岛津LC高效液相色谱仪使用维修保养操作规程

1目的：建立岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程，确保仪器的正确操作。2范围：本规程适用于岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养。

3责任：化验室负责人，化验员。

4内容：

4.1概述

本系统由四元低压梯度系统输送泵、自动进样器、UV检测器、柱温箱、LabSolutions色谱数据工作站和电脑等组成。

4.2原理

储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱固定相内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。

4.3技术参数

流量设定范围0.0001～10 mL/min 流速精度±1% 或±2µL/min 最大操作压力44MPa 进样数216个样品外形尺寸mm 410×500×605mm 波长重现性±0.1nm

温控精度±0.1℃波长范围190～700nm

噪声±2.5×10-6AU 漂移100×10-6AU/h 4.4设备安装位置

设备名称放置房间

LC-2030型高效液相色谱仪精密仪器室

4.5操作方法

4.5.1准备

4.5.1.1准备所需的流动相，用合适的0.45µm滤膜过滤，超声脱气20～30min。

4.5.1.2根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）。

4.5.1.3配制样品和规范溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45µm滤膜过滤。

4.5.1.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

4.5.2开机

接通电源，依次开启高效液相色谱仪开关，电脑主机、显示器，待高效液相色谱仪自检结束后，打开色谱工作站。

4.5.3等度洗脱

4.5.3.1排气

打开Purge，点击程序中的“自动排气”，系统自动进行排气，若使用多通道，根据实际需要选择通道进行排气；如果不出液，用针头接上“p”的管路，进行抽气，至到有液体从“Purge”这个管路排出。

4.5.3.2参数设定

4.5.3.2.1波长设定：在[数据采集]窗口的[时间程序视图]中[检测器A]，选择波长(1)输入所需波长。

4.5.3.2.2流速设定：在[数据采集]窗口的[时间程序视图]中[泵]，选择泵总流量，输入所需流速。

4.5.3.2.3流动相比例设定：在[数据采集]窗口的[时间程序]中[泵]，选择所用泵，输入泵项下所需的浓度比例。

4.5.3.3设置好后，点击“下载”系统自动按照设置好的方法，进行走基线。

4.5.3.4基线平稳后，方可进样。可以进行单次分析或批处理分析。

4.5.3.4.1单次分析:单击[数据采集]窗口助手栏上的“单次开始”图标；设置“样品名”“方法文件”“数据文件”“样品瓶”“样品架”“进样体积”等信息；点击确定，系统即自动进行单次分析。

4.5.3.4.2批处理分析:单击[数据采集]窗口助手栏上的“批处理”图标；从[文件]菜单中选择[新建批处理文件]；设置“样品名”“方法文件”“数据文件”“样品瓶”“样品架”“进样体积”等信息；点击保存，保存批处理文件；点击[批处理]助手栏中的“批处理开始”，系统即执行批处理程序。

4.5.4梯度洗脱

4.5.4.1排气:打开Purge，点击程序中的“自动排气”，系统自动进行排气，若使用多通道或梯度，根据实际需要选择通道进行排气；如果不出液，用针头接上“p”的管路，进行抽气，至到有液体从“Purge”这个管路排出。

4.5.4.2参数设定

4.5.4.2.1波长设定：在[数据采集]窗口的[时间程序视图]中[检测器A]，选择波长(1)输入所需波长。

4.5.4.2.2流速设定：在[数据采集]窗口的[时间程序视图]中[泵]，选择泵总流量，输入所需流速。

4.5.4.3 梯度洗脱设置程序:在[数据采集]窗口的[时间程序视图]，选择[时间程序]图标中的[LC 时间程序]；设置程序洗脱的时间及流动相比例；设置完后应以controllerstop（控制仪器停止）为结尾；点击“时间程序”查看设置时间程序是否正确；点击“泵”选择泵，调节压力限制(最大压力设为20.0MPa)；

4.5.4.4 设置好后，点击“下载”系统自动按照设置好的方法，进行走基线。

4.5.4.5 基线平稳后，方可进样。可以进行单次分析或批处理分析。

4.5.4.5.1单次分析:单击[LC实时分析]窗口助手栏上的“单次开始”图标；设置“样品名”“方法文件”“数据文件”“样品瓶”“样品架”“进样体积”等信息；点击确定，系统即自动进行单次分析。

4.5.4.5.2批处理分析:单击[数据采集]窗口助手栏上的“批处理”图标；从[文件]菜单中选择[新建批处理文件]；设置“样品名”“方法文件”“数据文件”“样品瓶”“样品架”“进样体积”等信息；点击保存，保存批处理文件；点击[批处理]助手栏中的“批处理开始”，系统即执行批处理程序。4.5.5泵的清洗

检测完毕后，如流动相无盐、酸及缓冲液，可直接用甲醇或乙腈冲洗30分钟即可，如流动相含有盐、酸及缓冲液，先用甲醇:水=10:90冲流30分钟，再用甲醇冲洗30分钟即可。

4.5.6样品测试完毕后，绘制规范曲线。方法如下：

4.5.6.1点击“LabSolutions”中的再解读图标，LC再解读开始；

4.5.6.2单击[再解读]助手栏中的[LC数据分析]图标，出现[LC数据分析]窗口；

4.5.6.3选择[文件]菜单中的[打开数据文件]，然后选择与测量的数据文件，数据文件打开；

4.5.6.4单击助手栏中的[向导]图标，出现[化合物向导]；

4.5.6.5请确保设置了正确的积分参数，然后单击[下一步]；

4.5.6.6记录要识别的峰的保留时间，然后单击[下一步]；

4.5.6.7指定定量计算方法和校准曲线类型，然后单击[下一步]；

4.5.6.8设置识别的方法，然后单击[下一步]；

4.5.6.9提供化合物表的详细设置，然后单击[完成]；

4.5.6.10单击[LC数据]助手栏中的[应用到方法]图标；

4.5.6.11命名方法文件并单击[保存]；

4.5.6.12单击[确定]而不进行任何更改；

4.5.6.13单击[再解读]助手栏中的[校准]图标；

4.5.6.14打开用于生成校准曲线的方法文件；

4.5.6.15拖入需要作校准曲线的数据，即得出校准曲线。

4.5.7使用校准曲线计算数据浓度

4.5.7.1选择[文件]菜单中的[打开数据文件]，然后指定数据文件名；

4.5.7.2选择[文件]菜单中的[加载方法参数]，然后指定方法文件名，出现[方法参数]屏幕；

4.5.7.3使用方法文件中的校准曲线计算数据的浓度。

4.5.8出具报告

4.5.8.1根据需要设置相应的报告格式；

4.5.8.2把测定的数据拖入设置好的报告模块中，即得报告。

4.5.9关机

全部分析完毕后，先关检测器和柱温箱电源，再用适宜的溶剂清洗色谱系统。依次关闭系统控制器、泵和微机电源，拔下各插头，做好使用记录。