固相萃取_液相色谱_串联质谱法测_省略_蔬菜中4种有机磷农药及其代谢产物_刘永
固相萃取-气相色谱质谱法测定饮用水中9种农药残留
固相萃取-气相色谱质谱法测定饮用水中9种农药残留邱姚瑶，谷贵章，曹秋虹，王新财*，曾 坤（湖州市食品药品检验研究院，浙江湖州 313000）摘 要：目的：建立气相色谱-质谱同时测定饮用水中常见9种农药残留的测定方法。
方法：农药组分经Oasis HLB固相萃取柱富集，乙酸乙酯/正己烷（1∶1）混合溶剂洗脱，气相色谱-质谱检测，标准工作曲线外标法定量。
结果：9种农药残留在0～5.000 mg·L-1线性关系良好，相关系数（R2）大于0.998，加标回收率为75.7～103.0%，9种农药的定量限为0.003～0.075 µg·L-1，精密度为1.1%～7.4%（n=6）。
结论：该方法操作简便、重复性好、准确度高，适用于饮用水中9种常见农药残留的测定。
关键词：固相萃取；气相色谱-质谱法；农药残留；饮用水Determination of 9 Pesticide Residues of Drinking Waterby Solid Phase Extraction-Gas Chromatography MassSpectrometryQIU Yaoyao, GU Guizhang, CAO Qiuhong, WANG Xincai*, ZENG Kun(Huzhou Institute for Food and Drug Control, Huzhou 313000, China)Abstract: Objective: To establish a method of simultaneous determination of 9 pesticide residues of drinking water by gas chromatography-mass spectrometry. Method: Pesticide residues were extracted by Oasis HLB solid phase extraction column, eluted by mixed solvent ethyl acetate/n-hexane (1∶1), detected by gas chromatography- mass spectrometry, and quantified by external standard method based on standard working curve. Result: The linear relationships of 9 analytes were good in the range of 0～5.000 mg·L-1, and their correlation coefficients (R2) were higher than 0.998, their average recoveries of the method ranged among 75.7～103.0%, the limits of quantitation of 9 pesticides were 0.003～0.075 µg·L-1, and the relative standard deviation was among was 1.1%～7.4%（n=6）. Conclusion: This method is easy to operate, has good precision and accuracy, and is suitable for determination of 9 common pesticide residues of drinking water.Keywords: solid phase extraction; gas chromatography-mass spectrometry; pesticide residues; drinking water我国是生产和使用农药最多的国家。
固相萃取-GC／PFPD法测定水中的有机磷农药
介 质。
２ ２ ２ 甲醇 （ ．． 色谱 纯 ） 。
２２ ３ 丙酮 （ ．． 色谱 纯 ） 。
摘 要 ：采 用 固相 萃取 法 萃取 ，以毛 细 管 柱 气相 色谱 法一 脉 冲 火焰 光度 检 测 器 （ ＧＣ／ Ｆ Ｄ ）同 时定量 测 ＰＰ
定 了水 中的七种有机磷农药，研 究了有机磷农 药的 气相 色谱 法分析条件 ，平均加标 回收率的范围为８ ． 一 １） （ ％
１）． （｛ ３） ％，方 法的 最低 检 测 限在（２）（５ ｇ Ｌ 间 ，相 对标 准偏 差 （ ＝ ） （ ） ５ ／之 ． ～． ｎ ５）在 ２４ ％－ ．１ 间 ，可 用 于水 中 ．５ ８２ ％之
节 ｐ 呈 弱酸 性 ，水 样 有余 氯 时 用硫 代 硫酸 钠 脱 氯 ， Ｈ
预先用 ５ ｍＬ甲醇 活 化 Ｗａｅｓ Ｏａｉ ＨＬ ｔｒ ｓ Ｂ小柱 ，再 ｓ 用５ ｍＬ蒸馏 水通过 小柱 ，水 样以 ５ ／ ｎ的流速 通 ｍＬ ｍｉ
过经 活化 的小柱 ，富集完 成后 小柱在 氮气 条件下吹 干
（ ．ｒｇ； ｏ ） ０５ ａ ３ｏ。 ２ ２ 试 剂 ．
按 照试验方 法 ， 对标 准溶液 用程序升温 进样检 测 ， 七种有 机磷农药 的保 留时 间见表 １ 。分离情 况 见图 １ 。 ２４３ 固相萃 取柱 的选 择 ．． 本试 验采 用 四种 固相萃 取柱 对水 中有机磷 农药进 行富集 ，在水 样 中加 入一 定浓度 的有机磷 农药混 合标 准溶 液 ，按 照试 验 方 法 进 行 试 验 ，采 用 的 固相 萃 取
５ ｎ，再 用洗 脱液 （ ｍｉ 甲醇 ： 丙酮 ＝ ０： ０ ７ ３ ）洗脱 ，定 容至 １ ｍＬ，供测定 用 。
分散液相微萃取-气相色谱-串联质谱法快速测定蔬菜中8种亲脂类农药残留
相 色 谱 级 ， 海 市 浙 东 特 种 试 剂 厂 ） 甲 醇 （ 相 色 临 、 液 谱 级 ， 国 Ｔ ｄａ公 司 ） 氯 苯 和 四 氯 化 碳 （ 析 纯 ， 美 ｅｉ ； 分 江苏 永华 精 细 化 学 有 限公 司 ） 四 氯 乙烯 （ 析 纯 ， 、 分 杭州 高 晶 精 细 化 工 有 限 公 司 ） ；Ⅳ－ 基 乙 二 胺 丙
（ ． ｏ ｒ ； 撞 能 量 ： 对 每 种 化 合 物 进 行 优 １５ ｍＴ ｒ ） 碰 针
化 ； 定 方 式 ： 反 应 监 测 （ Ｍ ） 其 他 质 谱 参 数 测 多 ＭＲ 。 及 各 农 药 的保 留 时 问见 表 １ 。
表 １ ８种 农 药 的保 留 时 间 及 在 多 反 应 监 测 模 式 下 的 定 性 和定 量 离子 、 测 离子 对 和 碰 撞 能 量 监
于一 体 ， 操 作 简单 、 速 、 本 低 、 集 倍 数 高 ， 且 快 成 富 是
一
种 极 具 应 用 潜 力 的样 品 前 处 理 方 法 。 但 其 在 农 药
质 谱 条 件 ： 子 轰 击 源 （ Ｉ ； 子 源 温度 ２０ 电 Ｅ ）离 ３ ℃ ； 输 线 温 度 ２ ０ ℃ ； 体 温 度 ４ ℃ ； 剂 延 时 传 ５ 腔 Ｏ 溶 ４ ０ｍｉ ； 段 扫 描 。 碰 撞 气 ： 气 ， 力 为 ０ ２ Ｐ ． ｎ 分 氩 压 ． ａ
残 留分 析 方 面 的 应 用 非 常 少 ， 用 分 散 液 相 微 萃 取 采
技 术 与气 相 色谱 － 串联 质 谱 （ — ／ ） 术 结 合 ＧＣ ＭＳ ＭＳ 技 应 用在 蔬 菜 中的农 药残 留分 析 尚未 见报 道 。本文将
这 两 种 技 术 结 合 ， 立 了 蔬 菜 中 ８种 亲 脂 类 农 药 残 建 留的快 速分 析方 法 。
固相萃取-气相色谱法测定香蕉中的有机磷农药
ｓ ｏ ｄ ｉ ｕ ｍ ｓ ｕ ｌ ｆ ａ ｔ ｅ ， ｓ ｏ ｌ ｉ ｄ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ（ Ｓ Ｐ Ｅ ） ｐ ｕ ｒ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ， ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｅ ｄ ｂ ｙ Ｎｉ ｔ ｒ ｏ ｇ ｅ ｎ ｂ ｌ ｏ ｗｉ ｎ ｇ ｉ ｎ ｓ ｔ ｒ ｕ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｎ ｄ
Ｌ Ｉ Ｃｈ ｕ ｎ ＺＨ ＡＯ Ｄｏ ｎ ｇ ｘ ｉ ｎ ｇ Ｌ Ｉ Ｑｉ ｎ Ｗ ＡＮＧ Ｓ ｈ ｕ ｍ ｎ ｇ
（ Ｈｏ ｎ ｇ ｈ ｅ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｔ ｒ ｏ ｐ ｉ ｃ ａ ｌ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｏ ｆ Ｙｕ ｎ ｎ ａ ｎ ，Ｈｅ ｋ ｏ ｕ ，Ｙ ｕ ｎ ｎ ａ ｎ ６ ６ １ ３ ０ ０ ）
ｄ ｅ ｔ ｅ ｍｉ ｒ ｎ ｅ ｄ ｂ ｙ ｎ ｉ ｔ ｒ ｏ ｇ ｅ ｎ — ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ｏ ｒ ｕ ｓ（ ＮＰ Ｄ）ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ ａ ｆ ｔ ｅ ｒ ａ ｃ ｅ ｔ ｏ ｎ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ，ｄ ｅ ｈ ｙ ｄ ｒ ａ ｔ ｅ ｄ ｂ ｙ ａ ｎ ｈ ｙ ｒｏ ｄ ｕ ｓ
的 方 法 ，采 用 氮 磷 检 测 器 （ Ｎ Ｐ Ｄ ） 气 相 色谱 法对 经 无 水 丙 酮 提 取 、Ｎ ａ Ｓ ０ 脱 水 、 固相 萃 取 净化 、氮 吹 仪 浓 缩 后 ，用
丙 酮 定 容 的 样 品进 行 测 定 。结 果 显 示 ，敌 敌 畏 、 乐果 、 毒死 蜱 、 辛 硫磷 、 丙 溴 磷 的 最 低 检 浓 度 分 别 为 ０ ． ０ １ ０ 、 ０ ． ０ ０ ８ 、 ０ ． ０ １ ２ 、 ０ ． ０ ０ ２ 、 ０ ． ０ ０ ８ ｍ ｇ ／ ｋ ｇ ，加标 回 收率 在 ７ ８ ． ８ ２ ％ ～１ ０ １ ． ５ ％ ，相 对 标 准 偏 差 为 ３ ． ７ ％ ～６ ． ２ ％ 。 表 明 该 方 法
固相萃取-高效液相色谱-串联质谱联用测定竹笋中残留的7种杀虫剂农药
ＨＰ Ｌ Ｃ 条 件 色 谱 柱 ： Ｗａ ｔ ｅ ｒ ｓ Ａ ｔ ｌ ａ ｎ ｔ ｉ ｓ Ｔ ３柱
（ １ ５ ０ ｍｍ × ２ ． １ ｍｍ， ５ ｍ） ； 柱温 ， ３ ５ ｏ Ｃ； 进样量 ： １ ０ Ｌ 。流动 相 Ａ： ０ ． １ ％ 甲酸水 溶液 （ 含５ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ
・
１ １ ８・
色
谱
第３ １卷
经 营方 式 的改变 及 呋喃丹 等高毒 高残 留防治药 剂 的 禁用 ， 使得 毒死 蜱等 高 效 低 毒 的杀 虫 剂 逐 渐被 广 泛 使用 ’ 。这类 高 效低 毒 的化 学农 药 的使 用 控制 了 病虫 害 的发生 ， 提高 了生 产力 ， 然而 它们 可通 过食物 链进 入人 体 ， 威 胁 人 类 的 健 康 。 因 此 ， 日本 和 欧 盟作 为竹 笋 的主要 进 口 国 ， 均 制 订 了竹 笋 中农 药 的
消除 和浓 缩 等 ） 已十 分 迫 切 。 目前 ， 关 于 竹 笋 中农 药残 留 分 析 方 法 的报 道 较 少 ， 且 主 要 以ＧＣ — ＭＳ ） 和液相 色谱 － 紫
外检 测 （ Ｌ Ｃ － Ｕ Ｖ） 为 检 测 手 段 。Ｇ Ｃ 和 ＧＣ — ＭＳ
氮气 吹干 。用 ４ ｍＬ乙腈 充 分 溶 解 残余 物 ， 上 样 于 Ｐ Ｓ Ａ 固相 萃取 柱 （ 预先用 ５ ｍＬ乙腈 平 衡 ） 净化 ， 收 集 流 出液 ， 氮气 吹干； 用 乙腈 溶 解 、 定容 至 １ ． ０ ｍＬ 后， 用０ ． ２ ２ ｍ 滤膜 过滤到进 样瓶 中， 供 Ｌ Ｃ — ＭＳ ／
最大 残 留限量 （ ＭＲ Ｌ ） ， 如欧 盟 规定 竹 笋 中毒 死 蜱 和 氟虫 腈 的 ＭＲ Ｌ值 分 别 为 ０ ． ０ ５和 ０ ． ０ ０ ５ ｍｇ ／ ｋ ｇ ， 日 本规 定 竹笋 中毒死 蜱 、 氟 虫腈 和辛 硫磷 的 ＭＲ Ｌ值 分
QuEChERS-_超高效液相色谱串联质谱法测定鸡蛋中甲硝唑和地美硝唑药物残留量
QuEChERS-超高效液相色谱串联质谱法测定 鸡蛋中甲硝唑和地美硝唑药物残留量王 易（广东省惠州市质量计量监督检测所，广东惠州 516000）摘 要：建立了QuEChERS结合超高效液相色谱串联质谱法测定鸡蛋中甲硝唑和地美硝唑残留量的方法。
样品经乙腈提取，QuEChERS净化后，使用Agilent Eclipse Plus C18柱分离，以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行洗脱，多反应监测模式下检测，外标法定量。
结果表明，甲硝唑和地美硝唑的质量浓度在0～50 ng·mL-1时线性关系良好（r2＞0.999），检出限分别为0.002 μg·kg-1、0.007 μg·kg-1；在低、中、高3个添加水平下甲硝唑和地美硝唑的加标回收率分别为95.79%～97.80%、95.66%～100.10%。
该方法前处理简单、重现性好、灵敏度高，适用于鸡蛋中甲硝唑、地美硝唑的测定。
关键词：鸡蛋；甲硝唑；地美硝唑；QuEChERS；超高效液相色谱串联质谱法Determination of Metronidazole and Dimetridazole Residues in Eggs by QuEChERS Combined with Ultra-High Performance Liquid Chromatography Tandem-Mass SpectrometryWANG Yi(Guangdong Huizhou Quality and Measuring Supervision Testing Institute, Huizhou 516000, China) Abstract: A QuEChERS combined with ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method was established to determine the residues of metronidazole and dimetridazole in eggs. The sample was extracted with acetonitrile, purified with QuEChERS, and separated using an Agilent Eclipse Plus C18 column. The mobile phase was eluted with acetonitrile and 0.1% formic acid aqueous solution, and detected under multiple reaction monitoring mode. The external standard method was used for quantification. The results showed that the mass concentrations of metronidazole and dimetridazole were linear in the range of 0～50 ng·mL-1 (r2＞0.999), and the detection limits were 0.002 μg·kg-1 and 0.007 μg·kg-1; under low, medium and high addition levels, the recoveries were 95.79%～97.80%, 95.66%～100.10% respectively. The method is simple, reproducible and sensitive, and is suitable for the determination of metronidazole and dimetridazole in eggs.Keywords: eggs; metronidazole; dimetridazole; QuEChERS; ultra-high performance liquid chromatography tandem-mass spectrometry鸡蛋含有非常丰富的卵磷脂、脂肪、蛋白质、微生物、矿物质、微量元素等营养成分，被誉为“全营养”食品[1]，现已成为日常饮食中的重要组成部分。
高效液相色谱—质谱联用技术测定食品中有害物质残留分析方法的研究
高效液相色谱—质谱联用技术测定食品中有害物质残留分析方法的研究一、本文概述高效液相色谱—质谱联用技术（HPLCMS）是一种广泛应用于食品安全领域的分析手段，其结合了高效液相色谱的分离能力和质谱的鉴定与定量能力，为食品中有害物质残留的检测提供了一种高效、准确的方法。
本文旨在探讨HPLCMS技术在食品中有害物质残留分析方法研究中的应用和发展。
本文将介绍HPLCMS技术的基本原理及其在食品分析中的重要性。
接着，将详细阐述该技术在检测食品中特定有害物质，如农药残留、重金属、非法添加剂等的应用案例。
本文还将讨论HPLCMS技术在实际应用中面临的挑战，包括样品前处理、方法开发、定量准确性和仪器灵敏度等方面。
文章将展望HPLCMS技术在未来食品安全监测中的潜在发展趋势，以及如何通过技术创新进一步提升分析方法的效能和适用性。
通过对HPLCMS技术在食品中有害物质残留分析方法研究的深入探讨，本文期望为食品安全监管机构、食品生产企业以及相关科研工作者提供有价值的参考和指导，共同促进食品安全保障水平的提升。
二、高效液相色谱—质谱联用技术原理高效液相色谱质谱联用技术（LCMS）是一种将液相色谱（LC）和质谱（MS）技术相结合的分析方法。
它通过液相色谱技术对样品进行分离，然后利用质谱技术对分离后的组分进行检测和分析。
液相色谱分离是基于样品中各组分在流动相和固定相之间的分配差异。
样品溶液通过高压泵进入色谱柱，流动相携带样品通过固定相。
由于不同组分在两相中的分配系数不同，它们在色谱柱中的移动速度也不同，从而实现分离。
分离后的组分按顺序从色谱柱中流出。
分离后的组分进入质谱仪后，首先被离子化，产生带电的离子。
这些离子通过质量分析器，根据质荷比（mz）进行分离。
检测器检测到不同质荷比的离子，并记录其相对丰度。
通过分析质谱图，可以确定样品中各组分的分子质量、结构信息以及相对含量。
LCMS技术具有高分离能力、高灵敏度、高选择性和结构分析能力等特点，可以用于食品中有害物质残留的分析，如农药、兽药残留、违禁物质和有害添加剂等。
有机磷
食品中有机农药残留分析的检测
采集 LOGO
保存 分析检测
前处理
样品的采集与保存
采集样品总的要求是随机性和代表性，因此应尽可 能采集不同的样品或相当数量的试样。采样时手、 容器和工具必须彻底清洗干净，以免污染样品。还 应避免在小区边缘取样，因为喷雾漂移或重叠会污 染边缘。有的对照区如用别的药剂处理要注明，并 研究是否会干扰测定结果。
通过抑制率可以判断出样品中是 否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯 类农药的存在。
LOGO
GB/T14553-2003
本标准规定了利用气相色谱(带NPD检测器或FPD 检测器)检测粮食 (大米、小麦、玉米) 、水果(苹果、 梨、桃等) 、蔬菜(黄瓜、 大白菜、西红柿)中 速灭磷(mevinphos) 、甲拌磷(phorate) 、 二嗓磷 (diazinon) 、异稻瘟净(iprobenfos) 、 甲基对硫磷 (on-methyl) 、杀螟硫磷(fenitrothion) 、澳硫磷 (bromophos) 、水胺硫磷(isocarbophos) 、稻丰散 (hoate ) 、杀扑磷(methidathion)等多组分残留量。
LOGO
关键在“洗、导、排”、解毒,防止并发症
1
清除毒物： 敌百虫中毒 不能用碳酸 氢钠溶液洗 胃。
2
导泻:尽量 不用硫酸 镁
3
解毒药：解磷 定（胆碱酯酶 复能剂）和阿 托品（胆碱能 神经抑制剂 ）
洗胃时严防并发症 ：
a、吸入性肺炎
b、上消化道出血 c 、急性胃扩张 d、胃穿孔
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GB/T5009.199-2003
•化学方法(如磺化法)
•低温冷冻柱法
由于某些样品组成复杂，提取后往往还要经过净 化步骤以达到待测物与干扰杂质的分离。
浅谈质谱在食品安全检测中的应用
浅谈质谱在食品安全检测中的应用摘要:随着人们生活水平的提高和食品行业的繁荣发展，食品营养和食品安全越来越受到人们的关注。
在线分析仪器能够及时、准确地分析食品成分，因此得到越来越多的应用。
其中，质谱技术以其高灵敏度、高精度和准确度以及高通量越来越成为食品安全检测中不可或缺的分析手段.关键词：质谱；食品；分析检测；应用前言食品安全问题已经是一个全球话题，近年来,国际上食品安全恶性事件不断发生，造成了巨大的经济损失。
目前，食品安全问题主要包括以下几个方面：化学性危害、生物毒素、微生物性危害、食品掺假和基因工程食品的安全性问题。
根据世界卫生组织和疾病控制中心的报告[1]，欧洲的食品污染事件40％发生在个体家庭里.而仅仅美国，每年就有7600万人发生食源性疾病和5000人死亡。
在我国，微生物污染、农药残留江河湖泊和近海等水源的污染以及非法添加激素和药物等是食品不安全的重要因素。
“菜篮子”的化学安全性问题以农药和兽药残留、环境污染物和真菌毒素等污染较为突出，蔬菜水果农药（如氯氰菊酯）残留超标、非法使用兽药（如瘦肉精)引起的急性中毒等事件严重影响了我国食品业的发展[2]。
随着人们生活水平的提高和食品行业的繁荣发展，食品营养和食品安全越来越受到人们的关注。
在线分析仪器能够及时、准确地分析食品成分,因此得到越来越多的应用。
其中，质谱仪由于测量范围广、分析速度快、自动化程度高、仪器稳定性和可靠性好等特点，已成为食品行业中相当重要的仪器。
质谱仪又称质谱计（mass spectrometer，MS)，是根据带电粒子在电磁场中能够偏转,按物质原子、分子或分子碎片的质量差异进行分离和检测物质组成的一类仪器，其最重要的应用是分离同位素并测定其原子及相对丰度。
它可以用来检测小分子化合物、生物大分子以及元素组成等.质谱技术不仅可以得到相对分子质量信息，还可以通过碎片分析得到被分析物质的结构信息,因此可以应用于定性和定量分析［3]。
固相萃取的原理方法等
固相萃取技术■在过去的二十多年中，固相萃取作为化学分离和纯化的一个强有力工具出现了。
从痕量样品的前处理到工业规模的化学分离，吸附剂萃取在制药、精细化工、生物医学、食品分析、有机合成、环境和其他领域起着越来越重要的作用。
■固相萃取的原理在过去的二十多年中，固相萃取作为化学分离和纯化的一个强有力工具出现了。
从痕量样品的前处理到工业规模的化学分离，吸附剂萃取在制药、精细化工、生物医学、食品分析、有机合成、环境和其他领域起着越来越重要的作用。
固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。
在固相萃取中，固相对分离物的吸附力比溶解分离物的溶剂更大。
当样品溶液通过吸附剂床时，分离物浓缩在其表面，其他样品成分通过吸附剂床；通过只吸附分离物而不吸附其他样品成分的吸附剂，可以得到高纯度和浓缩的分离物。
保留和洗脱在固相萃取中最通常的方法是将固体吸附剂装在一个针筒状柱子里，使样品溶液通过吸附剂床，样品中的化合物或通过吸附剂或保留在吸附剂上（依靠吸附剂对溶剂的相对吸附）。
“保留”是一种存在于吸附剂和分离物分子间吸引的现象，造成当样品溶液通过吸附剂床时，分离物在吸附剂上不移动。
保留是三个因素的作用：分离物、溶剂和吸附剂。
所以，一个给定的分离物的保留行为在不同溶剂和吸附剂存在下是变化的。
“洗脱”是一种保留在吸附剂上的分离物从吸附剂上去除的过程，这通过加入一种对分离物的吸引比吸附剂更强的溶剂来完成。
容量和选择性吸附剂的容量是在最优条件下，单位吸附剂的量能够保留一个强保留分离物的总量。
不同键合硅胶吸附剂的容量变化范围很大。
选择性是吸附剂区别分离物和其他样品基质化合物的能力，也就是说，保留分离物去除其他样品化合物。
一个高选择性吸附剂是从样品基质中仅保留分离物的吸附剂。
吸附剂选择性是三个参数的作用：分离物的化学结构、吸附剂的性质和样品基质的组成。
固相萃取的简要过程1.一个样品包括分离物和干扰物通过吸附剂；2.吸附剂选择性的保留分离物和一些干扰物，其他干扰物通过吸附剂；3.用适当的溶剂淋洗吸附剂，使先前保留的干扰物选择性的淋洗掉，分离物保留在吸附剂床上；4.纯化、浓缩的分离物从吸附剂上淋洗下来。
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2014年2月Vol．32No．2February2014ChineseJournalofChromatography139～144
研究论文DOI：10．3724/SP．J．1123．2013．10008
*通讯联系人．E-mail：songnefu@126．com．基金项目：国家质检总局课题（2009IK177）．收稿日期：2013-10-11
固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中4种有机磷农药及其代谢产物
刘永1，2，唐英斐2，3，宋金凤2*，胡志伟2（1．黑龙江出入境检验检疫局技术中心，黑龙江哈尔滨150001；2．东北林业大学，黑龙江哈尔滨150040；3．黑龙江工商行政管理局，黑龙江哈尔滨150018）
摘要：在蔬菜种植中经常使用的有机磷农药马拉硫磷、甲基对硫磷、敌百虫及乙酰甲胺磷可能转化的主要代谢产物分别为O，O-二甲基二硫代磷酸酯、对硝基酚、敌敌畏及甲胺磷。根据蔬菜色素等基质的含量不同采用不同的净化方法，色素含量高的蔬菜采用活性炭和弗罗里硅土串联固相萃取小柱净化，其他蔬菜采用弗罗里硅土固相萃取小柱净化。色谱分离选择ACQUITYUPLCBEHHILIC色谱柱，以乙腈和5mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱，得到的分离效果较好；质谱采用电喷雾正或负离子电离、多反应监测模式检测。液相色谱-质谱检测的基质效应为15.3%～45.1%；4种有机磷农药及其代谢物的方法回收率为76.9%～102.8%，相对标准偏差为5.92%～10.19%；定量限范围为0.001～0.01mg/L；在0.01～1.00mg/L范围内线性相关系数为0.9982～0.9999。方法具
有良好的回收率、相对标准偏差、定量限及线性关系，适合蔬菜中有机磷及代谢物的检测，应用该检测方法对农贸市场购买的白菜、辣椒、西红柿及洋葱进行了检测。关键词：固相萃取；液相色谱-串联质谱；有机磷农药；代谢产物；蔬菜中图分类号：O658文献标识码：A文章编号：1000-8713（2014）02-0139-06
Determinationoffourorganophosphoruspesticidesandtheirmetabolitesinvegetablesusingsolid-phaseextractioncoupledwithliquidchromatography-tandemmassspectrometry
LIUYong1，2，TANGYingfei2，3，SONGJinfeng2*，HUZhiwei2（1．TechnologyCenterofHeilongjiangEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau，Harbin150001，China；2．NortheastForestryUniversity，Harbin150040，China；3．HeilongjiangProvinceAdministrationforIndustry＆Commerce，Harbin150018，China）
Abstract：Organophosphoruspesticides（OPs），malathion，methylparathion，trichlorfon，andacephatewereusedfrequentlyinvegetablecultivation，mainlymetabolizedintoO，O-dimethyldithiophosphate，4-nitrophenol，dimethyldichlorovinyphosphate（DDVP）andmethamidophos，respectively．Amethodofliquidchromatography-tandemmassspectrometry（LC-MS/MS）wasdevelopedforthedeterminationoftheorganophosphoruspesticidesandtheirmetabolites．Accordingtothedifferenceofcoloringmattercon-tentsinvegetablematrix，thepre-treatmentforvegetableswithhighcoloringmattercontentswereper-formedusingactivatedcarboncoupledwithaFlorisilsolid-phaseextractioncolumn，andotherswerepuri-fiedbyaFlorisilsolid-phaseextractioncolumn．Ahydrophilicinteractionchromatographiccolumn（AC-QUITYUPLCBEHHILIC）wasusedwithacetonitrile-5mmol/Lammoniumacetateasmobilephases．TheMS/MSdetectionwasperformedunderpositiveornegativeelectrosprayionization（ESI）inmultiplereactionmonitoring（MＲM）mode．TheresultsshowedthatthematrixeffectoftheLC-MS/MSwas15.3%－45.1%，therecoveriesofthefourorganophosphoruspesticidesandtheirmetaboliteswere76.9%－102.8%，theprecisionrangedfrom5.92%to10.19%，thelimitsofquantificationrangedfrom色谱第32卷0.001to0.01mg/L，andthelinearcorrelationcoefficientswere0.9982－0.9999intherangeof0.01－1.00mg/L．ThismethodwasappliedintheanalysisofChinesecabbages，hotpeppers，tomatoesandonionsfrommarkets．Thismethodcanbeappliedinrapiddetectionoftheorganophosphoruspesticidesandtheirmetabolitesinvegetables．Keywords：solid-phaseextraction（SPE）；liquidchromatography-tandemmassspectrometry（LC-MS/MS）；organophosphoruspesticides；metabolites；vegetables
有机磷农药具有广谱、高效等众多优点，是当前三大支柱农药之一，经过几十年的不断发展，在品种的数量、产量规模等方面都位居各种农药首位［1］。由于有机磷农药对细菌、害虫、杂草生长等具有有效的控制作用和提高农业产量而被广泛使用，但有机磷农药使用过多，产生的负面效应也日益突显，致使农产品中农药残留严重超标，长期摄取含有机磷农药及代谢产物的农作物会对人的健康造成较大影响［2］。随着检测技术的发展和各国在食品安全研究方面的突破，除了对原药残留进行检测外，增加了对药物残留代谢产物的研究，并对其毒性较强的代谢产物进行检测。有机磷农药降解产物往往具有较强毒性，如敌百虫在一定条件下可迅速转化成毒性更强的敌敌畏［3］，乙酰甲胺磷在环境中容易降解成甲胺磷［4］，甲基对硫磷等含有苯硝基类有机磷农药最主要的降解产物是对硝基酚［5］，马拉硫磷代谢产物为中间体O，O-二甲基二硫代磷酸酯等［6］。我国在国家标准GB2763-2012中对蔬菜中各种有机磷农药的残留限量有明确的规定，4种有机磷农药及其代谢产物的残留限量为0.02～8mg/kg（对硝基酚及O，O-二甲基二硫代磷酸酯没有规定），美国及欧盟的残留限量标准与GB2763-2012所规定的限量基本一致［7］。有机磷农药的检测方法主要有气相色谱法［8］、气相色谱-质谱联用法［9］、气相色谱-串联质谱法［10］、液相色谱-串联质谱法［11］及毛细管电泳法［12］等，前处理方法主要为液液萃取［8，11］、QuEChEＲS技术［10，13］、固相萃取［9，14］、固相微萃取［15］等，但方法都局限于农药母体的检测，很少关注农药代谢产物的同时检测，而部分有机磷农药代谢产物在食品中的残留富集，对人体带来的伤害甚至远高于有机磷农药本身［4］。有机磷农药代谢物的检测，若局限于某一种化合物或者是几种可能代谢物的检测，不具有针对性，不能作为有机磷农药的标记物［16，17］。农药及其代谢产物的检测，对食品安全具有更重要的价值，可能是未来农药残留检测的热点和难点。本文以菠菜和洋葱为研究对象，用固相萃取-液相色谱-质谱联用技术同时检测4种有机磷农药及其代谢产物，对农药残留检测的技术储备及农药代谢产物的研究具有重要意义。
1实验部分
1．1仪器与试剂
WatersACQUITYUltraPerformance液相色谱系
统，并配有溶剂管理器；WatersXEVOTQ三重四极杆质谱仪（Waters公司）；均质机（T25，IKA公司）；组织捣碎机（Philips公司）；固相萃取装置（Supelco公司）等。有机磷农药及其代谢产物标准品：马拉硫磷（malathion，纯度99.5%，Fluka公司），O，O-二甲基
二硫代磷酸酯（dimethyldithiophosphate，纯度97%，维赛诺化学技术有限公司），甲基对硫磷（parathion-methyl，纯度99.8%，Sigma公司），对硝基酚（4-ni-trophenol，纯度99.5%，国药集团化学试剂有限公
司），敌百虫（trichlorfon，纯度99.5%，Sigma公司），敌敌畏（dimethyldichlorovinyphosphate，DDVP，纯度99.8%，Fluka公司），乙酰甲胺磷（acephate，纯度99.5%，Fluka公司），甲胺磷（methamidophos，纯度
99.5%，Fluka公司）。标准品用乙腈溶解，于4℃冰箱中保存，使用时用流动相定容。500mg6mL活性炭固相萃取柱及500mg6mL弗罗里硅土固相萃取小柱均购自Supelco公司，其他试剂均为分析纯试剂。1．2样品前处理方法
叶菜以菠菜为试验样本。提取：样品用组织捣碎机处理后，称取约5g（精确到0.01g）于50mL离心管中，加入2gMgSO4、20mL乙酸乙酯，