结核病的实验室诊断
结核病实验室诊断技术研发进展
结核杆 菌培养是诊 断结核病 的金标 准 ， 但传 统 的罗 氏培 养需要 ４～ ６周 的培养方能 检测 到结 核菌 的生长 。 目前 正在
推广 的液体培养系统 仅需 １ —３周 ， 更加敏 感 、 快速 。早 期 的
Ｂ Ｃ Ｅ －６ 由于具有 放射 性 而 限制 了其应 用 。Ｍ Ｉ Ａ Ｔ Ｃ４ ０法 Ｇ Ｔ为 ｍ ｃｂｃ ｒ ｌ ｒ ｔ ｉｄｃｔ ｂ ｙｏａｔ ｉ ｏ ｈ ｎ ｉ ｏ ｔ ｅ的简称 ， ｅａ ｇ ｗ ａ ｒｕ 其原 理是 Ｊ试 管 ： 底部的荧光复合物与氧气结 合时处 于淬灭状 态 ， 当结核 菌生 长时 ， 氧气逐渐减少 ， 荧光 复合 物就发出荧光 而被 检测 到。 自 动化的 ＭＧＴ还可 加入 临 界浓 度 的抗 结核 药物 进 行药 敏 分 Ｉ 析。Ｂ Ｄ公 司 推 出的 Ｂ Ｃ Ｅ － Ｉ ６ Ａ Ｔ Ｃ ＭＧＴ ９０全 自动分 枝杆 菌 培 养／ 鉴定／ 药敏系统操作简便 ； 阳性标本检出时间平均为 ９天 ；
诊断性能优于标准荧光显微镜。多项研究经 ｍ ｔ ｅ ａ分析显示 ： Ｌ Ｄ检查 的敏感 性 比传 统镜 检方法 高约 １ ％… 。同时具 备 Ｅ ０ 荧光染色的优点 ， 且花 费低 、 可实施性 强 ， 可更广泛 的常规 使 用。中国卫 生部 一 茨基金会 和中国卫 生部 一 国梅 里埃 基 盖 法 金会结核病防治项 目已准备将 Ｌ Ｄ显微 镜在 我 国基 层实 验 Ｅ
室推广。 二 、 枝 杆 菌 培 养 技 术 研 发 进 展 分
扩增反应在 等温条 件下进行 ， 不需 要专 门的 Ｐ Ｒ仪 ， Ｃ 只需一 个水浴 锅或 简单 的保 温桶 和温度计 ； 其结果可以肉眼读值 ： 通 过 生成 的焦磷 酸盐置换锰 离子 ， 使与之结 合的钙黄绿素 （ ａ— Ｃｌ ｃｉ） ｅ 游离 而发 出荧光 Ｊ也可通过 加人 核酸燃料 Ｓ Ｂ ｒｅ ｎ ， Ｙ ＲＧ ｅｎ Ｉ 或产生 白色混浊焦磷酸镁沉淀进行 肉眼观察或实时浊度计 观察 。其对于发展 中国家而言是一项分子检测结核杆菌的很 有前景 的方法 。 文献报 道 Ｌ ＭＰ的 总 特 异 性 为 ９ ％ Ｊ 总 敏 感 性 为 Ａ ９ ， ８ ．％ ， 中在痰涂 片 阴性 、 ８２ 其 培养 阳性 病 例 中 的敏 感性 只 有 ４ ． ％ ， 在 痰 涂 片 阳性 、 养 阳 性 病 例 中 的 敏 感 性 达 ８８ 但 培 ９ ． ％ 。中国卫生部 一盖茨基金会和 中国卫生部 一法 国梅里 ７７ 埃基金会结核病防治项 目已将 Ｌ Ｍ Ａ Ｐ列 入我国基层实验室推
结核病的诊断与护理
病理学检查：组 织活检、病理切 片等
诊断标准
临床表现：咳嗽、咳痰、发热、盗汗等 影像学检查：X光片、CT等 实验室检查：痰涂片、痰培养、血清学检查等 病理学检查：组织活检、病理切片等
诊断流程
病史采集：了 解患者的症状、 接触史、家族
史等
体格检查：观 察患者的体态、 呼吸、咳嗽等
情况
实验室检查： 进行痰液、血 液、尿液等检 查，以确定结
结核病的诊断与护理
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目录
CONTENTS
1 结核病的诊断 2 结核病的护理 3 结核病患者的自我管理 4 结核病防治知识普及
结核病的诊断
诊断方法
临床表现：咳嗽、 咳痰、发热、盗 汗等
影像学检查：X光 片、CT等
实验室检查：痰 涂片、痰培养、 血清学检查等
饮食护理
饮食原则：高热量、高蛋白、 高维生素
食物选择：瘦肉、鸡蛋、牛奶、 水果、蔬菜
避免刺激性食物：辛辣、油腻、 生冷
饮食规律：定时定量，避免暴 饮暴食
康复护理
护理原则：个体化、全面化、 连续性
康复目标：提高生活质量， 恢复健康
护理措施：心理支持、营养 支持、运动康复、药物治疗
出院指导：保持良好的生活 习惯，定期复查，避免感染
国际合作
世界卫生组织 （WHO）在结核 病防治中的作用
国际非政府组织 （如无国界医生 组织）在结核病 防治中的贡献
各国政府在结核 病防治中的合作 与支持
国际学术交流与 合作在结核病防 治中的重要性
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肺结核确诊病例诊断标准
肺结核确诊病例诊断标准摘要：一、肺结核病概述二、肺结核确诊病例诊断标准1.疑似病例2.确诊病例三、肺结核病的诊断流程1.病史和体格检查2.影像学检查3.实验室检查4.鉴别诊断四、肺结核病的治疗与管理1.治疗方案2.治疗管理3.预防措施正文：肺结核病是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，主要影响肺部，是全球重要的公共卫生问题之一。
肺结核病的诊断标准对于早期发现、诊断和治疗肺结核病具有重要意义。
一、肺结核病概述肺结核病是一种常见的慢性传染病，主要影响肺部，但也可侵犯其他器官。
肺结核病的主要传染源是痰中带菌的肺结核患者，通过呼吸道飞沫传播。
人群普遍易感，尤其是免疫力低下的人群。
二、肺结核确诊病例诊断标准1.疑似病例疑似病例是指具有肺结核病症状和体征，但尚未进行实验室检查或影像学检查证实的病例。
肺结核病的常见症状包括咳嗽、咳痰、发热、盗汗、乏力等。
2.确诊病例确诊病例是指根据实验室检查和影像学检查结果，确诊为肺结核病的病例。
实验室检查主要包括痰涂片检查和结核分枝杆菌培养，影像学检查主要包括胸部X光片和CT扫描。
三、肺结核病的诊断流程1.病史和体格检查了解患者的病史，包括症状、持续时间、加重或缓解因素等，以及体格检查，如肺部听诊、叩诊等，对肺结核病的诊断具有重要意义。
2.影像学检查胸部X光片和CT扫描是肺结核病的重要影像学检查手段，可以显示肺部病变的范围、形态、密度等，对诊断和鉴别诊断肺结核病具有重要价值。
3.实验室检查痰涂片检查和结核分枝杆菌培养是肺结核病的实验室检查方法，可以直接检测痰中的结核分枝杆菌，对确诊肺结核病具有决定性意义。
4.鉴别诊断肺结核病的鉴别诊断包括与其他肺部疾病、肺外结核病、非结核分枝杆菌病的鉴别。
四、肺结核病的治疗与管理1.治疗方案肺结核病的治疗方案根据病情、耐药情况等制定，主要包括一线抗结核药物和二线抗结核药物。
2.治疗管理肺结核病的治疗管理包括药物治疗、不良反应监测、疗效评估等，需要患者、医生和护士共同参与。
我国当前结核病实验室诊断的现状
１９ ， ７６： ｌ ６ ２ ０ ． ９ ９ ３ （）２ ｏ — ｌ８
７ ． Ｓ ｇｍ Ｙ， Ｃｈ ｋ ｕ ｕｉ ｏ ｙ Ｈ， Ｇｏｏ Ａ， ｅ ａ． Ｔｕ ｒｕ ｏ ｓ ｔｈ ｔ１ ｅ ｂ ｃ ｌｕ ｓ ｎ ｙｉｉ ｆｅ ｎ ｒｖ ｓｅ Ｂ ｏ ｐ ｄ ｌｔ ａｔｒｉｔａ ｅ ｉａ ｓ ｌ ＣＧ ｎｓ ｌｔ ｎａ ｃ ｓ ｒ・ ｉ ｔａｉ ： ａ ｌ ｏ ｅ ｅ
维普资讯
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Ｔｕ ｅ ｂ ｒ＆ Ｔｈ ｒＴｕｍｏ ，Ｄｅ ０ ｏ ｒ ｃ ２ ０７。 ． Ｎｏ４
平 和异烟 肼并用 （ Ｈ） 案治疗 ２年ｌ版． 京 ： 京 版 社 。０ ３１７ — ３ ７ 第 北 北 ２０ ．３２ １７ ．
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ｌ Ｉ ｜ ＵＡＬＤ． ｂ ｒｕｏ ｉ ｕｉｅｆｒｈｇ ｒｖ ｌｎ ｅ ｃ ｕ ｈｉｓ Ｔｕ ｅｃ ｌｓｓｇ ｄ ｏ ｉｈ ｐｅ ａｅ ｃ ｏ ｎ － ． ＇ ｅ ２ｎｄ ｅ ．Ｐ ｒｓ Ｉ ｔｒ ａ ｉｎ Ａｓ ｉｓ ｂ ｒ ｕｏｉ ｎ ｄ ａｉ： ｎｅｎ Ｕｎｏ ａｎ ｔ ｌ Ｔｕ ｅ ｌｓｓａ ｄ ｃ
涂 阳肺 结 核病 发现 率 ７ ％．治 愈 率 ８ ％ ， ０ ５ 直
接督 导 下 的短 程 化 学 疗 法 （ Ｏ Ｓ Ｄ Ｔ ）覆 盖 率 １０ ０ ％的 全球 结 核病控 制 阶段 性 目标 。但 是 ，
结 核病 仍 然 是 严 重 威 胁 人 民 生 命 健 康 的 传
染性 疾 病 ．控 制 结 核 病仍 然 需 要 长 期 的 奋 斗 ＨＩ Ｖ和耐药 结核 病 的 问题 加重 了结 核病 及 其 诊 断 的 复 杂性 。 结 核 病 正 确 诊 断 是 发 现 、 疗 和管 理结 核 病人 的基 础 。实 验 室诊 治 断起着 重 要 的作用 ， 特别 是 细 菌 学诊 断 。本 文就 目前 结 核 病 控 制 对 结 核 病 实 验 室 的 要 求 、 核 病 实验 室诊 断 现状 以及 我 国的应 对 结 策略 阐述 如下 。
结核病血清学诊断进展
结核病血清学诊断进展结核病的细菌学检查目前是结核病实验室诊断的金标准。
由于痰涂片阳性率较低，镜检需要经验，难以区分环境分枝杆菌造成的假阳性；痰培养需时太长，因此细菌学检查对结核病的诊断价值有限。
随着分子生物学技术的迅速发展，用高度敏感的方法检测结核菌及其特异性DNA 片段，如PCR、生物探针和基因芯片等，需要相应的检测设备和检测费用高未能广泛推广。
血清学诊断技术有其固有的优势，如操作简便、快速、便于推广、无需特殊精密仪器，已有多种纯化的特异性抗原可采用，可以发展成自动化检测，尤其是对痰培养阴性和肺外结核病有较为重要的辅助诊断价值，受到广泛的重视。
本文从靶抗原的选择和检测技术的改进等方面综述了结核病血清学诊断的现状和进展。
抗原的选择特异性的抗原是提高血清学检测敏感性、特异性的重要环节。
应用于血清学诊断的理想抗原应具有种的特异性及强的免疫原性。
尤其是结核分枝杆菌全基因组序列测定以后，单克隆抗体、分子生物学、蛋白质组学和比较基因组学等技术的应用，已获得多种纯化和特异性的诊断抗原。
现将当前最受关注的抗原及其临床评估结果归纳如下：1.脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原 脂阿拉伯甘露聚糖是分枝杆菌细胞壁的重要组成部分，是属特异性抗原，具有较强的免疫原性和免疫调节功能，可刺激机体产生相应的抗体，因而是结核病的血清学诊断应用较广的抗原。
有关LAM抗原的应用报道很多, Antunes等用美国生产的结明(MycoDot TM)试剂盒检测活动性肺结核病人的敏感性为63.0%，特异性为92.4%，认为检测LAM抗体是结核病一项有效的辅助诊断方法。
2.A60(antigen 60) A60是从牛分枝杆菌胞浆中提取的一种大分子物质，是脂质蛋白和多糖的复合抗原。
Wu等用ELISA法检测了178例活动性肺结核患者和151例其他疾病患者血清中的IgG A60，根据受试者工作特性曲线(ROC)取261.2单位为截切值(cutoff point)，其敏感性和特异性分别为49.4%和79.5%，认为胸部X片异常的患者结合IgG A60阳性将有助于肺结核病的准确临床诊断。
结核病的诊断标准
结核病的诊断标准结核病是一种由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）引起的慢性传染病，影响人类的呼吸系统。
要确诊结核病，医生通常会根据患者的症状、体征、实验室检查及影像学结果来做出判断。
以下是结核病的一般诊断标准及参考内容：1. 临床表现：结核病的常见症状包括长期持续咳嗽，可能伴有咳痰、咯血、胸痛、乏力、发热和体重下降。
因此，在诊断结核病时，医生需要仔细询问病史，包括症状的发生时间、频率、持续时间等。
2. 胸部X线检查：胸部X线是诊断肺结核的常用检查方法。
在结核病初期，胸部X线可能没有明显的异常，但在后期，可以看到肺部阴影、斑点状浸润和块状阴影。
这些结果是结核病的一种指示性特征。
3. 结核菌素皮肤试验（TST）：结核菌素皮肤试验是一种常用的结核病筛查方法。
在TST中，医生会将结核菌素注射到皮肤上，然后观察反应。
如果在48-72小时内形成硬结，则被视为阳性反应。
然而，TST不能区分活动结核感染和旧有感染，所以需要结合其他检查结果来做出诊断。
4. 结核分枝杆菌的培养与检测：通过结核杆菌的培养和分离，可以确定患者是否感染结核分枝杆菌。
这是一种特异性的方法，但需要相当长的时间（一般为6-8周）。
另外，还可以通过监测患者咳嗽样本中的结核分枝杆菌DNA来进行检测。
5. 基因扩增试验（GeneXpert）：GeneXpert是一种快速诊断结核病的分子诊断方法。
通过GeneXpert技术，可以检测结核分枝杆菌的核酸，并确定其对常用结核药物是否具有耐药性。
这是一种快速、高度敏感和特异性的诊断方法。
6. 组织活检：当其他检查结果无法确定患者是否感染结核分枝杆菌时，医生可能会进行组织活检。
在该检查中，医生会收集患者的肺组织样本进行检测，以确定结核分枝杆菌是否存在。
需要指出的是，以上诊断标准及参考内容仅供参考，结核病的确诊仍需要专业医生根据患者的具体情况综合判断。
因此，在怀疑结核病的情况下，请务必就医并寻求专业诊断与治疗。
3种检测方法对结核病诊断效能的比较
作者简介:王蕊,女,主管技师,主要从事结核病检验方面的研究㊂ ә 通信作者,E -m a i l :c h e n y a n j i o n g @x jt u .e d u .c n ㊂㊃论 著㊃D O I :10.3969/j.i s s n .1672-9455.2024.09.0153种检测方法对结核病诊断效能的比较王 蕊1,2,李 妍2,杨 健2,王盼婷2,张 萌2,陈艳炯1ә1.西安交通大学医学部病原生物学与免疫学系,陕西西安710061;2.陕西省结核病防治研究所结核病参比实验室,陕西西安710048摘 要:目的 评价γ-干扰素释放试验(I G R A )㊁涂片抗酸染色镜检(A F B )和实时荧光定量核酸扩增检测技术(X pe r t MT B /R I F )诊断结核病的应用价值㊂方法 选取2019年6月至2023年6月在陕西省结核病防治研究所就诊的疑似结核病患者397例作为研究对象,所有研究对象均同时行I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测,收集患者的检测结果和病例资料㊂排除无法诊断是否为结核病的患者39例,最终纳入358例,并根据临床诊断结果将其分为结核患者141例和非结核患者217例㊂比较I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 在结核病中的阳性检出情况及其对结核病的诊断效能㊂结果 I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的灵敏度分别为95.74%㊁31.21%㊁56.74%,I G R A 的灵敏度高于A F B 和X pe r t MT B /R I F (χ2=126.66,P <0.01;χ2=59.22,P <0.01),X p e r t MT B /R I F 的灵敏度高于A F B (χ2=18.65,P <0.01);I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的特异度分别为60.37%㊁99.54%㊁100.00%,其中A F B 和X pe r t MT B /R I F 的特异度均高于I G R A (χ2=103.86,P <0.01;χ2=107.25,P <0.01),而A F B 和X pe r t MT B /R I F 的特异度比较,差异无统计学意义(χ2=1.00,P =0.32)㊂I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的准确率分别为74.30%㊁72.63%㊁82.96%,其中X pe r t MT B /R I F 的准确率最高,且3种检测方法的准确率比较,差异有统计学意义(χ2=12.30,P <0.01)㊂I G R A 与A F P 检测结果的总符合率为31.21%(44/141),阳性符合率为95.45%(42/44),阴性符合率为4.12%(4/97);X pe r t MT B /R I F 与A F P 检测结果的总符合率为74.47(105/141),阳性符合率为100.00%(44/44),阴性符合率为62.89%(61/91)㊂结论 在结核病诊断中,X pe r t MT B /R I F 和A F B 的特异度高于I G R A ,而I G R A 和X pe r t MT B /R I F 的灵敏度高于A F B ,临床可根据3种方法各自的优势应用于结核病的诊断,以此来提高结核病的临床诊治效率㊂关键词:结核病; γ-干扰素释放试验; 实时荧光定量核酸扩增检测技术; 涂片抗酸染色镜检; 阳性检出率中图法分类号:R 522文献标志码:A文章编号:1672-9455(2024)09-1259-04C o m p a r i s o n o f t h e e f f i c a c y o f t h r e e t e s t s f o r t h e d i a gn o s i s o f t u b e r c u l o s i s WA N G R u i 1,2,L I Y a n 2,Y A N G J i a n 2,WA N G P a n t i n g 2,Z HA N G M e n g 2,C H E N Y a n j i o n g 1ә1.D e p a r t m e n t o f P a t h o g e n i c B i o l o g y a n d I mm u n o l o g y ,X i 'a n J i a o t o n g U n i v e r s i t y He a l t h S c i e n c e C e n t e r ,X i 'a n ,S h a a n x i 710061,C h i n a ;2.T u b e r c u l o s i s R ef e r e n c e L a b o r a t o r y ,S h a a n x i P r o v i n c i a l I n s t i t u t e fo r T u b e r c u l o s i s C o n t r o l a n d P r e v e n t i o n ,X i 'a n ,S h a a n x i 710048,C h i n a A b s t r a c t :O b je c t i v e T o e v a l u a t e t h e v a l u e of i n t e r f e r o n -γr e l e a s e a s s a y (I G R A ),a c i d f a s t s t a i n i ng (A F B )a n d r e a l -t i m e f l u o r e s c e n c e q u a n t i t a t i v e n u c l e i c a c i d a m p l i f i c a t i o n d e t e c t i o n t e ch n o l o g y (X pe r t MT B /R I F )f o r t h e d i ag n o s i s o f t u b e r c u l o s i s .M e th o d s A t o t a l o f 397p a ti e n t s w i t h s u s pe c t e d t u b e r c u l o s i s w h o a t t e n d e d t o t h e S h a a n x i P r o v i n c i a l I n s t i t u t ef o r T u b e r c u l o s i s C o n t r o l a n d P r e v e n t i o n f r o m J u n e 2019t o J u n e 2023w e r e s e -l e c t e d a s t h e s t u d y s u b j e c t s ,a l l t h e s t u d y s u b j e c t s u n d e r w e n t I G R A ,A F B a n d X pe r t MT B /R I F t e s t s s i m u l t a -n e o u s l y ,a n d t h e t e s t r e s u l t s a n d c a s e d a t a of t h e p a t i e n t s w e r e c o l l e c t e d .E x c l u d i ng 39p a t i e n t s i n w h o m t u b e r -c u l o s i s c o u l d n o t b e d i a g n o s e d ,f i n a l l y 358c o n f i r m e d c a s e s w e r e i n c l u d e d a n d d i v i d e d i n t o 141c a s e s w i t h t u -b e r c u l o s i s a n d 217c a s e s w i t h o u t t u b e r c u l o s i s a c c o r d i n g t o t h e c l i n i c a l d i a g n o s i s .T h e p o s i t i v e d e t e c t i o n a n d d i -a g n o s t i c e f f i c a c y f o r t u b e r c u l o s i s o f I G R A ,A F B a n d X p e r t MT B /R I F w e r e c o m p a r e d .R e s u l t s T h e s e n s i t i v i t yo f I G R A ,A F B a n d X p e r t MT B /R I F a s s a y s w a s 95.74%,31.21%a n d 56.74%,r e s p e c t i v e l y,w h i l e t h e s e n s i -t i v i t y o f I G R A w a s h i g h e r t h a n t h a t o f A F B a n d X pe r t MT B /R I F (χ2=126.66,P <0.01;χ2=59.22,P <0.01),a n d t h e s e n s i t i v i t y of X p e r t MT B /R I F w a s h igh e r t h a n t h a t o f A F B (χ2=18.65,P <0.01).T h e s pe c i -f i c i t y o f I G R A ,A F B a n d X p e r t MT B /R I F a s s a y s w a s 60.37%,99.54%a n d 100.00%,r e s p e c t i v e l y,a n d t h e s p e c i f i c i t y o f A F B a n d X p e r t MT B /R I F w a s h i gh e r t h a n t h a t o f I G R A (χ2=103.86,P <0.01;χ2=107.25,㊃9521㊃检验医学与临床2024年5月第21卷第9期 L a b M e d C l i n ,M a y 2024,V o l .21,N o .9P<0.01),b u t t h e d i f f e r e n c e o f s p e c i f i t y o f b e t w e e n A F B a n d X p e r t MT B/R I F h a d n o s t a t i s t i c a l s i g n i f i c a n c e (χ2=1.00,P=0.32).T h e a c c u r a c y o f I G R A,A F B a n d X p e r t MT B/R I F a s s a y s w a s74.30%,72.63%a n d 82.96%,r e s p e c t i v e l y,a n d X p e r t MT B/R I F h a d t h e h i g h e s t a c c u r a c y,t h e d i f f e r e n c e o f a c c u r a c y a m o n g t h e t h r e e m e t h o d s w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(χ2=12.30,P<0.01).T h e t o t a l c o n s i s t e n t r a t e b e t w e e n I G R A a n d A F P t e s t r e s u l t s w a s31.21%(44/141),w i t h p o s i t i v e c o n s i s t e n t r a t e o f95.45%(42/44)a n d n e g a t i v ec o n s i s t e n t r a t e o f4.12%(4/97);t h e t o t a l c o n s i s t e n t r a t e b e t w e e n X p e r t MT B/R I F a nd A F P te s t r e s u l t s w a s74.47(105/141),w i t h p o s i t i v e c o n s i s t e n t r a t e o f100.00%(44/44)a n d c o n s i s t e n t c o m p l i a n c e r a t e o f62.89%(61/91).C o n c l u s i o n I n t h e d i a g n o s i s o f t u b e r c u l o s i s,t h e s p e c i f i c i t y o f X p e r t MT B/R I F a n d A F B i sh i g h e r t h a n t h a t o f I G R A,w h i l e t h e s e n s i t i v i t y o f I G R A a n d X p e r t MT B/R I F i s h i g h e r t h a n t h a t o f A F B.T h e c l i n i c c a n a p p l y t h e t h r e e m e t h o d s t o t h e d i a g n o s i s o f t u b e r c u l o s i s a c c o r d i n g t o t h e i r r e s p e c t i v e a d v a n t a g e s,s o a s t o i m p r o v e t h e e f f i c i e n c y o f c l i n i c a l d i a g n o s i s a n d t r e a t m e n t o f t u b e r c u l o s i s.K e y w o r d s:t u b e r c u l o s i s;i n t e r f e r o n-γr e l e a s e a s s a y; X p e r t MT B/R I F;a c i d f a s t s t a i n i n g;p o s i t i v e d e t e c t i o n结核病是仅次于新型冠状病毒感染(C O V I D-19)的第2大传染性疾病,目前我国仍是第3大结核病高负担国家[1]㊂早期诊断是治疗结核病的关键环节,而实验室检查是诊断结核病必不可少的方法之一,目前,实验室检查方法主要包括涂片抗酸染色镜检(A F B)㊁结核分枝杆菌(MT B)培养㊁γ-干扰素(I F N-γ)释放试验(I G R A)㊁实时荧光定量核酸扩增检测技术(X p e r t MT B/R I F)等[2]㊂A F B是最常用的确诊结核病的方法,而I G R A和X p e r t MT B/R I F是近年来结核病检测的新技术[3-5],X p e r t MT B/R I F更是被纳入肺结核的诊断标准(W S288-2017)[6]㊂本研究回顾性分析了同时采用I G R A㊁A F B㊁X p e r t MT B/R I F3种方法检测结核病患者的检测结果及病例资料,以评价3种检测方法对结核病的诊断价值㊂现报道如下㊂1资料与方法1.1一般资料选取2019年6月至2023年6月在陕西省结核病防治研究所就诊的疑似结核病患者397例作为研究对象㊂所有研究对象均同时进行I G R A㊁A F B㊁X p e r t MT B/R I F3种检测方法,收集患者的检测结果及病历资料,排除无法诊断是否为结核病的患者39例,最终纳入358例,根据结核病诊断标准,将其分为结核患者141例和非结核患者217例㊂结核患者中男87例(61.70%)㊁女54例(38.30%),平均年龄(49.50ʃ7.90)岁;非结核患者中男125例(57. 60%)㊁女92例(42.40%),平均年龄(50.61ʃ9.14)岁㊂两组研究对象性别㊁年龄比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性㊂所有研究对象均知晓本研究,并签署知情同意书㊂纳入标准:年龄18~80岁;临床症状提示结核病,如咳嗽㊁咳痰㊁发热㊁接触过结核病患者等㊂排除标准:X p e r t MT B/R I F检测结果无效;患者病例资料不完整㊂本研究经过陕西省结核病防治研究所医学伦理委员会审批通过(伦理审批号:2019J Y03)1.2仪器与试剂I G R A相关试剂和仪器均购自北京万泰生物药业公司;A F B染色液购自珠海贝索生物技术有限公司;X p e r t MT B/R I F相关试剂盒和仪器均购自美国C e p h e i d公司㊂严格按照使用说明步骤进行操作㊂1.3方法1.3.1I G R A 采集所有研究对象6m L肝素锂抗凝的静脉血,在2h之内,以1m L/管分装到 N T P 3种培养管中,颠倒混匀后置于37ħ环境中培养22~24h;以3000~5000r/m i n离心10m i n,取3种培养血浆各100μL与100μL样本稀释液分别进行1ʒ1稀释混匀;取稀释后样本70μL加至测试卡加样口㊂加样后15m i n置于荧光扫描仪判读结果㊂1.3.2 A F B取适量痰液在玻片上涂抹成1c mˑ2c m的卵圆形,自然干燥,置于染色架上,玻片间至少留有1c m的距离;加热固定;滴加苯酚复红盖满玻片,加热至产生蒸汽,5m i n后,流水轻缓冲洗;加酸性酒精,保持1~2m i n,流水轻缓冲洗,必要时重复脱色,至无红色为止;加亚甲蓝染液染色30~60s;流水轻缓冲洗,沥干㊂在油镜下观察㊂依照‘结核病实验室检验规程“[7]判定结果㊂1.3.3 X p e r t MT B/R I F先吸取痰液1m L置于一次性无菌试管内,然后加入2倍量前处理液并旋紧瓶盖,利用涡旋振荡器振荡30s,直至样品溶解无凝块;常温下静置15m i n,无菌吸管吸出2m L处理液,从加样孔慢慢添加到试剂盒中,盖上试剂盒盖,上机检测㊂1.4统计学处理采用S P S S18.0统计软件进行数据分析㊂符合正态分布的计量资料以xʃs表示,两组间比较采用t检验;计数资料以例数或百分率表示,组间比较采用χ2检验㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1I G R A㊁A F B㊁X p e r t MT B/R I F对结核病的诊断结果比较在结核患者中,I G R A㊁A F B和X p e r t MT B/R I F的阳性检出率分别为95.74%(135/141)㊁31.21%(44/141)和56.74%(80/141);在非结核患者中,I G R A㊁A F B和X p e r t MT B/R I F的阳性检出率分㊃0621㊃检验医学与临床2024年5月第21卷第9期 L a b M e d C l i n,M a y2024,V o l.21,N o.9别为39.63%(86/217)㊁0.46%(1/217)和0.00%(0/217)㊂3种方法对结核的阳性检出率比较,差异有统计学意义(χ2=125.50,P <0.01)㊂见表1㊂2.2 I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 对结核病的诊断效能比较 I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的灵敏度分别为95.74%㊁31.21%㊁56.74%,其中I G R A 的灵敏度均高于A F B 和X pe r t MT B /R I F (χ2=126.66,P <0.01;χ2=59.22,P <0.01),且X pe r t MT B /R I F 的灵敏度高于A F B (χ2=18.65,P <0.01);I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的特异度分别为60.37%㊁99.54%㊁100.00%,其中A F B 和X p e r t MT B /R I F 的特异度均高于I G R A (χ2=103.86,P <0.01;χ2=107.25,P <0.01),但A F B 和X pe r t MT B /R I F 的特异度比较,差异无统计学意义(χ2=1.00,P =0.32)㊂I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结核病的准确率分别为74.30%㊁72.63%㊁82.96%,其中X pe r t MT B /R I F 的准确率最高,且3种检测方法的准确率比较,差异有统计学意义(χ2=12.30,P <0.01)㊂见表2㊂表1 I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t M T B /R I F 检测结果比较(n )检测方法临床诊断结核非结核合计I G R A阳性13586221 阴性6131137 合计141217358A F B阳性44145阴性97216313 合计141217358X p e r t M T B /R I F 阳性80080阴性61217278 合计141217358表2 I G R A ㊁A F B ㊁X pe r t M T B /R I F 检测方法对结核病的诊断效能(%)检测方法灵敏度特异度阳性预测值阴性预测值准确率I G R A95.7460.3761.0996.6274.30A F B31.21a99.54a 97.7869.0172.63X pe r t MT B /R I F 56.74a b100.00a100.0078.0682.96注:与I G R A 比较,aP <0.05;与A F B 比较,bP <0.05㊂2.3 结核病患者中A F B ㊁X pe r t MT B /R I F 检测结果与A F B 检测结果比较 I G R A 与A F P 检测结果的总符合率为31.21%(44/141),阳性符合率为95.45%(42/44),阴性符合率为4.12%(4/97);X pe r t MT B /R I F 与A F P 检测结果的总符合率为74.47(105/141),阳性符合率为100.00%(44/44),阴性符合率为62.89%(61/91)㊂见表3㊂表3 结核病患者中A F B ㊁X pe r t M T B /R I F 检测结果 与A F B 检测结果比较(n )检测方法A F P 诊断阳性阴性合计I G R A阳性4293135 阴性246合计4497141X p e r t M T B /R I F 阳性443680 阴性06161 合计44971413 讨 论I G R A 采用MT B 特异性抗原刺激培养血液中的特异性T 细胞产生免疫应答并释放I F N -γ,通过检测I F N -γ的水平来判断患者是否感染了MT B ,其结果不受非结核分枝杆菌和卡介苗的影响[8-9]㊂I G R A 阳性说明患者存在结核感染,但并不表明结核是否处于活动期[10],因此,I G R A 不能独立诊断结核病[11]㊂本研究I G R A 检测结核病的灵敏度最高(95.74%)㊁阴性预测值最高(95.62%),提示I G R A 阴性可作为排除结核病的诊断指标㊂I G R A 与A F P 检测结果的阴性符合率为4.12%(4/97),说明I G R A 可用于痰涂片阴性患者的进一步检测㊂病原学诊断中,A F B 操作简单㊁费用低㊁耗时短,是应用最广泛的实验室检查方法,但是标本中的细菌数至少在每毫升5000~10000条时才能检测出阳性,且阳性率低,仅为14%~47%[12-14]㊂本研究中A F B 的敏感度为31.21%,与I G R A 和X pe r t MT B /R I F 相比,灵敏度最低,说明了A F B 易造成临床漏诊㊂本研究中A F B 的特异度为99.54%,共检测出阳性45例,其中44例诊断为结核病,剩余1例涂片阳性经对硝基苯甲酸(P N B )/噻吩-2-羧酸肼(T C H )选择培养基鉴定为非结核分枝杆菌(N T M )㊂这表明A F B 无法区分MT B 和N T M ,容易导致临床误诊㊂X pe r t MT B /R I F 是近年来快速发展应用的MT B 分子生物学检测技术,不仅可以检测MT B ,还可以检测利福平的耐药性,其整个检测过程只需要2h [15]㊂本研究的X pe r t MT B /R I F 灵敏度为56.74%,这与邹远妩等[16]研究的灵敏度63.8%接㊃1621㊃检验医学与临床2024年5月第21卷第9期 L a b M e d C l i n ,M a y 2024,V o l .21,N o .9近㊂X p e r t MT B/R I F的灵敏度显著高于A F B(χ2= 18.65,P<0.01),与既往研究相符[17-19]㊂X p e r t MT B/R I F与A F P检测结果的阳性符合率为95.45%(42/44),这提示临床非必要可不对A F B阴性患者进行X p e r t MT B/R I F检测,尤其对经济欠发达地区;X p e r t MT B/R I F与A F P检测结果的阴性符合率为62.89%(61/91),表明X p e r t MT B/R I F在A F B阴性患者中有进一步检测的价值㊂X p e r t MT B/ R I F特异度为100.00%,3种检测方法中最高㊂在1例N T M感染病例中,A F B检测呈阳性,而X p e r t MT B/R I F检测呈阴性,因此,当A F B呈阳性而X p e r t MT B/R I F呈阴性时,临床应高度怀疑N T M感染㊂I G R A㊁A F B㊁X p e r t M T B/R I F检测方法各有利弊㊂X p e r t M T B/R I F的灵敏度和特异度都很高[20-21],但它对实验室人员和环境的要求很高,而且价格昂贵,这就意味着一些患者会选择价格低廉的A F B检测,排菌量少的患者就无法被检测出来㊂I G R A检测还受到患者免疫水平的限制,一些免疫力低下的患者无法被检测出来[9,22]㊂因此,为患者找到合适的检测方法并进行最佳组合,为临床医生提供准确㊁快速的临床证据尤为重要[23]㊂综上所述,在结核病诊断中,X p e r t MT B/R I F和A F B的特异度均高于I G R A,而I G R A和X p e r t MT B/R I F的灵敏度高于A F B,故临床上可用I G R A 阴性作为排除结核病的指标,X p e r t MT B/R I F可作为病原学检测的首选方法,并可联合A F B辅助诊断N T M感染,以此来提高结核病的临床诊治效率㊂只有充分利用这3种检查方法的优势,并根据患者的实际情况适当应用,才能以尽可能低的成本尽快确诊结核病㊂参考文献[1]W o r l d H e a l t h O r g a n i z a t i o n.G l o b a l t u b e r c u l o s i s r e p o r t2022[R].G e n e v a:W o r l d H e a l t h O r g a n i z a t i o n,2022.[2]G O N G W P,WU X Q.D i f f e r e n t i a l d i a g n o s i s o f l a t e n t t u-b e rc u l o s i s i n f e c t i o n a nd a c t i ve t u b e r c u l o s i s:a k e y t o a s u c-c e s s f u l t u b e r c u l o s i s c o n t r o l s t r a t e g y[J].F r o n t M i c r o b i o l,2021,12:745592.[3]彭远远,包训迪,徐东芳.支气管肺泡灌洗液应用涂片抗酸染色T-S P O T.T B与G e n e X p e r t M T B/R I F联合检测对菌阴肺结核的诊断价值[J].分子诊断与治疗杂志, 2023,15(6):913-917.[4]P R O G R AMM E-G T.WHO o p e r a t i o n a l h a n d b o o k o n t u-b e rc u l o s i s m od u l e3:d i a g n o s i s te s t sf o r t u b e r c u l o s i s i n f e c-t i o n[J].G e n e v a:W o r l d H e a l t h O r g a n i z a t i o n,2022. [5]Z HA N G H H,L I H,T A N M Y,e t a l.G e n e X p e r t M T B/R I F c o m b i n e d w i t h c o n v e n t i o n a l m e t h o d s f o r t u b e r c u l o s i si n S h a n g h a i R e g i o n a l M e d i c a l C e n t e r:a r e t r o s p e c t i v e d i a g-n o s t i c s t u d y[J].A n n T r a n s l M e d,2022,10(10):575.[6]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.肺结核诊断标准(W S288-2017)[J/O L].新发传染病电子杂志, 2018,3(1):59-61.[7]赵雁林,逄宇.结核病实验室检验规程[M].北京:人民卫生出版社,2015.[8]智深深,陶俊吉,丁燕,等.五种临床常用结核分枝杆菌检测方法的应用性评价[J].国际检验医学杂志,2023,44(21):2587-2591.[9]吴多池,梁爱群,吴烨莹,等.结核菌素皮肤试验㊁干扰素释放酶联免疫法及核酸分子检测技术在结核病中的诊断价值[J/C D].新发传染病电子杂志,2023,8(4):60-63.[10]马婷婷,岳英,严文,等.γ-干扰素释放试验在结核病专科门诊诊断儿童活动性结核病的效能[J].临床肺科杂志, 2023,28(6):848-853.[11]袁梁,隋文君,王玫,等.X p e r t M T B/R I F㊁A F B与I G R A对结核病诊断价值的比较[J].标记免疫分析与临床, 2022,29(7):1081-1085.[12]张海霞,张觅,腾晓燕,等.G e n e X p e r t法与涂片抗酸染色法检测结核分枝杆菌的比较研究[J].南京医科大学学报(自然科学版),2022,42(1):129-132.[13]罗倩,刘泽远,刘亭,等.抗酸染色㊁X p e r t M T B/R I F与T-S P O T.T B联合检测在结核病诊断中的应用价值[J].武汉大学学报(医学版),2022,43(5):774-780. [14]曾庆雪,周明,唐柳生.两种方法检测结核分枝杆菌的价值分析[J].检验医学与临床,2022,19(19):2719-2721.[15]K A Y A W,F E R NÁN D E Z L G,Y E M I S I T Y,e t a l.X p e r tM T B/R I F a n d x p e r t M T B/R I F u l t r a a s s a y s f o r a c t i v e t u-b e rc u l o s i s a nd r i f a m p i c i n re s i s t a n c e i n c h i l d r e n[J].C o-c h r a n e D a t a b a s e S y s t R e v,2020,8(8):C D013359.[16]邹远妩,刘尚武,朱蕾,等.X p e r t M T B/R I F检测结核分枝杆菌及其耐药性在结核病辅助诊断中的临床价值[J].临床肺科杂志,2015,20(3):568-570.[17]王云格.X p e r t M T B/R I F在肺结核及耐药结核检测中的价值[J].中国实用医药,2021,16(11):103-104. [18]胡婧,周静,吴雯晶,等.结核病诊断T-S P O T.T B㊁G e n eX p e r t M T B/R I F技术应用价值研究[J].中国病原生物学杂志,2022,17(12):1454-1458.[19]彭利君,刘立宾,王静,等.五种结核检测方法在支气管肺泡灌洗液中对结核病的独立和联合诊断价值[J].全科医学临床与教育,2022,20(9):778-782.[20]柳正卫,彭颖,张明五,等.浙江省推广基于G e n e X p e r tM T B/R I F检测的结核病诊断流程的效果分析[J].中国防痨杂志,2021,43(8):790-795.[21]苟海梅,薛鳗玲,钟晓武,等.支气管肺泡灌洗液和痰液X p e r t M T B/R I F检测对肺结核临床诊断的价值分析[J].检验医学与临床,2022,19(6):745-748.[22]L I N W,L I U Z,Z HA N G Y,e t a l.D i a g n o s t i c v a l u e o f T B-I G R A,P P D,T B-D N A-P C R a n d T B-A b i n s i l i c o s i s c o m-p l i c a t e d w i t h t u b e r c u l o s i s[J].J T u b e r c R e s,2021,9(2): 110-116.[23]张贺龙,王慧燕,刘威,等.I G R A㊁L AM抗体联合X p e r t技术检测对膝关节结核的诊断价值及与结核活动性的关系[J].临床误诊误治,2021,34(10):84-87.(收稿日期:2023-09-04修回日期:2023-12-15)㊃2621㊃检验医学与临床2024年5月第21卷第9期 L a b M e d C l i n,M a y2024,V o l.21,N o.9。
诊断结核的三个标准
诊断结核的三个标准结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，其传播途径主要为空气传播。
诊断结核病需要依据一定的标准，而且需要综合考虑患者的临床表现、实验室检查和影像学检查等多方面的信息。
在临床实践中，医生们通常会根据以下三个标准来诊断结核病。
首先，临床症状是诊断结核病的重要依据之一。
结核病的临床表现多样，常见的症状包括慢性咳嗽、咳痰、低热、盗汗、消瘦等。
特别是慢性咳嗽伴有咳痰，尤其是带血丝的痰，是结核病的典型症状。
此外，结核病还可引起胸痛、呼吸困难、乏力等症状。
因此，对于有这些症状的患者，医生应高度怀疑结核病的可能性。
其次，实验室检查也是诊断结核病的重要手段之一。
结核分枝杆菌的培养和鉴定是确诊结核病的金标准。
此外，结核分枝杆菌的抗酸染色检查和基因扩增技术（PCR）检测也是常用的实验室检查手段。
这些检查可以直接检测结核分枝杆菌的存在，对于临床疑似结核病的患者具有重要的诊断意义。
最后，影像学检查对于诊断结核病也是至关重要的。
胸部X线检查是最常用的影像学检查手段，可以发现肺部结核病的病变。
而对于肺外结核病，如骨关节结核、淋巴结结核等，CT、MRI等影像学检查则具有更高的诊断敏感性和特异性。
因此，在诊断结核病时，医生们需要充分重视影像学检查的结果。
综上所述，诊断结核病需要综合考虑患者的临床表现、实验室检查和影像学检查等多方面的信息。
只有综合运用这三个标准，才能更准确地诊断结核病，为患者提供及时有效的治疗。
因此，医生们在临床实践中应当重视这三个诊断标准，提高对结核病的诊断水平，为控制结核病的传播做出积极的贡献。
浅谈结核病实验诊断技术的新进展
ＴＳ Ｏ ．Ｂ试验是 以特异性抗 原为刺激 源 ， ．Ｐ ＴＴ 应用 酶联免
疫斑点技术诊 断结核感染 的新方法。结核感染后体 内长期存
在抗原特异性 的记忆性 Ｔ细胞 ， 当再次遇到抗原刺激时 ， 能迅 速活化增值 ， 释放 干扰素 。综合上述 原理 ，ａｖｎ 建立了 Ｌｌａｉ 。 以Ｒ Ｉ Ｄ 编码 的结核特异性抗原 ６ｋ Ｄ早期分泌 靶向抗原 （ Ｓ Ｅ— Ａ －） １ Ｋ Ｔ６ 和 ０ ｄ培养滤过蛋 白（ Ｆ 一０ 肽段库为刺激原 ， Ｃ Ｐ１ ） 检测 外周血中结核特异性释放 干 扰素 的 Ｔ淋 巴细胞 ， 从而诊 断 结 核杆菌感染 。其优点 为 ： 实验结 果清晰 ， 于判断。Ｐ ｉ 易 ａ 等 对 近 ３年的 １ ３项研究 进行 Ｍｅ ｔ ａ分析 ， 明 ＴＳ Ｏ —Ｂ的综 表 —Ｐ ＴＴ 合 敏感性为 ９ ％ ， ０ 在免疫力 低下 的人群 中 ， 然能够 维持较 依 高的敏感性 ” 。在肺外结 核 的诊 断中 ，—Ｐ ＴＴ ＴＳ Ｏ —Ｂ也具有较 高的敏感性 。Ｆ ｒ ｒ ｅｒ ａ和 Ｌｅ等报道 的 ２个前 瞻性研究 中 ， ａ ｅ 共 包括 １ ８例 肺 外结 核 患者 ， －Ｐ ＴＴ 阳性率 为 １０ ［９。 Ｔ Ｓ Ｏ —Ｂ ０ ％ ８ｊ ， 同时以 ＴＳ Ｏ —Ｂ为标 准能够 更加准 确地 锁定 需要 预防性 ．Ｐ ＴＴ
酸扩增法。
抗结核治疗 的感染者 。其斑点 数越多 ， 发生活动性 结核 的可
能性越大 ， 时间内斑点数显著增 加 ， 短 则强烈提示体 内结核活 动 ， 时给 予预防性 的治疗 十分必要 。Ｔ Ｓ Ｏ ・Ｂ在 现有结 此 —Ｐ ＴＴ 核诊断方法存在诸多缺陷 的今 天 ， 以给临床 医生 提供有力 可
速、 特异、操作简单 、 无须 昂 贵仪器 等优点 。但 其可 与少数
结核病的实验室检查
１ ． ２ 结核分枝杆菌培 养
在 接 种 培 养 基 前 ，标 本 需要 进 行 预 处 理 ，主要 用 碱 处 理 法 ， 目的是杀 灭 或 抑 制 杂 菌生 长 。 吸取 预 处 理 过 的标 本 ０ ． １ ｍｌ ，无菌 操 作接 种 于 培养 基 的斜 面 上 ，接种 后 拧 紧培 养 瓶 盖或 塞 紧试 管胶 塞 ，３ ７ ｃ ｃ 平 卧放 置 斜面 ２ ４小 时后 ，直 立 放置 ，３ ７ ℃继 续培 养 。 培养 第 ３天 、第 ７天 各观察 一 次细菌 生长情 况 ，此后 每 周 观察 一 次 ，培 养 阳性 随 时 报告 结 果 。若 ７天 内发 现 菌 落 生 长 ，并 经抗 酸 染 色 证 实为 抗 酸 杆 菌 ，可 报告 快 速 生 长分 枝 杆 菌。
１ ． ５ 结核分枝杆菌分子生物学技术
近 年来 ，随着分 子生 物学技术 的飞速发 展 ，其 在结核 病 领 域 的研 究 和应 用 备 受 关 注 。结核 病 的 基 因诊 断 、耐 药性 测定 、菌 种 的分 子 生 物学 鉴 定 等均 取 得 了重 大 进 展 ，主要 包括 ： １ ． ５ ． １ 核酸探针 法
世界最 新 医学信 息文摘 ２ ０ １ ３年第 １ ３ 卷第 ５ 期
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临床 医护 ・
结核病 的实验室检 查
袁淑 霞
（ 黑龙江省 呼玛 县疾 病预防控制中心 ，黑龙江 大兴安岭 １ ６ ５ ０ ０ ０）
摘要 ：目的 探讨结核病 的实验 室检 查方法。方法 实验 室的结 核 病 检 查 试验 的 分 析 和 总 结 。 结 论 结核 病 的 传 统 实验 室
Ｏ 引言
结 核病 的实验 室 诊断 是 发现 传染 源 的 主要 途径 和 手段 ， 是确 定 结 核病诊 断 和化 疗方 案 的重 要依 据 ，也 是考 核疗 效 、 评价 治疗 效果 的可靠 标准 。