康复新液药用塑料瓶密封性挑战实验

康复新液药用塑料瓶铝箔封口密封性实验

1、目的：

通过微生物入侵的挑战性实验证明康复新液铝箔封口药用塑料瓶的密封性完好。

2、原理：

将灌装有康复新液的药用塑料瓶铝箔封口后浸泡于高浓度的菌液4小时，样品均无微生物入侵，证明铝箔封口密封性完好。

3、适用范围：

本实验适用于802、803车间康复新液药用塑料瓶铝箔封口的生产。

4、实验人员：

4.1生产技术部：负责实验的起草、实验的实施、实验数据的整理和审核。

4.2质量管理部：协助实验的起草，组织协调实验工作，并总结实验结果。

4.3化验室：负责按计划完成实验中的相关检验任务，确保检验结果的正确可靠。

4.4 802、803车间：协助实验工作的实施。

4.5质量授权人：负责实验内容和结果的审查。

5、实验内容：

5.1样品的制备

5.1.1制备方法：

由于康复新液富含营养物质，是微生物生长繁殖的理想环境，故可直接将康复新液作为微生物繁殖的培养基。

铝箔封口后连续取样100瓶，收集于一盘，做好标记，115℃灭菌30分钟。灭菌后每瓶进行编号，水平放置，使康复新液与铝箔封口内接缝充分接触，30-35℃放置14天，观察并记录瓶口是否长菌。

5.1.2判断标准：

所有样品均不应长菌。

5.1.3实验结果：

5.1.4小结：

实验人员：日期：

5.2确认康复新液促菌生长能力—营养性实验

5.2.1试验方法：

随机取试样20瓶，每瓶试样内接种0.1ml的铜绿假单胞菌ATCC 9027，菌液浓度：10～100CFU/0.1ml。在30～35℃下培养7天，或培养至所有试样都呈阳性结果并记录。

5.2.2判断标准：

在紫外灯下康复新液呈蓝绿色荧光，且所有接种铜绿假单胞菌的试样中，微生物生长良好。否则试验无效，须弃去全部试样，重新从头开始试验或改变培养基后重新开始试验。

5.2.3实验结果：

5.2.4小结：

实验人员：日期：

5.3挑战菌悬浮液的制备

5.3.1制备方法：

从铜绿假单胞菌ATCC 9027的新鲜斜面上取一整环培养物，分别接入含

10ml无菌培养基的试管中，在30～35℃下培养16～18h。将每管的培养物分别转入含1000ml相同培养基(SCDM／2)的容器内，于30～35℃下培养22～24h。培养结束后的菌悬液即可用来作药用塑料瓶密封性试验。

5.3.2判断标准：

若培养基明显浑浊，则挑战菌悬液制备成功。

5.3.3平板计数：

每毫升所含活菌数。

5.3.4实验结果：

实验人员：日期：

5.4微生物入侵实验

5.4.1试验方法：

将新鲜的铜绿假单胞菌ATCC9027的菌悬液倒入不锈钢桶中。将50个经灭菌的试样瓶盖去除，完全侵入菌悬液中，使瓶内康复新液与铝箔封口的内接缝充分接触，在菌悬液中持续浸泡4小时。

5.4.2将挑战试验用的试样培养7天，然后观察检查试样容器内培养基中微生物的生长情况。有生长记作+，无生长记作－。如果试样容器长菌，按5.2方法确认生长菌是挑战微生物——铜绿假单胞菌；如果所有试样容器都不长菌，则取10个试样按8.2进行培养基的营养性试验。

微生物生成长情况实验记录：

营养性实验记录： 5.4.3

试验结束后，挑战试验用菌悬液经121℃灭菌30分钟后丢弃。 5.4.4判断标准：

5.4.4.1步骤5.2、步骤5.4.2中进行的营养性试验都合格，试样的挑战试验才有效。

5.4.4.2在挑战试验开始时，挑战用菌悬液浓度（活菌数）必须达到1×106CFU/ml 。

5.4.4.3挑战试验中如长菌，需记录长菌的试样数，并按下述要求作进一步调查。

5.4.4.3.1仔细检查容器各部位封口处是否有缺损，造成微生物浸入。 5.4.4.3.2将观察到试样容器封口的缺陷，采用拍照详细记录。

5.4.4.3.3如果任何挑战试验中长菌的容器不是由于容器封口明显的物理性缺损所致，试验作失败论处。

5.4.5实验结果：

实验人员：日期：6、实验结果评定与结论

评价人：日期：