福建金线莲总黄酮提取工艺的研究

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荧光光度法测定福建组培金线莲中总黄酮含量

荧光光度法测定福建组培金线莲中总黄酮含量

荧光光度法测定福建组培金线莲中总黄酮含量作者:罗明可吴水华柯伙钊来源:《中国医药科学》2012年第02期[摘要] 目的建立测定福建组培金线莲中总黄酮含量的荧光光度法。

方法根据黄酮类化合物与Al3+能形成稳定的荧光络合物,采用95%乙醇超声提取福建组培金线莲中的总黄酮,以槲皮素为对照品,用荧光光度法测定总黄酮含量。

结果在选定的实验条件下,槲皮素浓度与荧光强度具有良好的线性关系,线性范围为0.002~0.400 μg/mL,检出限为0.000 4μg/mL,线性方程F=200 2.6C+5.529 6,相关系数r=0.999 5,测得福建组培金线莲中总黄酮含量(按干燥品计算)为73.98μg/g,平均回收率为99.95% ,相对标准偏差为0.92%(n=5)。

结论本法操作简便、快速、准确,适用于福建组培金线莲中总黄酮的含量测定。

[关键词] 金线莲;福建组培;总黄酮;荧光光度法[中图分类号] R284.2 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616(2012)02-121-03Determination of total flavanoid in tissue cultured anoectochilus roxburghii (wall.)lindl from Fujian by spectrofluorimetryLUO Mingke WU Shuihua KE HuozhaoFujian Biological Engineering Vocational College,Fuzhou 350002 China[Abstract] Objective To establish the Spectrofluorimetry of determining total flavanoid in tissue cultured Anoectochilus roxburghii (Wall.)Lindl.from Fujian . Methods On the basis of reaction of total flavanoid with alumimum ion to form fluorescent material,using 95% ethanol by ultrasonic wave to extract total flavanoid in tissue cultured Anoectochilus roxburghii (Wall.)Lindl from Fujian, a fluorimetric method for determination of total flavanoid was proposed by taking quecetin as standard sample. Results Under the optimum conditions,a linear relationship was obtained between the fluorescence intensity and the concentration of quercetin in the range of 0.002~0.400μg/mL,and the detection limit was 0.000 4μg/mL, linearity relationship wasF=2002.6C+5.5296, correlativity was 0.9995,determination of total flavanoid in tissue cultured anoectochilus roxburghii (wall.)lindl from Fujian (according to the dry product calculation) was 73.98 μg/g,average rate of recovery was 99.95%, RSD was 0.92%(n=5). Conclusion This method is simple, rapid, accurate which is suitable for determining total flavanoid in tissue cultured Anoectochilus roxburghii (wall.)lindl.from Fujian.[Key words] Anoectochilus roxburghii (wall.)lindl;Tissue cultured from fujian; Total flavanoid;Spectrofluorimetry金线莲[anoectochilus roxburghii (wall.)lindl.][1] 为兰科开唇兰属植物,又名金线兰、金线草等,民间素有“药王”“金草”“神药”等美称,是福建省和台湾等地极其珍贵、稀少的中药材。

贡享本草野生金线莲检测报告

贡享本草野生金线莲检测报告

贡享本草永泰生物科技有限公司,与福建省农业科学院农业生物资源研究所药用植物研究中心合作,随机抽取连城(公司其中的一个基地)的“贡享本草”野生金线莲作样品,检测其多糖和总黄酮(黄酮类化合物)的含量,结果表明两者均高于参考值(金线莲多糖总黄酮的行业标准),特别是多糖的含量为行业标准的2.236倍。

科学实验研究显示,许多植物多糖具有生物活性,具有包括免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗辐射、抗菌抗病毒、保肝护肝等保健作用。

金线莲化学成分研究进展_王晋成

金线莲化学成分研究进展_王晋成
酮类化合物是以黄酮 ( 2-苯基色原酮) 为 母核而衍生的一类黄色色素,其中包括黄酮的同分 异构体及其氢化和还原产物,即以 C6-C3-C6 为基 本碳架的一系列化合物 [5]。黄酮类化合物属植物次 级代谢产物,在植物中广泛存在,种类繁多,结构 类型复杂 [6],近年研究发现生物类黄酮具有清除自 由基 [7] 及抗氧化 [8]、保肝 [9-10]、抗肿瘤 [11]、治疗 糖尿病 [12] 等作用。
2 多糖及糖苷
糖是多羟基 ( 2 个或以上) 的醛类 ( Alde- hyde) 或酮类 ( Ketone) 化合物,按糖基的数量 分为单糖、双糖和多糖,多糖是由醛糖或酮糖通过 脱水形成糖苷键,并以糖苷键先行或者分枝连接而 成的链状聚合物,是构成生命活动的四大基本物质 之一 [30]。糖苷是糖与其他分子缩合形成的含糖衍 生物,包括糖的残基和配基 (非糖部分) 两部分, 中间的连接键称为糖苷键。金线莲苷是开唇兰属植 物研究最多的成分之一,也是本属植物已知的主要 活性成分 。 [31]
陈晓兰等采用苯酚-硫酸法测定了金线莲不同 部位的多糖含量,研究表明金线莲多糖含量在 0.85%~6.40%,且根茎部含量高于叶中含量 [32]。赖 应辉等检测出多糖、低聚糖和还原糖的含量分别为 13.326%、11.243%和 9.739% 。 [33]
日本学者 Aiko Ito 等从 A. koshunensis (恒春金 线兰 )中分离得到了脂肪族糖苷 nicoloside(3-吡啶 甲 醇 苷 ,β -d -glucopyranosyl -3 -pyridinemethanol)和 kinsenoside [ 3 - ( R) -3 -β -d -glucopyranosyloxybu -
研究者们首先开展了金线莲总黄酮含量的测 定。吴水华 [13] 和罗明可 [14] 等采用荧光光度法测 定了福建野生和组培金线莲中总黄酮的含量分别为

荧光分光光度法测定福建野生金线莲中总黄酮含量

荧光分光光度法测定福建野生金线莲中总黄酮含量

荧光分光光度法测定福建野生金线莲中总黄酮含量吴水华【摘要】目的:根据黄酮类化合物与Al3+形成稳定的荧光络合物原理,建立一种准确测定金线莲中总黄酮的方法.方法:采用超声提取法用95%乙醇提取福建野生金线莲中的总黄酮,以槲皮素为对照品,用荧光分光光度法测定总黄酮的含量,并进行回收率试验.结果:在选定的条件下,槲皮素浓度与荧光强度呈正相关,线性范围2~400 ng· mL-1,检出限为0.4 ng·mL-1,线性方程Y=2 098.1X +4.167 8,r=0.999 8,平均回收率为98.4%,RSD=1.5%.结论:本法操作简便、快速、准确,适用于金线莲中总黄酮的含量测定.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2012(014)008【总页数】4页(P10-13)【关键词】金线莲;荧光法;总黄酮【作者】吴水华【作者单位】福建生物工程职业技术学院中药系,福建福州 350002【正文语种】中文金线莲Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl.,别名金蚕、金石松、树草莲、鸟人参、金线虎头蕉、金线入骨消,是兰科开唇兰属的植物[1]。

金线莲在降血糖[2]、降血压[3]、保肝护肝[4]等方面具有显著的药理作用,是闽南民间常用要药。

金线莲中含有多糖、黄酮、挥发油等多种成分,其中黄酮类化合物主要由槲皮素、异鼠李素及其糖苷组成[5-9]。

目前,有关总黄酮的含量测定国内外没有公开的标准方法,《中国药典》中收载较多的是可见-紫外分光光度法,通常选用芦丁作为对照品,此法操作简便,但杂质干扰大,测定误差较大。

近年来,荧光分光光度法测定总黄酮含量具有简便、快速、专属性好等特点,得到了众多学者的关注。

目前,对金线莲中的总黄酮的测定,尚未见有应用荧光法的文献报道。

本文根据文献[10]选用槲皮素作为对照品,采用荧光法对福建野生金线莲中的总黄酮含量进行测定。

Cary Eclipse型荧光分光光度计(美国瓦里安);AL204型万分之一分析电子天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司];AKRY-UP-Ⅲ-10艾柯超纯水机(成都康宁实验专用纯水设备厂);KQ-100B超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)。

金线莲总黄酮提取工艺优化及不同月龄、品系金线莲黄酮含量比较

金线莲总黄酮提取工艺优化及不同月龄、品系金线莲黄酮含量比较
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金线草主根总黄酮的提取工艺优化

金线草主根总黄酮的提取工艺优化

金线草主根总黄酮的提取工艺优化方兰;邱树毅;周鸿翔;曾海英;王晓丹【期刊名称】《中国酿造》【年(卷),期】2017(036)008【摘要】以金线草主根为原料,对金线草主根总黄酮的乙醇回流提取工艺进行研究.在单因素试验的基础上,通过正交试验优化工艺条件.结果表明,金线草主根中总黄酮的最优提取工艺为:乙醇体积分数10%、提取温度80℃、提取时间2.0h、液料比20∶1(mL∶g).在此条件下,金线草主根总黄酮的提取率达到(23.59±0.19) mg/g.【总页数】4页(P149-152)【作者】方兰;邱树毅;周鸿翔;曾海英;王晓丹【作者单位】贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室,贵州贵阳550025;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室,贵州贵阳550025;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室,贵州贵阳550025;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室,贵州贵阳550025;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025;贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室,贵州贵阳550025;贵州大学酿酒与食品工程学院,贵州贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】TQ917【相关文献】1.百蕊草总黄酮提取工艺优化 [J], 雒江菡2.金线莲总黄酮提取工艺优化及不同月龄、品系金线莲黄酮含量比较 [J], 陈莹;张巧云;任丽;王文义;黄锦芳;张雪;吴水生3.鱼腥草中总黄酮的提取工艺优化研究 [J], 刘浩; 唐红枫4.佛耳草总黄酮的提取工艺优化与含量测定方法研究 [J], 陈巍;张乐;何达;闫娜5.白眉草总黄酮超声辅助提取工艺优化及抗菌活性研究 [J], 章烨雯;臧青民;蒋德旗;韦敏;李桂芬因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

金莲花总黄酮纯化研究

金莲花总黄酮纯化研究

金莲花总黄酮纯化研究作者:颜娟曲彩红田嘉铭安芳王书华【摘要】目的:利用正交试验,优选金莲花总黄酮的纯化方法。

方法:以总黄酮含量为考查指标,选择大孔吸附树脂、乙醇浓度、上样量、洗脱速度和吸附时间五个实验因素,采用L16(45)正交实验表进行实验,筛选出总黄酮的最佳纯化工艺。

结果:影响金莲花总黄酮含量的主要因素是乙醇浓度,其次是大孔吸附树脂的类型。

按最佳方案纯化,总黄酮含量可达到69.1%。

结论:最佳纯化方法为:采用大孔吸附树脂D-101,以50%乙醇洗脱,最佳上样量10mL,吸附时间20min,洗脱速度2.0 mL・min-1。

【关键词】金莲花;黄酮;正交试验;纯化【ABSTRACT】 Objective:With the method of orthogonal-test,to optimize the method of purifying total flavonoids.Methods:Taking the content of total flavones as indexes,the orthogonal design was done with five factors:macroporous adsorption resin,eluent,sample volume,elution speed and adsorption time by orthogonal design tableL16(45).Results:The main factor influcing the content of total flavones in Trollius chinensis Bunge was eluent,the next was different types of macroporous adsorption resin.The best method of purifying the total flavonoids was D-101 macroporous adsorption resin with 50% ethanol elution,the sample volume reaching 10mL,20min adsorption time and2.0mL/min elution speed.Conclusion:The content of total flavones reached was 69.1% which was the best optimum selection.【KEY WORDS】 Trollius Chinensis,Flavone,Orthogonal Test,Purifying金莲花是毛茛科植物金莲花(Trollius chinensis Bunge)的干燥花及花蕾,主要产于中国西南、西北、华北、东北及台湾等省区,赵学敏所著的《本草纲目拾遗》谓其“味苦、性寒、无毒”,可“治口疮、喉肿、浮热牙宣、耳疼、目痛”,并具“明目、解岚障”之功效。

高效液相色谱法测定黄酮

高效液相色谱法测定黄酮

高效液相色谱法测定金线莲中黄酮含量金线莲为兰科(Orchidaceae)开唇兰属(Anoec-tochilus)珍稀濒危药用植物,主产于我国福建、台湾和云南等省,其中福建金线莲[ Anoectochilus roxburghii( Wall. )Lindl. ]为主要药用种之-一川。

该植物主要用于治疗高血压、糖尿病、肝炎、肾炎等症,疗效独特2) ,素有“药王”、“金草”之称。

目前野生金线莲日渐匮乏,且市场较为混乱,急切需要科学的方法对金线莲药用种加以甄别。

本文在对福建金线莲系统的化学研究结果基础上,对其主要成分黄酮进行定性及定量分析,并比较了同为开唇兰属,而未作为金线莲主要药用种的云南金线莲(Anoectochilus burmannicusRolfe)与福建金线莲黄酮苷元类型和含量的差异,从而为金线莲的种间鉴别、人工栽培等研究提供依据。

福建金线莲化学成分研究的结果表明,该植物中富含黄酮类化合物,结构以异鼠李素、槲皮素及山柰素型黄酮醇苷为主[2-4]。

而总黄酮含量以及3种主要类型黄酮含量之比是金线莲质量控制的重要指标,因此有必要建立金线莲中黄酮类化合物的含量测定方法,为金线莲种的鉴别以及人工栽培方法等研究奠定化学基础。

总黄酮含量测定通常使用紫外分光光度法及高效液相色谱法,后者选择性优于前者。

本文对金线莲乙醇提取物进行酸水解处理,采用高效液相色谱法测定其水解所得主要苷元:异鼠李素槲皮素和山柰索的含量,计算3种黄酮苷元总含量及其比例,对比福建金线莲与云南金线莲之间黄酮类化学成分的差别。

1 仪器、试剂与材料美国Waters公司高效液相色谱仪:Waters600控制器,616泵,996二极管阵列检测器,2010工作站。

对照品:槲皮素、异鼠李素为本室自制,纯度95%以,上(以NMR和MS鉴定结构,以HPLC 一ELSD鉴定纯度)。

甲醇(色谱纯) :天津四友生物医学技术有限公司;乙腈(色谱纯) : Merck KGaA,Fish-ier ChemAlert;95%乙醇(分析纯):北京化工厂;85%磷酸(分析纯)福建金线莲( Anoectochilus roxburghii) 与云南金线莲(Anoectochilus burmannicus)干燥药材均由郭顺星研究员提供并鉴定。

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致谢 : 湘西土家族苗 族自治州 民族医 药研究 所田 华咏提 供 显脉獐牙菜药材 , 湖 南大学化 学生物 传感与 计量 学国家 重 点实验室代测 NMR 和 M S 。
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REFERENCES
[ 1] CA I G X H unan T radi tiona l D rug Syl log e ( V ol 5) ( 湖 南药物 志第 五 卷 ) [ M ] 1 st E d Changsha: H unan Science & Technology Press , 2004: 3183 3184 ZEN G G Y, TA N G S , XU K P, et al The w ater solub le ch em ical cons titu ents of Sw er tia dav id i franch [ J] A cta P har m S in ( 药学 [ 10]
Study on Extraction of Total F lavonoid s in Anoectoch ilu s roburgh ii by O rthogonal D esign
* GUAN Jin g , WANG Chun lan , GUO Shun x ing , X I AO Pe i gen ( Institute of M edicinal P lant D evelopm ent, Ch inese
A cademy of M edical Sciences and P ek ing Union M ed ical C ollege, B eij ing 100094, China ) AB STRACT : OBJECT IVE To study the ex traction techno logy o f tota l flavono ids fo r A no ectochilus roburgh ii METHODS extraction frequency , extrac tion ti m e and so lvent quantity CONCLU SION T he
ex traction condition w as opti m ized w ith o rthogona l design by the detection of UV spectrum RESULTS affected by e thano l concentra tion , ex tractions are A1 B3 C3 D3
究奠定基础 。 方法
考察的因素中 , 对福建金线莲 总黄酮提取率影响程度为 : 溶剂浓度 > 提取次 数 > 提取 时间 > 溶 剂用量 , 其中 乙醇浓度 对黄酮提取率具有显 著影响 。 结论 福建金 线莲 总黄 酮最佳 提取 工艺为 : 体积 分数 95 % 乙醇 浸泡 过夜 , 加 热回流 提取 3 次 , 每次 1 5 h, 溶剂用量均为 12倍量 。加样回 收率为 98 51% , RSD 为 2 068% 。 关键词 : 福建金线莲 ; 总黄酮 ; 正交实验设计 中图分类号 : R 282 文献标识码 : A 文章编号 : 1001- 2494 ( 2008) 21- 1615- 03
operation w as repeated for 3 ti m es A verage recovery is 98 51 % , and RSD is 2 068%
1 661 ,
1 588 ,
+
1 495 ,
+
1 381 。 E I M S m /z:
1
275
[ M + H ] , 274 [ M ] 。 H NMR ( DM SO d6, 400 MH z) : 3 76 ( 3 H, s , OCH 3 ), 4 92 ( 1H, s, OH ) , 6 28 ( 1 H, d , J = 2 5 H z, H 2 ), 6 48 (1 H, d , J= 2 5 Hz , H 4 ), 6 70 ( 1 H, d , J= 9 0H z , H 7) , 7 53 ( 1 H, d , J = 9 0H z , H 6) , 13 11 57 ( 1 H, s, OH ) , 12 02 ( 1H, s , OH )。 C NMR ( DM SO d 6, 100 MH z) 数据见表 1 。以上光 谱数据 与 1, 3 , 8 三 羟 基 5 甲氧 基 酮 基本 一 [2 , 10] 致 , 故鉴定 化合物 为 1 , 3 , 8 三羟 基 5 甲 氧基 酮 (1 , 3 , 8 trih ydroxy 5 m ethoxyxanthone)。
F lavono id ex traction w as The opti m um
The ma teria l w as soaked overn ight w ith 12 vo lum ns of 95% E t OH, kept circum fluence for 1 5 h , this
中国药学杂志 2008 年 11月第 43 卷第 21期
K EY W ORDS : Anoectochilus roburghiiu; tota l flavono id ; orthogonal exper i m enta l design
福 建 金 线 莲 [ A noectochilu s roburghii ( W all ) L indl ] 为 兰 科 ( Orchidaceae ) 开 唇 兰 属 (A noectochilus ) 珍稀药用植物, 又名金线兰、花叶开 唇兰等。该植物主要分布于中国南部福建等省, 日 本、斯里兰卡、印度和尼泊尔等国也有零星分布 。 金线莲在民间有 ∀ 药王 #、 ∀ 金草 # 之美誉, 近年来 主要用于治疗高血压、糖尿病、心脏病、肺炎、急慢 [ 2] 性肝炎、肾炎等症 。在对其化学成分系统研究的基 础上, 认为黄酮类化合物为福建金线莲化学成分中 重要组成部分 。因此以总黄酮为检测指标 , 紫 外分光光度法为检测手段 , 利用正交实验设计 , 对 福建金线莲提取工艺进行了研究, 为进一步的质量 控制以及药理活性等研究工作提供可靠资料。 1 材料与方法 1 1 材料和仪器 福建金线莲购于福建省, 由中国医学科学院药 用植物研究所郭顺星 研究员鉴定。对照品异鼠李 素 3 O 芸香糖 ( Bu h , 为我室从该 植物中 分离得 到 , 纯度 > 98 % ) 。所用试剂均为 分析纯。 Ph ilips PU8800 紫 外 可 见 分 光 光 度 计 ; 电 子 分 析 天 平 ( AE240) 。 1 2 实验方法 取待测标准溶液进行 200~ 400 nm 紫外光谱扫 描 , Bu h 的最大吸收波长在 205 , 370, 254 nm 处。 1 2 1 检测方法的选择 样品的原阶紫外光谱图 没有显示出黄酮的特征吸收, 但其二阶导数光谱图 在 370 nm 处有较明显的波动。因此以 370 n m 为检 测波长。 1 2 2 标准溶液的制备及标准曲线的绘制 取 Bu h 约 10 m g , 用体积分数 95 % 乙醇溶于 10 mL 量瓶 中。取 2 mL于 50mL 量瓶, 加体积分数 95 % 乙醇至 -1 刻度, 得到质量浓度为 0 040 20 g! L 的标准溶液。 取此标准溶液 1 5 , 2 0 , 2 5 , 3 0 , 3 5 mL, 置于 5 mL 量瓶, 加体积分数 95 % 乙醇至刻度, 测定吸光 度, 得到标准曲线方程: A = 0 027 1 + 0 021 6 , 相 关系数 r = 0 999 9 , 线性范围 : 8 04~ 28 14 mg ! L 。 1 2 3 样品溶液的制备 精密称取干 燥药材 500 m g, 加入溶剂, 浸泡 过夜, 加 热回流提 取, 提取 液转入 25 mL 量瓶, 加体积分数 95 % 乙醇至刻度。 取该溶液 1 mL, 置于 5 mL 量瓶, 加体积分数 95 %
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