肝素钠生产工艺综述
一、肝素分类肝素是哺乳动物体内含的一种粘多糖，它与蛋白质结合在一起存在于肠粘膜、肺、肝等器官内，肝素与蛋白质分离提取后，具有抗凝血、抗血栓、降血脂等多种生理活性，是防止动脉粥样硬化，心脑血管疾病的显效药物。
(1) 普通(标准)肝素是由猪或羊黏膜提取，平均分子量为15000，相当稳定。
(2) 通常把分子量小于6000的称为低分子肝素。
低分子肝素与普通肝素比较，其半衰期较长，抗血栓效果好，而抗凝出血倾向较弱，有取代普通肝素的趋势。
近年临床常用的有：达肝素钠(法安明)、依诺肝素钠(克赛)、低分子肝素钙(速避凝、那屈肝素钙)。
(3) 目前正在深入研究的肝素制剂中还有低抗凝活性肝素、改构型肝素、类肝素等, 这些药物特点是具有低抗凝、高抗栓、作用时间长和出血作用少的优点，很有开发前途。
二、肝素钠简介拼音名：Gansuna 英文名：Heparin Sodium本品系自猪的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡萄糖的钠盐，属粘多糖类物质，通过激活抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)而发挥抗凝作用。
它对凝血过程的三个阶段均有影响，在体内外均有抗凝作用，可延长凝血时间、凝血酶原时间和凝血酶时间。
口服不吸收，皮下、肌肉或静脉给药均吸收良好。
三、肝素钠检测（药典版）拼音名：Gansuna 英文名：Heparin Sodium本品系自猪或牛的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属黏多糖类物质，具有延长血凝时间的作用。
按干燥品计算，每1mg 的效价不得少于150 单位。
【性状】本品为白色或类白色的粉末；有引湿性。
本品在水中易溶。
【比旋度】取本品，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml 中含40mg 的溶液，依法测定（附录Ⅵ E），比旋度应不小于＋35°。
【鉴别】 (1) 取本品与肝素标准品，分别加水制成每1ml 中含2.5mg 的溶液，照电泳法（附录Ⅴ F第三法）试验，供试品和标准品所显斑点的迁移距离之比应为0.9 ～1.1 。
(2) 本品的水溶液显钠盐的鉴别反应（附录Ⅲ）。
【检查】酸碱度取本品0.10g ，加水10ml溶解后，依法测定（附录Ⅵ H），pH 值应为5.0 ～7.5 。
溶液的澄清度与颜色取本品0.50g ，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，照分光光度法（附录Ⅳ A），在640nm 的波长处测定，吸收度不得大于 0.018；如显色，与黄色1 号标准比色液（附录Ⅸ A 第一法）比较，不得更深。
吸收度取本品，加水制成每1ml 中含4mg 的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A）测定，在260nm 的波长处，其吸收度不得大于0.20；在280nm 的波长处，其吸收度不得大于0.15。
黏度精密称取本品（按实际测得的单位计算相当于40万单位），加水适量研细，移入干燥并称定重量的10ml量瓶中，研钵用水冲洗并移入量瓶中，将量瓶置25℃水浴内，俟温度平衡后，加25℃水至刻度，摇匀，称定重量，计算供试品溶液的密度。
取溶液，必要时用0.45μm 的滤膜过滤，照黏度测定法（附录Ⅵ G第一法），用内径约为 1 mm的毛细管，在25℃±0.1 ℃测定其动力黏度，不得大于0.030Pa.s 。
总氮量取本品，照氮测定法（附录Ⅶ D第二法）测定，按干燥品计算，含总氮量应为1.3％～2.5 ％。
硫取本品约25mg，精密称定，照氧瓶燃烧法（附录Ⅶ C）进行有机破坏，选用 1000ml燃烧瓶，以浓过氧化氢溶液0.1ml 与水10ml为吸收液，俟生成的烟雾完全吸收后，置冰浴中15分钟后，加热缓缓煮沸2 分钟，冷却，加乙醇－醋酸铵缓冲液 (pH3.7)50 ml，乙醇30ml，0.1 ％茜素红溶液0.3ml 为指示液，用高氯酸钡滴定液(0.05mol/L) 滴定至淡橙红色。
每1ml高氯酸钡滴定液(0.05mol/L) 相当于1.603mg 的S，按干燥品计算，含硫量不得少于10.0％。
干燥失重取本品，置五氧化二磷干燥器内，在60℃减压干燥至恒重，减失重量不得过 5.0%（附录Ⅷ L）。
炽灼残渣取本品0.50g ，依法检查（附录Ⅷ N），遗留残渣应为28.0％～41.0％。
钾盐取本品0.10g ，置100ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另量取标准氯化钾溶液（精密称取在150℃干燥1 小时的分析纯氯化钾 191mg ，置1000ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀） 5.0ml，置50ml量瓶中，加（B）溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。
照原子吸收分光光度法（附录Ⅳ D杂质检查法）在766.5nm 的波长处分别测定，应符合规定。
重金属取本品0.50g ，依法检查（附录Ⅷ H第二法），含重金属不得过百万分之三十。
热原取本品，加氯化钠注射液制成每1ml 中含1000单位的溶液，依法检查（附录Ⅺ D），剂量按家兔体重每1kg 注射2ml ，应符合规定。
【效价测定】照肝素生物检定法（附录Ⅻ D）测定，应符合规定；测得的结果应为标示量的91％～110 ％。
【类别】抗凝血药。
【贮藏】密封，在凉暗处保存。
【制剂】肝素钠注射液四、肝素钠生产工艺流程1、盐解：将刮好的新鲜肠粘膜，每100斤肠粘膜加入清水100斤，按肠粘膜和水的总重量，加入4%的工业盐，搅拌均匀，再加烧碱液调PH 值为8--9，缓慢升温50--55度，加温时每10--20分钟加水搅拌一次，恒温2小时，注意要间隔搅拌。
恒温结束后，要快速升温到96--98度，恒温10分钟，趁热捞出上层的渣子。
用100目尼龙布过滤。
注意：加盐过多会使下一步交换吸附含量超过规定，加盐过少，肝素和蛋白质分离不完全，碱性过强，会使肝素降解破坏，收率下降。
同时还能使一些蛋白质溶解度增大，造成过滤困难。
碱性不足造成提取液偏酸，则在高温的情况下，肝素迅速破坏，升温过急会使蛋白质早凝固，影响肝素的分解和溶出。
2、吸附：待提取液温度冷至50--55度，应检测盐浓度为3。
5--5%时，即可加入5%已处理号的树脂。
如树脂上含有盐水，需用清水将树脂洗净控干，方可使用。
搅拌吸附6--8小时，转速60--80转/分钟为宜，搅拌须使树脂上下翻动，否则吸附效果差，收率低。
吸附完毕，弃去上层吸附液，然后用100目的尼龙布过滤出树脂。
加入提取液的树脂量：新树脂可按提取液的5--6%加入，旧树脂可按提取液的8--10％。
3、洗涤：过滤后的树脂用40度左右的温水，漂洗干净。
再放入与树脂重量相等的盐溶液中(盐溶液的浓度为5%左右)洗涤10--20分钟，除去低分子肝素和一些蛋白质，然后将树脂过滤。
4、洗脱：第一次洗脱将过滤号的树脂放入浓度为20--22%的盐溶液中搅拌洗脱5--6小时，树脂和盐水的比例为1：0。
7。
过滤后将树脂控干进行第二次洗脱，调盐溶液浓度为16--18%，搅拌3小时以上，树脂和盐水的比例与第一次相同，过滤后的水即是药液。
5、除杂：将稀碱水加入洗脱后的药液里，要快搅慢加，调PH值为10--12搅拌2分钟，静止沉淀20小时后，抽出上层药液，下沉的是杂质，且渣子放另外桶内过滤。
过滤后的药液和下次药液除杂时合并待用。
6、沉淀：将抽出除杂后的药液加入盐酸调PH值为7--7。
5，即可加入酒精进行沉淀。
向药液里加入酒精要快搅慢加。
(由于酒精的浓度不同，因此沉淀肝素的酒精用量不等)用酒精计测量酒精度为30--35%，加盖密封，沉淀20小时。
弃去废酒精收集糊状肝素。
注意在抽出废酒精时，不可抽动沉淀的肝素。
将多次生产的肝素钠浆收集在一起，以备集中脱水干燥。
7、脱水：将生产的肝素钠浆，用双层的确良布过滤后放入95%的酒精内浸泡20小时，加盖密封。
过滤后按上述方法重复一次，使其充分的将肝素上的水分交换下来。
8、干燥：待肝素钠浆沥干后，放在不锈钢盘中烘干，用铲子来回的翻动，温度保持在50--55度，注意温度低于要求是不易烘干的，温度高于60度时会使肝素钠的生物活性下降。
干燥后的肝素很易吸潮，应及时用双层塑料袋密封包装，于通风干燥处存放。
五、肝素钠精制新工艺本工艺采用酶解结合氧化法精制肝素，在该过程中采用低温离心技术,解决在除酸性蛋白过程中，粗品肝素钠中残留杂蛋白在纯化过程中很难被除去的缺点。
在粗品肝素钠中加入胰蛋白酶对这些杂蛋白进行酶解,再结合一次氧化除杂过程,从而提高精品肝素钠的效价和效价回收率。
1、工艺流程2、溶解称取适量肝素钠粗品加质量分数3%左右NaCI溶液进行溶解。
50℃水浴加热，用NaOH溶液调pH至8.0静置2小时，过滤除不溶性杂质。
3、酶解法除蛋白肝素在动物体内是以肝素-蛋白质复合物的形式存在，通过酶解或盐解去除复合物的蛋白质成分，游离肝素。
但在实际生产过程中，复合物的解离，蛋白质的除去是不完全的，粗品中总存在数量不等的蛋白质。
粗品肝素钠必须经过精制，可以进一步去除粗品中残存的结合蛋白质，不仅因杂蛋白的去除而提高效价，而且因被“掩蔽”的肝素活性得到释放而获得较高活性。
为此，利用蛋白水解酶专一水解蛋白的特点，并结合调酸除蛋白和氧化除蛋白方法,采用酶解除蛋白法，该法能在除去蛋白质时较少影响肝素总效价。
在肝素钠溶液中加入少量的胰蛋白酶，使残留在肝素中的少量蛋白质降解成小分子肽,从肝素-蛋白质复合物中解离出来，再结合调酸碱和氧化法除蛋白,制得精品肝素钠的效价和效加回收率均有不同程度提高。
酶解反应条件：蛋白酶加入量0.05%， pH 7~9，温度40℃，反应时间5h。
4、调酸除蛋白在调酸除蛋白过程中，为防止肝素失活,加入亚硫酸氢钠作保护剂。
在低温下离心脱除蛋白。
5、氧化条件H2O2用量2/% pH8.5，温度25~27℃，时间15h。
6、沉淀将氧化液调pH6.5，加人等量的95%乙醇沉淀。
抽出上清液得沉淀物，将沉淀物慢慢加无水酒精或丙酮中脱水。
7、干燥55℃，真空干燥3小时以上即得精品。
采用酶解结合过氧化氢一次氧化的肝素钠精制工艺，产品较白，且效价和效价回收率均高于二次氧化方法，效价达150U/mg以上，效价回收率达95 %以上。
(工艺流程)肝素钠生产新工艺流程
（工艺流程）肝素钠生产新工艺流程再加；1、原料处理清洗去除内外污物、和 外部皮质脂肪绞成糜状；加入 3；充分搅拌下， 混合均匀2、酶解提取加少量 5 调节 PH;加入 7；搅匀后升温；保持条件 2.3 酶解 3-4h 再酌情加入 7； 继续酶解 4-5h;注：在上述酶解过程中，如果复查酶解料液 PH 值有所下降之际，应及时用少许的稀碱液仔细的调整1.调 整 PH5.5-6.0 酶解完毕，用 10 调整 PH; 酶解液 1然后升温；加入 111 .使充之分混搅合拌均；匀；再升温2，.混保合温均；匀； 停止搅3拌.升，温趁至热9过0滤℃去；处杂质；4. 保温 30min ；待滤液冷却至 37℃；用 15 调整其 PH=10.5；5.停止搅拌； 精细过滤之；酶解液 211. 料液 5%左右的精盐； 12. 过滤； 13. 稀碱液；回调其回P 调H 值P ；H 9.0-9.5； 酶解滤液 2在范围内进行离子交换处理； 3、离子交换吸附冷却1至.冷室却温至；室温； 2. 控制升温至45℃；捞除浮于液面的油脂薄片层；3.停止加热； 控制升温到 45℃，停止加热；酶解提取液18.D-204 型树脂（新树脂的用量一般为料液的 2，5%-3%，用过的酌情加大用量）；搅拌下加入 18 以有效吸附料液中的肝素钠成分；1. 将树脂先用清水19.树脂大约 1用 19 洗涤一次，滤干；吸有肝素成分 倍 量 的用 20 进行洗脱操作;充分漂洗干净；2. 洗涤一次，滤干；的 D-204 型树1.2mol/L 的4； 3. 等量的水 500g ；4. 少许浓度为 0.1%的防腐剂；猪肺糜状物第一次脱液为树脂体积的 1.5 倍，约洗 4h；第二次脱液为树脂体积的 0.5 倍，约洗 1h；滤干树脂，合并洗脱液；调节 PH 值；1. 调节PH=10-11；搅拌 30min；2. 搅拌；21.稀碱或酸液；静置 6h；3.静置；虹吸出上层清液；下部沉淀物尽量抽干；合并清液、滤液；精调节其P1H.=调6.节0-P6H.5=；6.0-6.52.沉淀加入 1.5 倍的 23，沉淀过夜；仔细虹吸出上层清液；收集下部沉淀物；抽滤至干（母液可套用于调PH值前的洗脱液中）；经真空烘干；4、精制22.酸碱液；23.1.5 倍的95%乙醇适当升温助溶猪肺肝素钠粗品用适度的 25 完全溶解；制成大约 8%的溶液；用 26 调节料液 PH;升温；25.适度2%的NaCl 溶液;第一按次每氧一化亿终个点单，位紫加红入色2不7；再褪色；料液1再加少许饱和 28；27.0.15-0.2mol/L 高锰酸钾精细过滤一次;复滤一次；待料液2 冷却后料液31.调节PH=10.5-11.0；将2滤.在液2用5-2297调℃节下第PH二；次氧化；料液5充分搅拌下，缓缓加入少量的 30；在标温下进行第二次氧化，时间为 16-24h；料液用 31 过滤；29.饱和NaOH;30.3%-5%H2O2 溶液；1.调PH 值=5.8-6.5；2.于5-10℃条件；滤液7 32.少许盐酸；33.95%乙醇；清液、滤液用 32 调节 PH ； 再加入 0.9 倍量的 33； 于标温下沉淀 24h ； 收集得沉淀物； 用少量 34 溶解后；再加上 3-4 倍量的 95%乙醇进行沉淀；收、套用）；16. 用 80 目尼龙袋沥出，沥干（乙醇应集中回7. 再用清水洗涤至物乙醇气味为止，沥干水份；8. 将树脂放入等量的上述盐酸中，搅拌10. 再用清水冲洗到 PH=7； 11. 沥干水份；目尼龙袋沥出树脂；12. 目尼龙袋沥出树脂；酸处理14. 再用清水冲洗到 PH=7； 15. 沥干水份；待用；二、猪胰浆的制作方法：搅成糊状1 千克猪胰加2 千克石灰水； 搅拌均匀，放置 2h ； 测 PH=8； 三、实验仪器：2）、温度计； 四．实验试剂：防腐剂、NaOH 、HCl 、NaCl 、H2O2、丙酮、石灰水。
实验猪小肠提取肝素钠技术
猪小肠提取肝素钠技术肝素钠是一种抗凝血药,用于临床至今已50多年的历史,长期应用不衰。
广泛用于治疗急性心肌梗塞,病毒性肝炎,与核糖核酸合用可增加对乙型肝炎的疗效.配合化疗.还有利于防止癌细胞的转移.此外肝素钠能阻抑血液的凝结过程,用于防止血栓形成,在降血脂和增进人体免疫功能方面也有一定的作用.肝素钠生产缺口很大,产品供不应求,由我国出口的肝素钠风靡欧美许多国家,年创外汇1000余万美元.每2000根猪小肠加工肠衣的粘膜可生产1公斤肝素钠,价值2200元左右.按此工艺提取的肝素钠,虽然经过了精制,但未经药理检查,不能直接临床使用.可将产品售给生产制药厂,进一步加工成制剂.(一): 主要原料:1,猪小肠粘膜新鲜的猪肠做肠衣时刮出的肠粘膜.2,氢氧化钠用于调节pH值,选用化学纯试剂.3,氯化钠选用化学纯试剂.4,D—254树脂. 是一种聚苯乙烯二乙烯苯三甲胺型强碱性阴离子交换树脂.交换能力较强,但机械强度较差,也可以选用714树脂,1299X9大孔树脂经及其它类似的树脂进行离子交换.在这里,树脂的作用是用来吸附肝素钠.（二）工艺流程肠粘膜-提取-吸附-洗涤-洗脱-干燥-精制-成品制作过程（三）1、提取：在猪肠衣刮下的粘膜中加入5%的氯化钠溶液，要完全淹没粘膜，用氢氧化纳溶液调节溶液的PH值为9至9.5，浸渍0.5小时左右。
此步的关键是肠粘必须新鲜，且含水量适中（总固定量为6%至7%）2、吸附：将上述溶液冷却至50度左右，除去浮在上面的油和杂质。
加入已处理的714树脂，树脂用量为粘膜量的4%至6%，吸附0.5小时，随时样校正PH值，使其在9.0至9.5之间，然后用70目至80目的的尼龙网过滤，滤出树脂，除去滤液。
3、洗涤：将吸附了肝素的树脂用水漂洗干净（至洗液澄清为止），滤干。
然后将树脂放在桶中，加1倍量1.4摩/升氯化钠溶液搅拌洗涤1小时，滤干。
再反复用1倍量1.2摩/升氯化钠溶液按上述条件洗涤两次并滤干树脂。
依诺肝素钠的制备方法
依诺肝素钠的制备方法杨胜凯【期刊名称】《河北企业》【年(卷),期】2015(000)007【总页数】1页(P115-115)【作者】杨胜凯【作者单位】华北制药股份有限公司生物技术分公司【正文语种】中文近年来国际市场对肝素原料药的需求十分强劲，肝素制剂用量稳中有升，低分子肝素的市场迅速扩容并保持高速增长趋势。
肝素粗品是该产业价值链的低端产品，肝素原料药是该产业价值链的中间品，低分子肝素制剂是该产业价值链的最高端产品。
依诺肝素钠是低分子量肝素钠的一种，其通用名：Enoxaparin。
作为一种常见的皮下注射液，经常被用来预防和治疗深部静脉血栓形成、肺动脉栓塞等疾病。
由于低分子量肝素类产品在临床使用时可以克服一些普通肝素的缺点，如选择性强、对动脉和静脉血栓形成有较强的抑制作用,在抗血栓剂量下,凝血时间无明显改变；抗血栓作用显著增强；人体药动学性质显著改善；临床疗效确切,使用安全方便,对血小板的副作用小。
一、依诺肝素钠制备方法1.成盐。
称取粗品肝素钠30 g，向其中加入适量纯化水溶解，得肝素钠溶液；称取苄索氯铵75 g，向其中加入纯化水溶解，得苄索氯铵溶液。
将苄索氯铵溶液缓慢加入到肝素钠溶液中，边加边搅拌，搅拌均匀后，静置2小时。
然后用离心机进行离心操作，将离心所得固体用纯化水进行洗涤，最后将所得肝素苄索氯铵盐湿品进行真空干燥即可得肝素苄索氯铵盐。
2.酯化。
向所得的肝素苄索氯铵盐中加入5倍体积的二氯甲烷，搅拌溶解后再向其中加入肝素苄索氯铵盐1倍体积的氯化苄，维持温度35℃，搅拌反应24小时，反应结束加入肝素苄索氯铵盐6倍体积的10%乙酸钠甲醇溶液，搅拌10分钟，静置4小时，对沉淀进行过滤，将过滤的沉淀用甲醇反复洗涤两次得肝素苄酯湿粗品。
向肝素苄酯湿粗品中加入肝素苄索氯铵盐重量3倍体积的8%氯化钠水溶液，搅拌至完全溶解，再加入氯化钠溶液体积4倍的甲醇，继续搅拌10分钟，静置2小时，过滤重复此操作三次，即得肝素苄酯湿品。
肝素钠分离工艺研究
原料 碱溶 盐解 提取液 D254吸附 吸咐后 D254树脂 NaCl 液脱附 洗脱液 适量乙醇 沉淀液 过 滤 粗肝素钠 再 制 肝素钠
1. 3. 2 实验方法[5] 称取肠粘膜 ,加入粘膜量的 3. 3 %的氯化钠晶体 ,用氢氧化钠调 pH 值 ,搅拌升温至 55 ℃,维持 1 h 后 ,迅速升温至 90 ℃,保温 10～30 min. 冷却过滤 ,滤液调 pH 值后 ,加入处理好的 D254 树脂 , 在 50 ℃下间歇搅拌吸附数 h ,弃去上清液 ,将吸附后的树脂先水洗 (以水清为度) ,沥干装柱 ,用 8 %NaCl 液 (调 pH 值) 进行洗脱 (注意控制洗脱液的流速及时间) . 洗脱液加适量的乙醇静置 24 h ,后经过滤 、真空干 燥 ,得粗品肝素钠. 粗品用 2 %NaCl 溶液配制成 10 %左右的溶液 ,用 40 %NaOH 溶液调 pH 为 8. 0 ,按溶液量的 4 %加入 H2O2 混匀后放置 10 h ,经 100 目筛过滤 ,用 4. 0 molΠL HCl 调滤液 pH 值为 6. 5 ,加入等量的冷乙醇在低温下 沉淀 24 h ,抽干 ,经丙酮洗涤 ,烘干得肝素钠.
2
9. 2
8. 5
9. 3
69. 4
效果不好 ,只有 pH = 9. 3 时分离效果最佳.
3
9. 2
8. 5
9. 5
66. 2
故 pH 值 9. 3 为最佳 pH 值.
综上所述 ,在肝素钠分离过程中 ,对不同环节的 pH 值的讨论结果为 :提取过程的 pH 为 9. 2 ,吸附过程 pH 为 8. 5 ,洗脱过程的 pH 值为 9. 3 时 ,是最佳的 pH 值条件 ,其分离效果最好. 2. 2 其他工艺条件及结果与讨论 2. 2. 1 正交实验结果 在确定分离过程中各环节最佳 pH 值的前提下 ,对其他条件做了实验探索 ,并结合 正交试验选定 4 因素 、3 个不同水平优选试验 ,见表 4 、表 5. 目标函数均为分离率.
肝素钠的制备
肝素钠的制备【适用对象】生物工程专业【实验学时】14学时一、实验目的1、掌握：用阴离子交换树脂714树脂分离纯化肝素钠2、了解：酶解-树脂法从猪肠黏膜制备肝素钠的基本过程及肝素钠的应用。
二、实验原理肝素广泛存在于哺乳动物肝、肺、肠黏膜中，多与蛋白质结合成复合体存在。
酶解蛋白质可分离肝素，肝素是含硫酸、氨基、醛糖酸的粘多糖。
在PH8-9时，带负电荷，可与阴离子交换剂进行离子交换，进行分离，多糖液在高浓度乙醇中沉淀进行精纯。
三、仪器设备714树脂、层析柱、磁力搅拌器、真空干燥器、真空泵等。
四、相关知识点多课程知识点：多糖化学特点，生活提取方法：蛋白质分解方法，离子交换原理与方法。
本课程知识点综合：多糖制备方法。
五、实验步骤（一）714树脂的预处理1、水浸泡，浮洗市售714树脂200g用蒸馏水500ml浸泡30分钟，搅拌稍静置，将细小颗粒浮洗掉。
2、泡碱4%氢氧化钠处理浸泡1小时，水洗中性，3、泡酸4%盐酸处理浸泡1小时，水洗中性。
得C1-型714树脂（二）酶解与提取称取猪肠黏膜碎片250g于1000ml烧杯中，加3%的氯化钠500ml搅拌，加胰蛋白酶0.5g，用30-40%的氢氧化钠调PH8-9，40℃保温2-3小时提取，过滤得滤液即为提取液。
（三）粗存1、吸附提取液用2%的处理好的714树脂氯型吸附，搅拌吸附2小时。
2、洗涤吸附完毕，树脂先用水洗，然后用1.4M氯化钠洗涤，滤干树脂，除去洗涤液。
3、洗脱洗涤完后树脂用2/3体积的3M氯化钠洗脱2次，收集洗脱液。
4、沉淀洗脱液过滤得11清夜，滤清液用0.9倍的95%乙醇沉淀，得沉淀为肝素钠粗品。
（四）精纯1、溶解肝素钠粗品用1%氯化钠溶解成肝素钠粗品液。
2、脱色肝素钠粗品液加1%-3%过氧化氢搅拌脱色半小时。
3、沉淀脱色后用95%乙醇沉淀。
4、干燥丙酮脱水干燥得肝素钠产品。
5、活性检测延长兔血凝血时间测定。
6、树脂再生水洗，4%氢氧化钠处理，水洗中性，4%盐酸处理，水洗中性。
低温提取肝素钠新工艺低温提取肝素钠新工艺
低温提取肝素钠新工艺低温提取肝素钠新工艺
——（中江李文）
1、酶解：将刮肠衣刮出的肠皮和肠膜倒入铁锅中，一根小肠的粘膜和水总量达13斤，加烧碱调PH值到8.5，加复合酶，每根2-3克，充分搅拌匀后，升温到45度，停止加热，保温3小时。
然后再加适量碱，调PH值到9，升温到60度，用比重计测盐达2.7度（低的话补加盐，高过了加些水降下来），保温1小时后，用90的滤袋过滤。
2、吸附：把过滤液倒入事先做好的吸附池中。
然后，加入已处理好的进口德国专用肝素钠提取树脂吸附6小时，吸附过程中要不断搅拌（吊扇头做搅拌工具）6小时后。
搅拌转速在70—80。
用80-90目袋子过滤出树脂。
用清水冲洗8-10遍。
沥干水（不滴水就行了）。
3、洗脱：将沥干的树脂倒入20度盐水中（盐水量是树脂的一半多一点），升温到45-55度，搅拌3-4小时，用尼龙袋滤出树脂。
第二次洗脱再树脂倒入20度盐水中，升温到45-55度，搅拌3小时，停机静泡待用，盐水可作下一锅的第一洗脱盐水。
4、沉淀：加入酒精充分搅匀，让酒精度达到40度左右，调PH值7，密封沉淀24小时，抽出上层清液，下层为肝素钠，到入另一只胶桶中收集保存。
5脱水干燥：将多次生产的肝素钠集中在一起，皮管抽出上层的酒精液，下层为
肝素钠，然后加入80-90度酒精充分搅匀沉淀10小时，然后用皮管抽出上层的酒精液，下层为肝素钠，把肝素钠倒入的良袋中沥干酒精后，倒入不锈钢盆中进行热传递蒸干待售。
采用本技术提取肝素钠粗品,1300-1600根小肠能提取一亿单位,效价80-100u/mg。
浅析药品依诺肝素钠的生产工艺
浅析药品依诺肝素钠的生产工艺这项生产工艺是本课题大量实验的相关成果，借鉴法国公司依诺肝素钠生产情况，采用一种原材料，经过科学、严谨的生产过程，所研制的依诺肝素钠样品符合欧洲药典标准。
根据实验情况，文章总结了生产过程中需要重视的环节，使这种药品国产化成为可能。
标签：依诺肝素钠；生产；酯化率；成环率；纯化药品依诺肝素钠（enoxaparin sodium）是一种低分子肝素药物，这种药品是治疗预防与脑血栓的最佳药品之一，具有抗血栓作用强、出血危险性小等特征，经临床试验表明，依诺肝素钠能达到抗凝血、抗血栓形成的显著疗效，故此，这种药品具有重要的医疗价值，对生物制药企业而言，大面积生产这种药品，能带来大量的经济效益，同时也能满足我国的医疗需求。
1 依诺肝素钠的生产工艺1.1 依诺肝素钠现行的生产工艺依诺肝素钠主要特征为分子中有一个4-烯吡喃糖醛酸结构（图1）。
目前，医疗上使用的依诺肝素钠都由法国Aventis公司研发，并由这家公司在1993年申请专利。
由于这项专利未涉及生产过程中酯化率、成环率及产物纯化等关键工艺，因此存在一定的缺陷，这就使得法国这家公司运用该专利生产的药物样品时，距离欧洲药典4.0版规定的标准尚有一定的距离。
1.2 这项生产工艺的研究目的这项研究主要是通过对相关反应条件的控制，研制出可以实现流水线生产依诺肝素钠的生产工艺，生产出来的样品，经过多次实验，表明这些样品的溶液颜色符合欧洲药典4.0版要求，其余质量指标均符合欧洲药典5.3版。
1.3 这项工艺所需的仪器与试剂根据生产过程的相关要求，结合前期的研究情况，这项工艺所需的仪器、设备和试剂，有如下几种：1100型高效液相色谱仪、TSK-GEL 凝胶色谱柱及1100型示差检测仪均为Agilent产品；UV-2101PC型紫外检测仪（日本岛津）。
肝素钠（南京健友公司）；苄索氯铵[benz e thoniumchloride，化学名为苄基二甲基[2-[2-[4-（1，1，3，3-四甲基丁基）苯氧基]乙氧基]乙基]氯化铵，Sigma公司]；二氯甲烷、氯苄（上海三爱思试剂有限公司）；H103型非极性大孔聚苯乙烯吸附树脂（南开大学化工厂，柱径3.6cm，柱床体积550ml）；依诺肝素钠标准品（欧洲药典标准品）；其他试剂均为分析纯。
肝素钠的配制方法
肝素钠的配制方法肝素钠是一种常用的抗凝药物，广泛应用于心血管疾病、肺栓塞、深静脉血栓形成等疾病的治疗。
肝素钠的配制主要是通过溶液的方式进行，下面将详细介绍肝素钠的配制方法。
肝素钠的配制方法一般包括以下几个步骤：1. 准备所需材料：肝素钠、注射用无菌水、无菌注射器、无菌注射针、适量的无菌容器等。
确保所有材料都是无菌的，以避免细菌污染。
2. 确定配制浓度：根据临床需要，确定所需的肝素钠浓度。
一般情况下，肝素钠的常用浓度为1000单位/毫升（U/ml）或5000单位/毫升（U/ml）。
3. 选择适当的容器：根据所需肝素钠的浓度和用途，选择适当的容器进行配制。
一般来说，较小的容器适用于较高浓度的肝素钠，较大的容器适用于较低浓度的肝素钠。
4. 准备配制溶液：将所需的无菌水注入到无菌容器中，按照所需浓度计算，添加适量的肝素钠粉末。
注意，在操作过程中要注意无菌操作，避免细菌污染。
5. 溶解肝素钠粉末：用无菌注射器吸取适量的无菌水，缓慢注入到肝素钠粉末中。
注意，要轻轻地摇晃容器，帮助粉末溶解，但不要剧烈晃动，以免气泡产生或溶液溢出。
6. 混匀：将溶解后的肝素钠溶液缓慢转动匀称，使溶液均匀混合。
注意不要搅拌过快，避免产生气泡。
7. 过滤：使用微孔滤器或滤纸将溶液过滤，以去除其中的微生物和杂质。
8. 配制完成：经过上述步骤，配制好的肝素钠溶液即可使用。
将其装入无菌注射器或进一步装入适当的容器中，标明配制日期和浓度。
需要注意的是，配制肝素钠溶液的过程需要在无菌条件下进行，以确保溶液的纯净度和无菌性。
此外，肝素钠是一种非常活性的药物，其配制应遵循一定的操作规程，防止肝素钠的活性受到损害。
总之，肝素钠的配制方法主要是通过溶液的方式进行，配制过程中需要在无菌条件下操作，并注意溶解和混匀的方法，最终得到纯净、无菌的肝素钠溶液。
此外，肝素钠的配制需要严格按照规定的浓度进行，同时标明配制日期和浓度，以保证其在临床使用中的准确性和安全性。
肝素钠
肝素钠（Heparin Sodium ）肝素钠是粘多糖硫酸酯类抗凝血药。
肝素钠是由猪或牛的肠粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属粘多糖类物质。
近年来研究证明肝素钠还有降血脂作用。
性状本品为白色或类白色的粉末；有引湿性。
本品在水中易溶。
比旋度取本品，精密称定，加水溶解并稀释成每1ml中含2.5mg的溶液，照琼脂糖凝胶电泳法试验，供试品和标准品所显斑点的迁移距离之比为0.9～1.1。
药物功能1.治疗各种疾病并发的播散性血管内凝血早期。
2.预防动、静脉血栓和肺栓塞。
3.治疗动、静脉血栓和肺栓塞，缺血性脑卒中，不稳定型心绞痛（减轻症状、预防心肌梗塞），急性心肌梗塞（防止早期再梗塞和梗塞区延展，降低病死率）。
4.人工心肺、腹膜透析或血液透析时作为抗凝血药物。
5.作为溶血栓疗法的维持治疗。
6.用于输血时预防血液凝固及血库保存鲜血等体外抗凝剂。
鉴别检查(1) 取本品与肝素标准品，分别加水制成每1ml 中含2.5mg 的溶液，照电泳法（附录Ⅴ F第三法）试验，供试品和标准品所显斑点的迁移距离之比应为0.9 ～1.1 。
(2) 本品的水溶液显钠盐的鉴别反应（附录Ⅲ）。
酸碱度取本品0.10g ，加水10ml溶解后，依法测定（附录Ⅵ H），pH 值应为5.0 ～7.5 。
溶液的澄清度与颜色取本品0.50g ，加水10ml 溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，照分光光度法（附录Ⅳ A），在640nm 的波长处测定，吸收度不得大于 0.018；如显色，与黄色1 号标准比色液（附录Ⅸ A第一法）比较，不得更深。
吸收度取本品，加水制成每1ml 中含4mg 的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A）测定，在260nm 的波长处，其吸收度不得大于0.20；在280nm 的波长处，其吸收度不得大于0.15。
黏度精密称取本品（按实际测得的单位计算相当于40万单位），加水适量研细，移入干燥并称定重量的10ml量瓶中，研钵用水冲洗并移入量瓶中，将量瓶置25℃水浴内，俟温度平衡后，加25℃水至刻度，摇匀，称定重量，计算供试品溶液的密度。
肝素钠简介——精选推荐
肝素钠简介⼀、概述：肝素钠是从猪⼩肠、⽺肠，动物肺中提取的⼀种具有抗凝⾎、防⽌⾎栓形成的纯天然绿⾊⽣化制品，因其⽆固定分⼦量，⽆法⼈⼯合成，所以该产品在国内，外市场长期供不应求，随着环境的变化，⽣化技术的快速发展，⼈类对她的需求量⽇趋增加，⽬前，除国内⼀些药⼚⼤量需求外，还有百余家收购单位竟相收购组织出⼝，所以从事该项加⼯是⼀项真正投资少、利润⾼、前景⼴阔的稳妥致富好项⽬，我单位技术⼈员在长期专业⽣产与研究的基础上，改进发明了“第⼆代⽣物解析分离法”提取⼯艺，⽣产中⽆废渣、⽆异味、⽆污染，肝素钠成份被全部析出后提出，产量⽐“盐解、酶解、沉淀(不⽤树脂)、递吸、低温、柱吸”等传统⼯艺提⾼⼀倍（只有掌握了最先进的⽣产技术，才能垄断当地资源，获取最⼤利润）。
由我单位发明的该项技术已获国家专利授权（专利号：200610068741.9、200720019296.7),并荣获国家科学技术推⼴许可证书(新科字[2006]21号), 同时被国家中轻产品质量保障中⼼评为“质量、信誉双保障技术重点推⼴单位”（证书号：B050082215）,⼭东省科技建设办授予星⽕科技带头致富单位。
朝阳⽣化从⼗年前的规模⽣产、收徒传艺，发展到如今学员遍布⼤江南北，荣获国家两级政府扶持的专业科技推⼴机构，我们⽤实实在在的成绩在全国同⾏中打造了⾃⼰的第⼀强势品牌。
⼆、⽣产⼯具：（1）⽊案⼦⼀张；（2）铁锅⼀⼝；（3）塑料桶四只；（4）电风扇头⼀只。
三、⽣产原料：（1）猪⼩肠、⽺肠、动物肺；（2）⾷盐；（3）⼏种普通易购化⼯原料。
四、⽣产⼈员、场地：（1）普通住房⼀间，1-2⼈即可⽣产；（2）规模视原料多少可⼤可⼩。
五、经济效益：加⼯⼀根猪⼩肠（肝素钠、肠⾐）总创值26元，若每根⼩肠18元收购，除去加⼯中所需化⼯原料、⼈⼯费总计为0.5元,即每根猪⼩肠获纯利:26元-18元-0.5元=7.5元。
加⼯⼀根⼭⽺肠（肝素钠、肠⾐）总创值10元，若每根⽺肠6元收购，除去加⼯中所需化⼯原料、⼈⼯费总计0.5元,即每条⼭⽺肠可获纯利:10元-6元-0.5元=3.5元,(绵⽺肠因长度⼤,加⼯利润则更⾼)。