色谱峰拖尾的原因
液相色谱峰拖尾的原因
液相色谱峰拖尾的原因
1.样品组分的不均一性：样品组分的分子量分布不均一性、极性或疏
水性的变化，以及表面活性剂等添加剂的存在，都可能导致峰拖尾现象。
2.色谱柱的选择：柱填充材料的不均一性或不适当的填充剂粒径大小、固定相表面官能团密度、载液的缓冲性能，都会影响到样品的保留与分离，从而导致峰拖尾现象。
3.操作条件的选择：流速过高、柱温过高、pH过高或过低，以及过
高的载液浓度等操作条件都可能导致峰拖尾现象。
4.柱效应：当样品中存在吸附性物质时，这些物质会在柱表面吸附并
难以解吸，从而导致峰拖尾现象。
对于液相色谱峰拖尾问题，可以采取以下措施进行解决和改善：
1.选择合适的色谱柱：根据样品的特性选择适合的色谱柱，如使用亲
水性柱或疏水性柱进行适当的尝试和比较。
2.调整操作条件：优化流速、温度和pH条件，适当降低载液浓度或
者添加缓冲剂等。
3.优化样品前处理：对于复杂的样品，可以采取前处理步骤，如溶剂
萃取、样品稀释等，以减少样品中的干扰物。
4.柱前附加剂：可以尝试添加适量的有机溶剂或胶体物质作为柱前附
加剂，以提高样品与固定相的相容性，从而减少峰拖尾现象。
5.使用合适的检测器：采用合适的检测器，如质谱检测器、荧光检测
器等，可以提高检测精度和分离度，从而减少峰拖尾现象的影响。
综上所述，液相色谱峰拖尾的原因是多方面的，需要综合考虑柱的选择、操作条件、样品处理等因素，采取相应的措施进行改善。
峰形拖尾的原因及解决方法汇总
技术报告改善反相 HPLC 中的峰拖尾在反相 HPLC 中峰拖尾是一个普遍的现象。
特别是分离碱性化合物和通过HPLC 分析药物成分时是经常产生拖尾缘由。
峰拖尾可以引起分离度降低,灵敏度减弱, 精密度和定量变差。
图 1表明峰之间的分离度和灵敏度与峰拖尾成负相关。
图 2表明准确度和精密度因数据系统无法准确识别峰的起点和终点而受到影响。
图 1 拖尾对分离度和灵敏度的影响当峰拖尾(T ,拖尾因子从 1.0增加到 2.0时,分离度(Rs 从 1.5降到 1.0。
灵敏度(峰高由于峰的体积增大和样品的浓度降低而降低。
图 2 峰拖尾对准确度和精密度的不利影响拖尾峰使数据系统难以准确确定峰的终点, 故而影响准确度和精密度。
在这个例子中,在 B 点测得到峰面积比在 A 点测得的峰面积少约 3%。
峰拖尾的原因,峰拖尾的主要原因有:1、溶解样品的溶剂比流动像更强,2、样品量过载,3、固定相中的硅醇基与胺类物质相结合反应,4、硅胶吸附酸性化合物,5、色谱柱柱床中有空隙。
只要确定了拖尾的原因就可以采取措施减少拖尾并消除之。
(表 1表 1 峰拖尾:原因及解决方案原因解决方案样品溶剂极性强于流动相在流动相中溶解样品, 尽可能降低样品溶剂的强度样品量过载减少进样量, 参考表 2中推荐的不同柱型对应的不同进样体积硅醇基与胺类物质的结合调节流动相的 pH<3.0。
2. 增加流动相的离子强度, 25mM ~ 50mM 。
3. 流动相中增加竞争性的胺类, 10mM的 TEA (三乙胺。
4. 选择低硅醇活性的固定相。
参照图 6 C18柱按固定相硅醇活性分级。
5.酸性物质在硅胶上的吸附增加流动相中盐的浓度, 25mM ~ 50mM 。
2. 调节流动相的 pH<3.03. 增加竞争性的有机酸, 1%醋酸或者是 0.1%TFA(三氟乙酸柱子空隙更换新的色谱柱尝试填充空隙很少能达到较好的效果。
一、由于溶解样品的溶剂极性强于流动相而引起的拖尾如果溶解样品的溶剂极性强于流动相, 就会引起宽的甚至是拖尾的峰。
气相色谱峰拖尾的原因和解决方法
气相色谱峰拖尾的原因和解决方法果气相色谱峰拖尾，一般是气相色谱仪的原因，与质谱仪或气相色谱仪检测器的关系不大，主要从以下几个方面分析：一、样品的问题1、样品浓度太高样品浓度太高时，样品的色谱峰就会有明显的拖尾，这种情况下可以稀释样品，或者把样品进样的模式由不分流进样改为分流进样，或者把分流进样的分流比调高一些，例如之前设置进样分流比为10:1，根据样品的实际浓度可以设置为100:1等。
2、样品的性质问题①化合物极性太强分析极性化合物或活性化合物时，其活性位点容易与流经途中的位点吸附而呈现出拖尾，这种情况下要求样品分析系统具有良好的惰性，例如使用超惰的衬管、干净的分流平板和惰性好的低流失色谱柱。
②化合物的沸点太低早流出的组分一般是挥发性强、沸点低的组分，这类化合物拖尾严重时，主要原因在于化合物的沸点太低，可能在于溶剂聚焦效应不够，溶剂没有完全冷凝、有部分气化时，样品就进入了色谱柱，这样沸点低的化合物也就先进入色谱柱进行分析了，导致色谱峰拖尾。
这种情况下可以降低进样口的温度、调整程序升温的初始温度在溶剂沸点10-25℃以下，让所有的化合物都在冷凝的情况下，整齐划一地进入色谱柱。
③化合物的沸点太高晚流出的色谱峰一般是低挥发性、沸点高的组分，这类化合物的拖尾现象随着保留时间的增加而严重，主要原因在于化合物的沸点太高，在进样口气化不完全，或者色谱柱和传输线的温度偏低，引起样品在分析的过程中有部分冷凝，进而导致色谱峰拖尾。
这种情况下，应该注意化合物的沸点，可以适当地提高进样口、色谱柱、传输线等处的温度可以改善拖尾现象。
二、进样口的问题1、进样口的温度不合适样品使用气相色谱仪分离时，首先进入进样口，在里面进行气化，所以要求进样口的温度要高于待测化合物的沸点，使化合物在进样口处充分气化。
如果进样口的温度低于待测化合物的沸点，那么化合物就会气化不充分，也会导致色谱峰拖尾。
并且，没有气化的化合物就会残留在进样口，污染进样隔垫和衬管，也可能响到其它化合物的峰形。
色谱峰拖尾的原因
液相色谱峰有拖尾局里是什么本果之阳早格格创做A、峰拖尾1、筛板阻塞（a、反冲色谱柱b、调换进心筛板c、调换色谱柱）2、色谱柱陷落（弥补色谱柱）3、搞扰峰（a、使用更少的色谱柱b、改变震动相大概调换色谱柱）4、震动相PH采用过得（安排PH值.对付于碱性化合物，矮PH值更有好处得到对付称峰）5、样品与挖料表面的凝结面爆收反应（a、加进离子对付试剂大概碱性挥收性建饰剂b、换柱子）B、峰前延1、柱温矮（降下柱温）2、样品溶剂采用不妥当（使用震动相动做样品溶剂）3、样品过载（落矮样品含量）4、色谱柱益坏（睹A1、A2）C、峰分叉1、呵护柱大概分解柱传染图（与下呵护柱再举止分解.如果需要调换呵护柱.如果分解柱阻塞，拆下去荡涤.如果问题仍旧存留，大概是柱子被强死存物量传染，使用适合的复活步伐.如果问题仍旧存留，出心大概被阻塞，调换筛板大概调换色谱柱.）2、样品溶剂不溶于震动相（改变样品溶剂.如果大概采与震动相动做样品溶剂.）D、峰变形1、样品过载（缩小样品载量）E、早出的峰变形1、样品溶剂采用不妥当（a、缩小进样体积b、使用矮极性样品溶剂）F、早出的峰拖尾程度大于早出的峰1、柱中效力（a、安排系统对接（使用更短、内径更小的管路）b、使用小体积的流利池）G、K’减少时，脱尾更宽沉1、两级死存效力，反相模式（a、加进三乙胺（大概碱性样品）b、加进乙酸（大概酸性样品）c、加进盐大概缓冲剂（大概离子化样品）d、调换一维持子）2、两级死存效力，正相模式（a、加进三乙胺（大概碱性样品）b、加进乙酸（大概酸性样品）c、加进火（大概多官能团化合物）d、试用另一种要领）3、两级死存效力，离子对付(加进三乙胺（大概碱性样品）)H、酸性大概碱性化合物的峰拖尾1、缓冲分歧适(a、使用浓度50-100mM的缓冲液b、使用Pka等于震动相PH值的缓冲液)I、特殊的峰1、样品中有其余组份(仄常)2、前一次进样的洗脱峰(a、减少运止时间大概梯度斜率b、普及流速)3、空位大概鬼峰(a、查看震动相是可杂洁b、使用震动相动做样品溶剂c、缩小进样体积)J、死存时间动摇1、温控不当(调好柱温) 2、震动相组分变更(预防变更（挥收、反应等）)3、色谱柱不仄稳(正在每一次运止之前赋予脚够的时间仄稳色谱柱)K、死存时间不竭变更1、流速变更(沉新设定流速)2、泵中有气泡(从泵中与消气泡)3、震动相采用不妥当(a、调换符合的震动相b、采用符合的混同震动相)L、基线漂移1、柱温动摇,纵然是很小的温度变更皆市引起基线的动摇.常常效率示好检测器、电导检测器、较矮敏捷度的紫中检测器大概其余光电类检测器. (统制好柱子战震动相的温度，正在检测器之前使用热接换器图)2、震动相不匀称,震动相条件变更引起的基线漂移大于温度引导的漂移.(使用HPLC级的溶剂，下杂度的盐战增加剂.震动相正在使用前举止脱气，使用中使用氦气.)3、流利池被传染大概有气体(用甲醇大概其余强极性溶剂浑洗流利池.如有需要，不妨用1M的硝酸.（不要用盐酸）)4、检测器出心阻塞,下压制成流利池窗心破裂，爆收噪音基线(与出阻塞物大概调换管子.参照检测器脚册调换流利池窗)5、震动相配比不当大概流速变更(变动配比大概流速,定期查看震动相组成及流速)6、柱仄稳缓，特地是震动相爆收变更时(用中等强度的溶剂举止浑洗，变动震动相时，正在分解前用10-20倍体积的新震动相对付柱子举止浑洗)7、震动相传染、蜕变大概由矮本量溶剂配成（查看震动相的组成.使用下本量的化教试剂及HPLC级的溶剂）8、样品中有强死存的物量（下K’值）以馒头峰样被洗脱出，进而表示出一个逐步降下的基线.（使用呵护柱，如有需要，正在进样之间大概正在分解历程中，定期用强溶剂浑洗柱子）9、使用循环溶剂，然而检测器已安排（沉新设定基线.当检测器能源教范畴爆收变更时，使用新的震动相）10、检测器不设定正在最大吸支波少处.（将波少安排至最大吸支波少处%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% %%%%%%%%%%%%%%%%HPLC分解中，正在色谱柱仄常，样品敏捷度脚够，分解要领符合，色谱峰正在出峰时间较短的条件下（不包罗梯度），峰型应付于称而尖钝.然而是，正在对付样品相识程度不敷，要领不当，样品处理要领及进样办法分歧理下，会出现百般意念不到的问题，而对付色谱峰易以做出合理的阐明，更加对付于新脚更是如许.色谱单峰指的是明显是共一种物量，然而正在色谱图中出现单峰，而标明含两种物量.那种情况分为四种本果.1 色谱柱如果您分解样品时创制每个色谱峰皆单峰出现（出峰越快，单峰的大概性会缩小），更加采与简单杂物量时，不妨肯定色谱柱出问题－呵护柱传染大概柱头牢固相变净大概流逝，大概颗粒汇集正在色谱柱的出心筛板上.如果进样量少，本去色谱柱仄常，色谱峰的形状多为一大峰戴一小峰，纷歧定拖尾，那普遍应是柱头受堵，将色谱柱反过去接，用震动相浑洗大概酸洗大概其余溶剂，将堵正在柱头的残留物冲掉，再反过去，普遍情况下便止了.天然不反冲，正冲偶尔也会仄常的.如果峰拖尾，单峰强强出进不大，柱头牢固相变净大概流逝大概性更大，那是不妨将进样那头拧启，将微孔滤片超声，柱头刮去一部分挖料，沉新挖上新挖料拧紧，不过那种活，需要一定技能，共时不克不迭老搞那种事，可则用不了频频，色谱柱便会应柱效很矮而报兴.2 溶剂极性及进样量许多HPLC分解者对付此大概不以为然，普遍的hplc的书籍籍战文件皆不会提到那圆里的实量，而那确是单峰爆收的一个很要害的本果.暂时hplc分解多为反相色谱，震动相多为甲醇、乙腈、火，加百般增加剂以革新分散本能.样品普遍用与震动相相溶的溶剂溶解.最好的溶解要领是用震动相溶解，然而是很多情况是纷歧致的.当用溶剂极性强度大的试剂，如杂甲醇、杂乙腈，杂乙醇，而分解体系中以火为主，样品进样量大，如定量管为20ul，此条件下实足不妨肯定，简单的杂物量出单峰，第两峰比第一峰小（屡屡皆不太一般），且拖尾，死存时间会提前(相对付进样量少而止)，将进样量缩小一半以上，峰型将形成仄常.那是样品的溶剂与震动相极性出进太大，而震动相去不迭将其密释达到仄稳制成的.那是上头提到进样量制成单峰的一个本果，另一个本果是，进样量纷歧定大，然而千万于量很大，色谱图上的单峰紧靠正在所有，基础上齐下，不拖尾（如果出峰很快，也大概是色谱柱问题）.将样品密释再进样便不妨了，那是由于进样量过大，色谱柱过载制成的.如果样品溶剂与震动相不溶大概互溶性短好，当样品注进色谱分散体系中，会析出并接着再溶解的大概，那时相称于两次进样，也非常简单爆收单峰..3 样品的个性及pH值有些样品由于其化教结构的个性，存留互变同构局里，而那种互变同构体无法分启，而是以一个动向仄稳存留.正在色谱分解时，正在一个特定的条件下，一种物量将出现单峰，以至三峰.那时普遍单峰靠的很近，基础齐下，不拖尾，条件稍一变更，更加pH，单峰局里将消得，如白霉素等.有的样品紫中的色谱图上瞅不到单峰，然而正在LC-MS下，用量谱检测器，其量谱的总离子流图上较明隐. pH对付峰形的效率正在缓冲液震动相仄稳历程中非常明隐，当连绝进样时，受pH的连绝变更效率会时常逢到那种单峰的情况.其余，正在样品分解时，震动相的pH尽管近离被分解物的等电面，可则也简单引起单峰的爆收.正在用离子对付试剂分解时，采用短好条件也会简单引起单峰的爆收.4 仪器参数记录的参数普遍皆内定的，不必建改，然而GC 战HPLC的参数是不实足普遍的，比圆C－R3A数据记录仪上的普遍记录时间隔断GC为2ms，HPLC 为5ms，如果记录隔断时间支缩，一个峰将形成两个峰大概更多.另有一种情况是，参比波少树立过得，比圆树立分解波少254nm，参比波少400nm，那个对付于大普遍化合物大概出效率.然而是如果被测化合物，正在400nm处也有强的紫中吸支，比254nm 更下.那样其出峰时，由于背景的抵扣效率，本本一个峰会形成对付称的两个峰，而且如果将两峰之间的峰谷反转180度，恰好是一个完备的峰.那时要将参比波少树立更大，大概者与消.。
分子筛色谱峰拖尾现象产生的原因
分子筛色谱峰拖尾现象产生的原因分子筛色谱峰拖尾现象的产生可能有多种原因，以下是可能的一些因素：1.柱子污染：长时间的色谱分析过程中，分子筛柱可能会被一些污染物堵塞，如有机物、硅胶、金属离子等。
这些污染物会影响分子筛柱的性能，导致峰形拖尾。
为了解决这个问题，可以定期对分子筛柱进行清洗和再生。
2.柱子过载：当进样量过大或样品浓度过高时，分子筛柱可能过载，导致色谱峰拖尾。
为了解决这个问题，可以减少进样量或稀释样品，以确保分子筛柱的负荷在可承受范围内。
3.样品复杂性：如果样品中含有多种化合物，其中一些可能会与分子筛柱产生相互作用，导致色谱峰拖尾。
为了解决这个问题，可以优化样品预处理步骤，去除可能与分子筛柱产生相互作用的化合物。
4.温度波动：温度波动可能会影响分子筛柱的性能，导致色谱峰拖尾。
为了解决这个问题，可以确保色谱仪器的温度控制稳定，并遵循制造商的建议进行操作。
5.流速波动：流速波动可能会影响分子筛柱的性能，导致色谱峰拖尾。
为了解决这个问题，可以确保色谱仪器的流速控制稳定，并遵循制造商的建议进行操作。
6.固定相流失：分子筛柱的固定相可能会在分析过程中流失，导致色谱峰拖尾。
为了解决这个问题，可以确保分子筛柱的固定相得到适当的维护和补充。
7.死体积过大：死体积是指色谱系统中液体流动的部分，如果这部分体积过大，会导致色谱峰拖尾。
为了解决这个问题，可以尽量减小死体积，例如使用低容量的接头和管路。
8.样品溶剂强度：如果样品溶剂强度过高，可能会导致色谱峰拖尾。
为了解决这个问题，可以尝试调整样品溶剂的强度，使其更适合分析。
9.缓冲液不匹配：在离子交换色谱中，如果缓冲液不匹配，可能会导致色谱峰拖尾。
为了解决这个问题，可以尝试调整缓冲液的组成或浓度，以改善峰形。
10.盐浓度：高盐浓度可能会导致色谱峰拖尾。
为了解决这个问题，可以尝试降低盐浓度或使用低盐浓度的样品处理方法。
综上所述，分子筛色谱峰拖尾现象的产生可能是由于多种因素的综合作用。
气相色谱峰拖尾的原因
气相色谱峰拖尾的原因
气相色谱峰拖尾的原因主要有以下几点：
1. 注射器问题：可能由于注射器进样不均匀或注射量过大，导致样品在进入柱中时出现不均匀扩散，从而产生峰拖尾。
2. 柱子问题：如果柱子老化或受到污染，可能会导致峰拖尾现象。
例如，柱子封口不良或填充物结构不均匀等情况都可能导致峰拖尾。
3. 柱温过高：当柱温过高时，可能会引起样品的挥发过快，样品分子在柱内无法充分附着于固定相，从而导致峰拖尾的现象。
4. 样品分子间相互作用：某些化合物在色谱柱中可能会发生相互作用，导致峰形变得不对称并出现拖尾。
5. 柱内载气流速过高：如果载气流速过高，可能会导致样品分子在固定相中的传播速度太快，无法充分附着于固定相，从而产生峰拖尾。
6. 柱内修饰物不匹配：如果柱内的固定相与某些特定样品不相容或相互不匹配，可能导致峰拖尾问题。
综上所述，气相色谱峰拖尾是由于多种因素造成的，需要综合考虑和分析，以确定问题的根本原因并采取相应的措施进行解决。
液相色谱峰形拖尾解决方案
液相色谱峰形拖尾解决方案液相色谱（Liquid Chromatography，LC）是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于食品、医药、环境、化学等领域。
在液相色谱分析中，峰形是评判分离效果和定性定量分析的重要指标之一。
然而，由于多种因素的影响，液相色谱峰形有时会出现拖尾（tailing）现象，影响分析的准确性和灵敏度。
本文将介绍液相色谱峰形拖尾的原因及解决方案。
峰形拖尾的原因液相色谱峰形拖尾常常由以下原因引起：1.柱温过高：柱温过高会导致样品在柱中停留时间过长，进而引发拖尾。
因此，在操作过程中需要根据分析物的性质和柱的温度稳定性进行合理控制。
2.样品溶液中存在离子：样品溶液中存在离子可能会与色谱柱填料表面形成静电吸附，导致峰形拖尾。
此时可以通过选择合适的移动相和调整离子强度来减轻或消除拖尾现象。
3.色谱柱填料表面活性：色谱柱填料表面的活性可能导致部分化合物与填料表面发生相互作用，从而造成峰形拖尾。
此时可以选择活性更低的色谱柱填料或在样品中添加适量的对应剂以减轻或消除拖尾现象。
4.柱寿命过长：使用时间过长的色谱柱填料可能会出现表面酸化、损伤等现象，导致峰形拖尾。
在实际操作中，及时更换色谱柱填料是重要的预防措施。
解决方案为了解决液相色谱峰形拖尾问题，可以采取以下措施：1.优化柱温：合理控制柱温可以有效减轻峰形拖尾。
根据样品的性质和柱的稳定温度范围，选择合适的柱温进行实验。
2.调整流速：合适的流速可以改善峰形拖尾。
通常情况下，过高的流速会导致色谱峰扩展和形状变化，而过低的流速会增加分析时间和柱寿命。
因此，通过选取适当的流速范围，可以寻找到最佳条件。
3.选择合适的固定相和移动相：色谱柱的固定相和移动相的选择对峰形拖尾有很大影响。
合适的固定相可以提供最佳相互作用，减少拖尾的发生。
移动相的选择也非常重要，需要考虑到离子强度、酸碱度等因素。
4.降低样品浓度：如果样品浓度过高，液相色谱峰形可能会出现拖尾现象。
在实际操作中，可以适当稀释样品，以降低浓度，改善峰形。
峰托尾的原因及解决办法
色谱拖尾原因及解决办法1、当经历维修色谱问题（色谱峰拖尾、灵敏度降低、保留时间改变等）时，切去色谱柱前端的1/2 到1 米。
必要时，更换进样口内衬管、隔垫，并清洗进样口。
保护柱可用于提高色谱柱的使用寿命。
（气相）2、衬管脱活进样口衬管上的活性点可以吸附样品组分并导致出现拖尾峰，并可能损失灵敏度和重现性。
用脱活制剂用来覆盖衬管玻璃表面的活性点或与之发生反应。
脱活程序进行脱活，该程序可以使衬管重现性高、惰性好，且使用寿命长。
对于不分流的应用，或者在必须分析极性很弱的化合物时，应当使用脱活的衬管。
即使使用脱活的衬管开始也会表现出活性，当这种情况发生时，应当更换衬管。
可以清洁衬管以除去颗粒物或用溶剂冲洗衬管以除去挥发性较低的组分。
但是，选择合适的衬管清洗程序可能较为困难。
某些溶剂可能会除去脱活层，并且工具可能会划伤衬管的玻璃表面，从而导致出现多余的活性点。
新的衬管几乎总比已清洁过并且重新脱活的衬管表现优异- 尤其对于痕量分析。
3、色谱柱、进样口衬管或被污染的金属进样口密封垫所吸收的样品组分使用新的脱活的衬管或清洗旧衬管并更换玻璃毛。
进样针针头撞击，进样口衬管内的填充物破碎。
从衬管中取出部分填充物，或使用无填充的衬管。
色谱柱末端切口不整齐（样品吸附于此）卸下色谱柱。
使用安全的毛细管熔融石英切割工具（例如陶瓷片或色谱柱切割器）将色谱柱切成垂直的齐口，然后重新装入色谱柱。
断裂或破碎的进样口衬管确保进样口中的总流速为40 ml/min以上。
4、色谱柱在进样口中的位置不正确，可能载气流路存在密封垫的颗粒。
5、一支色谱柱上不能装入超过2-3 个接头。
多个接头会造成死体积（拖尾峰）问题。
6、超出色谱柱的温度上限会造成固定相和管表面的加速损坏。
这样会造成色谱柱的过分流失，活性组分形成拖尾，以及/或降低柱效（分离度）。
幸好热损坏是一个很慢的过程，因此，在色谱柱严重损坏之前还有一段很长的时间可在高于温度极限的条件下使用。
当有氧存在时会大大加速热损坏。
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液相色谱峰有拖尾现象是什么原因
A、峰拖尾
1、筛板阻塞（a、反冲色谱柱b、更换进口筛板c、更换色谱柱）
2、色谱柱塌陷（填充色谱柱）
3、干扰峰（a、使用更长的色谱柱b、改变流动相或更换色谱柱）
4、流动相PH选择错误（调整PH值。
对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰）
5、样品与填料表面的溶化点发生反应（a、加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂b、换柱子）
B、峰前延
1、柱温低（升高柱温）
2、样品溶剂选择不恰当（使用流动相作为样品溶剂）
3、样品过载（降低样品含量）
4、色谱柱损坏（见A1、A2）
C、峰分叉
1、保护柱或分析柱污染图（取下保护柱再进行分析。
如果必要更换保护柱。
如果分析柱阻塞，拆下来清洗。
如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。
如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。
）
2、样品溶剂不溶于流动相（改变样品溶剂。
如果可能采取流动相作为样品溶剂。
）
D、峰变形
1、样品过载（减少样品载量）
E、早出的峰变形
1、样品溶剂选择不恰当（a、减少进样体积b、运用低极性样品溶剂）
F、早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
1、柱外效应（a、调整系统连接（使用更短、内径更小的管路）b、使用小体积的流通池）
G、K’增加时，脱尾更严重
1、二级保留效应，反相模式（a、加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入盐或缓冲剂（或离子化样品）d、更换一支柱子）
2、二级保留效应，正相模式（a、加入三乙胺（或碱性样品）b、加入乙酸（或酸性样品）c、加入水（或多官能团化合物）d、试用另一种方法）
3、二级保留效应，离子对(加入三乙胺（或碱性样品）)
H、酸性或碱性化合物的峰拖尾
1、缓冲不合适(a、使用浓度50-100mM的缓冲液b、使用Pka等于流动相PH值的缓冲液)
I、额外的峰
1、样品中有其他组份(正常)
2、前一次进样的洗脱峰(a、增加运行时间或梯度斜率b、提高流速)
3、空位或鬼峰(a、检查流动相是否纯净b、使用流动相作为样品溶剂
c、减少进样体积)
J、保留时间波动
1、温控不当(调好柱温)
2、流动相组分变化(防止变化（蒸发、反应等）)
3、色谱柱没有平衡(在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱) K、保留时间不断变化
1、流速变化(重新设定流速)
2、泵中有气泡(从泵中除去气泡)
3、流动相选择不恰当(a、更换合适的流动相b、选择合适的混合流动相)
L、基线漂移
1、柱温波动,即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。
通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。
(控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图)
2、流动相不均匀,流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。
(使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。
流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。
)
3、流通池被污染或有气体(用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。
如
有需要，可以用1M的硝酸。
（不要用盐酸）)
4、检测器出口阻塞,高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线(取出阻塞物或更换管子。
参考检测器手册更换流通池窗)
5、流动相配比不当或流速变化(更改配比或流速,定期检查流动相组成及流速)
6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时(用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗)
7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成（检查流动相的组成。
使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂）
8、样品中有强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。
（使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子）
9、使用循环溶剂，但检测器未调整（重新设定基线。
当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相）
10、检测器没有设定在最大吸收波长处。
（将波长调整至最大吸收波长处
%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% HPLC分析中，在色谱柱正常，样品灵敏度足够，分析方法合适，色谱峰在出峰时间较短的条件下（不包括梯度），峰型应对称而尖锐。
但是，在对样品了解程度不够，方法不妥，样品处理方法及进样方式不合理下，会出现各种意想不到的问题，而对色谱峰难以作出合理的解释，尤其对于新手更是如此。
色谱双峰指的是明明是同一种物质，但在色谱图中出现双峰，而表明含二种物质。
这种情况分为四种原因。
1 色谱柱
如果你分析样品时发现每个色谱峰都双峰出现（出峰越快，双峰的可能性会减少），尤其采用单一纯物质时，可以肯定色谱柱出问题－保护柱污染或柱头固定相变脏或流失，或颗粒聚集在色谱柱的入口筛板上。
如果进样量少，原来色谱柱正常，色谱峰的形状多为一大峰带一小峰，不一定拖尾，这一般应是柱头受堵，将色谱柱反过来接，用流动相冲洗或酸洗或其它溶剂，将堵在柱头的残留物冲掉，再反过来，一般情况下就行了。
当然不反冲，正冲有时也会正常的。
如果峰拖尾，双峰强弱相差不大，柱头固定相变脏或流失可能性更大，这是可以将进样那头拧开，将微孔滤片超声，柱头刮去一部分填料，重新填上新填料拧紧，不过这种活，需要一定技术，同时不能老干那种事，否则用不了几次，色谱柱就会应柱效很低而报废。
2 溶剂极性及进样量
许多HPLC分析者对此可能不以为然，一般的hplc的书籍和文献都不会提到这方面的内容，而这确是双峰产生的一个很重要的原因。
目前hplc分析多为反相色谱，流动相多为甲醇、乙腈、水，加各种添加剂以改善分离性能。
样品一般用与流动相相溶的溶剂溶解。
最佳的溶解方法是用流动相溶解，但是很多情况是不一致的。
当用溶剂极性强度大的试剂，如纯甲醇、纯乙腈，纯乙醇，而分析体系中以水为主，样品进样量大，如定量管为20ul，此条件下完全可以肯定，单一的纯物质出双峰，第二峰比第一峰小（每次都不太一样），且拖尾，保留时
间会提前(相对进样量少而言)，将进样量减少一半以上，峰型将变为正常。
这是样品的溶剂与流动相极性相差太大，而流动相来不及将其稀释达到平衡造成的。
这是上面提到进样量造成双峰的一个原因，另一个原因是，进样量不一定大，但绝对量很大，色谱图上的双峰紧靠在一起，基本上齐高，不拖尾（如果出峰很快，也可能是色谱柱问题）。
将样品稀释再进样就可以了，这是由于进样量过大，色谱柱过载造成的。
如果样品溶剂与流动相不溶或互溶性不好，当样品注入色谱分离体系中，会析出并接着再溶解的可能，这时相当于二次进样，也非常容易产生双峰。
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3 样品的特性及pH值
有些样品由于其化学结构的特点，存在互变异构现象，而这种互变异构体无法分开，而是以一个动态平衡存在。
在色谱分析时，在一个特定的条件下，一种物质将出现双峰，甚至三峰.这时一般双峰靠的很近，基本齐高，不拖尾，条件稍一变化，尤其pH，双峰现象将消失，如红霉素等。
有的样品紫外的色谱图上看不到双峰，但在LC-MS下，用质谱检测器，其质谱的总离子流图上较明显.
pH对峰形的影响在缓冲液流动相平衡过程中非常明显，当连续进样时，受pH的连续变化影响会经常遇到这种双峰的情况。
另外，在样品分析时，流动相的pH尽量远离被分析物的等电点，否则也容易引起双峰的产生。
在用离子对试剂分析时，选择不好条件也会容易引起双峰的产生。
4 仪器参数
记录的参数一般都内定的，不必修改，但GC和HPLC的参数是不完全一致的，例如C－R3A 数据记录仪上的一般记录时间间隔GC为2ms，HPLC 为5ms，如果记录间隔时间缩短，一个峰将变为二个峰或更多。
还有一种情况是，参比波长设置错误，例如设置分析波长254nm，参比波长400nm，这个对于大多数化合物可能没影响。
但是如果被测化合物，在400nm处也有强的紫外吸收，比254nm更高。
这样其出峰时，由于背景的抵扣作用，本来一个峰会变成对称的二个峰，而且如果将二峰之间的峰谷反转180度，恰好是一个完整的峰。
这时要将参比波长设置更大，或者取消。