非发酵革兰阴性杆菌
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非发酵菌及检验
氧化酶（+） 触酶（+） 不分解任何糖 动力、吲哚、 甲基红、VP 、DNA酶（-） 6.5%NaCL肉汤不生长
+ 二、微生物检验
+ 1.标本采集 + 2.方法与鉴定
+ 临床意义
人和动物黏膜上的正常菌群，也引起社 区和医内感染。本菌是呼吸道感染的主要 致病菌。大多菌株对青霉素、四环素、氨 基糖苷类敏感。
+ 1.标本采集 + 2.方法及鉴定
+ 临床意义
条件致病菌 医院感染常见菌 对广谱抗生素有耐药性，红霉素、克 林霉素、复方磺胺敏感。
鉴定试验
肠杆菌科
非发酵菌
弧菌科
氧化酶
葡萄糖氧化/ 发酵（O/F） 鞭毛
－
F
＋
O／－
＋
F
周鞭毛
单、丛、周
单、丛
+ 脑膜败血性黄杆菌 + 芳香黄杆菌 + 短黄杆菌
+ 水生黄杆菌
+ 嗜糖黄杆菌 + 嗜醇黄杆菌
+ 嗜温黄杆菌
+ F.yabuuchiae
+ 定义：氧化酶阳性、产黄色素、无动力、
吲哚阳性或阴性的非发酵革兰阴性菌。
+ 一、生物学性状 + 1.形态与染色 革兰阴性杆菌 菌体细长
两端略膨大 无动力 无芽胞
发 氧 产
+ 《伯杰系统细菌学手册》（1984）分类法
+ + + + + +
按rRNA和DNA同源性，分5个RNA Ⅰ 铜绿假单胞菌 Ⅱ 洋葱假单胞菌 鼻疽假单胞菌 Ⅲ 食醋假单胞菌 Ⅳ 微小假单胞菌 Ⅴ 嗜麦芽假单胞菌 腐败假单胞菌
铜绿假单胞菌生物学特性、实验室检查、生化鉴定、临床症状、耐药性及预防措施
铜绿假单胞菌生物学特性、实验室检查、生化鉴定、临床症状、耐药性及预防生物学特性铜绿假单胞菌是常见条件致病菌，属于非发酵革兰氏阴性杆菌。
菌体细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。
菌体的一端有单鞭毛，在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。
铜绿假单胞菌为专性需氧菌，最适生长温度为25~30℃，特别是该菌在4℃不生长而在42℃可以生长的特点可用以鉴别。
在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素，绿脓素与带荧光的水溶性荧光素等。
在血平板上会有透明溶血环。
含有O抗原以及H抗原。
O抗原包含两种成分：一种是其外膜蛋白，为保护性抗原；另一种是脂多糖，有特异性。
O抗原可用以分型。
实验室检查标本来源。
采自不同感染部位的各种标本，包括血液、尿液、痰标本、脓汁、穿刺液等。
还包括来自医院环境中的各种标本如水、空气、物体表面采样等。
染色镜检。
为革兰阴性杆菌，菌体大小(1.5~5.0)um×宽(0.5~1)um，细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。
菌体的一端有单鞭毛，无芽胞，无荚膜。
分离培养本菌生长对营养要求不高。
对有正常菌群存在的临床标本或来自环境中的标本应接种选择性培养基如麦康凯琼脂培养基(MAC)；对无正常菌群存在的临床标本如血液、脑脊液、穿刺液等可接种普通全营养型培养基或血琼脂培养基、铜绿假单胞菌培养基。
普通琼脂培养基上生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落，该菌所产生的带荧光的水溶性青脓素与绿脓素相结合将使得培养基呈亮绿色；在血琼脂平板上生长时可以见到在菌落的周围有溶血环，菌落呈金属光泽；在铜绿假单胞菌培养基上呈蓝绿色或者红褐色菌落，365nm紫外灯下显荧光。
如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长，在液体表面形成菌落，而在培养基底部的细菌生长不良。
生长实验。
铜绿假单胞菌在4℃不生长而在42℃可以生长。
生化鉴定分型(1)噬菌体分型：所应用的噬菌体现有24株，分型率达90%。
非发酵
素（兰绿色，可溶于水）和荧光素（即青脓素， 黄或黄绿色，只溶于水）。从临床标本中分离的 菌株大多产生此色素（90%）
铜绿假单胞菌在血琼脂平 板上的菌落特征（18-24h）
80-90%产生绿脓素和荧光素
铜绿假单胞菌产绿脓素
铜绿假单胞菌产ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ光素
铜绿假单胞菌荧光素
铜绿假单胞菌绿脓素
麦康凯上可形成5种不同形态的菌落：
（一）生物性状
形态染色性：革兰阴性菌杆，呈球杆 状或长丝状，长短不一，单个或短链排列。 无芽胞，无荚膜，单端单鞭毛，运动活泼。
培养特性：
专性需氧，4℃不长，42℃可生长。 血平板：典型的菌落扁平、湿润、毛玻璃
样、金属光泽、有透明的溶血环、生姜味、菌落 和培养基灰绿色
普通平板：可产多种色素，主要有：绿脓
假单胞菌属共同点
• 革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜，单或 丛鞭毛 • 专性需氧 • 氧化酶：＋ • O/F：O • 产生水溶性色素
二 铜绿假单胞菌
• 假单胞菌属的代表菌种，假单胞菌感染 主要为铜绿假单胞菌，分布广泛主要的 条件致病菌。
铜绿假单胞菌－－形态染色
• 革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜，单 鞭毛
肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别
鉴定试验 氧化酶 葡萄糖氧化/ 发酵（O/F） 鞭毛 肠杆菌科 － F 非发酵菌 ＋ O／－ 弧菌科 ＋ F
周鞭毛
单、丛、周 单、丛
不发酵革兰阴性杆菌
常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定
试验
假单胞菌属 无色杆菌属 黄杆菌属 不动杆菌属 产碱杆菌属 丛毛菌属
莫拉菌属
氧化酶
①典型型：灰绿色，大小不一，扁平湿润， 边缘不齐，表面可见金属光泽。 ②大肠菌群型：圆形凸起，灰白色半透明。
铜绿假单胞菌在血琼脂平 板上的菌落特征（18-24h）
80-90%产生绿脓素和荧光素
铜绿假单胞菌产绿脓素
铜绿假单胞菌产ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ光素
铜绿假单胞菌荧光素
铜绿假单胞菌绿脓素
麦康凯上可形成5种不同形态的菌落：
（一）生物性状
形态染色性：革兰阴性菌杆，呈球杆 状或长丝状，长短不一，单个或短链排列。 无芽胞，无荚膜，单端单鞭毛，运动活泼。
培养特性：
专性需氧，4℃不长，42℃可生长。 血平板：典型的菌落扁平、湿润、毛玻璃
样、金属光泽、有透明的溶血环、生姜味、菌落 和培养基灰绿色
普通平板：可产多种色素，主要有：绿脓
假单胞菌属共同点
• 革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜，单或 丛鞭毛 • 专性需氧 • 氧化酶：＋ • O/F：O • 产生水溶性色素
二 铜绿假单胞菌
• 假单胞菌属的代表菌种，假单胞菌感染 主要为铜绿假单胞菌，分布广泛主要的 条件致病菌。
铜绿假单胞菌－－形态染色
• 革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜，单 鞭毛
肠道杆菌、非发酵菌、弧菌科鉴别
鉴定试验 氧化酶 葡萄糖氧化/ 发酵（O/F） 鞭毛 肠杆菌科 － F 非发酵菌 ＋ O／－ 弧菌科 ＋ F
周鞭毛
单、丛、周 单、丛
不发酵革兰阴性杆菌
常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定
试验
假单胞菌属 无色杆菌属 黄杆菌属 不动杆菌属 产碱杆菌属 丛毛菌属
莫拉菌属
氧化酶
①典型型：灰绿色，大小不一，扁平湿润， 边缘不齐，表面可见金属光泽。 ②大肠菌群型：圆形凸起，灰白色半透明。
非发酵菌及检验
窄食单胞菌属(Stenotrophmonas) 土壤杆菌属
丛毛单胞菌属(Comamonas)
金氏杆菌属(Kingella) 食酸菌属（Acidovorax）
莫拉菌属(Moraxella)
鉴定系统
非发酵菌生化鉴定系统
假单胞菌属
(Pseudomonas)
一、分类 P335
假单胞菌属包括200多个菌种，尤以铜绿假单 胞菌（P.aeruginosa）多见。 恶臭假单胞菌生物变种(P.putica biovars)
• 非发酵革兰阴性菌（非发酵菌）的概念、
二、细菌特性
1. 形态染色
革兰阴性杆菌， 多为球杆状，单个存
在或成双排列，无芽
胞，无鞭毛，粘液型
菌株有荚膜。
2. 培养特性
专性需氧，营养要求不高，最 适生长温度为37℃，但有些 菌株可在42℃生长。 血琼脂平板：菌落圆形、光滑、 边缘整齐、灰白色，多数菌 株不溶血，有些β溶血。
麦康凯琼脂平板：菌落呈粉红 色，但在SS琼脂培养基上只 有部分菌株生长。
四、微生物学检验
胸水、血液 血清间接荧光 抗体染色、 ELISA等 气管分泌物和肺、肝、脾组织 分离培养 BCYE或BCYE＋抗生素 血琼脂平板、巧克力琼脂平板 35℃ 2.5%CO2 24h生长 （非军团菌） 48h后生长 革兰染色 姬美耐染色 革兰阴性菌 革兰阳性菌 非军团菌 直接荧光抗体 PCR、DNA探针 双相培养基 BCYE 增菌培养
3. 生化反应
氧化酶－
O/F试验为氧化型（O）
硝酸盐还原试验－
三、临床意义
条件致病菌，医院感染的常见病
原菌。
可从各种临床标本如血液、尿液、
脓液、呼吸道分泌物及脑脊液等
非发酵菌群的分类鉴定
• 该菌的生长特性、营养要求、及其它生物 学性状与铜绿假单胞菌极为相似，所不同 的是氧化酶阴性，这是与假单胞菌属相区 别的重要特性；此外，该菌一端具有3根以 上丛鞭毛，运动活泼，可与氧化酶阴性的 不动杆菌属和副百日咳鲍特氏菌相鉴别。
3、鼻疽（类鼻疽）伯克霍尔德菌
• 鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderia mallei） 和类鼻疽伯克霍尔德菌（ Burkholderia pseudomallei）是鼻疽与类鼻疽的病原菌， 属假单胞菌属rRNA同源群的第二群；2000 年被NCCLS/CLSI（National Committee
脑膜炎败血黄杆菌在血琼脂平板和营养琼脂平板上的菌落特征（37℃，18—24h）
• 黄杆菌属目前共分为8个种和4个未命名 的生物群。它们分别是：
• 脑膜炎败血黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄 杆菌、水田黄杆菌、嗜醇黄杆菌、嗜糖黄 杆菌、嗜温黄杆菌、薮内黄杆菌及黄杆菌 Ⅱb、Ⅱe、Ⅱh、Ⅱi群。其中脑膜炎败血 黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄杆菌和黄杆 菌Ⅱb群可引起人类疾病。
支气管腐败 鲍特氏菌
+ — + +
+ +
鲍特氏菌属
鞭毛染色
脂、巧克力色血琼脂及兔血琼脂上均不能生长。
副百日咳鲍特氏菌和支气管腐败鲍特氏菌营养 要求不高，在上述培养基上均能生长。
• 3、该菌属细菌不分解糖类。其它生化反应见 下表。
鉴别要点
鞭毛 动力 37℃
18—24℃ 尿素酶 硝酸盐还原 氧化酶
百日咳 鲍特氏菌
— — — — —
+
副百日咳 鲍特氏菌
—
— — + — —
铜绿假单胞菌镜下形态和在血平板上的菌落特征
铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上的菌落特征
非发酵菌ppt课件
No.1 No.3
协和12年鲍曼不动杆菌耐药性变迁。 北京协和医院 徐英春 2006
铜绿假单胞菌和不动杆菌
耐药状况日趋严峻
铜绿假单胞菌
不动杆菌
百分比（%）
直线：耐头孢他啶的铜绿假单胞菌 虚线：耐亚胺培南的铜绿假单胞菌
Robert Gaynes et al. CID 2005;41:848-854.
2%
主 要 非 发 酵 菌
铜绿假单胞菌
不动杆菌属 嗜麦芽窄食单胞菌
45% 53%
肠杆菌科细菌 非发酵菌 其他革兰阴性细菌
* Wang F, et al. Int J Antimicrob Agents 2003;22:444-448. ** 汪复等. 中国感染与化疗杂志 2006; 6(5): 289-295.
百分比（%） 黑色：耐碳青霉烯的不动杆菌 灰色：中度耐碳青霉烯的不动杆菌
Livermore DM The threat from the pink corner Ann Med 2003;35:226-234
铜绿假单胞菌和不动杆菌
2005年CHINET显示严峻的耐药现状
60 50.9 50 44.2 41.2 40 34.4 31.3 31.7 30 22.5 22.8 20 27.6 28.9 32.1 36.8 46.2
非发酵菌
革兰阴性菌会对
所有的β-内酰胺类、喹诺酮类抗菌药物都发生耐药吗？
这种情况已经发生：铜绿假单胞菌、不动杆菌属……
这些细菌都属于： 非发酵菌
什么是非发酵菌？
非发酵菌是一大类不能以发酵形式利用葡萄糖的需氧革兰 阴性杆菌的统称
非发酵菌并非严格意义上的分类学命名，只是由于该类细 菌在生化反应上具有某些共同特征而被沿用至今
非发酵菌
临床意义
• 常引起的是菌血症、脑膜炎、尿路感染、 附睾炎、结膜炎、心内膜炎、连续性腹膜 透析相关的腹膜炎、角膜炎以及广泛的皮 肤黏膜和软组织感染，也可引起医源性败 血症、肺炎等。引起本菌定植与感染的危 险因素有机械通气、广谱抗生素的预防性 应用、化疗、插管和中性粒细胞减少等。
耐药机制
• 1、细菌主动外拍泵的存在。 • 2、灭活抗生素的酶类的产生，如广谱β内
酰胺酶，超广谱β内酰胺酶，金属酶等。 • 3、外膜蛋白的改变或减少使抗生素进入细
菌的通道减少或缺如。 • 4、生物膜的存在使抗生素不能进入细菌细
非发酵菌
定义
非发酵菌是一大类不能以发酵形式利 用葡萄糖的需氧、无芽孢革兰阴性杆 菌的统称。
主要非发酵菌种类
非发酵菌
铜绿假单胞菌 假单胞菌属
伯克霍尔德菌属
洋葱伯克霍尔德菌
鲍曼不动杆菌 铜绿假单胞菌
窄食单胞菌属
嗜麦芽窄食单胞菌
嗜麦芽窄食单胞菌
产碱杆
不动杆菌属
菌属
鲍曼不动杆菌
黄杆菌属
脑膜败血黄杆 菌
非发酵菌共同特征
不动杆菌属
• 不动杆菌属广泛分布于自然界与医院环境 中，能在潮湿和干燥的表面生存，也可生 存于健康人的皮肤。最常见的种类有鲍曼 不动杆菌、洛菲不动杆菌、溶血不动杆菌 和约氏不动杆菌等。
鲍曼不动杆菌
• 鲍曼不动杆菌是仅次于铜绿假单胞菌而居 临床分离阳性率第2位的非发酵菌，为条件 致病菌。由于其能获得多重耐药性且能够 在大多数环境中生存，其引起的医院内感 染有增加趋势。
多重耐药菌与泛耐药菌株
• 多重耐药菌(MDR)是基糖苷类、红霉素、β－内酰胺类）或三类 以上抗菌药物同时耐药。
• 泛耐药菌株(PDR)指除多粘菌素类外，对几 乎所有测试抗菌素耐药。比如对氨基糖苷 、青霉素、头孢菌素、碳氢酶烯系类、四 环素类、氟奎诺酮及磺胺类等耐药。
临床常见非发酵革兰阴性杆菌的分布及耐药性分析
达 ３ ． ％， ２ １ 然而头孢他啶 、 头孢吡肟抗 菌活性较强 ， 药率 耐 分别是 １ ． ％和 １ ． ％， ３７ ９ ６ 这是由于这两种抗生素不被青霉 素酶水解 ， 头孢吡肟耐药率 比头孢他 啶高 ， 因为受细菌的 是
１ 、 ％）洋葱伯克尔德菌 ｌ ６株（ ． ％）其他 ９ （ ． ％） ５６ 、 株 ３１ 。
如下 。 １ 材 料 与方 法
耐药株数耐药率 （ ％）耐药株数耐药率（ ％）
１１ 菌株来源 ：０ ７年本 院住 院患者 临床各类 标本 获得 ． ２０
２７ ８ 株非发酵革 兰阴性 杆菌 ， 《 按 全国临床检 验操作 规程》
进行培养和鉴定。
１２ 标准质控菌株 ： 黄色葡萄球菌 Ａ Ｃ ５ ２ 、 ． 金 Ｔ Ｃ ２ ９３ 铜绿假
中， 其中痰标本 的分离率最高 ， 主要来 自呼吸科 和神经 内科 的标本 ， 提示本 院临床感 染 以呼吸道 为主 ， 患者 意识 障 与 碍、 吞咽反射减弱或消失 、 口咽部分泌物 不易排 出、 引起 吸
大的不使。由于产生头孢菌素酶， 使头孢哌酮、 氨曲南的耐
药率分别达 ７ ． ％、３ １ 可选含 酶抑制 剂 的抗 菌药 物 ８ ５ ６ ． ％， 如头孢哌酮／ 巴坦 ， 舒 耐药率较低 为 ９ ２ ． ％。阿米 卡星的耐
抗菌药物 ， 才能有效控制医院感染 的发生 。
铜绿假单胞菌耐药 机制有 Ｂ 一内酰 胺酶 、 青霉 素结合 蛋 白酶（ Ｂ Ｓ 的结 构和功能改变致通 透性降低等 ， Ｐ Ｐ） 带有耐 药质粒的铜绿假单胞菌 的大量存在是造成耐药菌株逐年增
２ 结
果
高的重要原因…。表 ２显示复方新诺 明 、 环素耐药率 米诺
太原市 中心 医￣（３ ０ ９ 张景萍 ， ０００ ） Ｚ 近年来 ， 随着抗菌药 物的广泛使用 ， 侵入性诊疗机会的
１ 、 ％）洋葱伯克尔德菌 ｌ ６株（ ． ％）其他 ９ （ ． ％） ５６ 、 株 ３１ 。
如下 。 １ 材 料 与方 法
耐药株数耐药率 （ ％）耐药株数耐药率（ ％）
１１ 菌株来源 ：０ ７年本 院住 院患者 临床各类 标本 获得 ． ２０
２７ ８ 株非发酵革 兰阴性 杆菌 ， 《 按 全国临床检 验操作 规程》
进行培养和鉴定。
１２ 标准质控菌株 ： 黄色葡萄球菌 Ａ Ｃ ５ ２ 、 ． 金 Ｔ Ｃ ２ ９３ 铜绿假
中， 其中痰标本 的分离率最高 ， 主要来 自呼吸科 和神经 内科 的标本 ， 提示本 院临床感 染 以呼吸道 为主 ， 患者 意识 障 与 碍、 吞咽反射减弱或消失 、 口咽部分泌物 不易排 出、 引起 吸
大的不使。由于产生头孢菌素酶， 使头孢哌酮、 氨曲南的耐
药率分别达 ７ ． ％、３ １ 可选含 酶抑制 剂 的抗 菌药 物 ８ ５ ６ ． ％， 如头孢哌酮／ 巴坦 ， 舒 耐药率较低 为 ９ ２ ． ％。阿米 卡星的耐
抗菌药物 ， 才能有效控制医院感染 的发生 。
铜绿假单胞菌耐药 机制有 Ｂ 一内酰 胺酶 、 青霉 素结合 蛋 白酶（ Ｂ Ｓ 的结 构和功能改变致通 透性降低等 ， Ｐ Ｐ） 带有耐 药质粒的铜绿假单胞菌 的大量存在是造成耐药菌株逐年增
２ 结
果
高的重要原因…。表 ２显示复方新诺 明 、 环素耐药率 米诺
太原市 中心 医￣（３ ０ ９ 张景萍 ， ０００ ） Ｚ 近年来 ， 随着抗菌药 物的广泛使用 ， 侵入性诊疗机会的
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• 所致疾病 条件致病菌 医院感染的重要病原菌 大面积烧伤创面感染的重要病原菌
[临床表现]
•
（一）败血症 铜绿假单胞菌败血症多继发于大面积烧伤、
白血病、淋巴瘤、恶性肿瘤、气管切开、静脉导管、心瓣膜置换
术及各种严重慢性疾病等的过程中。本菌引起的败血症约占革兰
阴性杆菌败血症的第三至第四位，病死率则居首位。其临床过程
部或腋下，偶见于口腔粘膜，疾病晚期可出现肢端迁徙脓肿。
•
（二）呼吸道感染 原发性铜绿假单胞菌肺炎少见，常继发于
宿主免疫功能受损后，尤其易发于原有肺部慢性病变基础上，如：
慢性支气管炎、支气管扩张、气管切开、应用人工呼吸机后，X线
表现为两侧散在支气管肺炎伴结节状渗出阴影，极少发生脓胸。
•
（三）心内膜炎 常发生于原有心脏病基础上，心脏手术、瓣
• 氧化酶：＋；不动杆菌属和嗜麦芽寡养单 胞菌除外
• O/F试验：O/－ • 动力试验：多数有鞭毛，但半固体动力试
验不明显，常采用镜检或鞭毛染色
不发酵革兰阴性杆菌
常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定
试验 假单胞菌属 无色杆菌属 黄杆菌属 不动杆菌属 产碱杆菌属 丛毛菌属 莫拉菌属
氧化酶
+
+
+/-
-
膜置换术后，细菌常接种于伤口缝线上或补缀物上，也可发生在
烧伤或有药瘾病人的正常心脏瓣膜上。炎症可发生在各个瓣膜，
但以三尖瓣为多见。如果抗生素延迟应用，有赘生物生长及左心
瓣膜病变，则预后较严重，药物治愈率低，最好的治疗是及早进
行手术切除赘生物和异物。
• （四）尿路感染 铜绿假单胞菌是医院内泌尿道交叉感染的常见菌， 占院内感染尿路分离菌的第二位，留置导尿管是截瘫病人获得感 染的诱因。其他如：神经原膀胱、尿路梗阻，慢性尿路感染长期 应用抗菌治疗易致铜绿假单胞菌感染。40%的铜绿假单胞菌败血 症的原发病为尿路感染。
革兰阴性，长短不一 单鞭毛
铜绿假单胞菌－－培养特性
• 专性需氧、营养要求不高
• 最适温度35℃，42 ℃ 生长，4℃不生长 • 产生荧光素和蓝绿色水溶性的色素，培养
物呈蓝绿色。 • 培养物有生姜气味 • 产生多种水溶性色素 • 溶血环
铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)
• 血平板上毛玻璃 样，金属光泽， 生姜味
+
+
+/-
O/F试验
O/-
O
O
O/-
-
-
-
动力
+/-
+/-
+/-
-
+
+
-
注：+：90%以上阳性；-10%以下的阳性；+/-：约70%为阳性；O：为氧化。
葡萄糖氧化发酵试验（O/F）
O/F培养基 （半固体高层）
指示剂：溴麝香草酚蓝
培养基pH：7.0
O/F：O
O/F：F
葡萄糖氧化发酵试验（O/F） O/F：K
• 可产生多种色素： 荧光素与绿脓素
铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)
• 绿脓素
铜绿假单胞菌－－菌落特征
• 典型菌落：扁平湿润，边缘不规则，菌落 和培养基灰绿色，表面有金属光泽
• 大肠菌样菌落：菌落圆形凸起，似大肠杆 菌
• 黏液型菌落：菌落凸起，呈粘液状 • 侏儒型菌落：细小，无光泽 • 在血平板上形成透明溶血环 • 在SS、Mac上形成不发酵乳糖菌落
与其他革兰阴性杆菌败血症相似，除早产儿及幼儿可不发热外，
病人可有弛张热或稽留热，常伴休克、成人呼吸窘迫综合征
(ARDS)或弥散性血管内凝血 (DIC)等。皮肤出现坏疽性深脓疱为其
特征性表现，周围环以红斑，皮疹出现后48～72小时，中心呈灰
黑色坏疽或有溃疡，小血管内有菌栓，将渗液涂片革兰染色或培
养易找到细菌。皮疹可发生于躯体任何部位，但多发于会阴、臀
组织感染病灶，老年人复杂性尿路感染及泌尿生殖系手术或器械
操作，可致多发性椎体骨髓炎。近年来报道，注射海洛因者常致
颈椎骨髓炎。临床过程无甚特殊，较少疼痛感，预后不良。
•
（七）眼科 本菌是角膜溃疡或角膜炎的常见病原菌之一，常
葡萄糖氧化发酵试验（O/F）
O/F：O O/F：F
葡萄糖氧化发酵试验（O/F） O/F：O
肠道杆菌、非发酵革兰阴性杆菌、弧 菌科鉴别
鉴定试验
氧化酶 葡萄糖氧化/发
酵（O/F） 鞭毛
肠杆菌科 － F
周鞭毛
非发酵革兰 阴性杆菌
＋ O／－
单、丛、周
弧菌科 ＋ F
单、丛
• 通常用于检测肠杆菌的培养基不适合用于 检测非发酵菌，用于检测非发酵菌的培养
• 多为条件致病菌，是医院感染的主要芽孢、无荚膜，单或丛 鞭毛
• 专性需氧 • 营养要求不高 • 氧化酶：＋ • O/F：O • MAC生长：＋ • 产生水溶性色素
铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)－－形态染色
• 革兰阴性杆菌
• 直或微弯杆菌。 • 无芽胞，有菌毛 • 单端有1～3根鞭毛 • 运动活泼
基一般含较高浓度的糖，使指示剂变色更
易观察到。检查动力用压滴法、悬滴法或
暗视野法，必要时可用鞭毛染色法；不适
合用半固体法（非发酵菌大部分为专性需 氧菌，在半固体培养基上观察动力不明
显 ）。
第一节 假单胞菌属
• 假单胞菌科细菌根据rRNA-DNA同源性分为5 群，其中Ⅰ群属于假单胞菌属，共7种细菌， 代表菌种为铜绿假单胞菌。
•
（五）中枢神经系统感染 铜绿假单胞菌脑膜炎或脑脓肿常继
发于颅脑外伤、头和颈部肿瘤手术后，或耳、乳突、鼻窦感染扩
散蔓延，腰穿术或脑室引流后。粒细胞缺乏、严重烧伤则为铜绿
假单胞菌败血症过程中迁徙至脑部的危险因素。临床表现与其他 细菌性中枢感染相同，但预后较差，病死率在60%以上。
•
（六）骨关节感染 主要由于败血症的血行迁徙或来源于邻近
铜绿假单胞菌－－生化反应
• 氧化酶＋ • O/F：O • 枸櫞酸盐利用＋ • 精氨酸双水解＋ • 乙酰胺酶＋ • 明胶液化＋
铜绿假单胞菌－－抗原结构和抵抗力
• 抗原结构 O抗原：包括外膜蛋白和脂多糖 H抗原 S抗原
• 抵抗力： 对外界环境抵抗力强 对多种抗生素不敏感
铜绿假单胞菌－－临床意义
• 致病物质：内毒素、外毒素、胞外酶、菌 毛、荚膜
非发酵革兰阴性杆菌
非发酵革兰阴性杆菌
• 是一大群不发酵葡萄糖或以氧化形式利用 糖、需氧或兼性厌氧、无芽孢的革兰阴性 杆菌
非发酵革兰阴性杆菌主要种类
• 铜绿假单胞菌 • 产碱杆菌属 • 不动杆菌属 • 嗜麦芽寡养单胞菌 • 莫拉菌属 • 黄杆菌属 • 金氏杆菌属 • 土壤杆菌属等
非发酵革兰阴性杆菌主要特点
[临床表现]
•
（一）败血症 铜绿假单胞菌败血症多继发于大面积烧伤、
白血病、淋巴瘤、恶性肿瘤、气管切开、静脉导管、心瓣膜置换
术及各种严重慢性疾病等的过程中。本菌引起的败血症约占革兰
阴性杆菌败血症的第三至第四位，病死率则居首位。其临床过程
部或腋下，偶见于口腔粘膜，疾病晚期可出现肢端迁徙脓肿。
•
（二）呼吸道感染 原发性铜绿假单胞菌肺炎少见，常继发于
宿主免疫功能受损后，尤其易发于原有肺部慢性病变基础上，如：
慢性支气管炎、支气管扩张、气管切开、应用人工呼吸机后，X线
表现为两侧散在支气管肺炎伴结节状渗出阴影，极少发生脓胸。
•
（三）心内膜炎 常发生于原有心脏病基础上，心脏手术、瓣
• 氧化酶：＋；不动杆菌属和嗜麦芽寡养单 胞菌除外
• O/F试验：O/－ • 动力试验：多数有鞭毛，但半固体动力试
验不明显，常采用镜检或鞭毛染色
不发酵革兰阴性杆菌
常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定
试验 假单胞菌属 无色杆菌属 黄杆菌属 不动杆菌属 产碱杆菌属 丛毛菌属 莫拉菌属
氧化酶
+
+
+/-
-
膜置换术后，细菌常接种于伤口缝线上或补缀物上，也可发生在
烧伤或有药瘾病人的正常心脏瓣膜上。炎症可发生在各个瓣膜，
但以三尖瓣为多见。如果抗生素延迟应用，有赘生物生长及左心
瓣膜病变，则预后较严重，药物治愈率低，最好的治疗是及早进
行手术切除赘生物和异物。
• （四）尿路感染 铜绿假单胞菌是医院内泌尿道交叉感染的常见菌， 占院内感染尿路分离菌的第二位，留置导尿管是截瘫病人获得感 染的诱因。其他如：神经原膀胱、尿路梗阻，慢性尿路感染长期 应用抗菌治疗易致铜绿假单胞菌感染。40%的铜绿假单胞菌败血 症的原发病为尿路感染。
革兰阴性，长短不一 单鞭毛
铜绿假单胞菌－－培养特性
• 专性需氧、营养要求不高
• 最适温度35℃，42 ℃ 生长，4℃不生长 • 产生荧光素和蓝绿色水溶性的色素，培养
物呈蓝绿色。 • 培养物有生姜气味 • 产生多种水溶性色素 • 溶血环
铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)
• 血平板上毛玻璃 样，金属光泽， 生姜味
+
+
+/-
O/F试验
O/-
O
O
O/-
-
-
-
动力
+/-
+/-
+/-
-
+
+
-
注：+：90%以上阳性；-10%以下的阳性；+/-：约70%为阳性；O：为氧化。
葡萄糖氧化发酵试验（O/F）
O/F培养基 （半固体高层）
指示剂：溴麝香草酚蓝
培养基pH：7.0
O/F：O
O/F：F
葡萄糖氧化发酵试验（O/F） O/F：K
• 可产生多种色素： 荧光素与绿脓素
铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)
• 绿脓素
铜绿假单胞菌－－菌落特征
• 典型菌落：扁平湿润，边缘不规则，菌落 和培养基灰绿色，表面有金属光泽
• 大肠菌样菌落：菌落圆形凸起，似大肠杆 菌
• 黏液型菌落：菌落凸起，呈粘液状 • 侏儒型菌落：细小，无光泽 • 在血平板上形成透明溶血环 • 在SS、Mac上形成不发酵乳糖菌落
与其他革兰阴性杆菌败血症相似，除早产儿及幼儿可不发热外，
病人可有弛张热或稽留热，常伴休克、成人呼吸窘迫综合征
(ARDS)或弥散性血管内凝血 (DIC)等。皮肤出现坏疽性深脓疱为其
特征性表现，周围环以红斑，皮疹出现后48～72小时，中心呈灰
黑色坏疽或有溃疡，小血管内有菌栓，将渗液涂片革兰染色或培
养易找到细菌。皮疹可发生于躯体任何部位，但多发于会阴、臀
组织感染病灶，老年人复杂性尿路感染及泌尿生殖系手术或器械
操作，可致多发性椎体骨髓炎。近年来报道，注射海洛因者常致
颈椎骨髓炎。临床过程无甚特殊，较少疼痛感，预后不良。
•
（七）眼科 本菌是角膜溃疡或角膜炎的常见病原菌之一，常
葡萄糖氧化发酵试验（O/F）
O/F：O O/F：F
葡萄糖氧化发酵试验（O/F） O/F：O
肠道杆菌、非发酵革兰阴性杆菌、弧 菌科鉴别
鉴定试验
氧化酶 葡萄糖氧化/发
酵（O/F） 鞭毛
肠杆菌科 － F
周鞭毛
非发酵革兰 阴性杆菌
＋ O／－
单、丛、周
弧菌科 ＋ F
单、丛
• 通常用于检测肠杆菌的培养基不适合用于 检测非发酵菌，用于检测非发酵菌的培养
• 多为条件致病菌，是医院感染的主要芽孢、无荚膜，单或丛 鞭毛
• 专性需氧 • 营养要求不高 • 氧化酶：＋ • O/F：O • MAC生长：＋ • 产生水溶性色素
铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)－－形态染色
• 革兰阴性杆菌
• 直或微弯杆菌。 • 无芽胞，有菌毛 • 单端有1～3根鞭毛 • 运动活泼
基一般含较高浓度的糖，使指示剂变色更
易观察到。检查动力用压滴法、悬滴法或
暗视野法，必要时可用鞭毛染色法；不适
合用半固体法（非发酵菌大部分为专性需 氧菌，在半固体培养基上观察动力不明
显 ）。
第一节 假单胞菌属
• 假单胞菌科细菌根据rRNA-DNA同源性分为5 群，其中Ⅰ群属于假单胞菌属，共7种细菌， 代表菌种为铜绿假单胞菌。
•
（五）中枢神经系统感染 铜绿假单胞菌脑膜炎或脑脓肿常继
发于颅脑外伤、头和颈部肿瘤手术后，或耳、乳突、鼻窦感染扩
散蔓延，腰穿术或脑室引流后。粒细胞缺乏、严重烧伤则为铜绿
假单胞菌败血症过程中迁徙至脑部的危险因素。临床表现与其他 细菌性中枢感染相同，但预后较差，病死率在60%以上。
•
（六）骨关节感染 主要由于败血症的血行迁徙或来源于邻近
铜绿假单胞菌－－生化反应
• 氧化酶＋ • O/F：O • 枸櫞酸盐利用＋ • 精氨酸双水解＋ • 乙酰胺酶＋ • 明胶液化＋
铜绿假单胞菌－－抗原结构和抵抗力
• 抗原结构 O抗原：包括外膜蛋白和脂多糖 H抗原 S抗原
• 抵抗力： 对外界环境抵抗力强 对多种抗生素不敏感
铜绿假单胞菌－－临床意义
• 致病物质：内毒素、外毒素、胞外酶、菌 毛、荚膜
非发酵革兰阴性杆菌
非发酵革兰阴性杆菌
• 是一大群不发酵葡萄糖或以氧化形式利用 糖、需氧或兼性厌氧、无芽孢的革兰阴性 杆菌
非发酵革兰阴性杆菌主要种类
• 铜绿假单胞菌 • 产碱杆菌属 • 不动杆菌属 • 嗜麦芽寡养单胞菌 • 莫拉菌属 • 黄杆菌属 • 金氏杆菌属 • 土壤杆菌属等
非发酵革兰阴性杆菌主要特点