利奈唑胺主要降解产物的结构鉴定_曹海彦
利奈唑胺主要降解产物的结构鉴定曹海彦1，祝艺娟2，桑志培1，晁若冰1*（1．四川大学华西药学院，成都610041；2．广州市药品检验所，广州510160）摘要目的：对利奈唑胺主要降解产物的结构进行鉴定。
方法：对利奈唑胺原料药进行强力破坏试验，采用高效液相色谱法对降解产物进行分析，应用LC－MS对3个主要的降解产物进行结构鉴定，并利用合成所得杂质对照品对降解产物的结构进行了确证。
结果：3个主要的降解产物分别为利奈唑胺的全水解物、开环水解物以及氨基物。
结论：利奈唑胺在碱性和酸性条件下的降解产物不相同。
在碱性条件下的降解产物主要为全水解物和开环水解物，而在酸性条件下的降解产物主要为氨基物。
关键词：利奈唑胺；降解产物；杂质结构鉴定；液相色谱－质谱联用中图分类号：Ｒ917文献标识码：A文章编号：0254－1793（2013）08－1342－07Structure identification of the main degradation products of linezolid CAO Hai－yan1，ZHU Yi－juan2，SANG Zhi－pei1，CHAOＲuo－bing1*（1．West China School of Pharmacy，Sichuan University，Chengdu610041，China；2．Guangzhou Institute for Drug Control，Guangzhou510160，China）Abstract Objective：To identify the structure of the main degradation products of linezolid．Methods：Stress de-struction testing was applied to the crude drug of linezolid，with an HPLC method to analyze the degradation prod-ucts．The three main degradation products were identified by LC－MS，and the structure of them were confirmed through comparison with synthetic impurities．Ｒesults：Three main degradation products are the full hydrolysate，the ring－opening hydrolysate and the amido substance of linezolid．Conclusion：The alkaline hydrolysis products of lin-ezolid are different from the acid hydrolysis product．The main alkaline hydrolysis products are the full hydrolysate and the ring－opening hydrolysate，while the acid hydrolysis product is the amido substance．Key words：linezolid；degradation products；impurity structure identification；LC－MS利奈唑胺（linezolid）为全合成的噁唑烷酮类抗菌药，化学名为（S）－N－｛［3－（3－氟－4－（4－吗啉基）苯基）－2－氧代－5－噁唑烷基］甲基｝乙酰胺，其结构见图1。
利奈唑胺对革兰阳性球菌特别是多重耐药的革兰阳性球菌有良好的抗菌活性，对葡萄球菌、链球菌（包括肠球菌）敏感［1］。
由于利奈唑胺具有独特的作用位点和方式，不易与其他抗菌药产生交叉耐药性，在临床上用于革兰阳性菌引起的肺炎、皮肤软组织感染、脑膜炎、心内膜炎、菌血症、骨髓炎和外科手术感染等的治疗［2］。
本品疗效确切，应用广泛，但有不良反应的报道，主要表现为恶心、腹胀、腹泻、血小板减少等［3］。
利奈唑胺在存放过程中可能产生降解产物，为了分析利奈唑胺中的潜在杂质，保证药品的质量，对利奈唑进行了降解试验，分析鉴定了主要降解产物。
有文献对利奈唑胺及其热降解产物进行核磁共振分析，但未介绍其他途径降解产物［4］。
有文献报道采用TLC、HPTLC或HPLC法检查原料或制剂中的利奈唑胺及其降解产物［5－8］。
另有对利奈唑胺合成过程中杂质进行分离鉴定的报道［9］。
本文对利奈唑胺原料药进行水解、酸水解、碱水解、氧化、高温、强光破坏，取破坏试验样品进行HPLC分析，对主要的降解产物进行结构鉴定，并利用合成所得杂质对照品对降解产物进行了结构确证。
本工作为利奈唑胺的稳定性和纯度控制提供了重要依据。
*通讯作者Tel：（028）85501454；E－mail：rbchao@scu．edu．cn图1利奈唑胺的结构Fig1Structure of linezolid1仪器与试药日本岛津LC－10AT分析型高效液相色谱仪，SPD－10A vp紫外检测器，Class－VP色谱工作站；Waters Acquity超高效液相色谱仪，Waters Quattro Premier XE质谱仪；美国Varian INOVA400MHz核磁共振仪。
利奈唑胺原料药、利奈唑胺杂质对照品（四川大学华西药学院药物化学系提供），乙腈、三氟乙酸、甲酸为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果2.1色谱条件采用HPLC法分析利奈唑胺强力破坏试验的样品。
色谱条件如下：色谱柱为Gemini C18柱（150mmˑ4.6mm，5μm）；流动相：A相为0.1%三氟醋酸水溶液，B相为0.1%三氟醋酸乙腈溶液，按表1进行线性梯度洗脱；检测波长：254nm；流速：1.0mL·min－1。
表1梯度洗脱程序Tab1Program of gradient elutiont/min A/%B/%090101880203325753490104590102.2强力破坏试验水解：取利奈唑胺原料药约25mg，置25mL量瓶中，加入水5mL，水浴加热1h，取出放冷，再加10%乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；酸水解：取利奈唑胺原料药约25mg，置25mL量瓶中，加入1 mol·L－1盐酸溶液5mL，放置过夜，加入1mol·L－1氢氧化钠溶液5mL中和，加10%乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；碱水解：取利奈唑胺原料药约25mg，置25mL量瓶中，加入1mol·L－1氢氧化钠溶液5mL，85ħ水浴加热5min，放冷，加入1mol·L－1盐酸溶液5mL中和，加10%乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；氧化破坏：取利奈唑胺原料药约25mg，置25mL量瓶中，加入30%H2O2溶液3mL，摇匀，放置过夜后，强烈振摇至无气泡产生，再加10%乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；高温破坏：取利奈唑胺原料药适量，置烘箱中，于130ħ加热3h 后，取出，放冷，称取25mg，置25mL量瓶中，加10%乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀；强光破坏：取利奈唑胺原料药适量，用强光（4500lxʃ500lx）照射5d后，取出，称取25mg，置25mL量瓶中，加10%乙腈溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。
取以上强力破坏试验的样品溶液，用“2.1”项下的色谱条件进行分析。
结果表明，利奈唑胺的降解产物主要有3个，按保留时间先后顺序将降解产物命名为杂质1、杂质2和杂质3，降解产物及主成分相对含量见表2。
利奈唑胺原料及酸、碱破坏样品的色谱图见图2。
表2利奈唑胺强力破坏试验的结果Tab2Ｒesults of stress destruction testing for linezolid破坏条件（destruction condition）利奈唑胺含量（content of linezolid）/%杂质含量（content of impurity）/%123水解（hydrolysis）99.1800.700酸（acid）94.9400 4.94碱（base）10.96 5.0083.850氧化（oxidation）97.22000.1热（heat）99.91000.03光解（photolysis）99.92000.02试验结果表明，水解、酸水解、碱水解、氧化等均可使有关物质的含量增加。
其中酸水解和碱水解影响较为显著，在碱性条件下水解，利奈唑胺主要产生杂质1和杂质2，而在酸性条件下水解，则主要产生杂质3。
利奈唑胺是噁唑烷酮类化合物，分子中有酯键和酰胺键，易发生水解反应，在不同的条件下，其水解产物不尽相同。
为了进一步研究3个主要降解产物的结构，运用LC－MS对其结构进行了鉴定。
2.3杂质的鉴定2.3.1LC－MS分析供试溶液的制备：取“2.2”项下酸、碱破坏的样品溶液各适量，混合，即得。
色谱条件：色谱柱为Waters Acquity UPLC BEHC18柱（100mmˑ2.1mm，1.7μm）；流动相：A相为0.1%甲酸水溶液，B相为乙腈，按表3进行线性梯度洗脱；检测波长：254nm；流速0.25mL·min－1；进样：5μL。
Fig2Chromatograms of linezolid（A），alkaline hydrolysis products of linezolid（B）and acid hydrolysis products of linezolid（C）表3梯度洗脱程序Tab 3Program of gradient elutiont /min A /%B /%090101.59010128020182575209010质谱条件：离子源：电喷雾离子源（ESI ）；扫描方式：正离子扫描；扫描范围：m /z 200→800；毛细管电压：2.8kV ；锥孔电压：20V ；萃取锥孔电压：5V ；干燥气流速：600L ·h －1；锥孔气流速：40L ·h －1；离子源温度：100ħ；干燥气温度：250ħ。
将制备所得的供试溶液进行LC －MS 分析，总离子流图见图3，杂质1 3的质谱图见图4。
图3利奈唑胺降解产物的总离子流图Fig 3Total ion chromatogram of linezolid degradation products从图3可以看出，杂质1、杂质2和杂质3的保留时间分别为1.72、3.24和3.90min 。
根据图4－A ，杂质1的准分子离子峰［M +H ］+为m /z 270.15。
低温烷烃降解菌Yarrowia sp.分离、鉴定及降解特性
敌草隆在棉纤维上的降解及产物分析
敌草隆在棉纤维上的降解及产物分析张重庆;马明波;董锁拽;周文龙【摘要】棉纤维作为重要的纺织品原料,其安全性越来越受到人们的关注.本文将棉花种植过程中大量使用且半衰期长的敌草隆作为研究对象,通过光降解和煮练过程,利用液相色谱技术进行检测,研究分析敌草隆的降解及产物.结果表明:煮练条件下,40 min敌草隆能够完全从棉纤维上脱除;液相色谱能够有效地检测敌草隆在棉纤维上的残留,重复性好,可满足农药检测标准;在光解和煮练过程中敌草隆的降解产物均为3,4-二氯苯胺.【期刊名称】《纺织学报》【年(卷),期】2014(035)004【总页数】4页(P1-4)【关键词】棉纤维;敌草隆;液相色谱;3,4-二氯苯胺【作者】张重庆;马明波;董锁拽;周文龙【作者单位】浙江理工大学材料与纺织学院,浙江杭州 310018;浙江理工大学材料与纺织学院,浙江杭州 310018;浙江出入境检验检疫局丝检中心,浙江杭州 310012;浙江理工大学材料与纺织学院,浙江杭州 310018【正文语种】中文【中图分类】S562棉花作为重要的战略资源，在我国国民经济中占有重要的地位。
中国作为全球最大的棉花消费国和进口国，每年纺织用棉量约为1200万t，2008年我国进口棉花200多万 t，这些数字还在持续增加［1－2］。
随着经济的发展，人们对服饰、面料的质量要求越来越高［3］，环保的理念深入人心，服饰的安全性受到越来越多的关注。
因此作物种植过程中用量最大的农药成为研究重点［4］。
本文以棉花种植过程中大量使用的除草剂/脱叶剂敌草隆为研究对象，探究其在纺织煮练条件下降解和残留特性以及检测方法。
敌草隆化学名称为3-(3，4-二氯苯基)-1，1-二甲基脲，属于苯基取代脲类化合物，用作内吸性除草剂。
目前对敌草隆的检测方法有液相色谱法［5－7］、气相色谱法［8］等。
对于其在蔬菜、土壤等中的衰减与检测都有文献报道，但有关敌草隆在棉花煮练过程中的降解与在棉纤维上的检测尚未见报道。
奥沙西泮降解产物的制备分离及结构鉴定的研究
F ig1 2 HPLC Chromatogram s of solution destroyed by acid (A ) , alkali (B ) , strong light ( C ) , heat (D ) and oxygen ( E) destroy2tests under A system
1
H2 NMR ,
13
C2 NMR , HMBC, HMQC, ESI2
M S1 RESUL TS One decomposable compound ( 6 2 Chloro 2 42 phenyl2quinazoline 2 2 2carbaldehyde ) was isolated and identified as the related substance of oxazepam 1 CO NCL US I O N The compound was reported in domestic literature for the first ti m e, p roviding reference for the imp rovement of oxazepam standard of Chinese pharmacopoeia1 KEY WO RD S: oxazepam; p reparative thin2layer chromatogram; decomposable compound
奥沙西泮降解产物的制备分离及结构鉴定的研究
程东升
1, 2
, 何艳 , 南楠1 Nhomakorabea2
(11青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院 , 山东 烟台 264000; 21中国药品生物制品检定所 , 北京 100050)
海洋放线菌WBF16次级代谢产物的分离与结构鉴定
Ａｂ ｔａ ｔ ０ｂ ｔ ｅ Ｔ ｏａｅａ ｄｉｅ ｔｙｔｅａ ｔｕ ｒ ｏ ｓ ｔｅ ｔ ｆ ｍ ｅ ｏ ｄｒ ｔｂ ｌｅ ｆ ｈ ｓｒ ｃ ｊｃｉ ｏｉ ｌ ｎ ｎｉ ｎｉ ｍｏ ｎ ｔｕ ｎｓ ｒ ｓｃ ｎ ａｙｍｅａ ｏｉ ｓｏ ｅ ｅ ｖ ｓ ｔ ｄ ｆ ｈ ｔ ｃ ｉ ｏ ｔ ｔ
２８ ５
中国抗生素杂志２ 年４ ０ 月第３ 卷第４ １ ２ ７ 期
文 章 编 号 ： １０ －６ ９２ １）４０ ５ ．３ ０ １８ ８ （０ ２０ —２ ８０
海洋放线 菌ＷＢ １ 次级代谢产物 的分离 与结构鉴定 Ｆ６
陆建胜 陆 园园 邢莹莹 奚涛
（ 中国药科大学 生命 科学技术学院海洋药物研 究 中心，南京 ２ ０ ０ ） １０ ９
ｎ ｔ ｒ ｌ ｏ ｏ ｄ ａ ｄ ｃ ｍｐ ｕ ｄ １ ｗａ ｒｔ ｓ ｌｔ ｄ ｆｏ ｍａ ｉ ｅ ｍｉ ｒ ｏ ｇ ｉｍ ｓ Ｃｏ ｏ ｎ ｉｐ ａ ｅ ｅ ｔｒ ａｕ ａ ｍｐ ｕ ｎ ｏ ｏ ｎ ｓｆ ｓｌ ｉｏ ａ ｅ ｍ ｒｎ ｃ ｏ ｒ ａ ｓ ． ｍｐ ｕ ｄ １ ｄ ｓ ｌｙ ｄ ｂ ｔ ｃ ｎ ｉ ｙ ｒ ｎ ｅ
ｇ ｌｃ ｒ ｍａ ｏ ｒ ｐ ｙ ａ ｄ ｐ ｅ ａ ａ ｉ ｅ ＨＰ ｅｈ ｄ ｅ ｒ ｓｒ ｃ ｕ ｅ ｒ ｅ ｅ ｍ ｉ ｅ ｙ ｓ ｅ ｔａ ｅ ｈ ｄ ｎ ｅ ｈ ｏ ｔ ｇ ａ ｈ ｎ ｒ ｐ ｒ ｔ ＬＣ ｍ ｔ ｏ ｓ Ｔｈ ｉ ｔ ｔ ｒ ｓ ｗｅ ｅ ｄ ｔ ｒ ｎ ｄ ｂ ｐ ｃ ｒ ｌ ｖ ｕ ｍ ｔｏ ｓａ ｄ
ａ ｔｖｉ ｔ ｗａ ｄ ｕ ａ ｏ ａ ｐ ｔ ｅ ｉｌｃ ｒ ｉ ｏ ａＫＢ ｅ ｌ． ｕｍａ ｕ ｇ ｃ ｎ ｅ ｅｌ１ ４ ｈｕ ｎ ｈｅ ｔ ｃ ｌｕ ａ ｃ ｉ ｔ ｏ ｒ ｓ ｈ ｍ ｎ ｒ １ｅ ｉｈ ｌａ ａ ｃ ｎ ｍ ｙ ｃ ｌｓ ｈ ｎ ｌ ａ ｃ ｒｃ ｌ ｉ Ａ５ ９， ｍａ ｐａｏ ｅ ｌ ｌｒ ｎ ｎｅ ｃ ｒ ｉ ｏ ｅ ｌｌ ｅ ＳＭ Ｍ Ｃ一 ７ ，ｈｅｒＩ ａ ｕ ｓｗａ ． ， ２１ａ ２．８ｐ ／ ｒ ｓ ｅ ｔｖ ｌ ． ａ ｃ ｎ ｍａ ｅ ｌ ｉ ｎ ７ ２１ ｔ ｉ Ｃ ｎｖ ｌ ｅ ｓ３ ８ｌ ７． ｎｄ １ ５ ｇ Ｌ， ｅ ｐ ｃｉ ｅ ｙ Ｋ ｅ ｒ Ｓｅ ｏ ａｙ ｔ ｂ ｉｅ ；Ｉｏ ａ ｉ ｎ； ｔｕ ｔ ｅ ｉ ｎ ｉ ｃ ｔｏ Ｃｈ ｏ ａ ｙ ｗｏ ｄｓ ｃ ｎｄ ｒ ｍｅａ ｏｌ ｓ ｓ ｌｔｏ Ｓ ｒ ｃｕｒ ｄｅ ｔｆ ａｉ ｎ； ｒ ｍ ｍｙｃｎ ｔ ｉ ｉ ｅＡ
2015年1月31日《药物化学》简答题
1.为什么环磷酰胺的毒性比其它氮芥类抗肿瘤药物的毒性小？答：环磷酰胺是利用潜效化原理设计出来的药物。
由于氮原子上连有吸电子的磷酰基，降低了氮原子的亲核性，因此在体外对肿瘤细胞无效。
进入体内后，由于正常组织和肿瘤组织中所含的酶的不同，导致代谢产物不同。
在正常组织中的代谢产物是无毒的4-酮基环磷酰胺和羧基化合物，而肿瘤组织中缺乏正常组织所具有的酶，代谢途径不同，经非酶促反应β-消除（逆Michael加成反应）生成丙烯醛和磷酰氮芥，后者经非酶水解生成去甲氮芥，这三个代谢产物都是较强的烷化剂。
因此环磷酰胺对正常组织的影响较小，其毒性比其他氮芥类药物小。
2.6-APA发现的意义？3. 磺胺类药物发现的意义？4.磺胺类药物及抗菌增效剂的作用机制？5.简述代谢拮抗原理（抗代谢作用）。
答：所谓代谢拮抗就是设计与生物体内基本代谢物的结构有某种程度相似的化合物，使之竞争性地和特定的酶相作用，干扰基本代谢物的被利用，从而干扰生物大分子的合成；或以伪代谢物的身份掺入生物大分子的合成中，形成伪生物大分子，导致致死合成，从而影响细胞的生长。
例如：尿嘧啶是体内正常的嘧啶碱基，其掺入肿瘤组织的速度比其它嘧啶快，利用生物电子等排原理，以氟原子代替尿嘧啶5位上的氢原子，得到氟尿嘧啶。
由于氟尿嘧啶和尿嘧啶的化学结构非常相似，在代谢过程中能在分子水平代替正常代谢物尿嘧啶，抑制了胸腺嘧啶合成酶，从而干扰了DNA的合成，导致肿瘤细胞死亡。
6.什么是先导化合物？答：先导化合物（Lead Compound ）是指有独特结构的具有一定活性的化合物。
即可以用来进行结构改造的模型，从而获得预期药理作用的药物。
亦称模型化合物。
简称先导物，又称原型物，是通过各种途径得到的具有一定生物活性的化合物。
一般而言，先导化合物的发现是新药研究的起始点。
先导化合物的发现有多种途径和方法。
7.什么是药物的化学结构改造？什么是药物的化学结构修饰？答：化学结构改造——利用各种化学原理，将药物化学结构加以衍化或显著改变，以寻求新药的方法。
可降解PLA
ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｗｅｉｇｈｔｌｅｓｓｎｅｓｓ ｍｅｔｈｏｄ． Ｔｈｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ ａｍｏｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｂａｔｃｈｅｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｈｉｇｈ⁃ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅ⁃
添加土壤稀释液的 ＰＬＡ ／ ＰＢＡＴ 塑料膜－无机盐液体培养基
作为空白对照组。
第一个降解周期培养结束后，继续富集转接时，将 １０％
聚类后，将微生物在门、纲、目、科、属、种分类水平上进行群
分析，计算细菌群落的 α－多样性指数，包括 Ｏｂｓｅｒｖｅｄ ＯＵＴ 和
Ｓｈａｎｎｏｎ 指数等，并基于加权和非加权分析不同批次细菌群
安徽农业科学，Ｊ．Ａｎｈｕｉ Ａｇｒｉｃ．Ｓｃｉ． ２０２４，５２（４） ：５７－６１，７０
可降解 ＰＬＡ ／ ＰＢＡＴ 塑料的微生物菌群结构研究
裴雯玉１ ，江雨韩１ ，李 娜１ ，陈 怡１ ，吴 弘１，２∗
（１．天津师范大学生命科学学院，天津 ３００３８７；２．天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室，天津 ３００３８７）
回收后在 Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＨｉＳｅｑ ２５００ 测序平台上完成高通量测序分
１．３ 降解菌群的筛选和转接富集 首先将 ＰＬＡ ／ ＰＢＡＴ 复合
中浸泡过夜，随后在 ７５％酒精中浸泡 ４ ｈ，用无菌水冲洗干净
备用。 称取 １０ ｇ 土样于 ９０ ｍＬ 无菌水中，制得土壤稀释液。