高中生物第二部分酶的应用实验6α_淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测学案浙科版选修1
高中生物第二部分酶的应用实验6α_淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测自我小测浙科版选修精编版

高中生物第二部分酶的应用实验6α_淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测自我小测浙科版选修精编版第二部分酶的应用实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测1淀粉在有关酶的作用下依次生成的物质是…()①糊精②葡萄糖③果胶④麦芽糖⑤蔗糖A.①②③④⑤ B.⑤④①②③C.①③⑤② D.①④②2本实验中α-淀粉酶的固定是将其水溶性的酶用物理或化学的方法固定在下列的哪一物质上( )A.有机硅胶 B.活性炭C.石英砂 D.明胶3下列叙述中不属于本实验所使用的α-淀粉酶特性的是( )A.是大肠杆菌的α-淀粉酶B.其作用的最适pH是5.5~7.5C.其作用的最适温度是50~75 ℃D.其化学本质是蛋白质4将固定化酶装柱后,当底物经过该柱时,底物发生的变化是( ) A.底物被稀释了B.底物被浓缩了C.底物的结构变得更加稳定了D.底物被酶水解成产物了5本实验保存在冰箱中取出后再重复实验,将得到下列的哪一结果( )A.由于时间太久,酶已经失去了活性,因此,用淀粉指示剂鉴定后溶液不显色B.由于时间太久,酶已经失去了活性,因此,用淀粉指示剂鉴定后溶液显蓝色C.固定化酶是能够较长时间保持活性的,因此,用淀粉指示剂鉴定后溶液显红色D.固定化酶是能够较长时间保持活性的,因此,用淀粉指示剂鉴定后溶液显无色6(2009江苏高考,3)下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是( )A.固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B.固定化酶的应用中,要控制好pH、温度和溶解氧C.利用固定化酶降解水体中有机磷农药,需提供适宜的营养条件D.利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物7在淀粉水解成葡萄糖的过程中,依次起作用的酶是( )①糖化淀粉酶②β-淀粉酶③α-淀粉酶A.①②③ B.③②①C .①③② D.③①②8下列关于对固定化酶中用到的反应柱的理解,正确的是( )A .反应物和酶均可自由通过反应柱B .反应物和酶均不能通过反应柱C .反应物能通过,酶不能通过D .反应物不能通过,酶能通过9关于固定化酶技术说法正确的是( )A .固定化酶技术就是固定反应物,将酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B .固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C .固定化酶中的酶无法重复利用D .固定化酶是将酶固定在一定空间的技术10多孔玻璃可使木瓜蛋白酶固定,这一固定化酶的方法属于下列的( )A .共价偶联法B .吸附法C .交联法D .包埋法11参照教材实验,请简述用多孔玻璃固定木瓜蛋白酶的方法。
上课用《实验六-α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测》(浙科版选修1)1

——固定化酶技术
一、酶与固定化酶
• 酶 活细胞产生的具有生物催化作用的 生物大分子。
• 固定化酶 (固相酶)
将水溶性的酶用物理或化学 的方法固定在某种介质上, 使之成为不溶于水而又有酶 活性的制剂。
固定化酶的优缺点
1、固定化酶(技术)的优点: (1)使酶既能与反应物接触,又能与产物 分离; (2)固定在载体上的酶可以被反复利用。 2、固定化酶(技术)的缺点:
用水稀释淀粉滤液1倍后再观察颜色。
实验后,用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置 在4℃冰箱中,几天后再重复上述实验,看是否有 相同的结果。
样品 水
① 对照 + ②样品1 ③样品2 ④样品3 -
淀粉溶 淀粉滤
液
液
-
-
+
-
-
+
-
+
KI-I2 稀释1 结果 溶液 倍
+
- 碘色
+
- 蓝色
+
- 红色
+
+ 浅红
不能催化一系列反应
二、酶的固定化
• 方法: 吸附法 包埋法 共价偶联法 交联法
•目的: 水溶性酶 物理、化学方法 不溶于水且有酶活性 • 机理:
将固定化酶装柱,当底物经过该柱时, 在酶的作用下转变为产物。
(一)、吸附法
吸附法是将酶与吸附剂接触,再经洗涤 除去未吸附的酶便能制得固定化酶。是最简 单的固定化技术,在经济上也最具有吸引力。
b.显色。在流出5mL后接取0.5mL过滤液, 然后向试管中加入1-2滴KI-I2 溶液。切记, KI-I2 溶液不要加入太多,以免碘液颜色覆盖 糊精淀粉反应后的颜色。
2013浙科版选修1第二部分《实验六 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测》word学案1

实验6:α—淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 导学一、酶和固定化酶1.酶:酶是生物体内催化各种反应的催化剂。
酶作为催化剂与一般的催化剂有共同特点:①用量少而催化效率高;②不改变化学反应的平衡点,酶本身在反应反应前后也不发生变化;③可降低反应的活化能。
酶作为生物催化剂的特性有:①催化效率高;②有高度的专一性;③易失活等。
通常情况下酶都是在水溶液中催化底物反应,因此酶在反应系统中是与底物、产物混在一起的,反应结束后,即使仍有较高活力,也很难再回收利用。
另外,在水溶液中起作用的酶也给产物进一步分离纯化带来了一定困难。
2.固定化酶:固定化酶又称固相酶、水不溶性酶,它是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
固定化酶与游离酶相比不但稳定性好,而且与底物和产物容易分离,且易于控制,能反复多次使用,便于运输和贮存,有利于自动化生产。
因此,固定化酶在工业、医学和生化分析等方面的应用发展较快。
直接使用酶和固定化酶催化的优缺点比较二、固定化酶的制作原理酶固定化方法由酶的性质和载体特性所决定,主要包括:吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。
1.吸附法:有物理吸附法和离子交换法两种。
物理吸附法是将酶蛋白的分子吸附在惰性载体上,但要选择不引起变性且能保持一定酶活力的载体,对蛋白质有高度吸附能力的有机硅胶、活性碳和石英砂等。
离子交换法是利用蛋白质的两性性质,使其带有电荷的基团与离子交换剂形成离子键,而被交换结合至交换剂上。
2.共价偶联法(载体偶联法):酶蛋白的一些基团,包括羧基末端、氨基末端等,在温和的条件下能与载体共价结合,从而被固定。
但结合的部位必须不是酶的活性中心,也不是维持其空间结构的必需基团。
这种结合稳定性好,酶不易脱落,可使用较长时间。
3.交联法:是指通过双功能试剂,将酶和酶联结成网状结构的方法,交联法使用的交联剂是戊二醛等水溶性化合物。
4.包埋法:是指将酶包裹在多孔的载体中,如将酶包裹在聚丙烯酰胺凝胶等高分子凝胶中,或包裹在硝酸纤维素等半透性高分子膜中。
2017_2018学年高中生物第二部分酶的应用实验6α_淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测学案浙科版选修1

第二部分酶的应用实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测一、酶与固定化酶1.酶:活细胞产生的具有催化作用的一类有机物,它是生物体内各种化学反应的催化剂。
2.固定化酶:将________的酶用________或________方法________,使之成为________而又有________。
3.将酶改造成固定化酶的原因是:由于酶________,且不利于________,所以要将酶改造成固定化酶。
4.酶固定化的方法有:________法、________法、________法和________法等。
本实验用的是________法。
5.固定化酶作用的机理:将固定化酶________,当________时,在________的作用下________。
答案:2.水溶性物理化学固定在某种介质上不溶于水酶活性的制剂3.在水溶液中很不稳定工业化使用4.吸附共价偶联交联包埋吸附5.装柱底物经过该柱酶转变为产物二、淀粉水解的过程及其在淀粉指示剂下的颜色反应:答案:糊精蓝红不显三、α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测的实验1.实验目的:(1)制备________。
(2)进行________的测试。
2.实验原理:将________酶固定在________上,一定浓度的淀粉溶液经过________后,可使淀粉水解成________。
用________测试,若流出物呈________色,表明有________生成。
3.本实验使用的酶及特性:本实验使用的酶是________酶,其作用的最适宜pH为________,最适宜温度为________。
4.实验设备及用品:5 mL塑料注射器、50 mL烧杯、滴管、自行车用气门芯及夹子、注射器架、试管或微量离心管3支。
5.实验材料及其制备:(1)材料:固定化的α淀粉酶、可溶性淀粉酶、5 mol/L KI—I2溶液。
(2)部分材料的制备:▲α淀粉酶的固定化:▲可溶性淀粉溶液:称取0.127 g________和0.83 g________。
实验6-α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测

固定化原生质体
注意:一般要添加渗透压稳定剂,以防止原生质体破裂。 ①由于去除了细胞壁的扩散障碍,有利于氧气和营养物 质的传递和吸收和胞内产物的分泌。 ②原生质体不稳定,容易破裂,固定化后,由于载体的 保护作用,稳定性提高,可反复使用和连续使用较长的 时间,利于连续化生产。 ③易于和发酵产物分开,有利于产物的分离纯化,提高 产品质量。
①溶解淀粉:50 mg 可溶性淀粉溶于100 mL热水 中,搅拌均匀。 ②过柱:使淀粉溶液以0.3 mL/min的流速过柱, 在流出5mL淀粉溶液后接收0.5 mL流出液。 ③检测:加入1-2滴KI-I2溶液,观察颜色变化。 用水稀释1倍后再观察颜色。
固 定 化 酶 柱
淀粉完全水解?
每分钟6滴
控制流速:让淀粉和淀粉酶充分接触反应。
关的问题:
(1)通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物,其
原因除水果中果胶含量较高外,还因为
。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
(2)为了获得高产果胶酶微生物的单菌落,通常对分
离或诱变后的微生物悬液进行
。
腐烂的水果中含产果胶酶的微生物较多 涂布分离或划线分离
(3)在某种果汁生产中,用果胶酶处理显著增加了产量
,其主要原因是果胶酶水解果胶使
什么是固定化酶
固定化酶:将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某 种非水溶性介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的 制剂。
游离酶
酶在水溶液中很不稳定,且不利于工业化使用。
固定化酶的优点
①能提高酶的稳定性。 ②可以反复多次使用,大大降低生产成本。 ③反应后易于与产物分离,利于提高产品质量。 ④反应条件易于控制,生产可实现连续化和自 动化。
。果汁
生产中的残渣果皮等用于果胶生产,通常将其提取液浓
浙科版高中生物选修一 第二部分 实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测(共18张PPT)

难以一次性固定化多种酶
物理 吸附法
通过物理吸附Leabharlann 用,把酶固定在纤 维素、琼脂糖、多孔玻璃或离子交
换树脂等载体上
考点二
要点突破
命题设计
技法提炼
返回
实验1.a-淀粉酶的固定化: 方法: 吸附法 载体: 石英砂
淀粉溶液
固定化酶柱
实验二、固定化α淀粉酶对淀粉水解作用的检测
实验原理:一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后 ,可使淀粉水解成糊精,用淀粉指示剂溶液测试, 流出物呈红色表明水解产物糊精生成
酶。
(3)作用:将果胶分解成可溶性的分子,使出汁率提高,也使
浑浊的果汁变得澄清。
考点一
要点突破
命题设计
返回
1.制备固定化a-淀粉酶 2.用固定化a-淀粉酶进行淀粉水解的测定 3.进行固定化a-淀粉酶重复利用效果实验
固定化酶:就是将水溶性的酶用物理或化学的方 法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有 酶活性的制剂。
优点: (1)使酶既能与反应物接触,又能与产物分离; (2)固定在载体上的酶可以被反复利用。
吸附法、 交联法、 包埋法、 共价偶连法
α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
2.酶的固定化方法及适用对象
名称
原理
图示
将微生物细胞均匀地包埋在不溶于 包埋法
水的多孔性载体中
化学 利用共价键、离子键将酶分子或细 结合法 胞相互结合,或将其结合到载体上
1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?
◦ 可在试管中加入1ml可溶性淀粉,再加几滴淀粉酶柱流出液 ,保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色,则流出液中没 有淀粉酶了。
2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?
2017-2018学年高中生物第二章实验四α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测教学案浙科版
实验四α.淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测1.固定化酶就是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
2.酶固定化的方法有吸附法、共价偶联法、交联法、包埋法等。
3.固定化酶的优点:(1)既能使酶与反应物接触,又能使酶与产物分离;(2)固定在载体上的酶可以被反复利用.4.淀粉遇碘显蓝色,糊精遇碘显红色,麦芽糖遇碘不显色。
1.固定化酶(1)概念:将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。
(2)方法:吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。
2.枯草杆菌的α淀粉酶的固定化(1)枯草杆菌的α.淀粉酶作用的条件:最适pH为5。
5~7.5;最适温度为50~75_℃.(2)方法:吸附法,介质是石英砂。
(3)淀粉水解作用的检测原理:错误!错误!错误!错误!错误!错误!错误!遇碘显蓝色遇碘显红色遇碘不显色3.α淀粉酶固定化实验步骤错误!↓错误!↓错误!↓滴加KI。
I2溶液,观察颜色,稀释1倍后再观察颜色↓错误!1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?提示:可在试管中加入1 mL可溶性淀粉,再加几滴淀粉酶柱流出液,保温几分钟后用碘液检验。
如仍显蓝色,则流出液中没有淀粉酶.2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?提示:可以在高温下使淀粉水解快,而且酶不会因高温而失活,所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用.3.判断下列叙述的正误(1)固定化α。
淀粉酶可永久使用(×)(2)用固定化α淀粉酶进行淀粉水解实验时不需考虑温度及pH 的影响(×)(3)α淀粉酶固定化实验结束后,将固定化柱放在常温下即可(×)错误!错误!错误!1.酶的固定化方法名称原理图示包埋法将酶或微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中,分为凝胶包埋法和微囊化法化学结合法利用共价键、离子键将酶分子或细胞相互结合,或将其结合到载体上,分为交联法、共价结合法、离子结合法吸附法通过物理吸附作用,把酶或细胞固定在醋酸纤维素、琼脂糖、多孔玻璃或聚丙烯酰胺等载体上2.直接使用酶和固定化酶比较1.下列关于固定化酶的叙述,错误的是( ) A.既能与反应物接触,又能与产物分离B.可催化一系列反应C.固定在载体上的酶可被反复利用D.酶的活性和稳定性受到限制解析:选B 固化酶能催化一种或一类化学反应,不能催化一系列的化学反应.2.淀粉在有关酶的作用下依次生成的物质是( )①糊精②葡萄糖③果胶④麦芽糖⑤蔗糖A.①②③④⑤B.⑤④①②③C.①③⑤② D.①④②解析:选D 淀粉水解过程为:淀粉错误!糊精错误!麦芽糖错误!葡萄糖,所以依次生成的物质是①糊精、④麦芽糖、②葡萄糖.3.下列有关淀粉水解作用检测的叙述,错误的是( )A.实验后,反应柱可常温保存B.正常情况下,向流出液中滴加KI.I2溶液呈红色C.实验后,用蒸馏水洗涤反应柱,可洗去未反应的淀粉和产物糊精D.实验中,向反应柱中滴加淀粉溶液宜慢,使淀粉溶液以0.3 mL/min的流速过柱解析:选A 实验后,反应柱应低温(4 ℃)保存,以延长酶的寿命.4.在“α.淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”实验中α。
实验6-a淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测(yang)
实验结束后,用 10 倍体积的蒸馏水洗涤注射器 洗去残留的淀粉溶液和产物
层析柱
固பைடு நூலகம்化装置-反应柱:
淀粉溶液 吸附有淀粉酶的石英砂
七、实验结果
淀粉溶液
吸附有α-淀粉酶的石英砂
1234 1、2mL水+1~2滴KI-I2溶液 2、2mL淀粉液+1~2滴KI-I2溶液 3、2mL淀粉滤液+1~2滴KI-I2溶液 4、2mL淀粉滤液+1~2滴KI-I2溶液+稀释1倍
直接使用酶和固定化酶的优缺点
类型
优点
不足
直接 使用
酶
催化效率高, 低耗能、 低污染等
固定 1 提高了酶的稳定性,可 化酶 较长时间贮存和使用
2 可被反复利用,更经济 更利于工厂化生产。 3、既可与反应物接触又 可以与产物分离,产物更 易纯化。
1.对环境条件很敏感,易失活; 2.溶液中的酶很难回收再利用, 提高了生产成本; 3.反应后酶会混在产物中, 可能影响产品质量。
一种酶只能催化一种化学反应, 而在生产实践中,很多产物的 形成都通过一系列的酶促反应 才能得到的
枯草杆菌的a-淀粉酶的固定化
实验目的:1、制备固定化的α-淀粉酶
2、检测固定化α-淀粉酶的效果
实验原理: 本实验是用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上,一
定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,用 淀粉指示剂溶液测试,流出物呈红色表明水解产物糊精生成。
(1) 枯草杆菌的a-淀粉酶作用的条件:最适pH为5.5~7.5 , 最适温度为 50~75 ℃。
(2)方法: 吸附 法,介质是石英砂。 (3)淀粉水解作用的检测原理
糊精
麦芽糖
两次用 10 倍体积的蒸馏水洗涤注射器的目的比较
实验6α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测课件-2020-2021学年高二生物浙科版选修1
载体上的酶还可以
被反复利用
2、催化能力下降
四、“α-淀粉酶固定化”实验
实验目的:1、制备固定化的α-淀粉酶
2、检测固定化α-淀粉酶的效果
实验原理
本实验是用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上,一定浓度 的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,用淀 粉指示剂溶液测试,流出物呈红色表明水解产物糊精生成
包埋法:包括凝胶包埋法和微胶囊包埋法
将酶包裹在多孔的载体中,包埋成格子型或包埋成
微胶囊型
凝胶包埋法,酶 被包埋成网格型
微胶囊包埋法,酶被 包埋成微胶囊型
常用的载体有海藻酸钠凝胶 常用的载体有聚酰胺、 火棉胶、醋酸纤维素
4、比较直接使用酶和固定化酶的优缺点
类型 优点
不足
直接使 用酶 催化效率高,低耗
淀粉α-淀粉酶 糊精β淀粉酶 麦芽糖糖化淀粉酶 葡萄糖
遇碘显蓝色
遇碘显红色
遇碘不显色
枯草杆菌
这里使用的是枯草杆菌的a-淀粉酶,其作用的最适温度为 50~75℃;最适PH为5.5~7.5
设备及用品:5ml塑料注射器 50ml烧杯 滴管 自行车
用气门心及夹子 注射器架 试管及微量离心管3支
实验材料:
除去未吸附的 游离淀粉酶
3、5mmol/L KI-I2溶液:称取0.127g碘和0.83g碘化钾。加 蒸馏水100ml完全溶解后装入滴瓶中。
1.α-淀粉酶的固定化
5ml注射器 吸附
反应柱 固定化酶
装柱
5mgα-淀粉酶+4ml蒸馏水 +5g石英砂,搅拌30min
装入下端接有气门心并用 夹子封住的注射器中
气门心 夹子
用10倍柱体积的蒸馏水 洗柱 洗涤除去未吸附的游离
高中生物第二部分酶的应用教案浙科版选修12
第二部分酶的应用一、课标内容1.研究酶的存在和简单制作方法。
2.尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。
3.探讨酶在食品制造和洗涤等方面的应用。
4.尝试制备和应用固相化酶。
二、教学要求本部分“实验5 加酶洗衣粉的使用条件和效果”不作要求,只要求学生做2个实验,即“实验4 果汁中的果胶和果胶酶”与“实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”。
实验4 果汁中的果胶和果胶酶实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测三、教学建议1.课时建议(共计9课时)(1)在“果汁中的果胶和果胶酶”的实验中,通过设计对比实验,以及把果胶酶放在不同条件下催化,从而探究果胶酶的作用及其发挥作用的最佳条件。
教科书所用的果实是苹果或山楂,教师也可以根据当地情况及时令选择适宜的水果,如葡萄、杨梅或樱桃等,最好能与当时、当地的丰产水果吻合,既有利于取材,可激发学生的兴趣。
(2)在“α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”实验中,“酶的固定化”最好不要由教师代做,应让学生自己制作,让学生直接观察与感受固定前后石英砂的变化。
形成固定化酶柱后,要求学生除去未吸附的游离淀粉酶,并检测固定化酶柱中的流出液中是否还有淀粉酶。
通过这个过程,可使学生更好地理解酶的固定化。
当实验结束后,对固定化酶柱要进行洗涤并冷藏,过一段时间,应该让学生重做实验,以测定固定化酶的有效性。
中国书法艺术说课教案今天我要说课的题目是中国书法艺术,下面我将从教材分析、教学方法、教学过程、课堂评价四个方面对这堂课进行设计。
一、教材分析:本节课讲的是中国书法艺术主要是为了提高学生对书法基础知识的掌握,让学生开始对书法的入门学习有一定了解。
书法作为中国特有的一门线条艺术,在书写中与笔、墨、纸、砚相得益彰,是中国人民勤劳智慧的结晶,是举世公认的艺术奇葩。
早在5000年以前的甲骨文就初露端倪,书法从文字产生到形成文字的书写体系,几经变革创造了多种体式的书写艺术。
1、教学目标:使学生了解书法的发展史概况和特点及书法的总体情况,通过分析代表作品,获得如何欣赏书法作品的知识,并能作简单的书法练习。
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第二部分酶的应用实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的
检测
一、酶与固定化酶
1.酶:活细胞产生的具有催化作用的一类有机物,它是生物体内各种化学反应的催化剂。
2.固定化酶:将________的酶用________或________方法________,使之成为________而又有________。
3.将酶改造成固定化酶的原因是:
由于酶________,且不利于________,所以要将酶改造成固定化酶。
4.酶固定化的方法有:
________法、________法、________法和________法等。
本实验用的是________法。
5.固定化酶作用的机理:
将固定化酶________,当________时,在________的作用下________。
答案:2.水溶性物理化学固定在某种介质上不溶于水酶活性的制剂
3.在水溶液中很不稳定工业化使用
4.吸附共价偶联交联包埋吸附
5.装柱底物经过该柱酶转变为产物
二、淀粉水解的过程及其在淀粉指示剂下的颜色反应:
答案:糊精蓝红不显
三、α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测的实验
1.实验目的:
(1)制备________。
(2)进行________的测试。
2.实验原理:
将________酶固定在________上,一定浓度的淀粉溶液经过________后,可使淀粉水解成________。
用________测试,若流出物呈________色,表明有________生成。
3.本实验使用的酶及特性:
本实验使用的酶是________酶,其作用的最适宜pH为________,最适宜温度为________。
4.实验设备及用品:
5 mL塑料注射器、50 mL烧杯、滴管、自行车用气门芯及夹子、注射器架、试管或微量离
心管3支。
5.实验材料及其制备:
(1)材料:固定化的α淀粉酶、可溶性淀粉酶、5 mol/L KI—I2溶液。
(2)部分材料的制备:
▲α淀粉酶的固定化:
▲可溶性淀粉溶液:称取0.127 g________和0.83 g________。
加蒸馏水100 mL,完全溶解后装入滴瓶中。
6.实验步骤:
(1)淀粉溶液流经固定化酶柱
将灌注了________的注射器放在注射器架上,用滴管加________溶液,使该溶液以
________mL/min的流速过柱。
(2)接取流出物
待从固定化酶柱中流出________mL的溶液后,接收________mL流出液。
(3)流出物鉴定
在流出物中加入________溶液,观察颜色。
用水稀释________倍后再观察颜色。
(4)洗涤、保存固定化酶柱。
实验后,用________倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱。
放置在________℃冰箱中保存。
(5)几天后取出冰箱中该固定化酶柱,重复实验,观察结果。
7.实验结果的比较:
答案:1.(1)固定化α淀粉酶(2)淀粉水解
2.α淀粉石英砂固定化酶柱糊精淀粉指示剂红糊精
3.枯草杆菌的α淀粉 5.5~7.5 50~75 ℃
5.实验材料及其制备:
(2)α淀粉酶酶不纯石英砂气门芯夹子10 洗涤未吸附的游离淀粉酶50 热水碘碘化钾6.(1)固定化酶淀粉0.3 (2) 5 0.5 (3)KII2 1 (4)10 4
7.蓝红红。