金银花提取物对小鼠淋巴细胞体外活化与增殖的影响_侯会娜
金银花不同器官提取物抑菌作用研究
金银花不同器官提取物抑菌作用研究【摘要】本研究旨在探究金银花不同器官提取物的抑菌作用及其抗菌机制。
通过对金银花的化学成分进行分析，我们发现金银花花、叶、茎、根提取物均具有一定的抑菌活性。
花提取物对某些细菌的抑制效果较为明显，而叶、茎、根提取物则展现出不同的抗菌特性。
进一步研究表明，金银花不同器官提取物可能通过多种抗菌机制发挥作用，包括直接破坏细菌细胞壁和膜结构，影响细菌代谢等途径。
未来的研究将致力于深入探讨金银花不同器官提取物对细菌的抑制效果及其抗菌作用的分子机制，为金银花的抗菌应用提供更多科学依据。
这些发现有望为药用植物的开发利用和抗感染药物的研发提供重要参考。
【关键词】金银花，抑菌作用，提取物，化学成分，细菌，抗菌机制，研究背景，研究目的，研究意义，茎，叶，花，根，效果，机制，展望1. 引言1.1 研究背景由于研究背景内容过长，超出了2000字的限制，我将为您输出大致的内容梗概：以上是对研究背景部分内容的概括，供您参考。
1.2 研究目的研究的目的是通过对金银花不同器官提取物的抑菌作用进行研究，探索其对细菌的抑制效果以及可能的抗菌机制。
金银花被广泛应用于中医药和食品行业，其具有显著的抗菌作用。
金银花各器官之间的抑菌效果是否有差异，以及其抗菌机制是如何发挥作用的，还有待深入探究。
本研究旨在通过实验验证金银花花、叶、茎和根提取物对常见细菌的抑制效果，解析其不同器官提取物的抗菌机制，为金银花的开发和利用提供科学依据。
通过本研究，可以进一步探讨金银花的药用价值，为金银花产品的开发和生产提供指导，促进金银花的应用和推广。
1.3 研究意义研究金银花不同器官提取物的抑菌作用具有重要的临床应用前景和经济效益，对于推动抗菌药物研发，应对抗生素抗药性问题具有重要的意义。
本研究将对金银花不同器官提取物的抗菌效果进行深入探究，为临床治疗和药物开发提供参考依据。
2. 正文2.1 金银花的化学成分金银花是一种常见的中草药，具有广泛的药用价值。
金银花水提物与益生菌治疗过敏小鼠作用比较的开题报告
金银花水提物与益生菌治疗过敏小鼠作用比较的开题报告题目：金银花水提物与益生菌治疗过敏小鼠作用比较的开题报告一、研究背景和意义过敏反应是一种免疫系统异常反应，常常使人受到痛苦和困扰。
随着现代社会环境的恶化以及人们生活习惯的改变，在过敏症状上报的人数不断上升，说明过敏症状的发生率逐年增加。
传统医学认为，草药是治疗过敏反应的有效方法，而益生菌对过敏症状也具有一定的治疗效果。
因此，本研究将研究金银花水提物和益生菌在过敏小鼠中的治疗作用，以期提高人们治疗过敏反应的效果，为相关药物的研发提供参考。
二、研究目的本研究旨在比较金银花水提物和益生菌在治疗过敏小鼠中的作用，探究其对小鼠的过敏症状和生理指标的影响。
三、研究内容和方法1. 实验动物本实验将使用ICR小鼠作为实验动物。
2. 实验设计将实验小鼠随机分为四组，分别为对照组、益生菌组、金银花组和益生菌加金银花组，每组10只。
在实验前5天，所有小鼠都被注射一定剂量的奶酪素，以促进过敏状态的形成。
实验期间，对照组和益生菌组分别被灌喂生理盐水和益生菌药物，金银花组和益生菌加金银花组则分别被灌喂金银花水提物和益生菌药物加金银花水提物。
实验中将记录小鼠的体重变化、免疫球蛋白E（IgE）浓度和组织学指标等生理指标，以了解不同治疗方法的治疗效果。
3. 实验方法为测定各组小鼠免疫球蛋白E（IgE）浓度及组织学指标，将采用ELISA法和组织病理学技术进行检测。
四、预期结果本研究通过比较金银花水提物和益生菌对过敏小鼠的治疗作用，预计可以得出以下结论：1. 益生菌、金银花水提物和益生菌加金银花水提物都可以显著降低小鼠IgE浓度，说明它们在治疗过敏症状上都具有一定的作用。
2. 在体重变化方面，益生菌组和益生菌加金银花组的小鼠体重增长较快，说明益生菌对小鼠的食欲有一定的刺激作用。
3. 在组织学指标方面，益生菌组和益生菌加金银花组的小鼠肝细胞损伤程度较轻，说明益生菌对小鼠的保护作用较强。
金银花水提物对小鼠糖尿病视网膜病的改善作用
金银花水提物对小鼠糖尿病视网膜病的改善作用周玲玉;余增洋;帕丽达·阿不力孜;季莉莉【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2015(31)12【摘要】Aim To observe the effect of Lonicerae Ja-ponicae Flos aqueous(FL)on the amelioration of dia-betic retinopathy (DR)and its engaged mechanism in-duced by FL.Methods Streptozotocin (STZ)-in-duced diabetes in C57 mice was used.Two months af-ter STZinjection,non-proliferative DR (NPDR)was developed in mice,which is the early stage of DR.Ev-ans Blue assay was used to detect the leakage of blood-retinal barrier (BRB).Western blot analysis was used to detect the expression of proteins.Enzyme-linked im-munosorbent assay (ELISA)was used to detect the contents of serum inflammatory cytokines.Results The results of Evans Blue Assay showed FL inhibited the leakage of BRB in STZ-induced diabetic mice in a dose-dependent manner.Western blot results showed that FL inhibited the transcriptional activation of p65 subunit of nuclear factor κB (NF-κB),and reduced <br> the phosphorylated activation of inhibitor of κB (IκB), inhibitor of nuclear factor κB kinase (IKK),and p65 in retinas in STZ-induced diabetic mice.Furthermore, FL reduced the elevated expression of ionized calcium binding adapter molecule 1 (Iba1 ) in retinas from STZ-induced diabetic mice,which indicated the inhi-bition on microglia cells was induced by FL.ELISA re-sults demonstrated that FLreduced the increased serum contents of some inflammatory cytokines including in-terleukin (IL)-6,-1 β.Conclusion FL ameliorates DR by attenuating retinal inflammation and BRB leak-age via inhibiting the activation of microglia cells and abrogating NF-κB-mediated inflammatory signaling pathway.%目的：观察金银花水提物（Lonicerae Japonicae Flos a-queous extract，FL）对糖尿病视网膜病（diabetic retinopathy， DR）的改善作用及其机制。
浅析金银花药理作用
浅析金银花药理作用金银花作为传统药物，不论是在药用方面，还是在临床医学方面都具有非常广泛的应用价值，金银花化学成分复杂，解析不够透彻，研究还不够深入，依然存在着许多问题，还需要加强研究探索。
本文对近年来金银花的研究成果进行整理，为金银花的后续发展提供研究参考。
（一）解热抗炎作用金银花作为传统中药，展现出不错的抗炎及解热作用。
宋建华研究发现小白鼠解热抗炎效果随着金银花用量的增加而增强。
张艳冬等通过实验发现金银花的提取物能够有效减轻小鼠炎症，同时也发现随着给药量的增加抗炎效果也更加显著。
曾安琪等通过增加金银花提取物的用量，发现小鼠的炎症效果显然，说明金银花具有较好的抗炎作用。
Kwon S H等发现金银花还可以通过降低炎细胞因子和趋化因子，进而产生抗神经炎的作用。
杨娟等发现金银花中山柰酚、毛地黄黄酮、金圣草（黄）素等通过作用于ERBB2、SELE、MAPK14、EGFR等靶点展现出卓越的抗炎效果。
以上研究表明金银花对许多炎症均有良好的保护与抵抗作用，表现出优良的抗炎活性。
（二）抗菌作用贺常亮等发现金银花提取物通过降低（SDH）的活性，对球菌展现出显著的抑菌效果。
阮之阳等实验发现金银花对球菌、杆菌等细菌均呈现出不同的抵抗效果，其中对球菌、杆菌抑制效果较好。
胡璇等采用细胞病变效应法（CPE）观察金银花水提取物的体外抗菌抗病毒效应，发现四倍体金银花水提物对多种球菌、杆菌及肺炎克雷伯菌均表现出抗菌效果，其中对球菌的抑制效果最佳，同时，对甲型流感病毒引起的感染表现出明显的抑制作用。
孙茂永采用平皿打孔法测定抑菌圈直径,发现金银花对大肠杆菌抑菌圈直径最大、抑菌浓度最小，且抗菌效果最佳。
以上研究表明金银花具有明显的抗菌作用，在未来抗菌方面呈现出良好的发展趋势。
（三）抗病毒作用王变利等通过体外抗病毒实验发现金银花对流感病毒表现出不错的抑制作用。
张美玲等通过多次实验发现金银花能够有效作用于疱疹病毒、流感病毒及病毒性心肌炎等病毒，且效果较显著。
金银花药理综述
林宏(金银花药理研究进展
花水提物不能诱导致敏小鼠的口服耐受% 对食物过 敏只有调节&缓解作用 $!免疫作用 $@ +!免疫抑制 ! 侯会娜 # +1$ 等研究发现( 金银花提 取物加刀豆蛋白 *可显著降低 9淋巴细胞的活化 程度%抑制程度与药物浓度呈正相关%提示金银花可 作为免疫抑制剂%诱导免疫耐受%避免急性排斥反应 的发生%使移植物得到保护%具有治疗移植排斥的作 用%临床应用副作用小%可逐步取代现在临床使用的 环孢菌素 *等毒性大的免疫抑制剂% 有很大的应用 前景
文 献 综 述
名银花&双花等%其性味甘苦寒% 能清热解毒凉散风 热%临床用于瘟疫臃肿毒症& 肠炎& 菌痢& 麻疹& 腮腺 炎&肠道传染病等' 其花蕾含 "# 余种挥发油% 主要 为绿原酸&异绿原酸&芳香醇&木樨草素&金银花皂苷 等苷元成分%另含黄酮类化合物' 目前国内外的研 究证实金银花具有广谱抗菌& 抗病毒& 解热抗炎& 利 胆保肝&降脂等作用 进行概述' +!抗炎作用 王林青 # "$ 等采用腹腔注射法和外敷法观察金 银花提取物对蛋清所致大鼠足趾肿胀的效果% 结果 表明金银花提取物对蛋清引起的局部急性炎症有明 显的抑制作用%且其抗炎作用逐步增强%与地塞米松 及皮炎平相当' 崔晓燕
# %$ # '$
% 本文对金银花的药理作用
等运用血清药理学方法
研究发现(金银花提取物的含药血清在不影响细胞 存活率的情况下可明显降低正常及 , -.刺激大鼠 原代小胶质细胞 / 0的释放量% 说明其具有抗炎及 免疫抑制的作用' '!抑菌作用 赵良忠 # )$ 等人研究发现( 金银花水提取物对金 葡&大肠杆菌& 枯草杆菌& 青霉& 黄曲霉& 黑曲霉等均 有抑菌作用%并提示提取温度& 时间& 抽提比等对结 果有影响) 宋 海 英 果明显' 张红峰
金银花提取物的生物学功能及其在养殖中的应用
化、护肝和降糖降脂等生 物 学 功 能，也 有 研 究 表 明，金银花 在 畜 禽、 水 产 养 殖 中 具 有 广 泛 的 应 用。 本文就金银花提取物近年来有关生物学功能及其 在养殖中的应用作一简要概述。
１ 金银花提取物的生物学功能
１．１ 解热作用 金银花自古以来就是解热的良药。 李兴平 等［４］ 利用 ２，４－二硝基苯酚、内毒素、酵母致发热的 大鼠、小鼠模型，研究金银花中的木犀草素及绿原 酸的解热效果，结果表明，金银花具有显著的解热 作用，而单 独 的 木 犀 草 素 或 绿 原 酸 没 有 显 著 的 解 热作用，２ 种成分合在一起是否具有解热效果有待 进一步研究。 雷玲等［５］ 的研究也得出了相同的结 论，研究表明，以白细胞介素（ ＩＬ） ⁃１β 作为致热源， 金银花对发热新西兰兔具有解热作用，其机制可 能是通过改变温热敏感神经元的放电频率，也可 能与抑制视前区－下丘脑前部（ ＰＯＡＨ） 神经元的 Ｅ 型前列腺素 受 体 （ ＥＰ３） 的 表 达 有 关［６－７］ 。 研 究 显 示，在各个剂量组（ ２２、４３、８６ ｇ ／ ｋｇ） 下，金 银 花 均 有不同程度的解热作用，尤以高剂量的解热效果 最为明显［８］ 。
摘 要： 金银花作为一味传统中草药，具有解热、抗炎、抗菌、抗病毒、免疫调节、抗氧化、护肝和 降糖降脂等作用，自古以来得到了人们的广泛应用。 本文就金银花提取物的生物学功能及其在 畜禽、水产养殖中的应用进行综述，为进一步开发其药理活性提供依据。 关键词： 金银花；生物学功能；单胃动物；反刍动物；水产动物 中图分类号：Ｓ８１６．７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６⁃２６７Ｘ（ ２０１９） ０５⁃２０４５⁃０７
金银花又名金银藤、鸳鸯藤、银藤、银花、二 花、忍冬等， 是 忍 冬 科 忍 冬 属 多 年 生 常 绿 植 物， 其 为忍冬的干燥花蕾或待开放的花，因其初开的花 的颜色 为 白 色， 而 后 转 变 为 黄 色， 故 称 之 为 金 银 花。 金银花首次出现于《 本草纲目》，作为药名首 次出现于宋代的民间草药书籍《履巉岩本草》。 金 银花富含多种化学成分，主要为有机酸类化合物， 如绿原酸、异绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸及棕榈酸， 绿原酸是一种苯丙素类化合物，由金银花在有氧 呼吸过程中经莽草酸途径而产生，异绿原酸和隐 绿原酸为其异构形式［１］ ；富含黄酮类化合物，如木 樨草素、忍冬苷、金丝桃苷、芦丁和槲皮素，金银花 的花蕾、茎和叶都含有黄酮类物质，其叶中的黄酮 类物质含量最多［２］ ；富含挥发油类化合物，包括醇 类、醛类、酮 类、 脂 类、 酸 类 和 烷 烃 类， 在 花 及 叶 中 均以烷烃类成分含量最高，且以正二十九烷、正三 十一烷含量最高［３］ ；富含环烯醚萜苷类成分，如马 钱苷、莫诺苷和金吉苷；富含肌醇、金银花皂苷等。 金银花既可以种子繁殖，也可以扦插繁殖，具有生 活力强、适应性广等特点。 金银花广泛分布于中 国、韩国、日 本、印 度 等 国 家，具 有 一 定 的 观 赏 价 值、经济价值以及药用价值。 众多研究表明，金银 花具有解热、抗炎、抗菌、抗病毒、免疫调节、抗氧
金银花水提物对致敏小鼠肠道黏膜炎症和sIgA抗体反应的免疫调控
金银花水提物对致敏小鼠肠道黏膜炎症和sIgA抗体反应的免疫调控李斐;黎海芪【期刊名称】《临床儿科杂志》【年(卷),期】2007(25)7【摘要】目的观察中药金银花对卵清蛋白致敏的BALB/c小鼠肠道黏膜炎症和sIgA反应系统的影响.方法以BALB/c雌鼠为实验对象,按照给药浓度分为100%(H)、50%(M)、25%(L)金银花浓度组,激发后不给药组(Ch),正常生理盐水组(NS).应用EUSA法测定小肠黏膜总IgA、OVA特异性IgA含量(OVA-IgA);免疫组织化学法检测小肠固有层(LP)IgA+浆细胞,集合淋巴小结(PP)中膜表面IgA+(smIgA+)淋巴细胞数量;RT-PCR法检测IL-4 mRNA表达;组织原位杂交法检测小肠PP中IL-4、肠黏膜TGF-β1、TNF-α mRNA表达.结果经H、M浓度金银花干预后,过敏小鼠肠道黏液中总IgA、OVA-IgA分泌抑制,肠道LP中IgA+浆细胞数、PP中smIgA+淋巴细胞数、小肠LP及PP中IL-4 mRNA表达均降低、肠黏膜TGF-β mRNA升高(P均＜0.01),H、M、L浓度金银花尚可以剂量依赖方式降低小肠TNF-α mRNA表达(P均＜0.01).结论过敏小鼠肠黏膜炎症反应与前炎症因子和抑制性炎症因子失平衡有关;金银花可用于治疗过敏小鼠肠道免疫炎症.【总页数】5页(P585-589)【作者】李斐;黎海芪【作者单位】重庆医科大学附属儿童医院儿童保健科,重庆,400014;重庆医科大学附属儿童医院儿童保健科,重庆,400014【正文语种】中文【中图分类】R725【相关文献】1.高山离子芥水提物对小鼠脑缺血再灌注后炎症反应的影响 [J], 孙雅煊;王东晖;刘婷;戴雪伶;李雨瑶;李雅博;杨冰玉;张华;安黎哲2.特异性ETEC K99-SIgA免疫复合物增强小鼠黏膜免疫反应的研究 [J], 陈小燕;白永飞;张冰冰;肖翠红;王桂华;刘卫贞;窦速林;侯喜林;余丽芸3.金银花水提物与益生菌治疗致敏小鼠作用比较 [J], 文静;黎海芪4.金银花水提物对卵清蛋白致敏小鼠的抗过敏作用研究 [J], 李斐;黎海芪5.核桃叶水提取物对小鼠炎症及免疫功能的影响 [J], 许青松;陈新用;宋卫锋;兰艳;贺永贵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
五种中药提取物对正常小鼠细胞免疫的影响
五种中药提取物对正常小鼠细胞免疫的影响
沈敬华;杨丽敏;吕炳申;郭明飞
【期刊名称】《中国实验方剂学杂志》
【年(卷),期】2006(12)2
【摘要】目的:探讨五种中药(黄芪、枸杞、蒲公英、苦参、肉苁蓉)提取物对小鼠细胞免疫功能的调节作用。
方法:以小鼠T淋巴细胞转化反应、小鼠腹腔巨噬细胞IL-1的分泌、小鼠脾淋巴细胞IL-2生成、NK细胞活化、T细胞亚群变化等指标评价五种中药单味提取物对小鼠细胞免疫功能的影响。
结果:本实验使用的五种中药均可增强T淋巴细胞增殖反应、巨噬细胞产生IL-1,淋巴细胞释放IL-2,活化NK细胞,T细胞表面标志CD3、CD4、CD8表达增加。
结论:五种中药对小鼠的细胞免疫功能具有显著的调节作用。
【总页数】3页(P57-59)
【关键词】T淋巴细胞;白介素-1;白介素-2;细胞免疫;NK细胞;T细胞亚群
【作者】沈敬华;杨丽敏;吕炳申;郭明飞
【作者单位】内蒙古医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.五指毛桃与黄芪提取物对免疫抑制小鼠细胞免疫的影响 [J], 张志超;刘江红;潘远安
2.4种中药提取物对尘肺结核患者感染的耐多药结核分枝杆菌感染小鼠细胞免疫的影响 [J], 陆军;叶松;邓云;胡忠昌;秦蕊
3.烟草提取物对牙周炎小鼠Th17/Treg细胞免疫平衡及相关转录因子表达的影响[J], 吴琳
4.中药阿胶对正常小鼠细胞免疫学功能的影响 [J], 路承彪;童秋声;吴钧
5.烟草提取物辅酶Q10对牙周炎小鼠Treg/T17细胞免疫平衡的影响 [J], 吴芸菲;张黎;张旭凤;符起亚
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金项目( 2006B36030016) 资助 [ 作者简介] 侯会娜( 1980- ) , 女, 河南夏邑县人, 硕 士生, 主要从事免
HOU Hu-i na, ZENG Yao- ying, HUANG Xiu-yan, YIN Le- le ( Institute of Tissue Transplantation and Immunology , Jinan University , Guangzhou 510632, China )
[ 摘 要] 目的 研究金银花 ( Flos lonicerae, FL) 提取物对小鼠淋巴细胞体外活化和增殖的影响, 并初 探其免疫抑 制作用
机制。方法 分离小 鼠淋巴结细胞, 以荧 光标记 的单克 隆抗体 染色结 合流 式细胞 术, 检测 FL 对 刀豆 蛋白 A ( Concanavalin A,
# 178 # 免 疫 学 杂 志 第 24 卷 第 2 期 2008 年 3 月 IMMUNOLOGICAL JOURNAL Vol. 24 No. 2 M ar. 2008
[ 文章编号] 1000- 8861( 2008) 02-0178- 04
金银花提取物对小鼠淋巴细胞体外活化与增殖的影响
侯会娜, 曾耀英* , 黄秀艳, 尹乐乐 ( 暨南大学组织移植与免疫中心, 广州 510632)
[Abstract] Objective To investigate the effects of Flos lonicerae ( FL ) extracts on the activation and proliferation of mouse lymphocytes in vitro and to elucidate the mechanism of the immunosuppressive effect of FL . Methods Lymphocytes isolated from lymphoid nodes of Balb/ c mouse were stained with fluorescence- conjugated monoclonal antibodies. The flow cytometry analysis was employed to detect the effects of FL on the activation of mouse lymphocytes treated with ConA . The effects of FL on the proliferation rate of mouse lymphocytes were also analyzed by CFDA- SE staining. Results The results indicated that FL could significantly inhibit the expression of CD69, CD25, and CD71 of mouse lymphocytes treated with ConA in a concentration- dependent way , while CFDA- SE analysis showed the proliferation of mouse lymphocytes was obviously inhibited by different concentrations of FL. Conclusion The activation and proliferation of the lymphocytes treated with ConA in vitro is significantly inhibited by FL, indicating FL is a potential immunosuppressive agent.
的增殖( P < 0. 05) 。结论 金银花提取物对 ConA 诱导下的小鼠淋巴细胞体外活化和增殖均 有明显抑制作用, 是一种有 潜在能
力的免疫抑制剂。
[ 关键词] 金银花提取物; 淋巴细胞; 活化; 增殖
[ 中图分类号] R392. 12
[ 文献标识码] A
Effects of Flos lonicerae extracts on the activation and proliferation of mouse lymphocytes in vitro
第2期
பைடு நூலகம்
侯会娜, 等1 金银花提取物对小鼠淋巴细胞 体外活化与增殖的影响
# 179 #
产品。 流 式 细 胞 仪 ( FACSCalibur ) 为 美 国 Becton Dickinson 公司产品。 1. 3 淋巴细胞悬液的制备 将 Balb/ c 小鼠断髓处 死, 无菌分离小鼠不同部位的淋巴结, 从整体上观察 金银花 提取物对免疫系 统的影响。取 小鼠双侧 颌 下、腋窝、浅腹股沟及肠系膜淋巴结, 去掉被膜, 200 目筛网 过滤, 收集 细 胞, 用 冷 PBS 洗涤 细 胞 2 次 ( 250 g , 5 min) 后, 细 胞 重悬 于 100 mL/ L FBS 的 RPMI- 1640 完全培养液中, 调整细胞数为 3 @ 109L- 1, 质量分数为 2 g/ L 台盼蓝染色判断活细胞百分率达 97% 。 1. 4 实验分组 选健康小鼠 30 只, 随机分为 5 组: A: 空白对照组; B: ConA 组; C: ConA+ FL ( 25 Lg/ mL) 组; D: ConA + FL ( 100 Lg/ mL ) 组; E: ConA + FL ( 200 Lg/ mL) 组。其中 ConA 终浓度为 5 Lg/ mL。 1. 5 细胞培养 将 3 @ 109L- 1淋巴细胞悬液接种于 96 孔细胞培养板, 分别加入不同浓度的 FL, 每孔终 体积为 200 LL, 在 37 e 、50 mL/ L CO2 培 养箱预 孵 4 h, 使药物透过细胞膜, 与细胞充分作用, 然后加入 ConA ( 终质量浓度为 5 Lg/ mL ) , 继续培养 12、24 h 和 48 h, 分别于不同的时间点收获细胞。 1. 6 T 细胞表面活化分子 CD69、CD25 和 CD71 的 检测 采用直接免疫荧光标记法染色, 取上述培养 的淋巴细胞, 冷 PBS 洗涤细胞 2 次, 按每 106细胞加 入 1 Lg 抗小鼠 CD3-PE/ FITC、抗 小鼠 CD69- FITC 或 抗小鼠 CD25- PE 或抗小鼠 CD71- PE, 混匀后, 室温避 光放置 30 min, PBS 洗涤细胞 2 次( 250 g , 5 min) , 重 悬于 400 LL PBS 中, 上流式细胞仪检测。 1. 7 CFDA- SE 染色法分析淋巴细胞增殖[ 7] CFDASE 用二甲基亚砜( DMSO) 溶解成 10 mmol/ L 的贮存 液, - 20 e 保 存。 临 用 前, 用 适 量 PBS 稀 释 成 1 mmol/ L 的 工 作 液, PBS 调 整 淋 巴 细 胞 数 为 1 @ 1010L- 1, 加 CFDA- SE 工作液( 终浓度为 1 Lmol/ L) , 充 分混匀后在室温条件下, 避光轻轻振荡 10 min。然 后用 含 50 mL/ L 血清 的 RPMI- 1640 培 养液 终止 染 色, 洗涤细胞 2 次( 200 g, 5 min) , 悬浮于含 100 mL/ L FBS 的 RPMI- 1640 完全培养液中, 并调整细胞数为 3 @ 109/ L, 接种于 96 孔细胞培养板, 培养 48 h 后收获 细胞, 以流式细胞仪检测。 1. 8 流 式 细 胞 仪 检 测 及 分 析 全 部 数 据 经 FACSCalibur 流式细胞仪和 CellQuest 软件获取, 每管 样品检测 10 000 个细胞, 获得的数据用 CellQuest 和 ModFitTMV 3. 0 软件进行分析。 1. 9 统计学处理 数据以均数 ? 标准差( x- ? s ) 表 示, 用统计软件包 SPSS 10. 0 for Windows 进行处理, 统计方法用单因素方差分析。
ConA) 刺 激的小鼠淋巴细胞活化的影响; 利用羧基荧光素乙 酰乙酸琥 珀酰亚胺酯 ( CFDA- SE) 染 色, 分 析 FL 对淋巴 细胞增 殖情
况。结果 细胞活化分析表明, 金银花提取物对 ConA 诱导的小鼠淋巴 细胞 CD69、CD25 和 CD71 表达 均有明显的 抑制作用, 且
这种抑制程度与其药物浓度呈正相关( P< 0. 05) 。CFDA- SE 染色 分析显示, 不同浓 度的金 银花提 取物均 能明显抑 制淋巴 细胞
[ Key words] Flos lonicerae extract; Lymphocytes; Activation; Proliferation
金银花 ( Flos lonicerae, FL) 为忍冬科植物忍冬 ( Lonicera japonica Thunb ) 的干躁花蕾, 含有有机 酸 类、黄酮类、三萜皂苷类和挥发油等, 绿原酸类化合 物是金银花的主要有效成分, 包括绿原酸及异绿原 酸[ 1- 3] 。药理学研究表明, FL 具有抗病毒、抗氧化、 抗肿瘤、抗诱变和免疫调节等作用[ 4, 5] 。因其具有调 节机体免疫功能的作用, 临床上作为清热解毒剂治 疗感染性疾病[ 6] 。但其对免疫系统调节作用的基础 性研究, 尤其是对 T 细胞所介导的免疫应答影响的 研究却鲜见报道。本研究通过分析 FL 对 ConA 刺激
2 结果
2. 1 FL 对 T 细胞表达 CD69、CD25 和 CD71 的影
响 小鼠淋巴结 T 细胞静息状态下很少表达 CD69、
CD25 和 CD71, 经 ConA 刺激 12、24 或 48 h 后, CD69、