黑曲霉Aspergillus niger对人参皂苷Re的微生物转化
黑曲霉Aspergillus niger对人参皂苷Re的微生物转化
目的：筛选长白山人参土壤中的活性微生物，转化单体人参皂苷产生稀有人参皂苷成份。方法：从长白山人参根际土壤中分离各类菌株，对单体人参皂苷Re进行微生物转化，通过硅胶柱层析等方法对转化产物进行分离纯化，采用波谱解析及理化常数对其进行结构鉴定。结果：从长白山人参根际土壤中分离各类真菌菌株68株，3株真菌对三醇组人参皂苷Re具有转化作用，其中黑曲霉Aspergillus niger的转化活性较强，转化产物为人参皂苷Rg1、Rg2和Rh1。结论：首次报道黑曲霉能将人参皂苷Re转化为人参皂苷Rg1、Rg2和Rh1这一转化过程。
[Abstract] Objective: Samples of Ginseng root soils, collect from Changbai
Mountain, are used to screen active microorganism which can transform Ginsenoside
Re, so as to obtain rare anti-tumor components. Methods: The strains were isolated
and screened on liquid transfer medium and yield transfer process for active strains.
Then the active strains were tested for their biotransformation properties by using
Ginsenoside Re. The biotransformation products were separated and purified through
different column chromatographies and identified by spectral analysis and physical
constants. Results: Total 68 fungal strains were isolated and 3 active strains showed
positive activity on Ginsenoside Re. One strain, Aspergillus niger, was found to have
the strong activity on Re. Conclusion: This is the first report on the transformation
G-Re to G-Rg1, G-Rg2, and G-Rh1 by microorganism Aspergillus niger.
[Key words] Ginsenoside Re; Ginsenoside Rg1; Ginsenoside Rg2; Ginsenoside
Rh1; Aspergillus niger; Biotransformation
人参及其制品中的主要活性成分是人参皂苷，由于人参皂苷分子结构中糖基侧链的不同而显示出不同的性质和药理活性[1-2]。例如人参皂苷Rb1有促进神经细胞生长的作用、降低细胞内钙、抗氧化、清除自由基和改善心肌缺血再灌注损伤等作用[3]；人参皂苷Rd能促进T细胞增殖，提高天然杀伤细胞（NK）的活性[4]；20（S）-原人参二醇苷元（PPD）具有抗癌活性[5]等。人参皂苷Re是抗心律失常有效成分，可抑制吗啡诱发小鼠产生的耐药性等作用；人参皂苷Rg1具有使中枢神经兴奋、抗疲劳、改善记忆、学习功能等作用[6]；人参皂苷Rg2可抑制兔血小板释放反应等作用。为了获得具有极高药用价值的稀有人参皂苷，从20世纪80年代始，国内外化学及生物技术工程研究人员便开始了人参皂苷的结构改造工程，并取得了很好的结果[7-13]。因此，从高含量人参皂苷成分获得稀有人参皂苷成分的工作备受关注。目前，用于人参皂苷糖基改造的主要方法有化学法、酶法和真菌代谢法[14-15]。真菌代谢法具有条件温和、不破坏皂苷结构、专属性、得率高、无污染等特点，被广泛应用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1主要试剂 人参单体Re购自昆明赛勋生物技术有限公司；薄层色谱硅胶GF254（10～40 μm）和柱色谱硅胶H （200～300目）为青岛海洋化工有限公司生产；其他试剂均为分析纯试剂。
1.1.2 培养基 ①真菌分离用PDA培养基[16]。②种子培养基：每升常水含10 g葡萄糖、10 g蔗糖、10 g蛋白胨、10 g氯化铵、3 g磷酸二氢钾、3 g七水硫酸镁，pH自然，分装40 ml/250 ml三角瓶，115℃灭菌20 min。③液体转化培养基：每升含10 g葡萄糖、0.1 mg硫酸锰、2 g天冬氨酸、0.1 mg硫酸锌、1 g磷酸二氢钾、0.2 mg氯化铁、0.5 g七水硫酸镁、1 mg维生素B1、5 μg生物素，pH
6.0，分装40 ml/250 ml三角瓶，115℃灭菌20 min。
1.2 人参根际真菌的分离
取长白山2年和5年人参根际土壤样品于40～50℃烘2～3 h，取1 g烘干的土样溶于10 ml无菌蒸馏水中，将土样从10-1稀释至10-6，选择10-3、10-4、10-5、10-6 4个浓度，分别取0.1 ml用无菌三角爬把溶液均匀涂布在含有庆大霉素（50 μg/ml）的PDA平板培养基表面，25℃倒置培养7 d。挑取单一菌落经反复划线分离得纯培养，传至PDA斜面培养7 d，4℃保藏备用。
1.3 活性菌株的筛选
液体筛选方法参见文献[17]，取上清进行TLC分析。在氯仿∶甲醇（3:1）系统中展开后，挥干溶剂，喷10%（V/V）H2SO4-EtOH于105℃下显色，与人参皂苷Re所显示的斑点比较，获得液体筛选的阳性菌株，进行放大实验。
1.4 人参皂苷Re转化产物的粗处理
将具有转化作用的真菌，分别进行液体发酵转化人参皂苷Re，转化液分别进行如下纯化过程。离心，上清液用水饱和的正丁醇分别萃取3次，合并正丁醇萃取部分，浓缩得提取物A。菌丝体用甲醇提取1次，回收甲醇得提取物B，合并A、B两部分提取物。水溶解，经HPD100型大孔吸附树脂吸附，蒸馏水洗涤去除杂质，再用95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱液，浓缩。
2 结果
2.1 活性菌株的筛选
从长白山的2年和5年人参根际土壤样品中共分离获得各种类型真菌68株，通过液体筛选方法，发现具有转化人参皂苷Re的活性菌株3株，分别记为SRS-67、SRS-68和SRS-69（图1）。其中SRS-69（黑曲霉）对人参皂苷Re有较强的转化活性，另外两株真菌菌株SRS-67和SRS-68正在鉴定中。
2.2 人参皂苷Re的转化产物的分离纯化
真菌SRS-67和SRS-68的转化浓缩液，经PTLC，重结晶纯化，分别得到单体化合物1及2。
SRS-69部分的浓缩液0.19 g，甲醇溶解，硅胶（0.5 g）拌样，进行硅胶柱色谱进行分离（15 g），洗脱系统为CHCl3-MeOH （100∶1, 100∶2, 100∶3, 100∶4, 100:5, 100∶7, 100∶9, 100∶11， 100∶13, 0.8 L each solvent）得到3个部分（F1-F3）。F3 组分经C18硅胶柱色谱，用不同比例甲醇-水洗脱，得到两个部分F3-1和F3-2。F3-1组分继续经反向HPLC分离得到化合物3（18.2 mg）；F3-2部分反复重结晶（甲醇）得到化合物4（24.5 mg）；F2组分通过制备TLC色谱，氯仿甲醇100∶25作为展开剂，分离得到化合物5（12.9 mg）。
2.3 人参皂苷Re的转化产物的结构鉴定
SRS-67、SRS-68和黑曲霉的转化产物1-3经TLC和HNM数据分析，鉴定其为同一化合物。
化合物1-3：白色粉末（MeOH），熔点191~194℃，1H NMR（pyridine-d5, 300
MHz）中在高场区0.83，1.04，1.17，1.59，1.60，1.64，1.62和2.07处给出8个单峰甲基信号；两个连氧质子信号5.03（1H, d，J=7.8 Hz）和5.18（1H, d, J=7.7
Hz），归属为β-葡萄糖端基质子；以上数据和13C NMR数据与文献[18]报道的人参皂苷Rg1一致。
化合物4：白色粉末（MeOH），熔点187~189 ℃，1H NMR（pyridine-d5，300 MHz）中在高场区0.95，0.97，1.20，1.36，1.40， 1.64，1.69和2.14处给出8个单峰甲基信号；两个连氧质子信号5.28（1H，d，J=6.8 Hz）和4.81（1H，brs），分别归属为β-葡萄糖和α-鼠李糖端基质子；以上数据和13C NMR数据与文献[19]报道的人参皂苷Rg2一致。
化合物5：白色粉末（MeOH），熔点168~170℃，1H NMR（pyridine-d5，300 MHz）中在高场区0.83，1.03，1.18，1.42， 1.61，1.64，1.67和2.07处给出8个单峰甲基信号；一个连氧质子信号5.03（1H，d，J=7.79 Hz），归属为β-葡萄糖端基质子；以上数据和13C NMR数据与文献[8, 19]报道的人参皂苷Rh1一致。
3 讨论
根据转化底物和产物的结构特征推测其转化途径：真菌SRS-67和SRS-68的转化机制为产生α-鼠李糖苷水解酶，水解掉人参皂苷Re的α-鼠李糖而生成人参皂苷Rg1，如图2所示；黑曲霉将人参皂苷Re转化为 G-Rg1, G-Rg2和G-Rh1，说明黑曲霉不但产生α-鼠李糖苷酶活性，水解G-Re和G-Rg2的C-6 位O-β-葡萄糖（2→1）α-鼠李糖苷键连接，而且产生β-葡萄糖苷水解酶，该酶立体选择性水解C-20位葡萄糖，而对于C-6位葡萄糖并不起作用，因此仅产生人参皂苷Rh1而没有得到人参皂苷F1，转化过程如图2所示。这一转化途径与其他生物体系
如小鼠的胃、大肠或者内生菌的转化过程不同，为首次报道。
图2 人参皂苷Re 可能的转化途径
[参考文献]
[1] Chen X, Zhou QL, Wang BX.The metabolism of ginsenoside Rbl by
intestinal Bacteda [J]. Acta Pharm. Sin,1999,34(6):410-414.
[2] 庄毅.菌质——中药的一个新领域[J].中药新药与临床药理(Traditional
Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology),1992,3(2):49-51.
[3] Rudakewich M, Ba F, Benishin CG. Neurotrophic and neuroprotective
actions of ginsenoside Rb1 and Rg1[J]. Planta Medica,2001,67(6):533-537.
黑曲霉组学研究进展及过程研究结合前瞻
黑曲霉组学研究进展及过程研究结合前瞻
隋雨菲;欧阳立明;鲁洪中;庄英萍;张嗣良
【期刊名称】《工业微生物》
【年(卷),期】2016(46)1
【摘 要】黑曲霉（Aspergillusniger）作为重要的工业发酵菌株，被广泛用于多种有机酸和工业用酶的生产。随着组学技术的日益发展和成熟，黑曲霉的基因组、转录组、蛋白质组、代谢组等组学数据不断增长，宣告着黑曲霉生物过程研究大数据时代的到来。从单一组学的数据分析、多组学的比较到以基因组代谢网络模型为中心的多组学整合研究使人们对黑曲霉高效生产机制的理解不断深入和系统，这为通过遗传改造和过程调控对菌株的生产性能进行理性的全局优化提供了可能。文中回顾和总结了近年来黑曲霉的组学研究进展，并提出黑曲霉组学研究未来与过程优化相结合的发展方向。
【总页数】1页(P65-65)
【关键词】黑曲霉;发酵菌株;工业用酶;生产机制;蛋白质组;生物过程;数据分析;网络模型
【作 者】隋雨菲;欧阳立明;鲁洪中;庄英萍;张嗣良
【作者单位】
【正文语种】中 文
【中图分类】Q949.327.1
【相关文献】 1.基因组学和蛋白质组学在肉品质研究中的应用研究进展 [J], 张素红;孙术国;罗章;马美湖;辜雪冬;胡敏;王若晖
2.黑曲霉代谢组学研究进展 [J], 靳梦琦;李军;朱凤妹;刘畅
3.液相色谱和质谱联用技术结合化学计量学应用于代谢组学的研究进展 [J], 林艳萍;司端运;刘昌孝
4.黑曲霉组学研究进展 [J], 隋雨菲;欧阳立明;鲁洪中;庄英萍;张嗣良
5.宏基因组学结合合成生物学法挖掘新型生物催化剂的研究进展 [J], 王叶;贾振华;宋水山
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NO16黑曲霉原生质体的制备_再生及转化条件
第25卷第4期2006年7月 食品与生物技术学报JournalofFoodScienceandBiotechnology Vol.25 No.4Jul. 2006
文章编号:167321689(2006)0420116205
收稿日期:2005209202; 修回日期:2006203204.
基金项目:国家“863”计划项目(2003AA241160);教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET20420497).
作者简介:姚婷婷(19832),女,江苏如皋人,微生物专业硕士研究生;3通讯作者.黑曲霉原生质体的制备、再生及转化条件
姚婷婷, 王正祥3
(江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214036)
摘 要:为了建立原生质体介导的黑曲霉转化系统,研究了菌龄、酶系统、渗透压稳定剂、酶解时间
对葡萄糖淀粉酶生产菌株黑曲霉CICIMF0410原生质体形成与再生的影响。结果表明,培养4d
的幼嫩菌丝体最适于制备原生质体;综合考虑原生质体形成与再生的情况,作者选用1mol/L山
梨醇为最适渗透压稳定剂,1g/dL蜗牛酶-1g/dL纤维素酶-0.1g/dL溶壁酶为最适裂解酶组
合,30℃酶解215～3h,最适合的原生质体的再生培养基为含016mol/LMgSO4的TZ培养基。
在PEG和CaCl2存在条件下,以潮霉素B为选择性标记,质粒pBC2Hygro转化原生质体,每微克
DNA可获得4～5个转化子。
关键词:黑曲霉;原生质体;制备;再生;转化
中图分类号:Q786文献标识码:A
Preparation,RegenerationandTransformationof
AspergillusnigerProtoplasts
YAOTing2ting, WANGZheng2xiang3
(KeyLaboratoryofIndustrialBiotechnology,MinistryofEducationSouthernYangtzeUniversity,Wuxi214036,
一株黑曲霉(Aspergillus niger sp.ZH-1)对活性红ST-2BF的脱色
一株黑曲霉(Aspergillus niger sp.ZH-1)对活性红ST-2BF的脱色
赵大传;张洪荣
【期刊名称】《应用与环境生物学报》
【年(卷),期】2004(10)2
【摘 要】通过富集培养,从空气中分离到一株脱色真菌,经初步鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger),定名为ZH-1并研究了该菌株ZH-1对活性红ST-2BF脱色的条件,结果表明,其对活性红ST-2BF的最佳脱色条件为:pH=6.0、温度30℃、在此条件下运行40 h脱色率达99.1％;探讨了碳源、氮源和接种量对其脱色率的影响;并对染料降解前后的紫外-可见光光谱进行了分析对比.
【总页数】3页(P239-241)
【关键词】黑曲霉;活性红ST-2BF;富集培养;脱色;碳源;氮源;接种量;染料;生物降解
【作 者】赵大传;张洪荣
【作者单位】山东大学环境科学与工程学院
【正文语种】中 文
【中图分类】X172
【相关文献】
1.蛋白组学差异揭示黑曲霉(Aspergillus niger)高产柠檬酸的分子机制 [J], 谢慧;王风清;魏东芝 2.磷矿石的微生物风化作用——以一株黑曲霉(Aspergillus niger)为例 [J], 谌书;郑厚义
3.一株黑曲霉(Aspergillus niger)对羟基磷灰石合成的诱导 [J], 何飞;连宾;刘世荣;龚国洪
4.黑曲霉Aspergillus niger NCUF413.1对特香型白酒酿造出酒率和风味的影响
[J], 潘菲; 付桂明; 董彪; 刘婷; 陈妍; 陈可丹; 黄冰静; 万茵; 刘成梅; 张鹏
5.黑曲霉Aspergillus niger全基因组DNA提取方法的改良与比较 [J], 蔡程山;
王雨; 白飞荣; 翟磊; 张天赐; 胡海蓉; 姚粟
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一种真菌转化人参皂苷的研究
一种真菌转化人参皂苷的研究
李小磊;齐滨;胡娜;李慧敏;刘莉
【期刊名称】《长春中医药大学学报》
【年(卷),期】2013(0)4
【摘 要】目的 研究利用真菌转化人参根总皂苷的方法,测定其含量变化.方法 利用实验室的菌株,对柱层析分离后的人参根皂苷进行微生物转化,运用HPLC对转化后的皂苷成分进行含量测定.结果 该菌株能将人参皂苷Rb1转化为人参皂苷Rd,为稀有人参皂苷Rd的制备提供了新的方法.结论 筛选出的真菌对二醇型皂苷具有转化活性,Rb1质量浓度明显减少,Rd的含量增多,由此得出结论该真菌能将皂苷Rb1转化为Rd.利用真菌转化人参根总皂苷方法是最适条件,为其规模化操作提供一定参考依据.
【总页数】2页(P731-732)
【作 者】李小磊;齐滨;胡娜;李慧敏;刘莉
【作者单位】长春中医药大学,长春130117;长春中医药大学,长春130117;长春中医药大学,长春130117;长春中医药大学,长春130117;长春中医药大学,长春130117
【正文语种】中 文
【中图分类】R284.1
【相关文献】 1.七种植物病原真菌对人参皂苷Rb1生物转化的初步研究 [J], 蒋自立
2.两株具有将人参皂苷Rg1转化为人参皂苷F1活性的真菌鉴定 [J], 张琪;武玉久;张磊磊;沈小静;赵文倩;张怡轩
3.一种真菌对人参皂苷Rg3的转化 [J], 吴秀丽;王艳;赵文倩;张怡轩
4.西洋参中人参皂苷的真菌生物转化研究进展 [J], 陈琪琪;吴晗琪;高秀君;蔡小雨;闫培生
5.真菌EST-Ⅰ及EST-Ⅱ对人参皂苷Rg1定向转化为人参皂苷F1的研究 [J], 吴秀丽;张怡轩;赵文倩;王金辉;吴春福;李铣
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微生物转化人参皂苷Rc和Rd的研究
一２２一 江苏农业科学２０１０年第４期
李东霄，常景玲，张志宏．微生物转化人参皂苷Ｒｃ和Ｒｄ的研究［Ｊ］．江苏农业科学，２０１０（４）：２２—２５
微生物转化人参皂苷Ｒｃ和Ｒｄ的研究
李东霄，常景玲，张志宏
（河南科技学院生命科技学院，河南新乡４５３００３）
摘要：人参皂苷尤其是稀有人参皂苷具有重要的药理活性，但在人参中含量极其稀少。通过运用薄层层析和高 效液相色谱分析技术，对４种真菌转化人参皂苷Ｒｃ和Ｒｄ生成稀有皂苷的代谢作用进行分析，结果显示４种真菌均具
有较强转化人参皂苷Ｒｃ和Ｒｄ的能力。其中，转化人参皂苷Ｒｃ的主要代谢途径推测为Ｒｃ—Ｍｃ。一Ｍｃ—ｃＫ—ＰＰＤ；而
在转化人参皂苷Ｒｄ的过程中可能存在２条代谢途径，其中主要途径推测为Ｒｄ—Ｆ 一ｃＫ—ＰＰＤ，而另一条途径则由人
参皂苷Ｒｄ直接转化为Ｒｇ 。试验结果为进一步通过优化试验条件积累代谢产物Ｒｇ，或ＣＫ，以及分离纯化相应的人
参皂苷糖苷酶提供了良好基础。 关键词：微生物转化；人参皂苷；高效液相色谱（ＨＰＬＣ）；薄层层析（ＴＬＣ）；代谢途径
中图分类号：ｓ５６７．５ １０．１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２—１３０２（２０１０）ｏ４—０ｏ２２一Ｏ３
人参是常见的补益中药，应用于中医临床已有２ ００３多年
的历史，具有广泛的药理作用和医疗用途。人参中主要的生理
活性成分是各种人参皂苷，其中大多数属于原人参二醇类皂
苷，主要包括人参皂苷Ｒａ 、Ｒａ：、Ｒｂ 、Ｒ１）：、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｇ３、Ｒｈ：等，
是人参的主要活性成分之一…。上述人参皂苷单体的结构差
异仅在于ｃ，和ｃ如位上的糖基侧链不同，但显示出的药理活性 却有不同。如人参皂苷Ｒｃ可减弱由辣椒碱和Ｐ物质诱导的疼
痛 。 及延长溶血发生的滞后时间 ；Ｒｄ具有促进Ｔ细胞增
殖，提高天然杀伤细胞（ＮＫ）活性，提高机体免疫力并具有促进
副肾皮质荷尔蒙分泌作用 ；人参皂苷Ｒ＆和Ｒｈ 在抑制肿瘤
黑曲霉Aspergillus niger对人参皂苷Re的微生物转化
２０１１年１１月第１８卷第３３期 论 著
里
一● １． 曲霉Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ对人参皂苷Ｒｅ的
微生物转化
吴秀丽 ，刘成 ，陈靖
１．宁夏医科大学药学院，宁夏回药现代化工程技术研究中心，宁夏银川７５０００４；２．宁夏医科大学科技中心，
宁夏银川７５０００４
【摘要】目的：筛选长白山人参土壤中的活性微生物，转化单体人参皂苷产生稀有人参皂苷成份。方法：从长白山人参
根际土壤中分离各类菌株，对单体人参皂苷Ｒｅ进行微生物转化，通过硅胶柱层析等方法对转化产物进行分离纯
化，采用波谱解析及理化常数对其进行结构鉴定。结果：从长白山人参根际土壤中分离各类真菌菌株６８株，３株真
菌对三醇组人参皂苷Ｒｅ具有转化作用，其中黑曲霉Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ的转化活性较强，转化产物为人参皂苷Ｒ 、
Ｒｇ２和Ｒｈ 。结论：首次报道黑曲霉能将人参皂苷Ｒｅ转化为人参皂苷Ｒｇ 、Ｒｇ２和Ｒｈ 这一转化过程。
【关键词】人参皂苷Ｒｅ；人参皂苷Ｒ．ｇ１；人参皂苷Ｒｇ２；人参皂苷Ｒｈ１；黑曲霉；生物转化
［中图分类号】Ｒ２８５ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１６７４—４７２１（２０１１）１１（ｃ）一００７—０３
Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｅ ｂｙ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ
ＷＵＸｉｕｌｉ１，ＬＩＵ Ｃｈｅｎｇ２，ＣＨＥＮＪｉ，
１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｏｄｅｍ Ｈｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｎｉｎｇｘｉａ Ｈｕｉ Ａｕｔｏｎｏｍｏｕｓ Ｒｅｇｉｏｎ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５０００４，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｎｉｎｇｘｉａ
黑曲霉对20(S)-原人参三醇的微生物转化及条件优化
现代医药卫生２０１５ｆｆ９Ｙ］３０目 ￣３１＠Ｓｇ１８期ＪＭｏｄＭｅｄＨｅａｈｈ，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ３０，２０１５，Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．１８
黑曲霉对２０（Ｓ）．原人参三醇的微生物转化及条件优化
严 宾，邹宝华（精华制药集团股份有限公司，江苏南通２２６００５） ・论 著・
【摘要】 目的 利用微生物转化方法构建制备２０（Ｓ）一原人参三醇衍生物的新合成途径，并对转化条件进行优化， 提高转化产物的产率。方法 选取黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎ妇ｒ ＡＳ ３．１８５８）为转化菌株，从接菌量、底物浓度、转化时间、加样 时间、温度、转速等方面对转化条件进行优化。结果获得２个２０（Ｓ）．原人参三醇衍生物，即２４一亚甲基．２０（Ｓ）一原人参三 醇和２３，２４．烯．２５．甲氧基．２０（Ｓ）．原人参三醇；并获得了优化的转化工艺，即接种量为１５％、底物浓度为０．２５ ｍｍｏ１］Ｌ、加样 时间为转种后３６ ｈ、培养温度为２６℃、转化时间为５ ｄ、摇床转速为１５０ ｒ／ｍｉｎ。结论该转化方法能简便地获得２０（Ｓ）．原 人参三醇衍生物，采用优化后的转化条件，２４一亚甲基一２０（Ｓ）．原人参三醇和２３，２４．烯．２５一甲氧基一２０（Ｓ）。原人参三醇的产 率均明显增大。 【关键词】人参三醇／类似物和衍生物； 曲霉菌，黑；发酵；培养基； 生物转化 ｄｏｉ：１０．３９６９６．ｉｓｓｎ．１００９．５５１９．２０１５．１８．００４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００９—５５１９（２０１５）１８－２７３６—０３
Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ２０（Ｓ）－ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ ｂｙＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ＡＳ ３．１８５８ Ｙａｈ Ｂｉｎ， Ｚｏｕ Ｂａｏｈｕａ（ｆｌｎｈｕａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｇｒｏｕｐ ｃ０．， ｔｄ．，Ｎａｎｔｏｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ ２２６。 ，Ｃｈｉｎａ） 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ ａ ｎｅｗ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｒｏｕｔｅ ｔｏ ｐｒｅｐａｒｅ ２０（Ｓ）一ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ，ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｆｏｒ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔｓ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ ＡＳ ３．１８５８ ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｔｒａｉｎ．Ｔｈｅ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｏｐ－ ｔｉｍｉｚｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｑｕａｎｔｉｔｙ，ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ，ｓａｍｐｌｉｎｇ ｔｉｍｅ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｎｄ ｒｏｔａｔｉｏｎａｌ ｓｐｅｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｗｏ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ２４一ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ一２０（Ｓ）－ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ ａｎｄ ２３，２４一ｅｎ一２５一ｍｅｔｈｏｘｙｌ一２０（Ｓ）一ｐｒｏ— ｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ：ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ，ｔｈｅ ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ ａｍｏｕｎｔ ｗａｓｌ５％，ｔｈｅ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ０．２５ ｍｍｏｌ／Ｌ．ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ａｄｄｉｎｇ ｔｉｍｅ ｗａｓ ａｔ ３６ ｈ ａｆｔｅｒ ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｉｍｅ ｗａｓ ２６ ｏＣ，ｔｈｅ￣ａｎｓｆｏｒｌＴｌａ— ｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｗａｓ ５ ｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｈａｋｉｎｇ ｓｐｅｅｄ ｗａｓ １５ ｒ／ｍｉｎ．Ｃｏｎｃｌｎｓｉｏｎ Ｔｈｉｓ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎ ｓｉｍｐｌｙ ｏｂｔａｉｎ ｔｈｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ２０（Ｓ）一ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏ１． Ｉ’ｈｅ ｙｉｅｌｄ ｒａｔｅ ｏｆ２４一ｍｅｔｈｙｌｅｎｅ一２０（Ｓ）－ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ ａｎｄ ２３，２４一ｅｎ一２５一ｍｅｔｈｏｘｙｌ一２０（Ｓ）一 ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｇｒｅａｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂｙ ａｄｏｐｔｉｎｇ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｐａｎａｘａｔｒｉｏｌ／ａｎａｌｏｇｓ＆ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ；Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ；Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ；Ｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉａ；Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ
人参皂苷的微生物转化研究进展
．１０４． Ｗｏｒｌｄ Ｎｏｔｅｓ ｏｎ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２０１２，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．３
人参皂苷的微生物转化研究进展
邹昆１，２， 何正有２， 王欣荣２， 田永强１ （１四川Ｉ大学化学工程学院， 成都６１００６５；２中国医药集团四川抗菌素工业研究所， 成都６１００５２）
摘要：研究表明人参稀有皂苷具有很强的生物活性，为获得稀有人参皂苷的各种研究越来越多，而生物转化法制备稀有 人参皂苷已成为一条重要途径。本文对产稀有人参皂苷微生物转化的方法最新研究进展进行了简要的综述，并简要展望了人参 皂苷生物转化研究的前景。 关键词： 人参稀有皂苷； 微生物转化； 二醇型人参皂苷； 三醇型人参皂苷 中图分类号：Ｑ８１９ 文献标识￣ｉ－ｑ：Ａ 文章编号：１００１－８７５１（２０１２）０３—０１０４—０５
Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ ｂｙ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ
Ｚｏｕ Ｋｕｎ ，一，Ｈｅ Ｚｈｅｎｇ—ｙｏｎ２， Ｗａｎｇ Ｘｉｎ—ｒｏｎｇ ，Ｔｉａｎ Ｙｏｎｇ—ｑｉａｎｇ （１ Ｃｏｌｌｇｅ ｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆＳｉｃｈｕａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ ６１００６５； ２ Ｃｈｉｎａ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｉｃｈｕａｎ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，Ｃｈｅｎｇｄｕ ６ １ ００５２）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｔ ｗａｓ ｒｅｐｏｒｔｅｄ ｔｈａｔ ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｈａｖｅ ｐｏｔｅｎｔ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ ｏｎ ｖａｒｉｏｕｓ ｍｅａｎｓ ｏｆ ｏｂｔａｉｎｉｎｇ ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｈａｖｅ ｂｅｅｎ ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ ｍｏｒｅ ａｎｄ ｍｏｒｅ．Ｂｉｏｔｒａｎｆｏｒｍａｉｏｎ ｈａｓ ｂｅｃａｍｅ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｗａｙ ｔｏ ａｂｔａｉｎ ｒａｒｅ ｇｉｓｅｎｏｓｉｄｅｓ．Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ｂｙ ｍｉｃｒｏ—ｂｉｏｔｒａｎｆｏｒｍａｉｏｎ ｗｅｒｅ ｒｅｖｉｅｗｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ａｒｔｉｌｅ，ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅ ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ ａｒｅ ｓｔａｔｅｄ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｒａｒｅ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ； ｍｉｃｒｏ—ｂｉｏｔｒａｎｆｏｒｍａｉｏｎ；ＰＰＤ；ＰＰＴ