蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定
植物产品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定离子色谱法
ICS67．050B 04N Y 中华人民共禾口国农业行业标准NY／T 1 375—2007植物产品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定离子色谱法Determination of N i tr i te an d N i tr a te in Pl ant Pro duc tsIo n Chromatography Method2007-06一{4发布2007-09—01实施中华人民共和国农业部发布NY／T 1375—2007刚旨本标准的附录A为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。
本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、浙江大地农作物产品质量安全检测中心。
本标准的主要起草人：徐霞、陈能、王敏、朱智伟、段彬伍、郑床木、闵捷、于永红。
NY／T 1375—2007植物产品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定离子色谱法1范围本标准规定了采用离子色谱测定粮食、蔬菜、水果等植物产品中亚硝酸盐与硝酸盐的方法。
本标准适用于粮食、蔬菜、水果等植物产品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定。
本方法的线性范围：亚硝酸盐为0．05 mg／L--20rag／L(以N02-计)、硝酸盐为0．05 rag／L--50 rn g／L(以N03计)。
本方法的检出限：亚硝酸盐为0．1m g／k g(以N a N02计)、硝酸盐为0．2m g／k g(以N o N03计)。
2原理在弱碱性条件下，用热水提取样品中亚硝酸根离子(N02)和硝酸根离子(N03-)，经净化后，用离子交换色谱一电导检测器(或紫外检测器于波长210 rim处)测定，外标法定量。
3试剂除另有说明外，所用试剂均为分析纯，所用的水为电导率小于1”S／em的去离子水。
3．1亚硝酸钠(NaN02)，基准试剂。
3．2硝酸钾(KNOs)，基准试剂。
3．3氢氧化钾溶液[C(K OH)=1m ol／L]：称取6 g氢氧化钾，加入新煮沸过的冷水溶解，并稀释至100 mL，混匀。
3 4亚硝酸根离子标准贮备液(1 000 mg／L)：称取1．500 0 g于115"C±5"C烘至恒重的亚硝酸钠(3．1)，溶于水，置于1 000mL容量瓶中，加水至刻度，混匀。
食品中亚硝酸盐的测定
（一）亚硝酸盐的测定
原理：试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐 与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色 染料，与标准比较定量。 试剂 1 亚铁氰化钾溶液：称取106.0g亚铁氰化钾，用水溶解，并稀 释至1000mL。 2 乙酸锌溶液：称取220.0g乙酸锌，加30mL冰乙酸溶于水， 并稀释至1000mL。 3 饱和硼砂溶液：称取5.0g硼酸钠，溶于100mL热水中，冷 却后备用。
（二）硝酸盐测定—镉柱法
原理
• 试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，溶液通过镉柱，使其
中的硝酸根离子还原成亚硝酸根离子，在弱酸性条件下 ，亚硝酸根与对氨苯基磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二 胺偶合形成红色染料，测得亚硝酸盐总量，由总量减去 亚硝酸盐含量即得硝酸盐含量。
（二）硝酸盐测定—镉柱法
1 氨缓冲溶液(pH9.6～9.7)：量取20 mL盐酸.加50 mL水，混 匀后加50 mL氨水，再加水稀释至1 000 mL，混匀。
• 井水中含有亚硝酸盐，据报道广东一村庄受井水中亚硝酸盐危
害几十年，男人寿命不足40岁，经化验结果表明亚硝酸盐含 量大大超过国家标准。
• 亚硝酸盐在食品生产中作为食品添加剂使用，用作发色剂和防
腐剂，允许用于肉及肉制品的生产加工中，其作用是使得肉与 肉制品呈现良好的色泽。
1.农产品中硝酸盐来源
• 化肥：硝酸铵、硝酸钙、硝酸钾、硝酸钠和尿素等； • 生活污水、生活垃圾与人畜粪便：1公斤垃圾粪便堆肥在自然
够容纳 2 倍试样体积的带盖容器中，通过反复摇晃和颠倒容器使样品充 分混匀直到使试样均一化。
• 发酵乳、乳、炼乳及其他液体乳制品：通过搅拌或反复摇晃和颠倒容器使
试样充分混匀。
• 干酪：取适量的样品研磨成均匀的泥浆状。为避免水分损失，研磨过程中
蔬菜中亚硝酸盐含量测定
+本科毕业论文题目：几种蔬菜中亚硝酸盐含量的动态分析学院：食品科学与工程学院姓名：XXX学号：xxxxxxx专业：食品质量与安全班级：食安091班指导教师：xxx 职称：讲师二〇一三年四月目录摘要 (I)ABSTRACT (II)1 引言 (1)1.1概述 (1)1.2测定方法及研究的意义 (1)2 实验材料与方法 (2)2.1实验材料 (2)2.1.1 原材料 (2)2.1.2 主要仪器 (2)2.2实验方法 (3)2.2.1 亚硝酸盐的测定 (3)2.2.2 菌落总数的测定 (4)2.3蔬菜在家庭贮藏与加工条件下的亚硝酸盐含量的测定 (6)2.3.1 不同贮藏温度对蔬菜中亚硝酸盐含量的影响 (6)2.4煮熟菠菜在常温条件下，亚硝酸盐含量与菌落总数的关系 (6)3 实验结果与分析 (7)3.1标准曲线的绘制 (7)3.2消除抗坏血酸对实验的影响 (7)3.3家庭加工及加工后贮藏对亚硝酸盐含量的影响 (8)3.3.1 不同贮藏温度对蔬菜中亚硝酸盐含量的影响 (8)3.3.2 不同煮沸时间对蔬菜中亚硝酸盐含量的影响 (9)3.3.3 煮熟菠菜在常温条件下，亚硝酸盐含量与菌落总数的关系 (10)4 结论 (11)参考文献 (12)致谢 (13)摘要新鲜蔬菜中的亚硝酸盐含量会随着贮藏和加工条件的改变而变化，本文以分光光度法测定蔬菜中亚硝酸盐含量，分别研究了芹菜、番茄、白菜、白萝卜、菠菜和四季豆在不同贮藏温度、不同煮沸时间条件下，亚硝酸盐含量的变化；蔬菜煮熟后室温放置一定时间，亚硝酸盐含量与菌落总数之间的关系。
根据《食品中污染物限量》(GB 2762－2005)规定，蔬菜中亚硝酸盐限量卫生标准≤4 mg/kg。
试验结果表明：室温存放叶类、茎类、鲜豆类蔬菜分别不超过三天、四天和四天；根类和茄果类蔬菜中的亚硝酸盐含量在检测周期内（一周）没有超过限量标准；冰箱存放叶类蔬菜不超过四天；茎类、鲜豆类、根类和茄果类蔬菜中的亚硝酸盐含量在检测周期内（一周）没有超过限量标准。
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的测定及含量分析
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的测定及含量分析
硝酸盐和亚硝酸盐在一些地区的日常食物中存在，如蔬菜和肉类。
它们也被添
加到食品中，如香肠和酱油，以改善口感和保鲜时间，可以减少有害微生物的生长。
硝酸盐和亚硝酸盐在高浓度下有毒，所以监管机构和食品安全官员必须密切监测它们在食品中的含量，以确保食物安全。
为了确定蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量，原理是用水解和酸解的方法，然后
用标准的分光光度法进行测定分析。
首先解冻样品，采用乙醇或其他适当的溶剂消化；消化液可以用酸浓度调节器进行调节，如HCl或NaOH；然后将消化液向容易
对比度测量物体中添加适量氧化铌，水解时加热蒸发；最后添加分光光度滴定液，如凯氏滴定液，测量出总硝酸盐摩尔浓度，并建立比例。
以上是硝酸盐和亚硝酸盐在蔬菜样品中的分析测定方法。
硝酸盐和亚硝酸盐的含量可以通过上述方法利用标准的分光光度法确定。
这一
测定方法简单容易，重点是精确度较高，可以准确检测出不同样品中硝酸盐和亚硝酸盐的含量，从而提高食物的安全性。
蔬菜中硝酸盐亚硝酸盐含量评价标准
蔬菜中硝酸盐亚硝酸盐含量评价标准蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是食品中主要存在的两种争议性化学物质。
硝酸盐和亚硝酸盐的摄入与一些癌症的发生有关，因此对其含量进行评价并制定相应的标准非常重要。
硝酸盐是一种常见的氮源，它在植物体内通过硝酸还原酶系列反应被还原为亚硝酸盐。
硝酸盐主要存在于土壤中，在植物生长过程中会被吸收和积累。
硝酸盐在人体内可以转化为亚硝酸盐，进一步转化为亚硝酸和亚硝胺。
亚硝酸盐是一种有害物质，它可导致亚硝酸盐中毒、致癌等健康问题。
目前，蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的评价标准主要有以下几种：1.GB2762-2024《食品安全国家标准蔬菜中亚硝酸盐的限量》根据《食品安全国家标准蔬菜中亚硝酸盐的限量》，蔬菜中亚硝酸盐的最大限量分别为：生菜0.10mg/kg，黄瓜0.20mg/kg，番茄0.20mg/kg，胡萝卜0.30mg/kg，茄子0.30mg/kg，辣椒0.50mg/kg，大蒜0.50mg/kg，韭菜0.50mg/kg，葱0.50mg/kg，芹菜0.50mg/kg，菠菜0.50mg/kg。
2.WHO和FAO联合国际食品标准委员会3.欧洲食品标准局（EFSA）欧洲食品标准局（EFSA）通过各类科学研究和实验证据，建议将蔬菜中硝酸盐的日摄入量限制在每公斤体重体积为3.7毫克，并对食品加工业提出了相应的建议和标准。
不同国家或地区制定的评价标准会有所不同，但都致力于保护人们的健康，防止硝酸盐和亚硝酸盐造成的健康问题。
为了降低蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量，可以采取以下措施：1.合理施肥：合理使用有机肥料和化学肥料，尽量减少硝酸盐的累积。
2.控制生长环境：合理调控温度和湿度，避免植物在高温和潮湿条件下生长，以减少硝酸盐的积累。
3.适时采摘：及时采摘新鲜蔬菜，减少硝酸盐的转化。
4.加工和烹饪：在加工和烹饪过程中，可采用烹饪、脱水和浸泡等方法，适当降低蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量。
总之，评价蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的标准主要是为了确保食品安全，保护人们的健康。
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定摘要：蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是一种对人体有害的化学物质,其含量比其它植物都高,人体摄入它会引起多种疾病.本实验采用分光光度发分别对拜城县恰玛古，柯坪县恰玛古，伊宁市恰玛古，大白菜，黄萝卜，黄瓜中亚硝酸盐及硝酸盐含量进行测定。
结果表明：（1）亚硝酸盐：六种蔬菜中亚硝酸盐含量有明显的差异，测定结果是：大白菜0.7919mg/g，黄萝卜0.6930mg/g，黄瓜0.5763mg/g，拜城恰玛古0.5528mg/g，伊宁恰玛古1.1294 mg/g，柯坪恰玛古0.5174mg/g。
（2）硝酸盐：大白菜1.6098mg/g，黄萝卜0.0598mg/g，黄瓜0.7421mg/g，拜城恰玛古0.2608mg/g，伊宁恰玛古2.5308mg/g，柯坪恰玛古0.0317mg/g，蔬菜中亚硝酸盐含量的回收率88.80%。
关键词：硝酸盐；亚硝酸盐；蔬菜；测定方法；前言：蔬菜尤其是叶菜类蔬菜,是一种易于富集硝酸盐的植物。
人体摄入的硝酸盐81.2％来自蔬菜[1]。
硝酸盐本身毒性不大,对人畜无直接的危害,但含量过高对人体可能造成危害,因为在微生物的作用下极易还原为亚硝酸盐。
亚硝酸盐是一种有毒物质,可直接使动物中毒!造成亚铁血红蛋白症,严重可致死亡[2]。
亚硝酸盐，一类无机化合物的总称。
主要指亚硝酸钠.亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。
外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。
由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。
食入0.3～0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡[3]。
硝酸盐,亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,其对人类健康和生态环境的危害,日益受到人们的普遍关注。
硝酸盐在细菌的作用下可还原成亚硝酸盐,使血液的载氧能力下降,从而导致高铁血红蛋白症。
联合国世界卫生组织和粮农组织[4]早在1973 年就制定了食品中硝酸盐的限量标准,以ADI值为基础,提出蔬菜可食部分中硝酸盐含量的卫生标准为432mg/kg (鲜样),亚硝酸盐成人每人每日容许量为7.8mg。
泡菜的总酸、硝酸盐、亚硝酸盐值的测定实验实验报告
《专业技能实践2——14食品质量安全》报告专业食品质量与安全姓名成绩班级学号日期项目二泡菜发酵过程中亚硝酸盐含量变化及安全控制一、目的1、学习泡菜制作工艺，了解泡菜制作原理；2、了解泡菜品质的影响因素的作用效果（0.25%D-异抗坏血酸）；3、了解泡菜质量评价指标；4、掌握泡菜中总酸、亚硝酸盐、硝酸盐含量的测定方法及变化规律。
二、原理与方案1、乳酸发酵是乳酸菌将糖类物质转化成主要产物乳酸的生物化学过程。
乳酸发酵的好坏与泡菜的品质密切相关。
在蔬菜盐渍过程中，应尽量满足乳酸菌生长繁殖的条件，尽可能抑制有害微生物的繁殖，并尽可能减少营养成分的损失。
影响乳酸菌发酵的因素主要是食盐浓度（最适盐度为3-5%）、温度（最适温度为25～35℃）、酸度（乳酸菌抗酸性强）、空气（乳酸菌为厌气性细菌）以及香辛调味料（一定的防腐作用）。
2、总酸测定原理（直接滴定法）：根据酸碱中和原理,用碱液滴定试液中的酸,根据电位的“突跃”判断滴定终点。
用NaOH标准溶液滴定试液中的酸,以酚酞为指示剂确定滴定终点,按NaOH标准溶液的消耗量计算食品中的总酸含量。
3、亚硝酸盐测定原理：样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化，产生重氮盐，此重氮盐再与显色物质(盐酸萘乙二胺)偶合形成紫红色染料，测定其吸光度后，可与亚硝酸盐含量标准曲线比较得到亚硝酸盐浓度。
4、硝酸盐测定原理：利用活性炭的吸附作用除去样品中的色素干扰。
通过硝酸根离子在220nm波长处的吸收值与硝酸盐含量标准曲线比较定量，从而计算得到硝酸盐浓度。
三、步骤（1）、小组分工：（小组长：罗旭红）（各项负责人按主次排列）总酸泡菜黎家宾蔡伟贤发酵液蔡伟贤罗旭红亚硝酸盐莫卓妍黎家宾硝酸盐罗旭红蔡伟贤配试剂蔡伟贤莫卓妍（2）、制作泡菜：原料：白菜1kg、水2.5L、100克，精盐157.5g（盐度4.5%），D-异抗坏血酸6.25g （0.25%）、白酒适量、香辛调味料适量（辣椒、花椒、八角）。
亚硝酸盐和硝酸盐2019上传
1 硝酸盐（nitrate）和亚硝酸盐（nitrite）简介
特点(features ) ：
• 食品中硝酸盐和亚硝酸盐主要来源有人工化肥、生活污水、雨水、食品防腐和保鲜添加、 转化过程；下面分别分析：
量过多或者过少，都会影响还原效率，一般为灰黑色。它能使 还原的历程作一些细微的变动，如加速反应，防止过渡还原等
3 分光光度法检测食品中硝酸盐和亚硝酸盐
镉柱制备(Cadmium column) ：
• 镉柱装填：用水装满镉柱，并在柱子底部装入高2cm高的玻璃棉，加入海绵状镉10-20cm， 再覆上玻璃棉。
3 分光光度法检测食品中硝酸盐和亚硝酸盐
标液试剂(reagents) ：
• 氨缓冲溶液（ammonia buffer）：盐酸30mL,氨水（25％）65mL稀释至100mL，pH9.6~9.7。 （作用：1、控制溶液pH值在稳定的范围内；2、做络合剂，防止反应生成的镉表面形成
的沉淀阻止反应进一步进行（锌与强碱生成锌酸盐。和氢氧化铝不同，能溶于氨水中生成 锌氨络离子：Zn(OH)2+4NH3=〔Zn(NH3)4〕2++20H-），所以沉淀剂要少用）
1 硝酸盐（nitrate）和亚硝酸盐（nitrite）简介
分子结构及特点（molecular structure & features）：
• 硝酸根：1个氮原子、3个氧原子，化学式：NO₃• 亚硝酸根：1个氮原子、2个氧原子，化学式：NO₂
• 硝酸盐相对更稳定，直到它被口腔中的细菌或体内的酶转化为亚硝酸盐。
参考文献： • GB 8538-2016 食品安全国家标准-饮用水天然矿泉水检验方法 • GB/T5750.5-2006 生活饮用水标准检验方法-无机非金属指标 • GB 5009.33-2016 食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定 • GB/T 13085-2005 饲料中亚硝酸盐的测定 比色法
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蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定摘要：蔬菜中的硝酸盐和亚硝酸盐是一种对人体有害的化学物质,其含量比其它植物都高,人体摄入它会引起多种疾病.本实验采用分光光度发分别对拜城县恰玛古，柯坪县恰玛古，伊宁市恰玛古，大白菜，黄萝卜，黄瓜中亚硝酸盐及硝酸盐含量进行测定。
结果表明：（1）亚硝酸盐：六种蔬菜中亚硝酸盐含量有明显的差异，测定结果是：大白菜0.7919mg/g，黄萝卜0.6930mg/g，黄瓜0.5763mg/g，拜城恰玛古0.5528mg/g，伊宁恰玛古1.1294 mg/g，柯坪恰玛古0.5174mg/g。
（2）硝酸盐：大白菜1.6098mg/g，黄萝卜0.0598mg/g，黄瓜0.7421mg/g，拜城恰玛古0.2608mg/g，伊宁恰玛古2.5308mg/g，柯坪恰玛古0.0317mg/g，蔬菜中亚硝酸盐含量的回收率88.80%。
关键词：硝酸盐；亚硝酸盐；蔬菜；测定方法；前言：蔬菜尤其是叶菜类蔬菜,是一种易于富集硝酸盐的植物。
人体摄入的硝酸盐81.2％来自蔬菜[1]。
硝酸盐本身毒性不大,对人畜无直接的危害,但含量过高对人体可能造成危害,因为在微生物的作用下极易还原为亚硝酸盐。
亚硝酸盐是一种有毒物质,可直接使动物中毒!造成亚铁血红蛋白症,严重可致死亡[2]。
亚硝酸盐，一类无机化合物的总称。
主要指亚硝酸钠.亚硝酸钠为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。
外观及滋味都与食盐相似，并在工业、建筑业中广为使用，肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。
由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。
食入0.3～0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡[3]。
硝酸盐,亚硝酸盐广泛存在于人类环境中,其对人类健康和生态环境的危害,日益受到人们的普遍关注。
硝酸盐在细菌的作用下可还原成亚硝酸盐,使血液的载氧能力下降,从而导致高铁血红蛋白症。
联合国世界卫生组织和粮农组织[4]早在1973 年就制定了食品中硝酸盐的限量标准,以ADI值为基础,提出蔬菜可食部分中硝酸盐含量的卫生标准为432mg/kg (鲜样),亚硝酸盐成人每人每日容许量为7.8mg。
蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐含量的高低已成为衡量蔬菜安全与否的一项重要指标,因此快速准确地测定蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的含量极为重要[5]。
-)是氮循环的中间产物，不稳定,广泛存在于水体、土壤和各类食品中。
根亚硝酸盐(NO2据水环境条件，可被氧化成硝酸盐，也可被还原为氨。
亚硝酸盐可使人体正常的血红蛋白（低铁血红蛋白）氧化成为高铁血红蛋白，发生高铁血红蛋白症，失去血红蛋白在人体内输送氧的能力，导致出现组织缺氧症状。
另外，在人的肠胃中，亚硝酸盐还可与仲胺类物质反应，生成具有致癌性的亚硝胺类物质。
因此，亚硝酸盐成为水质、食品等的重要监测项目之一[6]。
用分光光度法测定蔬菜中亚硝酸盐含量时，为了消除蛋白质对测定结果的干扰，往往通过沉淀的方法来去除蛋白质[7]。
在GB《中华人民共和国国家标准—食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定（GB/T5009.33—1996）中的格里斯试剂比色法》中，“样品处理”的主要目的就是通过沉淀来去除蛋白质，获测定所需的澄清滤液[8]。
样品处理时所加的氢氧化钠溶液，亚铁氰化钾，乙酸锌溶液和水浴加热的作用是使蛋白质变性而易沉淀[9]。
本文根据测定亚硝酸盐的标准方法于540 nm处测定生成的偶氮化合物的吸光度,从而建立了一种简单、快速、灵敏度较高的测定痕量亚硝酸盐的方法。
1.1实验部分1.1.1实验原理弱碱性条件下,用饱和四硼酸钠、亚铁氰化钾、乙酸锌沉淀除去蛋白质,氢氧化铝悬浮液脱色,减压抽滤;在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸酰胺起重氮化作用,再与萘乙二胺盐酸盐和对氨基苯磺酸反应,生成紫红色偶氮染料,于波长540nm 处测量蔬菜中亚硝酸盐的含量。
1.1.2仪器与试剂1.1.2.1 实验仪器：搅汁机;恒温水浴锅;722型分光光度计;电子天平;冰箱供试蔬菜为：大白菜，黄萝卜，黄瓜，拜城恰玛古，伊宁恰玛古，柯坪恰玛古。
1.1.2.2实验试剂主要试剂有10.6%亚铁氰化钾溶液；22%乙酸锌溶液；饱和四硼酸钠溶液；磺胺；萘乙二胺盐酸盐；盐酸；镉粒；氨缓冲溶液；活性碳；硝酸钾；亚硝酸钠标准使用液；1.1. 3试剂的配制：①10.6 %亚铁氰化钾溶液:称取106g(10.6g) 亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6·3H2O] ,溶于水后,稀释至1000ml(100ml)。
②22%乙酸锌溶液:称取220g(22g)乙酸锌[Zn (CH2COO)2·2H2O] ,加30ml冰乙酸和适量水溶解,并用水稀释至1000ml(100ml)。
③饱和四硼酸钠溶液:称取25g(5g)四硼酸钠(Na2B4O7·10H2O),溶于500ml(100ml)热水中,冷却后备用。
④对氨基苯磺酸溶液:称取0.8g对氨基苯磺酸,溶于12 %乙酸溶液150ml中(低温加热并搅拌加速溶解),冷却后避光保存。
⑤α—萘胺溶液:称取0.2gα—萘胺溶于数滴冰乙酸中,再加12%乙酸溶液150ml,混匀,避光保存。
⑥对氨基苯磺酸和α—萘胺混合液:测定前,将对氨基苯磺酸溶液与α—萘胺溶液两种溶液等体积混合摇匀,备用。
⑦亚硝酸钠标准储备溶液:精密称取0.2999g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠,加水溶解移入1000ml容量瓶中,加2ml氯仿作为保护剂,并稀释至刻度。
此溶液每毫升相当于0.2 mg亚硝酸根。
⑧亚硝酸钠标准使用液:临用前,吸取亚硝酸钠标准储备溶液5.00 ml ,置于100ml容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每毫升相当于10μg亚硝酸钠。
⑨氢氧化铝悬浮液:称取125g(12.5g)硫酸铝溶于1000ml(100ml)蒸馏水中,慢慢加入浓氨水,使铝离子沉淀完全,放置澄清后倾去上层清液,加蒸馏水反复洗涤,直至清液加氯化钡溶液(检查硫酸根)和硝酸银溶液(检查氯离子)无浑浊现象为止,最后向氢氧化铝胶体沉淀中加300ml蒸馏水,使用时振摇均匀。
1.1.3 标准曲线的绘制准确吸取10μg/ml亚硝酸钠标准使用液0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml依次加入到50mL容量瓶,再分别加人3～4滴HCl(1∶1)混匀,2ml对氨基苯磺酸—α—萘胺混合液混匀,静置15 min,用3cm比色杯,于波长540nm处测吸光度,绘制标准曲线，结果见表2-2，图2-2。
1.1.4样品处理与测定（表1-1）测定亚硝酸盐含量的取样量（g）大白菜黄萝卜黄瓜拜城恰玛古伊宁恰玛古柯坪恰玛古第一次20.004 20.068 20.078 20.012 20.03 20.015第二次20.077 20.059 20.089 20.009 20.033 20.027第三次20.015 20.003 20.017 20.038 20.070 20.030把样品洗净，匀浆，称取20g匀浆液于烧杯中，加60ml热水（65℃—75℃），用NaOH 溶液调节至偏碱性，再用水将样品全部转移至50ml 溶液瓶中，置于60℃水浴加热10min，取出冷却，加水至刻度，混匀，静置30min，上清液经乙酸锌和活性炭混合过滤，收集滤液备用。
亚硝酸盐测定：用移液管吸取20ml提取液于50ml容量瓶中,用水稀释至约30ml,加入磺胺溶液5ml,再加入盐酸溶液3ml,混匀,置于室温遮光处,加入萘乙二胺盐酸盐1ml,混匀,用水定容。
在波长540nm处测定吸光度。
依公式求得样品中亚硝酸盐含量，结果见表4。
硝酸盐测定：用移液管吸取提取液20ml于50ml具塞锥形瓶中,加入5ml蒸馏水,5ml氨缓冲液和2g镉粒,振荡,过滤得还原液。
吸取10ml还原液至50ml容量瓶中。
显色步骤同亚硝酸盐测定步骤,依公式求得硝酸盐含量，结果见表2-3。
1.2.5计算样品中亚硝酸盐含量公式：C ×50X=—————————— m ×V 2/ V 1×1000式中： X ——样品中亚硝酸盐的含量，mg/g ；m ——样品质量，g ；C ——查得样品在曲线上浓度, μg/mLV 1——样品处理液总体积，mL ； V 2——测定用样液体积，mL 。
2.结果与分析分光光度法测定各蔬菜中亚硝酸盐及硝酸盐含量实验中对样品三次平衡分析，测定结果见下表。
亚硝酸盐最大吸收波长的选择：（表2-1） 波长 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590吸光度 0.065 0.085 0.102 0.115 0.121 0.117 0.11 0.096 0.072 0.0475005205405605806000.040.050.060.070.080.090.100.110.120.13吸光度/A波长/nmB（图2-1）亚硝酸盐标准液的吸收波长从表2-1，图2-1可以看出亚硝酸盐标准液的最大吸收波长为540nm.最大吸收波长对应的吸光度为0.121 。
亚硝酸盐标准曲线的绘制：（表2-2）亚硝酸盐标准溶液的浓度及吸光度浓度(μg/mL ) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1吸光度(A)0 0.089 0.201 0.329 0.451 0.5840.00.20.40.60.81.00.00.10.20.30.40.50.6吸光度（A ）浓度（ug/mL)BLinear Fit of Data1_BY=-0.01962+0.59057*xR=0.99811（图2-2）亚硝酸盐标准液的标准曲线亚硝酸盐及硝酸盐含量的测定（表2-3）不同蔬菜中亚硝酸盐的含量(mg/g)吸光度 浓度 含量 平均值 相对平准偏差 大白菜0.051 0.1196 0.7472 0.7919 3.76% 0.057 0.1297 0.8078 0.058 0.1314 0.8208 黄萝卜0.043 0.1060 0.6605 0.6930 3.18% 0.046 0.1111 0.6924 0.049 0.1162 0.7261 黄瓜0.032 0.0874 0.5442 0.5763 4.79%0.039 0.0993 0.6176 0.034 0.0908 0.5670 拜城恰玛古 0.0340.0908 0.5671 0.5528 4.74%0.035 0.0925 0.5778 0.029 0.0823 0.5136伊宁恰玛古 0.092 0.1890 1.1795 1.12942.96%0.087 0.1805 1.1265 0.0830.1738 1.0822 柯坪恰玛古 0.028 0.0806 0.50360.031 0.0857 0.5350 0.5174 2.26%0.0290.08230.5138（表2-4）不同蔬菜中硝酸盐的含量(mg/g)总吸光度 总浓度 总含量 硝酸盐含量 平均值 相对平准偏差 大 白 菜 0.217 0.4007 2.5036 1.7564 1.6098 7.29% 0.193 0.3600 2.2415 1.4338 0.213 0.3939 2.4600 1.6391 黄 萝 卜 0.049 0.1162 0.7237 0.0633 0.0598 7.85% 0.051 0.1196 0.7452 0.0528 0.055 0.1264 0.7896 0.0635 黄 瓜 0.108 0.2161 1.3454 0.8012 0.7421 6.09% 0.103 0.2076 1.2919 0.6743 0.105 0.2110 1.3177 0.7508 拜城恰玛古 0.057 0.1297 0.8104 0.2433 0.2608 4.47% 0.061 0.1365 0.8528 0.2750 0.054 0.1247 0.7776 0.2641 伊宁恰玛古 0.331 0.5937 3.7051 2.5255 2.5308 0.14% 0.327 0.5869 3.6622 2.5357 0.323 0.5802 3.6133 2.5311 柯坪恰玛古0.031 0.0857 0.5353 0.0317 0.0317 0.11%0.034 0.0908 0.5667 0.0317 0.032 0.0874 0.5455 0.0317亚硝酸盐回收试验：在蔬菜样品中添加标准物质后与样品的制备，样品含量测定步骤相同条件下做回收试验。