离子色谱操作教程
离子色谱使用说明

离子色谱(ICS1000)色谱分为气相色谱和液相色谱。
气相色谱(气-固分离,流动相为载气)液相色谱(液-固分离,流动相为液体)HPLC(主要分离非极性的有机化合物)IC(主要分离极性和部分弱极性的化合物)离子色谱的样品前处理:A、过滤:0.22um,0.45um过滤膜,除去样品中颗粒物,用高纯水冲洗滤膜,以减少沾污。
B、稀释:待测物浓度较高时,应预先稀释,一般未知样品稀释100倍,降低干扰物的浓度。
分析未知样时,先测其电导率,与自来水电导率比值,为稀释倍数。
C、基体消除:去除样品中所包含的,有可能损坏仪器或者影响色谱柱/抑制器性能的成分——重金属离子、有机大分子;去除样品中所包含的,有可能干扰目标离子测定的成分——高离子强度基体。
(戴安公司有一些相应的预处理柱),含强疏水性物质不能直接进样。
离子色谱的基本流程图♦样品进样:定量环进样♦分离:离子交换分离♦检测:电导检测定量环进样:(根据进样量不同更换定量环)抑制器的工作原理:(阴离子)(实质是用H+代替其他阳离子进入检测器,因为H+的摩尔电导最高,所以以HCl 形式进入电导检测器,能够降低背景电导,从而提高待测离子的灵敏度)1)水进入阳极电离,产生H+,通过阳离子交换膜进入抑制器(中间通道)2)OH-带Cl-、SO42-等进入抑制器,并与H+结合生成HCL,H2SO4等,以离子形式存在。
进入检测器。
3)剩下的阳离子通过阳离子交换膜,进入并与阴极电离产生的OH-结合,废液排出。
保养:1、色谱柱清洗最好分别清洗保护柱与分离柱。
如要同时清洗,应将分离柱置于保护柱之前。
溶液流动方向: 保持→方向离子色谱柱不能反冲。
闲置或柱子干了以后重用,先用低流速冲(相当于沁润)。
分析柱污染,会导致保留时间变化,相当于柱子变短了,保留时间缩短,此时,可稀释淋洗液浓度。
若保留时间缩短<15%就需要开始清洗柱子了。
2、清洗抑制器(水化抑制器——从Eluent out 处注入3ml纯水,从Regen in 处注入5ml纯水)清洗ELUENT 和REGEN 两部分;清洗时应先关闭抑制器电源;清洗后要向抑制器内泵10分钟高纯水,以便于平衡系统A、清洗流速——0.5mL/minB、清洗液①金属污染或沉淀—— 0.2M 草酸(30min)——去离子水(10min)——淋洗液(10min)②有机污染—— 90%乙腈(30min)——去离子水(10min)——淋洗液(10min)③碱溶性污染—— 0.1M NaOH(30min)——去离子水(10min)淋洗液(10min)3、激活抑制器(0.2 N NaOH)(注水几ml),以赶走里面的酸碱,同时保持膜不干a)初次安装时b)有液体泄漏时c)进行清洗之后d)灵敏度下降后4、抑制器的使用a)如果电源关闭不要连续向抑制器内泵淋洗液b)停泵时抑制器的电源应关闭测量结束关闭仪器前, 允许泵在关闭抑制器电源的情况下继续运行30秒左右,确认再生液出口处没有气泡后再停泵c)经常检查废液桶-----确保气体不会存在桶内1. 每星期至少开机一次,保持抑制器活性;2. 长期不用应封存抑制器;用超纯水冲洗10min后,将各出口堵住。
离子色谱实验步骤及注意事项

离子色谱实验步骤及注意事项
1.清洗
(1)实验前先将超声瓶加入适量的超纯水,用手摇晃清洗6次左右备用。
(2)将旧的离心管装满超纯水进行多次超声清洗,用锡箔纸封好后将烘箱温度设置为60℃左右将其烘干。
(新的不用清洗)
(3)将用于配制淋洗液的容量瓶用超纯水清洗。
注:第一次清洗时要清洗容量瓶的外壁。
(4)将镊子和剪刀用棉花擦干净(3次),放在干净的锡箔纸上待用。
2.配制淋洗液
(1)阴离子淋洗液:配制3.2mmol的NaCO3(106)和2mmol的NaHCO3(84)1L的淋洗液
分别称取339.3mg的NaCO3和168mgNaHCO3的放于1L的容量瓶中,加入超纯水将其溶解摇匀,并最终精确定容至1L摇匀待用。
(2)阳离子淋洗液:?酒石酸(150)、?二甲基吡啶酸(96)1L的淋洗液
分别称取?mg和?mg的吡啶二羧酸放入1L容量瓶中,加入超纯水将其溶解摇匀,定容至1L。
注:将容量瓶放在超声仪中超声去泡
3.实验步骤
(1)将膜剪碎放入超声瓶中(加冰),加入5ml的超纯水,盖紧瓶盖超声抽提30min,静置?Min
(2)将抽提后的样品用一次性针头转移到离心管中,针头前装有过滤膜片。
注意:在拿离心管和装过滤膜片时要用镊子操作,不要用手去碰会和样品接触的位置以免造成污染。
(3)将样品放在离子色谱上进行分析检测。
离子色谱仪操作及原理

离子色谱仪操作及原理
离子色谱仪是一种利用离子交换技术分离离子的仪器。
其原理是通过离子交换柱将被分析的离子样品中的离子与载体离子之间进行交换反应,从而实现离子的分离和检测。
离子色谱仪的操作步骤如下:
1. 准备样品:将待测离子样品处理成溶液,并确保其浓度在仪器可检测范围之内。
2. 进样:将待测样品注入进样装置,并调整进样量。
3. 分离:样品溶液经过离子交换柱,不同离子在离子交换柱中的保留时间不同,从而实现分离。
4. 检测:离子色谱仪通常配备有离子检测器(如电导检测器、荧光检测器等),用于检测离子的浓度。
5. 数据处理:离子色谱仪会自动记录离子的检测信号,并通过计算机软件进行数据处理,包括峰面积计算、质量浓度计算等。
离子色谱仪的工作原理是基于离子交换作用。
离子交换柱一般采用离子交换树脂填充的管柱,该树脂具有特定的离子交换能力。
当被分析的离子样品通过离子交换柱时,样品中的离子与离子交换树脂中的载体离子发生交换作用。
载体离子会留在离子交换柱上,而被分析的离子则会随着流动相通过离子交换柱,从而实现分离。
离子色谱仪的分离还受到流动相性质和离子交换柱性能的影响。
通常,流动相是一种带有离子的溶液,其pH值对于离子的分
离也起着重要作用。
此外,离子交换柱的选择也要考虑样品的性质和离子的特点,以实现更好的分离效果。
离子色谱操作规程

离子色谱操作规程一、开机及准备工作1.开启电脑、离子色谱仪电源开关,预热10-15分钟。
2.更换淋洗液(建议现用现配,最多使用两天。
烧杯盛取适量超纯水超声脱气30min→配制淋洗液→砂芯过滤装置抽滤→倒入淋洗液瓶。
纯水仅脱气处理即可)。
3.登陆ShineLab,登录账号密码(初始账号:admin 密码:123456),进入到主界面,”仪器”窗口下→打开→√离子色谱→点击确定。
仪器控制。
将柱温箱的温度和电导池温度35 ℃,设置、启动。
将流量调至0.3 mL/min,开启泵;一分钟后将流量调为0.5 mL/ min,一分钟后调至1.0 mL/min。
电流设为75 mA(阳离子15 mA),开启。
二、查看仪器稳定状态量程归零。
[方法一] 不保存谱图“仪器”窗口下,点“电导检测器”。
下方的“仪器动态曲线”呈直线,电导值小数点前两位不变,说明仪器较为稳定。
[方法二] 需保存谱图待电导值相对稳定后,量程归零。
“分析控制”窗口下选择被动模式“仪器”窗口下,“序列管理”→新建,设置序列(样品名称、循环次数、进样时间、谱图名称、选择样品类型及选择方法等。
样品类型选择“基线”).“谱图处理”窗口下,查看“基线噪声与基线漂移”,一般要求噪声<2 ,漂移<60(国标要求噪声<5,漂移<100)。
三、标准曲线绘制1.“仪器”窗口下“序列管理”→新建2.“分析控制”窗口下1)查看模式是否为主动2)编辑序列,设置好样品名称、循环次数、进样时间、谱图名称、选择样品类型及选择方法等。
3)点击运行序列,依次进完所有的标准样品。
4)打开一个标准样品的谱图,点击“删除峰”,区域从头到尾。
点击“添加正峰”,区域每个峰均进行操纵。
添加上所有需要的峰,然后底部“积分参数”表里“保存为积分方法”。
后面的几个标准谱图可通过“批处理”,选择“积分方法”—“积分”。
5)建立校准方法:打开“积分方法”→点击“新建”→选择谱图→√→填写化合物名称→选择校准点数→对应等级选择谱图,“抠背景”旁边点右键“同步定量参数”→计算→输入校准曲线名称,校准建立完成。
离子色谱仪使用流程

离子色谱仪使用流程离子色谱仪是一种广泛应用于分析化学领域的仪器,它可以用来分离、鉴定和测定溶液中的离子。
以下是离子色谱仪的使用流程,供您参考:1. 准备样品在使用离子色谱仪之前,您需要准备好待测的样品溶液。
确保样品溶液的浓度适宜,不会对离子色谱仪产生过大的干扰。
如果需要,可以使用适当的稀释液将样品稀释到合适的浓度。
2. 开机预热在使用离子色谱仪之前,需要将仪器开机预热一段时间,以确保仪器各部件达到稳定的工作温度。
一般来说,预热时间为30分钟至1小时不等,具体时间可以根据仪器型号和厂家的要求来确定。
3. 设置仪器参数在仪器预热的同时,您需要设置一些仪器参数,以满足您对待测离子的分离和检测要求。
这些参数包括流速、温度、柱子类型和柱子温度等。
根据您的实际需求,调整这些参数,以达到最佳的分离效果和信号强度。
4. 装载样品预热完毕并设置好仪器参数后,可以将样品溶液装载到离子色谱仪中进行测试。
离子色谱仪一般会配备进样器或自动进样装置,您可以根据实际情况选择合适的装载方式。
注意,在装载样品之前,需要将进样装置进行一定的清洗和预处理,以避免交叉污染。
5. 进行分析一切准备就绪后,可以开始进行离子色谱分析了。
离子色谱仪将样品溶液按照设定的参数通过色谱柱进行分离。
分离过程中,不同离子会根据它们与固定相之间的相互作用参与不同程度的吸附和解吸,从而实现离子的分离。
6. 记录和分析数据在分离完成后,离子色谱仪会输出一系列数据,包括峰面积、保留时间等。
您可以使用数据处理软件对这些数据进行分析和处理,以获得想要的结果。
根据实际需要,您可以绘制色谱图、计算离子浓度等。
7. 仪器关机离子色谱分析完成后,您需要将仪器进行关机操作。
一般来说,需要按照仪器的操作手册进行关机步骤,如关闭电源、排气等。
确保仪器关机后,将其彻底清洁并进行维护,以保证仪器的长期稳定运行。
总结:离子色谱仪使用流程包括准备样品、开机预热、设置仪器参数、装载样品、进行分析、记录和分析数据以及仪器关机等步骤。
ICS-900离子色谱操作流程

ICS-900离子色谱操作规程一样品分析1.观察阴离子淋洗液瓶里淋洗液是否充足,若不足,请加足量。
2.打开氮气瓶阀门,调整分压表为0.2 Mpa, 调节淋洗液瓶压力表为3~6 psi。
3.打开离子色谱电源开关,启动电脑,双击右下角打叉的变色龙图标,出现对话框,点开始按钮,关掉对话框,双击桌面上变色龙软件,直接进入软件浏览器界面,打开控制面板文件夹,双击ICS-900,进入控制面板。
4.点击控制面板上的泵上开按钮,启动泵。
等压力稳定后打开抑制器电源,设好电流,阴离子25mA,阳离子59mA.5.点击蓝色圆圈,开始采集基线,等基线平稳后,再点击蓝色圆圈,停止基线采集。
6.点击左数第四个按钮,进入浏览器界面,编辑样品表。
此时可以新建样品表,也可以复制以前样品表。
7.新建样品表:点击文件,在下拉菜单中点新建,出现对话框,直接点击5次下一步,给样品表命名后,点确定,再点确定,此时出现编好的样品表,再修改样品个数,样品名,样品类型,点保存。
8.复制样品表:见附录一。
9.点击开始/停止批处理按钮(红色圆圈选中的按钮) ,出现对话框。
依次点击就绪检查,开始按钮,弹出请进样对话框,先用注射器注入样品,再点确定,此时开始分析样品。
二数据处理1 .等标准曲线做完后开始数据处理,双击第一个标准样品,点击黄色按钮。
2. 对下面四个表进行编辑。
综合表:在数量量纲处输入单位,一般为mg/L3. 检测表:在红色圈处输入最小峰面积值,推荐0.01。
选中第一行,点增加一行。
在下拉菜单中选中禁止积分,按回车键。
找到所要禁止积分峰的起始时间分别输入到保留时间格内,直至将所有不要的峰全部禁止为止。
4. 峰表:右键单击空白处,选择自动生成峰表。
出现对话框点击确定,再点确定。
然后在表格峰名字处输入名称双击窗口下面空格,出现对话框,依次选择相对,最接近峰,在窗口宽度处输入5,点确定,点F9。
如果是单点校正直接进入下面的数量表,如果是多点校正则双击校正类型下面空格,出现对话框,将强制过零点前面的勾勾掉,点确定,点F9。
离子色谱操作教程

离子色谱操作程序一、准备工作:➢去离子水:必须准备足量的去离子水➢淋洗液:配制好要用的淋洗液➢配制标准溶液:提前准备好预分析离子的标准溶液(均用去离子水配制)➢样品:进样前要用0.45 m的过滤膜过滤➢检查淋洗液的液面高度,不应低于200ml二、开关机:1、开机:➢打开N2保护气,调钢瓶分压在0.1-0.2Mpa之间,淋洗液前仪器压力表3-6psi之间;➢打开IC、PC电源开关;打开仪器软件开关、开泵;➢开泵稳定一段时间后压力大于1000psi后打开抑制器;➢检验仪器是否正常:压力1300-1500psi以下,一般阳离子1140-1160psi 之间,阴离子在1140-1180之间;系统压力的波动应小于±10psi;阴离子的背景电导应低于20μS;阳离子的背景电导应低于10μS;内部无泄漏;抑制器、废液出口有连续气泡,泵出口无气泡2、关机:➢关抑制器➢关泵➢关软件➢关保护气➢关电源离子色谱程序设定方法1、打开色谱工作站,点击计算机代码,双击与控制面板2、确认各模块的“connected”图标均为绿色后,点击红色正方形图标(stop flow)和绿色三角图标(continue),开泵(pump on/off),设定流速3、点击蓝色圆形图标(acquisition on/off),选ECD-ECD_1,选择抑制器类型,输入淋洗液浓度,点击“确定”开始采集基线(如果这次和上次用的同一个系统,则可以直接连接后开泵,点击蓝色图标采集基线) 4、阳离子分析:柱:CS12A 抑制器:CAES 淋洗液:20mM MSA 淋洗液流量:1.0ml/min测试电流:65mA阴离子分析:柱:AS14 抑制器:ASRS_4mm 淋洗液:3.5mM Na2CO3/1.0Mm NaHCO3 淋洗液流量:1.2ml/min 测试电流:20mA5、设定运行程序(Program File)➢依次点击file和new,选择program file,点击“OK”,点击“下一步”,确认泵的工作方式(isocratic)、淋洗液通道%A、高/低压极限(设为0-3000psi)和流速是否正确,点击“下一步”。
离子色谱操作规程

离子色谱操作规程离子色谱(Ion Chromatography, IC)是一种常用的分离和分析离子的技术。
它利用离子交换作用,将带电的离子在离子交换柱上进行分离,并通过检测器进行定量分析。
离子色谱在环境分析、食品安全、生物医药等领域有着广泛的应用。
下面是离子色谱操作规程的示范:一、实验前准备1. 确保离子色谱仪设备完好,充分检查各个部件的状态,如离子交换柱、检测器、泵浦等。
2. 准备好所有的实验试剂和溶剂,保证其纯度和质量。
3. 校准离子色谱仪,并记录校准数据。
4. 将样品放置在离子色谱仪使用前的冰箱中保持稳定。
二、试样制备1. 按照样品类型和分析要求选择合适的样品制备方法,并注意遵循标准操作程序。
2. 如果需要稀释样品,请使用纯水或适当的缓冲液进行稀释,并记录稀释倍数。
三、离子色谱仪的操作步骤1. 打开离子色谱仪电源,并等待其启动。
2. 打开相关软件,并根据实验需要进行选择。
3. 调节离子交换柱温度和流动相,并确保其稳定。
4. 根据样品的类型和浓度设置合适的进样量,并将样品注入进样器中。
5. 调节检测器的工作参数,如流速和灵敏度。
6. 开始运行离子色谱仪,并记录相关的图谱和数据。
7. 根据需要进行数据处理和分析,如果有问题需要重新运行实验。
四、离子色谱仪的维护与保养1. 实验结束后,关闭离子色谱仪,并清洗离子交换柱,避免交换柱内部积聚物质。
2. 定期检查离子交换柱和检测器的状态,如需更换请及时处理。
3. 定期进行仪器的校准和维护,以确保其正常运行。
4. 注意仪器及试剂的保存,离子色谱仪应放置在干燥、无尘的环境中。
五、安全事项1. 注意操作规程,避免操作失误和仪器损坏。
2. 处理样品和溶剂时,佩戴适当的防护装备,如手套、护目镜等。
3. 禁止直接接触高浓度的化学品和毒性物质。
4. 禁止私自拆卸或修理离子色谱仪,如出现问题应及时联系专业技术人员。
通过严格按照离子色谱操作规程进行实验,可以确保离子色谱仪的正常运行和数据的准确性。
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离子色谱操作教程离子色谱操作程序一、准备工作:➢去离子水:必须准备足量的去离子水➢淋洗液:配制好要用的淋洗液➢配制标准溶液:提前准备好预分析离子的标准溶液(均用去离子水配制)➢样品:进样前要用0.45 m的过滤膜过滤➢检查淋洗液的液面高度,不应低于200ml二、开关机:1、开机:➢打开N2保护气,调钢瓶分压在0.1-0.2Mpa之间,淋洗液前仪器压力表3-6psi 之间;➢打开IC、PC电源开关;打开仪器软件开关、开泵;➢开泵稳定一段时间后压力大于1000psi后打开抑制器;➢检验仪器是否正常:压力1300-1500psi以下,一般阳离子1140-1160psi之间,阴离子在1140-1180之间;系统压力的波动应小于±10psi;阴离子的背景电导应低于20μS;阳离子的背景电导应低于10μS;内部无泄漏;抑制器、废液出口有连续气泡,泵出口无气泡2、关机:➢关抑制器➢关泵➢关软件➢关保护气➢关电源➢➢击“OK”,点击“下一步”,确认泵的工作方式(isocratic)、淋洗液通道%A、高/低压极限(设为0-3000psi)和流速是否正确,点击“下一步”。
选择手动进样“manual”,进样时间设为30s➢将acquisition time调整至0-18min,点击“下一步”,确认以下参数:采样频率(5Hz),自动调零“Yes”池温柱温均为“35℃”选择抑制器类型,输入淋洗液浓度,电流为推荐值,点击“下一步”➢选择“review the program in a new window”,点击“完成”➢在程序的第一行添加一下提示信息:message “请进样”,删除“0.000”的“inject”(注意:绿色字体为注释信息,不起作用)➢存盘退出(推荐存入独立的“program”子目录中)2、建立方法文件(mothed file)➢依次点击file和new,选择method file➢依次点击file 和save as,存盘退出(推荐存入独立的“method”子目录中)3、建立样品表(sequence)➢依次点击file和new,选择sequence(using wizard),点击“OK”,点击“下一步”(连续两次次)填入未知样的数量“number of”和每个样的平行测定次数“injection per”,点击“apply”,点击“下一步”,填入标准样品的数量“number of”和每个样的平行测定次数“injection per”,点击“apply”,点击“下一步”,选择正确的程序文件,点击“open”,选择正确的方法文件,点击“open”,选择方法文件和程序文件,选择正确的报告文件,点击“下一步”,为这个sequence起名“sequence name”,点击“完成”8、运行标准样品➢点击蓝色圆形图标(acquisition on/off),选择“yes”,停止采集基线➢依次点击batch 和start。
➢点击“add”,打开需要运行的样品表➢点击“ready check”,如果样品表没有错误,将出现“ready check was successful”提示,点击“确定”➢点击“start”,注入样品,点击“确定”4、处理标准曲线(以多点校正为例)➢依次点击file和browser,双击需要处理的标准样品文件(第一个标准点),依次点击view 和QNT-Editer➢点击屏幕左下角“General”,在“Dimension of”处输入浓度单位“mg/L”➢点击相邻的“Detection”,设定最小峰面积为0.005。
点击键盘“↓”,选择“是(Y)”将新生成的“Minimum Area”重新选为“Inhibit Integration”,按“Enter”键➢点击键盘的“↓”后,将鼠标放在水负峰和F-之间的水平基线处,在Ret.Time[min]的第三行输入屏幕左下角显示的时间“2.5”➢点击相邻的“Peak Table”选择Edit、Autogenerate Peaktable,依次点击OK和确定,在“Peak Name”下顺序输入离子名称,注意:定性分析到此结束。
如需进行单点校正,直接执行下一步。
在“Cal.Type”下“Lin”处双击左键,选择“Linear with Offset”,点击“OK”,在“Loff”处点击右键,从弹出的对话框中选择“Fill Column”➢点击相邻的“Amount Table”,注意:如果进行单点校正,在“Amount [mg/L]”处输入各个组分的浓度,存盘退出➢在“Amount [mg/L]”处点击右键,依次选择Columns和Edit Amount Columns。
点击“Auto-Generate”,按“Apply”键,按“OK”键退出➢在“Amount”下输入各个组分的标准点浓度,屏幕右上方立即出现某一离子的标准曲线,点击“Integration”图标,选择“Calibration”,查标准曲线合格后,存盘退出离子色谱的基本操作一、淋洗液的配制:➢阳离子——20mM的MSA(甲磺酸)。
配制:2.6mlMSA(分析纯即可)溶解在2升的淋洗液瓶中。
注意配制过程中MSA要用0.45um的滤膜过滤,以防止堵塞管路。
➢阴离子——3.5mMNa2CO3/1.0mMNaHCO3。
配制:称取37.1g Na2CO3/8.4g NaHCO3(分析纯即可)定容于1升的容量瓶中,配成350mMNa2CO3/100mMNaHCO3的阴离子淋洗液母液(可保留半年),用前需稀释100倍,即取20ml母液于2升的淋洗瓶中。
➢注意:淋洗液配制过程中一定要充分摇匀。
二、样品前处理➢过滤:0.22µm, 0.45µm过滤膜➢稀释:未知样品稀释100倍➢基体消除:去除样品中所包含的,有可能损坏仪器或者影响色谱柱/抑制器性能的成分(如:重金属离子、有机大分子)去除样品中所包含的,有可能干扰目标离子测定的成分(如:高离子强度基体)三、SRS使用注意事项➢淋洗液中含有机溶剂时,使用外接水或者化学抑制;➢尽量将电流设定为自动生成电流的最小值以延长抑制器的使用寿命;➢抑制器与泵同时开关;或当泵压1000psi以上在开抑制器➢每周至少开机一次,保持抑制器活性;➢长期不用应封存抑制器;➢重新启用前需要水化抑制器,具体操作如下:①ASRS ——从ELUENT OUT处注入3mL H2O从REGEN IN处注入5mL H2O②CSRS ——从ELUENT OUT处注入3mL H2O从REGEN IN处注入5mL H2O完成上述操作后,将抑制器平放30分钟。
四、阴、阳离子色谱柱的更换:➢准备工作:要在换柱之前开泵和抑制器洗柱,至少30min,直到仪器稳定为止,因为仪器稳定才说明柱子内部液体以充满。
➢更换系统:更换淋洗液、保护柱、分离柱、抑制器;接通电源,停泵,设置淋洗液存量;打开保护柱进口的接头,开泵;排气泡,调节流速;清洗管路,用试纸检验流出溶液的pH值,与分离柱要求的淋洗液一致后停泵;拧紧保护柱进口的接头,进行正常操作。
➢注意:每个接口的正确对应,保护柱和色谱柱连接时要注意液流方向,保护柱箭头向下、色谱柱箭头向上。
抑制器连接时注意阴阳离子的不同,阴离子的regen in/out均为平头接口,而阳离子则只有regen out为平头接口,注意更换。
换下来的柱子及抑制器一定要密封好,已保持内部有溶液,防止内部溶液干掉,阴离子的抑制器regen in/out用专用堵头密封。
➢柱子装好后先开泵看是否漏水(气),再装上外面的两块面板。
五、排气泡:如果淋洗液被抽干或者更换需要排气泡。
➢具体操作:首先开泵,将注射器插入右侧主泵,旋松主泵的旋钮,此时有液体从泵中流出,流到8ml左右关闭泵,拧紧主泵旋钮,取出注射器,弹出注射器内气泡,然后将注射器插回主泵,打开左侧副泵旋钮后,再缓慢打开主泵旋钮,慢慢将注射器内液体推入泵内,从副泵流出,旋紧两个泵的旋钮。
六、测柱头压:要检查是否是柱子被堵塞时要分别测不地方的柱头压力。
➢正常的柱头压力值:过六通阀到保护柱前正常压力100psi以下;过保护柱后压力小于500-600psi;过分析柱后压力小于1500psi;系统正常压力1300-1500psi以下。
七、分离柱的存储与清洗➢分离柱的储存:在存储前用淋洗液正常运行至少10min,取下保护柱和分离柱,用死接头将分离柱/保护柱两端封堵➢分离柱的清洗:按清洗液—色谱柱—保护柱的流路进行清洗,流速为 1.0ml/min;清洗程序及时间为:去离子水-15min,清洗液-60min,去离子水- 15min,淋洗液-30min➢清洗液的类型阴离子柱:①低价态亲水离子污染(常用—— X10倍淋洗液②高价态疏水离子污染——80% 乙腈/20% 200mM NaCl(用HCl调节pH=2.0)③金属离子污染——0.1M 草酸阳离子柱①高价阳离子/酸溶性污染——10mM HCl(15min)—— 1M HCl(60min)——10mM HCl(15min)②疏水性阳离子/有机污染——10% 100mM HCl/ 90% 乙腈(30min)八、抑制器的存储与清洗➢抑制器的存储:➢抑制器的清洗:以1.0mL/min的流速,按清洗液-ELUENT IN-ELUENT OUT-REGEN IN-REGEN OUT流路进行清洗➢清洗液的类型阴离子抑制器①金属污染或沉淀——0.1M KCl/1.0M HCl(30min)——去离子水(10min)——0.2N 硫酸——淋洗液(10min)②有机污染——10%1.0M HCl/90%ACN(30min)——去离子水(10min)——0.2N 硫酸——淋洗液(10min) Na2CO3➢阳离子抑制器①金属污染或沉淀——1.0MMSA(30min)——去离子水(10min)——0.2N NaOH——淋洗液(10min)②有机污染——10%1.0M MSA/90%ACN(30min)——其余同上。