急性肾功能衰竭动物模型的复制
2010.12.4泌尿系统疾病动物模型
抗Thy1肾炎
Thy-
造模机制
2
Thy1是鼠类胸腺细胞表面糖蛋白，也存在于
大鼠肾小球系膜细胞表面。利用大鼠胸腺细胞作抗
原免疫家兔，制备的兔抗大鼠Thy1抗血清（ATS）
可直接与系膜细胞表面抗原结合，固定补体形成膜
攻击复合物，使细胞溶解，继而引起残存的系膜细
胞增生，制备系膜增生性肾小球肾炎。
44
造模机制
抗Thy1肾炎
大鼠肾小球系膜细胞表面 与
大鼠胸腺细胞表面
具有相同的抗原
(糖蛋白)
大鼠胸 腺细胞
新西兰家兔，
收集家兔血清
大鼠
45
实验动物
雄性成年新西兰家兔； 体重150g左右雄性SD大鼠。
抗Thy1肾炎
46
抗Thy1肾炎
操作步骤
1. 制备大鼠胸腺细胞悬液 2. 兔抗大鼠Thy1.1抗血清（ATS）制备
第3d系膜细胞开始增生； 至第7d增生明显； 第4、5周系膜细胞增生的同时伴有系膜基
质增多，部分毛细血管襻呈分叶状。
50
模型特点
抗Thy1肾炎
1. 本模型与人类系膜增生性肾小球肾炎相似。
2. 单次注射ATS后肾脏病变常为可逆性的，反 复注射后出现明显肾小球硬化和慢性肾功 能衰竭。
51
系膜增生性肾小球肾炎 左：正常； 右：系膜细胞和基质增生， 电子致密物（D）沉积。
65
嘌呤霉素致肾病模型
[方法]-2 一次注射：
用体重280~300g雄性大鼠，静脉或腹 腔注射嘌呤霉素，剂量为130~150mg/kg体 重。10d左右出现蛋白尿。
66
嘌呤霉素致肾病模型
[方法]-3 一次注射：
用体重150~200g雄性SD大鼠，麻醉下行左侧颈 静脉插管，缓慢注射嘌呤霉素生理盐水溶液，剂量 为80mg/kg体重，5min内注完。蛋白尿于注射后3~5 天开始升高，9~11天达高峰，约14天开始下降，至 28天恢复正常。
壳寡糖对氯化汞诱导的兔急性肾功能衰竭的保护作用
少。本实验拟通过观察壳寡糖对 Ｈ Ｃ ｇ１ 诱导 的兔急性
肾功 能衰竭 是 否具 有 保 护 作 用 ， 初 步 探 讨 其 作 用 机 并 制 ， 临床 寻找便 宜 、 效 的治疗 药物 提供 实验 依 据 。 为 有
１ 材 料与 方法
高， 患者难 以承受； 且仪器设备 昂贵 ， 技术水平要求高，
苯胺 （ Ａ 显色 剂 和免 疫 组化 链 霉 素合 素一 Ｄ Ｂ） 生物 素一 过
四川医学 ２ １ 年 ９ ０２ 月第 ３ 卷 （ ９ ） ＳｃｕｎＭ ｄ ａ Ｊ ｕ ａ ，０２ Ｉ１ ３ Ｎ ． ３ 第 期 ｉ ａ ｅｉ ｌ ｏｒ ｌ １ ，ｏ ３ ， ｏ９ ｈ ｃ ｎ ２ ／．
・ｌ ３ ・ ５ ｌ
ｍｏ ｌ ． Ｉ ｈ Ｓ ｇ ｏ ｐ， ｈ ｅ ｕ ｌｖ ｌ ｆＢＵ ｎ ｓｌ ｗ ｒｓｇ ｉ ｃ ｎｌ ，ｈ ｅ ｅｓｏ Ｄ ｃ ｎｅ ｔ ｅ ｅ ｌｗｅ ｎ ＯＤ ｄ ｅ ｎ ｔ ｅ ＣＯ ｒ ｕ Ｔ ｅ ｓ ｒ ｍ ｅｓ ｏ Ｎ ａ ｄ Ｃｒ ｅ ｗａ ｏ ｅ ｉｎ ｆ ａ ｔ ｔ ｅ ｌｖ ｌ ｆ ｉ ｙ Ｍ Ａ ｏ ｔ ｎ ｒ ｏ ｒａ ｄ Ｓ ｗ ａ ｔ ｉ ｅ ｅ ｈ ｇ ｅ ａ ｈ ｓ ｈ Ｆ ｇ ｏ ｐ，Ｗｈ ｔ Ｓｍｏ ｅ， ｏ ａ ｅ ｉ ｃ ｉ ｔ ｗ ｒ ｉｈ ｒｔ ｎ ｔ ｏ ｅ ｉ ｔ ｅ ＡＲ ｒ ｕ ｖｙ ｈ ｎ ａ ’ ｒ ｃ ｍｐ ｒ ｄ ｗ ｔ ＡＲＦ ｇ ｏ ｐ，ｔｅ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆ ｅ ａ ａ ｉｈ ｒ ｈ ｒｕ ｈ ｘ ｒ ｓ ｉｎ ｏ ｎ ｌＭＴ ｗ ｓｈ ｇ ｅ ｒ ｓｇ ｉ ｃ ｎ ｌ ｉ Ｓ ｇ ｏ ｐ Ｃｏ ｃｕ ｉ ｎ Ｔ ｅ ｐ ｅｒ ａｍｅ ｔ ｉ ＯＳ ｃ ｎ ｅ ｃｅ ｔ ｒｔｃ ａ ｂ ｔ ａ ａｎ ｔＨｇ １ ｎ ｕ ｅ ｉｎ ｆ ａ ｔ ｎ ＣＯ ｒ ｕ ． ｉ ｙ ｎ ｌｓ ｏ ｈ ｒ ｔ ｔ ｎ ｔ Ｃ ａ ｆ ｉｎ ｌ ｐ ｏ ｅ ｔ ｂ ｉ ｇ ｉｓ Ｃ ｉｄ ｃ ｄ ＡＲＦ． ｅ ｗ ｈ ｉ ｙ ｒ ｓ ２
桃仁承气汤对急性肾功能衰竭大鼠肾功能及电解质的影响
桃仁承气汤对急性肾功能衰竭大鼠肾功能及电解质的影响朱虹;王灿晖;杨进;张庆宏【期刊名称】《中国中医药科技》【年(卷),期】2006(013)006【摘要】动物：普通级（CL）SD大鼠71只，雌雄各半，体重（221．49±18．345）g，由南京中医药大学动物实验中心提供。
药物及试剂：桃仁承气汤，参照《温病条辨》原方剂量，即大黄18g、芒硝8g（冲服）、桃仁10g、当归10卧赤芍10g、丹皮10g。
攻下组参照《温病条辨》及前人用药经验，即大黄18g、芒硝12g（冲服）。
活血化瘀组参照《温病条辨》剂量，即桃仁10g、赤芍10g、丹皮10g。
以上药材均由南京巾医药大学国医堂提供。
各纽药物水提浓缩成含生药1g/ml口服液．置于250ml盐水瓶中，4℃保存备用。
速尿由常州康普药业有限公司生产，批号：0410028。
【总页数】1页(P415)【作者】朱虹;王灿晖;杨进;张庆宏【作者单位】南京中医药大学,南京,210029;南京中医药大学,南京,210029;南京中医药大学,南京,210029;南京中医药大学,南京,210029【正文语种】中文【中图分类】R2【相关文献】1.桃仁承气汤对大鼠急性肾功能衰竭模型血液流变性及肾指数的影响 [J], 朱虹;王灿晖;杨进;张庆宏2.血液透析的不同模式治疗急性肾功能衰竭患者的有效性及对肾功能、电解质的影响 [J], 林正均;罗昭强;金仙勇3.不同血液透析模式对急性肾功能衰竭患者电解质、肾功能指标的影响 [J], 黄勇进;4.血液透析的不同模式治疗急性肾功能衰竭患者的有效性及对肾功能、电解质的影响 [J], 王欣5.连续性肾脏替代治疗急性肾功能衰竭疗效及对T淋巴细胞炎症因子和血清电解质水平的影响 [J], 韩瑞萍;袁光新;陈慰;苏清;朱梦莉;王智超因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
慢性心衰动物模型的制备及指标评定
慢性心衰动物模型的制备及指标评定慢性心衰是一种心血管疾病，其主要特征是心脏功能逐渐衰竭。
为了深入研究慢性心衰的发生机制及治疗方法，科学家们广泛应用动物模型进行实验研究。
下面将介绍慢性心衰动物模型的制备方法以及常用的指标评定方法。
一、慢性心衰动物模型的制备方法：1.高盐饮食法：将小鼠或大鼠的日常饮食中的盐分含量提高，例如增加食盐的含量。
高盐饮食会引起血压升高，从而导致心脏负荷增加，进而发生心衰。
2.高胆固醇饮食法：给小鼠或大鼠注射或灌胃高胆固醇的食物，例如高脂食品。
高胆固醇饮食会引起血液中胆固醇水平升高，导致动脉粥样硬化，心脏供血不足，最终发生心衰。
3.慢性心肌梗塞法：在小鼠或大鼠的冠状动脉中注射致命的微球或通过手术结扎冠状动脉，造成心肌梗塞，进而诱发心衰。
4.肾脏疾病法：通过手术切除小鼠或大鼠的一个或两个肾脏，或者给予肾脏毒素如丙酮酸来诱发肾脏疾病，进而导致心衰的发生。
二、慢性心衰动物模型的指标评定方法：1.心脏形态学指标：通过心脏组织切片染色法，观察心脏组织的肥大程度和纤维化情况。
常用的染色方法有hematoxylin-eosin (HE)染色和Masson's trichrome 染色，通过显微镜观察心脏细胞形态、胶原纤维沉积情况等。
2.心脏生理学指标：使用心电图（ECG）记录动物的心电活动，评估心脏的电生理状态。
常用的心电图参数包括心率、QRS波群、QT间期等。
超声心动图是另一种评估心脏功能的重要工具，可以测量心腔内径、心肌收缩力等参数，来评估心脏的收缩和舒张功能。
3.血液学指标：采集动物的血液样本，常见的指标包括血红蛋白浓度、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数等。
这些指标可以反映动物的贫血情况、炎症反应以及凝血功能等情况。
4.生物化学指标：测定动物血液中的心肌损伤标志物，如肌钙蛋白、心钙蛋白等。
这些标志物在心肌损伤时释放到血液中，可以反映心肌细胞的损伤程度。
5.心脏基因表达：通过转录组学方法，分析心脏细胞内基因的表达变化。
急性肾损伤模型塑造研究进展
Ｒeview of the process of modeling acute kidney injury
YANG Ting，LIN Zhijian，JIANG Zhuoxi，CHU Mengzhen，ZHANG Bing* ，ZOU Lina
【Abstract】 Establishing a stable and reliable acute kidney injury model is an important means of researching acute kidney disease． Acute kidney injury models have various modeling method，different application scopes and diverse modeling standards． Acute kidney injury models were classified by reviewing the recent related literature and materials to analyze modeling method，pathological mechanisms，applications，modeling characteristics and other aspects． This work was conducted to provide promising references and considerable guidance for research and practice in treating acute kidney injuries．
犬肾功能衰竭的病因分析与防治措施
阻及 时解 除 ， 功 能 可 恢 复 ； 长 期 未 解 除 ， 展 成 器 质 性 肾 肾 如 发
功 能 衰竭 。常 见 的 原 因有 ： 尿 路 结 石 、 腔 肿 瘤 、 列 腺 肿 双 盆 前
瘤等 。
１ ２ 慢 性 肾 功 能 衰 竭 ．
慢性 。 能 衰 竭 是 指 各 种 疾 病 造 成 肾单 位 呈 慢 性 、 行 肾功 进 性破坏 ， 承担 肾功 能 的 肾 单 位 绝 对 数 减 少 ， 能 充 分 排 出 代 不 谢产物 以维持 内环境稳定 ， 致代谢 产物潴 留， 、 导 水 电解 质 、
被 发 现 。 而 一旦 出 现 临 床 症 状 ，尿 蛋 白持 续 阳性 ，肾 脏 病 变
已不 可 逆 转 “ 。特 别 是 肾 脏 出 现 器 质 性 病 变 时 尿 液 的 量 和
忽 视 。这 些 药 物 的毒 副 作 用 主 要 表 现 在 以 下 ４个 方 面 ： １ （） 引起全身性过敏反 应 ， 发 过敏性 血 管炎并 累及 肾小 球 ， 伴 或 者 引 起 过 敏 性 休 克 导 致 肾 脏 缺 血 、 氧 ， 而 弓 起 肾 小 管 上 缺 从 ｌ
尿 期 应 严 格 控 制 输 液 量 ， 理 高 血 钾 症 ， 正 酸 中 毒 ， 制 氮 处 纠 控 质 血 症 ； 尿 期 的 后 期 注 意 补 充 水 、 、 和 维 生 素 ， 止 多 钠 钾 防 感染 。
排 泄 障 碍 导 致 血 液 中 肌 酐 和 尿 酸 增 多 ， 中 以 尿 素 增 多 为 其 主 。临 床 上 用 尿 素 氮 作 为判 断 氮 质 血 症 的 指 标 ， 内 生 肌 酐 用
坏死 、 肾实 质 受 损 所 致 。 肾性 急 性 肾功 能 衰 竭 又 称 为 器 质 性
尿毒症脑病大鼠脑组织多巴胺、5-羟色胺含量变化及发病机制的探讨
脑病组多 巴胺含量（ ．５ ．９／／ ）５羟色胺含 量 （ ．４±００ ｇ ｇ 低 于正 常组 ， ０６ ±００ ￣ ｇ 、－ ｇ ０２ ．９ｅ ／ ） 差别有 统计 学意 义 （ Ｐ＜０ ０ ） ．５ ｏ
ｆｉ ｒ Ａ ｃ ｒｉ ｇ ｔ ｅｒｃ ｎｃ ｌｍａ ｉ ｓ ｔ ｎ， ｅ ｍｏ ｅ ｒｕ ｓ ｄ ｒ ｄ ｄ ｉｔ ｒｍｉ ￣ ｐ ａ ｄ ｕ ｅ ａ ｅ ｃ ｐ ａｏ ａｈ ｒｕ ａ ｕｅ． ｃ ｏ ｄｎ ｔ ｉ ｈ ｉａ ｎｆ ｔｉ ｌ ｏｈ ｅ ａ ｏ ｔ ｄ ｌｇｏ ｐ ｗａ ｅ ｉ ｅ ｏ ｕ ｅ ａ ｇａ ｎ ｒｍｉ ｎ ｅ ｈ ｌｐ ｔ ｙ ｇｏ ｐ． ｈ ｎ ＇ ｎ
３ ． ±６ ．７ｐ ｏ １明显高于正 常对照组 （７０ ４ ０ ０ ５ ６ １ ｍ ｌ ） ／ ９ ．０±２ ． ｎｌ１， ７ ４ ｗ ｏ ） 差别有统计 学意 义（ ４ ／ Ｐ＜００ ） ．５ 。尿毒症脑 病组肌 酐值明显高于尿毒症组 ， 差别有统计学意义（ Ｐ＜００ ）尿 毒症组 大鼠脑组织 中多巴胺 含量 （ ．４ ．Ｏｖ／ ）５羟 色 ．５ ； ０ ７ ±０ １ ｇ ｇ 、一
鼠急性肾功能衰竭动物模 型。急性 。 肾功能衰竭无 神经 系统 并发症 时脑组 织 中多 巴胺 、一 ５羟色胺一 度无变化 ， 发神 浓 并 经系统症状 时含量降低 ， 因此 多巴胺 、一 ５羟色胺 可能参与 了尿毒症脑 病 的发 生。急性 肾功能衰竭 时血肌酐 值越高 ， 越 容易并发神经系统症状。急性。 肾功能衰竭 并发脑病 时 ， 并非血肌酐值越高 ， 脑组织 中多巴胺 、． 色胺 浓度越低 ， ５羟 二者
超声造影评价兔急性肾功能衰竭肾皮质血流灌注
方 差 分 析 。 以 Ｐ＜ ０ ０ 为 差 异 有 统 计 学 意 义 。 ．５
２ 结 果
２ １ 造 模 前 、 各 时 间 点 血 生 化 改 变 情 况 ： 肉 注 射 甘 油 ． 后 肌
Ｌ ３ Ｅ探 头 。分 别 于 注 射 甘 油 前 、 射 甘 油 后 ０ ５ ６ ２ 、 Ａ５ ２ 注 ． 、 、 ４ ４ 、２ｈ共 ６个 时 间 点 行 超 声 造 影 。 肌 肉注 射 咪 达 唑 仑 （ ８ ７ 剂
量 ０ １ ｋ ）待 动 物 安 静 后 ， 探 头 固定 于 左 肾 长 轴 最 ． ５ｍＩ ｇ ， ／ 将 大 切 面 ， 动超 声 造 影 ， 耳 缘 静 脉 团 注 造 影 剂声 诺 维 （ 量 启 经 剂
细 观察 肾脏 灌 注 情 况 ， 集 图 像 并 保存 以供 分 析 。各 种 造 影 采
条 件在 所 有 动 物 造 影 过 程 中 均 保 持 不 变 。 每 次 造 影 开 始 前 经 耳 中 央动 脉 抽 血 测 量 Ｓ ｒ Ｂ ｃ 、 ＵＮ 水 平 ， 影 后 随 机 取 １只 造 兔 经 静 脉注 入 １ ０ ｍＩ 空气 处 死 ， 肾脏 送 病 理 检 查 。 取
度、 曲线 下 面积 有 回 升 趋 势 ， 于 ２ ， 异 有 统 计 学 意 义 高 ４ｈ差
（ Ｐ＜ ０ ０ ． １或 Ｐ＜ ０ ０ ） 自 ２ ． ５ ； ４ｈ曲线 上升 斜 率 减 小 、 峰 达
表 ２ 肾 皮 质 时 间 强 度 一 曲线 各 参 数 比较 （ ± ）
时间延迟 ， 造模 前 比较 差 异有 统 计 学 意 义 （ ＜００ 与 Ｐ ． １或
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机能实验学实验设计大纲实验名称：急性肾功能衰竭动物模型的复制课题来源：自选
设计班级：2004级临床本科乙班
设计人员：庞路人杜泽东朱慕风黄波梁军设计日期：2006年9月30日
指导老师：张晓荣成
成都医学院实验技术教研室
2006年制
表1-2
夹闭后（1-10min ） 心率 血压 呼吸
B1 B2 B10
表1-3
夹闭后（10-30） 心率 血压 呼吸 B1 B2 … B10
表1-4
夹闭后（30-60min ） 心率 血压 呼吸 B1 B2 … B10
（5）统计数据分析：本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数±标准差（±a）表示，A,B 两组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，组间两比较行q 检验.
（1）平均数公式：x=x1+x2+…+xn/n= Σxi/n x=均数 Σ= 总和n =变量值的个数
（标准差）：a=sqr(Σ(xi-u)^2/n) a:总体标准差 xi:观测数的各个变量u:总体均数
四组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析，如各组肺系数总体均值的比较，其方法如下： （1）建立检验假设 H0：1μ=2μ(A.B 两组间的各项生理指标相同）。
H1：1μ、2μ、不等或不全相等，α＝0.05。
（2）计算统计量
夹闭前心率血压呼吸
A1
A2
…
A10
夹闭后（10-30min）心率血压呼吸
A1
A2
…
A10
夹闭后（30-60min）心率血压呼吸
A1
A2
…
A10
（5）统计数据分析
本实验采用计量资料来测定各种指标的数值，所有数据均采用平均数±标准差（±s）表示，A.B间实验数据比较行完全随机单因素方差分析（1）建立检验假设
μ=2μ（各组肺系数总体均值相等）。
H0：1
μ、2μ、不等或不全相等，α＝0.05
H1：1
（2）计算统计量
利用统计学专业软件SPSS做One-way ANOV A 。
( 3 ) 查F值表，确定P值，得出结论。
4、实验方法设计
家兔
实验技术方法
(1).随机抽样：随机20只正常的家兔，并分别编号，再随机平分成2组，
(2)．实验步骤：
（1）取兔、称重、麻醉、固定、备皮。
取家兔两只，编号，用婴儿称体重后按1ml/kg从耳缘静脉注入3%戊巴比妥钠溶液，五点法固定于兔台上，剪去颈部和腹部被毛。
（2）手术：1. 颈正中切口，分离出气管，在甲状软骨下方第3～4个环状软骨上做一个倒“T”切口，插入“Y”字形气管插管，用线固定，接上张力换能器，设定输入信号为“张力”。
2. 动脉插管：分离一侧颈总动脉，穿双线备用，结扎远心端，近心端用动脉夹夹闭，靠近结扎线处用眼科剪剪一“V”形切口，将连接好的动脉插管打满肝素，插入血管内，结扎固定，将压力换能器连上，放开动脉夹，设定输入信号为“压力”。
3. 将A兔沿腹白线剖开，找到两侧肾动脉，并用动脉夹夹闭，造成A兔急性肾功能衰竭，B兔不做此手术。
观察A、B两兔呼吸、心率、血压，并做记录。
4.用导尿管到尿并做尿钠：尿0.1ml+无水乙醇1.9ml，振荡后置10分钟，2500r/min离心5min，取上清夜备用，按表1-4加好试剂后，混匀，于520nm处比色。
计算：Na+（mmol/l）=OD测/OD标*6.5mg*20 肾衰指数=（尿钠mmol/l）/（尿肌酐/血肌酐）＞2。
5技术路线：
夹闭肾动脉→肾血流量减少→肾小球毛细血管压降低→肾小球有效滤过压降低→肾小球滤过压↓→缺血时间过长→急性肾功能衰竭
6可行行分析：
⑴本实验动物来源方便。
⑵急性肾功能衰竭动物的复制流程易于操作。
⑶实验
器材和药品普遍，实验室能提供充足的条件。
⑷所需资金不多，防止了实验过程中
资金不足足带来的问题。
7．预期结果：
术后的兔子血压升高，呼吸加深加快，心率加快，血钾和血钠含量升高，尿少
且比重降低，肌酐的浓度低，各项症状明显易于测定。
8、时间安排，见表1-5
表1-5 时间安排表
时间工作安排
1-10min 麻醉、固定、备皮 10-30min 气管、动脉插管
30-50min 观察各项正常生理指标
50-70min 复制肾衰模型
70-130min 观察各项生理指标的变化
130-160min 尿钠测定
180-190min 完成实验、整理实验室
三、完成时间的条件：实验器械，实验动物，实验药品。
实验设备：
注射器（若干 5ml）、试管（若干）、水浴锅、分光光度计、计算机、压力感受器、张力感受器、塑料管、动脉夹、哺乳动物手术器械一套、玻片
实验动物：
家兔（20只）
实验药品：
3%戊巴比妥钠溶液、、蒸馏水、碱性苦味酸、12.5%NaOH、Na+标准液、
附表
表1-4 尿钠测定的操作表
成分标准管测定管
空白管
尿上清澈— 0.2
—
Na+标准液 0.2 —
—
蒸馏水——
0.2
2%焦锑酸钾 5.0 5.0
5.0
教研室评审意见。