细菌拮抗作用的筛选 - 副本
拮抗细菌的筛选及其对油菜菌核病的防治效果
拮抗细菌的筛选及其对油菜菌核病的防治效果
李国庆;王道本
【期刊名称】《华中农业大学学报》
【年(卷),期】1991(10)1
【摘要】自核盘菌腐烂菌核和油菜等七种植物地上部分健康组织表面分离到163株细菌。
平板测定表明,其中的31株对油菜菌核病菌有抑制作用.被抑制核盘菌菌丝顶端出现褐变,菌丝壁溃解,原生质凝聚为颗粒状并外渗,以反形成小型分生孢子等变化。
用拮抗作用强的3个菌株发酵液涂布于接种的油菜离体叶片,其菌核病的抑制率达48.3—100.0％;并用这3个菌株发酵液喷于盆栽和大田油菜叶片,其防效达41.6—86.89％。
【总页数】6页(P30-35)
【关键词】油菜菌核病;拮抗细菌;防治
【作者】李国庆;王道本
【作者单位】华中农业大学植保系
【正文语种】中文
【中图分类】S435.654
【相关文献】
1.柑桔内生拮抗细菌的发酵液对油菜菌核病的田间防治效果 [J], 冉国华;张志元
2.拮抗油菜菌核病的海洋细菌筛选及其活性物质的分子检测 [J], 林建朋;邵宗泽;陈莉;孙风芹;张智涛;喻子牛;张吉斌
3.油菜菌核病拮抗细菌的筛选和高效菌株的鉴定 [J], 晏立英;周乐聪;谈宇俊;单志慧;沈明珍;Leonid Chernin
4.2株油菜菌核病拮抗内生细菌的筛选鉴定及其拮抗活性初步分析 [J], 李梦霖;阮羽萱;杜可心;石进校;阮颖
5.油菜菌核病内生拮抗细菌的筛选及防病作用研究 [J], 高小宁;陈金艳;黄丽丽;乔宏萍;韩青梅;康振生
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防治葡萄灰霉病的优势拮抗细菌的筛选
防治葡萄灰霉病的优势拮抗细菌的筛选作者：崔欣李伟来源：《新农村》2010年第11期【摘要】生物农药是防治植物病虫害的一种长远有效的方法，本文通过葡萄果穗附生细菌对灰霉病菌的抗性实验，筛选出对葡萄灰霉病抑制性最好的拮抗细菌，从而为开发新型的生物农药提供了理论基础。
【关键词】生物防治；葡萄灰霉病；拮抗细菌在葡萄灰霉病发生普遍严重的地区，使用拮抗微生物进行生物防治，可以有效减少化学农药的使用，解决农药残留问题，延缓病菌抗药性的产生。
特别是在病菌已产生抗药性的地区，使用拮抗微生物，更是抗药性治理的一项有效措施【1】。
1材料与方法1.1试验材料供试菌种：葡萄灰霉病菌；葡萄果穗附生细菌13种葡萄品种：中抗品种红地球1.2试验方法1.2.1附生细菌的平板对峙试验为了简化工作量，采用了复式筛选法【2】，首先在平板上粗筛选出拮抗作用明显的菌株，然后，再进行二次平板筛选，找到最具拮抗作用的拮抗菌。
1.2.2附生细菌对病原菌孢子萌发的抑制试验【3】将待测菌液于26℃、180r/min摇床培养3d。
取葡萄灰霉病孢子悬浮液（107个孢子∕ml）10ul，加10ul待测细菌发酵液，置无菌洁净载玻片上，于培养皿内25℃保湿，8h后观察孢子萌发情况。
以0.5%葡萄糖液作对照，每个处理调查200个孢子，重复3次。
计算发酵液对孢子萌发的抑制率。
将100%抑制孢子萌发的发酵液稀释10、100、1000倍后再测定抑制孢子萌发情况。
将待测菌发酵液5000r/min离心10min，取上清液进行抑制孢子萌发试验，方法同上。
1.2.3附生细菌对灰霉病菌菌丝生长的抑制试验【4】取灰霉病菌孢子悬浮液0.5 ml加入盛有10ml已冷却至50℃的PDA培养基中。
将直径为5mm灭菌滤纸片蘸上发酵液，放入配好的培养皿中，每个培养皿放两片，25℃培养3d后测量抑菌圈直径，以无菌水作对照，重复3次。
2 结果与分析2.1 13种附生细菌对峙试验结果通过二次平板对峙试验，结果表明：分离得到的13种细菌中，除了B9和B13对葡萄灰霉病没有拮抗作用外，其他11种细菌对灰霉病均有拮抗作用，但不同附生细菌的抑菌力差异性显著。
拮抗高水分玉米霉变菌株的筛选及其抗菌活性物质的研究
拮抗高水分玉米霉变菌株的筛选及其抗菌活性物质的研究拮抗高水分玉米霉变菌株的筛选及其抗菌活性物质的研究一、引言玉米是世界上最重要的粮食作物之一，但在贮存和加工过程中容易受到玉米霉变菌的污染，导致质量下降和毒素产生。
尤其是在高水分环境下，玉米霉变菌的生长更为迅速。
因此，研究高水分玉米霉变菌株的拮抗菌株以及其抗菌活性物质有着重要的意义。
二、材料与方法1. 环境样品采集：本研究在多个玉米仓库中收集了高水分玉米样品。
2. 菌种的分离与筛选：从高水分玉米中分离出霉变菌株，并利用接种试验筛选出对霉变菌株具有拮抗作用的菌株。
3. 菌株鉴定：通过形态学和生理生化特性鉴定菌株。
三、结果1. 分离和筛选出拮抗菌株：从高水分玉米中共分离出30个霉变菌株，经过筛选，得到了5个对霉变菌株具有拮抗作用的菌株。
2. 菌株鉴定：通过形态学和生理生化特性分析，确认了这5个菌株分别属于拮抗菌属A、B、C、D和E。
四、讨论1. 拮抗菌株的筛选优势：本研究利用直接接种法筛选拮抗菌株，相比于传统悬浮液法，能更直接地评估菌株对霉变菌株的拮抗作用。
2. 菌株A的抗菌活性物质研究：通过超高效液相色谱法分离提纯，从菌株A中得到了一种抗菌活性物质，并初步确定其结构为抗菌素A。
进一步的研究表明，抗菌素A对多种霉变菌株具有较强的抑制作用。
3. 菌株B、C、D和E的抗菌活性物质研究：通过生物发酵法，从菌株B、C、D和E中提取到了不同的抗菌活性物质，并初步确定其结构。
五、结论本研究通过对高水分玉米样品中的霉变菌株进行拮抗菌株筛选，成功分离出了5个具有拮抗作用的菌株。
另外，从其中一株菌株A中提取到的抗菌活性物质抗菌素A对多种霉变菌株具有较强的抑制作用。
这些研究结果为高水分玉米霉变菌的防治提供了新的思路和方法。
然而，本研究还存在一些不足之处，例如只采集了有限数量的样品，且尚未对菌株A的抗菌素A进行进一步的抗菌谱和毒性研究。
未来的研究可以进一步扩大样品数量，并对拮抗菌株的抗菌活性物质进行深入研究，以提高其应用价值和防治效果通过对高水分玉米样品中的霉变菌株进行拮抗菌株筛选，本研究成功分离出了5个具有拮抗作用的菌株，分别属于拮抗菌属A、B、C、D和E。
烟草黑胫病菌拮抗细菌的筛选与鉴定
２１ 第 １ ０ ２年 ６期
植物 保护 学
烟 草 黑胫 病 菌 拮 抗细 菌 的筛选 与鉴 勇 张 永辉 雷 晓 ・
（ 四 川省 烟 草 公 司泸 州 市 公 司 ， 川 泸 州 ６ ６ ０ 山 东 省 烟 草 公 司 临 沂 市 公 司 ； 中 国农 业 科 学 院 烟 草 研 究 所 ） ’ 四 ４ ００；
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Ｋ ｅ ｗｏ ｄ Ｐｈ ｔｐｈｈ ｒ ｒ ｓｔ ａｖ ｒ ｎ ｃ ｔａ ａ ；ｎａ ｏ ｓｉ ａ ｔｒａｂ ｏｏ ｉａ ｏ ｔｏ； ｃ ｅ ｎｎ ； ｄ ｎｔ ｃ ｔｏ ｙ ｒ ｓ ｙ ｏ ｔｏ ａｐａａ ｉｉ ａ． ｉｏｉ ｎ ｅａ ｔｇ ｎｉｔｃｂ ｃｅｉ；ｉｌｇｃ ｃ ｎｒｌ ｓ ｒｅ ｉｇ ｉ ｅ ｉ ａｉｎ ｃ ｌ ｉ ｆ
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拮抗性放线菌的筛选实验心得
拮抗性放线菌的筛选实验心得
对峙培养筛选拮抗性放线菌时因多次向平板中移入菌片，很容易受杂菌污染，所以无菌操作至关重要；滤器使用前一定要检查气密性，针筒活塞下压并能自动弹回恢复，则气密性良好；否则抗生素过滤除菌不完全会有杂菌污染；得到的所有菌株都要妥善保藏，以免关键时刻无法找到，影响实验进度；减压蒸馏提取抗生素时，控制旋转薄膜蒸发器温度在45-50℃之间，否则温度太高抗生素遇高温易降解；萃取时注意油相与水相是否分离完全，分液时将水相彻底排除干净；测定MIC时，滤纸片浸泡时间要一致，而且滤纸片的距离也要相当，否则测定值不准确。
每次实验课所需器材和药品。
菌种：放线菌制片：插片法培养，培养了4天的平板培养物10个，每皿插15片。
米酒酵母斜面培养物或平板培养物：2天，6支(皿)黑曲霉平板培养物：72h，6皿米根霉平板培养物：72h，6皿青霉平板培养物：48h，5皿。
细菌之间的拮抗作用
细菌之间的拮抗作用
细菌之间的拮抗作用指的是不同种细菌之间的一种竞争关系，即它们在共同的生态环境中互相制约、竞争和抑制彼此的生长繁殖或生存能力。
这种竞争往往是通过产生一些细菌自身的生物活性物质（如一些毒素、代谢产物、酶等）来实现的。
例如，某些细菌可在其自身的生长过程中产生一些抗菌物质，这些物质能够杀死或抑制与其竞争的其他细菌，从而获得更多的生存空间。
另外，一些细菌还可通过产生酶类使周围环境的营养物质被分解降解变得不利于其他细菌生存、生长。
细菌之间的拮抗作用是细菌世界中极为普遍的现象，它们通过这种竞争关系促进自身生存、控制环境中的细菌数量，从而维持生态平衡。
此外，细菌之间的拮抗作用还具有一定的应用价值，例如，可以利用某些抗菌物质对人类、动物的疾病进行治疗，或者利用细菌之间的拮抗作用来改善土壤环境、控制植物病害等。
番茄灰霉病菌拮抗细菌的筛选及其作用机制研究
摘要 ： 辽 宁、 林等省各地番茄种植园区采集土壤样本 ８ 从 吉 ２份 ． 用 土 壤 稀 释 法 进 行 分 离 ， 采 获得 对 番 茄 灰 霉
病菌有拮抗作用的细菌 ５ 株 。其中 Ｋ １ ５的拮抗 能力最 强且稳定 ， 其抑 菌圈可达 ３ ｍ。通过抑制孢子萌发 、 响 ８ｍ 影 菌丝正常生长试验对 Ｋ ５的作用机制进行 了研究 ， 结果表 明 ，５能产生抗 菌物质 ， Ｋ 可有效抑制番茄灰霉病菌生长 ， 其 中对菌丝生长的抑制率为 ７ ． ％ ， ３ ２ 对孢子 萌发 的抑制 率为 ９ ． ％ 。对 Ｋ ８３ ５在 番茄果实上 的防治效果进 行 了测
定 ， 防效可达到 ７ ． ％ ， ５ ％多菌灵 ５０倍液的防治效果相 当， 其 ３１ 与 ０ ０ 是一种有潜力的生防制剂。
关 键 词 ：番茄 ； 霉 病 菌 ； 抗 细菌 ； 用 机 制 灰 拮 作 中图 分 类 号 ： ４ ６ ４２ １ ￥ ３ ． １． ３ 文献标志码 ： Ａ 文章 编 号 ：０ ２一ｌ０ （０ ８ ０ ０ １ ０ １０ ３２ ２０ ）２～ ｌ４— ３
３次 。
参考文献 ：
［ ］ 俊范．药用植物病害防治图册ｆ ．辽宁 ： １傅 Ｍ］ 辽宁科学技 术出版
社 ．９ ９ １９ 、
通讯作者 ： 曹远银 ， 研究员 ， 从事植物免疫和分子植 物病理学研究 。
（ 上接 第 １ ３页 ） １
近年 来 ， 随着紫 草人 工种植 面 积 的增 加 ， 紫草病 害发 生呈 加重 趋 势 。 目前 ， 内外 尚未 见 有关 紫草 国
植 物 资 源 ，０４，３ ２ ：２—１ ． ２０ ２（ ） １ ４
［ 张忠义， ４］ 王英祥 ， 何永 宏 ， 等
巾围柱隔 孢属 的分类研 究 Ⅲ［ ］ Ｊ．
小麦纹枯病拮抗细菌的筛选
中国生物防治CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICAL CONTROL 1996,12(4)161～164 小麦纹枯病拮抗细菌的筛选史建荣 王裕中 陈怀谷 沈素文(江苏省农业科学院植物保护研究所,南京 210014)[摘要]从小麦纹枯病、健叶鞘上分离到240个细菌分离物,通过细菌-纹枯菌对峙培养和含菌平板培养筛选出拮抗力较强的R b2、R b26等11个芽孢杆菌菌株。
在对峙培养中,拮抗细菌的抑菌带达11.5～16.2mm,在含细菌培养基中,拮抗细菌产生明显的抑菌透明圈,宽度7.0～13.0mm,小麦纹枯菌不能生长甚至死亡。
筛选到的Rb2和Rb26的代谢产物对小麦纹枯菌生长和菌核形成均有明显的抑制作用,抑制中浓度分别为2.8%和1.8%,且高温处理对其抑制活性无显著改变,抑制中浓度仍分别达3.0%和2.1%,但对菌核形成的抑制活性有所减弱。
R b2和R b26菌液浸种对苗期纹枯病的防效分别达到71.8%和78.1%,代谢产物浸种的防病效果也达71.1%和72.8%。
研究认为,Rb2和Rb26对小麦纹枯菌具有良好的拮抗作用,对苗期小麦纹枯病有明显的控制作用。
关键词 拮抗细菌 筛选 小麦纹枯病(菌) 生物防治小麦纹枯病是由禾谷丝核菌(Rhiz octonia cer ealis)引起的土传病害,在长江流域广大麦区发生严重。
目前以药剂拌种和早春喷药控制其为害(王裕中,1988)。
由于化学药剂在控制病原菌的同时,也对有益微生物的生存构成威胁,且化学药剂的过度使用易诱导病菌产生抗药性,因此有必要开拓新的防治途径以提高综防效益。
利用植株上附生的拮抗细菌或其代谢产物调控根围益害微生物的平衡以达到控病保产的目的,是土传病害防治的重要途径(Cook,Bak-er,1983),而筛选高效和活性稳定的拮抗菌株是保证生物防治获得成功的先决条件。
本文报道小麦纹枯菌拮抗细菌的筛选及其抑菌防病的效果。
1 材料和方法1.1 拮抗细菌的筛选 1993年5月上中旬分次从发病麦田中取样,小麦品种为宁麦7号和宁9144,将植株基部8～15cm切成1～2cm的小段,取病、健叶鞘各10g,无菌水冲洗后置于100mL 无菌水中,恒温振荡20小时。
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细菌对几种病害的拮抗作用
植物病害拮抗细菌的筛选和应用是植物病害防治的研究热点。拮
抗细菌及其代谢产物的开发利用, 以及通过基因工程改造产生新型、
高效、稳定、适生性强的拮抗细菌是今后生防菌发展的趋势。拮抗细
菌作为生物防治措施的成功例子已经存在。
植物内生菌是一个多样性十分丰富的微生物类群,已受到各国生
物学家的高度关注。大量研究结果表明:植物内生菌在体内占据有利
于生防的生态位,具有生物防治,植物促长,增强宿主抗逆境、抗病虫
害、抗菌、抗病毒和抗肿瘤活性等优点。近年来,对植物内生菌的生
态和生理作用及其作为潜在的生防资源和外源基因载体的研究,已逐
渐成为国内外研究的热点。关于内生细菌对植物病原菌的拮抗作用,
前人研究已证明,植物内生细菌中存在有大量的对植物病原菌具有拮
抗作用的菌株,不同植物含有对病原菌具有拮抗作用的内生细菌的种
类有所不同。本实验研究了拮抗细菌对几种病害的拮抗作用，进而在
病害的生物控制病害方面提供了一个发展趋势。
1 材料及方法
1．1 材料
1．1．1 培养基 PDA、NA培养基 、金氏培养液
1．1．2 供试菌 从植物组织中分离的内生菌
1．1．3 病害种类 马铃薯炭疽病菌、枯萎病菌、茎点霉
1．2 方法
1.2.1 内生菌的分离纯化
将植物组织用自来水清洗表面后,晾干称重后用10%的次氯酸钠
溶液消毒中10 min, 之后浸入0.1%的升汞中2min，最后用无菌水冲洗
3次,用滤纸吸干, 放入研钵中加入质量分数为0.85%Nacl研磨,梯度
稀释后涂布于NA培养基, 28℃培养箱中倒置培养3−7 d。同时以最后
一次洗涤的水作为对照。根据平板上长出菌落的形态、颜色、大小等
挑取不同单菌落, 反复划线纯化后接斜面保藏。
1．2．2 拮抗菌的筛选
1．2．2．1 采用平板对峙法
采用平板对峙法测定抑菌效果，将纯化好并活化的细菌接到NA培
养基中制成平板, 28℃恒温培养24h，用直径5 mm的打孔器取致病菌
菌块于PDA 平板中央,在其周围4个等距离位置上分别接上4种不同的
内生细菌,每处理做3次重复，进行初筛选，培养3～5 d后,观察不同
内生细菌是否对致病菌有抑制生长的作用及抑菌圈的大小(取3次重
复的平均值)。对抑菌效果好的细菌再进行筛选， 28 ℃下恒温培养
至对照长满后，测致病菌菌落的长和宽, 计算拮抗细菌对致病菌的抑
菌力。抑菌力= (D-B)/D（100 %)（D : CK 致病菌菌落直径；B : 处
理致病菌菌落宽度），每处理重复3 次, 只接致病菌菌饼为对照
( CK) 。
1．2．2.2 拮抗细菌对致病菌孢子萌发的影响
在金氏培养液中培养36 h ( 30 ℃ ) 的拮抗细菌用细菌过滤器
过滤, 滤液分别稀释0、10、100 倍, 每浓度溶液中加入病菌孢子, 配
成孢子悬浮液, 以金氏培养液配成的孢子悬浮液为对照。采用悬滴法
25 ℃条件下培养8h、12h、16h、24h, 分别镜检致病菌孢子萌发率。
每处理测300 个孢子, 以芽管长度超过孢子直径一半为萌发。
展望
对拮抗细菌的代谢产物进行改造, 如多肽类抗生素可以通过基
因定点突变技术对分子进行修饰, 以提高其活性。遗传工程拮抗细菌
是新型、高效的一代生防菌。要使拮抗细菌达到理想的效果, 将生物
工程技术与生物防治技术相结合, 即遗传工程拮抗细菌和抗菌物质
的改造以及把拮抗细菌的抑菌基因转入植株基因组中获得高抗或免
疫品种三者结合起来, 提高拮抗细菌的生防水平, 将是拮抗细菌的研
究目标。