脂肪间充质干细胞的临床PPT讲稿
间充质干细胞源性外泌体在缺血性脑卒中后神经血管单元中的作用
间充质干细胞源性外泌体在缺血性脑卒中后神经血管单元中的作用
目录
1. 内容概要................................................2
1.1 背景介绍.............................................3
1.2 研究目的和重要性.....................................4
1.3 文献综述概览.........................................5
2. 间充质干细胞与缺血性脑卒中..............................6
2.1 间充质干细胞的特性...................................7
2.2 缺血性脑卒中的病理生理学机制.........................8
2.3 MSC在缺血性脑卒中治疗中的应用........................9
3. 间充质干细胞源性外泌体的概述...........................10
3.1 外泌体的生物学特性..................................11
3.2 MSC源性外泌体的主要特点.............................12
3.3 外泌体在神经科学中的应用前景........................13 4. 神经血管单元在缺血性脑卒中中的应用.....................14
4.1 神经血管单元的定义及其组成..........................15
4.2 神经血管单元在脑卒中后恢复中的作用..................16
5. 外泌体在神经血管单元的特定功能.........................18
人脂肪源性间充质干细胞的分离培养和鉴定
３５８ 第１９卷５｛｝｝】 ２０１３年９月 天津医科大学学报 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｉａｎｊｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｖｏ１．１９．ＮＯ．５ Ｓｅｐ ２０１３
文章编号１００６—８１４７（２０ｌ３）０５—０３５８—０４ 人脂肪源性间充质干细胞的分离培养和鉴定 ｛仑 誊
赵辉 ，吕军强’，贾静’，王松’，傅正’，车绪春 ，陆融１１２，林刚２ｉ姚智 （１．天津医科大学基础医学院免疫学系，天津３０００７０；２．深圳市康哲药业有限公司，深圳５１８０５７；３．教育部免 疫微环境与疾病重点实验室，天津３０００７０）
摘要目的：分离培养并鉴定人脂肪源性间充质千细胞（ｈＡＤ—ＭＳＣ）、方法：采用贴壁法从人脂肪组织分离获得ｈＡＤ—ＭＳＣ，并从 表面分子表达和定向分化两个方面进行坚定 结果：成功从脂肪组织中分离获得间充质干细胞，该群细胞贴壁生长，形态类似成 纤维细胞样；具有较强的体外增殖能力和自我更新能力；一致性好，纯度高，９９％的细胞阳性表达ＣＤｌ０５、ＣＤ９０、ＣＤＩ３、ＣＤ４４分 子；ＣＤｌｌ７、ＣＤ３４、ＣＤ４５和ＨＩ Ａ—ＤＲ阴性表达，阳性率低于２％；可向脂肪和成骨细胞定向分化 ．结论：分离所得细胞符合间充质 干细胞基本特点，可确定为ｈＡＤ—ＭＳＣ．． 关键词人脂肪源性问充质干细胞；分离；鉴定；定向分化 中图分类号Ｑ８１３ 文献标志码Ａ
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ＺＨＡＯ Ｈｕｉ ，Ｔ Ｕ Ｊｕｎ—ｑｉａｎｇ ，ＪＩＡ Ｊｉｎｇ。，ＷＡＮＧ Ｓｏｎｇ ，ＦＵ Ｚｈｅｎｇ。，ＣＨＥ Ｘｕ—ｃｈｕｎ ，ＬＵ Ｒｏｎｇ。一，ＬＩＮ Ｇａｎｇ ，ＹＡＯ Ｚｈｉ ， （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｎｍｕｎｕｌｏｇｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔｉａｎｊｉｎ ３０００７０，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｈｅｎｚｈｅｎ Ｋａｎｇｚｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｌｉｄ．， Ｓｈｅｎｚｈｅｎ ５ １ ８０５７，Ｃｈｉｎａ；３．Ｋｅｙ １，ａｂｏｒａｔｍｙ ｏｆ ｌｍｎｍｎｏ Ｍｉｅｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎａｌ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｔ Ｃｈｉｎａ，Ｔｉａｎｊｉｎ ３０００７（）．Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ ０ｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｉｓｏｌａｔｅ ａｎｄ ｅｘｐａｎｄ ｈｕｍａｎ‘ｄＩｌｉｐｏｓｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ（ｈＡＤ—ＭＳＣ）ｆｌ＇ｏｍ ａｄｕｈ ａｄｉｐ（）ｓｅ ｔｉｓｓｕｅ，ａｎｄ ｄｅｆｉｎｅ ｔｈｅ ｅｈａｒａｃｔｅｒｉｓｌｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ｈＡＤ——ＭＳＣ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ ｂｙ ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ａｌｌ（］ａｄｈｅｒｅｎｃｅ ｔｏ ｐｌａｓｔｉｃ ａｌｌ｛１ ｔｈｅ ＳＨｄａｃｅ ｍａｒｋｅｒ ａｎｄ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｍｕｈｉｐｏｔｅｎｔ ｄｉｆｉｅｒｅｎｔｉａｔｉｎｎ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅｓｅ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ—ｌｉｋｅ（：ｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｔ）１）ｒａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ａｔｌｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ．Ｔｈｅｓｅ ｃｅｌｌｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｅｘｐａｎｄｅｄ ｑｕｉｃｋｌｙ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．ａｎｄ ｓｈｏｗｅｄ ｓｅｌｆ－ｒｅｎｅｗａｌ ａｂｉｌｉｔｙ．ＣＤ １０５．ＣＤ９０．ＣＤ １ ３ ａｎｄ ＣＩ）４４ ｗｅｒｅ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｉｎ ９９％ｕｆ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｃｅｌｌｓ ｗｈｉｌｅ ＣＤ１ １７，ＣＤ３４，ＣＤ４５ ａｎｄ ＨＬＡ—ＤＲ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ ｎｅｇａｔｉｖｅ． ｌ＇ｈｅｙ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｉｎ— ｄｌｌｃｅｄ ｔｏ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ ｎｓｌｅｏｂｌａｓｔｓ ａｎｄ ａｄｉｐｕｃｙｔｅｓ ｉｎ ｓｐｅ（：ｉａｌ ｄｉｆｌ＇ｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｓｅ ｅｅｌｌｓ ｆｒｏｉｎ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ ａｒｅ ｈＡＤ— ＭＳＣ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｈＡＤ—ＭＳＣ；ｉｓ（４ａｔｉｏｎ；ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｎｍｈｉｐｏｔｅｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｌｌ
间充质干细胞流程
间充质干细胞流程
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间充质干细胞（MSCs）是一类具有多重潜能的成体细胞，在干细胞领域具有重要的应用前景。MSCs具有自我更新、多向分化和免疫调节等特性，在组织修复、再生医学和免疫治疗等领域具有广阔的应用前景。本文将重点介绍间充质干细胞的提取、培养、鉴定及应用等流程，希望能为相关研究工作提供参考。
脂肪源性间充质干细胞与肝病
塞旦 壁 苤查 Ｑ 生 旦箜 鲞箜 塑 丝 型 ！￡！ Ｑ ： ： ： ‘６９‘
ａｉｔｅｒｅｄ Ｔ－ｃｅ１１ ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ ｉｎ ａｓｃｉｔｉｃ ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｃｉｒｈｏｓｉｓ： ［１５］聂青和．内毒素血症在重型肝炎发病中的地位ｆＪ］．实用
ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｎｏｒｆｌｏｘａｃｉｎ［Ｊ１．Ｊ Ｈｅｐａｔｏｌ，２００４，４０： 肝脏病杂志，２００４，７：５－７．
６２４—６３１． 『１６１ ＷＩＥＳＴ Ｒ，ＣＡＤＥＬＩＮＡ Ｇ，ＭＩＬＳＴＩＥＮ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｂａｃｔｅｒｉａｌ 【１３】ＡＤＡＭＳ ＤＨ，ＥＫＳＴＥＥＮ Ｂ，ＣＵＲＢＩＳＨＬＥＹ ＳＭ．Ｉｍ—ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ＧＴＰ－ｃｙｃｌｏｈｙｄｒｏｌａｓｅ Ｉ ｉｎ
ｍｕｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ ｇｕｔ ａｎｄ ｌｉｖｅｒ：ａ ｌｏｖｅ／ｈａｔｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｍｅｓｅｎｔｅｒｉｃ ｖａｓｃｕｌａｔｕｒｅ ｏｆ ｃｉｒｒｈｏｔｉｃ ｒａｔｓ叨．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， 『Ｊ］．Ｇｕｔ，２００８，５７：８３８—８４８． ２００３，３８：ｌ５０８—１５１５． 『１４１ ＳＬＯＭＩＡＮＹ ＢＬ，ＳＬＯＭＩＡＮＹ Ａ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ （收稿－２００９—０４—２４） Ｄｌａｔｅｌｅｔ—ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｍｕｃｏｓａｌ ｕｌｃｅｒ ｈｅａｌ一 （校对：张骏飞）
ｉｎ ．Ｉｎｆｌａｍｍ Ｏｐｈａｒｍａｃｏｌ，２００３，ｌ ｌ：２３７—２４８．
脂肪源性间充质干细胞与肝病
陈耀凯郭艳
【摘要】脂肪源性间充质干细胞是近年来发现的一种成体干细胞，具有自我更新和多向分化潜能。由于其广泛存在
于脂肪组织中，取材容易，获得率高而有望成为组织工程和基因工程中新的干细胞来源，极具临床应用及基础研究前景。
本文对脂肪源性间充质干细胞的生物学特性、多向分化潜能及其在肝脏疾病治疗方面的最新研究进展进行了阐述。
间充质干细胞能量代谢 力学
间充质干细胞能量代谢 力学
间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是一类来源于胚胎或成体组织的多潜能干细胞，具有自我更新和多向分化能力。它们广泛存在于人体各个组织中，包括骨髓、脂肪、骨骼、肌肉、心脏和脑组织等。
能量代谢是维持细胞生存和生物学功能正常运转的重要过程。间充质干细胞的能量代谢与其生物学特性密切相关。在干细胞的能量代谢中，主要有两个重要的通路：糖酵解和线粒体三磷酸腺苷（ATP）生成。
糖酵解是一种不需要氧气的代谢途径，能够将葡萄糖分解为丙酮酸和乳酸，并生成少量的ATP。这一过程被称为厌氧糖酵解，因为它在缺氧条件下进行。糖酵解对于维持间充质干细胞的自我更新和增殖非常重要，因为干细胞生长需要大量的能量供应。此外，糖酵解还可以产生丙酮酸，可以进一步参与线粒体三羧酸循环。
线粒体是细胞内的一个重要细胞器，负责产生ATP，维持细胞的能量供应。线粒体内的线粒体呼吸链（mitochondrial respiratory chain，MRC）能够通过氧化还原反应从葡萄糖、脂肪酸和氨基酸等物质中释放大量的ATP。线粒体的功能受到细胞内和细胞外环境的影响。在正常细胞中，线粒体的形状、结构和数量可根据能量需要进行调节。
间充质干细胞的线粒体功能在其能量代谢和多向分化中起着重要作用。线粒体功能障碍或线粒体损伤会导致线粒体功能减弱，ATP生成减少，细胞能量供应不足，从而影响干细胞的生物学活性。因此，维持线粒体功能的稳定对于间充质干细胞的功能维持和自我更新非常重要。
除了糖酵解和线粒体呼吸链之外，脂肪酸氧化也是间充质干细胞的一个重要能量代谢途径。脂肪酸氧化是指将脂肪酸分解为丙酮酸，然后进入线粒体三羧酸循环，最终产生ATP。脂肪酸氧化是一种有氧代谢过程，需要氧气的参与。脂肪酸氧化在间充质干细胞的增殖和分化中起着重要作用。
总的来说，间充质干细胞能量代谢是一个复杂的过程，包括糖酵解、线粒体呼吸链和脂肪酸氧化等途径。这些代谢途径相互作用，在维持干细胞的自我更新和增殖的同时，也参与了干细胞的分化和功能维持。了解间充质干细胞的能量代谢与其生物学特性之间的关系，有助于更好地理解和应用干细胞在再生医学和疾病治疗中的潜力。
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间充质干细胞成脂成骨分化实验方法学开发思路和流程
间充质干细胞成脂成骨分化实验方法学开发思路和流程
干细胞是一种具有自我更新能力和多潜能分化的细胞，可以分化成为各种类型的细胞，包括脂肪细胞和骨细胞。间充质干细胞（MSCs）是一种重要的干细胞类型，它们存在于各种组织中，如骨髓、脂肪组织和胎盘组织等。间充质干细胞成脂成骨分化的实验方法学开发，是生物医学研究中一个重要的课题。本文将从方法学开发的思路和流程入手，对间充质干细胞成脂成骨分化实验方法学进行探讨。
一、研究背景
间充质干细胞成脂成骨分化是指间充质干细胞在一定的诱导条件下分化为脂肪细胞或骨细胞的过程，这一过程在细胞生物学和再生医学领域具有重要意义。成脂成骨分化的研究有助于深入了解骨质疏松症、骨折愈合和脂肪代谢等疾病的发病机制，同时也为干细胞治疗提供了理论基础。因此，开发一套可靠的实验方法学对于间充质干细胞成脂成骨分化研究至关重要。 二、方法学开发思路
1.确定分化诱导条件
间充质干细胞在体外培养时，可通过添加不同的生长因子、细胞因子或药物来诱导其分化为脂肪细胞或骨细胞。因此，确定最佳的分化诱导条件是方法学开发的第一步。此过程需要考虑到诱导因子的种类、浓度、培养时间等因素，以及不同来源的间充质干细胞在分化过程中的差异性。
2.确定评价指标
分化过程中，需要通过一系列的生物化学和分子生物学方法来评价间充质干细胞的脂肪细胞或骨细胞特征。这些评价指标包括脂肪细胞的油红O染色、脂肪球形成实验，以及骨细胞的矿化实验、ALP染色等。确定合适的评价指标对于评估分化效果至关重要。
3.确定实验方案
在确定了分化诱导条件和评价指标后，需要制定详细的实验方案。包括细胞的处理方法、诱导条件的优化、实验的时间节点等，以便后续实验的顺利进行。 三、方法学开发流程
1.间充质干细胞的提取和培养
首先需要从适当的组织中分离和提取间充质干细胞，并进行细胞培养。这一步需要注意细胞的纯度和活性，以保证后续实验的准确性。
2.分化诱导实验
人脂肪来源的间充质干细胞的生物学研究
中国药物与临床２００９年３月第９卷第３期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｒｅｍｅｄｉｅｓ＆Ｃｌｉｎｉｃｓ，Ｍａｒｃｈ ２００９，Ｖｏ１．９，Ｎｏ．３
人脂肪来源的间充质干细胞的生物学研究
薛君边云飞郭泽君武卫东 肖传实
【摘要】 目的探索从人脂肪中获取间充质干细胞的方法，通过观察人脂肪来源间充质干细胞（ｈＡＤＡＳ） 的形态学、生长动力学、细胞表面标志，揭示其生物学特性。方法分离培养脂肪间充质干细胞并观察其形态学 变化：四甲基偶氮唑盐（ＭｑＴ）比色法测细胞活性；流式细胞仪测细胞周期和间充质干细胞表面抗原。结果 脂肪干细胞呈成纤维细胞样；ＭＴＩ＇比色法证实其有很强的增殖活性；流式细胞周期显示处于增生活跃期的细胞 占很大比例；间充质干细胞表面抗原ＣＤ２９、ＣＤ４４随着传代表达逐渐增高，不表达内皮细胞标志ＣＤ３１，造血干细 胞标志ＣＤ３４随细胞培养时间延长表达逐渐降低。结论通过酶消化法可从人脂肪中获取间充质干细胞，具有很 强的增殖能力．表达干细胞表面标志。 【关键词】 间质干细胞；组织工程；种子细胞
Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ ａｄｈｅｒｅｎｔ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ＸＵＥ Ｊｕｒｔ，ＢｌＡ Ｎ Ｙｕｎ－ｆｅｉ．ＧＵＯ Ｚｅ ｊｕｎ， Ｕ ｅ －ｄｏ， ＩＡ Ｏｉａｏ Ｃｈｕａｎ－ｓｈｉ．Ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｓｈａｎｘ Ｍｅｄｉｃｏｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｙｕａｎ ０３０００１，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｕｌｃｕｒｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ ａｄｈｅｒｅｎｔ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｉｌｓ（ｈＡＤＡＳ）ｆｒｏｍ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅｓ，ａｎｄ ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ｃｙｔｏｄｙｎａｍｉｃｓ ａｎｄ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ ｏｆ ｈＡＤＡＳ ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｒｅｖｅａｌ ｔｈｅｉｒ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｆｅａｔｕｒｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｈＡＤＡＳ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ，ｃｕｌｔｕｒｅｄ，ａｎｄ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｆｏｒ ｍｏｒ－ ｐｈｏｌｏｇｙ．Ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ａｓｓｅｓｓｅｄ ｂｙ Ｍ ＩＴＩ’ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｈｏｗ ｅｙｔｏｍｅｔｒｙ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｆｏｒ ｃｅｌｌ ｃｙｃｌｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｆｔｅｒ ６ ｈｏｕｒｓ．ｔｈｅ ｐｒｉｍａｒｉｌｙ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｃｅｌｌｓ ａｄｈｅｒｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ＷａⅡ． Ｉ１１ｅ ｃｅｌｌｓ ｓｐｒｅａｄｅｄ ａｎｄ ｂｅｃａｍｅ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ—ｌｉｋｅ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｕｒｅ ｆｏｒ １２ ｈｏｕｒｓ．ＭＴＹ ａｓｓａｙ ｓｈｏｗｅｄ ｈｉｇｈｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｈＡＤＡＳ ｃｅｌｌｓ．Ｆｌｏｗ ｅｙｔｏｍｅｔｒｙ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ：ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｒｋｅｒｓ ｆＣＤ４４，ＣＤ２９１ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｗｉｔｈ ｓｕｃｃｅｓ－ ｓｉｖｅ ｐａｓｓａｇｅｓ；ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｒｋｅｒｓ ＣＤ３ １ ｄｉｄ ｎｏｔ ｃｈａｎｇｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｗｉｔｈ ｓｅｒｉａｌ ｐａｓｓａｇｅ；ｔｈｅ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ— ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍａｒｋｅｒ ＣＤ３４ ｗａｓ ａｔ ｐｅａｋ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｅａｒｌｙ—ｐａｓｓａｇｅ ＡＳＣｓ．ａｌｔｈｏｕｇｈ ｏｎ ｔｈｅ ｄｅｃｌｉｎｅ ｔｈｒｏｕｇｈｏｕｔ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｐｅｒｉｏｄ．ｋｅｐｔ ａｔ ａ ｌｏｗ ｌｅｖｅ１．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ｈＡＤＡＳ ｃａｎ ｂｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ ｂｙ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｅ． ｓｅｎｔｅｄ ａ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ—ｌｉｋｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ．Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｏｓｅ ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｓｔｒｏｎｇｌｙ ａｃｔｉｖｅ．Ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ａｎｔｉｇｅｎｓ ｗｅｒｅ ｆｏｕｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｏｎ ｈＡＤＡＳ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ；Ｔｉｓｓｕｅ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ；Ｓｅｅｄ ｃｅｌｌｓ
脂肪来源间充质干细胞移植对大鼠全层皮肤缺损的修复作用
广东医学２０１４年３月第３５卷第６期 Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｍａｒ．２０１４．Ｖｏ１．３５．Ｎｏ．６ ・８０５・
基础研究
脂肪来源间充质干细胞移植对大鼠全层皮肤
缺损的修复作用 米
孙传伟，陈华德，卞徽宁，郑少逸，刘族安，赖文
广东省人民医院（广东省医学科学院）烧伤科（广州５１００８０）
【摘要】 目的探讨脂肪来源间充质干细胞（ＡＤＳＣｓ）移植在全层皮肤缺损修复中的作用。方法２５只ｓＤ
大鼠制作大鼠背部全层皮肤缺损模型，随机分为３组，分别移植胶原膜（胶原膜组）、ＡＤＳＣｓ＋胶原膜（ＡＤＳＣｓ＋胶
原膜组）后覆盖异体ｓＤ大鼠皮肤及直接以异体ｓＤ大鼠皮肤覆盖（空白对照组）。观察各组创口的愈合速度，并
通过愈合皮肤抗拉力实验、ＨＥ染色、原位杂交的方法检测愈合后皮肤的抗拉性、组织学改变及ＡＤＳＣｓ的表达。
结果ＡＤＳＣｓ及胶原膜对大鼠一般情况无明显影响；ＡＤＳＣｓ十胶原膜组创面愈合率为（９４．２４±３．１３）％，显著高于
空白对照组的（８４．５７±２．４２）％及胶原膜组的（８４．７２±９．７０）％，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；ＡＤＳＣｓ＋胶原膜
组皮肤的最大拉力、弹性位移和拉伸率与空白对照组及胶原膜组比较差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）；ＡＤＳＣｓ＋胶
原膜组皮肤真皮层中存在大量类似于正常皮肤的毛囊结构；在ＡＤＳＣｓ＋胶原膜组愈合创面皮肤组织中可追踪到
雄性大鼠来源细胞的阳性表达。结论ＡＤＳＣｓ能促进大鼠全层皮肤缺损的修复。
【关键词】 脂肪来源间充质千细胞；全层皮肤缺损；创面愈合
Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ａｄｉｐｏｓｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｊ０ｎ ｉｎ ｆｕｌｌ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｒｅｐａｉｒｉｎｇ ｉｎ ｒａｔｓ．
ＳＵＮ Ｃｈｕａｎ—ｗｅｉ，ＣＨＥＮ Ｈｕａ—ｄｅ，ＢＩＡＮ Ｈｕｉ—ｎｉｎｇ，ＺＩｔＥＮＧ Ｓｈａｏ一）， ，Ｌｊｕ Ｚｕ—ａｎ，ＬＡｊ Ｗｅｎ．Ｄｉｖｉｓｉｏｎ ｏｆ Ｂｕｒｎｓ，
脂肪间充质干细胞的免疫学特性及其在组织工程中的应用
・８２・ 安徽医科大学学报Ａｃｔａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌｉｓ Ａｎｈｕｉ ２０１３ Ｊａｎ；４８（１）
◇综 述◇
脂肪问充质干细胞的免疫学特性及其在组织工程中的应用
汪婧综述徐燕审校
摘要脂肪间充质干细胞（ＡＤＳＣｓ）具有多分化潜能，且来源 广泛、分离简单，同时具有低免疫原性，这为异源性组织工程 器官的构建提供了可能。现就ＡＤＳＣｓ的免疫学特性及其在 组织工程中的应用进展作一综述。 关键词脂肪间充质干细胞；免疫学特性；组织工程；异体移 植 中图分类号Ｒ ３１８．０６ 文献标志码Ａ文章编号１０００—１４９２（２０１３）Ｏ１—００８２—０３
间充质干细胞（ａｄｉｐｏｓｅ ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ， ＡＤＳＣｓ）是指一群能够向成骨细胞、软骨细胞、脂肪
细胞、骨髓基质甚至肝细胞和神经细胞等多种细胞
分化的多能干细胞，它可以从多个部位获得，如：骨
髓、脐带血、头皮组织、胎盘和多种胚胎组织。近年
来，由于吸脂手术的推广，脂肪来源的ＡＤＳＣｓ的研
究日益增多。有研究¨ 证实，ＡＤＳＣｓ是存在于脂
肪组织的成体多潜能干细胞，可分化为骨、软骨、心
肌、平滑肌、神经及内皮等多种组织细胞。因其具有
多向分化潜能，且来源广泛、取材方便、损伤小、增殖
迅速、表型稳定，尤其是具有低免疫原性 ，其在
异源性组织工程中的研究已得到人们的广泛关注。
目前，由于异体细胞移植可能产生移植物抗宿
主病，使得干细胞移植、组织工程仅局限于个体化治
疗的范畴，这种个体化治疗限制了组织工程在临床
上的广泛应用。然而，由于ＡＤＳＣｓ具有低免疫原
性，使其有望成为异体来源的种子细胞并应用于组
织工程产品的产业化生产。
１ ＡＤＳＣｓ的分离、培养及分化
以大鼠ＡＤＳＣｓ为例介绍其分离培养和分化如
２０１２—０９—０６接收 作者单位：安徽医科大学口腔医学院，安徽医科大学附属１５腔医院牙 周黏膜科，安徽省Ｅｌ腔疾病研究中心实验室，合肥 ２３０ｏ３２ 作者简介：汪婧，女，硕士研究生； 徐燕，女，教授，硕士生导师，责任作者，Ｅ．ｍａｉｌ：ｙａｎｘｕ０９ ＠１２６．ｃｏｎ 下 Ｊ：常规麻醉大鼠，无菌条件下取出腹股沟区的