腺苷脱氨酶(ADA)
腺苷脱氨酶检测方法研究进展
腺苷脱氨酶检测方法研究进展【摘要】腺苷脱氨酶是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属巯基酶，能催化腺嘌呤核苷转变为次黄嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次黄嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸。
测定体液中ada活性对临床某些疾病的鉴别、诊断、治疗以及免疫功能研究等具有重要意义。
本文对各种检测腺苷脱氨酶活性的方法学做了评述，并对检测腺苷脱氨酶新技术进行了展望。
【关键词】腺苷脱氨酶；方法学；研究进展；综述1 ada的生物化学腺苷脱氨酶（ada）广泛分布于人体各组织中，以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高，肝、肺、肾和骨胳肌等处含量较低。
血液ada主要存在于红、白细胞(淋巴细胞、粒细胞)中,其含量为血清中的40-70倍。
ada 有两种同工酶即ada1和ada2,其主要作用是催化腺苷, 2’-脱氧腺苷脱氨转化为肌苷和2’-脱氧肌苷。
ada1普遍存在于人体内，保证了其作用底物腺苷和2’-脱氧腺苷含量的下调，因为一个较低水平的腺苷、2’-脱氧腺苷对人体细胞发挥正常生理功能十分有益。
它也存在于红细胞内，红细胞可通过某种有效的机制获取2’-脱氧腺苷并使其内在化。
因此，红细胞对循环的2’-脱氧腺苷形成了一个透析系统，以保护有核细胞不被过多的2’-脱氧腺苷损伤。
2 方法学发展趋势近十几年来，随着对ada的深入研究，检测方法也不断发展。
现对检测腺苷脱氨酶活性的方法主要特点进行简述：腺苷测定法[1]: ada将腺苷脱氨产生次黄苷和氨。
一个ada活性单位在测试特定条件下每分钟脱氨1μmol腺苷成为次黄苷。
通过动态测量腺苷265nm处吸光度下降的速度，可以测算ada的活性大小，kaplan法由此建立。
由于高底物浓度造成吸光度过高，该法仅适用于腺苷浓度低于40μmol/l。
如此低的底物浓度达不到底物饱和要求，造成ada活性检测失真。
因此，该法不适用于临床应用。
奈氏显色法[2]：原理为腺苷脱氨酶催化腺嘌呤核苷水解，产生次黄嘌呤核苷和氨。
ada催化底物产生的氨与奈氏试剂作用，然后进行比色测定。
腺苷脱氢酶(ADA)
腺苷脱氢酶（ADA）一、定义腺苷脱氨酶（Adenosine deaminase）是一种参与嘌呤代谢作用的酶。
它是用作拆解食物组织中的核酸中的腺苷。
在人体中，它主要参与了免疫细胞的制造；若该酶突变，会造成T细胞、B细胞、自然杀伤细胞皆无法表现的严重复合型免疫缺乏症(SCID)二、异构体有两种ADA同种型：ADA1和ADA2。
（一）ADA1存在于大多数体细胞中，特别是淋巴细胞和巨噬细胞中，它不仅存在于胞质溶胶和细胞核中，而且还存在于与二肽基肽酶-4（aka，CD26）连接的细胞膜上的外胚层中。
ADA1主要参与细胞内活动，并且以小形式（单体）和大形式（二聚体）存在。
小型到大型的相互转换受肺中“转换因子”的调节。
（二）ADA2首次在人类脾脏中发现。
随后在包括巨噬细胞在内的其他组织中发现它与ADA1共存。
这两种同种型调节腺苷与脱氧腺苷的比例，增强了寄生虫的杀灭。
ADA2主要存在于人血浆和血清中，并且仅作为同型二聚体存在。
三、临床意义（一）、用于肝胆疾病的诊断1．急性肝炎患者ADA与ALT均显著升高。
乙型肝炎患者ALT的升高大于ADA，而非甲非乙肝炎病人ADA的升高大于ALT，非甲非乙肝炎患者ADA活性极度升高者多易转变为迁延性肝炎。
2．慢性肝炎患者ADA活性均升高，慢性活动型肝炎比非活动型升高更甚。
3．肝纤维化、肝硬化及慢性肝炎患者ADA活性显著升高而ALT 不升高，所以同时测定ALT和ADA更具有临床价值。
4．阻塞性黄疸ADA不升高，而肝细胞性黄疸ADA活性升高，因此测定血清ADA有助于黄疸类型的鉴别诊断。
（二）、用于结核性胸膜炎及结核性腹膜炎的诊断胸腹腔积液ADA活性测定，可区别胸腹腔积液的性质。
结核性胸膜炎及结核性腹膜炎病人胸腹腔积液中ADA活性明显高于癌症和心衰性胸腔积液中的ADA活性，且积液中ADA/血清ADA的比值大于1，所以测定胸腹水和血清ADA活性及比值是诊断结核性胸膜炎和结核性腹膜炎的一项可靠有效的指标。
腺苷脱氨酶与临床疾病的相关性
腺苷脱氨酶与临床疾病的相关性摘要】腺苷脱氨酶（ADA）它能催化腺苷和脱氧腺苷脱氨生成次黄苷和脱氧次黄苷,最终氧化成尿酸排出体外,并与细胞免疫反应相关。
ADA是由T淋巴细胞(T 细胞)产生的,ADA含量与T细胞数相关,与T细胞的增殖、分化关系更为密切。
腺苷脱氨酶广泛分布在人体组织中，它与多种疾病的发生、发展关系密切，测定其活性有助于肝脏疾病；恶性血液病；良、恶性胸腔积液；中枢神经系统感染性疾病的早期诊断与鉴别诊断。
【关键词】腺苷脱氨酶肝脏疾病恶性血液病良、恶性胸腔积液中枢神经系统感染性疾病1 腺苷脱氨酶代谢及分布腺苷脱氨酶(ADA),系统命名为腺嘌呤核苷酸氨基水解酶,编号为Ec 3、5、4、4,分子量:35kD,100kD。
ADA是一种巯基酶,是嘌呤核苷酸代谢的关键酶。
ADA有3种,其中2种为单体酶,另1种为酶-糖蛋白结合体。
ADA有两种同功酶ADA1和ADA2,它能催化腺苷和脱氧腺苷脱氨生成次黄苷和脱氧次黄苷,最终氧化成尿酸排出体外,并与细胞免疫反应相关。
ADA广泛分布在人体组织中,以胸腺、脾和其他淋巴组织中含量最高,在纤维细胞、羊水细胞、肝、肾、肺、骨胳肌中也有发现,血液中ADA主要存在于红、白细胞(淋巴细胞、粒细胞)中,其中含量为血清中的40～70倍，各种细胞内ADA含量各不相同，淋巴细胞ADA活性较红细胞高10倍以上[1]。
ADA是由T淋巴细胞(T细胞)产生的,ADA含量与T细胞数相关,与T细胞的增殖、分化关系更为密切。
目前ADA检测试剂已标准化,可应用全自动生化分析仪进行检测，ADA目前可用于胸腹水良恶性鉴别[2]、肝脏疾病的诊断、中枢神经系统感染性疾病鉴别及恶性血液病诊断的研究。
ADA对这些疾病的诊断、疗效观察和发病机制的相关性研究已有很大进展，本文对其临床应用作一简要综述。
2 腺苷脱氨酶与临床疾病2.1 腺苷脱氨酶与肝脏疾病肝脏疾病患者中血清ADA升高常提示病情不断进展,可反映肝脏储备合成功能逐渐降低。
腺苷脱氨酶缺陷症
ADA还参与神经递质的合成与代谢，对神经系统发 育和功能具有重要作用。
腺苷脱氨酶缺陷症的遗传性
01
ADA缺陷症属于常染色体隐性 遗传病，由常从父母那里继承了两 个异常的基因拷贝，导致ADA 活性降低或完全缺失。
03
家族遗传史是诊断ADA缺陷症 的重要依据之一。
筛查
通过血液检测或其他相关检测方法，对高风险人群进行腺苷脱氨酶缺陷症的筛查，以便早期发现和治 疗。
预防策略与措施
预防感染
01
避免与感染人群接触，注意个人卫生和环境卫生，以降低感染
的风险。
饮食调整
02
根据患者的具体情况，制定个性化的饮食计划，确保摄入足够
的营养素，增强免疫力。
药物治疗
03
在医生的建议下，使用适当的药物进行治疗，以缓解症状和预
02
易患感染性疾病
患者容易感染细菌、病毒等病原 体，且感染后病情较重，恢复缓 慢。
03
自身免疫疾病风险 增加
腺苷脱氨酶缺陷症患者发生自身 免疫疾病的几率增加，如风湿性 关节炎、系统性红斑狼疮等。
对神经系统的影响
01
02
03
智力发育迟缓
腺苷脱氨酶缺陷症患者智 力发育可能受到影响，表 现为学习能力、认知能力 低下。
支持性护理与康复
心理支持
为患者和家庭提供心理支持，帮助他们应对疾 病带来的心理压力。
营养支持
根据患者的营养需求，提供个性化的营养支持 方案。
康复训练
针对患者的具体情况，进行有针对性的康复训练，如语言、运动、认知等方面 的训练。
04
腺苷脱氨酶缺陷症的预防与 管理
遗传咨询与筛查
遗传咨询
向患者及其家庭成员提供关于腺苷脱氨酶缺陷症的信息，帮助他们理解疾病的风险、症状和治疗方法 。
检验科腺苷脱氨酶ADA标准操作规程
检验科腺苷脱氨酶（ADA）标准操作规程【目的】体外检测血清腺苷脱氨酶（ADA）含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理ADA腺苷 + H2O 次黄甘 + 氨PNP次黄甘+磷酸次黄嘌呤+核糖-1-磷酸XOD次黄嘌呤+2H2O 尿酸+H2O2POD2H2O2+4-AA+TOOS+H3+O 红色苯醌色素+5H20在上述反应中，通过在546nm处测定红色苯醌色素生成速率，即可测得样本中腺苷脱氨酶（ADA）的活性。
二、试剂1.试剂本科使上海复星长征医学科技有限公司ADA试剂盒，为液体双试剂。
各组分如下：试剂1（R1）4-氨基安替比林 0.4g/L嘌呤核苷酸磷酸化酶 1.3KU/L黄嘌呤氧化酶 2KU/L过氧化物酶 2KU/L试剂2（R2）TOOS 0.9g/L腺苷 4.0 G/L2.校准要求2.1使用与试剂配套使用的复星长征腺苷脱氨酶校准血清对测定进行校。
2.2校准间隔2.2．1 试剂批号变更时，使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。
三、操作按生化分析仪操作要求结合长征试剂说明书输入测定参数，并按校准、质量控制、样本测定的顺序进行常规测定。
血清腺苷脱氨酶ADA测定
血清腺苷脱氨酶ADA测定1.实验原理应用ADA偶联嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)，黄嘌呤氧化酶(XOD)和过氧化物酶(POD)反应连续监测法。
ADA酶解腺苷(Adenosine)脱氨产生次黄苷(Inosine)；再通过偶联PNP的作用，生成次黄嘌呤(Hypoxanthine);后者在XOD氧化作用下生成尿酸和过氧化氢；最后在POD的作用下H2O2再与N-乙基-N-(2-羟基-3-硫丙基)-3-甲基苯胺(EHSPT)、4-氨基安替比林(4-AAP)反应(Trinder氏反应)，生成紫红色的有色醌。
通过测量有色醌550nm处吸光度上升的速度来测算ADA的活性。
ADAAdenosine + H2O Inosine + NH3PNPInosine + Pi Hypoxanthine + Ribose 1-phosphateXODHypoxanthine + 2H2O + 2O2 Uric acid + 2H2O2POD2H2O2 + 4-AA P+ EHSPT 4H2O + Quinone dy e2. 标本：2.1 病人准备：新鲜血清，采血后应及时分离，避免溶血。
2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。
3. 标本存放：血清，采血后应及时分离避免溶血，ADA在4℃稳定一个星期。
4. 标本运输：冰冻条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血等存运输的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：亚太ADA试剂盒（H013 090920 试剂1＋试剂2）6.1.1 试剂组成6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为12个月。
试剂必需避光保存。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：试剂出现颗粒或浑浊，被视作变质，应停止使用。
6.1.5 注意事项：试剂请勿直接接触皮肤、眼睛，如有接触，请用大量清水清洗。
请勿吞服。
6.2 校准品：使用亚太提供的专用校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪项目测定参数.SOP文件。
腺苷脱氨酶(ADA)的检测及临床应用
ＡＩ 嘿 呤 饮 ｆ分 解 代 鲥过 程 中 起 关 键 作 用 的 酶 ， 能 ） Ａ １ ： 它
催 化 腺 嵘 呤 核 ＿ 降 解 为 次 黄 嘌 呤 核 苷 ， 后 经 核 苷 磷 酸 化 酶 催 ｆ ｛ ＝ 而 化 成 次 嘌 呤 ， 终 钣化 成 代 谢产 物 尿 酸 。 最
４ 重 症 联 合 免 疫 缺 陷 病 （ Ｃ Ｄ 的 产 前 诊 断 ． Ｓ Ｉ）
ＡＩ 缺 ） Ａ
乏与Ｓ Ｉ Ｃ Ｄ有关 ， 至今 发现约有 １４ ／ ／ ～１ ２的 ｇ Ｉ 因先 天缺 Ｃ Ｄ是
乏 Ａ ＤＡ造 成 的 ， 且 也 证 实 了 ＡＤ 属 常 染 色 体 隐 性 遗 传 。 并 Ａ
肝 损 害 程 度 方 面 ， 结 核 患 者 服 用 抗 痨 药 物 最 常 见 引 起 肝 损 如
害 ， Ａ 较 Ａ 敏感 ， 且 可 作 为 非 甲非 乙型 肝 炎 的标 记 。 ＡＤ Ｉ Ｔ 并
在 临床 方 面 的应 用 利用 相 同 血 型 红 细 胞 悬 液 ， 处 理 破 坏 其 中 的淋 巴 细胞 后 经
临床 测 定 胎 儿 羊 水 中纤 维母 细胞 Ａ ＤＡ 活 性 能 有 效 地 对 Ａ ＤＡ
ＡＩ ） Ａ属 于一 种筑 幕 酶 ， 一 分 子 含 两 个 活 性 巯 基 ， 活 性 每 其 能 被 对 氯 笨 ｝酸 完 伞 抑 制 。 Ａ ｝ １ ＤＡ 基 因 位 于 第 ２ Ｏ对 染 色 体
孙 菲
【 键 词 】 腺 苷脱 氨 酶 ； 方 法 ； 临 床 实 验 室技 术 关
中图分类号 ：４６１ Ｒ ４ ．
文 献 标 识 码 ： Ｂ
文 章 编 号 ：６ ３４ ３ （０ ８ １一 １ １Ｏ １７ —１０ ２０ ）２ｌ ５一２ 有 关 资 料 证 实 ， 性 淋 巴 细 胞 性 白血 病 的 Ｔ 淋 巴 细 胞 活 性 增 急 强， 而慢 性 淋 巴 细 胞 性 白血 病 和 何 杰 金 氏淋 巴瘤 患 者 外 周 血 Ｔ
医学检验·检查项目：血清腺苷脱氨酶(ADA)_课件模板
血清ADA活性增高见于： ① 肝脏疾 病：急性黄疸性肝炎，肝细胞出现损伤， 在黄疸尚未出现前，可见增高。因ADA分 子量较ALT小，当肝细胞轻度受损时ADA比 ALT先释入血内。慢性肝炎活动期，慢性 迁延性肝炎升高明显；肝硬化、原发性肝 癌时，ADA活性也升高。 ② 肿瘤引起的 阻塞性黄疸
相关症状： 黄疸、腹水、咳嗽、血红蛋白尿、血尿、 尿频伴尿急和尿痛。
医学检验·各论：血清腺苷脱氨酶（ADA） >>>
相关疾病：
溶血过度所致贫血、原发性肝癌、再生障 碍性贫血、膀胱癌、前列腺癌、小儿腺苷 脱氨酶缺乏、肝硬化、溶血性贫血、急性 淋巴细胞性白血病、黏脂贮积症Ⅰ型、病 毒性肝炎、肺结核、肠结核。
医学检验·各论：血清腺苷脱氨酶（ADA） >>>
简介：
40～70倍，T淋巴细胞比B淋巴细胞该酶活 性更高。
腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫活 性有重要关系的核酸代谢酶。测定血液、 体液中的ADA及其同工酶水平对某些疾病 的诊断、鉴别诊断、治疗及免疫功能的研 究日趋受到临床重视。
医学检验·各论：血清腺苷脱氨酶（ADA） >>>
Байду номын сангаас
医学检验·各论：血清腺苷脱氨酶（ADA） >>>
临床意义：
前列腺癌和膀胱癌、网状细胞瘤、淋巴瘤、 溶血性贫血、风湿热、伤寒、痛风、重症 地中海贫血、骨髓性白血病、结核、自身 免疫性疾病、传染性单核细胞增多症和心 力衰竭等均可引起此酶升高。 ③ 结核性 胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不 增高，而血清中ADA活性二者无明显差别， 故测定胸腹水中A
谢谢！
医学检验·各论：血清腺苷脱氨酶（ADA） >>>
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
腺苷脱氨酶（ADA）
参考值：0-15U/L 海丰参考区间4~24U/L
介绍：腺苷脱氨酶(ADA)为一种与机体细胞免疫活性有重要关系的核酸代谢酶，其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。
ADA广泛存在于各组织中，以盲肠、小肠黏膜、脾脏、胸腺中含量最高，肝脏、肺、肾、心脏、骨骼肌、神经组织等处含量较低，肝脏含量约为小肠的7%~10％。
肝内ADA90％存在与细胞浆水溶性部分，其余在细胞核内。
此外，血细胞(红细胞、粒细胞、淋巴细胞)内ADA活性约为血液中40倍~70倍，因此测定ADA时应避免溶血。
血清中的ADA主要来自肝脏，所以肝细胞损伤或膜通透性增强，均可使血中酶活性增高，故可依据该酶活性增高或降低反映肝细胞损伤和恢复程度。
血清腺苷脱氨酶（ADA）正常值：
(1)酶速率法(37℃)：健康成年人：7.7-19.3 U/L
(2)分光光度法：<25 U/L
(3)比色法：健康成年人为：5～25 U/L
诊断参考：
肝脏疾病：
ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与ALT或GGT等组成肝酶谱能较全面地反映肝脏病的酶学改变。
一．ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，可作为肝功能常规检查项目之一，与AIT或GGT等组成肝酶谱。
（1）用于判断急性肝损伤及残留病变急性肝炎时ALT明显升高。
ADA仅低度，中度升高。
但重症肝炎发生酶胆分离时，尽管ALT不高，而ADA常明显升高。
而ALT恢复正常，ADA持续升高者，常易复发或易迁延为慢性肝炎。
（2）协助诊断慢性肝病在反映慢性肝损伤时ADA较ALT为优。
慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高，因而可判断慢性肝病的程度。
另外，
慢性活动性肝炎活性明显高于慢性迁延性肝炎。
故可用于二者的鉴别诊断。
（3）有助于肝纤维化的诊断ADA活性差异与肝细胞损害关系不大，与肝纤维化程度相关。
肝纤维化程度增加，ADA活性增加。
（4）有助于黄疸的鉴别据文献报道，阻塞性黄疸血清ADA活性明显低于肝细胞性黄疸及肝硬化伴黄疸。
二.肿瘤引起的阻塞性黄疸，前列腺癌和膀胱癌，网状细胞瘤，淋巴瘤，溶血性贫血，
风湿热，伤寒，痛风，重症地中海贫血，骨髓性白血病，结核，自身免疫性疾病，传染性单核细胞增多症和心力衰竭等均可引起此酶升高。
3.结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高，而血清中ADA活性二者无
明显差别，故测定胸腹水中ADA活性有助于将两者鉴别。
4.结核性脑膜炎ADA显著增高，而病毒性脑膜炎则不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统
白血病稍增高，所以脑脊液ADA检测可以作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标。
5.血清ADA活性降低见于：见于重度免疫缺陷症状。
阿米巴肝脓肿（ALA）ADA活性明显减少。
重症联合免疫缺陷病（SCID）血液病
Valentine等报道慢性溶血患者红细胞ADA活性显著升高，为正常人的45～70倍。