鱼类细菌性败血症疫苗的应用
白鲢出血病的治疗方法
白鲢出血病的治疗方法
白鲢出血病是由一种病毒引起的鱼类疾病，目前还没有特效药物可以直接治疗该疾病。因此，治疗方法主要包括以下几个方面：
1. 加强饲养管理：提供优质饲料，保持水质清洁，控制水温，避免过度密度饲养和过度捕捞，增强鱼群的免疫力。
2. 细菌感染控制：由于白鲢出血病容易导致细菌感染，可以使用抗生素来控制细菌感染，减轻疾病的严重程度。
3. 病鱼隔离：及时发现病鱼，并把它们与健康鱼分开，以避免疾病的传播。
4. 免疫增强：可以通过注射疫苗或者口服疫苗来增强鱼群的免疫力，减少白鲢出血病的发生。
需要注意的是，白鲢出血病是一种病毒性疾病，目前还没有彻底根治的方法，因此预防控制措施的实施非常重要。及时发现病情，采取有效的防治措施，可以减少这种疾病对白鲢鱼群的危害。同时，定期进行水质监测和病害监测，及时处理异常情况，也是有效预防出血病的手段。
欧洲鳗鱼败血症症状及防治方法
欧洲鳗鱼败血症症状及防治方法
欧鳗败血症主要危害养殖中的黑仔及幼鳗，是近年来我国欧鳗养殖过程中新发现的一种细菌病。下面介绍一下欧洲鳗鱼败血症症状及防治方法，供养殖者参考。
一、欧鳗败血症的症状
患病鳗体弱，缓游于池角水面或水流平稳处，部分病鳗喜吊挂于池内桩柱或栖息台。鳃盖、臀鳍及整个腹部皮肤充血、水肿，鳃丝水肿、失血，腹部膨胀，肛门红肿突出。
剖解可见，病鳗腹腔积水，肝脏呈苍白色，胆囊肿大，肾脏肿大呈棕褐色，消化道充血、无食物。从病鳗的腹腔积水。肝脏、肾脏中均能分离到温和气单胞菌。
流行季节为夏季高温期。感染率在10％以上，病鳗的死亡率达80％～90％。
二、欧鳗败血症的治疗方法
1、全池泼酒氟哌酸（用酸或碱溶液助溶），使池水浓度为6～10毫克/千克，连续处理2～3天。
2、全池泼酒庆大霉素，剂量为每立方米水体100万～200万国际单位，连用2～3天。
3、全池泼酒含氯消毒剂，使池水有效氯浓度达0.2～0.3毫克/千克，连用2～3天。
4、全池泼酒有机碘（如宝碘、龙碘等），使池水浓度为2～3毫克/千克，连用3天。于外消毒的同时，每月在饵料中添加维生素c及敏感抗生素，连喂7～10天。
三、欧鳗败血症的预防方法
1、高温季节尤其要保持池水及池底清洁，定期（约5天1次）使用消毒剂，以降低池水中的病原菌。
2、高温季节定期投喂新霉素、氟哌酸、庆大霉素及菌毒清等敏感抗菌药。
3、流行高峰期增加维生素c的添加量。
鱼细菌性败血症怎么治？能治好吗？.doc
鱼细菌性败血症怎么治？能治好吗？
概述：鱼一旦患上细菌性败血症，鱼体病变症状比较明显。对于患鱼在治疗上，应遵循外用泼洒和内服治疗药物两种方式相结合的方法，来进行治疗，方可更好的达到里表兼治的目的。
鱼细菌性败血症怎么治?
1、先检查鱼是否患寄生虫病，采用肉眼观察和显微镜检查鱼的体表、鳃、肠道等部位，然后对症下药杀灭寄生虫，用杀虫类药物(速效杀虫灵、菌毒杀等)全池泼洒。
2、杀虫后停食1-2天，用抗菌类药物(鱼病灵、内服康、四病灵等)等制成药饵，让鱼内服，5--7天为一疗程。药饵的制作：先用面粉制成面糊，准确估计池塘中治疗时的载鱼量，按所用药物的剂量称取后拌和成“药糊”，再拌和饵料、晾于(要避免阳光直射)后喂鱼。治疗鲤、鲫用“药糊”拌豆饼、菜饼等饲料制成沉性药饵投喂在食台上;治疗草鱼、鳊鱼用“药糊”粘在浮萍或水草上投喂在草架内;治疗鲢、鳙鱼用“药糊”拌麸皮等比重轻的饲料，直接撒于水面。病情严重的塘口，将上述三种药饵同时投喂。
3、药饵投喂一个疗程后，对水体(因鱼的粪便中带有致病菌)进行一次消毒，可用0.5ppm三氯异氰尿酸或每亩水深1米，用生石灰10公斤全池泼洒。
鱼细菌性败血症能治好吗?
该病是可以治好的。
特别是症状较轻，处于发病初期的病鱼更易治愈。而病情严重的患鱼，也会症状有所好转。
治疗鱼细菌性败血症要注意什么?
注意要点：
1、在治疗细菌性败血症鱼病的同时，要兼顾其它并发症(肠炎、烂鳃、赤皮等)的治疗。
2、全池泼洒的药，要准确测量水深，计算出水体总体积。
3、用药后要注意巡塘，防止用药后水中浮游生物大量死亡，造成水质恶化，溶氧降低，引起鱼类浮头和泛塘。
浅谈淡水鱼养殖暴发性出血病的防治
罗 定 市 广 播 电 视 大 学
毕
业
论
文
题 目：浅谈淡水鱼养殖暴发性出血病的防治
专 业：畜牧兽医
年 级：2012秋
姓 名：黄家乐
学 号：
指导老师：陈团
成 绩： 浅谈淡水鱼养殖暴发性出血病的防治
罗定电大2012秋畜牧兽医班 黄家乐
自从年迈的父亲叫我接管十五亩鱼塘以来，我就知道责任重大，父亲虽然不是大富大贵，最起码靠自己的劳动所得支撑起一家七口人的所有费用和开支。接过父亲的鱼塘，我一边参加水产讲习班，畜牧兽医班，一边请教父亲，目的就是超父亲所短，见自己所长，继承产业的同时将其做好做大。
说起淡水鱼养殖，包括草鱼（草鲩）、鳙鱼（大头鱼）、鲢鱼（扁鱼）、青鱼（黑鲩）、鲤鱼、鲮鱼、罗非鱼„„我国大约有30种，其中四大家鱼（前四种）是最为常见的淡水鱼养殖而且都是混养。我采取的是珠江三角洲养殖模式：塘基一部分养猪（也可以养鸭）粪便作为四大家鱼的饲料，猪尿另外排出一个大坑储存起来作为果树的肥料；另一部分种经济作物，如番石榴和辣椒，塘边兼种一些番薯和皇竹草，这些既可以是鱼的草料也可以是猪的青料。这种模式有利也有弊，利就是多方面发展，多种收益，动物和植物相互得益；弊就是鱼塘很容易滋生细菌，鱼容易感染病毒，就以鱼的暴发性出血为例。
鱼类暴发性出血病（细菌性败血症）是近几年来新出现的流行病，无论是池塘、湖泊、水库都有发生，流行地区广、季节长，发病死亡率高，是淡水养殖业危害最为严重的病害之一。每年的高温季节（7、8、9月）是暴发性出血病的发病高峰期，一般由嗜水气单胞菌感染引起，该季节鱼体处于快速生长时期，密度大，吃料多，加上水温升高，容易使溶氧降低，氨氮增加，形成亚硝酸盐中毒造成体质下降。从2月底至11月份，尤以水温为28℃左右发病最为严重。危害的淡水鱼类有鲫、鳊、鲢、鳙、鲤、草鱼等，患病率为60%以上，死亡率为10%～80%。
大黄侧柏叶合剂对淡水鱼类细菌性败血症的防治试验
表３ 反应时间对ＤＭＳＰ产率的影响
由表３可以看ｍ，反应时间对产率影响较大，随着反应 时间的延长，ＤＭＳＰ产率增加，但超过１０ ｈ后，产率增加缓 慢，选择反应时间为１０ ｈ，此时ＤＭＳＰ产率为７２％。 ３结论 ３．１ 以二甲基硫醚和３一氯丙酸为原料合成ＤＭＳＰ，在优化 反应条件下。ＤＭＳＰ的产率达到了７２％，纯度达到了９６％．． ３．２ 该反应具有操作简单、反应时间短、反应条件温和、收 率高、纯度高等优点。 ２００６年第６期霹 瓣 ｜＿ 考文献： ］Ｒｅｅｄ Ｒ Ｈ．Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ａｎｄ ｏｓｍｓｔｉｃ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｄｉｍｅｔｈ－ ｙｌ ｓｕｌｐｈｏｎｉ（）ｐｒ。ｐｉｏｎａｔｅ ｉｎ ｍａｒｉｎｅ ｍｉｃｒｏａｇｌａｅ［Ｊ］．Ｍａｒｉｎｅ Ｅｏｌｏｇｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９８３，（４）：１７３—１８１． ］１）ｉｃｋｏｎ Ｄ Ｍ．Ｏｓｍｏｔｉｃ ａｄｊｕｓｔｍｅｎｔ ｉｎ ｍａｒｉｎｅ ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ ａｇｌａｅ：ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｉｎｏｒｇａｎｉｃｉｏｎｓ。ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ ａｍｍｏｎｉｕｍ，ｔｏｒｉ－ ａｒｙ ｓｕｌｆｏｎｉｕｍ ａｎｄ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ ｓｏｌｕｔｅ［Ｊ］．Ｎｅｗ Ｐｈｙｔｏｌｏｇｙ， １９８７，１０６：６５７—６６６． ］Ｄｉｇｅｌｉｎ Ｊ Ｖａｎ．Ｂ 一３一Ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆ０ｎｉ０ｐｒ０ｐｉ０ｎａｔｅ，ｐｒｏｌｉｎ ａｎｄ ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ ａｍｍｏｎｉｕｍ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｉｎ Ｓｐａｒｔｉｎａ ａｔｇｌｉｃａ ｉｎ ｒ ｌａｔｉｏｎ ｔｏ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈｌｏｒｄｅ ｎｉｔｒｏｈｅｎ ａｎｄ ｓｕｌｆｕｒ［Ｊ］．Ｎｅｗ Ｐｈｙ— ｔｏｌｏｇｙ，１９８６，１０３：５７３—５８６． ］中岛谦二．一种新的淡水鱼类摄食引诱剂一二甲基一Ｂ 一丙酸塞亭［Ｊ］．国外水产，２００２，（４）：２３—２５． ］杨官娥，魏文珑．甜菜碱合成新工艺的研究［Ｊ］．中国药 物化学杂志，２００１，（３）：１６０—１６１． ｌ 大黄侧柏叶合剂对淡水鱼类细菌性败血症的防治试验 陆广富 ，金礼琴 ，刘 波 （１．江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州２２５３００；２．江苏倍康药业有限公司；３．中国水产科学研究院淡水渔业研究中心） 中图分类号：￥８５３．７４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００—６３５４（２００６）０６—００３９—０２ 细菌性败血症是淡水鱼类常见病之一。用抗生素和化 学药物治疗淡水鱼类细菌性败血症虽然疗效确切，但存在着 严重的抗生素和化学药物残留问题。要解决这一问题，必须 研究开发针对性强、低毒、无残留、无公害的鱼药。笔者等研 制的纯中药制剂——大黄侧柏１３－ 合剂对鱼类嗜水气单胞菌 （Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｈｙｄｒｏｐｈｉ１ａ，Ａｈ）引起的淡水鱼类细菌性败血症进 行防治试验，探讨以中药替代抗生素、化药防治淡水鱼类细 菌性败血症的应用效果，为其合理应用、生产无公害水产品 提供科学依据。 １材料与方法 １．１ 试验材料 １．１．１ 供试药物 大黄侧柏叶合剂，由江苏倍康药业有限 公司提供，批号为２００５０６０５５。 １，１，２ 供试菌 淡水细菌性败血症病原菌鱼类嗜水气单胞 菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌⅡ。ＡＩ１）（血清型Ｏ ）菌株ＢＳＫ一１０，南 浙江省淡水水产研究所鱼病室分离、鉴定。该菌种接种于普 通肉汤培养液，２７—３０℃培养２０—２４ ｈ，备用。 １，１，３供试鱼供试鱼为鲤鱼鱼种，均为健康无病个体，试 验鱼体长为（１２．１４ ４－２．０７）ｃｍ，体重为（３７．０８ ４－０．７４）ｇ。 戴蕊硅虢 躺嗨 峨 ； 唾｜ 蠢 ｌｌ爨鼙鼍臻嚣誊ｌ ≮鼙 ｊ 嚣ｌｌ髓强 ：氇 巍 蕊ｌＩ谴 Ｉ罄ｔ ｌ＿ ｉ彝 氍辞碡蔓 礅薄ｔ壤 熏彝谤博 啜 ｒ筵ｌ 。０镌礤 穰喹 ０每 翠 薯 。 ｜《｜≈＝ 螺≮ § ％Ⅲ¨ 褥薯 ｜ １．２ 方法 １．２．１ 预防性给药试验鱼在２００ ｌ水的玻璃缸中（４５ ｃｍ× ７５ ｃｍ×１００ ｃｍ）分别以０．５％、０．１％、０．０５％的饵料添加量 添加大黄侧柏叶合剂，饲养１５ ｄ后，开始试验。 １．２．２人ｌＴ感染ＢＳＫ一１０嗜水气单胞菌２，５×１０ ｃｆｕ／ｍｌ， 每１００ ｇ鱼体重注射菌液１ ｍｌ。感染后即放入装有２００ ｌ 水的玻璃缸（４５ ｃｍ×７５ ｃｍ×１００ ｃｍ）中。试验期７ ｄ，试 验期间水温２０—２５ ｏＣ．ｐＨ值为７．２—７．８。 试验分别设注射感染高剂量组、注射感染中剂量组、沣射 感染低剂量组、注射感染药物（大蒜）对照组、注射感染阳性对 照组、空白对照组和大黄侧柏叶合剂的阴性对照组（见表１）。 每个组设３个平行试验组，每个平行试验组各放养鲤鱼２Ｏ尾。 药物的保护率南以下公式计算： 药物保护率／％＝型堡 毒 害 × 。。 ２ 结果 试验开始２ ｈ后，部分试验鱼体色开始呈现黑色，随后陆 续死 ，死鱼的症状呈典型的淡水养殖鱼类出血性败血症症 状：鳍基部、眼眶出血，内脏、肠道红肿 各试验组鱼在第４天时停止死亡，高剂量组死亡率为 ２Ｏ．００％，中剂量组为１３．３３％，低剂量组为４６．６７％，药物对 照组为３３．３３％，阳性对照组为９３＋３３％。根据公式计算得 鲤鱼感染嗜水气单胞菌后高剂量组的药物保护率为 实 验 技
第六章鱼病防治第一节药物预防池塘养鱼的鱼病防治主要抓好清
第六章鱼病防治第一节药物预防池塘养鱼的鱼病防治主要抓好清
第一节 药物预防
池塘养鱼的鱼病防治主要抓好清塘、、消毒、合理投饵施肥、投喂药饵等。清塘包括修整池塘和药物清塘两个方面。清塘药物的种类很多，其中以生石灰清塘效果最好，漂白粉次之。在抓好清塘和增强饲养管理中的〝四定〞投饵法同时，还要留意做好药物预防任务，特别要实在做好以下〝五消〞和投喂药饵任务。
一、鱼种消毒
1、3-5%食盐水浸浴5分钟左右，杀灭寄生虫，防治水霉病、竖鳞病。
2、10克/立方米漂白粉溶液浸浴20-30分钟，杀死鱼体上的细菌，预防赤皮病、烂鳃病。
3、8克/立方米硫酸铜溶液浸浴15-30分钟，杀死鱼体上的多种寄生虫，预防寄生性鱼病。
4、20克/立方米高锰酸钾溶液浸浴15-20分钟，防治原生植物惹起的鱼病。
5、注射疫苗，草鱼放养前，每尾注射出血病毒灭活疫苗0.2-0.5毫升。
二、食场消毒
1、漂白粉挂篓。食场框架挂竹篓3-6只，每只篓装漂白粉100克，每天互换一次，三天为一疗程。5-9月经常用漂白粉食场挂篓，可以防止或增加细菌性皮肤病和烂鳃病的发作。
2、鱼病盛行时节十天一次或延续三天为一疗，每次用150-200克漂白粉配成溶液倾注食场消毒。
3、硫酸铜和硫酸亚铁合剂〔5∶2〕挂袋。发病时节每周一次，食场挂袋3个，每袋装硫酸铜100克、硫酸亚铁40克，预防寄生性鱼病。
4、夏春时节每次用2.5-5.0千克生石灰兑水溶化成浆倾注食场，防治草鱼粘细菌、烂鳃病。
三、工具消毒
将工具放入10克/立方米硫酸铜溶液浸洗5分钟再用。大型工具可在阳光下晒干后再用。
四、饵料消毒
1、植物性饵料用清水洗净，择鲜活投喂，也可将其放入8克/立方米硫酸铜溶液浸洗20-30分钟后再投喂，防病效果更好。
2、对水草等植物性饵料用6克/立方米漂白粉溶液浸洗20-30分钟后再投喂。 3、对粪肥每100千克加漂白粉24克，搅拌平均后投施，或加1-5%生石灰消毒施用。
鱼类细菌性败血症的防治技术
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鱼类细菌性败血症的防治技术
作者：张蕴
来源：《新农村》2011年第06期
近年来，由于养殖户追求较高的产量，养殖密度的加大和颗粒饲料的大面积推广应用，鱼类细菌性败血症的危害情况愈发严重。该病有危害严重、周期长、患病品种多、死亡率高的特点，给养殖户造成了巨大的经济损失。
一、流行情况
该病流行季节从3~10月，水温9~32℃，尤其水温在28℃以上的高温季节最为严重，危害鲫、鲢、鲤、鳙、鲂等大部分鱼类，各种规格个体均可感染，一般大规格个体先于小规格个体死亡。
二、症状与诊断
患病早期，病鱼口腔、腹部、鳃盖、眼眶及鱼体两侧轻度充血的症状。病情发展后上述现象加剧，眼眶周围充血，眼球突出，腹部膨大、红肿，解剖可见肝、脾肿大，肠道充血、无食，鳃丝灰白，严重时鳃丝呈紫色，末端腐烂。3~4月份，病鱼多表现为头、口腔、鳃盖、眼眶等部位以及体表两侧充血发炎。5月以后多表现为鳃盖下缘、鳍基和内脏充血发炎。
三、发病类型
按病情发展缓急、病程长短大致可分为急性、亚急性、慢性3种类型。
1.急性发病鱼来势凶猛，死亡率高，在发病1~2天后大批鱼类死亡，一周左右死亡高峰期下降，两天后停止死亡。该种类型主要发生在鲫鱼放养密度高、投饵较多、水质过肥、老化，池水透明度较小的池塘中。
2.慢性发病池，病程发展缓慢，死亡条数少，无明显高峰期，但发病时间长，累计死亡量高。
3.亚急性发病池介于以上两者之间，发病时间也较长，无明显死亡高峰，时多时少，不够稳定。
四、发病原因
主要有以下几个方面：
1.放养密度高，鱼病预防工作被忽视。 龙源期刊网
2.池塘水质差，导致鱼体抵抗力下降。
金鱼细菌性败血症防治
金鱼细菌性败血症防治
80年代末期，鲫鱼细菌性败血症（亦称暴发性鱼病）就在全国各地流行，自90年代初迅速蔓延到云南省。该病流行区域广，发病速度快，危害种类多，死亡率较高，给渔业生产造成了巨大的损失。2000年4月在我中心金鱼养殖池发现细菌性败血症，造成金鱼鱼苗及商品鱼的较大损失。今年四月份中心金鱼养殖池再次暴发该病。在经过多次试验和观察后对该病病原体、传播途径及流行规律有了初步的了解，现根据我中心的实践经验，对该病的防治做出如下总结：
〔症状〕：
发病初期，病鱼摄食减少，活动能力降低，离群独游，反应迟钝，体表及鳃部黏液增多，形成一层灰白色黏液层，在水中尤为明显。后期病鱼鳃盖四周、眼眶周围、胸部及鳍基出血，鳍条边缘出现1厘米的白边；肛门红肿，轻压腹部有少量的脓血或黄色黏液流出；鳃部颜色较浅，有点状出血或呈白鳃；严重时腹部膨大、红肿、眼球突出、竖鳞，2～3天即开始死亡。
剖开腹腔，有粉红色的腹水流出，肝、胰脏颜色变浅，胆、脾肿大，肠道内无食物，充血呈鲜红色，肠系膜、生殖腺、鳔等充血。
镜检病鱼鳃部，可见鳃丝灰白，末端腐烂，鳃小片水肿，有时可见车轮虫、斜管虫、指环虫等寄生虫。
〔流行特点〕:
该病发生于放养密度过高、水质过肥、透明度低的金鱼鱼苗培育池及商品鱼池。从每年4月开始流行一直延续整个高温季节，发病水温在20～30℃之间。在连续阴雨，天气突然转晴或持续高温后，较易发生该病。发病率高达60％～100％，病程短，3～4天即达死亡高峰，且死亡率高达60％以上，发病严重的鱼池可达100％。
〔病原体〕: 目前研究普遍认为嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）是引发此病的主要致病菌。嗜水气单胞菌为革兰氏阴性短杆菌，在5～40℃，pH值5.5～10的条件下均能生长，最适生长温度在20～30℃之间，属于一种条件致病菌。在正常水体和鱼的肠道中均有分布，对健康鱼体难以感染，但当鱼受伤或养殖环境恶化，鱼体抵抗力降低时，病菌就会乘机而入，感染伤口或鳃部，产生溶血素和细胞毒素，使鱼体呈现出血症状。
异育银鲫细菌性败血症的免疫预防
异育银鲫细茵性败血症的免疫预防
。一Ｏ—Ｏ—ｏ—ｏ—Ｏ
杭州富阳地区是浙江省异育银鲫集中养殖的主产
区，全市养殖面积达１２０００亩以上。异育银鲫细菌性
败血症（出血病或暴发病）为流行最广、危害最为严重
的一种疾病，有些养殖场的感染率达８０％￣９０％，死
亡率高达２０％以上。２０１１—２０１２年我们在富阳市东洲
街道国森养殖场进行疫苗免疫防治水生动物病害示范
和应用，采用嗜水气单胞菌出血病疫苗浸泡免疫的方
法，极大地降低了异育银鲫的发病率，现介绍如下。
一、材料与方法
１．池塘条件选择富阳市东洲街道国森养殖场，
异育银鲫养殖池塘为标准池塘，面积分别为３亩和６
亩，水深１．５～２米，池塘土质为黏性土。水源充 沛，进排水方便，水质良好，符合ＮＹ／Ｔ ５０５１—２００１
无公害食品淡水养殖用水水质标准，每口池塘配置 ｌ＾＿２台增氧机。免疫池塘３亩和６亩各２只，面积共
１８亩；对照池塘３亩和６亩各１只，面积９亩，试验 池塘相连。冬季池塘干塘后，用１００千克／亩生石灰
或４～５千克／亩漂白粉全池泼洒清塘，清塘后曝晒
２０～３０无。放养前７天用４０目网布过滤注水，同时
使用生物肥肥水，７～１０天后使水呈黄绿色、透明度
３０￣３５厘米时，开始放苗。
２．鱼种放养及免疫浸泡选择体质健壮、规格整
齐、鳞片完整、无病无伤、游动敏捷、集群能力强的
异育银鲫鱼种（规格５０克／尾左右）进行放养，在放养
时设立疫苗浸泡组与２％食盐水消毒对照组。池塘中
同时搭养少量草鱼（规格２５０克／尾左右）、鲢、鳙、 鳊（规格５０克／尾左右）。疫苗为嗜水气单胞菌灭活疫
苗，由浙江省淡水水产研究所提供，疫苗的浓度为
ｌ０×１０。ｃｆｕ／毫升。疫苗浸泡的时间在１月中旬放养时
进行。在２００升左右的塑料箱中，配制１％疫苗＋２％食
盐＋少量增效剂的水溶液１００千克，按ｌ：ｌ的重量比
放入鱼种１００千克，浸泡１０～１５分钟后放入试验池
塘。为减少疫苗使用成本，疫苗溶液重复浸浴５次
中华鳖细菌疫苗免疫佐剂的筛选及其初步应用
第２５卷第１期 ２ ０ １ ０年２月 大连水产学院学报 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＤＡＵＡＮ ｎＳＨＥＲＩＥＳ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ Ｖｏ１．２５ Ｎｏ．１ Ｆｅｂ．２０ｌ ０
文章编号：１０００—９９５７（２０１０ｌ０ｌ一００１９—０５
中华鳖细菌疫苗免疫佐剂的筛选及其初步应用
郝贵杰，潘晓艺，姚嘉赞，徐洋，尹文林，沈锦玉
（浙江省淡水水产研究所，浙江湖州３１３００１）
摘要：将分离自中华鳖Ｔｒｉｏｎｙｘ ｓｉｎｅｎｓｉｓ主要细菌性疾病——肠道出血性败血症、鳖穿孔病（疖疮病）、红脖
子红底板病、鳖腐皮病的４株病原菌，在体积分数为３．５％的福尔马林溶液中灭活２４ ｈ。在灭活的４株菌 中添加不同佐剂，充分混匀后分别制备成总含菌量为６ Ｘ １０’－￣／ｍＬ的４价菌苗，分别免疫８只ＩＣＲ小鼠， 并设不加佐剂免疫组及空白组作为对照。经３次免疫后，随机选３只小鼠抽血制备血清，用间接ＥＬＩＳＡ方 法测定抗体效价，除空白对照组外，其它４组小鼠的免疫血清效价为１：１．６×１０ 一１：２．５６×１０ ，各免疫 组的效价依次为弗氏佐剂＞白油佐剂＞蜂胶佐剂＞不加佐剂。另外５只小鼠用于免疫保护性试验。结果表 明：３种佐剂的免疫保护率均为１００％，而不加佐剂组免疫保护率为８０％，空白对照组死亡率为１００％。考 虑到弗氏佐剂的成本较高且白油佐剂有副作用，故选择蜂胶作为免疫佐剂，制备了中华鳖４价菌苗。用该 菌苗免疫接种５０只体重为１００～１５０ ｇ，／只的健康中华鳖，注射剂量为０．２ ｍＬ／只，并设置对照组（注射等 量的生理盐水），共接种２０只健康中华鳖。分别于免疫后第２Ｏ、３Ｏ、４ＪＤ、５０天随机采集３只受免疫的中华 鳖和对照组的１只中华鳖血液并制备血清，用浙江省淡水水产研究所制备的针对中华鳖ＩｇＭ的单抗３１－１３介 导的ＥＬＩＳＡ方法，测定血清中的抗体效价。结果表明：当中华鳖免疫后４０ ｄ，血清中抗体效价达到最高， 为１：６．４×１０ ；免疫后５０ ｄ将受免中华鳖分成４组，分别用４种菌株以５ＬＤ５ｏ（９×１０ ＂ｂ／ｍＬ）进行攻毒 试验（０．５ ｍＬ／只），结果免疫保护率均达到１００％，而对照组死亡率均为１００％。