牛奶中抗生素残留的检测
生鲜乳中抗生素残留的检测
徐 华敏
（ 淮安 市产 品质量监督检验所 ， 江苏淮安
ＸＵ Ｈｕ ａ －ｍｉ ｎ
２ ２ ３ ０ ０ １ ）
（ Ｈ ｕ ａ ｉ ａ ｎ ｃ ｉ ｔ ｙ ｆ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ ｓ ｕ ｐ ｅ ｒ ｖ ｉ ｓ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｉ ｎ ｓ ｐ ｏ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ， Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｓ ｕ Ｈ ｕ ａ ｉ ｎ ２ ａ ２ ３ ０ ０ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
ｒ ａ ｗ ｆ ｒ ｌ ｅ ｓ ｈ ｍｉ ｌ ｋ ．Ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｓ ｈ ｏ ｗ ｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ ＨＰ Ｌ Ｃ ｉ ｓ ａ ｌ ｌ ｅ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｎｄ ａ ｓ ｉ ｍｐ ｌ ｅ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｅ ｎｔ ａ ｉ ｂ ｉ ｏ ｉ ｔ ｃ ｒ ｅ ｓ ｉ ｄ ｕ ｅ ｓｉ ｎ ｒ ａ ｗｆ ｒ ｅ ｓ ｈｍ ｉｌ ｋ 。 Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ａ ｎｔ ｉ ｂ ｉ ｏ ｉ ｔ ｃ ｓ ； ＨＰ Ｌ Ｃ；ｆ ｒ ｅ ｓ ｈ ｉｌ ｍ ｋ； ｒ ｅ ｓ ｉ ｄ ｕ ａ ｌ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ
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确 的特 点 。
关 键词
牛奶中抗生素残留及其三种检测方法的比较分析研究
般 认 为 ，对 奶 牛用 药不 当或 不注 意 安全 时 间是 牛奶 中抗 生素 残 留 的重要 因素 ，奶 牛饲 养环
一
最全 面 、 消化 率 最 高 的有 机 食 品之 一 ，其质 量 及
其 安全 性 倍受 关注 。自 １４ ９ ９年美 国首次 发现 抗 生 素对 畜 禽 有促 生 长 作用 ，此 后 ，许 多 国家将 抗 生 素广泛 应 用于 畜牧 业 ，我 国在 ２ ０世 纪 ５ ０年 代 开 始将 抗 生 素作 为 饲料 添 加 剂 ，其 在 防治 动物 疾 病
Ｔｈｒ ｅ ｋ ｎ ｆＤ ｅ ｅ ｔｏ ｅ ｈｏ ｅ ｉ ｄｓｏ ｔ ｃ ｉ ｎ Ｍ ｔ ｄｓ
Ｃｈ ｑ ｕ Ｌｉｕｎ
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ｗａ ｙ．
Ｋｅ ｒ ｓ ｍｉ ， ｎ ｉ ｉ ｔ ｅ ｉ ｕ ｓ Ｔ ｙ ｗｏ ｄ ： ｌ ａ ｔ ｏ ｉ ｒ ｓｄ ｅ ， ＴＣ， ＮＡＰ ＥＣＬＩ Ｓ ５ ｋ ｂ ｃ Ｓ ， Ｐ Ｅ ０
近 年来 畜 牧业 在迅 速 发展 ， “ 绿色 ” “ 保 ” 环 “ 机 ”食 品倍 受老 百姓 的欢迎 。牛 奶 作 为营 养 有
乳 业 学与 技术
２１ ０ ０年第 ４期
（ 第 １３ ） 总 ４期
１３ ９
牛奶 中抗生素残 留及其三种检测方 法 的 比较分析研 究
褚 立 群
光 明荷斯 坦牧 业有 限公 司，上 海 ２ ０４ ０４ ３ 摘 要 ：抗 生素 残 留不仅 危 害人 类健 康 ，同时也 影 响牛奶 的品质 ，造 成经 济损 失 。本文讨 论 了牛奶 中抗
浅谈乳制品抗生素残留检测
浅谈乳制品抗生素残留检测摘要：随着广大消费者食品安全意识的提高，乳制品中抗生素残留超标的问题愈来愈引起人们关注，如何检测乳制品中的抗生素，杜绝乳制品中抗生素的存在，消除给消费者的健康带来了威胁，这是乳品行业事在必行的任务，这就要求相关部门提高抗生素的检测技术，从源头控制原料乳中抗生素残留，保证乳制品质量。
关键词：抗生素残留乳制品抗生素检测1 抗生素的来源中国乳制品行业起步晚，起点低，但发展迅速，特别是改革开放以来，奶类生产量以每年两位数的增长幅度迅速增加，与此同时，畜牧业也发展迅速，众多的抗生素在乳牛饲养中得到了广泛的应用，其中以β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类等为主，造成乳制品中大量的抗生素残留。
从目前我国乳制品中残留的抗生素近况来看，抗生素作为一种治疗用药，目前已被广泛用于乳牛疾病的治疗，无论是通过口服还是肌肉注射，进入牛体中的抗生素都可以通过乳牛自身的代谢排出体外，而牛乳就是牛体将抗生素排出体外的一个重要途经。
我国乳制品标准中有明确规定，注射过抗生素的乳牛5天内所产的牛乳不允许出售和食用，然而，有些奶户没有按要求处理含抗生素牛乳，为了谋取利益，向乳品企业出售含抗生素的牛乳；有些奶户定期给健康乳牛的饲料中添加抗生素或注射抗生素药物；有些奶户为了防止牛乳酸败而非法在乳中掺入抗生素，以上种种都造成了牛乳中出现抗生素的残留。
2 抗生素残留的危害牛乳中残留抗生素，对于乳品生产厂来说，会造成对原料乳质量的误判，给企业生产酸奶或奶酪造成失败，给企业的产品带来潜在的消费危害，给企业造成经济损失。
对于消费者来说，长期食用含抗生素的牛乳，无疑是等于长期服用了小剂量的抗生素，对抗生素有过敏体质的人服用残留抗生素牛乳会发生过敏反应，即使正常饮用者如果长期服用含抗生素的牛乳，可使体内致病细菌产生耐药性，给临床治疗带来很大麻烦。
生产无抗生素的乳制品是每个乳品生产企业必须做的一项工作，同时也是食品国家安全标准中明确规定的。
试牛奶中抗生素残留预防措施及检测
试论牛奶中抗生素残留的预防措施及检测[摘要]：分析抗生素药物如何进入到牛奶中。
在牛场如何采取有效措施预防抗生素的污染。
帝斯曼公司最新的广谱检测工具，在更短的时间内完成大量样品的自动检测，可以帮助牛奶产业链更高效地为消费者提供无抗、安全的乳制品。
[关键词]：牛奶抗生素残留预防检测中图分类号：tu266+.2 文献标识码：tu 文章编号：1009-914x（2012）20- 0116 -011.引言抗生素是20世纪最伟大的发明之一，它对于治疗和减轻人类和动物的疾病，起到了功不可没的作用。
在奶牛饲养过程中，用于预防和治疗作用的抗生素药物在治疗疾病和提高牛奶产量方面做出了相当大的贡献。
但是随之而来也给乳品加工行业和消费都带来了危险：一定浓度的抗生素残留会导致牛奶不能发酵；食用含有抗生素的乳制品对人有致敏、产生耐药性的风险，对人体健康不利。
对于抗生素，如何在合理使用的同时避免它进入牛奶产业链中就成了一个重要的课题。
而且随着社会对食品安全关注度的提高，人们对于无污染健康食品的追求，必将会推动乳制品行业从源头上健康发展，从根本上解决抗生素残留的问题。
2.奶牛肌肉注射后抗生素在牛奶中的消除动力学溶液或注射液通常用于肌肉注射。
皮下注射通常用于小动物，对于大型动物来说，注射液的体积太大而不适于皮下注射。
肌肉注射后注射液的释放取决于肌肉组织的结构。
在同一地方注射过一次以上的动物其药物释放会减慢，因为形成了疤痕组织。
药物是否注射到了肌肉束中或肌肉束之间也很重要。
前一种情况下注射液的释放会相当慢。
在注射8h后药的浓度达到了高峰。
出现高峰的时间随抗生素不同而不同。
如果其它条件相同，青霉素g的时间相似，cyclin更短（4h），盐酸克林霉素最短（2～3h）。
药物从用药点进人血液并分布到全身。
局部用药或乳房灌注也是如此。
进入乳房的相当一部分药物会被身体吸收，数量取决于灌注药物的化学结构和乳房的状况。
肝脏和肾脏会捕捉和转变药物，取决于药物的化学结构，并通过胆汁排泄到粪便、尿液、汗液、眼泪中，如果是哺乳动物，还会排泄到乳中。
嗜热脂肪芽孢杆菌检测牛乳中抗生素残留_廖玲
重干扰发酵乳制品的生产， 造成很多原料奶的浪费，
［ J&/ ］ 致使企业经 济 受 到 很 大 损 失 。微 生 物 法 检 测 是
目前抗生素检测最常用的方法， 主要有氯化三苯基 四氮唑 法 （ ::* 法） 、 牛 乳 发 酵 活 性 实 验 法、 纸片法 （ -M） 、 管碟法、 试剂盒检测法等， 不同微生物检测法 所用的微生物种类不同， 反应的灵敏度、 特异性、 检
雀石绿染液、 番红染液 % 北京陆桥技术有限责任公 司； 青霉素 P、 头孢噻呋、 阿西莫林、 卡那霉素 % 瑞士 Q=HR6 公司； 土霉素、 四 环 素、 磺 胺、 磺胺嘧啶% 德国
$ !"#
!"# $%"&’()*"+&" 公 司；牛 奶 抗 生 素 检 测 试 剂 盒 （ $,-./0$12 ） 3 西 班 牙 4$5 6 .78579:$, 公 司； ;< 孔微孔板 （ 可分拆） 3 加拿大 =$: >.9?.- 公司。 086@A 高压蒸汽灭菌锅、 .0<22 恒温培养箱 3 日 @DE1 高 速 低 温 离 心 机 3 本 BC89:9 公 司； 德国 0.F8C 公司； >G6A 生物显微镜 3 日本 9-B8/50 公 司； 80E 涡旋震荡器 3 德国 .HC 公司； G=6 @ 恒温磁 力搅拌器3 金坛市科兴仪器厂。
蒸馏水配制成 E22LU Q DU 的标准 储 备 液， JI 贮 存 备 用。无抗牛 奶， 用 无 抗 全 脂 乳 粉 复 原 而 成， 浓度为 EAV 。使 用 时， 将各抗生素储备液与无抗牛奶 E22L- 混合， 以欧盟制定的牛奶中 抗 生 素 最 大 残 留 量 （ 8W-） 为中间值， 上下各浮动一定范围值， 配制成 表 E 中的各种浓度。文中涉及到的各抗生素的 8W是： 青霉素 F、 阿 莫 西 林 均 为 J !U Q DU ， 头 孢 噻 呋、 磺 胺、 磺 胺 嘧 啶、 土 霉 素、 四环素和庆大霉素均为 E22 !U Q DU ， 链霉素、 卡那霉素均为 A22 !U Q DU 。
乳制品中抗生素残留现状及其检测方法
乳制品中抗生素残留现状及其检测方法探究摘要：抗生素检测是我国当前乳制品行业所面临的一大难题，提高乳制品检测技术是促进乳制品行业发展的关键。
本文简要叙述了乳制品中存在抗生素残留的具体危害与现状，并描述了几种检测抗生素残留的方法。
关键词：抗生素乳制品检测方法前言：乳制品属是我国人均需求量最大的一种营养品，同时，乳制品行业也是发展最快的工业之一，我国乳制品行业的发展也带动了畜牧业的发展，乳畜行业应用最广泛的的抗生素为四环素类、氨基糖苷类、β-内酰胺类等，抗生素的应用使我国的乳制品中均有其残留物，为广大消费者留下了较大的健康隐患。
因此，对残留在乳制品中的抗生素检测极为重要，本文就此问题进行讨论。
1.乳制品中的抗生素残留状况现今我国的乳制品现状并不乐观，06年对几处乳制品零售点进行残留抽样检测，检测结果有60%以上的样品显示为阳性。
而另一项对我国几大城市的乳制品检测，抗生素检测残留超标现象严重。
2.残留的抗生素来源与危害抗生素的残留可以追溯到乳制品的生产及流通过程。
乳制品的原材料来自于动物，因此，抗生素主要应用于动物的疫病防治工作。
在奶牛患病期间药物使用不当或是停药期不符合规定均会造成乳制品中残留抗生素。
再者，奶牛长期食用含有抗生素饲料等也会造成抗生素的残留。
其次，为了抑制乳制品中的微生物，使乳制品易于保存，经常会认为的在牛奶中添加抗生素，这是抗生素检测残留超标的主要原因。
在发酵乳制产品时将会受到残留在原料乳中的抗生素的影响，增加了乳制品较大的生产困难，同时，黄油、干酪、发酵乳的起酵均会受到抗生素残留的干扰，并影响其后期形成风味。
虽然少量的抗生素不会对人体造成影响，但是长期食用将会造成人体健康隐患。
长期食用具有残留抗生素的乳制品会产生以下几点危害：第一，抗生素残留中含有较低的毒性，长期服用就可能引发人体疾病如肾毒病与耳毒病；第二，造成人体过敏；第三，有可能增加乳制品中的病原菌的耐药性；第四，造成体内肠胃系统微生物菌群的失衡；第五，影响我国畜牧产品的出口。
鲜乳中抗生素残留检验
鲜乳中抗生素残留检验鲜乳中抗生素残留检验张志诚 060409123（常熟理工学院，苏州常熟，215500）摘要：利用TTC快速检测法对牛奶中抗生素检测结果进行比较分析，根据检测结果认为样品牛奶中不含青霉素G类抗生素。
关键词：牛奶；抗生素残留；TTC；青霉素GAbstract：The TTC method is used to detect the antibiotic residue in milk.According to testresults,there’s no Penicillin-G class antibiotic residue.Key words：milk; antibiotic residue; TTC method; Penicillin-G class antibiotic 育，引言随着人们对食品安全问题的逐步关TTC不能还原，试验液为无色状态。
根据待注．长期饮用抗生素残留超标乳制品可能引测牛奶的着色情况判定是否有抗菌素存在。
起的菌群失调、产生耐药性。
该问题已引起该法简便、快速，无需特殊设备，2h～3 h消费者和乳品生产企业的高度重视。
虽然我可见报告。
检测各种抗生素所用的TTC法试国《生鲜牛乳收购标准》中并未对抗生素残验的灵敏度(最低检出量)分别为：青霉素留作出要求．。
但绝大部分乳品生产企业在 0．004U／mL，链霉素0．5 U／mL，庆大霉原料乳收购环节都已开展抗生素残留检测素0．4 U／mL，卡那霉素5 U／mL。
工作。
本文利用TTC法(嗜热链球菌抑制法)对牛奶中抗生素残留进行检测。
2.材料和方法1.原理TTC法，即氯化三苯基四氮唑法(tripheye tetrazolium chloride)，是目前我国食品卫生标准中规定的检查牛乳中抗生素残留的检测方法 (GB5409．85)。
样品经80℃杀菌后加入嗜热链球菌菌液。
培养一段时间后加入TTC( 2,3,5-氯化三苯四氮唑），若样品中不含抗菌素或其浓度低于检测限，试验菌繁殖，TTC被还原，试验溶液变成红色。
牛奶中抗生素残留检测技术的研究进展
相同 ， 但填料更加精细 （ 直径 ５—１ ｍ） 需高压泵推动 ， ０ ， 柱效 高 （０ １５塔板／ ， ｍ） 速度 快 ， 灵敏 度与 Ｇ Ｃ相 近。与 Ｇ Ｃ相 比， Ｐ Ｃ Ｈ Ｌ
流动相参与分离 机制 ， 其组 成 、 比例和 ｐ Ｈ值 等可 灵活调 节 ， ： 如 离子对 色谱 、 胶束 色谱 、 手性分 离色谱 等 ， 许 多极难 分 离的 待 使 测 物得 以分 析。反相 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ发展最快 ， 目前 已成为大多数 抗生素 残 留 的 常 规 分 析 方法 Ｊ 主要 原 因是 ： １ 化 学 键 合 固 定 相 （ 。 。 （） Ｃ 或 Ｃ） 性质稳定 ， 不流失 ；２ 使用水 、 （） 甲醇或 乙睛等水溶 性有 机 溶剂作 流动相 ， 不干扰紫外检测 ， 成本低 ；３ 样 品中极性杂质 先 （） 流 出， 只需待测物 出峰后 即可重复进样 ， 分析速度快 。
第４ ０卷第 １ ０期
２１ ０ ２年 ５月 Ｇ ａ ｇｈ ｕ Ｃ ｅ ｉ ｌ ｎ ｕ ｔ ｕ ｎ ｚ ｏ ｈ ｍ ｃ ｄ ｓ ｙ ａＩ ｒ
Ｖｏ ． ０ Ｎｏ ０ １ ４ ．１ Ｍａ ２ ２ ｖ． ０ｌ
牛 奶 中抗 生 素 残 留检 测 技 术 的 研 究 进 展 木
陈家越
是 关 键 问题 。液 一 联 用 要 通 过 一 个 “ 口 ’来 实 现 。在 接 口 质 接 ， 有 关 检 测 技 术 列 为 标 准 检 测 方 法 。
一
率很高 ， 故可极大地放大反应效果 ， 从而使测定 方法达到很 高的 敏 感 度 。１７ 年 Ｅ ｇａ 和 Ｐｒ — ｎ 表 了 酶 联 免 疫 吸 附 测 ９１ ｎｖｌ ｌ ｅ ｍ ａ ｎ发 ｌ 定（ ＬＳ 用 于 ＩＧ定量测 定的文章 ， Ｅ ＩＡ） ｇ 使得 １６ ９６年开始用 于抗 原 定 位 的 酶 标 抗 体 技 术 发 展 成 液 体 标 本 中微 量 物 质 的 测 定 方
牛奶中抗生素的检测方法
牛奶中抗生素的检测方法(总4页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除牛奶中几种抗生素检测方法热[ 作者：云月英,王文龙|转贴自：本站原创|点击数：725|更新时间：2009-8-10|文章录入：imste2009年第2期 ](内蒙古科技大学生物与化学工程学院，内蒙古包头 014010)摘要：文章就牛奶中抗生素残留的几种检测方法做了一个系统综述，介绍了普通方法、色谱法、免疫法、牛乳发酵活性实验法、Benedict试剂法、DELVOTEST检测法、Deivoteur p试剂等方法。
提出，其中色谱法、免疫法及其联用技术在残留分析方面的研究与应用取得了长足进展，在抗生素残留快速检测中效果明显。
关键词：牛奶；抗生素；检测中图分类号：TS207 文献标识码：A 文章编号：1007—6921(2009)02—0077—03牛奶中抗生素残留问题在世界范围内一直没有被彻底攻克，已成为行业发展以及食品安全的隐患之一。
抗生素主要指能抑制或杀死其他微生物的一类化学物质，如青霉素、四环素、金霉素、链霉素、氯霉素、磺胺类药物等。
在医学上，抗生素被广泛的应用于预防和治疗多种微生物感染性疾病以及某些癌症。
在奶业的源头中，抗生素使用频率很高，特别是治疗牛乳房炎，常常大剂量反复使用。
据统计，约有十多种抗生素以一种或多种联合的形式采用粉剂、涂擦剂、注射剂，以及乳导管注入等方式加以应用，导致抗生素残留相当严重，在奶牛饲料中，也含有抗生素添加剂。
目前，国内外用于检测奶及奶制品中抗生素残留的方法很多，而为满足奶及奶制品生产需要和遵守新法规，人们对快速检测开始感兴趣，而高效液相色谱法、酶联免疫吸附测定法等方法具有最低检出限量低、准确性好、灵敏性强、重现性好的特点，成为残留分析的主流。
1 牛奶中抗生素的弊处牛奶中不允许残留抗生素，主要有两个原因：第一，占人口一定比例的人对抗菌素尤其是青霉素过敏，人们长期饮用或食用抗生素残留的牛奶或奶制品，也就相当于长期低剂量的摄取抗生素，其危害性主要有：①使人体产生耐药性，给今后患病使用抗生素治疗带来不良影响；②抗生素对过敏体质的人会出现过敏反应，危及健康；③破坏人体内正常菌群的平衡状态，使菌群失调，甚至造成二重感染，使重症患者病情难以控制。
利普斯牛奶抗生素残留检测恒温仪
E50利普斯牛奶抗生素残留检测恒温仪产品描述：HCN-E50利普斯50牛奶抗生素残留检测恒温仪是采用微电脑控制技术制造的一款恒温产品、可适用于车载电源的掌上型恒温仪。
代替传统的水浴锅，控温更准确，误差更小，操作更方便。
不需要重新多次检测温度是否降低，不需要担心样品会因加热而进水。
温度恒温在65℃，可以同时放32个样品。
产品为行业中进口慢抗，要2.5小时检测一次，但准确度相对于20元一次检测的快抗更为准确，如检测时间允许，为推荐款，需要配合专用HCN-E50恒温温育器.E-50是一种用于牛奶中的抗生素检测的试剂盒，其检测原理基于微生物生长抑制实验。
这是一种快速简单的检测方法，可用于检查牛奶中所含的抗生素浓度是否超出欧盟规定最大残留量（MRL)。
此试剂盒主要针对β-内酰胺类，磺胺药物，四环素类药物，大环内酯物，氨基配糖类等30多种抗生素，对抗生素检测具有广谱性。
此试剂盒不仅适合乳制品生产工厂对原料及成品半成品中抗生素的检测，更适合牧场和奶站对抗生素的源头控制，从而更有效地保证了乳品安全，使乳品真正达到＂无抗＂要求。
以下是产品说明书本试剂为微生物抑制法检测牛奶中抗生素含量。
每个微孔中散播了芽孢杆菌孢子，含有琼脂培养基和pH指示剂。
当在65度下培养时，微孔内的芽孢发育生长，该细菌生长时产酸，从而降低了培养基的pH值。
pH的改变使指示剂由原来的蓝紫色变成黄绿色。
若加入的牛奶中含有抗生素，抗生素会抑制微生物的生长，从而不会产酸，指示剂不会变色。
试剂将保持原来的蓝紫色。
最终依据颜色的变化，可以判定牛奶样品中是否含有抗生素。
二，操作过程1，确定要检测的样品数，用小刀沿微孔条间缝隙划开金属薄膜。
取出对应数量的微孔。
准备进行实验。
注意防止划破剩余的微孔板上的金属薄膜。
2，从塑料框上取下要进行检测的微孔，放在一个空的塑料框上。
剩余的微孔板需立即放回塑料袋中，4-8℃下冷藏保存。
3，将要使用的微孔上的胶粘金属膜揭去，在每个微孔中加入50μl牛奶样品。
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牛奶中抗生素残留的检测
摘 要 研究了链霉素与1.5%硫酸铁铵的0.25mol/L硫酸液的显色反应。利用
链霉素的特有性质（麦芽酚）反应[1]，链霉素在碱性溶液中，链霉糖经重排使
环扩大 形成麦芽酚，麦芽酚与硫酸链霉素溶液形成紫红色配位化合物[2]。本实
验据此分析得到在NaOH的溶液中，以硫酸铁铵为显色剂在525nm波长下用分
光光度法测定硫酸链霉素的含量。回归方程A=0.0882C+0.0003，相关系数
r=0.9998，链霉素在0.5～3.0μg/mL的浓度范围具有良好线性关系。该方法操作
简便快捷，结果稳定可靠。
关键词 分光光度；抗生素；残留；牛奶
0 引言
随着抗生素在乳畜饲养业中的广泛应用，牛奶中抗生素残留问题日益受到国
际社会的重视。而硫酸链霉素是常用氨基糖苷类抗生素，主要对结核杆菌，多种
革兰氏阴性杆菌有效，在较低浓度时抑菌，较高浓度时则杀菌，在兽药抗生素领
域广泛应用[3]。目前抗生素的残留检测方法多样，而笔者采用硫酸链霉素与硫
酸铁铵发生显色反应，并采用分光光度法测定硫酸链霉素的含量，该方法操作简
单，方便快捷，适合在实际工作中运用。
1 实验部分
1.1主要仪器及试剂
723型分光光度计 台式电动离心机
注射用硫酸链霉素 山东鲁抗医药股份有限公司提供 国家准字H37020187
产品批号：110715 1g（100万个单位）；1.5%硫酸铁铵的0.25mol/L硫酸液；冰
醋酸；0.2mol/LNaOH。
1.2实验方法
取样品50mL水浴加热至40℃，取1mL冰醋酸滴加于其中，边加边搅拌直
到沉淀析出完全，冷却至室温，离心。取3mL离心后的清液于试管中，并加入
4mLNaOH，在60℃水浴加热10min，冷却后，移入25mL容量瓶中，加入3mL
显色剂，定容。静置20分钟，于525nm下测定吸光度。通过工作曲线，得到相
应硫酸链霉素的浓度[4]。
2 结果与讨论
2.1吸收曲线
精密称取链霉素标准品0.0504g溶于水，置50ml容量瓶中定容，即得1mg/mL
链霉素标准液。再取配置后的标准液1mL再次稀释到100mL的容量瓶中，最终
得到10μg/mL链霉素标准液.
取2支试管，分别标明一号和二号标记。在一号试管中加入3mL蒸馏水，
4.0mLNaOH溶液，置于60℃热水浴中加热10min，自来水水流中冷却，转入25mL
容量瓶中，再加入显色剂 3.0mL，加水至刻度，摇匀，静置20min后用蒸馏水
做空白参比。二号试管吸取链霉素3mL置于其中，并加入4.0mLNaOH溶液，
置于 60℃热水浴中加热10min，自来水水流中冷却，分别转入25mL容量瓶中，
再依次加入显色剂 3.0mL，加水至刻度，摇匀，静置20min后用一号试管做参
比。两支试管均在波长450nm～600nm之间以1cm吸收池测定其吸光度，并以
两支试管的吸光度差绘制吸收曲线。发现在波长525nm吸收最大。
2.2体系碱度的选择
取6支试管，分别吸取链霉素3mL置于其中，再依次加入0.2mol/LNaOH
溶液0.0mL 2.0mL 3.0mL 4.0mL 5.0mL 6.0mL于热水浴中加热10min，自来水水
流中冷却，分别转入25ml容量瓶中，各加入显色剂3mL，加水至刻度，摇匀，
静置20min后用未加NaOH溶液的做空白，于525nm处以1cm吸收池测定其吸
光度。实验表明，最佳NaOH的用量为4mL，因此本实验选用的碱度用量为
0.2mol/L的NaOH溶液4mL。
2.3显色剂用量的选择
取6支试管，分别吸取链霉素3ml置于其中，并均加入4.0mlNaOH溶液，
于热水浴中加热10min，自来水水流中冷却，分别转入25ml容量瓶中，再依次
加入显色剂0.0mL 1.0mL2.0mL 3.0mL 4.0mL 5.0mL，加水至刻度，摇匀，静置
20min后用未加显色剂的做空白，于525nm处以1cm吸收池测定其吸收值。实
验取显色剂（1.5%硫酸铁铵的0.25mol/L硫酸液）3mL。
2.4温度的选择
取5支试管，分别吸取链霉素3mL置于其中，并均加入4.0mLNaOH溶液，
分别于室温，25℃ 40℃ 60℃ 80℃热水浴中加热10min，自来水水流中冷却，
分别转入25mL容量瓶中，再依次加入显色剂 3.0mL，加水至刻度，摇匀，静置
20min后用室温的做做空白，于525nm处以1cm吸收池测定其吸收值.根据实验
结果，本实验选取水浴的温度为60℃。
2.5工作曲线
取6支试管，分别吸取链霉素标准液0.0mL 2.0mL 3.0mL 4.0mL5.0mL 6.0mL
7.0mL于其中，各加入4mLNaOH溶液，于60℃热水浴中加热10min，自来水水
流中冷却，分别转入25mL容量瓶中，各加入显色剂3mL，加水至刻度，摇匀，
静置20min后用未加标准液的做空白，于525nm处以1cm吸收池测定其吸光度。
其回归方程为A=0.0882C+0.0003，相关系数为 r=0.9998 结果，链霉素在
0.5μg/mL～3.0μg/mL的浓度范围具有良好线性关系。
4样品测定
4.1试样处理
分别取市面上售卖的三种普通盒装牛奶50ml水浴加热至40℃，取1mL冰
醋酸滴加于其中，边加边搅拌直到沉淀析出完全，冷却至室温，离心。得三种清
液备用。
4.2测定方法
依次取每种离心后的清液3mL于试管中，并加入4mlNaOH，在60℃水浴加
热10min，冷却后，移入25mL容量瓶中，加入3mL显色剂，定容。静置20min，
于525nm下以蒸馏水为参比测定吸光度。每种样品均重复试验五次。
5结论
分光光度法测定硫酸链霉素原料含量，其线性令人满意，得到实验现象迅速，
结果稳定，克服了抗生素生物价法的操作繁琐，条件严格，操作难度较大及人为
误差因素大等缺点，所以笔者认为该方法可以用作硫酸链霉素含量的快速测定方
法。
参考文献
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2003，535.
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