内毒素检测系列--鲎和鲎试剂(LALTAL)相关介绍
鲎和鲎试剂（LAL/TAL）相关介绍
鲎又称王蟹，隶属于节肢动物门（Arfhropoda）、有螯肢亚门（Chelicerata）、肢口纲（Merostomata）、剑尾目（Xiphosura）。此种动物远在古生代泥盆纪就已经出现，直到现在它的形态并无重大变化，故人们称其为“活化石”。鲎在胚胎发育过程中要经过三叶虫阶段，说明它们是从古生代的三叶虫演化而来，因此对鲎的生物学研究在节肢动物的系统发生研究中具有一定的意义。鲎从受精卵孵出到成熟，要经过漫长的15年，因此如何保护鲎资源是十分重要的。我国已经把鲎作为珍贵动物加以保护。很多省市将鲎列为2级保护动物，并设立鲎保护区。
鲎的种属很少，全世界现存种类只有5种，它们分隶于三个属。5种鲎的名录及其分布如下：
（1）美洲鲎 Limulus polyphemus Linnaeus，产于北美洲东岸；
（2）巨鲎 Tachypleus gigas Muller，产于泰国、马来半岛、马来群岛沿岸；
（3）中国鲎(又名三刺鲎）Tachypleus tridentatus Leach，产于我国东南沿海及日本南部沿岸；
（4）锄腹鲎 Tachypleus hoeveni Pocock,产于马六甲诸岛沿岸；
（5）圆尾鲎 Carcinoscorpius rotundicauda Pocock，产于东南亚往西沿岸.
鲎的地理分布狭隘，仅限于北美与东南亚一带。欧洲虽然发现不少鲎的化石，但从未发现生活鲎。分布在我国沿海的鲎都属于同一种，取名中国鲎，从浙江乍浦以南，福建，台湾和广东，广西均有分布，但以福建，广东，广西产的鲎个体大，数量多。
鲎有5种但是能用于制备鲎试剂的只有2种：中国鲎和美洲鲎。
鲎试剂是从栖生于海洋的节肢动物“鲎”的兰色血液中提取变形细胞溶解物，经低温冷冻干燥而成的生物试剂，专用于细菌内毒素检测。
鲎试验法是国际上至今为止检测内毒素最好的方法，它简单﹑快速﹑灵敏﹑准确，因而被欧美药典及我国药典定为法定内毒素检查法，并已被世界各国所采用。由于鲎地理分布狭隘和资源不多，目前世界上仅有美国，日本、中国、英国、德国等少数国家能进行商品生产目前国际上销售的鲎试剂有两种，一种称美洲鲎试剂（Limulus Amebocyte Lysate），缩写为LAL，由美国生产；另一种称东方鲎鲎试剂（Tachypleus Amebocyte Lysate），缩写为TAL。TAL与LAL有相同的功效。
国内最早的鲎试剂专家主要有厦门鲎试剂的创始人吴伟洪、卫生部上海生物制品研究所的张天仁，卫生部药品生物制品检定所的夏振民等。
国内最早投入鲎试剂研究和批量生产的厂家是厦门鲎试剂厂，如今已成为国内最大，产品最齐全的厂家之一。
国内最经典的鲎试验法是凝胶法，自从2004年以来，开始陆续推出显色基质法，动态浊度法鲎试剂，完成了从定性到定量的转变。
细菌内毒素试验（鲎试验）的全面解析
细菌内毒素试验（鲎试验）的全面解析
一般细菌毒素可分为两类，一类为外毒素(Exotoxin)；它是一种毒性蛋白质，是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。产生外毒素的细菌主要是 革兰氏阳性菌。如白喉杆菌、破伤风杆菌、肉毒杆菌、
金黄色葡萄球菌以及少数 革兰氏阴性菌。
另一类为内毒素(Endotoxin)，是革兰氏阴性菌的细胞壁的产物。细菌在生活状态时不释放出来，只有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其毒性，内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。
和热原的关系
热原(pyrogen)系指能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。它包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。
热原是否就是内毒素？细菌内毒素是热原的一种，即细菌性热原。细菌内毒素被认为是热原的本质，此事在学术上仍有争议，热原不仅是细菌内毒素。
但在药检的范畴，细菌内毒素是主要的热原物质，可以说无内毒素就无热原，控制内毒素就是控制热原。
热原反应：含有热原的注射剂注入人体可引起发热反应，使人体产生发冷、寒战、体温升高、出汗、恶心、呕吐等症状，有时体温可升至40℃，严重者甚至昏迷、虚脱，如不及时抢救，可危及生命。
来源和控制方法
1、细菌内毒素的特性
2、去除细菌内毒素的方法
(1)吸附法
此法是利用活性炭对热原的吸附作用达到去除作用的方法。常用的吸附剂中，活性炭对热原的吸附作用最强，一般用量为总容量的0.1%-0.5% ，将溶液加热到70℃左右保温一定时间效果更好。
使用的活性炭应符合药典规定要求。
(2)蒸馏法
此法是利用热原具有不挥发性而达到去除目的。因此，凡适于蒸馏的药品均可用蒸馏法除去热原。
(3)热破坏法
此法是利用热高温能破坏热原质达到去除目的。因此，凡适用于高温处理的如热原检查试验中接触药液的容器，可用180℃干烤3小时，或250℃干烤30min以上。
(4)强酸强碱处理法
此法利用强酸强碱能破坏热原而达到去除的目的。
细菌内毒素与鲎试剂反应机理
细菌内毒素与鲎试剂反应机理
细菌内毒素是一种由细菌产生的有毒物质，对人体健康带来严重的威胁。鲎试剂是一种常用于检测细菌内毒素的试剂。本文将探讨细菌内毒素与鲎试剂反应的机理。
鲎试剂是由鲎血清制成的，其中含有一种叫做鲎凝集素的蛋白质。细菌内毒素与鲎凝集素之间存在一种特殊的相互作用。细菌内毒素可以与鲎凝集素结合，形成一个复合物。这个复合物会导致鲎凝集素发生聚集，形成一种凝集物。
通过观察鲎试剂在细菌内毒素存在下的凝集反应，我们可以判断细菌内毒素的存在与浓度。当细菌内毒素浓度较高时，凝集反应会更明显。而当细菌内毒素浓度较低时，凝集反应会较弱或不明显。
这种凝集反应的机理是基于鲎凝集素与细菌内毒素之间的亲和性。鲎凝集素可以识别并结合特定的糖分子，而细菌内毒素上的一些糖分子与鲎凝集素具有亲和性。当细菌内毒素存在时，鲎凝集素会与其结合，从而导致凝集反应的发生。
细菌内毒素与鲎试剂反应机理的研究对于细菌内毒素的检测和预防具有重要意义。通过了解细菌内毒素与鲎试剂的相互作用，我们可以快速、准确地检测细菌内毒素的存在与浓度，从而采取相应的措施保护人体健康。
细菌内毒素与鲎试剂之间的反应机理是基于鲎凝集素与细菌内毒素之间的亲和性。通过观察鲎试剂的凝集反应，我们可以判断细菌内毒素的存在与浓度。这一研究对于细菌内毒素的检测和预防具有重要意义。
医疗用品中内毒素检测标准
医疗用品中内毒素检测标准
一、检测方法
医疗用品中的内毒素检测应采用鲎试剂法。鲎试剂法是一种利用鲎血变形细胞溶解物与内毒素产生凝集反应的检测方法，具有灵敏度高、特异性强的特点。
二、灵敏度要求
内毒素检测的灵敏度要求应达到0.1 EU/ml或更低。这意味着在每毫升医疗用品中，内毒素的含量应不超过0.1 EU。
三、准确性要求
内毒素检测的准确性要求较高，误差率应不超过±20%。同时，应采用已知浓度的标准品对检测方法进行校正，以保证检测结果的准确性。
四、特异性要求
内毒素检测应具有良好的特异性，避免与其他物质发生交叉反应。对于医疗用品中可能存在的其他成分，应在检测时进行特异性验证，以确保结果的可靠性。
五、重复性要求
内毒素检测的重复性要求较高，应采用多份样品进行平行试验，并计算变异系数（CV）。CV值应不超过20%，以保证检测结果的稳定性和可重复性。
六、线性范围
内毒素检测的线性范围应满足医疗用品中内毒素含量的要求。线性范围的下限应达到灵敏度要求，上限应根据实际需要确定，一般可达到10 EU/ml或更高。
七、稳定性要求
内毒素检测试剂的稳定性要求较高，应在规定的有效期内使用。同时，应定期对试剂进行质量检查，以保证检测结果的可靠性。
八、操作简便性
内毒素检测的操作应简便易行，不需要特殊设备和技能。在操作过程中，应严格按照说明书进行操作，避免误差和偏差。
九、试剂安全性
内毒素检测试剂应安全可靠，不会对操作者和环境造成危害。同时，试剂的储存和运输也应注意安全问题，防止意外事故的发生。
十、符合国家相关法规和标准
医疗用品中内毒素检测标准应符合国家相关法规和标准的要求。具体来说，应遵循国家食品药品监督管理总局发布的《医疗器械注册管理办法》、《医疗器械监督管理条例》等法规的要求，以及国家标准化管理委员会发布的相关标准。同时，还应关注国际上的相关法规和标准，以便与国际接轨。
内毒素检测方法
内毒素检测方法
一、内毒素的检测方法
常用的检测内毒素的方法有以下几种：
1.凝胶法：通过鲎试剂（鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等）与内毒素发生凝集反应产生凝固蛋白（凝胶）的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。凝胶法是通过观察有无凝胶形成作为反应的终点。此法操作比较简单，经济，不需要专用测定设备，可以进行定性或半定量测定。
2.动态浊度法；浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。内毒素与鲎试剂中的凝固酶原激活呈凝固酶，凝固酶可使凝固蛋白原变成凝固蛋白（即产生凝胶），使液体的浊度发生变化，通过动态观察浊度变化速率检测。
3.终点显色法:通过由于细菌内毒素激活鲎试剂（鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等）C因子，引起一系列酶促反应，激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的显色基质（含N-α-苯甲酰-DL-精氨酰-4-硝基苯胺盐酸盐），使其分解为多肽和黄色的对硝基苯胺（pNA，λmax = 405nm）。同时，对硝基苯胺（pNA）也可用偶氮化试剂染成玫瑰红色（λmax = 545nm），避免了供试品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰。根据产物颜色判断内毒素浓度，又称为比色法。
4.动态显色法:内毒素可激活鲎试剂引起一系列酶促反应，产生黄色的对硝基苯胺（pNA，λmax = 405nm），在一定时间内，动态观察对硝基苯胺（pNA）的生成量，与细菌内毒素浓度成正相关。但此方法需要带温育系统的动态光度测定仪器及配套软件。
5.其他检测方法：还有一些直接测定内毒素定量的方法如酶联免疫吸附测定法(ELISA)、免疫学方法（如火箭免疫电泳试验法、L-聚赖氨酸法、双抗体夹心法、荧光偏振法等）等，这些方法的特点是特异性、准确性高，但其应用尚待大量临床实践的验证，操作尚待进一步简化；还有一些间接测定的方法，如生物学方法利用LPS刺激免疫细胞产生IL-1、TNF，通过间接测定IL-1、TNF等细胞因子含量，推算出待检样本中的LPS含量；化学发光法：应用CR1和CR3受体诱导中性粒细胞的氧化反应作为一个反应平台，通过测定内毒素对中性粒细胞的生物学作用来检测内毒素的含量；流式细胞术：应用针对内毒素表面抗原决定簇的单克隆抗体对内毒素进行荧光标定而后应用流式细胞仪进行检测。
中国药典和美国药典的内毒素检测要求
鲎试剂－LAL，中国药典和美国药典的内毒素检测要求
鲎试剂是从栖生于海洋的节肢动物“鲎”的兰色血液中提取变形细胞溶解物，经低温冷冻干燥而成的生物试剂，专用于细菌内毒素检测。
鲎试验法是国际上至今为止检测内毒素最好的方法，它简单﹑快速﹑灵敏﹑准确，因而被欧美药典及我国药典定为法定内毒素检查法，并已被世界各国所采用。
目前国际上销售的鲎试剂有两种，一种称美洲鲎试剂（Limulus Amebocyte Lysate），缩写为LAL，由美国生产；另一种称东方鲎鲎试剂（Tachypleus Amebocyte Lysate），缩写为TAL。实验证明：美洲鲎试剂-LAL比东方鲎试剂LAL更纯洁，检测效果更好。
TAL检查内毒素有很多方法，目前应用最广泛的是凝胶法，此外还有动态浊度法﹑显色基质法,比色法等。其用途有以下几方面：1. 药检：用于注射药品﹑放射性药物﹑生物制品﹑注射器及生产工艺流程中的内毒素检测；2. 临床：用于检测病人各种体液中的内毒素含量；3. 其他：用于检测水或食品中的内毒素含量。
2005年版中国药典 《细菌内毒素检查法-鲎试剂法》(鲎试剂－LAL法)
本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。
细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和显色基质法。供试品检测时，可使用其中任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶法结果为准。
细菌内毒素的量用内毒素单位（EU）表示。
细菌内毒素国家标准品系自大肠杆菌提取精制而成，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度和标定细菌内毒素工作标准品的效价。
细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于试验中鲎试剂灵敏度复核、干扰试验及设置的各种阳性对照。
凝胶法细菌内毒素检查用水系指内毒素含量小于0.015EU/ml的灭菌注射用水。定量测定用的细菌内毒素检查用水，其内毒素的含量应小于0.005EU/ml。
细菌内毒素与鲎试剂反应机理 2
细菌内毒素与鲎试剂反应机理
引言
细菌内毒素是由细菌产生的一类有毒化合物，可以对人体和其他生物产生严重的危害。鲎试剂是一种常用于检测细菌内毒素的试剂，通过与细菌内毒素发生反应来实现检测。本文将介绍细菌内毒素与鲎试剂的反应机理，包括反应过程、影响因素以及实验方法等内容。
1. 细菌内毒素概述
细菌内毒素是一类由细菌产生的有毒化合物，常见的包括脂多糖（LPS）和外毒素等。这些化合物可以引起炎症反应、损伤组织和器官，并在严重情况下导致败血症等危险疾病。
2. 鲎试剂概述
鲎试剂是一种常用于检测细菌内毒素的试剂，其原理是通过与细菌内毒素发生特异性反应来实现检测。鲎试剂通常由两部分组成：辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体和底物。
3. 反应机理
细菌内毒素与鲎试剂的反应机理如下：
1. 鲎试剂中的抗体能够识别并结合特定的细菌内毒素。
2. 细菌内毒素与抗体结合后，形成一个复合物。
3. 复合物中的细菌内毒素能够与HRP标记的抗体发生反应。
4. HRP在适当条件下可以催化底物发生氧化反应，产生可检测的信号。
4. 影响因素
细菌内毒素与鲎试剂反应的效果受到多种因素的影响，包括以下几个方面：
1. 温度：适宜的温度有助于提高反应速率和灵敏度。一般情况下，常温或37摄氏度是常用的温度条件。
2. pH值：pH值对于鲎试剂反应具有重要影响。不同细菌内毒素与鲎试剂之间可能存在最适宜pH值差异。
3. 时间：反应时间需要根据具体实验条件进行优化。过短或过长的反应时间都可能导致结果不准确。
4. 细菌内毒素浓度：细菌内毒素浓度的高低直接影响反应的灵敏度和线性范围。 5. 实验方法
以下是一种常用的实验方法，用于检测细菌内毒素与鲎试剂的反应：
1. 准备样品：收集待检测的细菌培养物，并将其离心沉淀。将沉淀物重新悬浮于适当的缓冲液中。
2. 添加试剂：将鲎试剂中标记有HRP的抗体加入样品中，充分混合。
3. 反应条件：根据实验要求，调节温度、pH值和反应时间等条件。
内毒素检测系列--鲎和鲎试剂(LALTAL)相关介绍
鲎和鲎试剂（LAL/TAL）相关介绍
鲎又称王蟹，隶属于节肢动物门（Arfhropoda）、有螯肢亚门（Chelicerata）、肢口纲（Merostomata）、剑尾目（Xiphosura）。此种动物远在古生代泥盆纪就已经出现，直到现在它的形态并无重大变化，故人们称其为“活化石”。鲎在胚胎发育过程中要经过三叶虫阶段，说明它们是从古生代的三叶虫演化而来，因此对鲎的生物学研究在节肢动物的系统发生研究中具有一定的意义。鲎从受精卵孵出到成熟，要经过漫长的15年，因此如何保护鲎资源是十分重要的。我国已经把鲎作为珍贵动物加以保护。很多省市将鲎列为2级保护动物，并设立鲎保护区。
鲎的种属很少，全世界现存种类只有5种，它们分隶于三个属。5种鲎的名录及其分布如下：
（1）美洲鲎 Limulus polyphemus Linnaeus，产于北美洲东岸；
（2）巨鲎 Tachypleus gigas Muller，产于泰国、马来半岛、马来群岛沿岸；
（3）中国鲎(又名三刺鲎）Tachypleus tridentatus Leach，产于我国东南沿海及日本南部沿岸；
（4）锄腹鲎 Tachypleus hoeveni Pocock,产于马六甲诸岛沿岸；
（5）圆尾鲎 Carcinoscorpius rotundicauda Pocock，产于东南亚往西沿岸.
鲎的地理分布狭隘，仅限于北美与东南亚一带。欧洲虽然发现不少鲎的化石，但从未发现生活鲎。分布在我国沿海的鲎都属于同一种，取名中国鲎，从浙江乍浦以南，福建，台湾和广东，广西均有分布，但以福建，广东，广西产的鲎个体大，数量多。
鲎有5种但是能用于制备鲎试剂的只有2种：中国鲎和美洲鲎。
鲎试剂是从栖生于海洋的节肢动物“鲎”的兰色血液中提取变形细胞溶解物，经低温冷冻干燥而成的生物试剂，专用于细菌内毒素检测。
鲎试验法是国际上至今为止检测内毒素最好的方法，它简单﹑快速﹑灵敏﹑准确，因而被欧美药典及我国药典定为法定内毒素检查法，并已被世界各国所采用。由于鲎地理分布狭隘和资源不多，目前世界上仅有美国，日本、中国、英国、德国等少数国家能进行商品生产目前国际上销售的鲎试剂有两种，一种称美洲鲎试剂（Limulus Amebocyte Lysate），缩写为LAL，由美国生产；另一种称东方鲎鲎试剂（Tachypleus Amebocyte Lysate），缩写为TAL。TAL与LAL有相同的功效。
内毒素的检测-鲎实验
— 1 — 内毒素的检测-鲎实验
【实验原理】
鲎试验是检测内毒素的一种试验方法，试验灵敏，能检出微量（0.0001μg/ml）内毒素。鲎是一种冷血动物，其血细胞的溶解产物与内毒素相遇即被凝固，机制尚不清楚，可能是溶解物中含有凝固蛋白原和一种高相对分子质量的凝固酶原，凝固酶原经内毒素激活转化成凝固酶，此酶使蛋白酶原变为凝固蛋白，再通过交联酶的作用，相互聚合形成纤维状凝胶。
【实验材料与仪器】
1.鲎试验试剂一套，待检测样品；
2.大肠杆菌内毒素（阳性对照）、无菌蒸馏水、待检液等；
3.吸管、小试管、试管架等。
【实验方法】
1.将鲎试剂按要求加入等量的不含有热原质的无菌蒸馏水，振摇2～3min使之溶解。
2.在试验管、阳性对照管及空白对照管中各加溶解物0.1ml。
3.试管中加待检液0.1ml，阳性对照管加大肠杆菌内毒素0.1ml，空白对照管加溶解水0.1ml，置37℃水浴1h后观察结果。
【实验结果】
1.阳性对照管出现凝固，空白对照管无变化时，试验结果正确，再观察待检测样品管。
2.试验管出现凝固为阳性，证明有内毒素存在，如未出现凝固，证— 2 — 明无内毒素存在。
鲎试验 名词解释
鲎试验 名词解释
鲎试验是检测内毒素血症的一种试验。鲎系海边栖生的一种大型节肢动物,属蜘蛛纲。其多功能血细胞(变形细胞)的溶解物中含有一种可凝性蛋白质,在极微量内毒素(0.0005vg/ml)存在时可形成凝胶。本试验即利用此原理测定血液或其他样品中的微量内毒素。在临床病例,下列疾病阳性率较高:内毒素性休克、急性化脓性胆管炎、重症肝炎、腹膜炎、肝硬化等。内毒素检出阳性病例中约有2/3导致死亡。
鲎试剂是从栖生于海洋的节肢动物“鲎”的兰色血液中提取变形细胞溶解物，经低温冷冻干燥而成的生物试剂，专用于细菌内毒素检测。鲎试剂因能与细菌内毒素及β-葡聚糖反应形成凝胶而被广泛用于检测食品、水源、药品、医疗器械、动物体液等不同样品中的内毒素。使用鲎试剂检测的试验称为鲎试验。根据鲎试剂反应的原理可分为定性鲎试剂和定量鲎试剂，对应的试验称定性鲎试验和定量鲎试验。定性鲎试验主要用于药品，医疗器械等产品的内毒素定性检验。定量鲎试验主要用于检测临床病人、动物体内内毒素等方面，以便为医生用药提供参考。
内毒素测定新手上路
内毒素检测鲎试剂盒种类及选购------新手上路
鲎试剂
鲎试剂是从栖生于海洋的节肢动物“鲎”的蓝色血液中提取变形细胞溶解物，经低温冷冻干燥而成的生物试剂，专用于细菌内毒素与β-葡聚糖检测。
鲎试剂按原料来源分：
全世界目前有4个种属的鲎，其中仅有东方鲎(Tachypleus tridentatus Leach) 和美洲鲎(Limulus polyphemus Linnaeus)可制造鲎试剂，对应生产出来的鲎试剂分别为东方鲎鲎试剂（Tachypleus Amebocyte Lysate, TAL）和美洲鲎鲎试剂（Limulus
Amebocyte Lysate，LAL），TAL与LAL具有相同的功效。
鲎试剂按方法分：
凝胶法鲎试剂
动态浊度法鲎试剂
终点浊度法鲎试剂
动态显色法鲎试剂
终点显色法鲎试剂
凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量内毒素的方法。凝胶法鲎试剂常见规格为0.1ml/支或0.5ml/支或者更大装量，使用时应加除热原水（细菌内毒素检查用水）复溶后使用。凝胶法是通过观察有无凝胶形成作为反应的终点。此法操作比较简单，经济，不需要专用测定设备，可在0.03EU/ml的范围内进行定性或半定量测定。
动态浊度法鲎试剂、终点浊度法鲎试剂、动态显色法鲎试剂、终点显色法鲎试剂，这四种方法都是定量检测内毒素的。
根据检测原理，终点浊度法和动态浊度法都属于浊度法。浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。终点浊度法未见与商品化产品。动态浊度法（又称动态比浊法）是检测反应混合物的浊度到达某一预先设定的吸光度所需要的反应时间，或是检测浊度增加速度的方法。
终点显色法和动态显色法都是属于显色基质法。显色基质法系利用鲎试剂与内毒素反应过程中产生的凝固酶使特定底物显色释放出的呈色团的多少而测定内毒素含量的方法，根据产物颜色判断内毒素浓度，又称为比色法。厦门鲎试剂厂于2005年推出以鲎四肽为显色底物的鲎试剂盒，抗干扰能力强, 灵敏度高达0.005EU/ml, 质量达到国际领先水平。目前已有500多家单位使用该试剂盒，并有部分单位发表相应文献。国内有少量国外产品，但价格远高于国产试剂，到货周期长。