金线莲组培快繁

金线莲组培快繁技术研究

【摘要】 目的建立金线莲快繁体系。方法以茎段为外植体,开展了茎段不同部位、培养基、激素、有机物和活性炭对不定芽增殖、幼苗生长的影响研究,并进行了移栽试验。结果外植体以不含顶芽和长根的中间段茎节为好;不定芽增殖最佳培养基配方为MS(或B5)+BA3.0 mg/L +NAA0.5~1.0 mg/L,两个月增殖倍数达5.0以上;壮苗最适培养基为1/2MS+NAA3.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+香蕉提取物20%(或椰子汁20%);试管苗移栽适宜的基质为菜园土1份+2~3 mm粗砂2份(或1份)+木屑1份(或2份),3个月成活率均达100%,且生长良好。结论采用上述方法,能实现金线莲幼苗的快速繁殖。

【关键词】 金线莲; 快速繁殖; 增殖; 生长; 移栽

金线莲Anoectochilus roxburghii(wall.)lindl为兰科开唇兰属多年生草本,别名金蚕、金线兰、金线虎头蕉等,是我国传统珍贵药材,素有“金草”“神药”“乌人参”等美称,在民间应用范围较广,广泛应用于风湿性关节炎、高血压病、糖尿病、肾病等疑难杂症的 治疗 和强身健体、病后体虚恢复等方面,在浙江、福建、 台湾 等省和东南亚地区被视为珍稀名贵药材,特别在台湾省更是备受青睐,被称为“药中之王”[1,2]。

金线莲种子微小,由未成熟的胚及数层种皮细胞构成, 自然 萌发率和繁殖率低,目前市场上货源主要来自于野生采挖,产品一直处于供不应求的状况。近年来,随着对其药效学和临床应用研究的深入,对金线莲药用价值的认识进一步提高,其市场货源紧缺的状况更为严峻,野生资源也不断遭到破坏性采挖,以致于处于濒临灭绝之地。本研究旨在采用组织培养技术,解决金线莲种苗来源,加快人工栽培,以保护金线莲野生资源、稳定市场供应。现将有关实验结果如下。

1 材料与方法

1.1 材料 无菌繁殖体系的建立为浙江金线莲野生种源,其它实验为继代培养的不定芽及无根幼苗茎段。

1.2 无菌繁殖体系的建立 取生长健壮、无病虫害的植株,去叶后放入低浓度的洗衣粉水中漂洗3~5 min,然后用流水冲洗30

min。在超静工作台前,用75% 酒精湿润5~6 s,放入0.1%的HgCl溶液灭菌12~13 min,用无菌水冲洗5~6次。将消毒好的茎按上段(具茎尖)、中段和下段(匍匐茎段)切成长约1.5~2 cm,带有1~2个节间的小段,分别接种于MS+6-BA 4.0 mg/L +NAA 0.4 mg/L 培养基上,pH5.6,蔗糖2.5%,琼脂0.7%。培养条件为:温度(25±2)℃ ,光照时间12 h/d,光照强度1 500~2 000 lx。

1.3 不定芽诱导

1.3.1 基本培养基对不定芽诱导的影响 采用单因素实验,培养基选用MS(Murashige-Skoog)[3],1/2MS(大量元素减半,其他成分不变),VW(Vacin & Went),B5(Gamborg·Miller & Ojima)和KC(Knudson C)等5种,分别添加6-BA 4.0mg/L,NAA 1.0 mg/L。

1.3.2 激素对不定芽诱导的影响 以MS为基本培养基,添加不同种类及浓度的细胞分裂素和生长素。

上述实验选取无菌健壮植株,切取长约1~1.5 cm,带有一个节间的茎中段,每处理接10个茎节,重复3次。培养期间定时观察不定芽生长情况,培养60 d后统计不定芽数。其它条件同实验“1.2”项。

1.4 壮苗培养

1.4.1 激素对幼苗生长和发根的影响 以1/2MS为基本培养基,NAA设1~5 mg/L 5个处理,6-BA设0.5,1.0和1.5 mg/L 3个处理,共15个处理。

1.4.2 添加物对幼苗生长和发根的影响以1/2MS+NAA 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L为基本培养,考察马铃薯提取物、香蕉提取物、苹果提取物、椰子汁等4种天然有机物和活性炭对金线莲幼苗生长的影响。

上述每种培养基均接入经增殖培养高约3 cm,具3~4节间、有1~2片的无根幼苗,每处理接种接无根幼苗10株,重复3次。培养后每隔15 d观察生长情况1次,至3个月考察每株净增加的叶片数、重量及发根数,并进行数理统计分析。

1.5 移栽 选苗高约6~8 cm,茎基直径约2 mm,丛生根有2~3条的试管苗,炼苗4 d后,洗净附着在植株上的培养基,并晾干洗涤水后移人直径为15 cm,装有不同基质的土盆中,考察不同基质对金线莲试管苗成活率的影响。移栽前,实验基质均用45%多菌灵可湿性粉剂800倍溶液浇透消毒。实验条件为遮荫度80%的荫棚,保持空气相对湿度的80%~90%。如发现有病死植株,及时拔除。每处理5盆,每盆种5株,重复3次,移栽3个月后考察成活株数,并进行数理统计分析。

2 结果

2.1 无菌繁殖体系的建立 实验表明,外植体茎段的分化程度对诱导结果存在一定的影响。从表1可知,上、中段茎均能萌动生长。上段茎因有顶芽的存在,顶端优势表现较为强烈,因而以生长为主,不定芽发生较少,平均芽增殖数为0.6个;中段茎不定芽发生快、量大、长势好,平均芽增殖数为4.05个,并形成多枝丛生状。下段茎由于组织相对老化,虽有不定芽发生,但发生量与生长势均较弱。这和陈自力[4]报道的结果一致。

从实验中观察到,不定芽的产生以侧芽萌生为主。一般在培养15~20 d后,茎节上潜伏的叶腋芽萌动膨大,芽丛在节的四周萌出,起初为白色略带黄色,随着培养时间加长,芽不断伸展,逐渐转为黄绿色,形成主芽。叶腋芽是单生的,极个别节上能对生两个腋芽,未发现茎部或切口处长出不定芽。培养30 d左右,主芽基部的节再生侧芽(称一级侧芽),45 d左右一级侧芽节上又可发生二级侧芽,随着芽的生长、出现叶片,节处毛并产生根,外被浓密的白色绒毛,从而形成完整小植株。培养3个月后每天观察,侧芽分生组织的增殖,一般只出现主芽和一二级侧芽或苗;培养5个月以上,主芽、侧芽较高,叶片较多、大,只有少数出现三级侧芽或苗。这种腋芽萌生的增殖形成了主轴分枝型的芽苗,随培养时间或继代繁殖代数的增加,或激素的作用,芽或苗因节间短,多数为形成似不定芽或丛生苗。培养过程中,未见愈伤组织,也没有发现有原球茎和类原球茎产生。

表1 金线莲茎段外植体不定芽诱导(略)

2.2 不定芽诱导

2.2.1 基本培养基对不定芽诱导的影响 以金线莲的茎节段作为外植体,腋芽能快速萌发出不定芽体。经60 d的培养,增殖倍数可达3.1~5.4倍。但基本培养基对不定芽的诱导具有明显的影响,MS,B5培养基不定芽增殖率分别为5.4倍与5.2倍,比其它培养基增加23.8%~74.2%。

表2 基本培养基对金线莲不定芽诱导的影响(略)

经LSR差异显著性测定,MS,B5培养基之间无明显差异,与1/2MS,KC和VW之间存在极显著差异,且MS,B5培养基上诱导产生的不定芽色绿、粗壮(见表2),表明MS,B5培养基适合作为金线莲茎段不定芽诱导的基本培养基[5]。

2.2.2 激素对不定芽诱导的影响 激素种类、水平与配比对组织培养快速繁殖在效率存在明显的影响,6-BA、KT和NAA是3种常用生长调节剂,其添加量对金线莲不定芽增殖的影响很大。结果见表3。从表3可知,同为细胞分裂素的6-BA,KT在相同的添加量下对不定芽的增殖效果差异极显著,6-BA比KT的增殖率提高46.0%和55.0%,表明6-BA比KT更适合金线莲茎节不定芽的诱导。

6-BA的浓度也影响不定芽诱导效果。在添加量小于4.0 mg/L的情况下,随浓度的提高,不定芽增殖率明显上升,添加量为4.0 mg/L的不定芽增殖率比2.0,1.0 mg/L分别提高22.1%和47.6%。当6-BA添加量达到6.0 mg/L时,其增殖率还出现下降趋势,表明本实验条件下6-BA添加的适宜量为4.0 mg/L。

表3 激素对金线莲不定芽诱导的影响(略)

生长素NAA对金线莲不定芽的诱导与生长具有明显的促进作用。从表3可以看出,添加了NAA的培养基不定芽增殖量与生长明显较不添加的好,芽体粗壮、色浓绿,其中添加0.5 mg/L的表现最好,添加1.0 mg/L的其次,但二者间差异未达到显著水平;与其它不添加NAA的相比差异达极显著水平。表明在本试验条件下NAA适宜添加的量为0.5~1.0 mg/L。

2.3 壮苗培养

2.3.1 激素对幼苗生长的影响 在金线莲壮苗培养中,NAA较6-BA对促进幼苗生长的影响更为明显。结果见表4。NAA浓度低于3 mg/L时,对幼苗生长有促进作用,随浓度的增加,叶片净增量、发根数和鲜重净增量明显增加,当浓度达到4.0 mg/L时,叶片净增量、发根数和鲜重净增量增加不明显。6-BA在0.5 mg/L情况下,比不加的具有一定的促进作用,但未达显著水平;在浓度为1.0 mg/L,1.5 mg/L情况下,叶片净增量、发根数和鲜重净增量反而减少,但在幼苗基部观察到丛生状不定芽的产生,表明6-BA在浓度高于1.0

mg/L情况下,有利于金线莲不定芽的生成,对幼苗生长不利。

从表4也可以看出,处理9、10号在发根数、鲜生净增量方面较其它处理明显提高,达极显著差异;在叶片净增量方面,除与处理13、14号无明显差异外,与其它处理之间的差异达极显著水平,表明在金线莲壮苗培养中,NAA适宜添加的量为3.0~4.0 mg/L,6-BA

添加量为0.5 mg/L或不加。

表4 激素对金线莲幼苗生长的影响(略)

2.3.2 活性炭与有机添加物对幼苗生长的影响 结果见表5。从表5可知,不同的添加物对金线莲幼苗生长的影响表现不一,香蕉、椰子汁对促进幼苗生长最为有利,叶片净增量、发根数和鲜重净增量均高于其它处理,二者间无明显差异;马铃薯对幼苗生长不利,与其它处理相比均存在极显著差异水平。活性炭对金线莲幼苗生长具有一定的促进作用,在添加0.3%情况下,叶片净增量、发根数和鲜重净增量与对照相比均显著提高,差异达极显著水平;但与香蕉、椰子汁处理相比,其促进幼苗生长的作用不如前二者,除发根数无差异外,叶净增量与香蕉、椰子汁处理差异达显著水平,鲜重净增量差异达极显著水平。同时观察到活性炭、香蕉和椰子汁新发根洁白、粗壮。试验结果表明添加20%香蕉和椰子汁最适宜金线莲幼苗的生长。

表5 添加物对金线莲幼苗生长的影响(略)

2.4 移栽 金线莲试管苗移栽3个月后的植株成活情况见表6。从表6中可以看出,处理7和处理9保持100%的成活率,处理3和处理8的植株成活率也在93%以上,处理1的成活率最低,仅为56%。经LSR差异显著性测定,处理3、7、8、9号之间无明显差异,与处理5、6号差异达显著水平、与处理1、2、4号差异达极显著水平。表明在菜园土中加入粗砂、木屑能明显提高金线莲试管苗移栽的成活率,适宜添加的比例为1份菜园土中加入粗砂2份、木屑1份或粗砂1份、木屑2份,要求充分混匀。

表6 种植基质对金线莲试管苗移栽成活率的影响(略)

3 小结

金线莲不同部位的茎间对不定芽的诱导结果存在明显的差异,以不含顶芽和长根的中间段茎节为好,不定芽增殖率达4倍以上。

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光照强度与栽培模式对金线莲生长及品质影响

光照强度与栽培模式对金线莲生长及品质影响

光照强度与栽培模式对金线莲生长及品质影响

何碧珠;邹双全;刘江枫;朱萍;邹小兴

【摘 要】目的:探讨不同光照强度和栽培模式下金线莲形态、产量、主要药用成分黄酮和多糖的动态变化规律,确定金线莲适宜栽培模式和最佳采收时间.方法:以一次性成苗有机培养金线莲植株为材料,调节不同光照强度,采用林下仿生栽培和大棚种植2种不同栽培模式下大面积种植,测定不同栽培模式金线莲多糖含量和黄酮含量的变化,分析金线莲栽培过程中活性成分累积规律.结果:光照强度为3000 1x时,植株的株高、叶片大小、茎粗、鲜重和于重均达到最大;两种模式(大棚和林下)栽培苗随着栽培月龄的增长,多糖含量先减少后增加,黄酮含量则逐渐增加.种植6月后,以林下仿生态种植的金线莲在形态和生物量都显著优于大棚种植,多糖含量比大棚种植高2.9 mg,但黄酮含量差异不显著.结论:不同的光照强度和栽培模式对金线莲的生长、黄酮和多糖的变化有显著影响,金线莲的适宜采收期为林下栽培6个月以上.

【期刊名称】《中国现代中药》

【年(卷),期】2015(017)012

【总页数】4页(P1292-1295)

【关键词】金线莲;光照强度;栽培模式;栽培月龄;生长;多糖;黄酮

【作 者】何碧珠;邹双全;刘江枫;朱萍;邹小兴

【作者单位】福建农林大学园艺学院,福建福州350002;福建农林大学林学院,福建福州350002;福建农林大学林学院,福建福州350002;福建农林大学园艺学院,福建福州350002;福建农林大学林学院,福建福州350002 【正文语种】中 文

金线莲Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.为兰科(Orchidaceae)开唇兰属植物[1-2],是传统珍贵药材,含糖类、牛磺酸、强心甙类、酯类、生物碱、甾体,多种氨基酸,微量元素及无机元素等,常用于治疗糖尿病、风湿性关节炎、肺热咳嗽、破伤风、急慢性肝炎等[3-4]。目前,关于金线莲的活性成分[5-10]、组织培养[11-15]、栽培[16-18]等报道较多,但对于光照强度、栽培模式对金线莲的生长和品质变化研究仍较少。本试验通过对不同光照强度与不同栽培模式下大面积种植对金线莲生长与品质影响进行研究,探讨不同光照强度和栽培模式下金线莲形态、产量、主要药用成分黄酮和多糖的动态变化规律,确定金线莲适宜栽培模式和最佳采收时间,为金线莲林下仿生种植提供可靠参考数据和技术支持。

南靖县金线莲林下种植技术

南靖县金线莲林下种植技术

南靖县金线莲林下种植技术

陈汉宗

【期刊名称】《福建农业》

【年(卷),期】2013(000)011

【摘 要】南靖县是中国金线莲之乡,近几年,我县金线莲企业采取"公司+农户+基地"形式与农民合作发展订单生产,公司和农民签订协议书,由公司提供种苗、技术服务并回购产品,农民利用所在林地搭建简易棚或天然林下套种金线莲获取工资报酬,走出一条从天然林下采集野生金线莲种质资源到利用人工组培快繁技术工厂化生产种苗。

【总页数】2页(P22-23)

【作 者】陈汉宗

【作者单位】南靖县农业局

【正文语种】中 文

【相关文献】

1.喀斯特林下石灰岩上金线莲种植技术研究2.林下套种金线莲技术与林下经济产业发展策略研究3.林下套种金线莲技术与林下经济产业发展策略研究4.金线莲的林下种植技术与效益分析5.天然次生林下金线莲种植技术

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金线莲研究的现状与展望

金线莲研究的现状与展望

第25卷第2期2007年6月贵州科学

GUIZHOUSCIENCEV01.25.No.2Jun.2007

金线莲研究的现状与展望

张以忠1,邓琳琼2,黄丽华3,陈坤浩1

(1.毕节学院环境与生命科学系,贵州毕节551700;2.毕节学院岩溶研究所,贵州毕节551700;3.贵州科学院,贵州贵阳550001)

摘要阐述了金线莲的地理分布、生态环境、原植物、自然资源匮乏的原目、人工培养、化学成分、药理活性及其应用等,并对金线莲今后的研究作了展望

关键词:金线莲;生态环境;原植物;化学成分;药理活性中图分类号Q949.7l+8.43;Q948文献标识码A文章编号1003—6563(2007)02—0081一04

S’IIATUSANDPROSPECTOFRESEARCHONANOECTOCHⅡ。USROX.

BURGHⅡz删ⅣGM一舶增1,DEⅣG踟一gW,黝ⅣG厶一ljl眦3,勰驯拖凡一^∞1

(1.Departme呲ofEnvir0砌ent8ndI施Science,BijieCoⅡege,Bijie551700;2.Institmeofl(a瑙t,BijieCouege,Bijie551700;3.GuizhouAcademyofSciences,Guiy蚰g,550001)

ABS’I雌CTnegeogra出cdis袖tni∞,ecol晒cale删瑚ment,ori百n8lp1锄t,n咖ralres伽∞e撇cie眦y,cm-

v砒i∞,chenlicalcomposition,ph舢colo舀cacti“ty肋dtlle印pHcationofAnoectocllilusR0曲llrI蛐iwem他viewed.Andt11epr∞pectofitsresearchwasdiscussed.KEYwORDSAnoectocllilllsRoxb哦灿i;ecol晒cale耐瑚mem;耐ginalpl舭t;cheIllicalo咖posid∞;pba珊a阶l晒cacd、rit)r

花叶开唇兰组培快繁技术的研究

花叶开唇兰组培快繁技术的研究

安徽农业科学,Journal ofAnhui Agri.Sci.2007,35(2):380,382 责任编辑周娜责任校对胡剑胜 

花叶开唇兰组培快繁技术的研究 

曹受金(中南林业科技大学,湖南长沙4l0oo4) 

摘要对花叶开唇兰组织培养中外植体的选择、芽的诱导、继代增殖、壮苗培养和生根诱导进行3"z ̄3E。试验结果表明,运用正交试 验筛选出快速生芽的最佳培养基为:MS+6-A 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+ ̄35 L+琼脂6 g/L;生根的最佳培养基为:1/2 MS+NAA 0,5 mCL。分析比较出芽长为1,5 cm,叶长为1.5 cm,叶数为2 ̄3片的兰花苗有利于生根。 关键词花叶开唇兰;组织培养;原球茎 中图分类号Q943.1 文献标识码A 文章编号o517—6611(2007)02—00380一O1 

花叶开唇兰(Anoectochilus roxburghii)俗称金线莲、金 

线草,为多年生热带陆生兰,是民间珍稀名贵中草药,具极 

高经济价值,同时也是一种观赏价值较高的室内观叶植物Ⅲ。 

随着森林不断砍伐,花叶开唇兰的生长环境遭到严重破坏, 

野生资源日趋减少,正面临灭绝的危险。为满足市场的需要 

和保护野生植物资源,笔者利用其茎尖和顶芽为外植体开 

展花叶开唇兰组织培养f2】,为花叶开唇兰遗传资源的保存和 

开发利用及其工厂化生产提供参考。 

1材料与方法 

1.1材料以花叶开唇兰(植株6节高,茎径大于0.6cm) 

的茎尖和顶芽为外植体『31。 

1.2方法 

1.2.1材料的表面灭菌。取5~10 cm的新芽,从植株茎部切 

离。先用洗衣粉刷洗,充分洗净后将材料再切取1-2 cm左 

右,先在浓度75%的酒精中处理30 s,转人浓度0.1%氯化 

汞溶液中10 min,灭菌后用无菌水冲洗数次,再放到灭菌滤 

纸上吸干水分,然后在解剖镜下无菌操作剥取茎尖和顶芽。 

一般茎尖大于2 mm,带2个原叶基,接种到培养基中。 

金线莲的药用价值与开发

金线莲的药用价值与开发

金线莲的药用价值与开发

钟岑生

(广西农科院情报所 南宁 530007)

金线莲(Anoectochilusroxburghii(Wall.)Lindl.)即花叶开唇兰,又称金丝线、金线兰、虎头蕉、金蚕等,为兰科开唇兰属

多年生草本植物。

1 特性及分布金线莲属植物有30多种。

一般分布在海

拔300—1000米的丘陵区,印度、喜马拉雅山

脉及东南亚各地,我国南方部分省区都有分

布,广西主要分布在防城、上思、龙州、武鸣、

隆安、融水、鹿寨、金秀、桂平、蒙山、贺县等市

县。金线莲性喜凉爽、荫湿、弱光或散射光的

生境,尤其喜生长于上有常绿阔叶遮阳,下有

枯枝落叶铺被的沟边、石壁、树兜等阴湿环

境,以及有机质含量高,疏松、通气、透水、含

水量25%—24%,pH值515—615的森林腐

殖土或黄壤、草甸土中。

金线莲为陆生兰,植株矮小,株高一般

10—18厘米。根茎细软,茎圆筒形,先端直立,基部成匍匐状,茎节明显。叶互生,叶柄基

部呈鞘状,叶片卵形或圆卵形,长2—5厘米,宽1—3厘米,先端急尖,基部圆,叶面黑紫

色,有金黄色的脉网,叶背面带淡紫红色,除

药用外,也是一种观赏价值极高的室内观叶

珍品。

2 药用价值

金线莲全草均可入药。其味甘微苦,性平

微寒,具有解毒、止痛、镇咳等功效。民间用于

治疗肺结核、肺热咳嗽、风湿性关节炎、小儿

惊风、跌打损伤、蛇伤等多种疾病,均有很好疗效。在福建、台湾等省和东南亚地区被视为珍稀名贵药材。近年来,金线莲用于治疗高血

压、糖尿病及肿瘤等疑难病症方面,日益引起

医药界的重视。民间称其为“神药”,台湾称为

“药王”,据1995年1月市场调查,新鲜生草

零售价格每台两(3715克)300元。由于金线

莲对生态环境要求严格,自然繁殖和生长缓

慢,加上鸟类嗜食和人工大量采集,野生资源

日益减少,已不能满足临床治疗需要,国内有

关部门正在开展金线莲快速繁殖研究。

3 金线莲的组织培养

金线莲种子微小,由未成熟的胚及数层

种皮细胞构成,一般不易发芽。只有在无菌状

大棚金线莲栽培主要病害及防治技术

大棚金线莲栽培主要病害及防治技术

大棚金线莲栽培主要病害及防治技术

林江波;王伟英;邹晖;戴艺民

【摘 要】金线莲大棚种植主要病害有白绢病、灰霉病、茎腐病和软腐病等,该文对上述主要病害的发病症状和特点进行总结,并提出防治措施.

【期刊名称】《福建农业科技》

【年(卷),期】2017(000)009

【总页数】2页(P34-35)

【关键词】金线莲;大棚;病害;防治技术

【作 者】林江波;王伟英;邹晖;戴艺民

【作者单位】福建省农业科学院亚热带农业研究所 363005;福建省农业科学院亚热带农业研究所 363005;福建省农业科学院亚热带农业研究所 363005;福建省农业科学院亚热带农业研究所 363005

【正文语种】中 文

金线莲,又称金线兰、金丝草,属兰科开唇兰属多年生草本植物,是多年生珍稀中草药,具有较高的观赏价值和药用价值。福建、台湾和浙江是金线莲的原产地[1]。福建是我国金线莲产量最大的省份之一,目前,全省金线莲企业有几十家,产值在20亿元以上。福建省的南靖、永安、武平、明溪、永春、厦门、邵武等地都有颇具规模的金线莲种植基地。金线莲富含黄酮、生物碱、多糖、皂苷、甾体化合物等成分[2-3],全草均可入药,性甘、味平,具有保肝、降血压、降血糖、抗肿瘤、提高免疫力等作用[4-5]。金线莲组培快繁技术的突破[6],使濒危植物金线莲规模种植成为可能。但是,大棚种植的金线莲由于营养水平、光温条件等栽培技术的改变,容易导致病害发生。本文对白绢病、灰霉病、茎腐病和软腐病等病害的病原、症状及发病特点进行总结,并提出防治技术,以供种植者参考。

1 白绢病

1.1 症状及发病特点

病原为罗氏小核菌(Sclerotiumrolfsii Sacc.)。在春夏梅雨季节和秋雨连绵时是白绢病高发期,主要为害根部和茎基,严重危害金线莲生长。刚开始发病时,在靠近基质的基部出现黄色病斑,呈水渍状,并向根部迅速扩展,引起茎秆腐烂、叶片萎蔫。严重的病部会产生白色辐射状绢丝状菌丝,并在基质表面蔓延。发病后期菌丝体会交织形成菜籽状菌核,开始呈白色,后变为黄色,最终为褐色[7]。

降低植物组培苗的污染方法

摘要:控制污染是植物组培苗工厂化生产中重要的技术环节,本文从外植体消毒、操作污

染和环境污染、继代培养中污染的防治、减少培养基中的有机成分等方面讨论了减少污染的

措施和方法。 关键词:组织培养污染防治方法

植物组培苗的工厂化生产在我国发展速度很快,组织培养技术日趋完善,在市场竞

争中,如何降低成本是提高经济效益的首要问题,组织培养中污染率的增加势必引起组培苗成本的提高,经济损失很大。因此,组织培养中降低污染率是工厂化生产中不可忽视的技术

环节[1]。植物组织培养过程中造成污染的原因是多方面的,应根据具体情况从不同方面预

防解决。

1 外植体的消毒

要尽量选取带菌少的材料,如果室外栽培的材料污染太严重,就要采取一些预防措

施:先将植物样本挖出,改为室内盆栽,喷布杀虫剂和杀菌剂,不便移栽的,可套塑料袋,

等它们长出新枝条后,再行采样接种。邢震等对比野外直接采用外植体和经室内黄化处理的

外植体组织培养效果分析发现,经黄化处理的外植体污染率低,但分化明显没有野外直接采用的外植体强[2]。先对材料进行低温预处理也有利于降低污染率,于福科等把刚采回的玫

瑰枝置于冰箱 7d后,选取带芽茎段培养,并与未经低温处理的材料作对照,发现低温处理

后的材料,污染和褐化均有不同程度的降低,且带芽茎段的萌动也明显提早。这可能与杂菌

或某些酶的活性在低温下受抑制或被冻结有关[3]。高成伟等在夏橙的组织培养中用10mg/

L培福朗溶液预处理 56h接种枝条也取得了较好的消毒效果[4]。 外植体消毒常用药剂有:70 %~75%的乙醇溶液,0.3-0.6%的次氯酸钠溶液和0.1 %

的升汞溶液。选用何种灭菌剂和灭菌时间根据操作者的经验来掌握,既要求将外植体表面的

微生物彻底杀死,又要求尽可能少伤害外植体组织和表层细胞。先用75%的酒精棉花擦拭

外植体材料再使用消毒药剂常能取得较好的消毒效果,尤其对有毛的材料。周俊辉等对玛丽安万年青采用减压灭菌,利用减压抽走植物组织中的气体使消毒剂更易进入植物内部,从而

生根培养基配方

生根培养基配方

生根培养基指的是一种专门用于促进植物生根的营养液,可以加速植物的根系生长,提高植物的存活率和生长质量。生根培养基主要由营养盐、植物激素和其他辅助物质组成,不同的植物需要的生根培养基配方也不一样,下面我们就来详细介绍一下生根培养基的配方。

一、基础配方

生根培养基的基础配方是由一定比例的基础营养盐组成,包括氮、磷、钾、镁、钙等元素,同时还加入一些维生素和氨基酸等有机物质。基础配方是生根培养基的基础,常见的基础成分有:

1、MS培养基(Murashige & Skoog medium):普遍适用于植物组织培养,由Murashige和Skoog于1962年开发出来,主要成分包括磷酸二氢钾、硝酸铵、硫酸镁、硝酸钾等。

2、1/2MS培养基:是MS培养基的一半浓度,适合于一些对营养要求不高的植物,如多肉植物、草本植物等。

3、B5培养基:是由Gamborg等人于1968年开发的一种细胞培养基,适用于多种植物的培养,主要成分包括硝酸钙、硝酸钾、磷酸二氢钾等。

二、植物激素 生根培养基中的植物激素可以促进植物的生长和分化,控制植物的生理过程,常用的植物激素有:

1、生长素(IAA):促进细胞分化和生长,可以加速根尖的细胞分裂和伸长。

2、植物生长素(BA):促进细胞分裂和生长,可以加快植物幼芽和花芽的生长和发育。

3、愈伤组织生长因子(TDZ):促进愈伤组织的细胞分裂和生长,特别适合于以愈伤组织为材料的植物生根。

三、其他辅助物质

1、维生素:能够促进植物生长和代谢,加入维生素C、维生素B12等可以加快植物生根。

2、有机酸:如柠檬酸、琥珀酸等有机酸可以降低培养基的pH值,促进植物的吸收和利用。

3、糖类:适量的蔗糖可以促进植物的代谢,提高幼根的质量和数量。

四、具体配方

以下是一些常用的植物的生根培养基配方:

1、白菜生根培养基:MS培养基+1mg/L IAA+0.5mg/L

BA+30g/L蔗糖+3g/L干酵母提取物。

名贵药材_金线莲_林宗铿

第卷福建热作科技28 Vol.28 No.2第期2 Fujian Science & Technology of Tropical Crops 2003- 45 - 金线莲是一种名贵珍稀的中药材,有药用植物之王的盛誉。由于金线莲野生资源稀少和药用价值高,目前许多地区都在开展金线莲种源保护和产品开发工作。但许多研究开发人员在工作中会遇到一些混淆不清的问题。本文作者根据几年来进行金线莲研究开发工作的实践经验,对于一些易混淆的地方进行总结,供有兴趣的朋友参考。 金线莲的种类和别称1 金线莲为兰科()开唇兰属金线Orchidaceae(莲属()多年生草本植物。)Anoectochilus Blume该属植物有多种,分布于中国、日本、印度、斯40里兰卡、尼泊尔及东南亚各国等。我国已经发现的野生种有种,分布于浙江、福建、江西、广东、8广西、海南、贵州、云南、西藏、台湾等省区。目前国内主要开发品种为花叶开唇兰(A. roxburghii ),也称为福建金线莲或广西金线(Wall.) Lindl.莲;福建金线莲和广西金线莲同属同种[1],但广西金线莲植株壮、叶片宽大、花轴粗、果实饱满,生长量比福建金线莲高近一倍,更适宜作为栽培品种。台湾有四种金线莲[2],分别为台湾金线莲(A. )、高雄恒春金线莲(formosanus Hayata()A. )、单囊开唇兰(koshunensis HayataA. inabai )、二囊开唇兰(),HayataA. lanceolatus Lindl供药用为台湾金线莲和高雄恒春金线莲二种,台()湾金线莲更为民间贵重药材之一。 金线莲的别称较多,主要有鸟人参、金蚕、石松、金石松、本山石松、树草莲、开唇兰、金钱草、金丝线、金线兰、金线屈腰、金线蕨龙、金线入骨消、雉鸡草、黄花糯子兰等。 野生金线莲的生境特点2 野生金线莲属中阴性植物,适应于阴凉潮湿的生态环境。其垂直分布幅度较广,从海拔300~1200米均有分布,尤其喜欢植被覆盖良好,荫闭度为60,林内凉爽,土壤腐殖质丰富,水湿条件优~80%越,林中常云雾弥漫,空气相对湿度的小85~95%环境。常见于山涧常绿阔叶林、针阔混交林或竹林下的枯枝落叶层、沟边、岩缝、石壁、树兜头等()阴湿处。 金线莲的生物学特性3 金线莲植株高一般为厘米,根茎细软。8~20 茎圆筒形肉质,先端直立,基部可成匍匐状,茎节明显。 叶互生具柄,其长度约为,宽约为1.5~3.5cm1.,卵形或卵圆形,前端急尖,平滑全缘,0~3.0cm叶面有光泽、墨绿色,叶背浅红或紫红色,叶柄基部薄膜包覆茎节及不定芽。 叶片中央主脉线条明显,成金黄色或黄白色,细小网状支脉均布于叶面。根据张振珏[3]等解剖观察,叶肉细胞中具有大而浓绿的叶绿体,液泡无色,而叶脉与叶上表皮之间的细胞较小,只具有小而色浅的叶绿体,液泡内具有桔黄色的细胞液,因而从叶上表面看叶面呈墨绿色而叶脉处为呈金黄色线条,极有观赏价值,故而得名金线莲。"" 茎顶部位抽苔开花,花序梗长,花8~13cm4~7枚,顶生;花茎披茸毛,总状花序,常由下往上依序开;花萼近肉质;花梗连同子房部位为细长微弯下勾状;苞片卵状披针形,长约厘米;后萼片圆1形,凸头状,和两瓣片形成兜状;侧萼片卵状长椭圆形,瓣片半卵形;唇瓣呈字形,隐藏于花萼Y内,末端白色,中间部份两侧前裂为黄色深梳状。 果实为棕色朔果,窄椭圆形;种子粉状细小。 金线莲的化学成分和药理作用4目前,对于金线莲体中化学成分和药理作用的研究仍然未见较为系统的报道。综合许多研究报道,金名贵药材“金线莲”林宗铿(福建省热带作物科学研究所漳州) 363001摘要本文对金线莲的种类和别称、生境特点、生物学特性、化学成分和药理作用、种苗繁育、人工栽培和采收:技术等方面进行了综述,并对以后的研究重点提出了看法。关键词金线莲 综述:中图分类号: 文献标识码: 文章编号:S567.9A----10062327(2003)02004503福建热作科技 - 46 -线莲体中的生物碱、氨基酸、糖类、皂甙、甾体、微量元素等化学成分可能对人体起到药理作用。据刘新裕、蔡新声等[2]对台湾金线莲的测量报道,金线莲中含水量为,脂类,蛋白质及87%2.7%2.2%糖类,其他的为灰份及粗纤维;金6.4%1.0%0.7%线莲为低热量药用植物之一,每干重的热量仅100g为卡;金线莲中维生素含量较高,每干重54C100g中含有;金线莲中钾、钙、镁、磷、钠、125mg铁、锰及锌等种矿质元素含量丰富,每干重8100g中分别含有、、、K806mgCa279mgMg270mg、、、、P193mgNa188mgFe51.7mgMn13.8mg。许文江等Zn9.3mg[1]报道对金线莲体中对人体必须的种氨基酸进行分析,其中游离氨基酸含量为17。另外据赖应辉等192.66mg/100g [4]报道金线莲体中多糖含量为、低聚糖为、还原13.326%11.243%糖为。9.739% 在金线莲的药理作用研究方面,所能查找的资料不多。中医认为金线莲性味甘、平,入肝、脾、肾三经,民间常用于清凉解热、祛风活血、止血、强心、利尿、降血糖、降血压等,可用于治肝亢、肝炎、肺病、肺痨、肿伤、胸腹痛、遗漏、遗精、牙痛、小儿发育不良、蛇类咬伤及肝脾诸脏器疾病的滋养。李鸣等[5]对野生、人工栽培和组织培养的金线莲进行药理作用比较研究,发现它们的品质基本一致,均可供药用。陈卓等[6]报道金线莲的水提物中存在降血糖的有效成分,验证了民间利用金线莲水煎剂治疗糖尿病的作法;台湾学者陈春雄也从高雄金线莲体中抽取出生物碱,证明其对实验动物具有强烈的镇痛作用。 金线莲的种苗繁育5 野生金线莲由于人们长期大量无节制的挖掘,目前国内野生的金线莲近乎枯绝。金线莲种子不具胚乳,无发芽能力,只有在真菌共生下,才促进种子萌发生长,但其发芽率很低;以分根法或扦插法方式繁殖,则需时间长且繁殖倍率不高。为保护这一名贵药材,许多单位和专家在年代末就已开1980展了卓有成效的保护工作,特别是利用植物组培快速繁殖种苗的技术,生产试管苗进行人工栽培,有效地保护了金线莲的种质资源,也极大地促进了金线莲的研究和开发工作。 利用种子进行无菌播种。将消毒后较老熟的金线莲种子用的过氧化氢溶液浸泡处理分钟,播3%3种在含有大量元素、花宝号、蛋1/2MS1g/L11g/L白胨的培养基上,天后萌芽率可达,并形成9035%根茎齐全的植株[7] 。 利用金线莲植株顶芽或侧芽进行试管无性快繁。近二十年来许多研究人员都有报道了其研究成果,但是所报道侧重点不尽相同。我们单位也是较早开展金线莲组培快繁技术研究单位之一,本所组培中心现收集有台湾金线莲、福建金线莲、广西金线莲等三个品种[8]。我们以金线莲植株的茎节为外植体,接种在附加、的MSBA5mg/LNAA0.5mg/L增殖培养基上,经天的培养,茎节处可萌发出较50为粗壮的丛生侧芽;将萌发的侧芽单个切下,接种在附加、、、MSNAA4mg/LIBA1mg/LKT0.2mg/L活性碳、香蕉泥的生根壮苗培养基上,3g/L100g/L培养天左右就可出瓶移栽。这套开发技术周期50短、成本低、可周年生产,适合用于金线莲的工厂化大量育苗见封。(3) 金线莲的生长习性和人工栽培技术6 金线莲为中阴性植物,喜弱光、高湿、凉爽的移栽环境。金线莲的生长适宜温度在~℃,高2024温易导致死亡。利用气流法测定,金线莲光饱和点为,光补偿点为,最大需光量不超过5000Lx400Lx,在金线莲的生长季节,光照强度应控制6000Lx在~。30005000Lx 因此人工栽培金线莲试管苗主要是采用设施栽培。选址方面一是可选择海拔在米以上,月份4001平均气温≥℃,月份平均气温≤℃,空气湿10727度≥,有林有水的山沟边,搭建简易大棚;二70%是模仿热带兰花的种植方式,在低海拔平地上建立可以控制温度、湿度、光照强度的温室。 试管苗移栽基质主要是要求疏松、透气、有机质丰富。经济方便的基质可选用森林腐殖土:粗沙,做成高畦或用育苗盘做立体种植,每平方米=5:1可种植试管苗~株或更密见封。200300(3) 在日常管理方面,大棚应是保持通风良好且湿润凉爽。科学浇水,金线莲喜多湿,应保持基质湿润,但过湿也会影响气生根的生长。施肥可用液体喷雾追施方式进行,选用尿素磷酸二氢0.3%+0.2%钾溶液喷施。高温、多湿、通风不良、场地不清洁等易引起病虫害主要病害有猝倒病、下转第页,(23)福建热作科技 - 23 -复合肥,生长中期,结合喷施浓度的10-15kg0.2%磷酸二氢钾、硼砂水溶液次。水份管理方面,2-3应勤浇水、轻浇水,经常保持土壤湿润为原则,晴天,一般每天浇水次。2-3 培土6.2 培土也是芹菜高产优质的关键措施之一,一般定植后天左右进行第一次培土,培土材料是选用10火烧土或经过筛细的垃圾土。并注意不使植株受伤。从定植到植株封行前一般培土次。2-3 篱笆围裙6.3 芹菜叶柄脆,易倒伏。在苗高时,在15-20cm畦四周每隔用竹篱笆做支架,后用稻草或芦30cm苇沿畦四周围起,围裙高。40-60cm 适时采收7 一般芹菜植株高左右,具有片真60-80cm6-8叶,可根据市场需求陆续采收,但收获不可晚,否则养分易向根部输送,造成产量和品质下降。 病虫防治8 主要虫害8.1 主要虫害有蚜虫、斑潜蝇。蚜虫用“大:10%功臣”可湿性粉剂倍或“一遍净”可湿性300010%粉剂倍斑潜蝇用“爱福丁”乳油3000;0.9%3000-倍或“灭蝇胺”可湿性粉剂400075%5000-8000倍。 主要病害8.2 主要病害有:叶斑病、斑枯病。叶斑病用80%“大生”可湿性粉剂倍或“甲基托布M-4575070%津”可湿性粉剂倍;斑枯病用“大生60080%M-”可湿性粉剂倍或“瑞毒霉锰锌”可湿4575025%性粉剂倍或“杀毒矾”可性湿粉剂倍防60064%500治。参考文献、中国蔬菜栽培学中国农业科学院蔬菜研究所主编1..、农药商品大全中国商业出版社2..1996,2..上接第页立枯病、茎枯病、黑斑病等,主要虫(46)害有蛞蝓、蜗牛、潜叶蝇、蝼蚁等,鸟、鼠也可造成危害。病虫害防治应以预防为主、生物防治为主,少喷有毒农药,禁用残留期长且高毒的农药。 金线莲人工栽培苗的采收7 金线莲人工栽培时间长短可根椐植株的生长情况和当地的气候条件决定,一般需种植个月以上6时间。采收后用风自然阴干或烘箱烘干较好,阳光下曝晒会使叶片变色,影响外观。金线莲的种植期间内生长量小。我们曾于年月种植一批金线199711莲试管苗(平地移栽),于年月份连根拔起19986采收,种植时间约为个月。对采收的金线莲清除7泥沙后测量,植株株高平均为,每株平均叶15.2cm片为片、叶长、叶宽、茎粗5.33.0cm1.9cm0.、根数条。平均每株鲜重为克,用26cm3.71.2784烘干箱进行烘干脱水,平均每株干重仅为0.0882克,干鲜为。/6.9% 结语8金线莲的种苗无性快繁技术目前已经研究地较为深入,能满足生产上的需要。但是对于金线莲药理作用的研究和低海拔人工移栽技术方面的报导仍然较少,有必要加强这一方面的研究。另外能否克服金线莲在移栽过程中生长缓慢的问题,也值得研究人员进一步探索。参考文献、许文江陈裕等药用金线莲植物资源的研究福建热作科1,..技,2000,25(4):9-10.、刘新裕蔡新声等金线莲大量繁殖与栽培后之生育性2,.状、种间比较及营养成分研究中华农业研究. .1987,36(4):357-366.、陈振珏陈裕等花开唇叶兰营养体的结构云南植物研究3,...1992,14(1):45-48.、赖应辉吴绵忠中药材4,..1997,20(2):84.、李鸣邹丹种不同来源金线莲的药理研究海峡药学5,.3..1995,7(4):12-14.、陈卓黄自强金线莲及其提取物降血糖实验研究福建医6,..科大学学报.2000,34(4):350-353、萧翌柱陈威臣等台湾金线莲之组组织织培养Ⅰ改进种7,..子萌芽率之研究中华农业研究..1995,44(3):279-286.、黄德贵陈振东金线莲组织培养与人工栽植研究Ⅱ芽的8,. .快速繁殖福建热作科技..1994,19(1):1-6.

滇越金线莲快速繁殖技术研究

第19卷 第3期文山师范高等专科学校学报Vol119 No132006年9月JOURNALOFWENSHANTEACHERSCOLLEGESep12006

滇越金线莲快速繁殖技术研究

张 铁1,田雪琪1,李 彬2

(11文山师范高等专科学校生物资源开发研究中心,云南文山663000;

21文山民族职业技术学校,云南 文山 663000)

[收稿日期]2006-05-12[基金项目]文山师范高等专科学校学术科研基金项目(2003201)[作者简介]张铁(1969-),男,文山师专实验师,主要从事生物技术研究。[摘要]通过滇越金线莲种子无菌诱导和茎诱导芽以及丛生芽增殖、生根等试验,得出结论:滇越金线莲

种子在不含激素的Hyponex1培养基上有较好萌发率,并且在添加10%椰乳后原球茎能分化出健壮的苗。外植茎在Hyponexl+6-BA1mg/L+NAA0101/L培养基上诱导产生芽的几率最高;最佳增殖培养基是Hyponexl+

BA015mg/L+NAA011mg/L;生根培养基是Hyponexl+6-BA0105mg/L+NAA011mg/L。

[关键词]滇越金线莲;兰科;开唇兰属;花叶开唇兰;组织培养;组培快繁

[中图分类号] Q943 [文献标识码] A [文章编号] 1671-3303(2006)03-0110-05

滇越金线莲(Anoectochiluschapaensis)为兰科

开唇兰属多年生草本植物,是一种名贵珍稀的中药材,主要分布于云南文山与越南交界的边境线一

带[1](P26-28)。由于其生物学特征及药效与同属植物花

叶开唇兰相近[2],被当地药农无度采挖,加之生态环

境的破坏,这一野生资源日趋枯竭。从文献资料看,对于滇越金线莲研究甚少,组培快繁研究还未见报

导,作者以滇越金线莲种子和茎为材料,利用植物组

织培养技术,建立了人工快繁技术体系,为保护、开

发和利用这一资源奠定基础。1 材料与方法

111 实验材料

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