超数排卵的作用机理综述1

羔羊超数排卵研究进展

1 超数排卵的作用机理

超数排卵，即指在雌性动物发情周期的适当时间，注射外源激素，从而使血液中促性腺激素浓度升高，使卵巢上更多的卵泡发育并排卵。

自然条件下，雌性动物卵巢中含有大约300，000 个左右的卵泡，但自然情况下仅有1%能发育成熟而排卵，约有99%的卵泡会发生闭锁退化。卵泡是位于卵巢生殖上皮、包裹卵母细胞或卵子的特殊结构。卵泡细胞分为初级卵泡，次级卵泡和成熟卵泡。卵泡细胞从初级卵泡开始到发育为成熟卵泡时要经历三个不同的发育阶段，即征集、选择及优势化阶段。征集阶段是指生长卵泡池中一群小卵泡开始迅速生长，引起此现象发生的主要因素是因为卵泡发育受到激素FSH 的调控。选择阶段是指只有部分被征集的卵泡继续发育，以至最终确立优势卵泡的过程。优势化阶段是指优势卵泡迅速发育而其它同时被征集的卵泡生长和发育受到移植。这主要是因为发育起来的较大的卵泡能够分泌大量的雌二醇和抑制素，然后又可通过负反馈抑制垂体分泌FSH，从而使FSH 浓度降低，使其只够维持较小卵泡发育。而当这些较大的卵泡中有一个或几个发育为优势卵泡时，这个优势卵泡就开始分泌一些抑制因子，来抑制其它小卵泡的发育。在此阶段，卵泡的发育主要受到LH 的调控，且由于这些卵泡内的E2 浓度较高，在与FSH 共同作用下可使得颗粒细胞上的FSH

受体和LH受体增加，从而来维持这些优势卵泡的发育。但LH 的脉冲模式决定了这些优势卵泡最后能否成熟排卵，当LH 的脉冲模式较强时，就使颗粒细胞产生大量的E2 来促使这些大的优势卵泡成熟排卵。若LH 脉冲模式较弱时，颗粒细胞就不能产生足量的E2，也不能使排卵前LH 出现高峰。在下一个发情周期到来之前优势卵泡加速生长，利用了几乎所有的促性腺激素，致使那些小卵泡发生闭锁退化。

家畜在发情期间促黄体素排放频率加快，可使优势卵泡逐渐增加雌二醇的分泌。当优势卵泡成熟时，它所分泌的雌二醇产生正反馈作用导致垂体大量释放促黄体素。促黄体素可使卵母细胞恢复减数分裂，成熟卵泡分泌前列腺素类似物，进而促进卵泡膜细胞释放胶原酶而溶解局部组织出现排卵过程。因此认为，超排的过程就是应用超过体内正常水平的外源性促卵泡激素，使将要转化为闭锁卵泡的有腔卵泡发育成熟而排卵由于在动物的发情周期中常出现2 个或3 个卵泡波，选择恰当的时机通过激素处理对动物进行超排处理，可促使卵巢上更多的卵泡发育。垂体分泌和释放的FSH 和LH 对卵泡的发育和排卵具有重要的调控作用。FSH 不仅可以刺激卵泡的生长，还可刺激颗粒细胞增加FSH 受体数和受体结合力，而且还可刺激颗粒细胞分泌雌激素，并在启动卵泡腔的形成过程中起着重要的作用。而LH正常分泌时也可促进卵泡的发育。因此，卵泡在选择阶段、优势化阶段受到FSH和LH的调控。在发情期，LH释放加快，当LH释放达到高峰时发生排卵。试验证明，动物有腔卵泡闭锁之前，注射FSH 或PMSG，能使大量的卵泡不发生闭锁而正常发育成熟，在排卵之前注射LH来补充内源性LH的不足，可以使多数发育成熟的卵泡同时排卵。

2.羔羊超数排卵的常用方法

超排处理就是降低发育卵泡的闭锁率，增加早期卵泡发育到高级阶段的数量，是一个连续的动态过程，这一过程受中枢神经系统、垂体前叶和卵巢问激素调控。超排处理常见的方法有：1）降低或消除卵巢对促性腺激素释放的负反馈反应，这主要针对FSH，如进行抑制素免疫；2）增加外源激素，提高血液中促性腺激素浓度。生产中较多采用后者，而且常与刺激内源促性腺激素释放的方法结合进行。

羔羊超排方法主要是利用外源促性腺激素(孕激素、促卵泡素和孕马血清等) 刺激卵泡发育,进而获取性成熟前羔羊卵母细胞。目前,羔羊超排方法主要有孕酮+ 促性腺激素和促性腺激素处理两种方法。

1）孕酮+ 促性腺激素方法这种方法是将孕酮以栓剂形式放置阴道内一定时间后再用促性腺激素刺激,然后撤掉孕酮栓,再进行卵母细胞采集。Ledda 等对30～40 d 的羔羊进行激素处理:给羔羊埋栓(栓体积为成年羊的六分之一) 6 d ,撤栓前36 h 一次性分别注射120 IU GnRH 和400 IUPMSG。撤栓24 h 后采卵,每只羔羊平均得到(86.2 ±7. 9) 枚卵母细胞,成熟率为77. 9 %。Ptak 等给1 月龄的羔羊放置孕酮栓8 d ,第5 、6 、7 天每天早晚2 次注射2. 7 mg FSH ,第8 天撤栓采卵,得到约29枚卵母细胞,49. 8 %培养到成熟,囊胚率为22. 9 %。Morton 等通过性别分离的精子与羔羊卵母细胞受精并结合胚胎冷冻方法研究体外胚胎生产时,对羔羊超数排卵采用如下方法:先给3～4 周和6～7 周供体羔羊注射50μg 安息香酸雌二醇,48

h后将二分之一的含有3. 0 mg 的182甲炔诺酮栓埋植10 d ,在埋植第7 天时肌肉注射400 IU PMSG和1 支50

mg 猪促性腺激素(p2FSH) ,2 d 后再肌肉注射1 支40 mg p2FSH ,结果得到2 只羔羊。

2）促性腺激素处理张锁链等(1994) 以FSH或FSH2L H 4 种不同处理方法对29 只68～110 日龄羔山羊进行处理,结果表明采用FSH2L H (肌注)进行处理得到的卵子经体外受精后,其卵裂率明显高于其它方法得到卵子的卵裂率。刘东军等对2～4 月龄的杂种羊,用FSH、FSH + L H(静脉注射) 、FSH + L H(肌注) 3 种方法进行激素处理,结果表明,FSH + L H (肌注) 组效果最好,平均回收到15. 0 枚卵母细胞,体外培养成熟率达76. 5 %。Kelly 等比较了FSH(4 ×40 mg) 分4 次等量(间隔12h) 和1 次(1 ×160 mg) 肌肉注射方法,最后一次注FSH 同时注射eCG 400 IU 。结果表明,FSH 分4 次等量注射效果最好,平均每只供体羔羊得到(88±22. 3) 枚卵母细胞,卵裂率为77. 5 %。Kelly 等对9 周龄的美利奴羔羊采用了类似的超排方法,结果最好的处理组平均每只羔羊得到(162. 3 ±23. 2) 枚卵母细胞,各处理组卵裂率为78. 2 %～93. 7 %。

目前，常采用多种激素方案对幼龄母畜进行处理， Armstrong 采用GnRH、FSH+LH、hCG 三种方法对犊牛和羔羊进行处理，均获得了可用的卵丘细胞-卵母细胞复合体，但FSH+LH 的方法获得的卵丘细胞-卵母细胞复合体数量和囊胚率较另外两种方法高。后来Grazyna Ptak 又采用FSH、FSH+eCG、FSH+eCG+GnRH 对1 月龄左右的羔羊进行处理，结果FSH+eCG 的方法获得的卵丘细胞－卵母细胞复合体的数量最高，然而单独注射FSH 的方法获得的囊胚率却最高。旭日干等对2～3 月龄的羔山羊进行FSH、FSH+LH、eCG 三种不同的方法处理，结果与Armstrong的结论一致，也表明FSH+LH 的方法获得的卵丘细胞-卵母细胞复合体的数量最多，但囊胚率都很低。Kelly等认为对1 月龄左右的羔羊进行激素诱导时采用FSH+ eCG 方法处理最佳，不仅可

获得较多的卵母细胞，而且还可生产出优质的胚胎，囊胚率达到60％，胚胎移植后平均每只羔羊可获得9.0-13.9 个后代。J D. Godkin等采用FSH+Va的方法对羊进行激素处理，结果全反式Va能够提高囊胚率，达到72％，胚胎妊娠率达70％。

3．羔羊超数排卵的影响因素

羔羊的个体状况、年龄对卵泡数量和胚胎生产具有较大的影响。在自然状态下，胎儿卵巢上的有腔卵泡开始出现大约在怀孕晚期。母羊大约在妊娠期的135 天。出生之后有腔卵泡数量随着日龄的增加而增加，于羔羊出生后4～8 周龄达到高峰；以后随着青春期的到来开始减少。旭日干等对羔山羊卵泡发育及卵母细胞体外成熟研究时，发现40－60 日龄的羔羊卵泡数、卵母细胞数都较121－150 日龄多，且前者卵母细胞回收卵率（66％）明显较后者回收卵率（40.8%）高。后有研究者又从羔羊日龄不同卵巢重量存在差异方面进行分析。Grazyna Ptak 报道羔羊从出生到4周龄时卵巢的重量增加了7倍，随后开始下降，到羔羊33周龄时保持相对的稳定，大量的生长卵泡在羔羊出生后2周就可看到，到4-5周龄时卵母细胞数达到高峰，同时伴随着第一次卵泡的闭锁，以后卵泡的数目会逐渐的减少，这就说明羔羊卵巢上卵母细胞数最多的时期是在出生后的几周内。后来Grazyna Ptak 又分别对1，2，3，5，7 月龄的羔羊采用不同的激素处理，结果表明一月龄时卵母细胞数目较高，二月龄次之，三月龄较低，随后四月龄五月龄有所升高，表明羔羊卵巢上卵母细胞数与年龄有着密切的关系。因此为了充分利用羔羊可提供的大量的卵母细胞，在一些研究中常选用4－5周龄左右的羔羊作为试验对象。

生产大量体外胚胎的关键在于能够获得数目较多质量较优的卵泡细胞。而卵泡的发育不仅受外源激素处理类型的影响，而且还因内源性的激素分泌水平不同出现差异，N.C.Rawlings 和A.Jorio 的研究表明，犊牛或羔羊卵泡数量和大小在一定程度上与FSH 的分泌水平有关， FSH 分泌水平高的羔羊卵巢上生长发育的卵泡数较多，且选育后表现出的繁育性能也较好。当羔羊在注射少量的雌激素后，体内的FSH、LH 的分泌水平将上升，这时卵巢上卵泡的数量也明显增加，从而说明激素水平对卵巢反应性起着至关重要的作用；尤其是体内的FSH、LH 分泌水平对卵泡的发育有较大影响。处于不同发育阶段的羔羊，体内激素分泌水平也有着明显的区别，但目前研究结果都证实较高的FSH 水平可促使卵巢上更多的卵泡发育。

4. 重复超数排卵

超数排卵是在母畜发情的适当时期，用外源激素诱导雌性动物，使动物体内的激素达到阈值，从而诱发动物卵巢的大量的将要转化为闭锁卵泡的有腔卵泡发育成熟并排出具有受精能力的卵子的过程。而重复超排就是对同一母畜以一定的时间为间隔进行多次超排，以提高每只供体所获卵母细胞总数，从而提高供体遗传资源的利用效率的方法。在家畜的自然繁殖中，低排卵率、低妊娠率已经成为了制约优良母畜快速繁殖后代，产生经济效益的瓶颈问题。在这种情况下，利用激素诱导母畜进行超数排卵和重复超排成为了提高优良母畜的繁殖力、加速品种改良迅速扩大良种畜群的有效手段。超数排卵和重复超排大大提高了由

母畜获得的卵母细胞数目，为体外胚胎的研究培养和生产提供了大量的材料，使得动物繁殖的大量研究试验成为可能，是当今动物生殖研究领域中获取大量卵子或胚胎的基本方法之一。因此，对于研究、改善家畜超数排卵及重复超排技术，并使之成熟化、稳定化是动物生殖领域的科学研究和畜牧业生产中的一项重要研究课题。

在羔羊的超数排卵和重复超排研究中发现，供体羔羊每次超排处理所获卵母细胞数量会随重复超排次数的增加而逐渐减少。Valasi 等的研究表明对供体羔羊进行重复超排后，所获得的卵母细胞数目与初次超排相比较明显下降，并且，他们认为造成这一结果的主要原因是供体羔羊的卵巢对激素的反应性降低。陈晓勇等对幼龄羔羊进行超排研究，并间隔3周重复超排，结果显示供体羔羊重复超排获得的卵母细胞数目较初次超排明显降低，且差异极显著（ P<0.01）。相较于一次超排来说，重复超排次数增多、间隔变短、外源激素对卵巢的诱导效应减弱，卵巢上发育的卵泡数目和获得的卵母细胞数目减少。对于这些现象，目前的研究认为是由于经过多次激素诱导之后，机体对外源性促性腺激素发生了免疫反应，从而产生激素抗体，使得供体对外源激素的敏感性和反应性降低。除此之外，在重复超排过程中，通过手术法采集卵子或胚胎会因为手术损伤、出血等造成卵巢、输卵管及子宫等相互粘连，在一定程度上也会影响卵母细胞采集效果。可见，改进手术采卵方法、降低手术粘连和对卵巢的损伤程度也有利于提高供体羔羊的重复超排效率。

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牛超数排卵影响因素分析

乔利敏1,2 黄成定2　李向臣1　姚雅馨1,2 关伟军13 马月辉1

(1中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100094　2甘肃农业大学动物科技学院兰州730070)

【摘要】高效、稳定的超数排卵方法是获得充足卵源,充分发挥胚胎移植实际应用效果,扩大优良母畜繁殖速度

的技术支撑和保障。长期以来,对于牛超数排卵影响因素的研究一直是生殖生物学家关注的热门课题之一,因此本

文在查阅大量相关文献资料、总结实验经验和综合分析的基础上,紧密结合胚胎工程研究与应用过程中的实际需

要,就环境条件、个体情况和超排处理方法对超排效果的影响因素等关键技术环节进行了概括性的论述,为建立牛

超数排卵的科学体系奠定基础。

关键词:牛超数排卵;影响因素;科学体系

胚胎移植(E.T)是将一头良种母畜配种后的早期胚胎

取出,移植到另一头同种的、生理状态相同的母畜体内,使之

继续发育成为新个体的方法。超数排卵(超排)则为E.T提

供大量优质胚胎,是E.T的重要环节,只有高效、稳定的超

排方法和技术才能提供充足的卵源。近些年来,牛的胚胎移

植技术日趋成熟,结合超数排卵处理,可以极大地增加优秀

母牛的后代数。在畜牧业发达的国家,胚胎移植已进入商品

化阶段;在我国近几年这项技术也得到迅速发展,在奶牛改

良中发挥了重要的作用〔1〕。目前尽管超排的方法已广泛应

用,但超排产生的胚胎有15%～20%(或更高的比率)不能用

于移植〔2〕,而未经超排处理获得的胚胎几乎都为可移植的有

活力的好胚〔3〕,主要是由于超排产生的卵质量较差造成的。

而且现有的超排方法获卵率和可用的胚胎数(胚胎质量)还

都十分的不稳定,这严重阻碍了该项技术的推广应用,同时

给畜牧的生产管理带来了不便,严重影响胚胎生物工程技术

山羊超数排卵效果影响因素的研究进展

山羊超数排卵　藏　

效果影响因素的研究进展　陈军丁威（江苏农林职业技术学院２１２４００）亓美玉刘玉锋（黑龙江省农科院１５００８６）　

胚胎移植技术是一项复杂的、细致的、完整的系统工　作，由许多环节构成，超数排卵是其中的重要环节之一。能　够为胚胎移植提供大量优质胚胎…。只有高效、稳定的超数　排卵方法和技术才能提供充足的卵源。近些年来．山羊的超　数排卵技术的研究取得了一定的进展，但由于羊个体小．超　数排卵需采用手术法，加之影响超数排卵的因素很多，使山　羊的超数排卵受到了很大限制。因此寻求一种适合各地条　件、超数排卵效果相对稳定的处理程序和方法是我们最为关　注的研究课题。本文就影响山羊超数排卵的诸多因素作如下　综述。　１激素的影响　超数排卵所应用的激素主要以ＦＳＨ或ＰＭＳＧ为主。促性　腺激素的种类不同，超数排卵效果有差异。Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ等　在安哥拉山羊的超数排卵处理中．对ＰＭＳＧ和ＦＳＨ—Ｐ作了比　较，ＦＳＨ—Ｐ的效果（排卵数１６．１±０．８）明显优于ＰＭＳＧ组　（排卵数１０．８＋１．２），用ＦＳＨ处理的４７只供体山羊平均产羔　７．５￣０．６个，也明显超过ＰＭＳＧ处理的２８只供体所获羔羊平　均数（４．８＋０．６个）。Ｋｉｅｓｓｌｉｎｇ等［３１在奶山羊进行了ＦＳＨ和　ＰＭＳＧ超数排卵对比试验；ＦＳＨ超数排卵获得４细胞到１２细　胞期胚胎数为１７（ｎ＝２）枚，明显超过了ＰＭＳＧ处理组获得　的２（ｎ＝２）枚。ＡＰＭＳＧ为ＰＭＳＧ的抗体．可中和ＰＭＳＧ在　动物体内的残留，阻止小卵泡继续生长并促进成熟大卵泡排　卵。Ｇ．Ｍａｒｔｅｍｕｃｃｉ等［４１对绵羊超数排卵使用１０００ＩＵＰＭＳＧ结　合ＡＰＭＳＧ在发情后一定时间使用能提高超数排卵反应及可　移植胚胎的产生。而Ｂｏｌａｎｄ等ＤＩ认为：抗体并没有显著提　高胚胎质量。目前国内外研究者对羊的超数排卵多应用ＦＳＨ　多次注射法。尽管ＦＳＨ的半衰期短，需多次注射、费时费　力，但其超数排卵效果相对稳定，一般不会出现卵巢囊肿和　持续发情等现象。为克服ＦＳＨ多次注射的缺点．有人提出用　聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰ）来延长ＦＳＨ的半衰期。ＰＶＰ是一种　缓释剂，用它溶解ＦＳＨ可延长ＦＳＨ在动物体内的半衰期。　用１５％ＰＶＰ＋ＦＳＨ２００—３００ＩＵ一次注射．超数排卵有效率可达　８０％［６１。王希朝等【　用ＰＶＰ（３００ｇ／Ｌ）溶解ＦＳＨ２５０—３００ＩＵ　一次注射与分次注射生理盐水溶解的ＦＳＨ回收可用胚差异不　显著。　此外，制剂的来源不同．超数排卵效果亦有差异。ＭＰ．　Ｂｏｌａｎｄ等阁研究发现，用Ｏｖａｇｅｎ（羊提纯ＦＳＨ）超数排卵　绵羊所得可移植胚胎比用Ｆｏｌｌｔｒｏｐｉｎ（猪提纯ＦＳＨ）多。Ｋ．　Ｆｅｍｉｅ等阁试验也得出相同结论，证明动物超数排卵用同源　激素比异源激素效果好。包呼格吉乐图等［９１证实．使用加　拿大产ＦＳＨ，黄体数、回收胚胎数及胚胎合格率优于中科院　产ＦＳＨ组。张春等１１ｏ］证实进口的药物超数排卵有效率大于　８０％。而桑润滋等ｌ１１ｊ试验证明．以日本和国产ＦｓＨ超排．　头均获可用胚数差异不显著．分别为１５．６６－＋８．２６和１５．３９￣　６．９１枚。杨蔼云等ｆ　和谭景和等１１３］也认为用国产激素同　样可获得类似国外激素的超数排卵效果．不同厂家不同批次　间ＦＳＨ超数排卵效果无显著差异。并且李键等１１４１试验表　明，使用国产和进Ｅｌ激素ＦＳＨ，平均获得可用胚胎数量差异　显著，分别为１５．９４￣８．３３和１５．１５＋＿５．０３枚，国产组显著高于　进口激素组。　山羊超数排卵后是否注射促排药物目前看法不一　杨永　林等旧和仲跻峰等　认为，供体发情后注射促排药物可　使卵巢上未排卵的卵泡数明显减少，可用胚数有增加趋势。　而王光亚等　则认为，家畜垂体中Ｆ　与ＬＨ的含量比例　２００８．５口叵置匝墨囤

肉羊超数排卵时未受精卵多的原因及改进后的效果观察

郭尚军　

（辽宁省建平县小塘动物卫生监督所１２２４０２）　

中图分类号：￥８２６．９　１　文献标识码：Ａ　文章编号：１００５—２７３９（２０１２）０４—００２６—０２　

超数排卵是肉羊胚胎移植中的重要环节，　

卵子是否受精关系到整个胚胎移植的成败。　

笔者在多年的肉羊胚胎移植工作中，对造成　

未受精卵的原因及控制措施进行了探讨。　１　未受精卵多的原因　

１．１未能适时配种　

发情鉴定不准确未能及时配种错过最佳　

配种时机；试情公羊性欲低造成试情不准　确；试情场地窄小，羊群拥挤造成试情公羊　

乱爬跨造成发情判断错误。　

１．２有效精子量不足　精液稀薄，有效精子数量不够。精子活　

力差，死精多。人工输精时输精量不够。　

１．３应激反应　激烈抓捕供体母羊，使供体母羊机体处　

于紧张状态。输精操作粗暴，阴道损伤。这　

些应激刺激都会影响精、卵运行。　

１．４药物作用　

供体母羊在配种时使用大环内酯类药物　会影响卵子受精（子宫平滑肌出现异常）。　

２控制措施　

２．１　加强对试情公羊的饲养管理与调教，确　

保试情准确　试情公羊体力消耗很大，要确保对其蛋　

白质和能量饲料的供给。加大试情公羊的比　

例，２０只母羊配备１只公羊。试情场地要宽　

收稿日期：２０１２—０５—０２　Ｅ—ｍａｉｌ：ｇｕｏｊｉａｙａｏｌＯ１５＠ｑｑ．ｏｏｍ　

一２６一　敞、安静，试情人员要对发情母羊判断准　

确，确保对供体发情母羊适时配种。增加试　

情次数，由原来的１２　ｈ试情１次，即早、晚　

试情，改为每６　ｈ试情１次。　２．２保证有效精子数量和精液质量达到受精　

要求　

加强种公羊的运动，每天应不少于　

５　ｋｍ，应采取慢一快一慢的方式运动，保证　种公羊有充足旺盛精力参加配种。　

增加人工输精量，由通常的０．１　ｍＬ，增　

加到０．３～０．４　ｍＬ。增加输精配种次数，根　

据种公羊数量，第１次配种应以本交为好。　由原来的１２　ｈｌｌ精配种１次，结合试情改为　

母羊多排卵是什么如何让母羊多排卵

母羊多排卵是什么如何让母羊多排卵？

母羊多排卵是进行胚胎移植时对供体母羊首先必不可少的措施。也是增加母羊产羔数、提高繁殖力的重要措施。我们一起了解下母羊多排卵是什么？如何让母羊多排卵吧！

母羊多排卵是什么？

母羊多排卵，就是在母羊发情周期的适当时间，注射以促性腺激素，使卵巢中比一般情况下有较多的卵泡发育并排卵。

母羊的多排卵处理有两种情况：一种是为了提高产仔数。在处理后，经过配种，使母羊正常妊娠，使母羊由不孕变有孕，由产单羔变产双羔或三羔等。在这种情况下，母羊排卵数以3―4个为宜。

另一种情况是结合胚胎移植进行。在这种情况下，母羊排卵数以10―20个为宜。

如何让母羊多排卵？

1.选好供体母羊应选择健康无病，生长发育好，生殖器官发育正常，年龄在三岁以上，不要超过七岁的，有专门生产性能的母羊作供体羊。并为供体羊提供好的饲养管理条件，以发挥供体母羊增排的作用。

2.注射生殖激素

由于超数排卵的处理，通常是使周期性发情的母羊的卵巢机能进一步增强，更大程度地提高其活性，不断要引起发情排卵，而且是多排卵。

因此，在处理方法上，既要注射促卵泡成熟的激素；又要注射促进排卵的激素。被选母羊在预定发情期到来之前4天，即发情周期的第12―13天，肌肉注射（或皮下注射）孕马血清促性腺激素750―1000单位，出现发情后或配种当日，肌肉注射或静脉注射绒毛膜促性腺激素500―750单位。当实际应用这一方法时，应先对小部分母羊进行鉴定性试验，根据结果再对大群母羊进行处理。

3.取卵应结合母羊的胚胎移植进行

我们要了解母羊多排卵是什么，如何让母羊多排卵，提高母羊排卵量，增加繁育。

小鼠超数排卵的实验方法

新教参中宜介绍“假减数分裂”

什么叫“假减数分裂”呢?以下就以雄蜂产生精子

的过程为例给大家介绍一下。蜜蜂群体由蜂王、雄蜂和

工蜂组成,其中蜂王和工蜂是由受精卵发育而来的,雄

蜂是由未受精卵发育而来的。蜂王和工蜂是二倍体(2n=32),雄蜂是单倍体(n=16)。

雄蜂的假减数分裂过程雄蜂在产生精子的过程中,它的精母细胞进行的是1种特殊形式的减数分裂。在减数第1次分裂中,染

色体数目并没有变化,只是细胞质分成大小不等的两

部分。大的那部分含有完整的细胞核,小的那部分只是

一团细胞质,一段时间后将退化消失。减数第2次分

裂,则是1次普通的有丝分裂,在含有细胞核的那团细

胞质中,成对的染色单体相互分开,而细胞质

则进行不均等的分裂,含细胞质多的那部分

(内含16个染色体)进一步发育成精子,含细胞质少的那部分(也含16个染色体)则逐步退

化。雄蜂的1个精母细胞,通过这种减数分裂,只产生1个精子,精母细胞和精子都是单倍体

细胞。这种特殊的减数分裂称为“假减数分裂”。

陈　维(连云港市东方中学江苏连云港222042)　(BH)　

小鼠超数排卵的实验方法

随着基因工程、发育生物学的发展,超数排卵技术

应用于生物学的研究和生产养殖中,如何让这些应用

性的实验充实教学内容、培养学生的实验动手能力,是

值得探讨的问题。小鼠繁殖快、不受季节影响,是现代

生物学中最好的实验材料,现将实验方法简述如下:

1　实验材料　材料:5～6周龄的♀鼠。器具:解剖镜、

解剖针、培养皿、剪刀、镊子和注射器。药品:孕马激素、

HCG(人用绒毛膜促性腺激素)、生理盐水。

2　实验方法　选取5～6周龄的健康♀鼠,在下午4～

5点时,每只小鼠注射1mL孕马激素(5单位󰃗mL),48

h后每只小鼠再注射HCG1mL(5单位󰃗mL),然后放

入󰂎鼠与之交配,雌雄比例♀2∶󰂎1。在15～18h后取

卵,断颈处死小鼠,剪开腹腔,掀开内脏,暴露出子宫,剪取宫颈和卵巢之间的输卵管后,放在盛有生理盐水

育麟方改善老龄雌性小鼠超促排卵作用的机制研究

马景;张驰;章勤;何嘉琳;刘晓昱;缪晨韵

【摘要】[目的]观察育麟方对老龄导致卵巢储备功能下降(diminished ovarian

reserve,DOR)小鼠卵母细胞数量与体外受精率的影响.[方法]将70只6～7月龄的C57BL/6J雌性小鼠随机分为育麟方高剂量组、育麟方中剂量组、育麟方低剂量组、脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)组和老龄对照组;另外14只C57BL/6J性成熟雌性小鼠作为青年对照组.育麟方高、中、低剂量组分别用25.0g/kg·d、12.0g/kg·d、6.0g/kg·d育麟方浓缩液灌胃,DHEA组用10.2mg/kg·d的DHEA灌胃,青年对照组和老龄对照组每日均采用蒸馏水0.2mL/10g灌胃,共用药40d.用药第38天开始腹腔序贯注射孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)10U、人绒毛膜促性腺激素(human choionic gonadotophin,HCG)10U行控制性超促排卵,每组选择7只小鼠收集并比较卵母细胞数量;余下7只与C57BL/6J青年雄性小鼠行体外受精(in

vitro fertilization,IVF),观察体外受精率;收集各组小鼠卵巢组织,并采用Western

blot检测β-catenin、Wnt4蛋白表达.[结果]与青年对照组小鼠比较,老龄对照组小鼠卵巢指数、卵母细胞数量和成熟卵率显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01),受精率显著下降(P<0.01).与老龄对照组比较,育麟方高剂量组、DHEA组小鼠卵巢指数明显升高(P<0.01),且育麟方高剂量组高于DEHA组(P<0.01);与老龄对照组比较,育麟方高剂量组、DHEA组卵母细胞数显著上升(P<0.01),且育麟方高剂量组高于DHEA组(P<0.05);育麟方高剂量组小鼠卵母细胞成熟卵率高于老龄对照组(P<0.05).[结论]高剂量育麟方可以改善老龄所致的卵巢指数下降、增加卵母细胞数量和成熟卵率,从而提高体外受精率. 【期刊名称】《浙江中医药大学学报》

【同期发情与超数排卵的区别及联系】

第 1 页共 4 页【同期发情与超数排卵的区别及联系】

1 发情和排卵的调节及控制原理发情和排卵主要受神经内分泌和生殖激素的共同作用调节。当母畜生长发育到初情期时，下丘脑的某些神经细胞所分泌的促性腺激素释放激素可促使脑垂体前叶分泌促性腺激素,包括促卵泡素和促黄体素。其中促卵泡素可促使卵巢中的卵泡发育并分泌雌激素，引起母畜一系列的发情表现和生殖器官的相应变化。同时，雌激素的分泌导致垂体分泌促黄体素的高峰，进而引起排卵，并在排卵的卵泡内形成黄体。此时，黄体分泌孕酮；孕酮的反馈作用抑制垂体分泌促性腺激素，同时也抑制了卵泡发育和发情。如母畜未妊娠，则经过一段时间后由子宫产生的前列腺素，可促使黄体迅速退化，从而使体内孕酮量下降。此时垂体因失去了孕酮的抑制作用而又开始分泌促性腺激素,再次促使卵泡发育,引起发情和排卵。当母畜在发情期间经配种而受胎时，则前列腺素促使黄体退化的作用受到抑制，因此卵巢中的黄体不消失，而转变为妊娠黄体，一般继续存在到妊娠后期。 2

同期发情的理论依据在群体中，母畜个体所处的发情周期阶段是随机的。由于黄体期的时间占了整个发情周期的大部分时间（70%左右），即一群母畜中处于黄体期的个体数占了第 2 页共 4 页大多数。因此，控制个体母畜黄体的消长是控制群体母畜同期发情的关键。同期发情的实质就是利用某些激素人为地控制并调整一群母畜发情周期的进程，使之在预定的时间内集中发情和排卵。实践中常用前列腺素来提前消除黄体或用孕激素类药物来制造一个人为延长的黄体期以实现群体母畜发情的同期化。 3 超数排卵的理论依据在自然状态下，动物卵巢上约有99%的有腔卵泡发生闭锁而退化，只有1%的卵泡能发育成熟而排卵。在每次发情期之前优势卵泡加速生长，其余小的有腔卵泡发生闭锁退化。超排的过程就是应用超过体内正常水平的外源性促性腺激素，使将要转化为闭锁卵泡的有腔卵泡发育成熟，从而使卵巢比自然发情时有更多的卵泡发育并排卵。 4 同期发情与超数排卵的区别及联系 4.1 同期发情与超数排卵的区别所用的激素不同：应用于同期发情的药物根据其性质主要可分作两类：① 抑制卵泡发育的制剂，如孕酮、甲孕酮等。它们能够抑制垂体促性腺激素的分泌，延长黄体期。② 溶解黄体的制剂，如PGF2α、氯前列烯醇等，它们具有明显的溶解黄体作用，从而缩短黄体期。超排处理的试剂通常是刺激卵泡发育或促进排卵的促性腺激素类药物，如FSH、PMSG、LH、HCG等。处理时期不同：同期发情处理的时期理论上可以在发情周期的任何阶段。但其中前列腺素法有一定缺点，就是有些母畜不能同期发情，原因是前第 3 页共 4 页列腺素只对功能性黄体而不是发情后4～5 d的新生黄体起溶解作用，所以处理后必须间隔一定时间后再用药一次，才能使群体发情达到高度同期化。超排处理时期应选择在发情周期的后期，即黄体消退时期。此时卵巢正处于由黄体期向卵泡开始发育过渡的时期。目的不同：通过同期发情处理可以节省发情鉴定的劳力，使人工授精和胚胎移植时间相同，使母畜集中妊娠和产仔，利于集约经营。对母畜超排处理，利于获得更多早期胚胎进行胚胎移植；自然繁殖情况下，经控制排卵来提高母畜的产仔数，使其达到产多胎的目的。 4.2 同期发情与超数排卵的联系同期发情和超排都是胚胎移植技术中的关键环节。在使用同期发情药物的同时，如果配合使用促性腺激素，可以增强发情同期化和提高发情率，并促使卵泡更好地成熟和排卵。在自然情况下，母畜的发情周期长度并非恒定不变，不但个体之间有差异，而且同一个体各次发情周期的时期也不一致，所以在发情周期的后期用药物作超排处理，不一定能和卵巢机能的转变阶段相吻合。用药物处理的时间如果是在黄体尚未临近消退的阶段，或者是在黄体已经消退、卵泡已明显发育并开始出现发情时，由于注射促性腺激素作超排处理的时间与卵巢机能发育的步调不相一致，效果往往不佳。在动物胚胎移植技术中往往采用同期排卵的方法，该方法是结合同期发情和排卵控制，使母畜于同一段时间内发情，第 4 页共 4 页在发情时期的卵泡发育过程中，又促使发育的卵泡于同一段短时间内排卵，可大为提高超排的效率和受胎率。

动物超数排卵影响因素的分析与总结

畜牧兽医杂志　第２５卷　第４期　５１　

动物超数排卵影响因素的分析与总结　

陈映花，刘岐　（山西农业大学，山西太谷０３０８０１）　摘　要：本文就多年来关于影响动物超数排卵效果的因素作了全面性的概括和总结，并且对这些因　素进行了详细地比较与分析。　关键词：动物；超数排卵；影响因素　中图分类号：￥８１４．４　文献标识码：Ａ　文章编号：１００４—６７０４（２００６）０４—００５１—０３　

Ａｎａｌｙｓｉｓ　ａｎｄ　Ｓｕｍｍａｒｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｆａｃｔｏｒｓ　Ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ　Ｓｕｐｅｒ０Ｖｕｌａｔｉ０ｎ　ｏｎ　Ａｎｉｍａｌｓ　ＣＨＥＮ　Ｙｉｎｇ—ｈｕａ，ＬＩＵ　Ｑｉ　（Ｓｈａｎｘｉ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｔ　Ｔａｉｇｕ　Ｓｈａｎｘｉ　０３０８０１　ｔＣｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓ　ａｒｔｉｃｌｅ　ｓｕｍｍａｒｉｚｅｓ　ｏｖｅｒａｌｌ　ｔｈｅ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ　ｓｕｐｅｒｏｖｕｌａｔｉｏｎｇ　ｏｎ　ａｎｉｍａｌｓ　ｉｎ　ｍａｎｙ　ｙｅａｒｓ．Ｂｅｓｉｄｅｓ，ｉｔ　ａｌｓｏ　ｍａｋｅｓ　ｄｅｔａｉｌｅｄ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ａｎｉｍａｌｓ；ＳｕｐｅｒｏＶｕｌａｔｉｏｎ；Ｆａｃｔｏｒｓ　

１什么是超数排卵　为了获得更多的胚胎，在母畜发情周期的适当时　期，通过注射不同的促性腺激素，刺激暂时处于休止　状态的卵母细胞进入成熟发育期，成熟后排放到输卵　管，由此可以获得比自然排卵情况下多的多的卵母细　胞或胚胎，这一过程就称为超数排卵，简称“超排”。　２超数排卵的机理　超排的机理就是利用动物发情周期的一个阶段，　通过外源激素处理，提高血液中促性腺激素浓度，降　低发育卵泡的闭锁率，增加早期卵泡发育到高级阶段　卵的数量。　３影响超数排卵效果的因素　３．１动物因素　３．１．１　品种不同品种动物对超数排卵的反应有所　不同。李树静等的超排结果表明，海福特牛超数排卵　效果明显好于安格斯、西门塔尔和夏洛来。许斌等人　的实验表明特克塞尔羊的超排效果优于萨福克羊。　３．１．２年龄动物年龄对其超排效果有重要的影　响。苏和等人的超排试验表明，育成羊平均获卵数　高于老龄羊。适龄羊超排效果最佳，平均获卵和可　用胚胎数均显著高于育成和老龄羊组。　３．１．３胎次马保华等报道，奶山羊平均超排卵数　