酶解大豆蛋白生产生物活性肽
研究方法
• 1.采用亚油酸－硫氰酸钾体系、邻苯三酚自氧化体系研究 蛋白酶种类、水解方法、水解时间、水解度对水解物抗氧 化活性的影响，确定获得高抗氧化性水解物的方法。 • 2.采用 Sephadex G－25 凝胶过滤层析将大豆分离蛋白的 水解物按分子量大小分成不同部分，采用亚油酸－硫氰酸 钾体系、邻苯三酚自氧化体系和人红细胞氧化溶血实验来 研究水解液不同部分对抗氧化活性的影响。确定抗氧化性 最高的大豆肽的分子量范围。 • 3．采用高效凝胶过滤色谱对抗氧化活性较好的大豆肽段 继续进行分离，进一步确定抗氧化大豆肽的分子量分布范 围。
苦味评价方法
• 称取奎啉 0.1g 溶于 50ml 5%乙醇溶液中， 从中取 5ml 溶液用蒸馏水稀释到100ml，得 到 1.0×10-4奎啉溶液，再进一步稀释成 5×10-5、2.5×10-5、1×10-5、5×10-6等浓 度奎啉溶液，其苦味值分别定为 10、5、 2.5、1、0.5,将制得的大豆多肽与不同浓度 奎啉溶液比较，从而确定大豆多肽的苦味 值。
酶解大豆蛋白生产生物活性肽
游子娟 2013.3.18
酶的选择
• 动物蛋白酶，如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋 白酶等； • 植物蛋白酶，如木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花 果蛋白酶等； • 微生物来源蛋白酶，如丹麦 Novo 公司生产的碱 性蛋白酶 Alcalase、复合蛋白酶 Protamex、中性 蛋白酶 Neutrase 以及国产的碱性蛋白酶地衣型芽 抱杆菌2709、中性蛋白酶枯草杆菌 1.398、放线 菌 l66、栖土曲霉 3.942、酸性蛋白酶黑曲霉 3350等。
蛋白酶活力的测定方法
• 酶活力的定义为：1g 固体酶粉（或 1mL 液体 酶），在一定温度和 pH 条件下，lmin内水解标 准酪蛋白产生 1μg 酪氨酸，即为 1 个酶活力单位， 以 U/g（U/mL）表示。 • 酶活测定方法为福林酚法。其原理为蛋白酶在一 定的温度与 pH 条件下，水解酪蛋白底物，产生 含有酚基的氨基酸（如酪氨酸、色氨酸等），在 碱性条件下，将福林试剂还原，生成钼蓝与钨蓝， 用分光光度计于波长 680nm 下测定溶液的吸光度。 因酶活力与吸光度成正比例，由此可以计算产品 的酶活力。
谢谢！
一些蛋白酶的切割位点和较适 pH 值
大豆肽的性质与功能
• （l）易消化、易吸收性 • （2）低抗原性 低分子肽具有低的抗原性，不会引起过敏反应，可为食物 过敏患者食用。 （3）降胆固醇作用 大豆肽能刺激甲状腺激素分泌，促使胆固醇代谢生成胆汁 酸，胆汁酸又被食物纤维素所吸附排出体外，从而阻碍对 胆固醇吸收，起到降低胆固醇的作用。 （4）降血压作用 （5）减肥作用 （6）抗疲劳、增强体力 （7）抗氧化活性
亚油酸－硫氰酸钾方法
• 原理：通过链式反应积累起来的大量过氧 化脂质将 Fe2+氧化生成Fe3+，Fe3+和 SCN结合，生成红色硫氰酸铁。大豆肽由于能 够清除自由基，从而阻断或抑制链式反应， 减少红色硫氰酸铁产生。因此通过比色反 应可以检测大豆肽抗氧化性的强弱。
• 在 5ml 具塞玻璃试管加入 1.5ml.0.15mol/L（pH7）的磷 酸盐缓冲液，加入浓度 2％待测大豆蛋白水解物样品 100μL，加入 100μl 50mmol/L 亚油酸的乙醇溶液和 25μl 50mmol/L 的 FeCl2-EDTA 溶液，采用漩涡分散器振荡后， 盖上玻盖，于50℃暗处水浴保温，记录保温时间。 • 大豆蛋白水解物抗氧化性检测 另取一支普通试管，加入 3ml75%乙醇，100μ l 上述混合液， 100μ l 1mol/L 的 FeCl2的 1.0mol/LHCl 溶液，100μl30%KSCN，采用漩涡 分散器振荡后，立即计时，三分钟后用蒸馏水作参比，在 480nm 处测定溶液的吸光度 A。以抗氧化剂空白的吸光 度为 A0，加抗氧化剂时吸光度为 AS，抗氧化活力 AA （antioxidative activity）可用公式表示：
大豆肽抗氧化性的研究
• 大豆蛋白酶水解物中存在具有抗氧化性的活性肽，这类活 性肽能抑制机体内自由基的大量积累，对提高自由基清除 机制起到一定功效。从而能在一定程度上消除机体内多种 生理功能的障碍，延缓机体的衰老，减少各种老年性疾病 的发生。 • 生物抗氧化剂通常通过以下五种途径来达到抗氧化目的： （1）抑制脂质过氧化反应。（2）直接清除活性氧自由基。 （3）清除氧。（4）螯合金属离子。（5）激活机体本身 内在抗氧化防御系统。五种途径实际上都是围绕阻断脂质 过氧化链式反应来进行。由于过量自由基容易引发机体内 脂质过氧化链式反应，而机体内脂质过氧化是导致组织损 伤的主要原因，所以研究抗氧化剂防止体内脂质过大豆蛋白水解度（DH）是水解过程中所断 裂的肽键数占总肽键数的比例，通常表示 为百分数的形式。肽键断裂后生成多肽或 氨基酸，α-氨基氮含量增加，因此，水解度 可根据水解过程中生成的 α-氨基氮的数量 得到按下式进行计算： • DH（%）＝（水解后生成的 α-氨基氮的量/ 样品总含氮量）×100% • 水解后生成的 α-氨基氮的量由甲醛滴定法 测得，样品总含氮量由凯氏定氮法测得
邻苯三酚方法
• 原理：试验通过邻苯三酚的自氧化反应产生 O2•－，研究 大豆蛋白水解物对 O2•－的清除能力。邻苯三酚的自氧化 机理比较复杂，它在碱性条件下能迅速自氧化、释放出 O2•－，生成黄色的中间产物，中间产物的累积 30～40s 后与时间成线性关系，当有抗氧化剂存在时，可清除 O2• －，从而阻止中间产物的积累，导致产物颜色较浅，采用 分光光度计对产物进行比色分析，可以检测该抗氧化剂清 除O2•－自由基的能力。
• 步骤：在一系列的试管中加 3ml 0.05mol/L 的 Tris-HCl 缓冲 液(pH8.2)，分别加入浓度 2％待测大豆肽样品溶液 100μl， 空白组加入同体积蒸馏水，再加入 100μl的 0.45mol/L 邻苯 三酚溶液，振荡并计时，待计时至三分钟时立即加入 100μl 3%抗坏血酸溶液，振荡，终止反应，在 325nm 处测吸光度 A。以抗氧化剂空白的吸光度为 A0，加抗氧化剂时吸光度为 AS，清除自由基活力 SA（scavengingactivity）可用公式表 示：
存在的问题
• 与生产大豆蛋白相比，制备大豆肽需要增加一定 量的设备和工艺程序，所以生产成本比较高，价 格也比较高，这也是多肽类制品进入市场较困难 的主要原因 。 • 其次，将大豆蛋白酶解成肽后，常常不可避免会 产生少量苦味物质，影响产品的风味 。 • 总之，随着理论和工艺条件的不断完善，大豆肽 的质量不断提高，随着脱臭 脱苦技术的不断改进， 其风味将得到很大的改善，大豆肽产品必定会被 更多的消费者认识和接受，成为人们日常生活中 的一种优质的蛋白质营养品。
食物蛋白制备生物活性肽的酶解工艺及发展趋势
品 — 检 测 ＋
根据 原 料 蛋 白 的性 质 ，采 用 热 处 理 或 酸处 理 的方法 件下 水 解 蛋 白获得 水 解 度 高 、 性 肽 含 量 丰 富 的肽 溶 液 。 活
等， 不利于推广应用 。③水解法 ， 分为 ： 化学水解法 ， 以天 使 蛋 白质变 性 ， 然后 选 择 合适 的蛋 白酶 ， 在其 最 适 水 解 条
水解液经灭酶 、 苦 、 色 、 盐 、 缩等精制 工艺后 ， 脱 脱 脱 浓 再
经喷 雾 干燥 ， 即获 得 富含 生 物活 性 肽 的 多肽 产 品 。
２酶 解 工 艺 操 作 要 点
２１蛋 白 原 料 ．
在 酶解 前 用丙 酮 、 乙醚 对 原 料进 行 脱 脂 处 理 ． 水 解 对
２３酶 解 － ２３１蛋 白 酶 的 选 择 －．
根据 蛋 白酶 的来 源 ， 选 用 的蛋 白酶 分 为 ： 物 性 蛋 常 动 白酶 （ 胰蛋 白酶 ， 胃蛋 白酶 等 ） 植 物 蛋 白酶 （ 瓜 蛋 白酶 ， 、 木 菠萝 蛋 白酶 等 ） 微 生 物 蛋 白酶 （ 草 杆 菌 蛋 白酶 ， 曲 和 枯 黑 酶等 ） 根 据 蛋 白酶 作 用 的 最 适 ｐ 值 来 分 ， 分 为 酸 性 ； Ｈ 可
蛋 白酶 。 由于 不 同蛋 白酶 的特 异 性 不 同 ， 蛋 白原 料 的蛋 而
白较 复 杂 。 用 单 一 的酶 难 以 提 高最 终 的 水解 度 ， 蛋 白 使 对 质进 行 有 效 的酶 解 ， 验 中多 以水 解 度 、 肽 得 率 以及 产 试 小
品风 味 为指 标 对 蛋 白酶 进行 比较 筛 选 或选 用 复 合 酶 进 行
乳 蛋 白制 备 酪 蛋 白 磷 酸 肽 、免 疫 肽 等 活 性 多 肽 等 ；
一种酶解大豆肽的制备方法
一种酶解大豆肽的制备方法大豆肽是由大豆蛋白质经过酶解而得到的一种多肽混合物。
由于其具有丰富的氨基酸组成和生物活性，被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。
酶解大豆肽的制备方法是通过加入适量的酶来降解大豆蛋白质，从而得到所需的大豆肽。
一种常用的酶解大豆肽的制备方法是采用酸性酶解法。
具体步骤如下：1. 原料准备：选择优质的大豆作为原料，经过清洗、浸泡和磨浆等处理，得到大豆浆。
2. 酶的选择：根据需要得到的大豆肽特性，选择适合的酶进行酶解。
常用的酶包括胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等。
酶的选择要考虑其活性、稳定性和成本等因素。
3. 酶解反应：将大豆浆加热至适宜的温度，然后加入适量的酶。
酶解反应的时间和温度要根据酶的特性和大豆肽的需求来确定。
一般来说，酶解反应时间较长，温度较高，得到的大豆肽含量较高。
4. 反应停止：通过加热、酸化或酶的不活化等方法停止酶解反应，以防止过度酶解或酶的不受控制活性。
5. 分离和纯化：通过离心、过滤或超滤等方法将酶解液中的大豆肽分离出来。
根据需要，可以进一步进行纯化和浓缩处理。
6. 干燥和粉碎：将分离出的大豆肽进行干燥处理，以去除水分。
然后进行粉碎，得到所需的酶解大豆肽。
酶解大豆肽的制备方法中，酶的选择和酶解条件的控制是非常关键的。
不同的酶具有不同的底物特异性和酶解特性，因此需要根据需求选择合适的酶。
同时，酶解反应的时间、温度和pH值等条件也会对酶解效果产生影响。
合理控制这些条件可以提高大豆肽的产率和质量。
在酶解大豆肽的制备过程中，还可以通过添加助剂或利用超声波、微波等辅助技术来提高酶解效果。
这些方法可以加速酶解反应、提高酶的活性和提高大豆肽的产率。
酶解大豆肽的制备方法是一种有效的手段，可以通过酶的作用来降解大豆蛋白质，得到所需的大豆肽。
在制备过程中，酶的选择和酶解条件的控制十分重要，可以通过合理调控来提高大豆肽的产率和质量。
此外，辅助技术的应用也可以进一步提高酶解效果。
酶解大豆肽的制备方法具有广泛的应用前景，可以满足人们对高质量大豆肽的需求。
大豆蛋白改性酶解制备大豆肽的研究
了大豆蛋白质的利用。 近年来， 通过酶法水解大豆蛋 白得到大豆肽已经得到了科学界的重视。 大豆肽分子 量小、 溶解度高、 黏度低、 在体内消化吸收快、 抗原 性低， 而且具有抗疲劳、 抗氧化、 降血压、 降低胆固 醇、 提高免疫力、 抗肿瘤以及控制肥胖等多种生理功 能， 使其应用范围大大扩大， 提高了大豆产品的附加 值。
水解条件： 底物浓度 20g ／ L， 酶和底物比 8 000U ／ g， 温度 50℃， pH 值 7．5。 以水解度为指 标 研 究 2、 3、 4、 5、 6h 的水解时间对水解的影响， 结果如图 3 所示。
图 4 pH 值对水解度的影响 所示。
由 图 4 可 知 ： 在 pH 值 小 于 7．5 时 ， 水 解 度 随 pH 值的升高显著提高； 在 pH 值大于 7．5 时， 水解度随 pH 值 增 加 逐 渐 降 低 ； 在 pH 值 为 7．5 时 ， 水 解 度 达 到 最 大。 这是因为大豆分离蛋白的等电点为酸性， 在中性 偏酸性条件下， 溶解度会进一步降低， 水解度受到酶 催化活性和底物溶解性的双重影响而变化较大； 在偏 碱性条件下， 水解度只受到酶催化活性的影响。 因此， 本试验条件下， 大豆蛋白改性酶水解大豆分离蛋白的 最适 pH 值为 7．5。 2．1．5 水解温度对水解的影响
大豆分离蛋白→调浆→酶解→灭酶→酸沉离心分离→ 上清液冷冻干燥
准确称量大豆分离蛋白加蒸馏水搅拌均匀， 加入 一定量的大豆蛋白改性酶， 在一定的温度和 pH 值条件 下水解， 到达时间后， 90℃灭酶 10min， 冷却至室温后 加入 1mol ／ L HCl 调 pH 值 4．2 沉淀未水解蛋白， 8 000r ／
1 材料与方法
1．1 材料与试剂 大豆分离蛋白， 吉林省通榆蛋白质厂； 大豆蛋白
食物蛋白酶解物中的生物活性肽
食物蛋白酶解物中的生物活性肽王 梅 沈 辉无锡轻工大学食品学院 江苏无锡214036摘要 本文讨论了食物蛋白质酶解物中的生物活性肽及其药理作用。
关键词 生物活性 寡肽 食物蛋白 酶解 蛋白质是人类生命活动中不可缺少的营养物质。
人类通过日常食物而摄取蛋白质,这些蛋白质就是许多生物活性肽的来源。
源于食物蛋白的活性肽有些是天然存在的,有些是蛋白酶解的产物。
本文只就食物蛋白酶解产生的生物活性寡肽按功能特点进行分类讨论。
1 具有免疫活性的寡肽因为母乳是婴儿的第一食物,所以乳汁可能是免疫调节物质的来源[1]。
事实上确实在人乳和牛乳的酪蛋白中检测到了具有免疫刺激活性有肽段[2,3]。
用老鼠的巨噬细胞作检测体系,可见这些肽具有刺激巨噬细胞的吞噬能力。
同样,作为人类食物蛋白的大豆蛋白和大米蛋白通过合适的酶解也可产生具有免疫活性的肽[4,5],而且有些肽除了具有刺激巨噬细胞的吞噬能力外,还能抑制肿瘤细胞的生长[4]。
这些具有免疫活性的肽序列及来源见表1。
2 抗高血压活性肽在人体的生理过程中,血压的调节是至关重要的。
血管的收缩和细胞外液的体积是由肾素——血管紧张素调节的。
肾脏近球旁细胞释放的肾素(一种酶)进入血液将血浆中一种 2球蛋白(血管紧张素原)水解为血管紧张素I。
血管紧张素I在经过肺循环时,又受转化酶的作用转换成血管紧张素II。
血管紧张素II可直接加强心肌收缩力,提高心率;可直接作用于血管平滑肌;或通过交感神经使内脏和皮肤等血管收缩;可使血管内皮细胞收缩,细胞间隙增宽,管壁通透性增加;并且由于毛细管后阻力增高,结果使组织液生成增多。
在此系统中,血管紧张素II能引起血管强大地收缩。
而血管紧张素II是由血管紧张素I通过酶转换而形成的。
从营养和治疗的观点出发,这个过程中酶的抑制剂是关键点。
一般认为凡是能抑制血管紧张素转换酶的物质就有降血压的功能。
事实上,在许多蛋白质的酶解产物中都有血管紧张素转换酶抑制剂[6],见表2。
大豆肽的功能活性及其在食品加工中的应用
第1期（总第520期) 2021年1月农产品加工Farm Products ProcessingNo.1Jan.文章编号：1671-9646 (2021)01b-0059-05大豆肽的功能活性及其在食品加工中的应用王露露，史茜茜，王雨桐，谷鑫，姜雨彤，**韩齐(黑龙江八一农垦大学食品学院，黑龙江大庆163319)摘要：大豆活性肽是大豆蛋白的水解产物，因具有多种功能活性而受到广泛关注，并且大豆活性肽的稳定性更好，加工性能也优于大豆蛋白。
综述了大豆肽的活性功能，如降血压、降血脂、抗疲劳和抗氧化等，并对其在不同种类 食品中的应用进行了分析和展望，为大豆活性肽在食品加工中的应用提供参考。
关键词：大豆肽；功能活性；食品加工；应用中图分类号：TS202.1 文献标志码： A doi：10.16693/ki.1671-9646(X).2021.01.050Function of Soybean Bioactive Peptides and its Application in Food Processing WANG Lulu,SfflQianqiaii,WANG Yutong,GUXin,JIANG YutBng,*H A N Q i(College of Food Science，Heilongjiang Bayi Agricultural University，Daqing，Heilongjiang 163319，China) Abstract：Soybean bioactive peptides were the hydrolysate of soybean protein，which have been attracted lots of attention due to its various functional activities，and the stability and processing properties of soybean bioactive peptides were better than soybean protein. The functional activities of soybean bioactive peptides，such as antihypertensive，antilipemic，antifatigue and antioxidant，were reviewed in the paper. The application of soybean bioactive peptides in food processing were described and prospected，either. The paper would provide references for the further application of soybean active peptide in food processing.Key words：soybean bioactive peptides;functional activities;food processing;application〇引言大豆蛋白是一种植物源高蛋白食品，蛋白质含 量可达36%~56%，氨基酸组成也十分均衡，包含人 体所需的全部必需氨基酸[1-2]。
大豆活性肽酶解工艺的研究
大豆活性肽酶解工艺的研究
丛建民;陈光;李艳丽
【期刊名称】《吉林农业大学学报》
【年(卷),期】2003(025)006
【摘要】采用物理方法与酶解技术相结合水解大豆分离蛋白制备大豆肽.确定了大豆肽的制备工艺参数,即:温度为55℃,pH为8.5,底物浓度为3%,酶与底物比为6%,水解时间为1.0 h,此条件下水解度(DH)为92.27%,并分析了各工艺参数对水解效果的影响;微波处理能提高水解度(DH)和氮溶指数(NSI)5%以上.
【总页数】4页(P685-688)
【作者】丛建民;陈光;李艳丽
【作者单位】吉林农业大学生物技术学院,吉林,长春,130118;白城师范学院生物系,吉林,白城,137000;吉林农业大学生物技术学院,吉林,长春,130118;吉林农业大学生物技术学院,吉林,长春,130118
【正文语种】中文
【中图分类】TS214.2
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大豆多肽的制备工艺探究
大豆多肽的制备工艺探究大豆多肽是由大豆蛋白经过水解作用得到的一种具有生物活性的多肽物质。
它具有良好的水溶性、丰富的氨基酸组成和多种生物活性功能，如抗氧化、抗菌、降脂等。
由于其丰富的功能和广泛的应用前景，大豆多肽的制备工艺备受研究者关注。
本文将探究大豆多肽的制备工艺。
首先，大豆多肽的制备可以通过酶解大豆蛋白来实现。
一般来说，最常用的酶解剂是蛋白酶，如胃蛋白酶、胰蛋白酶等。
制备大豆多肽的关键是选择适宜的酶解剂和酶解条件。
酶解剂的种类和用量，以及酶解的时间和温度，都会对大豆多肽的产率和特性产生影响。
因此，研究者需要对这些因素进行优化和调控，以获得理想的大豆多肽产物。
其次，酶解反应的前处理也是影响大豆多肽制备工艺的重要因素。
在酶解前，可以进行一些物理或化学处理，以改善大豆蛋白的可溶性和酶解效果。
例如，大豆蛋白可以经过脱脂、研磨等处理，以去除一些油脂和结构性成分，增加大豆蛋白的暴露面积。
同时，还可以通过酸碱调节、温度调节等方式来改变蛋白的结构和电荷状态，增加酶解的效率和选择性。
此外，大豆多肽的制备还需要注意酶解反应的停止和后处理。
当达到理想的酶解程度后，需要立即停止酶解反应，以防止过度酶解或酶失活。
一般来说，可以通过加热、调节pH、添加抑制剂等方式来停止酶解反应。
之后，可以通过蛋白沉淀、渗透浓缩、超滤、膜分离等技术来提取和纯化大豆多肽。
这些后处理技术的选择和操作条件，也会影响大豆多肽的产率和品质。
综上所述，大豆多肽的制备工艺是一个复杂的过程，需要研究者对酶解剂、酶解条件、前处理和后处理等环节进行充分的优化和调控。
只有在合适的条件下，才能实现大豆多肽的高产率和优良特性。
随着科学技术的发展和研究的深入，相信大豆多肽的制备工艺将会进一步完善，为其广泛的应用提供更多的可能性。
蛋白酶水解豆渣制备大豆肽的研究
白酶来 酶解 大豆 豆渣 制 备 大 豆 肽 ， 以确 定 各 种 蛋 白
酶 的最 适水 解条件 。
１ 材 料 与 方 法
１ Ｉ 材 料 与 试 剂 ．
１ ｒ Ｖ 、
Ｑ１００ （ 一 Ｖ ） × ０ ｏ Ｘ
Ｃｈ ｎ Ｊｅ ， ｅ ｇ ， ｕ Ａｉｏ ｇ ， ａ ｇ Ｈａ ｍｉｇ ， ｎＷ ｅ ｌ Ｎｉ ｅ ｎ ｅ ｉ ＸｕＭ ｎ 。 Ｌｉ ｈ ｎ 。 Ｗ ｎ ｏ ｎ 。 Ｙａ ｎｉ ， Ｘｕ ｗｅ
（ ． Ｃｏｌｅ ｆＢｉｌ ｃ ｌＥｎ ｎｅ ｒｎｇ，Ｈ ｕｂｅ ｎｉ ｒ ｉｙ ｏｆＴ ｅ ｈｎ ｏｇ １ ｌｇｅ ｏ ｏｏｇｉａ ｇｉ ｅ ｉ ｉＵ ｖｅ ｓｔ ｃ ｏｌ ｙ，Ｗ ｕｈ ３０ ６８，Ｃｈｉ ａｎ ４ ０ ｎａ；２ ．Ｄｅ ａ ｔ ｅ ｔｏ ｏ ｎｇ ｎ ｅ — ｐ ｒ ｍ ｎ ｆＢｉｅ ｉ ｅ ｒ
收稿 日期 ：０ ２０ —３ 修 回 日期 ：０ ２０—７ ２ １ －６１ ； ２ １—９１ 作 者简 介 ： 陈 洁 （ ９ ０） 女 ， 师 ， 士 ， 究 方 向为 食 品 化 学 。 １ ８一 ， 讲 硕 研 通 讯作 者 ： 学 文 （９ ７）， ， 教 授 ， 士 ， 究 方 向为 食 品 加 工 技 术 。 倪 １７ 一 女 副 博 研
ｗｅｅａ ｏｌｗｓ ｕ ｓｒｔ ｏ ｃｎ ｒｔｏ ｆ５ （ ｗ） ｎ ｙ ｏ ｃｎ ｒｔｏ ｆ１ ０ ｇ ｙ ｒ ｌｓｓｔｍｐ ｒｔ ｒ ｆ５ ℃ ， ｒ ｓｆｌ ｏ ：ｓ ｂ ｔａｅｃ ｎ ｅ ｔａ ｉｎｏ ｗ／ ，ｅ ｚ ｍｅｃ ｎ ｅ ｔａ ｉｎ ｏ ５０ ０Ｕ／ ，ｈ ｄｏｙ ｉ ｅ ｅａｕ ｅｏ ５
通过酶解大豆蛋白制备大豆肽的方法[发明专利]
(10)申请公布号(43)申请公布日 (21)申请号 201310697710.X(22)申请日 2013.12.18A23J 3/34(2006.01)A23J 3/16(2006.01)(71)申请人中粮营养健康研究院有限公司地址100020 北京市朝阳区朝阳门南大街8号申请人中粮集团有限公司(72)发明人刘新旗 张连慧 王一 刘泽龙贺寅 应欣 郑岩 涂丛慧 杨佳王宇(74)专利代理机构北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290代理人张淑珍 洪俊梅(54)发明名称通过酶解大豆蛋白制备大豆肽的方法(57)摘要本发明涉及通过酶解大豆蛋白来制备大豆肽的方法。
该方法所得大豆肽苦涩味低，大豆肽得率高，其中的游离氨基酸及分子量小于150Da或分子量大于2000Da 的肽段含量均较低。
所述方法包括如下步骤：将大豆分离蛋白加水配制成4wt%-12wt%的大豆分离蛋白液，调节温度和pH ，然后将适量的作为内肽酶使用的碱性蛋白酶和中性蛋白酶以及作为外肽酶使用的风味蛋白酶按照先加入碱性蛋白酶和中性蛋白酶、后加入风味蛋白酶的顺序加入，进行酶解反应，调节酶解液的pH ，灭酶，离心取上清液，进行杀菌后，喷雾干燥得到大豆肽。
(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书8页(10)申请公布号CN 104719611 A (43)申请公布日2015.06.24C N 104719611A1/1页1.一种通过酶解大豆蛋白制备大豆肽的方法，所述方法包括如下步骤：（1）将大豆分离蛋白加水配制成4wt%-12wt%、优选6wt%-10wt%的大豆分离蛋白液，制备大豆分离蛋白液；（2）向步骤（1）中制备的大豆分离蛋白液中滴加酸性调节剂或碱性调节剂，调节pH 至5.0-9.0，调节温度至30-60℃，然后，加入作为内肽酶使用的碱性蛋白酶和中性蛋白酶，酶解1-3h ，再加入作为外肽酶使用的风味蛋白酶，酶解1-3h ；（3）酶解结束后，滴加酸性调节剂或碱性调节剂调节酶解液的pH 至4.0-5.0，将酶灭活，1000g-5000g 离心10-30min ，取上清液，置于100-180℃、优选130-160℃的温度下杀菌处理30-120s 、优选60-90s ，之后喷雾干燥得到大豆肽。
大豆多肽的制备工艺探究
大豆多肽的制备工艺探究大豆多肽是一种重要的生物活性肽，在医药、保健品、化妆品等领域具有广泛的应用前景。
为了实现大豆多肽的商业化生产，需要开发和优化其制备工艺。
本文将探讨大豆多肽的制备工艺，包括原料准备、提取纯化、酶解及多肽纯化等环节。
一、原料准备大豆是制备大豆多肽的主要原料。
在大豆中，多肽主要存在于蛋豆蛋白中，因此需要先从大豆中提取蛋白质。
大豆蛋白主要包括大豆分离蛋白和大豆食品蛋白两种，可以根据需求选择合适的原料进行制备。
二、提取纯化大豆蛋白的提取可以采用代用水、酸或盐溶液等方法。
其中，代用水法是最常用的提取方法之一、具体操作步骤包括：将大豆粉加入适量的水中，与水搅拌均匀，过滤离心，得到大豆蛋白液。
为了提高大豆蛋白的纯度，可以采用脱色、去脂肪等方法进行进一步的纯化处理。
三、酶解酶解是将大豆蛋白中的多肽进行降解的过程。
常用的酶包括胰蛋白酶、链霉亲子酶、狄普西酶等。
酶解条件包括酶解剂质量浓度、反应时间、反应温度等。
一般来说，酶解剂质量浓度和反应时间较高，反应温度较低，可以得到较高的酶解率和多肽产率。
四、多肽纯化多肽纯化是将酶解产物中的多肽纯化为目标产物的过程。
常用的多肽纯化方法包括超滤、透析、离子交换色谱、凝胶渗透色谱等。
其中，超滤是最常见和简便的纯化方法。
超滤膜的孔径选择根据多肽分子量的大小，通常为1kDa左右。
在多肽纯化过程中，还可以通过中性洗脱、梯度洗脱等方法进一步提高纯化效果。
此外，还可以使用逆向高效液相色谱、薄层色谱等方法进行目标多肽的分离纯化。
综上所述，大豆多肽的制备工艺包括原料准备、提取纯化、酶解和多肽纯化等环节。
通过合理选择原料、优化工艺参数和选择合适的纯化方法，可以获得高纯度的大豆多肽产品。
对于大豆多肽的制备工艺的探究，有助于推动大豆多肽的商业化生产，并满足不同领域对大豆多肽的需求。