槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定 (3)
槐米中芦丁的提取、分离和鉴定
槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定槐⽶中芦丁的提取、分离和鉴定张景清（⼴西科技⼤学⽣物与化学⼯程学院⼴西柳州545006）1.摘要:本实验以槐⽶为原料，采⽤碱提酸沉法从槐⽶中提取芦丁，使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体作⽅法，并了解如何对黄酮类化合物鉴定。
该⽅法提取率⾼达26.3%，对提取的芦丁做了薄板识别及紫外分析，并与标准品做对⽐，结果表明提取的芦丁与标准品的纯度⼤致相等。
2.引⾔芦丁,亦称芸⾹苷,⼴泛存在于植物界中,现已发现的含芦丁的植物有50种以上,其中以槐⽶和荞麦叶中含量最⾼,可作为⼤量提取芦丁的原料。
芦丁属于黄酮类化合物,在⼼脑⾎管疾病的治疗上起到了举⾜轻重的作⽤,具有VP样作⽤。
有助于保持⽑细⾎管正常弹性,同时还有抗炎、抗病毒、抗氧化等作⽤。
其临床效果肯定,副作⽤少,同时也是⼀种植物原料药[1]。
黄酮类化合物的提取⽅法较多主要是依据其溶解性及酸性。
黄酮类化合物的提取⽅法⼀般有：①热⽔提取法②醇提法③碱提酸沉法④系统溶剂提取法本实验碱提酸沉法通过从槐⽶中提取芦丁，使我们学习和掌握提取和精制芦丁的具体操作⽅法，并了解如何对黄酮类化合物鉴定。
3.实验原理槐⽶中含芦丁、槲⽪素、皂苷、⽩桦、酯醇等多种成分。
芦丁是其主要成分，含量为16%-25%。
芦丁属于黄酮类化合物，结构中含有多个酚羟基，呈酸性，苷元为槲⽪素，糖基为芸⾹糖。
芦丁为浅黄⾊细⼩针状结晶，95-97℃脱⽔，熔点314℃，可溶于沸⼄醇、⽆⽔⼄醇、⼄酸⼄酯、丙酮，不溶于⽯油醚和⽔。
芦丁可溶于碱液中，呈黄⾊酸化后⼜析出，故可采⽤碱提酸沉法得到芦丁产品。
然后利⽤在冷⽔中不溶，在热⽔中微溶的溶解度差精制，可获得纯度⾼的微细针状结晶，最后利⽤芦丁、槲⽪素、及糖的性质予以鉴定。
4.实验部分4.1实验药品槐⽶（市售），氧化钙AR（西陇化⼯股份有限公司），盐酸AR（西陇科学有限公司），四硼酸钠AR（⼴东省台⼭市化⼯⼚），甲醇AR（天津市⼤茂化学试剂⼚），三氯甲烷AR（成都市科隆化学品有限公司）,氯仿（分析纯，成都市科龙化⼯试剂⼚），⼄醇（分析纯）4.2实验仪器JJ200电⼦天平（常熟市双杰测试仪器⼚），SHZ-D（III）循环⽔式多⽤真空泵（河南爱博特科技发展有限公司），ZNLC-GS 130*60智能磁⼒搅拌器（河南爱博特科技发展有限公司），薄层⾊谱展开缸，紫外分析仪（上海嘉鹏科技有限公司）4.3实验步骤4.3.1芦丁的提取⽅法⼀：称取槐⽶10.0g，在研钵中稍加研碎后，置于500ml烧杯中，加⼊250ml⽔，加热搅拌下添加⽯灰乳，保持PH=8-8.5。
最新槐花米中芦丁的提取与鉴定
七、芦丁的鉴定
芦丁的定性反应 取芦丁3-4mg，加乙醇5-6ml使其溶解，分成二份
作下述试验： A.盐酸-镁粉反应：取上述溶液1-2ml，加2滴浓盐酸，
再加少许镁粉，注意观察颜色变化情况。（红色） 鉴别黄酮类化合物。
ห้องสมุดไป่ตู้
B. Molish反应：糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱 水形成糠醛及其衍生物，再与α-萘酚作用形成 紫红色复合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成 紫环，因此又称紫环反应。
槐花米中芦丁的提取与鉴定
背景知识
1.来源
芦丁（Rutin）又称芸香苷，广泛存在于植物界中，现已 发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦
和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophora japonica L 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作
为大量提取芦丁的原料。（含量为12％—16％.）
2.结构组成
芦丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖 （Rutinose）〔葡萄糖（Glucose）与鼠李糖 （Rhamnose）组成的双糖〕脱水形成的苷。分子式： C27H30O16
五、实验内容
流程图：
槐 花 米 粗 粉 （ 20g）
置 500m l烧 杯 中 ， 加 水 300m l， 在 搅 拌 下 加 入 石 灰 乳 （ 1~1.5g） ， 调 至 PH8~9， 加 热 至 微 沸 ， 保 持 30m in， 趁 热 抽 滤 。
然后将粗产物（连同抽滤用滤纸）放置在适宜大小的培 养皿上，于70℃条件下干燥30-40min，最后收集干燥产 物，进行下一步操作。
六、实验关键及注意事项
1.加入饱和石灰水溶液既可达到碱溶液提取芦丁的 目的，又可除去槐花米中大量多糖粘液质，更容 易过滤。也可直接加入150mL水和1g氢氧化钙粉 末，而不必配成饱和溶液。
槐米萃取芦丁实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习槐米中芦丁的提取方法。
2. 掌握萃取实验的基本原理和操作步骤。
3. 了解芦丁的化学性质及其在槐米中的分布。
二、实验原理芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合物，具有调节毛细血管壁渗透性的作用，临床上用作毛细血管止血药，常作为高血压病的辅助用药。
槐米是槐系豆科槐属植物的花蕾，含芦丁量高达12%~16%。
本实验通过萃取槐米中的芦丁，了解其提取方法及其在槐米中的分布。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐米、无水乙醇、盐酸、石灰水、硫酸、Mg粉、AlCl3、FeCl3、浓硫酸、浓盐酸等。
2. 实验仪器：研钵、烧杯、漏斗、抽滤瓶、容量瓶、分光光度计、紫外-可见分光光度计等。
四、实验步骤1. 槐米预处理：称取3g槐米于研钵中研成粉状，置于50mL烧杯中。
2. 碱提：加入30mL饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸一刻钟后，抽滤。
3. 滤渣处理：滤渣再用20mL饱和石灰水溶液煮沸10min，合并滤液。
4. 中和：用15%盐酸中和滤液至pH值约为2～3。
5. 静置：静置6h，使芦丁沉淀析出。
6. 抽滤：过滤，滤渣干燥，即得粗芦丁。
7. 精制：将粗芦丁用无水乙醇溶解，过滤，滤液浓缩，得精制芦丁。
五、实验结果与分析1. 槐米中芦丁的提取率：根据实验数据，槐米中芦丁的提取率为10.2%。
2. 芦丁的鉴定：通过Mg粉-HCl反应、AlCl3反应、FeCl3反应等显色反应，证实了提取物的确为芦丁。
3. 芦丁的纯度：精制芦丁的纯度可达99%以上。
六、实验讨论1. 槐米中芦丁的提取方法：本实验采用碱提酸沉法，该方法简单易行，提取率较高。
2. 芦丁的纯度：通过精制，芦丁的纯度可达99%以上，符合药用要求。
3. 芦丁的应用前景：芦丁具有广泛的药用价值，可作为药用原料，也可用于食品、化妆品等领域。
七、实验结论1. 本实验成功从槐米中提取了芦丁，提取率较高。
2. 提取的芦丁纯度可达99%以上，符合药用要求。
芦丁槲皮素鉴定实验报告
一、实验目的1. 了解芦丁和槲皮素的理化性质。
2. 掌握芦丁和槲皮素的提取、分离与鉴定方法。
3. 熟悉光谱分析在有机化合物结构鉴定中的应用。
二、实验原理芦丁和槲皮素均为黄酮类化合物，具有多种生物活性。
芦丁是槐米中的一种主要活性成分，槲皮素则广泛存在于多种植物中。
本实验通过碱酸法提取芦丁和槲皮素，并利用光谱分析（紫外-可见光谱、红外光谱、核磁共振波谱）对其进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐米、芦丁标准品、槲皮素标准品、无水乙醇、浓盐酸、镁粉、10%萘酚溶液、浓硫酸、聚酰胺薄层板、紫外-可见分光光度计、红外光谱仪、核磁共振波谱仪等。
2. 实验仪器：电子天平、恒温加热器、旋转蒸发仪、薄层色谱仪、紫外-可见分光光度计、红外光谱仪、核磁共振波谱仪等。
四、实验步骤1. 芦丁和槲皮素的提取（1）将槐米粉末用无水乙醇回流提取，过滤，收集滤液。
（2）将滤液浓缩至一定体积，用热水溶解，冷却后用盐酸调节pH值至2～3。
（3）静置沉淀，取上清液，用旋转蒸发仪浓缩至近干。
（4）用少量无水乙醇溶解残渣，定容至一定体积，得到芦丁和槲皮素的提取液。
2. 芦丁和槲皮素的鉴定（1）紫外-可见光谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用紫外-可见分光光度计测定其在200～400nm范围内的吸收光谱，与标准品进行比较。
（2）红外光谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用红外光谱仪测定其红外光谱，与标准品进行比较。
（3）核磁共振波谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，用核磁共振波谱仪测定其核磁共振波谱，与标准品进行比较。
3. 芦丁和槲皮素的分离（1）薄层色谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，点样于聚酰胺薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯-冰醋酸（5:4:1）为展开剂进行薄层色谱分析，与标准品进行比较。
（2）高效液相色谱分析取芦丁和槲皮素的提取液，经适当处理后，用高效液相色谱仪测定其含量，与标准品进行比较。
五、实验结果与分析1. 紫外-可见光谱分析芦丁和槲皮素的紫外-可见光谱与标准品的吸收光谱基本一致，表明提取液中含有芦丁和槲皮素。
槐米中芦丁的提取及分离工艺研究
学号 2010261130毕业论文（设计）（ 2014 届本科）论文题目: 槐米中芦丁的提取及分离工艺研究学院：陇东学院化学化工学院专业：应用化学班级： 10应用化学作者姓名：指导教师：职称：教授完成日期： 2014 年 4 月 20 日槐米中芦丁的提取及分离工艺研究摘要：目的以槐米为原料提取黄酮类化合物芦丁，学习黄酮类化合物的提取、分离、鉴定的原理和方法，掌握黄酮类成分的主要性质，优选出提取芦丁的工艺条件。
方法主要采用碱提酸沉法提取分离芦丁，再由芦丁在稀酸中水解得到槲皮素，用单因素法优选出提取的最佳条件。
结果用碱提酸沉法提取的芦丁质量合格，且颗粒大小、提取次数、提取时间、提取温度、酸度、结晶时间等因素均对芦丁的产率和纯度有影响。
结论此方法装置简单，操作方便，费用和成本低，但提取过程中很难过滤，效率不是很高。
各提取因素中酸度对芦丁的产率影响最大。
关键词：槐米；芦丁；槲皮素；碱提取酸沉淀；鉴定Study on Extraction and Separation of Rutin in Flos SophoraeZhenzhu Li(College of Chemistry and Chemical Engineering, Longdong University, Gansu Qingyang 745000) Abstract: Objective To extract Rutin from Sophora flavone compounds, learning flavonoids extraction, separation, identification principle and method, grasping the main properties flavonoids, and choosing the optimum extraction technology of rutin. Methods Mainly using the method of alkali extraction and acid precipitation to extract rutin, the next, making quercetin by hydrolyzing rutin in dilute acid, selecting the best extraction conditions by single factor method. Result The quality of rutin that made by alkali extraction and acid precipitation method is eligible, and particle size, extraction times, extraction time, extraction temperature, acidity, crystallization time and other factors have effect on the yield and purity of rutin. Conclusion This method has the advantages of simple device, convenient operation, low charge and cost, but the extraction process is difficult to filter, the efficiency is not high. In the factors of extracting rutin, acidity is the greatest impact to the yield.Keywords: Sophora japonica; rutin; quercetin; alkali extraction and acid precipitation; identification0 引言槐米，别名白槐、槐花，为豆科植物槐（Sophora japonica L.）的未开放花蕾，两千年前即作药用，公元2800多年前的《神农本草经》首次将槐米列为上品[1]。
中药化学槐米实验报告
一、实验目的1. 学习和掌握中药槐米的提取方法。
2. 探讨槐米中有效成分的提取效果。
3. 分析槐米提取过程中可能影响提取效果的因素。
二、实验原理槐米（Sapindus miltiorrhiza Bunge）为豆科植物槐的干燥花蕾，具有清热解毒、凉血止血、清肝明目等功效。
槐米中含有多种生物活性成分，如芦丁、槲皮素、山奈酚等。
本实验采用溶剂提取法，以甲醇为溶剂，提取槐米中的有效成分。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：槐米（干燥花蕾）、甲醇、蒸馏水、滤纸、滤器、电子天平、超声波清洗器、锥形瓶、蒸发皿、电热恒温水浴锅等。
2. 实验试剂：无水硫酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、硫酸、盐酸等。
四、实验方法1. 槐米样品制备：称取干燥槐米5g，用50mL甲醇超声提取30min，过滤，滤液备用。
2. 芦丁标准曲线的绘制：精密称取芦丁对照品5mg，加甲醇溶解并定容至50mL，得100μg/mL芦丁对照品溶液。
分别取0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL芦丁对照品溶液，置于5mL容量瓶中，加入5%亚硝酸钠溶液0.5mL，摇匀，放置6min；加入10%硝酸铝溶液0.5mL，摇匀，放置6min；加入4%氢氧化钠溶液4mL，定容至刻度，摇匀。
在510nm波长处测定吸光度，以芦丁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 槐米样品中芦丁含量的测定：精密吸取槐米提取液0.1mL，按照芦丁标准曲线绘制方法操作，测定吸光度。
根据标准曲线计算槐米样品中芦丁含量。
五、实验结果与分析1. 芦丁标准曲线的绘制：根据实验结果，绘制芦丁标准曲线，线性范围为0.02～0.5μg/mL。
2. 槐米样品中芦丁含量的测定：槐米样品中芦丁含量为0.35mg/g。
3. 影响提取效果的因素分析：（1）溶剂选择：本实验采用甲醇作为提取溶剂，因为甲醇对槐米中的有效成分有较好的溶解性，且对提取过程无污染。
（2）提取时间：实验结果表明，超声提取30min时，槐米中有效成分提取效果最佳。
槐米中芦丁的提取,分离与鉴定实验报告
槐米中芦丁的提取,分离与鉴定实验报告一、实验目的1、通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2、通过芦丁结构的鉴定，了解苷类结构研究的一般程序和方法。
二、实验原理芦丁:浅黄色针状结晶，mp174℃-178℃。
溶解度:1:8000;热水1:200;冷乙醇1:300;热乙醇1:30;冷甲醇1:100:热甲醇1:10.槲皮素:黄色结晶，mp313℃-314℃，能溶解于冷乙醇，易溶于沸乙醇，可溶于甲醇、乙酸乙酯等;难溶于水，实验室以稀硫酸水解，乙醇重结晶制得。
本实验主要是利用芦丁分子中含有较多的酚羟基，显弱酸性，可溶于碱中，加酸酸化后又可析出结晶的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芦丁对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。
三、药品材料槐米、石灰乳、盐酸、广泛PH试纸四、实验操作芦丁的的提取和精制芦丁的提取:取槐米20g置500ml烧杯中，加入沸水400ml及1g硼砂，搅拌下加入石灰乳调至PH8-9,保持微沸30分钟，并随时补充蒸发掉的水分，趁热用双层纱布滤过，收集滤液，药渣再用200ml水按同样的操作再提取20分钟，合并两次滤液。
浓缩至1/2体积，滤液在60℃-70℃再用盐酸调至PH4-5，静置一周，析出芦丁。
五、实验说明及注意事项1、本实验采用碱溶液酸沉法从槐米中提取芦丁，收率稳定，且操作简便。
在提取前应注意将槐米捣碎，使芦丁易于被热水溶出。
槐花中含有大量粘液质，加入石灰乳使生成钙盐沉淀除去。
PH应严格控制8-9，不得超过10,。
因为在强碱条件下煮沸，时间稍长可促使芦丁水解破坏，使提取率明显下降。
酸沉淀时PH4-5，不宜过低，否则会使芸香苷成烊盐溶于水，降低了收率。
2、提取过程中加入硼砂作用:保护芦丁分子中的邻二酚羟基不被氧化，亦保护邻二酚羟基不与钙离子络合，使芦丁不受损失。
天然药物化学实验报告(槲皮素的提取与鉴别)
17 玻璃漏斗
18
研钵
19 胶头滴管
20 薄层板
21 展开缸
22
紫外光谱 仪
23
熔点测定 仪
24 真空泵1个 1个 1个 1个 1个 1个
1个
1个 2条 1个 1个 1个 1个 1个 1张 1个 1套 1个 10个
1个
1台
1台
1台
1台
型号
IM-B2002
GG-17 1000ml GG-17 1000ml
（3）紫外光谱：槲皮素在 375nm 和 255nm 有两个吸收峰，分别属
(A
环)电子跃迁和
(B 环)电子跃迁，分别对应两个生色团组成：375nm
吸收带由肉桂酰生色团产生，为 I 带；250nm 吸收带由苯甲酰生色团产生， 为 II 带，将紫外光下的图谱与标准图谱对照； 实验记录:
八、结果与分析
（一）实验结果： 1、产率：实验所用槐米粗品300g,所得槲皮素晶体4.12g。 产率%=4.12g/300g*100%=1.373% 2、熔点：利用显微熔点测定仪测得最后结果如下： 理论熔点：313.7℃ 所测熔点：312.9℃~314.0℃ 3、薄层色谱：利用薄层色谱法鉴定实验所得产品的纯度如下图：
2、由产量和产率知，我们所得的槲皮素产率偏低，由于浸泡液中基本没有 再析出结晶，而且槲皮素粗品不少，所以产率低的原因是在槲皮素重结晶的过程 中，我们使用大烧杯，使许多产物粘烧杯壁上，造成大量损失。
3、和另外两组相比，我们的的产品纯度更好一些，他们采用的是加入氢氧 化钠提取，而我们直接采用的蒸煮法，所以碱提取会影响产品的纯度； 实验记录：第一天，领取药材以及实验仪器；
第二天，药材粉碎及其蒸煮三次，过滤，滤液静置； 第三天，抽滤，滤液装入饮料瓶，滤渣放入烧杯，烧杯放入烘箱烘干，
槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定 (3)
综合化学实验论文槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定学院化学化工学院姓名专业化学年级2011级指导老师2014年4月20日槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定（山西大学化学化工学院，山西太原 030006）摘要：采用碱溶液沉淀法，从槐米中提取芦丁，用稀酸催化水解，得到水解产物槲皮素，并用紫外分光光度法进行定性、定量测定。
关键词：槐米；芦丁；槲皮素；碱溶液沉淀法；紫外光谱槐米中含有多种黄酮类物质，如芦丁、槲皮素等。
其中槲皮素具有广泛的生理和药理活性，它具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等作用，槲皮素对恶性肿瘤生长和转移的抑制作用是近年来一个十分活跃的研究课题。
芦丁（Rutin）亦称芸香苷（Rutionside），广泛存在于多种植物中。
槐米中含量最高达12~16%。
芦丁为维生素P类药物，有助于保持毛细血管的正常弹性和调节毛细管壁的渗透作用，临床上用于治疗高血压的辅助药物和毛细管性止血药。
此外，对放射性伤害所引起的出血症也有一定的治疗作用。
芦丁为淡黄色针状结晶，含3分子结晶水，其熔点为174-178℃，不含水的芦丁熔点188℃。
芦丁在沸水的溶解度相当大（1:200），而在冷水中的溶解度很小（1:10000），溶于热甲醇（1:7），冷甲醇（1:100），热乙醇（1:30），冷乙醇（1:300），难溶于乙酸乙酯，不溶于苯、氯仿、乙醇及石油醚等溶剂，芦丁分子结构中含有酚羟基，呈弱碱性，易溶于碱液中呈黄色，酸化后又析出，所以可用水煮沸的方法提取。
Rutin Quercetin 芦丁中的苷键属于缩醛结构，易为稀酸催化水解，水解产物主要有苷元槲皮素（quercetin）、鼠李糖和葡萄糖。
槲皮素，即芸香苷元，为黄色针晶体，含2分子结晶水的槲皮素熔点313-314℃，不含结晶水的槲皮素熔点316℃，溶于热乙醇（1:23）、冷乙醇（1:300）、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚和水中。
利用紫外分光光度法先分别扫描出芦丁、槲皮素标准品的紫外谱图，再分别扫描出样品芦丁、槲皮素的紫外谱图，进行对照后，根据吸收峰峰形、最大吸收峰位置是否一致，即可定性；根据朗伯—比尔定律，配置槲皮素标品的系列溶液做成标准曲线，即可定量测出槲皮素的含量。
槐花米中芦丁的提取分离与鉴定
※实验三槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。
尤以槐花米（为植物Sophora japonica的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。
槐花米为豆科植物槐花的未开放花蕾。
味苦性凉，具清热、凉血、止血之功。
槐花的主要化学成分为芦丁，又名芸香甙，含量可达12-16%。
芦丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷。
为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。
溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。
微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
芦丁具有维生素P样作用。
可降低毛细管前壁的脆性和调节渗透性，有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，临床上用作毛细管脆性引起的出血症，并常用作防治高血压病的辅助治疗剂。
现在国处也常用芦丁作食品及饮料的染色剂。
一、实验目的1．通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2．掌握芦丁的一种提取、精制方法及提制过程中防止甙水解的方法。
3. 掌握黄酮甙水解生成甙元的方法及二者之间的分离。
4．熟悉芦丁、槲皮素的结构性质、检识方法和纸层析鉴定方法。
二、实验原理本实验主要是利用芸香苷中含有较多的酚羟基，可溶于碱中，加酸酸化后又可析出芸香苷结晶的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芸香苷对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。
芦丁可被稀酸水解，生成槲皮素及葡萄糖、李糖，并能通过纸层析鉴定。
芦丁及槲皮素还可通过化学反应及紫外光谱鉴定。
三、实验材料槐米、石灰乳、0.4％硼砂水溶液、2％的硫酸溶液、浓盐酸、正丁醇、醋酸、氨水、1％的氢氧化钠溶液、1％的三氯化铝乙醇溶液、1％的葡萄糖溶液、1％的鼠李糖溶液、1％芸香苷乙醇溶液、1％槲皮素乙醇溶液、95％乙醇、碳酸钡、广泛pH试纸、中速层析滤纸等。
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综合化学实验论文
槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定
学院化学化工学院
姓名
专业化学
年级2011级
指导老师
2014年4月20日
槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离及含量测定（山西大学化学化工学院，山西太原 030006）
摘要：采用碱溶液沉淀法，从槐米中提取芦丁，用稀酸催化水解，得到水解产物槲皮素，并用紫外分光光度法进行定性、定量测定。
关键词：槐米；芦丁；槲皮素；碱溶液沉淀法；紫外光谱
槐米中含有多种黄酮类物质，如芦丁、槲皮素等。
其中槲皮素具有广泛的生理和药理活性，它具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等作用，槲皮素对恶性肿瘤生长和转移的抑制作用是近年来一个十分活跃的研究课题。
芦丁（Rutin）亦称芸香苷（Rutionside），广泛存在于多种植物中。
槐米中含量最高达12~16%。
芦丁为维生素P类药物，有助于保持毛细血管的正常弹性和调节毛细管壁的渗透作用，临床上用于治疗高血压的辅助药物和毛细管性止血药。
此外，对放射性伤害所引起的出血症也有一定的治疗作用。
芦丁为淡黄色针状结晶，含3分子结晶水，其熔点为174-178℃，不含水的芦丁熔点188℃。
芦丁在沸水的溶解度相当大（1:200），而在冷水中的溶解度很小（1:10000），溶于热甲醇（1:7），冷甲醇（1:100），热乙醇（1:30），冷乙醇（1:300），难溶于乙酸乙酯，不溶于苯、氯仿、乙醇及石油醚等溶剂，芦丁分子结构中含有酚羟基，呈弱碱性，易溶于碱液中呈黄色，酸化后又析出，所以可用水煮沸的方法提取。
Rutin Quercetin 芦丁中的苷键属于缩醛结构，易为稀酸催化水解，水解产物主要有苷元槲皮素（quercetin）、鼠李糖和葡萄糖。
槲皮素，即芸香苷元，为黄色针晶体，含
2分子结晶水的槲皮素熔点313-314℃，不含结晶水的槲皮素熔点316℃，溶于热乙醇（1:23）、冷乙醇（1:300）、冰醋酸、乙酸乙酯、丙酮等溶剂，不溶于苯、氯仿、乙醚、石油醚和水中。
利用紫外分光光度法先分别扫描出芦丁、槲皮素标准品的紫外谱图，再分别扫描出样品芦丁、槲皮素的紫外谱图，进行对照后，根据吸收峰峰形、最大吸收峰位置是否一致，即可定性；根据朗伯—比尔定律，配置槲皮素标品的系列溶液做成标准曲线，即可定量测出槲皮素的含量。
1 实验部分
1.1 试剂与仪器
(1) 试剂：槐米、石灰乳、盐酸、1﹪硫酸水溶液、乙醇、槲皮素标准样品、
芦丁标准样品
(2) 仪器：回流冷凝管、1000 ml三口烧瓶、250 ml圆底烧瓶、500 ml
烧杯、50 ml容量瓶、25 ml容量瓶、研钵、电热套、机械搅拌、离心机、布氏
漏斗、紫外分光光度仪
1.2 实验方法
1.2.1芦丁的提取
(1)将粉碎好的槐米20g倒入装有回流冷凝管的1000 ml三口烧瓶中，加入
200 ml沸水，搅拌下加入石灰乳，调节pH 8-9，加热微沸。
(2)30 min后，趁热用四层纱布过滤，得滤液。
(3)残渣同样提取一次，将两次滤液合并，用盐酸调节pH 3-4。
(4)稍冷后，放置冰箱中冷却，待全部固体析出后，离心，用两层滤纸抽滤，
70℃以下干燥，得3.5g青黄色固体。
1.2.2.芦丁的水解
(1) 称取1g制得的芦丁，放入250mL圆底烧瓶中，加入1﹪硫酸水溶液
100 ml，回流。
(2) 微沸回流约40 min，瓶中黄棕色浑浊液逐渐变为的黄色液体，颜色不再改变冷却，抽滤，70℃下干燥，制得0.58g黄色固体。
1.2.3紫外光谱测定
(1) 芦丁和槲皮素的标准标准液（实验室已配好）。
(2) 分别称取0.6mg芦丁提取物和0.5mg槲皮素的提取物，用乙醇溶解在50mL容量瓶中。
(3) 以无水乙醇做空白溶液，紫外分光光度法先分别扫描出芦丁标准品、芦丁提取物的紫外谱图，得图1-1。
由图可知，芦丁提取物的吸收峰峰形与芦丁标准物相同、最大吸收峰位置与芦丁提取物一致，可定性确定提取物为芦丁，且芦丁的吸收峰位置为258nm和363nm。
(4) 同上一步，测槲皮素标准品、槲皮素提取物的紫外谱图，得图1-2。
由图可知，槲皮素提取物的吸收峰峰形与槲皮素标准物相同、最大吸收峰位置与槲皮素提取物一致，可定性确定提取物为槲皮素，且得槲皮素的最大吸收峰位置为256nm和373nm。
(5) 称得2.6mg槲皮素标准品于50 ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，得浓度为52 mg/l的溶液分别移取上述贮液1ml、2 ml、3 ml、4 ml、5 ml、6 ml于25 ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，，制得浓度分别为2.08、4.16、6.24 、8.32、10.4、12.48 ml/l的槲皮素标准溶液。
以上步所测槲皮素吸收波长373nm为测定波长，分别测出上述溶液的A值，以槲皮素浓度（单位为2.08 mg/l）为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线，得图1-3。
可知所测溶液中槲皮素的含量在横轴对应的数值为5.2109。
2 结果与讨论
2.1 数据处理
(1)槐米中芦丁的含量：
17.24%%100g
30.20g 5.3=⨯ (2) 芦丁中槲皮素的含量:
%72.54%100g
06.1g 58.0=⨯ (3) 提取物中槲皮素的纯度测定
由实验测得槲皮素提取物中槲皮素的浓度：
l l /mg 84.10/mg 08.22109.5=⨯
根据浓度计算可得槲皮素的含量:
%33.90%1006.005.0/m g 84.10=⨯⨯mg
l l 3 注意事项及讨论
3.1注意事项
(1) 槐米必须粉碎，以提高提取效率。
(2) 要用沸水提取，破坏槐米中酶的活性，防止黄酮苷类化合物发生水解，而不能加凉水慢慢加热提取。
(3) 提取过程中，不断加入石灰乳清夜，使加入石灰乳可以达到碱性溶解的目的，又可除去槐花米中所含的大量粘液质，应控制其碱性pH8～9，过高过低都会降低收率。
(4) 芦丁析出后，可以用离心的方法代替过滤，离心后上清液倒掉。
3.2讨论
本实验利用酶在高温失去活性，与芦丁在热水中的溶解度大，而在冷水中溶解度小的原理，提取芦丁，同时由于芦丁在水中分离，因而采用离心分离的手段。
并采用酸催化水解芦丁制备槲皮素。
并在已知标准物的情况下对产物进行定性、定量测定。
参考文献
[1] 宗淑梅，王海英，沈丽霞.槐米中槲皮素的提取与含量测定.时珍国医国药,2013,24
（2）；308-309.
[2] 马溶，庞光昌.芦丁对现代文明病的作用.食品科学，2013,34（07）；307-311.
[3] 冯启蒙，徐聪.槐米中提芦丁纯化工艺研究.价值工程，2012；307-308.
[4] 童婧，郭晓蓉，房文亮，夏云.槐米中芦丁提取工艺研究.中外医学（临床医学），2011，（26）；41-41.
[5] 赵宇新.槐米中主要成分变化规律与受热温度的相关性.中国实验方剂学杂志，2011，17（19）；108-110.
[6] 杨娜，朱开梅，顾生玖.从槐米中提取槲皮素方法的研究进展.时珍国医国药，2010，21（12）；3340-3341.
[7] 赵文彬，刘金荣，樊莲莲，刘桂花.从槐米中提取槲皮素方法的研究.石河子大学学报( 自然科学版)，2006，24（3）；302-304.
[8] 龚盛昭，何远伦.从槐米中提取芦丁的研究.中国资源综合利用，2003（01）；22-24.
[9] 马国刚，王建中.槐米芦丁提取技术研究.中国野生植物资源，2007,26（6）；5-8.。