葡萄糖氧化酶法的实验报告
实验八血糖的测定（葡萄糖氧化酶法）
实验十 血糖的测定血液中的葡萄糖称血糖。
正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol ／L ～6．1mmol ／L 之间。
血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。
其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。
因此，血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。
血糖测定按其发展过程及反应原理的不同，大致分三类：氧化还原法 ，缩合法（主要有邻甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。
下边介绍两种方法供选择。
一、葡萄糖氧化酶法【目的】1. 了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，能进行血糖测定的操作。
2. 掌握血糖测定的临床意义。
【原理】葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ，GOD) 能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。
后者在过氧化物酶 (peroxidase ，POD)作用下，分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即 Trinder 反应。
其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm 波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。
反应式如下：2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚红色醌类化合物POD2H 2O2H 2O 2O 2葡萄糖+葡萄糖酸+GOD+【器材】试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】1. 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.0）称取无水磷酸氢二钠8.67g 及无水磷酸二氢钾5.3g 溶于800ml 蒸馏水中，用1mol/L 氢氧化钠（或1mol/L 盐酸）调节pH 至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L 。
2. 酶试剂称取过氧化物酶1200U ，葡萄糖氧化酶1200U ，4-氨基安替比林10mg ，叠氮钠100mg ，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml 中，用1mol/L NaOH 调pH 至7.0，加磷酸缓冲液至100ml 。
实验室血糖测试实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法；2. 了解血糖测定的临床意义；3. 培养学生严谨的实验态度和实验技能。
二、实验原理血糖测定是指通过检测血液中的葡萄糖浓度来评估血糖水平的方法。
常用的血糖测定方法有氧化酶法、葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法等。
本实验采用葡萄糖氧化酶法进行血糖测定。
葡萄糖氧化酶法原理：葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下，与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶的催化下，与色原反应生成红色化合物，根据红色化合物的吸光度可以计算出血糖浓度。
三、实验材料1. 血糖测试仪；2. 血糖测试试纸；3. 血液采集针；4. 75%乙醇；5. 实验用试剂：葡萄糖标准液、磷酸盐缓冲液、过氧化物酶、色原等。
四、实验方法1. 准备工作：将血糖测试仪打开，预热10分钟；准备75%乙醇棉球，用于消毒。
2. 采血：用酒精棉球消毒采血部位，用采血针穿刺采血，采集少量血液。
3. 测定血糖：将采血针插入血糖测试仪的采血孔，等待测试仪显示血糖浓度。
4. 结果记录：将血糖测试仪显示的血糖浓度记录在实验报告上。
五、实验结果实验结果如下：1. 采集血液的血糖浓度：X mmol/L；2. 血糖测试仪显示的血糖浓度：Y mmol/L。
六、实验分析1. 实验结果与血糖标准液的结果进行比较，判断实验结果的准确性；2. 分析血糖浓度与实验操作的关系，找出可能导致误差的因素；3. 探讨血糖测定的临床意义。
七、实验讨论1. 血糖测定是糖尿病诊断和病情监测的重要指标，准确测定血糖浓度对临床治疗具有重要意义；2. 本实验采用葡萄糖氧化酶法进行血糖测定，操作简单、结果准确；3. 实验过程中，要注意采血部位消毒，避免感染；保持血糖测试仪的清洁，防止污染。
八、实验结论1. 本实验成功掌握了血糖测定的原理和方法；2. 通过实验操作，了解了血糖测定的临床意义；3. 培养了学生严谨的实验态度和实验技能。
九、实验改进建议1. 在实验过程中，可以增加血糖测定次数，提高实验结果的可靠性；2. 可以将实验结果与其他血糖测定方法进行比较，进一步验证实验结果的准确性；3. 可以探讨血糖测定的应用领域，如糖尿病的早期诊断、病情监测等。
兔子血糖检测实验报告
一、实验目的1. 掌握兔子血糖检测的基本原理和方法。
2. 了解血糖检测在兔子健康监测中的应用。
3. 通过实验，验证血糖检测方法的准确性和可靠性。
二、实验原理血糖检测是利用葡萄糖氧化酶法检测血液中的葡萄糖含量。
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖和氧气反应，生成过氧化氢和葡萄糖酸，过氧化氢在过氧化物酶的作用下分解产生水和氧气，同时使色原物质氧化，其颜色深浅与葡萄糖浓度成正比。
通过比色法，可以计算出血液中的葡萄糖浓度。
三、实验材料1. 实验动物：健康成年兔子2只。
2. 试剂：葡萄糖氧化酶试剂盒、血样采集器、抗凝剂、生理盐水、碘伏、消毒棉签。
3. 仪器：血糖检测仪、移液器、试管、烧杯、酒精灯、计时器。
四、实验步骤1. 实验动物准备：将2只兔子放入安静的环境中，适应环境30分钟。
2. 采集血样：对兔子进行耳静脉穿刺，采集血样2ml，加入抗凝剂，混匀。
3. 标准曲线制作：将葡萄糖氧化酶试剂盒中的标准品按照说明书要求，分别配制成不同浓度的溶液，每组加入适量抗凝剂，混匀。
4. 检测：将血样和标准品分别加入试管中，按照说明书要求，依次加入试剂，混匀，放入血糖检测仪中，测定血糖浓度。
5. 结果分析：比较实验组兔子的血糖浓度与正常兔子的血糖浓度，分析实验结果。
五、实验结果实验组兔子的血糖浓度分别为5.8mmol/L和6.2mmol/L，正常兔子的血糖浓度为4.5mmol/L。
六、实验讨论1. 实验结果表明，兔子血糖检测方法准确可靠，可用于兔子血糖水平的监测。
2. 通过实验，我们可以了解到兔子血糖水平的变化，有助于判断兔子的健康状况。
3. 在实验过程中，应严格按照操作规程进行，确保实验结果的准确性。
4. 本实验采用耳静脉穿刺采集血样，操作过程中要注意无菌操作，防止感染。
七、实验结论通过本次实验，我们掌握了兔子血糖检测的基本原理和方法，验证了血糖检测方法的准确性和可靠性。
实验结果表明，血糖检测可用于兔子血糖水平的监测，有助于判断兔子的健康状况。
葡萄糖测定实训报告范文
一、实训目的1. 掌握葡萄糖定量测定的原理和方法。
2. 熟悉葡萄糖试纸条的使用和操作步骤。
3. 培养实验操作能力和数据处理能力。
4. 提高对生物化学实验的兴趣和严谨的科学态度。
二、实训环境1. 实验室：生物化学实验室2. 仪器：葡萄糖测定仪、电子天平、移液器、试管等3. 试剂：葡萄糖标准溶液、蒸馏水、缓冲液等三、实训原理葡萄糖测定实验采用葡萄糖氧化酶法。
该方法基于葡萄糖氧化酶对葡萄糖的特异性催化作用，将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，同时生成过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶的作用下，将色原物质氧化成有色物质，通过比色法测定葡萄糖的浓度。
四、实训过程1. 准备试剂和仪器- 配制葡萄糖标准溶液：准确称取一定量的葡萄糖标准品，用蒸馏水溶解并定容至一定体积，得到不同浓度的葡萄糖标准溶液。
- 准备试剂：按照实验要求配制缓冲液、过氧化物酶溶液等。
- 检查仪器：确保葡萄糖测定仪、电子天平、移液器等仪器正常工作。
2. 样品处理- 取一定量的待测样品，用蒸馏水稀释至适当浓度。
- 用移液器准确吸取样品，按照实验要求进行操作。
3. 测定过程- 将葡萄糖测定仪预热至设定温度。
- 将标准溶液和样品分别加入测试孔中，按照仪器操作规程进行测定。
- 记录测定结果。
4. 数据处理- 根据标准曲线，计算样品中葡萄糖的浓度。
五、实训结果1. 标准曲线绘制：以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：将样品测定结果代入标准曲线，计算样品中葡萄糖的浓度。
六、实训总结1. 通过本次实训，掌握了葡萄糖氧化酶法的原理和操作步骤，学会了使用葡萄糖测定仪进行测定。
2. 在实验过程中，注意了实验操作的规范性，培养了严谨的科学态度。
3. 通过数据处理，提高了对实验结果的分析能力。
七、注意事项1. 实验操作过程中，注意安全，防止试剂溅到皮肤上。
2. 使用移液器时，注意准确吸取试剂，避免误差。
3. 实验结束后，清洗实验器材，保持实验室卫生。
八、拓展实验1. 研究不同浓度葡萄糖对测定结果的影响。
血糖实验报告
一、实验目的1. 了解血糖测定的原理和方法。
2. 掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖的步骤和操作技巧。
3. 学会分析实验数据，并得出结论。
二、实验原理血糖是指血液中的葡萄糖含量，是人体重要的能量来源。
血糖浓度的高低直接关系到人体的健康。
葡萄糖氧化酶法是测定血糖的一种常用方法，其原理是葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下分解产生水和新生态氧，新生态氧与色原性物质反应，产生颜色变化，通过比色法测定葡萄糖浓度。
三、实验器材与试剂1. 器材：葡萄糖氧化酶法血糖测定试剂盒、离心机、移液器、移液管、比色杯、水浴锅、恒温水浴箱、电子天平、白瓷板等。
2. 试剂：葡萄糖标准溶液、葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、缓冲液、氧化剂、还原剂等。
四、实验步骤1. 标准曲线的制作（1）取6个比色杯，分别加入0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5毫升的葡萄糖标准溶液，用缓冲液定容至1毫升。
（2）在每个比色杯中加入相应的酶试剂，混匀。
（3）将比色杯放入水浴锅中，恒温反应10分钟。
（4）取出比色杯，用移液器加入还原剂，混匀。
（5）在波长540nm下，用比色杯测定吸光度，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 血糖测定（1）取5个比色杯，分别加入0.1毫升待测血清或血浆，用缓冲液定容至1毫升。
（2）在每个比色杯中加入相应的酶试剂，混匀。
（3）将比色杯放入水浴锅中，恒温反应10分钟。
（4）取出比色杯，用移液器加入还原剂，混匀。
（5）在波长540nm下，用比色杯测定吸光度。
（6）根据标准曲线，计算待测血清或血浆中的葡萄糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作根据实验数据，绘制标准曲线，得出线性方程：y = 0.0245x + 0.0043，相关系数R² = 0.9987。
2. 血糖测定根据实验数据，计算待测血清或血浆中的葡萄糖浓度，结果如下：- 血清A：5.2 mmol/L- 血清B：4.8 mmol/L- 血清C：6.0 mmol/L- 血浆D：5.5 mmol/L- 血浆E：4.9 mmol/L六、实验结论通过本次实验，我们成功掌握了葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理和步骤。
实验报告血糖的测定
一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。
2. 了解血糖水平与人体健康的关系。
3. 培养实验操作技能，提高实验数据分析能力。
二、实验原理血糖是指在血液中葡萄糖的浓度。
正常人体血糖水平相对稳定，维持在一定范围内。
血糖的测定对于糖尿病等疾病的诊断和治疗具有重要意义。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度。
葡萄糖氧化酶法是一种测定血糖的常用方法，其原理是葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下，与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使色原物质氧化产生颜色变化，根据颜色变化程度，可以计算出样品中的葡萄糖浓度。
三、实验材料1. 试剂：葡萄糖标准溶液、显色剂、显色剂储备液、反应缓冲液、显色剂工作液、空白试剂、待测血液样品。
2. 仪器：微量移液器、移液管、移液器、酶标仪、试管、水浴锅、吸管、滤纸等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制（1）取6支试管，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml葡萄糖标准溶液，加入0.5ml反应缓冲液。
（2）将各试管充分混匀，置于水浴锅中，恒温30分钟。
（3）取出试管，加入0.5ml显色剂，充分混匀，室温放置10分钟。
（4）以空白试剂为参比，用酶标仪在波长540nm处测定各管吸光度。
（5）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 待测样品测定（1）取6支试管，分别加入0.5ml反应缓冲液、0.5ml显色剂、0.5ml待测血液样品。
（2）将各试管充分混匀，置于水浴锅中，恒温30分钟。
（3）取出试管，加入0.5ml显色剂，充分混匀，室温放置10分钟。
（4）以空白试剂为参比，用酶标仪在波长540nm处测定各管吸光度。
（5）根据标准曲线，计算待测样品的血糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据实验数据绘制标准曲线，线性范围为0-2.5mmol/L。
2. 待测样品测定：根据标准曲线计算，待测样品的血糖浓度为3.8mmol/L。
六、实验结论本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，实验结果准确可靠。
检测血糖的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握血糖检测的基本原理和方法。
2. 了解血糖检测在临床医学中的重要性。
3. 通过实验，提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理血糖检测是通过测定血液中的葡萄糖浓度来判断人体血糖水平的方法。
常用的血糖检测方法有：氧化酶法、葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法等。
本实验采用葡萄糖氧化酶法检测血糖。
葡萄糖氧化酶法的基本原理是：葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下，与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢。
过氧化氢在过氧化物酶的作用下，将色原物质氧化成有色物质，通过比色法测定有色物质的吸光度，从而计算出血糖浓度。
三、实验材料1. 血糖测定试剂盒（含葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、色原物质、缓冲液等）2. 血糖仪3. 采血针4. 采血管5. 水浴箱6. 移液器7. 试管8. 比色皿9. 75%乙醇10. 酒精棉球四、实验步骤1. 采血：用采血针对指尖进行采血，将血液滴入采血管中。
2. 标准曲线制备：按照试剂盒说明书，配制标准溶液，将标准溶液分别加入比色皿中，用移液器加入适量的缓冲液，混匀后放入水浴箱中预热。
3. 样品测定：将采集到的血液按照试剂盒说明书进行稀释，加入比色皿中，用移液器加入适量的缓冲液，混匀后放入水浴箱中预热。
4. 比色：将标准溶液和样品溶液分别放入比色皿中，用血糖仪进行比色，记录吸光度值。
5. 数据处理：根据标准曲线和样品吸光度值，计算出样品的血糖浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：将标准溶液的吸光度值与血糖浓度进行线性回归分析，得到标准曲线方程为：y = 0.0127x + 0.0032，其中y为吸光度值，x为血糖浓度。
2. 样品测定：将采集到的血液按照试剂盒说明书进行稀释，得到样品的血糖浓度为7.5 mmol/L。
3. 结果分析：根据实验结果，该受试者的血糖浓度为7.5 mmol/L，属于正常范围。
六、实验讨论1. 实验过程中，应严格按照试剂盒说明书进行操作，以保证实验结果的准确性。
血清葡萄糖检测实训报告
一、实训目的通过本次实训，使学生掌握血清葡萄糖检测的基本原理、操作方法和注意事项，提高学生的实验技能和综合素质，为今后从事临床检验工作打下坚实基础。
二、实训内容1. 实验原理血清葡萄糖检测是利用葡萄糖氧化酶法检测血清中的葡萄糖含量。
该方法基于葡萄糖氧化酶催化-D-葡萄糖氧化生成D-葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的催化下，与色原在酸性条件下生成绿色化合物，通过比色法测定绿色化合物的吸光度，从而计算出血清中葡萄糖的含量。
2. 实验材料（1）试剂：葡萄糖氧化酶试剂盒、显色剂、底物、缓冲液、氧化酶溶液、过氧化物酶溶液、盐酸、磷酸盐缓冲液、标准葡萄糖溶液。
（2）仪器：酶标仪、移液器、加样器、微量离心机、恒温水浴锅、试管、试管架、吸头、吸管、酒精灯、蒸馏水等。
3. 实验步骤（1）标准曲线绘制1）将标准葡萄糖溶液用蒸馏水稀释成0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mg/L系列浓度。
2）分别取上述溶液100μl于试管中，加入葡萄糖氧化酶试剂100μl，混匀。
3）在37℃恒温水浴锅中反应10分钟。
4）取出试管，加入显色剂100μl，混匀。
5）室温放置10分钟。
6）用酶标仪在波长520nm处测定吸光度。
7）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
（2）样品测定1）取血清样品100μl于试管中，按照上述步骤进行操作。
2）测定吸光度。
3）根据标准曲线计算血清中葡萄糖的含量。
4. 结果与分析（1）标准曲线绘制以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，计算相关系数R²。
（2）样品测定根据标准曲线，计算血清中葡萄糖的含量。
三、实训总结1. 通过本次实训，掌握了血清葡萄糖检测的基本原理、操作方法和注意事项。
2. 培养了严谨的实验态度和团队协作精神。
3. 提高了实验技能和综合素质。
4. 为今后从事临床检验工作打下了坚实基础。
四、存在问题及改进措施1. 问题：部分学生操作过程中出现吸光度误差较大，导致计算结果不准确。
葡萄糖测定实训报告总结
一、实训背景随着现代生物技术的不断发展，对生物体内葡萄糖含量的测定在医学、食品、农业等领域具有广泛的应用。
为了提高我们对葡萄糖测定方法的理解和操作技能，我们开展了葡萄糖测定实训。
本次实训旨在使学生掌握葡萄糖测定原理，熟悉操作流程，提高实验技能。
二、实训目的1. 理解葡萄糖测定原理，掌握不同测定方法的操作流程；2. 熟悉葡萄糖测定仪器的使用，提高实验操作技能；3. 通过实验，培养学生的团队协作能力和分析问题、解决问题的能力。
三、实训内容1. 葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量；2. 葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定葡萄糖含量；3. 葡萄糖-磷酸变位酶法测定葡萄糖含量。
四、实训过程1. 葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量（1）实验原理：葡萄糖氧化酶（GOD）催化葡萄糖与氧反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶（POD）的催化下生成水和氧气，氧气与邻苯二胺反应生成蓝色化合物，通过比色法测定葡萄糖含量。
（2）实验步骤：① 样品处理：取适量样品，用蒸馏水稀释至一定浓度；② 标准曲线制作：分别取不同浓度的葡萄糖标准溶液，按照实验步骤进行测定，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线；③ 样品测定：取适量样品溶液，按照实验步骤进行测定，从标准曲线上查出样品溶液中葡萄糖含量。
2. 葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定葡萄糖含量（1）实验原理：与葡萄糖氧化酶法类似，但在测定过程中加入过氧化物酶，进一步提高反应速率。
（2）实验步骤：与葡萄糖氧化酶法基本相同，仅在加入试剂时，先加入过氧化物酶，再加入葡萄糖氧化酶。
3. 葡萄糖-磷酸变位酶法测定葡萄糖含量（1）实验原理：葡萄糖-磷酸变位酶（GPM）催化葡萄糖-1-磷酸转化为葡萄糖-6-磷酸，通过测定葡萄糖-6-磷酸的生成量，间接测定葡萄糖含量。
（2）实验步骤：① 样品处理：取适量样品，用蒸馏水稀释至一定浓度；② 标准曲线制作：分别取不同浓度的葡萄糖标准溶液，按照实验步骤进行测定，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线；③ 样品测定：取适量样品溶液，按照实验步骤进行测定，从标准曲线上查出样品溶液中葡萄糖含量。
实验 血糖测定(葡萄糖氧化酶法)
实验血糖测定（葡萄糖氧化酶法）【目的】体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。
【临床意义】葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。
通常在查找这些病症的起因时，还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。
葡萄糖含量增高见于：糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。
葡萄糖含量减少见于：胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。
【原理】样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。
【器材】紫外分光光度计，恒温水浴箱，移液器（枪），枪头，试管【药品】葡萄糖测定试剂盒，试剂盒主要成分与浓度：【样本】新鲜无溶血血清。
【步骤】将10ml R1与90ml R2混合均匀，即为工作液。
空白管校准管样品管工作液 1.50 ml 1.50 ml 1.50 ml蒸馏水0.01 ml ————校准液——0.01 ml ——样品————0.01 ml分别混合均匀，37℃水浴10～15分钟（避免太阳光直射），用波长505nm、比色杯光径1.0cm，用空白管调“零”点测定各管的吸光度（A）值。
【计算】【参考值】血清/血浆：3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。
此范围仅供参考，各实验室须建立本室的参考值范围。
【参考文献】1．全国临床检验操作规程（第二版），主编：叶应妩，王敏三，1997，P616.2．Trinder P. Ann Clin Biochem，1969，6: 24-27.血糖测定实验所需器材：1.紫外分光光度计（比色杯光径1.0cm），2.恒温水浴箱（能调温度的，37℃），3.移液器（枪）（规格1.0ml 6个，20µl 6个），枪头各100个4.试管50支，6个试管架5.烧杯100ml一个，50ml（或25ml）6个6.记号笔6支7.蒸馏水1瓶。
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葡萄糖氧化酶法的实验报告
篇一：葡萄糖测定-葡萄糖氧化酶法 葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖 【原理】 葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase，goD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase，poD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。 【试剂】 1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液(ph7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中，用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L盐酸)调ph至7.0，用蒸馏水定容至1L。
2 9 2．酶试剂称取过氧化物酶1200u，葡萄糖氧化酶1200u，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于磷酸盐缓冲液80ml中，用1mol/Lnaoh调ph至7.0，用磷酸盐缓冲液定容至100ml，置4℃保存，可稳定3个月。3．酚溶液称取重蒸馏酚100mg溶于蒸馏水100ml中，用棕色瓶贮存。4．酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合，4℃可以存放1个月。 5．12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至lL。 6．100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中，以12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。2h以后方可使用。 7．5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于100ml容量瓶中，用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。 【操作步骤】 1．自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。 2．手工操作法取试管3支，按下表操作。 读取标准管及测定管吸光度。 【计算】 【参考范围】空腹血清葡萄糖为3.89～6.11mmol/L。 【临床意义】 1．生理性高血糖可见摄入高糖食物后，或情绪紧张肾
3 9 上腺分泌增加时。2．病理性高血糖 (1)糖尿病：病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患者。 (2)内分泌腺功能障碍：甲状腺功能亢进，肾上腺皮质功能及髓质功能亢进。引起的各种对抗胰岛素的激素分泌过多也会出现高血糖。注意升高血糖的激素增多引起的高血糖，现已归入特异性糖尿病中。 (3)颅内压增高：颅内压增高刺激血糖中枢，如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等。 (4)脱水引起的高血糖：如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。3．生理性低血糖见于饥饿和剧烈运动。 4．病理性低血糖(特发性功能性低血糖最多见，依次是药源性、肝源性、胰岛素瘤等) (1)胰岛β细胞增生或胰岛β细胞瘤等，使胰岛素分泌过多。 (2)对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、肾上腺皮质激素分泌减少。 (3)严重肝病患者，由于肝脏储存糖原及糖异生等功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。 【注意事项】 1．葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异，溶液中的葡
4 9 萄糖约36%为α型，64%为β型。葡萄糖的完全氧化需要α型到β型的变旋反应。国外某些商品葡萄糖氧(:葡萄糖氧化酶法的实验报告)化酶试剂盒含有葡萄糖变旋酶，可加速这一反应，但在终点法中，延长孵育时间可达到完成自发变旋过程。新配制的葡萄糖标准液主要是α型，故须放置2h以上(最好过夜)，待变旋平衡后方可应用。 2．葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量。因为尿液中尿酸等干扰物质浓度过高，可干扰过氧化物酶反应，造成结果假性偏低。 3．测定标本以草酸钾－氟化钠为抗凝剂的血浆较好。取草酸钾6g，氟化钠4g。加水溶解至100ml。吸取0.1ml到试管内，在80℃以下烤干使用，可使2～3ml血液在3～4天内不凝固并抑制糖分解。 4．本法用血量甚微，操作中应直接加标本至试剂中，再吸试剂反复冲洗吸管，以保证结果可靠。 5．严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白血滤液，然后再进行测定。 【评价】线性范围至少可达22.24mmol/L，回收率94%～105%，批内cV为0.7%～2.0%。批间cV为2%左右，日间cV为2%～3%。葡萄糖氧化酶法与己糖激酶法比较，73份标本葡萄糖氧化酶法均值为8.31mmol/L，已糖激酶法均值8.21mmol/L，相关系数为0.9986，回归方程y=1.0026x－2.29。
5 9 本法测定葡萄糖非常特异，从原理反应式中可知第一步是特异反应，第二步特异性较差。误差往往发生在反应的第二步。一些还原性物质如尿酸、维生素c、胆红素和谷胱甘肽等，可与色原性物质竞争过氧化氢，从而消耗反应过程中所产生的过氧化氢，产生竞争性抑制，使测定结果偏低。然而，在本法的测定条件下，溶血标本血红蛋白的浓度达10g/L，黄疸标本胆红素浓度达342μmol/L，维生素c小于30mg/L，均不影响测定结果。氟化钠浓度达2g/L不干扰测定结果。标本中含尿素浓度达46.7mmol/L，尿酸浓度达2.95mmol/L，肌酐浓度达4.42mmol/L。半胱氨酸浓度达3.30mmol/L，甘油三酯浓度达5.6mmol/L，胆固醇4.40mmol/L，对测定结果均无显著影响。 左旋多巴100mg/L，维生素c5mg/L以上，谷胱甘肽100mg/L时，可引起负误差；半胱氨酸达10mmol/L时，产生相当0.72mmol/L葡萄糖的正误差。 篇二：葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖 实验名称：葡萄糖氧化酶法测定血清（浆)葡萄糖 【实验原理】 葡萄糖可由葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸并产生过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，能与苯酚及4-氨基安替比林作用产生红色醌化合物。醌的产量与葡萄糖量成正比。醌化合物呈红色，其颜色深浅与葡萄糖含量成正比，在500nm
6 9 出测定其吸光度，对照标准科计算出葡萄糖的含量。【实验准备】一、材料（1）血清 （2）血浆：以草酸钾-氟化钠为抗凝剂的血浆二、试剂 （1）试剂R1：磷酸盐缓冲液100mmol，ph7.5，苯酚10mmol/L。（2）试剂R2：磷酸盐缓冲液100mmol，ph7.5，葡萄糖氧化酶16000u/L，过氧化物酶1000u/L，4-氨基安替比林2.0mmol/L。 （3）葡萄糖校准液：5.550mmol/L（1mg/ml）（4）生理盐水。（5）工作试剂（酶酚混合液）：取R1试剂4.5ml与R2试剂0.5ml混合在10ml试管中。三、器材 （1）试管和试管架（2）移液枪 （3）722型分光光度计（4）酶标仪（5）恒温水浴箱（6）酶标板（7）板条 （8）生化培养箱【实验步骤】 （1）取酶标板一块，板条一条，设定空白孔A1，标准孔A2、A3，测定孔A4、A5，按 【实验结果】 葡萄糖（gLu）浓度（mmol/L）=（A测定孔平均值/A校准孔平均值）×5.55参考值：3.89~6.11mmol/L 测得数据为A2A3A4A50.0850.050.030.037 (0.037+0.030)/2 ——×5.55﹦2.75mmol/L
7 9 （0.085+0.050/2【实验讨论】 ①移液枪操作熟练程度直接影响测定结果，吸样前需多练习②测定标本以草酸钾-氟化钠为抗凝剂的血浆较好。 ③由于尿液中尿酸等干扰物质浓度过高，会干扰过氧化物酶反应，出现结果假性偏低，因 此葡萄糖氧化酶法不能直接测定尿液葡萄糖含量，但可直接测定脑脊液葡萄糖含量。④本法测定葡萄糖原理中反应式第一步是特异反应，第二步特异性较差，所以第二步易引 起误差。 【】 ⑤葡萄糖氧化酶法测定血清（浆)葡萄糖的反应15min达不到反应终点，应延长到25min1。⑥新生儿高胆红素血对葡萄糖氧化酶法测定血糖有负干扰影响,除去胆红素后可以较准确 【】 测定血糖2。【参考文献】 1.王彦明，实用医技杂志，20XX（05） 2.邹焕荣；何国坚；叶有玩，江西医学检验，20XX（03） 篇三：葡萄糖氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖背景知识 葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖 实验原理葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并成成过氧化氢。过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化氢
8 9 分解喂水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林（4-AAp）和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。在500nm处测得的吸光度与葡萄糖含量成正比。 临床意义1.生理性高血糖可见于餐后或高糖饮食.情绪紧张肾上腺分泌增加等。 2.病理性高血糖（1）糖尿病患者。（2）内分泌腺功能障碍：甲状腺功能亢进，肾上腺皮质及髓质功能亢进等。升高血糖的激素增多引起的高血糖，现已归入特异性糖尿病中。（3）颅内压增高：颅内压增高刺激血糖中枢，如颅外伤.颅内出血.脑膜炎等。（4）脱水引起的高血糖：如呕吐.腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。 3.生理性低血糖见于长期饥饿和剧烈运动后。 4.病理性低血糖（特发性功能性低血糖最多见，依次是药源性.肝源性.胰岛素瘤等）。（1）胰岛β细胞增生或胰岛β细胞瘤等，使胰岛素分泌过多。（2）对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退.肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使相应的激素分泌减少。（3）严重肝病患者，由于肝脏存储糖原及糖异生等功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。 注意事项1.葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异，溶液中的葡萄糖约36%为α型，64%为β型。葡萄糖的完全氧化需要α型到β型的变旋反应。目前某些商品葡萄糖氧化酶试