实验十二反相高效液相色谱法测定尼泊金酯
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11 实验六 反相高效液相色谱内标定量法测定尼泊金酯
预习提示
1. 液相色谱仪的基本结构及操作技术
2. 什么是反相液相色谱，反相高效液相色谱的分离特点是什么。
3. 相对校正因子的意义及测定方法
4. 色谱分析内标定量法的原理及操作要点。
一、目的要求
1. 熟悉高效液相色谱仪器基本结构及操作技术；
2. 掌握HPLC保留值定性方法和内标定量方法。（了解定制报告编辑方法）。
二、基本原理
1. 高效液相色谱是以液体为流动相的色谱。其分离原理是利用不同物质在由固定相和流动相构成的体系中具有不同的分配系数，当两相作相对运动时，这些物质随流动相一起运动，并在两相间进行反复多次的分配，从而使各物质达到分离。
正相色谱体系是固定相的极性大于流动相的极性，反之亦然。
尼泊金酯（对羟基苯甲酸酯）混合物中含有尼泊金甲、乙、丙、丁酯，均属于强极性化合物，可用反相HPLC进行分析，选用非极性的C18烷基键合固定相，甲醇水溶液作流动相。
2. 色谱保留值法定性的依据在一定色谱条件下，每一种物质都有一个确定的保留值和它相对应。
3. 色谱定量依据 Amii Afmiii' 绝对校正因子 Amfiii'
不易测定
（相对）校正因子 AAmmAmAmfffississiisii•''
4. 对于试样中某一种或几种组分定量测定时可用内标定量法。
内标法要领：定量试样m试样中加入定量内标物ms，LC分析后进行相对定量计算。
内标法定量计算公式：
)/(%mlugAAffVmcisiisisisi••
内标物要求：试样中不存在的纯物质；加入量、理化性质、峰位置均与被测组分接近。
三、仪器、试剂 百度文库 - 让每个人平等地提升自我
22 1. 恒流泵 Series Ⅲ 2. 500型紫外检测器 3. 高压六通进样阀（20ul）
4. 分析之星色谱数据工作站 5. 超声波发生器、砂芯过滤器 6. 进样器 1ml
7. 10ug/ml尼泊金乙酯（对羟基苯甲酸乙酯）甲醇溶液，20ug/ml尼泊金丁酯甲醇溶液，100ug/ml苯甲酸甲酯甲醇溶液，备测试样。
四、实验条件
1. 色谱柱：250mm× 固定相：C18烷基键合相 5um。
2. 流动相：85%-90%甲醇水溶液，1ml/min。
3. 检测器：紫外光度监测器，254nm，灵敏度
4. 进样量 20ul
五、实验步骤
1. 将过滤配好的流动相装入试剂瓶中，开盖置于超声波发生器脱气15min。
2. 按仪器操作规程打开数据工作站，据给定仪器条件启动HPLC至基线平直。
3. 用甲醇清洗进样注射器、进样阀（10ml容量瓶取甲醇适量，用干净的1ml注射器操作）。
4. 定性实验 取干净10ml 容量瓶4只，分别取流动相和所给试剂尼泊金乙酯、尼泊金丁酯、苯甲酸甲酯甲醇溶液和备测试样。
用干净的1ml注射器取样～，排气泡，加过滤头，注入进样阀（LOAD位），接着按仪器操作规程“10”进样操作。待试样出峰完毕，积分后记录被测组分保留时间。
5. 校正因子测定 取一干净10ml容量瓶，用吸量管加入10ug/ml尼泊金乙酯，100ug/ml苯甲酸甲酯，充分混匀，按上述方法注入色谱仪，待试样出峰完毕，积分后记录各相应组分峰面积A，重复进样三次以上便于分别取平均值。
6. 试样中尼泊金乙酯和尼泊金丁酯定量测定 取一干净10ml容量瓶，用吸量管加入试样，加入内标标准溶液（100ug/ml苯甲酸甲酯甲醇溶液），充分混匀，按上述方法注入色谱仪，待试样出峰完毕，积分后记录尼泊金乙酯和苯甲酸甲酯各相应组分峰面积A，重复进样三次以上便于分别取平均值。
7. 选择典型试样加内标的色谱图保存，编制分析报告，打印色谱图。
8. 实验完毕按仪器操作规程停机，做好后处理工作。
六、数据处理
1. 根据实验记录数据计算尼泊金乙酯对苯甲酸甲酯的校正因子fwi
AAmmfissiwi• 百度文库 - 让每个人平等地提升自我
33 3. 根据实验记录数据计算试样中尼泊金乙酯的含量（mg/L）
)/(%LmgAAffVmcisiisisisi••
4. 将所得色谱图附于“实验结果处理”后，并对应色谱峰标出相应物质的名称。
七、思考题
1.液相色谱仪的主要部件有哪些？试画出HPLC流程方框图。
2.什么是反相液相色谱？按极性，化合物流出顺序如何？
3.液相色谱操作应注意哪些问题？
实验数据记录表（参考）
1. 定性测定记录表
标样保留值测定记录表
物质名称 tRi/min
1 2 3 平均
尼泊金乙酯
苯甲酸甲酯
2. 校正因子测定记录表
峰序号
进样次序 1 2
tRi/min Ai /（×10n） tRi/min Ai /（×10n）
1
2
3
平均
物质名称 尼泊金乙酯 苯甲酸甲酯
3. 定量测定记录表
4. 试样保留值测定记录表
峰序号 tRi/min
物质名称
1 2 3 平均
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44 2
3
4
峰序号
进样次序 尼泊金乙酯 苯甲酸甲酯
tRi/min Ai /（×10n） tRi/min Ai /（×10n）
1
2
3
平均
5. 实验结论报告表
尼泊金乙酯 尼泊金丁酯 苯甲酸甲酯
tRi/min ci /（mg/L） tRi/min ci /（mg/L） tRi/min ci /（mg/L）
高效液相色谱法同时检测祛痘类化妆品中12种禁限用物质
高效液相色谱法同时检测祛痘类化妆品中12种禁限用物质
雷毅;何嘉雯;黄艳婷;黄文静
【摘 要】建立了反相高效液相色谱同时测定祛痘类化妆品中12种禁限用物质(依诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、林可霉素、克林霉素、克林霉素磷酸酯、氯霉素、氯霉素二醇物、磺胺甲(噁)唑、甲硝唑、替硝唑、水杨酸)的方法.样品经甲醇与0.1
mol/L盐酸混合溶液(体积比1∶1)超声提取,采用ACE C18(250 mm
×4.6mm,5μm)色谱柱分离,以乙腈-0.025 mol/L磷酸三乙胺溶液二元流动相梯度洗脱,流速1.5 mL/min,柱温40℃,采用二极管阵列检测器双波长(210、277 n m)检测,外标法定量.林可霉素、克林霉素、克林霉素磷酸酯3种成分的线性范围为25～1 000 mg/L,其他9种成分的线性范围为5～200 mg/L,相关系数均大于0.997.12种禁限用物质的方法检出限为5～50μg/g,平均回收率为88％～115％,相对标准偏差为0.4％～3.0％.该方法操作简便、准确、灵敏,适用于祛痘类化妆品中12种禁限用物质的测定.%A method for the simultaneous determination
of 12 banned and restricted substances, including enoxacin, ciprofloxacin,
ofloxacin, lincomycin, clindamycin, clindamycin phosphate,
chloramphenicol, p-nitropheny-2-amino-1.3-propanediol,
sulfamethoxazole, metronidazole, tin-dazole and salicylic acid was
developed by reversed-phase high performance liquid chromatography
油浸食品中防腐剂反相高效液相色谱法测定(一)
油浸食品中防腐剂反相高效液相色谱法测定(一)
【关键词】防腐剂检测
对于油浸食品中的防腐剂检测，国标GB/T500929-2003中没有明确规定处理与检验方法，实验室一般采用酸性乙醚萃取、浓缩，气相色谱法检测。该方法由于填充柱的吸附及柱效能差别较大，使标准系列线性差，最低检出限较高，对于含量低或稀释倍数大的样品无法检测。本方法采用乙醇氢氧化钠混合液萃取，反相液相色谱紫外检测器检测，有效消除萃取中乳化现象，提高分析灵敏性和准确性。
1仪器与试剂
11主要仪器L7000型高效液相色谱系统(日本日立HITACHI公司)，配L7420型UVVis检测器，D7000色谱数据处理系统；802型离心机(上海手术器械厂)；XK96B型快速混合器(姜堰新康医疗器械有限公司)。
12试剂苯甲酸和山梨酸标准储备液：100mg/ml(国家标准物质研究中心)；001mol/L氢氧化钠乙醇溶液;008mol/L氯化氢溶液；002mol/L乙酸铵溶液；石油醚乙醚混合液：石油醚(AR)+乙醚(AR)=3+1；甲醇：色谱纯。
13仪器条件色谱柱：KromasilC18(250×46mm，ID5μm)；流动相：甲醇+002mol/L乙酸铵溶液=5+95；流速：10ml/mim；进样量：5μl;柱温：室温；检测波长：230nm。
14方法(1)样品处理:准确称取混匀后的样品100g于10ml的具塞离心管中，加入50ml的石油醚乙醚混合液,用快速混合器使油脂溶解。加入001mol/L氢氧化钠乙醇溶液40ml，上下振荡20次，静置15min后，在离心机中3500r/min离心5min，取下层溶液于10ml容量瓶中，按上述方法再萃取1次，合并2次萃取液，用008mol/L氯化氢溶液调节pH≈7，用双蒸水定容至10ml，混匀，取适量定容液，用045μm滤膜过滤，注入具塞小试管中，待测。同法做试剂空白。(2)标准曲线的绘制及样品测定：分别取苯甲酸和山梨酸标准储备液配制出00，100，200，500，1000，1500，2000μg/ml标准工作曲线浓度系列,在上述仪器条件下，用5μl定量环取标准及样品溶液进行液相色谱分析。以标准系列质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，样品测定结果由其峰面积经工作曲线计算得出。
反相高效液相色谱法测定食品中防腐剂和甜味剂探析
88 食品安全导刊 2021年9月分析检测反相高效液相色谱法测定食品中防腐剂和 甜味剂探析王棋棋（中纺检测（福建）有限公司，福建泉州 362200）摘 要：为了解反相高效液相色谱法在食品中防腐剂和甜味剂测定中的应用情况，本文采用C18色谱柱，建立了反相高效液相色谱法测定食品中防腐剂和甜味剂的方法体系。检测器在210 nm波长、230 nm波长位置分别检测出糖精钠与阿斯巴甜、山梨酸与安赛蜜，脱氢乙酸色谱峰出现在293 nm检测波长条件下。结果表明，在利用反相高效液相色谱法测定食品中防腐剂和甜味剂时，各组分质量浓度处于1.0～100.0 μg/mL可达到最佳线性关系，且精密度与准确度较高。关键词：反相高效液相色谱法；食品；防腐剂；甜味剂食品中防腐剂和甜味剂的存在，对食品品质、口味有直接的影响，也是食品安全管理至关重要的内容。测定食品中防腐剂和甜味剂的含量及类型，是食品安全管理的依据。反相高效液相色谱法测定食品中防腐剂和甜味剂，该方法具有准确性好、样品前处理简单、精密度高的优良特点。根据食品中防腐剂和甜味剂的测定要求，探究反相高效液相色谱法的应用非常必要。1 材料与方法1.1 试剂与设备在测定前，准备食品添加剂标准品，主要为糖精钠、阿斯巴甜、山梨酸、安赛蜜等。同时准备92 g/L亚铁氰化钾溶液、183 g/L乙酸锌溶液、0.02 mol/L的乙酸铵溶液[1]。日本岛津带He脱气装置的高效液相色谱仪；国产电动离心沉淀剂；带二极管阵列的检测器；感量为0.001 g的电子分析天平；转速大于8 000 r/min的离心机；涡旋振荡器；超声波清洗仪[2]。1.2 实验方法1.2.1 测定条件流动相溶剂A为0.02 mol乙酸铵溶液，由超声后二水乙酸220 g与500 mL水加入30.0 mL冰乙酸后定容至 1 000 mL配制；流动相溶剂B为甲醇，色谱纯[3]。梯度洗脱程序为：5.0%甲醇，1.0～0.8 mL/min，0～5 min；设定初始浓度为5.0%溶剂B和95.0%溶剂B，糖精钠、脱氢乙酸出峰时间相同，色谱峰单独积分计算难度大，可以调整为10%溶剂B+90%溶剂A，流速为0.8～1.0 mL/min，洗脱时间为5～20 min。由于阿斯巴甜在5.0%溶剂B和95.0%溶剂B洗脱时，出峰时间延后，影响了分析效率，在 20.0 min后，可以调整流动相比例为38%溶剂B+62%溶剂A，流动速度为1.0 mL/min，洗脱时间为20～40 min。山梨酸在洗脱比例为5.0%溶剂B和95.0%溶剂B，且流动速度为 1.0 mL/min时，与样品中其他干扰杂峰分离，可以在洗脱时调整洗脱时间范围为40～48 min。设定在230 nm波长下进行安赛蜜、山梨酸测定，在210nm波长下进行阿斯巴甜、糖精钠测定，在293 nm波长下进行脱氢乙酸测定。同时设定检测器柱温为37.0～ 39.0 ℃，进样量为10 μL，灵敏度为0.08 aufs[4]。1.2.2 样品处理对于酱油等液体样品，直接取样并加水稀释20倍，以50%氨水调节酸碱值至中性偏弱碱性。调节酸碱值后进行超速离心，取上清液备用。含二氧化碳、酒精的软饮料，需要取10.00 g加热后去除二氧化碳、酒精，放入50 mL比色管内用水定容并经滤膜过滤，滤膜孔径为0.45 μm。对于酱菜、果脯等固体样品，切碎后混合均匀加入8.0 mL 水，超声30 min时后用水定容到10.0 mL，定容后经0.45 μm滤膜过滤处理。饼干等基质成分复杂的样品，需要在利用石油醚脱脂处理的基础上，粉碎并均匀混合，加入等量的2份水以及1份200 g/L硫酸锌溶液和20.0 g/L氢氧化钠溶液，超声0.5 h后，用水定容到25.0 mL经0.45 μm滤膜过滤待测定[5]。酸奶等固液混合样，需将其混合均匀后加入100 g/L硫酸铵溶液以及等量的两份水，超声30 min后，用水定容到10.0 mL经0.45 μm滤膜过滤处理备用。2 结果与分析2.1 定量测定结果依据前述测定条件，对前期处理完毕的样品进行测定，得出结果为：可乐含安赛蜜12.5 mg/kg；酸奶中糖精钠含量为155.2 mg/kg，山梨酸含量为112.3 mg/kg，阿斯巴甜含量为936.5 mg/kg、安赛蜜含量为35.1 mg/kg；饼干含阿斯巴甜61.3 mg/kg；酱菜含安赛蜜32.6 mg/kg；果脯含阿斯巴甜32.6 mg/kg，安赛蜜含量为469.5 mg/kg；酱油含脱氢乙酸123.5 mg/kg。重复测定6次后，得出测定结果的相对标准偏差在3.5%～8.5%，准确度较高。2.2 线性范围与相关系数对反相高效液相色谱法进行方法学考察验证，其中山梨酸标准线性范围在2.0～20.0 μg/mL时达到最佳线性关系，相关系数为0.999 85，糖精钠标准线性范围为0.0～ 100.0 μg/mL，相关系数为0.999 98，脱氢乙酸在1.0～ （下转第91页）Copyright©博看网 . All Rights Reserved.Sep. 2021 CHINA FOOD SAFETY 91分析检测
化妆品中几种防腐剂的分析方法
化妆品中几种防腐剂的分析方法【综述】戴京晶,刘奋,梁伟,司徒潮满,张勇,丘汾,李可
摘要 目的 了解深圳市售化妆品中使用防腐剂的情况。方法 采用高效液相色谱法(HPLC)、火焰光度检测器-气相色
谱法(FPD2GC)、分光光度法分析化妆品中9种防腐剂。结果 化妆品中最常用的防腐剂是对羟基苯甲酸酯类;FPD2GC法
测定卡松的灵敏度高于HPLC法;FID2GC法测定丁氨基甲酸232碘化222丙炔基酯(IBPC)的最低检出浓度为1.8μg/g;甲醛
检出率37%。结论 FPD2GC法测定卡松灵敏度较高。甲醛检出率较高,可能与某些防腐剂释放甲醛有关。
关键词 化妆品;防腐剂;HPLC法;GC法
中国图书资料分类号:R115 文献标识码:A 文章编号:1004-1257(2007)20-1861-02
Subject AnalysisofthePreservativesinCosmetics
Authors DAIJing2jing,LIUFen,LIANGWei,etal.((FutianCenterforDiseasePreventionandControl,Shenzhen,518040China)
Abstract [Objective]Tograsptheusingsituationofpreservativesincosmetic.[Methods]HPLC,GCandspectrophotometry
wereappliedtoanalyze9sortsofpreservativesincosmetics.[Results]Themostfrequentlyusedpreservativeincosmeticswaspara2
bers;thesensitivityofFPDandGCwashigherthanthatofHPLC;thedetectionrateofformaldehydewas37%.[Conclusion]FPD
浅谈酱油醋中对羟基苯甲酸酯类的测定
浅谈酱油醋中对羟基苯甲酸酯类的测定
摘要：对羟基苯甲酸酯作为防腐剂，被广泛应用于酱油、醋等食品中。随着新的技术水平的推进，对于它的检测，还有优化的空间。
关键词：对羟基苯甲酸酯类； 检测
对羟基苯甲酸酯又称尼泊金酯，它是一种毒性较低且相对稳定的防腐剂，作为食品中的防腐剂主要应用在酱油、醋、果酱、果汁中。
现行GB5009.31-2016标准采用气相色谱法对醋、酱油、饮料、果酱中对羟基苯甲酸酯类进行测定。在国标方法中，试样酸化后用乙醚进行提取，浓缩近干用乙醇复溶，进气相色谱进行检测。
该方法中试样的提取试剂主要是乙醚。常用的乙醚试剂中存在氧化物， 因此有的厂家会加入一定量的抗氧化剂来防止过氧化。采用气相色谱法检测时发现对羟基苯甲酸甲酯和抗氧化剂BHT出峰时间重合，如果使用的乙醚试剂中存在抗氧化剂BHT，就会产生假阳性，影响检测结果的准确性。
1、实验仪器、试剂以及气相色谱实验条件:
仪器为Agilent 7890B气相色谱仪；对羟基苯甲酸酯标准物质为坛墨质检科技股份有限公司。气相色谱条件：色谱柱为DB-1（30 m×0.32 mm×0.25μm）；进样口温度为220 ℃；进样量为1.0 μL，分流进样,分流比10:1；载气为高纯氮气；恒流模式；流量为2.0 mL/min；升温程序：100 ℃保持1 min，以20 ℃/min升到170 ℃，以12 ℃/min升到220 ℃保持1 min，以10 ℃/min升到250 ℃保持6 min。
下图为上述条件下，选取实验室所用乙醚溶剂和BHT标准溶液以及对羟基苯甲酸甲酯标液的重叠图谱。
保留时间/min
对羟基苯甲酸甲酯、BHT与乙醚试剂的重叠图谱
从图谱可以看出三者是在相同时间出峰，图谱是重叠在一起的。单纯的通过保留时间，仍无法确定是什么物质。因此对乙醚试剂进行了气相色谱质谱联用仪检测，检测目标峰是什么物质。
羟苯乙酯尼泊金乙酯检验操作规程
羟苯乙酯尼泊金乙酯检验操作规程
1 目的：建立羟苯乙酯尼泊金乙酯检验操作规程。
2 适用范围：适用于羟苯乙酯（尼泊金乙酯）的检验。
3 职责：检验人员对本规程的实施负责。
4 规程：
4.1 编制依据：《中国药典》2010年版二部P1223。
4.2 质量指标：见《羟苯乙酯（尼泊金乙酯）质量标准》。
4.3 仪器与用具：紫外分光光度计、熔点仪、红外光谱仪。
4.4 试药与试液：硝酸汞试液、标准氯化钠、标准硫酸钾、稀硫酸铁铵、冰醋酸、氢氧化钠滴定液（1mol/L）、溴麝香草酚蓝指示液。
4.5 操作方法
4.5.1 性状：本品为白色结晶性粉末；无臭或有轻微的特殊香气，味微苦、灼麻。
本品在乙醇或乙醚中易溶，在氯仿中略溶，在甘油中微溶，在水中几乎不溶。
熔点：按《凝点测定操作规程》测定，本品的熔点为115-118℃。
4.5.2 鉴别
4.5.2.1 液相色谱：取本品和羟苯乙酯对照品适量，分别用流动相溶解并稀释制成每1ml含20g的供试品溶液与对照品溶液；照有关物质项下的色谱条件测定，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
4.5.2.2 取本品约0.1g，加乙醇2ml使溶解，煮沸，加硝酸汞试液0.5ml，放置后逐渐生成沉淀，上清液显红色。
4.5.2.2 紫外光谱：取本品，加乙醇制成每1ml中含5μg的溶液，照《紫外-可见分光光度法检验操作规程》测定，在259nm的波长处有最大吸收度。
4.5.2.3 红外光谱：按《红外分光光度法检验操作规程》检验，本品的红外光吸收图谱应与对照图谱（光谱集850图）一致。
4.5.3 检查
4.5.3.1 溶液的澄清度与颜色：取本品1.0g，加乙醇10ml使溶解，溶液应澄清无色；如显色，与黄色或黄绿色1号标准比色液比较，照《澄清度检查操作规程》检查，不得更深。
4.5.3.2 酸度：取溶液的澄清度与颜色项下溶液2ml，加乙醇2ml与水5ml，摇匀，加溴甲酚氯指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至显蓝色，消耗氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）不得过0.1ml。 4.5.3.3 氯化物：取本品20g，加水50ml，80水浴加热5分钟，放冷，滤过；取滤液5.0ml，照《氯化物检查操作规程》检查，与标准氯化钠溶液7.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.035%）。
高效液相色谱法测定化妆品中8种有毒有害物质
１３０ 广东化工 ｗｗｗ．ｇｄｃｈｅｍ．ｃｏｍ ２０１０年第９期 第３７卷总第２０９期 高效液相色谱法测定化妆品中８种有 毒有害物质 贾芳，王继才，李慧勇，谭建华，赵田甜，席绍峰 （广州市质量监督检测研究院，广东广州５１０１１０） ［｝商要】文章建立了高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法同时测定化妆品中尼泊金甲醣、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯和三氯生、氯霉素、甲基 睾丸甯、己烯雌酚的检测方法。该方法采用Ｃ１８色谱柱，以乙腈一水为流动相，用梯度洗脱方式，实现了对８种物质的良好分离。结果表朗：８ 种物质的线性相关系数ｒ＞０．９９９２，回收率为９３．８％～１ １４．０％，方法相对标准偏差ＲＳＤ＜Ｉ％。 ｆ关键词】抗生素；性激素；蒴腐剂；高效液相色谱 冲图分类号］０６５ 【文献标识码］Ａ 【文章编号］１００７—１８６５（２０１ ｏ）０９—０１３０・０２ ‘ Ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ Ｅｉｇｈｔ Ｋｉｎｄｓ ｏｆ Ｈａｚａｒｄｏｕｓ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ ｂｙ ＨＰＬＣ Ｊｉａ Ｆａｎｇ，Ｗａｎｇ Ｊｉｃａｉ，Ｌｉ Ｈｕｉｙｏｎｇ，Ｔａｎ Ｊｉａｎｈｕａ，Ｚｈａｏ Ｔｉａｎｔｉａｎ，Ｘｉ Ｓｈａｏｆｅｎｇ （Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｑｕａｌｉｔｙ Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ ａｎｄ Ｔｅｓｔｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５ １ ０ １ １ ０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｍｅｔｈｏｄ ｈａｄ ｂｅｅｎ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｔｈｙｌ－ｐａｒａｂｅｎ，ｅｔｈｙｌ－ｐａｒａｂｅｎ， ｐｒｏｐｙｌ—ｐａｒａｂｅｎ，ｂｕｔｙｌ－ｐａｒａｂｅｎ ａｎｄ ｔｒｉｃｌｏｓａｎ，ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ，ｍｅｔｈｙｌ－ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ，ｓｔｉｌｂｅｓｔｒｏｌ Ａ Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｓｉｓｔ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ—ｗａｔｅｒ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ，ｅｉｇｈｔ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｃｈｅｍｉｃａｌｓ ｗｅｒｅ ｗｅｌｌ ｓｅｐａｒａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ａｌｌ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ（ ｏｆ ｔｈｅ ｅｉｇｈｔ ｃｈｅｍｉｃａｌｓ ｗｅｒｅ ｎｏ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ０ ９９９２，ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｗｅｒｅ ９３．８％～１ １４ ０％，ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｓｔａｎｄａｒｄ ｄｅｖｉａｔｉｏｎｓ（ＲＳＤ）ｏｆｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗｅｒｅ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ １％． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ；ｓｅｘｕａｌ ｈｏｒｍｏｎｅｓ；ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ；ＨＰＬＣ 随着人们物质生活水平的提高，化妆品需求量的急剧增 加，使得对化妆品质量的检测和监管工作愈加艰巨。在 化妆 品卫生规范＞）（２００７年版）中列出了１２８６种禁用物质和１９３种 限用物质 尼泊金酯（亦称对羟基苯甲酸酯）是一类常用于化妆 品的防腐剂，三氯生常用于祛痘类化妆品，氯霉素、甲 基睾丸酮和己烯雌酚等物质因具有抗菌和消炎、抗皱、抗衰 老的作用，也常被添加到某些功能性化妆品中。目前这８种有 毒有害物质的常用检测方法有液相色谱法Ｌ２。Ｊ、气相色谱法 Ｊ、 气相色谱质谱联用法 Ｊ、分光光度法 等，但一般都按照防腐 剂、性激素和抗生素的类别分别检测。为了完善和补充原有的 测定方法，文章采用高效液相色谱法同时测定化妆品中的尼泊 金甲酯、乙酯、丙酯、丁酯和三氯生、氯霉素、甲基睾丸酮、 己烯雌酚，结果证明此方法准确、可行。 １买验邵分 １．１仪器和试剂 Ａｇｉｌｅｎｔ １２００高效液相色谱仪（ＤＡＤ检测器），Ａｇｉｌｅｎｔ Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ；分析天平ＢＰ２２１Ｓ；乙腈，色谱纯；尼泊金甲酯、 尼泊金乙酯、尼泊金丙酯、尼泊金丁酯、三氯生、甲基睾丸酮、 己烯雌酚、氯霉素标准品；Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ超纯水。 １．２色谱条件 色谱柱：Ｗａｔｅｒｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１ ８柱（４．６×２５０ ｍｍ，５“ｍ）；进 样体积１０ ；流动相为乙腈加水，流速为１ ｒｎＬ／ｍｉｎ，梯度 洗脱条件见表１，ＤＡＤ检测波长为２５４ ｎｒｒｌ。 表１梯度洗脱条件 Ｔａｂ．１ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ
反相高效液相色谱负峰测定法研究以及酮类的测定
反相高效液相色谱负峰测定法研究以及酮类的测定
简介
反相高效液相色谱（RP-HPLC）是一种常用的色谱分析方法，其原理就是利用固定在固相填充柱上的具有疏水性质的固体填料作为固定相，使得待测物分子在流动相中与固定相分子发生较为强烈的疏水作用，从而实现谱峰分离。
本文主要介绍了一种新的反相高效液相色谱负峰测定法，并使用该方法对酮类进行测定。
实验步骤
1. 实验仪器和试剂
实验仪器包括：
• Agilent 1260 Infinity高效液相色谱系统
• Agilent Eclipse Plus-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）
• 紫外检测器
常用的试剂包括：
• 甲醇
• 乙腈
• 磷酸
• 马来酸
• 丁二酸
• 顺丙酸酮
• 双氯芬酸钠
2. 样品制备
以顺丙酸酮和双氯芬酸钠为例，具体制备步骤如下：
1. 将相应的样品溶于甲醇中，并用磁力搅拌均匀。
2. 用0.22 μm的滤器进行过滤，去除悬浮颗粒，使样品更加纯净，从而确保色谱分析的准确性。
3. 将样品转移到注射器中，注射器最佳体积为10 μL。 3. 色谱条件
色谱流动相为磷酸-乙腈（0.05 mol/L磷酸调pH至2.9，乙腈与磷酸的比例为35:65），流速为1.0 mL/min，柱温为30 ℃。检测波长为254 nm。
4. 实验步骤
1. 开始检测前，需要对仪器进行稳定性测试，检测出样品的基线。这一步需要检测出的是前载流相。
2. 样品注入后，从0 min开始进行检测，不断观察色谱图的变化情况。
3. 测量样品的积分峰面积，计算出样品的浓度。
结果分析
反相高效液相色谱负峰测定法的主要特点就是能够有效地分离出弱极性化合物，且测量结果的准确性和稳定性都比较高。
实验结果表明，使用该方法进行顺丙酸酮和双氯芬酸钠的测定，可以获得较好的分离效果。样品的积分峰面积与其浓度之间呈良好的线性关系，R2值均在0.999以上。
液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中4种尼泊金酯
液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中4种尼泊金酯
陈祥准;夏碧琪;沈祥茹;程洁;沈燕;韩超
【摘 要】采用液相色谱-串联质谱建立了同时测定水产品(羊栖菜、紫菜、带鱼、黄鱼)中尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯和尼泊金丁酯4种尼泊金酯的分析方法.样品用甲醇超声提取,提取液经离心过滤后用MCX固相萃取柱净化,采用Agilent ZOBRAX C18色谱柱(2.1mm×150 mm,5 μm)分离;以0.1％乙酸水溶液-乙腈作为流动相进行梯度洗脱,目标分析物在多反应监测(MRM)模式下进行定性分析,内标法定量.7 min内即可完成4种待测物的分离分析.在优化实验条件下,尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯和尼泊金丁酯在5.0～100.0 ng·mL-范围内呈良好的线性关系,相关系数均不低于0.999 2,方法定量下限为10.0 μg·kg-1.在低、中、高3个加标水平下的平均回收率为75％ ～ 96％,相对标准偏差(RSD)不大于7.1％.本方法前处理简单、选择性好、灵敏度高,可用于水产品中尼泊金酯的测定.
【期刊名称】《分析测试学报》
【年(卷),期】2015(034)004
【总页数】5页(P443-447)
【关键词】水产品;尼泊金酯;固相萃取;液相色谱-串联质谱
【作 者】陈祥准;夏碧琪;沈祥茹;程洁;沈燕;韩超
【作者单位】温州出入境检验检疫局,浙江温州325027;温州出入境检验检疫局,浙江温州325027;温州出入境检验检疫局,浙江温州325027;温州出入境检验检疫局,浙江温州325027;温州大学化学与材料工程学院,浙江温州325035;温州出入境检验检疫局,浙江温州325027 【正文语种】中 文
【中图分类】O657.63;F762.6
液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中4种尼泊金酯
陈祥准
1，夏碧琪
1，沈祥茹
高效液相色谱测定复方硝酸益康唑乳膏中尼泊金酯的含量
高效液相色谱测定复方硝酸益康唑乳膏中尼泊金酯的含量3
曾立华,熊喜悦,雷春华,尹笃林
(湖南师范大学化学化工学院,湖南长沙 410081)
[摘要] 用乙醇2水作流动相,建立了同时测定复方硝酸益康唑乳膏中对羟基苯甲酸甲酯和丙酯的高效液相色谱方法,分析柱为HyperoDscC18(250mm×4mm,i1d)色谱柱,流动相:乙醇:水=45:55,流速为018mLmin-1,检测波长为254nm,回收率为94192%～107142%。经测定,复方硝酸益康唑乳膏中尼泊金甲酯、丙酯质量分数分别为1197‰(g1g-1)、01950‰(g1g-1),含量测定重复性RSD分别为0162%、115%。[关键词] 尼泊金酯;含量;高效液相色谱[中图分类号]R28411 [文献标识码]A [文章编号]1673-016x(2008)04-0037-03
HPLCDeterminationofParabensintheCompoundEconazoleNitrateCream
ZENGLi2hua,XIONGYi2yue,LEIChun2hua,YINDu2lin(CollogeofChemistry&ChemicalEngineering,ofHunanNormalUniveisity,Changsha410081,China)
[Abstract]HPLCwasappliedtothedeterminationofParabensinthecompoundeconazolenitratecream.The
HyperoDscC18(250mm×4mm,i.d)wasusedasthestationaryphase,andamixedsolutionofethanol2waterin
theratioof45to55(byvolume)wasusedasthemobilephase..UV2detectionatthewavelengthof254nmwas