淋巴细胞亚群检测

淋巴细胞亚群检测

检测对象

原则：免疫功能受损者均应常规评估淋巴细胞亚群

免疫功能包括：

免疫防御功能

免疫自稳和耐受功能

免疫监视功能

免疫防御功能受损

易发生感染

反复感染

严重感染

多种病原与特殊病原感染

常规治疗效果不佳的感染

除了宿主免疫防御受损容易造成上述少见感染状况之外，感染本身也可造成继发性免疫防御受损，因此免疫评估应注意原发和继发两方面的问题。

免疫自稳和耐受功能受损

过敏性疾病：并非所有这类患者都需要进行淋巴细胞亚群的检测。对于一些严重的过敏患者应考虑淋巴细胞亚群的检测。

①婴幼儿时期全身严重湿疹样表现。

②嗜酸性粒细胞显著增多

③血清IgE水平明显增高（IgE>1000IU/L）

④伴有反复、严重感染的患者

自身免疫和自身炎症性疾病

①存在难以控制的自身免疫反应情况及出现明显的自身免疫性淋巴增殖情况

②合并反复感染的患者

③存在自身炎症反应

④长期免疫抑制药物、生物制剂使用前后

免疫监视功能受损

主要引起肿瘤

血液系统肿瘤：儿童时期最为多见的是血液系统肿瘤

其他肿瘤及实体瘤：其他系统肿瘤患者也应酌情进行淋巴细胞亚群的检测，既可能存在原发性淋巴细胞亚群的异常，也可能出现继发性改变，尤其是进行各种化疗时，淋巴细胞亚群大多会受到影响

其他特殊情况

血常规中淋巴细胞明显异常

家族成员中有免疫缺陷病史

长期使用免疫抑制剂者

淋巴细胞亚群分析结果判读，应对淋巴细胞亚群的相对计数和绝对计数分别进行判别。

结果分析

(一)基本数据判断

1．相对计数的3个基本公式：

FCM检测淋巴细胞亚群结果应首先根据下述3个公式进行评估[15]。公式1: CD3＋%＋CD19＋%＋CD16＋/CD56＋%＝100%±5%

公式2：CD4＋%＋CD8＋%＝CD3＋%±5%

公式3：CD4＋/CD8＋比值>1.0(1.5～2.0，新生儿期可达4.0)

2．相对计数基本公式意义：

(1) CD3＋%＋CD19＋%＋CD16＋/CD56＋%明显大于或小于100%±5%，提示检测系统异常或存在明显淋巴细胞亚群异常。(2) CD4＋%＋CD8＋%之和明显大于或小于CD3＋%±5%，提示存在双阳性(CD4＋CD8＋)或双阴性(CD4-CD8-)T淋巴细胞。(3)一般情况CD4＋/CD8＋比值>1，年龄越小CD4＋/CD8＋比值越大。CD4＋/CD8＋比值<1，提示T淋巴细胞亚群存在异常。

3.绝对计数的判断：

绝对数标准不同仪器和年龄段及人群存在差别。个体间变化也比较大。各个实验室所采用的标准有所不同。应根据实验室的参考范围进

(二)如何判断淋巴细胞亚群中哪种或几种细胞发生了变化

在淋巴细胞亚群结果判别中既要注意绝对计数的判别，也要判别相对计数也就是百分比的变化。淋巴细胞亚群发生变化可以是一种也可以是几种同时发生变化。

根据基本公式1和2，一种淋巴细胞亚群绝对数的变化在检测结果中不会影响到其他亚群绝对数变化，但可能引起自身相对计数和其他淋巴细胞亚群相对计数的变化。应注意判别。

1.一种淋巴细胞亚群变化：

(1)根据绝对计数判断：

依据绝对计数参考值范围进行判断，若一种淋巴细胞亚群明显高于参考值上限或低于参考值下限，其他亚群绝对计数基本正常，则可明确此群细胞存在异常。

(2)根据相对计数(百分比)进行判断：

若没有绝对计数报告，可根据相对百分比进行判断。

二一判别法[15]：用于判别T、B、NK三群淋巴细胞亚群中哪一种是引起相对计数改变的原因。根据百分比，在三种淋巴细胞中，找出二种变化趋势一致的，另一种则是异常的根源。

一二判别法[15]：用于判别T细胞两个亚群中哪一种是引起相对计数变化的原因。

以CD3＋T细胞百分比变化为基准，两种T细胞亚群CD4＋和CD8＋哪种百分比变化趋势与CD3＋T细胞一致，这种T细胞亚群则是异常

可通过相同样本血常规淋巴细胞计数换算出淋巴细胞亚群的绝对计数进行验证。

2．两种或以上淋巴细胞亚群变化：

此类情况不适合使用上述"二一判别法"和"一二判别法" 。

两种或以上的淋巴细胞亚群发生变化，需要仔细甄别，这种情况也比较多见。一种情况是两种淋巴细胞亚群同时发生变化，如联合免疫缺陷病，T、B细胞都缺如；还有些是原发于一种淋巴细胞亚群的变化，其他淋巴细胞亚群因感染等因素，发生继发性改变。

3.数据判别流程：

详见图1。

图1

淋巴细胞亚群结果判别流程

此部分内容很多情况使用"可能"、"也可能"等不确定词汇，说明外周血T、B、NK细胞绝对计数和相对百分比变化程度较大。这种变化一方面来自于儿童随年龄变化的特征，另一方面还受到许多环境、发育和疾病因素的综合影响。因此，评估淋巴细胞亚群的变化不应是孤立的，应同时结合临床与其他辅助检查结果，对临床价值做出判断。淋巴细胞亚群的变化也很少与临床疾病有一一对应的情况，这些变化与临床疾病往往是一对多或多对一的。在本部分内容中，"典型案例"是属于相对比较确定或常见的情况，其他可能出现的变化，临床实际中

也可能并不出现。使用本手册时应将其作为重要的临床辅助手段对待。熟练的应用还需要结合临床疾病不断地训练和总结。

(一)单一淋巴细胞亚群变化

1.仅CD3＋T细胞增多：

CD3＋T%增高；根据基本公式1，CD19＋%和CD16＋/CD56＋%相对降低。例如：CD3＋T 5 000个/μl；其他淋巴细胞无变化；CD3＋T：90%；CD19＋：8%；CD16＋/CD56＋：1%。CD3＋T细胞增多又可分为如下：

(1) CD4＋细胞增多为主，CD4＋%增高；根据基本公式2，CD8＋%相对降低；CD4＋/CD8＋比值增高。例如：生理现象，生命早期CD4＋T 细胞相对较多，比例较高；一些细菌感染可使CD4＋T细胞增多，比例增高；CD4＋/CD8＋比值也增高。锌制剂可能使CD4＋增多[16]。

(2) CD8＋细胞增多为主，CD8＋%增高；根据基本公式2，CD4＋%相对降低；CD4＋/CD8＋比值降低。例如：EBV感染引起的传染性单核细胞增多症[17]；其他许多病毒感染、真菌感染及肿瘤等也可出现此类变化。

(3) CD4＋和CD8＋T细胞均增多，CD4＋%，CD8＋%无改变；CD4＋/CD8＋比值正常。

2.仅CD3＋T细胞减少：

CD3＋T%降低；根据基本公式1，CD19＋%和CD16＋/CD56＋%相对增高。例如：CD3＋T 500个/μl；其他淋巴细胞无变化；CD3＋T：10%；CD19＋：80%；CD16＋/CD56＋：10%。可分为如下：