倒置荧光显微镜操作说明
显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤) (使用IPP第二部分拍摄图像流程相差观察、荧光观察) 明场观察(拍摄图像流程第三部分BX2-BSW使用观察方法步骤第一部分 1、明场观察方法步骤涉及部件步骤”主开关拨到“I打开电源开关三目观察筒选择杆拨至最内选择目镜观察光路聚光镜选择钮聚光镜选择明场（BF）相差移出光路载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路开始观调节瞳间观察筒瞳间距调节调节屈光目镜屈光度调节环寻找标载物台控制手柄手动调调节光照亮图像采准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。
①聚光镜升高到最高位置聚光镜高度升降旋钮②用10X物镜聚焦至清晰③视场光阑打至最小视场光阑④逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像聚光镜升降旋钮⑤调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心聚光镜中心调节旋钮⑥逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切视场光阑⑦稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可视场光阑2、相差（PH）观察方法步骤步骤涉及部件主开关拨到“I”打开电源开关选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路选择与物镜匹配的相差环聚光镜选择钮进入光路PH对10物镜PH对20物镜PH对40物开始观调节瞳间观察筒瞳间距调调节屈光目镜屈光度调节寻找标载物台控制手手动调调节光照亮图像采3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤涉及部件主开关拨到“I”打开电源开关选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内聚光镜选择明场（BF）聚光镜选择CD+或CD-钮相差环移出光路载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路标本定位调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调焦卤素灯电源调至最暗机身架光强调节按钮打开汞灯电源供电器主开关拨到“I”选择合适的荧光激发块打开光开始观选择合适的物物镜选择按钮选用合适N滤色荧光反射照明器上ND片插槽调节汞灯透镜聚焦旋钮使视场亮度均汞灯透镜聚焦旋钮调节视场光阑和孔径光阑改善反视场光阑/孔径光阑图像采准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。
汞灯供电器主开关：拨到I，待光稳定后进行调节光路选择杆载物台选择蓝色荧光激发块进行调荧光激发块选择按钮节，打开光闸，光路通过载物台控制手柄物镜转入光路，标本聚焦10X物镜选择钮清晰手动调焦调节瞳间距观察筒调节屈光度屈光度调节环取下物镜或使空物镜孔进光路物镜转盘视场光阑杆视场光阑拉出至最小，此时对2中标本表面出现个斑点使两斑点最清晰汞灯透镜聚焦调节旋钮使两斑点重合（先水平后重合）汞灯中心调节旋钮物镜选择按钮物镜转入光路，向对中标本10X视场光阑杆聚焦清晰，视场光阑推进至最大调节视场亮度均匀一致集光透镜聚焦旋钮（亮度最大）对中视场光阑视场光阑拉出至最小调整正多边形至视野中央视场光阑中心调节钮完成高压汞灯对中第二部分使用IPP 拍摄图像流程1. 在桌面点击以下图标打开IPP。
2. 在菜单栏中，（采集）Acquire 菜单下点击（视频/数字图像采集）Video/Digital拍照的对话框。
CCD ，即出现控制，或点击工具栏中Capture3. 有两种拍照界面可选，点击图一Basic Dialog 和图二Advance 即可在两种模式下自由转换（以下操作将主要以图二的对话框为主）。
4. 点击图三More/Less 按钮即可在基本对话框和扩展对话框间转换。
5. 相机有两种状态可选：，一种是预览（Preview）模式，用来观察动态图像，一般在聚焦和确定感兴趣区域时使用；另一种是拍摄（Snap）模式，用来获取图像。
6. 点击预览后，如果显示的图像为完全黑色，最大的可能是光路转换器没有切换到CCD，所以请把光路转换器切换到CCD。
7. 点击预览后，一般会有图像太亮或太暗的情况，这是因为曝光时间不适合造成的，如下面两图所示。
8. 自动曝光：自动曝光可以帮我们找到比较适合的曝光时间，即我们关心的样本看到比较清晰。
当出现一个非常暗或者非常亮的图像时，可以通过以下三种方法之一获得自动曝光时间。
点击自动曝光按钮。
．A．B．先点击Auto Exp Area（自动测光区域），用鼠标在预览图上选定感光区域（或者点击Reset to Full Frame 恢复全图预览），然后点击Calc Auto Exp，就可以根据设定的区域自动计算曝光时间。
C B方式方式C．点击Auto Set，此时软件将先自动计算曝光时间，然后提示选取一个区域做自动白平衡（一般选在图像上最亮白的地方，此部分的详细操作请参考下面的“第12步：自动白平衡”）。
9. 预览时图像覆盖着一层透明膜的效果：在预览图片上点击右键，Transparency 选择OFF可以关闭此功能。
10. 预览图像的直方图实时显示：在预览图像上点击右键，选中Live Histogram 即可显示，此功能可以帮助我们判断图像效果，但波峰在直方图中间部分时效果比较好。
．11. 如果预览图像中有很多红色的条带或比较多的红色点：这是因为我们选中了“饱和提示Saturation Warning”功能，如下图所示，把“饱和提示”功能关闭即可。
12. 自动白平衡：在预览图像上右击鼠标，可以选择自动白平衡（Auto White Balance）,或者点击以下菜单上的“Auto White Balance”，此时可以在预览图像上选定白色区域，然后点击Calculate 按钮即可实现自动白平衡。
（下图中的选项在图像拍摄界面点击More后即可显示）13. 手动调整曝光时间：当使用了自动曝光以后，可以通过手动调整来更加精确的得到更好的图像效果。
．选中“Adjust Exp for Binning”后，可以看到曝光时间会自动调整，此时虽然预览和拍摄曝光时间不同，但是图像效果相同。
14. 预览和拍摄图像条件的锁定：很多状况下，预览和拍摄的图像效果不一致，可以锁定界面中的锁定钮使两种状况一致。
包含以下条件的锁定：A．拍摄区域的锁定：”的按钮，即可看到以下界面SET PVW AREA如果要改变区域，点击“此时，选择Select Area from Live Preview 即可在图像上划定感兴趣的区域；选择Resetarea to full frame 即可重新把感兴趣区域划定为全图。
B．预览和拍摄Binning 锁定:如果标本荧光较弱，可以采用Binning模式增强CCD敏感度。
C．预览和拍摄Gain，Gamma，Offset 的锁定D．当以上条件均已锁定，但色彩仍然不一致时，请到：Camera Configuration —〉Active Camera Settings，在Color Correction 下面，把Preview 和Acquire 都选中或者都不选中。
15. 拍摄动态图像：如果需要连续拍摄动态多幅图像，把拍摄界面转化到基本模式，并点击Image，如下所示：一般情况下，拍摄单张图像时，选取New Image，拍摄连续动态图像时，一般选取Sequence（如果需要直接存储在硬盘中，选取File…Browse…输入图像名称）。
另一种是图一种是以最快的速度连续拍摄，提供两种拍摄动态图像的模式，IPP 像有间隔时间拍摄，A．需要以最快速度拍摄时，请输入拍摄帧数，并选中“Use Minimum possible Interval”，做了此设定后，在点击拍摄时，就会以最快的速度拍摄一定帧数的图像。
B. 需要以一定间隔时间拍摄时，把“Use Minimum possible Interval”去掉，秒，10 比如：在弹出的对话框中输入两幅图像的间隔时间，，Set Time然后点击点击OK 确定。
此时，界面如下图所示。
在拍摄帧数下就会有两幅图像之间间隔时间的显示。
做了如此设定后，再点击拍摄时，就会以10s 的时间间隔拍摄一定帧数的图像。
警告：当不使用动态拍摄模式时，请务必把Image 选项选中“New Image”，否则，每次点击拍摄，都会得到动态图像。
：Camera Configuration属性对话框的使用：16. CCDA．当使用单色CCD 时，有时会看到彩色图像，这是因为在相机确认里选择了彩色滤镜，所以，到Camera Configuration 中，把Color Filter 的选项去掉即可。
B．制冷型CCD 要选择制冷模式，使芯片工作在制冷状态下，所以，到Camera Configuration 中，选中Enable Cooling，如下图所示：当以上条件可以满足一定的试验要求时，可以保存所有的参数设置，这样，17. 并使试验可以直接调出相关试验条件，从而节省时间，以后做类似试验时，过程简化。
，然后输入文件名，选择目录保存即可。
操作：直接点击Save/Save as调出时直接点击标有三个黑点的钮，选择要调出的文件即可。
提供了六个试验条件文件调出的快捷方式，如下图所示：IPP这样调出的文件可以显示在基本模式的简单控制条中，便于试验使用。
)(明场观察使用BX2-BSW拍摄图像流程第三部分DP-BSW软件打开DP控制器。
启动见明场观察部分）调节显微镜。
（①显示预览图象。
②设置曝光时间。
手动曝光模式？③设置曝光时间自动选择测光区域）。
④，1%，0.1%（30% 按下手动控制盒自动对焦红色按键，进行自动聚焦。
软件）（打开BX2-BSW手动曝光模式？自动精细调节曝光时间移动曝光区域，⑤校正曝光。
⑥调节白平衡。
⑦记录图象。
DP进入管理器。
⑧⑨添加注释或图释。
⑩储存图象。
具体的参照图见下页的内容。
．DP-BSW软件：拍照曝光模式预览测光模式（30％/1%/0.1%）。
Leica全自动倒置荧光显微镜DMI6000B操作说明
① ② ③ ④ 明场观察：在BF下，将样品放入载物台上， 选择所需目镜，控制smartmove来调节样品 位置和焦距。
⑤
CTR6000 显微镜控制箱
Ebq 100 荧光控制器 7.荧光光源激发开关 8.“LAMP”灯泡指示灯 9.灯泡使用时间显示
显微镜 电源开关
5 1 2 4 3
1.INT照明强度调节 2. AP孔径光圈大小调节 3.FD市场光圈大小调节 4.TL/IL切换 明场/荧光视野 5.明场/相差 (PH)的切换
Leica全自动倒置荧光显微镜DMI6000B操作说明
旋转控制元件 SmartMove，用来调节焦 距，X,Y轴 1.用以来切换目镜镜头 2.X轴调节,载物台左右移动 3.Y轴调节,载物台前后移动 4.Z轴调节，焦距调节 5/6 粗调焦、细调焦切换
4
2 1 5 3 6
8 7
9
荧光观察：打开ebq100，选 择所需荧光滤光块，打开荧 光挡板，通过smartmove调 节聚焦图像
6.Z轴上下快速调节 6பைடு நூலகம்
1
2 4
3 5 5 5 5
5
5
1.切回镜下视野 2.切回CCD视野 3.切换至另一通道 4.荧光挡板 5.荧光模块或明场 选择 1.表示显微镜属于 明场普通光下 2.目镜镜头显示 3.INT为光照强度， AP孔径光圈，FD市 场光圈 D视野和镜下 视野 5.显示Z轴位置
倒置荧光相差显微镜简明操作规程
倒置荧光相差显微镜简明操作规程
1. 左侧面的固定功能按钮
①TL/IL 反复切换明视场/荧光
②AP孔径光圈（BF模式下的图像反差）
③INT照明强度（明视场/荧光的亮度）
④FD 视野光圈
2. 初始化后的前方显示屏上的图形功能按钮
①显微镜观察方法的状态
②当前使用的物镜倍数
③Σ显微镜总放大倍数
④光线强度 / INT ；AP 孔径光圈 FD 视野光圈
⑤视频/目镜
3. 前方按钮功能
荧光虑块 A 颜色表达蓝
荧光虑块 I3 颜色表达绿
荧光虑块 N21 颜色表达红
SHUTTER 荧光挡板(阻挡或释放荧光)
其它固定功能按键为空
4. 开机
位于显微镜左侧，①为显微镜开关：只使用明场观察时，只打
开此开关即可；②为荧光汞灯开关，需要荧光观察时，两个开关均
需开启。
另需拍照时，请打开电脑。
5. 根据样品标记的荧光素选择相应的滤光片；
6. 放好样品，找到合适的视野进行观察；
7. 双击开启软件
8. 如需拍照点击采图键，
注意：拍照时应将CCD下方的拉杆拉出方可在屏幕上
显示图像
9. 拍照过程中如需白平衡，在空白处，按住鼠标左键画
一个框，即可显示相关信息；
10. 拍照完毕，及时关闭电脑、汞灯及电源，清理试验台；
11. 如需将数据带走，请到办公室取专用U盘拷取，严禁私自用自己的盘拷贝资料。
尼康TE2000-U倒置显微镜使用操作说明
【目的 目的】 目的 了解TE2000-U型倒置显微镜的基本组件、原 理，掌握其基本操作。 【材料 材料】 材料 1．高等动、植物各类组织永久制片； 2．培养皿（瓶）中的活细胞或微生物； 3．口腔上皮细胞的临时装片。
【实验用品 实验用品】 实验用品 1．试剂：10µg/mL罗丹明123的磷酸缓冲液 （PBS）荧光染料。 2 2．器材：倒置显微镜，相差显微镜附件（相差 物镜、转盘聚光器、对中环形光阑和绿色滤色 镜等），微分干涉显微镜附件（起偏镜、检偏 镜和渥拉斯顿棱镜等），荧光显微镜附件（荧 光发射器、激发滤片和阻断滤片等），载玻片， 盖玻片，牙签，滤纸条，擦镜纸，镊子，滴管。
7. 调焦 1）将样品放置载物台中。 2）转动同轴粗微调旋钮，将标本对好焦。
8. 聚光器中心调节
1）确信10X 物镜在光路中。 2）将“视场光阑调节杆”降低直到能从目镜看到视场光 阑像。 3）转动“聚光器调焦钮”升降聚光器，使视场光阑像清 晰地成象在标本面上。 4）转动两个“聚光器中心调节螺钉”，使视场光阑像在 视场中心。 5）更换40X 物镜。 6）调节“视场光阑调节杆”，使视场光阑的象与视场大 致相同。 7）转动两个“聚光器中心调节螺钉”，使视场光阑像在 视场正中。
T-DS 30W透射照明器(霍夫曼观察)
ELWD-S 聚光器
A：调中杆指紧螺钉 B：调中杆 C：转盘
SLWD 聚光器
T-SR矩形载物台 矩形载物台
A：载物环湾 B：载物台Y 轴方向 移动控制旋钮 C：载物台X 轴方向 移动控制旋钮
（二）由TE2000-U，100W 透射照明器， 系统聚光器，以及T-TD 目镜筒D 组成的显 微镜系统。 明视场(BF)镜检 镜检 明视场 关键点： 从光路中卸下其它形式观察需要 的所有光学组件，聚光器调节好（调节 聚焦和对中），转动孔径光阑调节好像 的清晰度。
倒置荧光显微镜2
8. 聚光器中心调节 1）确信10X物镜在光路中。 2）将“视场光阑调节杆”降低直到能从目镜看到视场光 阑像。 3）转动“聚光器调焦钮”升降聚光器，使视场光阑像清 晰地成象在标本面上。 4）转动两个“聚光器中心调节螺钉”，使视场光阑像在 视场中心。 5）更换40X物镜。 6）调节“视场光阑调节杆”，使视场光阑的象与视场大 致相同。 7）转动两个“聚光器中心调节螺钉”，使视场光阑像在 视场正中。
简易操作程序： 倒置显微镜中最常用的观察方法就是相差。由于这种方法不要求染色，是观察活细胞 和微生物的理想方法。在此提供各种聚光器来满足需要，这种方法提供带有自然背景 色的、高对比度的、高清晰度的图像。 1.开机。接连电源。打开镜体下端的电控开关。 2.使用 (1)准备：将待观察对象置于载物台上。旋转三孔转换器，选择较小的物镜。观察，并 调节铰链式双目目镜，舒适为宜。 (2)调节光源：推拉调节镜体下端的亮度调节器至适宜。通过调节聚光镜下面的光栅来 调节光源的大小。 (3)调节像距：转三孔转换器，选择合适倍数的物镜；更换并选择合适的目镜；同时调 节升降， 以消除或减小图像周围的光晕，提高了图像的衬度。 (4)观察：通过目镜进行观察结果；调整载物台，选择观察视野。 3.关机 取下观察对象，推拉光源亮度调节器至最暗。关闭镜体下端的开关，并断开电源。旋 转三孔转换器，使物镜镜片置于载物台下侧，防止灰尘的沉降。
聚光器座的转动 拧松聚光器座旋转指紧螺钉，聚光器座就可 以转动。 此功能主要用于微分干涉显微术时调节偏振 方向。 当用系统聚光器及无起偏器光器转盘位置，为显微操作器或其它 系统留下空间。
故障及对策
维护 1. 镜头的清洁 不要将灰尘、指纹等留在镜头上。镜头、滤色片上的灰尘将影响视场中的图像。 如果镜头变脏，按以下方法进行清洁。 • 将灰尘用软刷刷去，或用纱布轻轻擦掉。 • 如果镜头上有指纹或油脂，可用一块沾有纯酒精（乙醇或甲醇）的柔软清洁的 棉布、镜头纸或纱布擦去。 • 当擦物镜上的浸油时，使用石油醚。如果没有石油醚，请用乙醇。但是，因为 乙醇的清洁效果没有石油醚效果好，需要重复擦表面。（通常清洁镜头要三到四 次。） • 勿用石油醚清洁目镜筒底部的镜头或目镜筒表面。 • 纯酒精和石油醚均为高度易燃品。因此在使用、保管、搬运过程中应格外小心。 操作电源开关或台灯尚热时，勿将它们放在灯泡附近。 • 使用纯酒精时，请遵守厂家提供的使用说明书。
上海理工大学医疗器械与食品学院-OLYMPUS-IX71倒置相差荧光显微镜使用说明
上海理工大学医疗器械与食品学院-O L Y M P U S-I X71倒置相差荧光显微镜使用说明--------------------------------------------------------------------------作者: _____________--------------------------------------------------------------------------日期: _____________OLYMPUS IX71倒置相差荧光显微镜使用说明一、明场方式的使用说明1) 打开明场卤素灯控制器（TH4）电源，“I”为打开，“o”为关闭。
TH4电源开关TH4光强调节旋钮2)调节TH4上的光强调节旋钮，获得合适的光强度。
4) 选择合适的物镜并将聚光镜上的调节环至BF或空档位置。
5) 调节调焦旋钮，获得清楚的明场图像。
6）进行拍照时，要将光路切换到目镜和软件里都可看的位置。
光路切换旋钮当前位置为完全目镜位置，光100%到目镜，软件下看不到；若将旋钮逆时针旋转至最下方时，此时目镜下和软件里都可以看到，拍照时要将光路切换到此位置。
二、相差方式的使用说明1) 选择合适的物镜和聚光镜中的相差环。
聚光镜（5孔位）1号孔位相差环 PHL2号孔位相差环 PH13号孔位相差环 PH2在聚光镜右侧旋转调节相差环，白点处的显示数字即代表相对应的相差环已放入光路4X物镜用PHL10X、20X物镜用PH140X物镜用PH22) 调节调焦旋钮，获得清楚的相差图像。
3) 20X、40X的物镜上有矫正环，根据不同的培养容器需要调节矫正环，在聚焦到相对最清楚后调节矫正环至图像最清晰。
*观察相差时，要使用与相差物镜放大倍数相匹配的相差环板。
三、荧光方式的使用说明1) 打开汞灯光源控制器U-RFL-T 的电源（开关在控制器前面板右下方）“I ”为打开，“o ”为关闭；2s 后“BURNER ON ”指示灯点亮为绿色，荧光光源完全打开。
倒置荧光显微镜X71
倒置荧光显微镜X71仪器名称：奥林巴斯IX71倒置荧光显微镜型号：IX71 1、说明书（多的话单独附件）IX71 产品规格光学系统UIS2光学系统。
观察法荧光（U激励）（B，G激发）荧光荧光（U激励）微分⼲涉相位差简易偏光明场对⽐照明系统透射照明100W卤素灯照明⽩光LED照明EPI照明100W汞灯75W氙⽓灯光源，光导镜筒双⽬宽视场22数场倾⾓30°宽视⾓CT*1摇摆双⽬宽视场22数场倾⾓30°常设三⽬宽视场22场35?85°的倾斜⾓度荧光光源130⽡的卤素灯光导照明100⽡汞脂蛋⽩灯外壳和变压器100⽡汞灯和变压器75 W氙灯外壳和变压器物镜转换器电动六孔物镜转换器（DIC滑块），防⽔结构编码六孔物镜转换器（DIC滑块），防⽔结构荧光照明复眼透镜L形荧光照明L形的设计与可交换FS模块L形的荧光照明器L形的交换FS和AS模块设计荧光照明直板造型设计与视场光阑研究级倒置显微镜1.1 物镜转换器：6孔式物镜转换器，带有简易防⽔装置*1.2 聚焦机构：备有聚焦机构同轴粗、微调旋钮（最⼩微调刻度单位：1µm），⾏程9mm（向上7mm、向下2mm），粗调旋钮扭矩可调，备有上限位装置*1.3 原象光⼝：双层光路设计，共6条射⼊/射出光路，最多可同时接4 路采集原像的图像获取系统，左侧光⼝的原像到机架的距离102mm*1.4 具有中间2级放⼤率转换器：1×/1.6×1.5 透射光照明装置：100W卤素灯透射光照明装置，视场可变光阑可调；外置电源供应器1.6 观察镜筒：双⽬镜筒：瞳距可在50-76mm范围内进⾏调节，视场直径为22*1.7 ⾼精度载物台：⾏程为50 × 50mm；载物台插⼊圆板（外径110mm、内径25mm）* 1.8 万能平场半复消⾊差相差物镜，视场数≥26.54X（N.A.0.13 W.D.17 mm）；10X（N.A.0.3 W.D.10 mm）20X（N.A.0.45 W.D.6.6-7.8 mm）；40X（N.A.0.6 W.D.3.0-4.2 mm）1.9 ⽬镜：⾼眼点⽬镜，10×，视场直径：221.110 反射荧光系统1.10.1 荧光照明装置：备有视场可变光阑，滤光⽚插板*1.10.2 荧光滤⾊镜盒：备有可装⼊6个滤⾊镜⽴体镜套的转盘式滤⾊镜盒，内装光闸*1.10.3 荧光激发块：蓝⾊（B）、绿⾊（G）、紫外（U）1.10.4 荧光光源：100W超⾼压汞灯2 超⾼分辨率制冷彩⾊CCD*2.1 像素：≥1700万像素（最⾼分辨率≥4800 X 3600）*2.2 制冷系统：低于环境温度10度*2.3 测光⽅式：30%、1%平均测光，可达0.1%点测光*2.4 ⽆压缩图像采集速度：≥15 幅/秒（1600 X 1200）2.5 提供2x2、4x4的像素混合模式（binning）2.6 图像传输速度：4秒（最⾼分辨率）2.7 芯⽚规格：1/1.8英⼨彩⾊CCD2.8 ⽩平衡：⾃动/ ⼿动/ 点触式2.9 感光度：可达ISO1600*2.10 具有3CCD模式，更佳的⾊彩还原性3 图像控制分析软件3.1 采集图像：⽀持奥林巴斯多种型号专业CCD，⽀持TWAIN接⼝，界⾯直观，操作容易，使⽤户更加容易的集中精⼒关注⽣物试验过程；3.2 对图像中的直线显⽰线上灰度强度变化，从⽽反映图像中的变化特性；3.3 在图像上添加注释、箭头等功能，可以⽅便的表⽰图像中的重点关注部位；3.4 调节亮度、对⽐度、伽玛值以及灰度显⽰范围，并可以单独调节RGB各通道的亮度，⽅便地对图像添加伪彩⾊、改变⾊彩模式以及⾊阶位数等功能，可以改变图像分辨率、旋转图像等各种操作，⽀持反转、低通、⾼通、锐化等滤镜，使图像关注点和各荧光通道获得最佳的显⽰效果；3.5 对单荧光通道图⽚做⾊彩合成，⽅便显⽰多染标本的图像；*3.6 合成透射光和荧光通道图像，显⽰荧光在细胞上的定位图像；3.7 ⽅便的输⼊硬件信息即可实现添加标尺功能，从⽽显⽰图像的放⼤⽐例关系；3.8 可以做离线⽩平衡、市场平整度以及背景校正等处理，便于后期图像处理；3.9 可以对多幅视野相邻的图像做⼤图拼接，轻松获取⾼分辨率⼤视野图像；*3.10 可以实时对多幅视野相邻的图像做⼤图拼接，实时获取⾼分辨率⼤视野图像；*3.11 可以测量直线长度、曲线长度、矩形⾯积、圆⾯积、周长、⾓度等多个参数，并把测量结果输出到EXCEL，并于后期分析处理。
倒置相差显微镜及荧光显微镜原理、使用与注意事项
倒置相差显微镜及荧光显微镜的使用XXX,YYY,ZZZ(版权所有，仅限个人)1倒置相差显微镜倒置相差显微镜，是将相差显微镜和倒置显微镜相结合的产物，倒置相差显微镜既具有倒置显微镜的倒置观察方式，同时又具有与相差显微镜相一致的成像原理。
因此，研究倒置相差显微镜的工作原理就需分别研究倒置显微镜和相差显微镜的工作原理。
1.1倒置显微镜的工作原理：倒置显微镜组成和普通显微镜一样，主要包括三部分：机械部分、照明部分、光学部分。
其中与普通显微镜有明显区别的是：物镜与照明聚光系统的相对位置。
相比于普通显微镜，倒置显微镜的物镜与照明聚光系统以载物台为轴颠倒位置，物镜在载物台之下，照明系统在在载物台之上。
这样的构造使得照明聚光系统与载物台的有效距离可以显著扩大，便于放置培养皿、细胞培养瓶等较厚的待观察器具，而同时物镜与材料之间的工作距离不必很大。
图1.1倒置显微镜由于倒置显微镜观察的材料一般都是培养的细胞，透明性大，结构对比不明显，故倒置显微镜常配备相差物镜，实际上也就构成了倒置相差显微镜（图1.1）。
1.2相差显微镜的工作原理：1.2.1光学知识镜检时，视场中的样品只有在其透射光的波长（颜色）和振幅（亮度）与周围介质有明显变化时，才能被眼睛所分辨。
照明光线通过无色透明的物体时，透射光的波长和振幅都不发生明显改变，尤其是振幅，几乎无变化。
所以用普通光学显微镜观察时，难以辨清这样物体的结构，必须借助于固定和染色等理化方法，使样品和背景的透射光在波长或振幅上发生变化，即在颜色和亮度上有所差异，以供识别。
一束光线在透过折射率n不同的透明介质后，产生的衍射光和透过的直射光的波长没有明显变化，只是衍射光的振幅稍小于直射光，这也是透明不均质物质产生些许明暗变化的原因，但这一点变化很小，并不能有效分辨。
变化明显的是衍射光相对透射光在相位上有1/4λ的滞后，虽然人眼不能分辨相位的差别，但可以分辨振幅和波长的变化。
相差显微镜就是利用这一点，将相位的差别转变成振幅的变化，也就是将本来均为透明但折射率不同的各个结构显现出明暗差距，从而可以被清楚地分辨。
倒置荧光显微镜操作规程
LEICA DMIRB 倒置荧光显微镜操作规程
一、明场观察
1．把要观察的载玻片固定在载物台上。
2．打开显微镜左侧的电源开关，挡光片往下打。
3．调节聚光镜座至BF位置，荧光转盘调至4位置，物镜棱镜调制BF位置。
4．先用低倍镜进行观察，然后转至高倍镜。
5．观察完毕，取下载玻片，把物镜调至空档处，盖好物镜和目镜防尘盖。
关上电源，盖上显微镜防尘罩。
6．做好使用记录。
二、荧光观察
1．打开荧光观察专用的汞灯光源，预热2～3分钟。
2．先在普通光下观察，对焦，然后将挡光板往上打，将普通光路挡住，转至汞灯光路上。
3．将荧光滑片拉出，调节荧光转盘至所需荧光相应位置。
（1—紫外激发340～380nm；
2—蓝光激发450～490nm；3—绿光激发510～560nm；4—明场）4．观察完毕，关闭汞灯光源。
5．同上。
6．同上。
三、微分干涉（DIC）观察
1．将起偏器（PDL）右移。
2．检查检偏器是否已到位。
3．调节聚光镜座，与物镜倍数相对应。
4．调节物镜棱镜转盘。
A与5×，10×物镜相对应；C与20×，40×物镜相对应。
5．同上。
6．同上。
2005年9月
负责人：林丽贞。
倒置荧光显微镜彼爱姆安全操作及保养规程
倒置荧光显微镜彼爱姆安全操作及保养规程1. 引言本文档旨在介绍倒置荧光显微镜彼爱姆的安全操作和保养规程，以确保设备的正常运行和使用者的安全。
2. 安全操作规程2.1 使用前的准备在使用倒置荧光显微镜彼爱姆之前，必须仔细阅读并理解设备的使用说明和安全注意事项。
确保以下准备工作已经完成： - 确保工作区域清洁整齐，无杂物； - 确保设备连接正常，电源和电缆是否可靠连接； - 检查镜头、滤镜等配件是否安装正确。
2.2 设备操作在操作倒置荧光显微镜彼爱姆时，请参考以下指导：- 调节镜头和照明系统时，避免直接观察强光源，以免损害视力； -使用设备时应保持安静，避免频繁的震动； - 在移动设备时，应先断电并确认设备已经停止运行，以避免可能的损坏或意外。
2.3 使用荧光染料和化学试剂的注意事项使用倒置荧光显微镜彼爱姆时，若涉及荧光染料和化学试剂的使用，请务必注意以下事项：- 阅读并遵守所使用荧光染料和化学试剂的安全操作说明书； - 避免吸入、接触或摄入荧光染料和化学试剂； - 使用荧光染料和化学试剂时，应佩戴防护手套、口罩和防护眼镜等个人防护设备； - 离开实验台时，应将荧光染料和化学试剂妥善存放，避免误触或泄漏。
3. 保养规程为确保倒置荧光显微镜彼爱姆的长期稳定性和高效工作，以下保养规程应被严格遵守：3.1 日常保养 - 使用前后，应清理镜头和物镜，使用干净且柔软的镜头纸或棉纱轻轻擦拭； - 重新组装前，清理和除去使用中的残留样品，避免对设备内部产生积聚和污染； - 将设备置于干燥、通风良好的环境，避免高温、潮湿和尘埃。
3.2 定期保养 - 根据设备说明书的要求，定期更换设备的滤镜和灯泡； - 检查和清洗设备的各个部件，包括对光路系统的校准； - 定期检查电源线和连接线的状态，确保电源供应安全可靠。
4. 紧急事故应急处理在紧急情况下，如设备发生故障或意外事故，请参考以下应急处理方法： - 首先，切断电源并确保设备停止运行； - 在必要时，立即通知经验丰富的维修人员进行维修； - 如可能，将受损设备移至安全区域，以避免进一步损坏。
倒置荧光显微镜 尼康Ti s操作规程
尼康TI-S操作规程眼视光研究室2012-02-29警告和注意1高温警告此标记在透射照明器的顶部及12V100W 灯室上，提醒您注意以下几点：A 灯亮时，灯泡可产生高温高热，灯室在使用过程中及照明刚关闭时非常热，为避免烫伤，请勿在灯亮时触摸灯室，而要在关闭电源30 分钟后方可接触；B为避免火灾，切勿在亮灯或熄灯三十分钟内，在灯室周围放置纤维织品、纸张或易燃物质如汽油、乙醚、稀料或酒精；C在使用时电源底座发热，请不要堵塞电源侧面的通风孔；D更换灯泡前确信灯室已充分冷却。
3 不要弄湿显微镜如果显微镜被弄湿，可能会导致电路短路从而损坏显微镜或发生危险。
如果不小心将液体溅到显微镜上，请立即关闭电源开关(拨至O 侧)并拨掉电源线，然后用一块干布擦干。
如果有液体进到显微镜内，请停止使用并与就近的尼康代理商联系。
4 微弱电磁波本显微镜有微弱的电磁波，如果靠近精密电子仪器使用，其精度有可能受到不良影响。
5 搬运显微镜当移动显微镜时，请不要紧握调焦旋钮、目镜筒、平台、透射照明器等部位，因为这有可能导致部件损坏或脱落。
而要握紧显微镜前、后的底部。
6 小心T-SR 矩型载物台的伸出齿条平台移动时T-SR 矩型载物台的齿条会向外伸出，在调焦或转动物镜转换器时，小心不要被齿面弄伤您的手。
明场显微术操作规程A明场显微术用于观察染色标本和定位样本观察视野；B透明照射器（卤素灯）使用时灯泡可产生高温高热，使用完请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源30 分钟后再盖上防尘罩，防止烧坏显微镜部件和发生火灾8；C聚光器调焦旋钮、聚光器和环形光阑调中螺钉由工程师调整固定好，请不要随意调整，以免造成显微镜使用不正常8，12；D 使用完毕后，请及时登记显微镜使用状态。
注意：流程：-物镜及物镜转换器-荧光滤光块转盘-目镜2 打开电源：A 打开外置电源开关8；B 打开显微镜左侧的透射照明器开关10；C 将显微镜上的亮度调节盘调整到12V100W位置10；3 将滤光片D\NCB推进到光路中，ND根据亮度需要移入和移出光路9；4 将聚光器模块旋转至A位置12；5 将荧光滤光块转盘旋转至无字母标示位置（明场无需使用荧光滤光片）10；6 先用低倍物镜确定观察视野，调节亮度和焦距，找到并观察样本7，10；7 调整目镜筒的屈光度使成像清晰度，调整目镜筒瞳距宽度11；8 通过物镜转换器切换高倍物镜观察细胞，调节亮度、焦距和物镜校正环，找到并观察样本，使显微图像最清晰（切换高倍物镜后光线会减弱）10；9 20倍物镜和40倍物镜带有物镜校正环，当校正环刻度设定值与实际容器底板厚度（细胞培养皿或载玻片的底部）一致时，显微图像为最清晰状态10；10肉眼观察找到需拍照视野后，通过光路转换盘切换光路，打开电脑和软件拍照11；11观察结束时，把显微镜左侧亮度调节旋钮调至最小，依次关闭显微镜左侧的透射照明器开关和外置电源开关，登记显微镜使用情况；12 请勿立即盖上防尘罩，而要在关闭电源30 分钟后再盖上。