耐碳青霉烯肺克雷伯菌和大肠埃希菌耐药机制研究
2005年中国CHINET大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析
５ ４ ｓ ｆｗａｅａ ｃ ｒ ｉｇ ｔ Ｓ ０ ５ ． ｏ ｔ ｒ ｃｏ ｄ ｎ Ｏ ＣＬ Ｉ２ ０ ．Ｒｅｕｔ ｅ ｐ ｅ ａｅ ｃ ｆｅ ｔｎ ｅ ｐ ｃ ｒ ｍ —ａ ｔｍａ ｅ ＥＳ Ｌｓ ｓ ｌ Ｔｈ ｒｖ ｌｎ ｅｏ ｘ ｅ ｄ ｄｓ ｅ ｔｕ Ｂ ｌｃａ ｓ ｓ（ Ｂ ）ｗａ ８ ９ ｓ ｓ３ ．
叶 素 娟 ， 杨 青 ， 俞 云 松 执 笔
摘 要 ： 目的 了 解 我 国 主 要 地 区 医院 临 床 分 离 的大 肠 埃 希菌 和 肺 炎 克 雷 伯 菌 对 抗 菌 药 物 的 耐 药 性 ， 导 临 床 合 理 使 用 抗 菌 指
药物 。方 法 国 内 ８所 较 有 代 表 性 的 综 合 性 医 院按 统 一 方 案 、 一 方 法 （ ｉ ｙＢ ｕ ｒ ） 判 断 标 准 （ Ｉ Ｉ ０ ５版 ） 行 细 菌 统 Ｋｒ —ａｅ法 和 ｂ Ｃ ０ Ｓ２ 进 耐 药 性 监 测 。 结 果 临 床 分 离 的 大 肠 埃 希 菌 和 肺 炎 克 雷 伯 菌 Ｅ Ｂ 检 出率 分 别 为 ３ ． （０ ～ ５ ） ４ ． （ ３ ～ ＳＩ ｓ ８ ９ ２ ７ 、０５ １ ７） ）各 所 医 院检 出率 有 较 大差 异 。 大肠 埃 希 菌 和 肺 炎 克 雷 伯 菌 对 亚 胺 培 南 、 罗 培 南 等 碳 青 霉 烯 类 抗 生 素 仍 高 度 敏 感 ， （ ， 美 耐 药 率 为 【 ， ４所 医 院 出现 了对 碳 青 霉 烯 类 抗 生 素耐 药 株 。 大肠 埃 希 菌 产 Ｅ Ｂ ｓ 对 头 孢 哌 酮 一 巴 坦 、 拉 西 林 一 唑 】 ～３ 有 ＳＬ 株 舒 哌 三 巴 坦 、 孢 他 啶 、 米 卡 星 耐 药 率 ＜ ２ ， 肺 炎 克雷 伯菌 产 Ｅ Ｂ ｓ 对 其 耐 药 率 ＞ ５ 。 大 肠 埃 希 菌 Ｅ Ｂ ｓ 性 株 对 氨 苄 头 阿 ０ 而 ＳＬ 株 ０ ＳＬ 阴 西林 、 哌拉 西 林 、 丙 沙 星 、 大霉 素 和 复 方磺 胺 甲 嗯 唑耐 药 率 ＞ ５ ， 炎 克 雷 伯 菌 非 产 Ｅ Ｂ ｓ 对 氨 苄 西 林 高 度 耐 药 。 不 环 庆 ０ 肺 ＳＬ 株
耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌耐药基因检测及分析
耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌耐药基因检测及分析涂海健;陈淑娟;林群英;许光辉【摘要】目的分析耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KPN)耐药情况与耐药相关基因的关系,了解其耐药机制. 方法采用PCR技术检测29株碳青霉烯类耐药KPN与产碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,β-ESBLs)、ampC酶及喹诺酮类耐药相关基因blaKPC-2、blaIMP-4、blaCTX-M、blaCTX-M-15、blaVIM-1、blaTEM、blaSHV、ampC、gyrA、parC,并对KPC-2、ampC、gyrA基因进行序列分析. 结果用PCR技术证实了29株为产KPC、IMP型碳青霉烯酶的KPN,并且携带TEM、SHV型β-ESBLs,其中18株同时编码ampC基因;29株待测菌均检出喹诺酮类耐药相关gyrA、parC基因.KPC基因片段同源性分析显示,待测菌株之间核苷酸同源性为98％～100％,氨基酸同源性为97％～100％;与肺炎克雷伯氏菌Kpn-1504株之间的核苷酸同源性最高,为99％～100％.gyrA 、parC基因突变率分别为58.6％、62.1％.结论产KPC-2、IMP-4型碳青霉烯酶同时携带多种β-ESBLs、ampC基因及突变的喹诺酮类耐药相关gyrA、parC基因的KPN耐药情况更加严重,同时存在克隆性流行可能.【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》【年(卷),期】2016(008)004【总页数】6页(P246-251)【关键词】肺炎克雷伯菌;blaKPC;超广谱β-内酰胺酶;基因;PCR【作者】涂海健;陈淑娟;林群英;许光辉【作者单位】莆田学院附属医院检验科,福建,莆田351100;莆田学院附属医院检验科,福建,莆田351100;莆田学院附属医院呼吸内科,福建,莆田351100;莆田学院附属医院检验科,福建,莆田351100【正文语种】中文随着耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae，KPN）出现和临床检出不断增多，给临床抗感染治疗和医院内感染控制带来极大的困难，严重威胁人们的健康［1］。
同一患者不同部位的4株肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制研究和同源性分析
中 国 感 染 与化 疗 杂 志 ２ ０ １ ３年 １ １ 月２ （ ） 日第 １ ３卷 第 ６期 Ｃ ｈ ｉ ｎ Ｊ Ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ Ｃｈ ｅ ｍｏ ｔ ｈ ｅ ｒ ， Ｎｏ ｖ ｅ ｍｂ ｅ ｒ ２ ０ １ ３ ，Ｖｏ １ ．１ ３， Ｎｏ ６
酶 。Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ ＡＧＥ分析 结 果 显示 ４株 细 菌 的外 膜 蛋 白表 达 不 同于 碳 青 霉烯 类 抗 生 素 敏 感 型 肺 炎 克 雷 伯 菌 。 Ｅ ＲＩ Ｃ — Ｐ Ｃ Ｒ 基 因 图
谱 思示 此 ４株 细 菌 的 Ｉ ） Ｎ Ａ 指 纹 图谱 完 全 一 致 。结 论
本研 究 中 的 ４株 耐 碳 青 霉 烯 类 抗 生 素肺 炎 克 雷 伯 菌 的 主 要 耐 药 机 制
ｊ ， Ｕ Ｙ ｉ ｎ ｇ ’ ，ＹＵ Ｊ ｉ ｎ ｇ ，ＺＨＡ ＮＧ Ｌｉ ａ ｎ ｇ，ＳＨ ＥＮ Ｌ ｉ ｓ ｏ ｎ ｇ． （ Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｒ Ｊ ／ ’ Ｃｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ Ｌａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ，Ｘｉ ｎ ｈ ｕ ａ
・
论 著 ・
同一 患者 不 同部 位 的 ４株 肺 炎 克 雷伯 菌 对 碳青 霉 烯 类 抗 生 素 耐药 机 制研 究 和 同源 性 分 析
刘 瑛， 俞 静， 张 良 ， 沈立松
摘要 ： 目的 对 临床 分 离 自同一 患 者 不 同部 位 的 ４株 耐 碳 青 霉 烯 类 抗 生 素 肺 炎 克 雷 伯 菌 进 行 耐 药 机 制 研 究 和 同 源 性 分 析 。 方 法 收集 ２ （ ） １ ２年 ３月 上 海 新 华 医 院 临 床 微 生 物 实 验 室 从 １例 膀 胱癌 术后 患者 的血 、 尿、 痰 和 盆 腔 引 流 液 标 本 中分 离 得 到 耐 碳 青 霉 烯 类 抗 生 素 肺 炎 充 雷 伯 菌 ４株 。分 别 采 用 ： ① 改 良 Ｈｏ ｄ ｇ ｅ 试 验筛选碳青 霉烯酶 ； ②Ｐ Ｃ Ｒ 方 法 及 基 因测 序 检 测 耐 药 基
中国碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的流行病学和防控策略ppt课件
倡导个人卫生习惯的培养，如勤洗手、不乱摸鼻子、不随地吐痰等，避免细菌传播。
社会干预
采取社会干预措施，如取消公共场所禁烟、限制抗生素滥用等，共同防控碳青霉烯类耐药 肠杆菌科细菌的传播。
04
中国碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的耐 药机制研究
细菌耐药机制概述
01
天然耐药
某些细菌本身就对某些抗菌药物有天然的耐药性，这种耐药性通常由
加强病例监测和报告，及时掌握感染情况和细菌耐药性变化。
消毒与清洁
03
医院应定期开展消毒与清洁工作，对重点区域和医疗器械进行
特别管理。
抗生素管理政策落实情况
抗生素使用规定
严格执行抗生素使用规定，限制抗生素使用量和使用范围。
抗生素采购与储存
加强抗生素的采购、储存和使用环节的管理，确保抗生素的质量和安全。
流行病学调查方法包括描述性研究、分析性研究和实 验性研究等。其中描述性研究主要是通过收集有关疾 病在时间、空间和人群中的分布情况，揭示疾病流行 的规律和特点；分析性研究主要是通过病例对照研究 和队列研究等方法，探讨疾病病因和影响因素；实验 性研究主要是通过随机对照试验等方法，评价干预措 施的效果。
调查结果
细菌染色体或质粒介导。
02
获得性耐药
细菌在长期接触抗菌药物的过程中，会发生基因突变或改变，从而获
得耐药性。
03
传播耐药基因
细菌可以通过接合、转化、转导等方式，将耐药基因在种间或种内传
播。
碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的耐药基因研究
1 2
KPC基因
KPC基因编码碳青霉烯酶，能使细菌对碳青霉 烯类抗菌药物产生耐药性。
抗生素使用培训
开展医务人员抗生素使用知识和技能的培训，提高合理使用抗生素的意识。
2009年中国CHINET大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌耐药性监测
论著2009年中国CH I N ET大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌耐药性监测卓超1，朱德妹5，张泓9，吴玲”，苏丹虹1，胡付品5，李万华9，胡云建14，倪语星2，蒋晓飞5，单斌Ⅲ，艾效曼“孙景勇2，王传清6，杜艳10，俞云松3，王爱敏6，张朝霞11，杨青3，徐元宏7，季萍¨，孙自镛4，沈继录7，贾蓓12，简翠4，徐英春8，黄文祥”，汪复5，孙宏莉8，魏莲花”，摘要：目的了解2009年中国C H I N ET所属14所医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯菌属的耐药情况。
方法采用纸片扩散法(K-B法)对临床分离株作药敏试验。
结果共收集C H I N E T细菌耐药性监测网14所医院分离的大肠埃希菌7992株，肺炎克雷伯菌4556株和产酸克雷伯菌377株。
其中儿童患者(o～14岁)来源的大肠埃希菌和克雷伯菌属分别占21．3％(1700／7992)和18．5％(915／4933)。
大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESB L s株检出率分别为56．5％(33．3％～78．5％)和41．4％(21．7％～70．8％)。
各医院ESB I。
S检出率存在一定差异。
药敏试验结果显示，大肠埃希菌对亚胺培南、美罗培南和厄他培南等3种碳青霉烯类抗生素的耐药率均小于1％，对头孢哌酮一舒巴坦和哌拉西林一他唑巴坦的耐药率低于6％。
肺炎克雷伯菌对3种碳青霉烯类抗生素耐药率介于2．9％～5．2％，对头孢哌酮舒巴坦和哌拉西林一他唑巴坦的耐药率分别为10．8％和15．1％。
产E SB I。
S菌对上述5种药物的耐药率也低于25％。
50％以上的产E SB I，S株对庆大霉素和环丙沙星耐药。
有10所医院分离出对碳青霉烯类抗生素不敏感菌株，其中肺炎克雷伯菌132株，大肠埃希菌20株。
83株肺炎克雷伯菌和5株大肠埃希菌为泛耐药株。
主要集中于复旦大学附属华山医院(共73株)。
结论大肠埃希菌和克雷伯菌属对碳青霉烯类抗生素、头孢哌酮一舒巴坦和哌拉西林一他唑巴坦仍保持高度敏感性。
肠杆菌科细菌碳青霉烯类抗生素耐药治疗的研究进展
Mod Diagn Treat 现代诊断与治疗2021Apr 32(8)肠杆菌科细菌碳青霉烯类抗生素耐药治疗的研究进展吴鸿滨(天津市第五中心医院检验科,天津300450)Research Progress in the Treatment of Carbapenem-resistant Enter 鄄obacteriaceaeWU Hong-bin (Department of Clinical Laboratory,Peking University Binhai Hospital,Tianjin 300450,China )Abstract :Enterobacteriaceae are facultative anaerobic or obligate aerobic gram -negative bacilli and coccobacillusthat widely exist in human and in the intestine of most warm-blooded animals,and most of them are normal flora.As one of the most widely distributed pathogenic bacteria,Enterobacteriaceae can be transformed into conditional pathogenic bacteriawhen the immunity of host decreases,which not only causes external acquired infection,but also iatrogenic infection inside the hospital.Carbapenems are β-lactam antibiotics with broadantibacterial spectrum and strong antibacterial property,and is thus often used as the final drug therapyin the treatment of multi-drugresistant gram-negative bacillus infection.However,the unscientific usage and dosage of broad-spectrum antibioticsin recent years has given rise toa large number of carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE),the drug resistance rate ofwhich is increasing year by year.Keywords :Enterobacteriaceae ;Drug resistance ;Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae ;Resistance mechanism;Ther ⁃影响,其不同形状大小会对患者治疗效果产生较大影响,在治疗时应根据患者实际情况进行选择。
碳青霉烯类
铜绿假单胞菌耐药率
CFP LVX IMP PIP BIA CIP CAZ CSL TZP AMK MEM FEP
MOHNARIN
对β-内酰胺酶的稳定性
➢碳青霉烯类对质粒介导的超广谱β内酰胺酶、染色体及质粒介导的头孢 菌素酶(AmpC酶)高度稳定； ➢可被金属β-内酰胺酶水解灭活，造 成碳青酶烯类抗生素耐药；
▪对铜绿假单胞菌、不动杆菌无效 ▪对厌氧菌效果好，对产 ESBLs 的G- 菌有效 ▪使用后不增加细菌对碳青霉烯类的耐药性，对正常菌群几无影响 ▪呼吸系统感染 ▪外科 (cIAI, cSSSI) ▪妇产科感染 ▪ 已上市碳青霉烯类唯一可一天一次给药药物， 1g QD ▪ 儿童应用： 15mg/kg, Q12h, 3 个月 至 12 岁
➢西司他丁与亚胺培南1︰1合用，可阻止亚 胺培南肾内代谢并消除肾毒性； ➢倍他米隆以1︰1的比例与帕尼培南合用， 可通过倍他米隆竞争性抑制帕尼培南向肾小 管分泌，从而降低其在肾皮质的浓度，减轻 帕尼培南的肾毒性； ➢美罗培南对肾脱氢肽酶 I的稳定性比亚胺 培南高4倍，不需与倍他米隆或酶抑制剂西 司他丁合用。
肠杆菌科细菌中产ESBLs菌株增长迅速
产ESBLs是肠杆菌科细菌最主要的耐药机制
大肠 埃希菌
肺炎 克雷伯菌
奇异 变形杆菌
菌株数 检出率范围 总检出率
7992 33.3-78.5%
56.5%
4933 21.7-70.8%
41.4%
年ESBLs的检出率
693 0-33.3% 16.0%
肠杆菌科细菌的敏感性
▪恶心、呕吐、肝酶升高、可引起抽搐 ▪不可用于中枢神经系统感染的治疗
体外抗菌作用 ▪对葡萄球菌和肠球菌的作用较美罗培南强
(MIC)
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学和耐药基因分析
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学和耐药基因分析吕继芳;郑焙文;张静;喻玮;董慧慧;李兰娟;肖永红【摘要】目的了解碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌分子流行病学特征及其碳青霉烯酶基因的携带情况.方法收集我院2014年1月到2014年12月临床标本中分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌,采用VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定及药敏检测,改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因、多位点序列分型(MLST)和质粒复制子分型.结果共收集138株碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌,细菌对多种临床常用抗菌药物均显著耐药.改良Hodge试验127株结果阳性(92.0％).PCR结果显示125株携带碳青霉烯酶基因,其中124株携带blakpc-2型基因(89.9％),1株携带blaimp-4型基因.MLST分型显示以ST11为主(96株,69.6％).质粒分型以IncF型多见(100株,72.5％).结论产KPC-2型碳青霉烯酶是我院肺炎克雷伯菌碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,ST11为主要克隆菌株.耐药菌株携带的质粒类型以IncF型为主.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2016(041)005【总页数】6页(P356-361)【关键词】肺炎克雷伯菌;耐药性;碳青霉烯酶;分子分型【作者】吕继芳;郑焙文;张静;喻玮;董慧慧;李兰娟;肖永红【作者单位】浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003;浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室,感染性疾病诊治协同创新中心,杭州310003【正文语种】中文【中图分类】R978;R378碳青霉烯类抗菌药物是临床上治疗产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌引起的感染最有效的药物。
碳青霉烯类抗生素耐药机制介绍
碳青霉烯类抗生素耐药机制介绍碳青霉烯类抗生素一种非典型beta-内酰胺类抗生素，具有抗菌谱广、抗菌活性强以及对beta-内酰胺酶稳定以及毒性低等特点，对控制耐药菌、产酶菌感染及免疫缺陷者感染发挥着重要作用。
其结构与青霉素类的青霉环相似，不同之处在于噻唑环上的硫原子为碳所替代，且C2与C3之间存在不饱和双键；另外，其6位羟乙基侧链为反式构象。
研究证明，正是这个构型特殊的基团，使该类化合物与通常青霉烯的顺式构象显著不同，具有超广谱的、极强的抗菌活性，以及对beta-内酰胺酶高度的稳定性。
碳青霉烯类抗生素作用方式都是抑制胞壁粘肽合成酶，即青霉素结合蛋白（PBPs），从而阻碍细胞壁粘肽合成，使细菌胞壁缺损，菌体膨胀致使细菌胞浆渗透压改变和细胞溶解而杀灭细菌。
哺乳动物无细胞壁，不受此类药物的影响，因而本类药具有对细菌的选择性杀菌作用，对宿主毒性小。
青霉素结合蛋白（PBPs）是存在于细胞浆膜上的蛋白，分两类，一类具有转肽酶和转糖基酶的活性，参与细胞壁的合成，另一类具有羧肽酶活性，与细菌细胞分裂和维持形态有关。
近十多年来已证实细菌胞浆膜上特殊蛋白PBPs是此药的作用靶位，亚胺培南与PBP2的亲和力很强，结合后阻碍细胞壁的合成，可使细菌迅速肿胀、溶解，而且其作用很少受接种菌量（PH5.5～8.5）的影响。
美罗培南能迅速渗透入肠杆菌科和铜绿假单孢菌靶位，主要是与PBP2和PBP3紧密结合。
国内已经上市的品种有亚胺培南，美罗培南，帕尼培南，法罗培南，厄他培南，比阿培南。
抗菌药物出现，总是伴随着细菌耐药性的产生，碳青霉烯类抗生素虽然刚开始使用时，细菌的耐药性相当低，对常见病原菌的敏感率很高，但碳青霉烯类与其他抗菌药物一样，在临床应用后即出现耐药菌株。
目前临床上已出现亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类药物的耐药菌株。
细菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的机制主要有以下几种：1.外膜孔蛋白减少或丢失伴高水平beta-内酰胺酶的持续产生外膜的通透性对药物进入菌体至关重要，抗生素可以通过通道蛋白直接扩散进入胞内，并到达菌体内的相应作用部位，从而达到抑菌或杀菌的作用。
肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药现状
contents
目录
• 肠杆菌科细菌概述 • 碳青霉烯类药物介绍 • 肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物的耐药
现状 • 肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药性的
影响 • 应对肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药
性的策略与措施
01
肠杆菌科细菌概述
肠杆菌科细菌的定义与分类
定义
肠杆菌科细菌是一类常见的肠道病原 菌，属于革兰氏阴性杆菌。
碳青霉烯类药物的作用机制
抑制细菌细胞壁的合成
碳青霉烯类药物通过抑制细菌细胞壁的合成，导致细菌细胞壁缺损，水分由外环境不断 渗入高渗的菌体内，致细菌膨胀、变形死亡。
ห้องสมุดไป่ตู้破坏细菌细胞膜的完整性
碳青霉烯类药物能够破坏细菌细胞膜的完整性，导致细胞膜失去正常的生理功能，引起 细菌死亡。
碳青霉烯类药物的抗菌谱
对肠杆菌科细菌具有抗菌 活性
加强耐药性监测与预警
建立全国性的肠杆菌科细菌碳青霉烯类药物耐药监测网络，定期收集和分析相关数据，及时发现和预 警耐药性趋势。
强化医疗机构、实验室和公共卫生部门之间的信息共享和协作，确保耐药性监测数据的准确性和及时性。
提高医务人员对耐药性的认识和警惕性，加强临床微生物实验室的检测能力，确保及时发现和报告耐药 菌株。
针对肠杆菌科细菌的耐药性，抗生素使用指 南需要不断更新，以指导临床医生合理用药 。
抗生素管理政策调整
政府和医疗机构需要加强抗生素管理，制定更为严 格的抗生素使用规定，以遏制耐药性的发展。
患者自我保护意识提高
公众需要增强对抗生素合理使用的认识，提 高自我保护意识，避免不合理的抗生素使用 。
05
应对肠杆菌科细菌碳青 霉烯类药物耐药性的策 略与措施