槐花中芦丁的正交提取工艺及抗氧化活性研究
畜牧与饲料科学 Ａ ｎｉｍａ１日 ６帆ｄ ａｎｄ Ｆｅｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０１０，３１（２）：１１—１３
槐花中芦丁的正交提取工艺及抗氧化活性研究
董晓宁 ，赵强。，王俊峰
（１．天水师范学院生命科学与化学学院，甘肃 天水７４１００１；２．甘肃工业职业技术学院化学与环境工程系，甘肃 天水
７４１０２５；３．西北师范大学化学化工学院，甘肃 兰州 ７３００７０）
摘要：以芦丁的紫外最大吸收波长５１０ ｎｍ为指标，进行正交试验设计，筛选出从槐花中提取芦丁的最佳工艺参数，将芦
丁用超氧负离子自由基清除法进行抗氧化活性试验。结果表明。醇提法提取工艺最为理想，其工艺参数为：乙醇浓度
８０％、乙醇用量１００ ｍＬ、振荡温度４５℃，该工艺提取出的芦丁含量最高可达１１．６％；芦丁对超氧负离子自由基Ｏ２－・的清
除作用呈量效关系，清除作用的ＩＣ５０值为：０．０３０ ５ ｇ／Ｌ，存在显著性差异（￡＝２．９３，Ｐ＜０．０５）。
关键词：槐花；芦丁；正交设计；抗氧化活性 中图分类号：Ｒ２８４ 文献标识码：Ａ 文章顺序编号：１６７２—５１９０（２０１０）０２—００１１—０３
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ Ｄｅｓｉｇｎ Ｍｏｄｅ ａｎｄ Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ０ｆ Ｒｕｔｉｎ ｆｒｏｍ Ｓｏｐｈｏｒａｊａｐｏｎｉｃａ
Ｄ０ＮＧ Ｘｉａｏ—ｎｉｎｇ ．ＺＨＡＯ Ｑｉａｎｇ２，ＷＡＮＧ Ｊｕｎ－ｆｅｎｇ
（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｔｉａｎｓｈｕｉ Ｎｏ瑚ａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔｉａｎｓｈｕｉ ７４１００１，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｇａｎｓｕ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｔｉａｎｓｈｕｉ ７４１０２５，Ｃｈｉｎａ；３．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ
Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｌａｎｚｈｏｕ ７３００７０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ，ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｍａｘｉｍｕｍ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ５ １０ ｎｍ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｉｎｄｅｘ ｆｏｒ ｔｈｅ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｍｏｄｅ ｔｏ ｓｃｒｅｅｎ ｔｈｅ
ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｐａｒａｍｅｔｅｒ ｏｆ ｒｕｔｉｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ Ｓｏｐｈｏｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ，ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｒｕｔｉｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｓｕｐｅｒ ｏｘｉｄｅ ａｎｉｏｎ ｒａｄｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ
ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ｍｃｏｈｏｌ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｉｄｅａｌ ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ ｉｔｓ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｗａｓ ｅｔｈａｎｏｌ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ８０％。ｅｔｈａｎｏｌ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ １００ ｍＬ ａｎｄ ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ４５℃．ｒｕｔｉｎ ｏｆ １ １．６％ｃｏｕｌｄ ｂｅ ａｃｈｉｅｖｅｄ ｂｙ ｉｔ．Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ
ｄｏｓｅ—ｄｅｐｅｎｄａｎｔ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｒｕｔｉｎ ｔｏ ｃｌｅａｎ ｕｐ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃｌｅ ０２一，ａｎｄ ｔｈｅ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ＩＣ５０ ｗａｓ ０．０３０ ５ ｇ／Ｌ，ｗｈｉｃｈ ｉｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ
ｄｉｆｅｒｅｎｃｅｓ ｅｘｉｓｔ（ｔ＝２．９３，Ｐ＜０．０５）．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｓｏｐｈｏｒａｊａｐｏｎｉｃａ；ｒｕｔｉｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ
槐花（Ｓｏｐｈｏｒａｊａｐｏｎｉｃａ）又名槐蕊，为豆科植物槐
（Ｓｏｐｈｏｒａｊａｐｏｎｉｃａ Ｌ．）的干燥花朵。槐原产于我国北方，现广
泛分布于全国各地，生长于山坡、平原或种植于庭院。春夏
收稿日期：２０１０—０１—２８
基金项目：甘肃省应用技术研究与开发专项基金（ＱＳ０３１一 Ｃ３ｌ一１１）。 作者简介：董晓宁（１９６８一），男，讲师，主要研究方向为药物分
析化学与无机化学。 季花初开时采收，除去杂质，干燥，生用或炒炭用。据《１３华子
本草》记载：槐花味苦、性微寒，归肝、大肠经。槐花具有清热、凉
血、止血、清肝明目等功效，主治肠风便血、痔疮下血、血痢、尿
血、血淋、崩漏、衄血、赤白痢下、风热目赤、肝热目赤、肝热头
痛、痈疽疮毒、皮下出血、月经过多、眼内出血、过敏性紫癜、银
屑病、高血压、动脉硬化、慢性非特异性溃疡性结肠炎、大便反
复出血等症，并能防治脑出血，尤以对便血、痔血、清肝火等的
治疗效果十分显著。其水煎剂及提取物还有一定的抗菌、抗
收率试验，结果见表３。表３中所示结果说明该方法具有较
好的准确度。
表３回收率试验Ｐ，ｇ／ｇ，％
组别 元素‘样品中含量 加入量 测得量 回收率
对照组 Ｐｂ ０．１１０ ０．１０ ０．２０９ ９８．２
凝胶组Ｐｂ ０．０９９ ０．０５ ０．１４６ ９７．２
２．４方法的检出限 经过对空白样品的２０次重复测定．求
其标准偏差，以其标准偏差的３倍对应的含量作为该元素的检
出限。试验结果显示，Ｐｂ的检出限为１．０３２ ｇｅＬ。而一般烟
用胶黏剂含量都介于ｍ Ｌ和 Ｌ级别之间，因此，对于大多数
烟用胶黏剂而言，该方法完全可以满足其铅分析测定的需要。
３结论
用微波消解一石墨炉原子吸收法能够快速、准确、简便
地测定烟用胶黏剂中Ｐｂ的含量。该方法的建立为烟用添加
剂的安全使用提供了参考。
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ｉｎｄｕｃｔｉｖｅｌｙ ｃｏｕｐｌｅｄ ｐｌａｓｍａ ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＩＣＰ—ＭＳ）ｌ Ｊ １． ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，９（５）：１４５—１４９．口
ｒ｝１２ 畜牧与饲料科学 第３ｌ卷
炎、抗病毒、凝血、止血、影响心血管系统等作用。
槐花中的主要成分为芦丁（ｒｕｔｉｎ），又名芸香苷，其化学
名称为：５，７，３ ，４＇－四羟基一３一芸香糖黄酮，槐花中芦丁的含
量在４．３０％～２３．５０％之间…。现代药理研究表明，槐花之所
以具有如此非凡的药效，主要与其含有黄酮类物质芦丁有
很大的关系 ］。该试验旨在建立和优选槐花中芦丁的正交
提取工艺模式，并进行芦丁的抗氧化活性研究，以期为槐花
药物的开发和利用提供一定的理论依据。
１材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ 药材：槐花粉末（初夏采集于天水师范学院生物园，
自然风干，粉碎）。 ・
１．１．２ 仪器设备：ＫＱ一５００Ｄ型数控超声波清洗器（昆山市
超声仪器有限公司生产）、ＵＶ一９２００型紫外一可见光分光光
度计（北京瑞利仪器分析有限公司生产）、ＡＢ１０４一Ｓ电分析
天平（瑞士梅特勒公司生产）、索式提取器（昆山市超声仪器
有限公司生产）。
１．１．３ 药品及试剂：芦丁对照品、ＮａＨＣＯ３、９５％乙醇、５％硼
砂、石灰水、ＮａＮＯ２、Ａ１Ｃ１３、邻苯三酚、吐温一８０、Ｔｒｉｓ，其他试剂
均为国产或进口分析纯。
１．２方法
１．２．１槐花中芦丁的正交提取工艺
１．２．１．１粗提：粗称槐花粉末１０ ｇ，加入定量浓度的乙醇，在
室温下封口浸泡４～６ ｈ，加入１５ ｍＬ ８％的ＮａＨＣＯ３溶液调节
ｐＨ值至中性，在超声波中震荡３０ｍｉｎ后，在恒温水浴下浸
泡１２ ｈ，趁热抽滤，将滤液进行减压蒸馏，趁热将滤液倒入
锥形瓶中，用９％的盐酸调节ｐＨ值在３～４之间，静置过夜，
自然冷却析晶，即为芦丁粗品 ］。
１．２．１．２ 精制：将粗品置于２５０ ｍＬ的烧杯中，加入１５０ ｍＬ
的蒸馏水．边加热边搅拌，再加入５ ｍＬ ３％硼砂溶液，用饱
和石灰水调节ｐＨ值在８￣９之间，煮沸至粗品溶解后，趁热
减压抽滤，将滤液用９％的盐酸调节ｐＨ值在３￣４之间，静
置过夜。析出晶体。
１．２．１．３纯度测定：精密称取０．０６２ ５ ｇ的芦丁对照品，加５Ｏ
ｍＬ ７５％乙醇溶解，定容至２５０ ｍＬ刻度线，摇匀作为芦丁对
照品溶液。
精密量取对照品溶液各２．０，４．０，６．０，８．０，１０．０ ｍＬ于５０
ｍＬ容量瓶中，分别加蒸馏水至１０ ｍＬ。另取三重蒸馏水作为
空白对照，分别各加人５％ＮａＮＯ２溶液２ ｍＬ，摇匀 静置６
ｒａｉｎ，加１％Ａ１Ｃ１３溶液６ ｍＬ，摇匀静置６ ｍｉｎ，加４％ＮａＯＨ溶
液２０ ｍＬ，摇匀静置１５ ｍｉｎ，加蒸馏水至刻度，在５１０ ｎｍ的
波长处测定其吸光度，以芦丁对照品的浓度为横坐标，吸光
度为纵坐标，得出回归方程：ｌ，＝０．００９Ｘ一０．００１ ８，Ｒ２＝０．９９９ ８。
称取样品约３Ｏ ｍｇ，置５０ ｍＬ容量瓶中，加入１０ ｍＬ
７５％乙醇使其溶解加水至刻度。取正交试验的９个样品，精
密量取２ｍＬ供试品．依次加入上述试剂使其显色，在５１０
ｎｍ下测定吸光度并计算芦丁的含量。
１．２．２ 抗氧化活性作用：用邻苯三酚氧化反应测定芦丁对
产生的超氧负离子自由基的清除作用。邻苯三酚在弱碱性
（Ｔｒｉｓ—Ｉ－ＩＣ１缓冲溶液，ｐＨ值８．２）环境中自氧化分解产生
０２－・，随着反应的进行，０ 一・在体系中会不断积累，导致反应 表１ 槐花中芦丁醇提法因素水平表
槐花米中芦丁的提取与鉴定
槐花米中芦丁的提取与鉴定
槐花米是槐花籽的胚芽部分，富含植物化学物质，常被用作食品、保健品和药品。芦丁是一种重要的植物黄酮类化合物，在槐花米中也存在着。本文主要探讨了槐花米中芦丁的提取与鉴定方法。
一、提取方法
1. 酸碱水解法
将槐花米粉末用75%酒精浸泡后，用钝性气体保护，加入0.1mol/L的氢氧化钠溶液，水解2小时。水解完毕后，加入酸化剂使pH值调至5.5左右，然后提取2次，每次提取30分钟，使用乙醇使提取液达到所需的体积，完成提取过程。
2. 超声波辅助法
将槐花米粉末用95%乙醇提取2次，每次提取60分钟。取得的提取液储存在4℃条件下，超声波辅助溶解过程中，超声波功率设置为250W，处理时间为45分钟。超声波辅助能够加速溶剂的渗透和分解，提高提取效率。
3. 超临界流体法
将槐花米粉末与正己烷混合，注入超临界流体反应器中，流体选择二氧化碳，温度为90℃，压力为30Mpa。在45分钟内处理样品，得到高品质的芦丁提取物。
二、鉴定方法
1. 毛细管电泳法
使用毛细管电泳法确定芦丁的含量和纯度。在试验中，一般采用50 mM 磷酸盐缓冲液( pH=3.10 ) 为电泳缓冲液，以50 mbar 的压力施加电压，对样品进行分离和检测，将检测到的谱图与标准物质谱图进行比对，以得到样品中芦丁的含量。
2. 气相色谱法
使用气相色谱法测定芦丁在槐花米中的含量。首先，将提取物用氮气吹干至干燥，然后加入甲醇，溶解完毕后过滤。过滤后再用甲醇调整成正常体积。
将样品注入色谱柱，沿着柱从注射口到检测器方向以一定的压力进行分离，通过检测器检测分离出来的物质。将检测到的峰面积与已知含量的标准物质进行比较，以确定样品中芦丁的含量。
3. 紫外分光光度法 使用紫外分光光度法确定芦丁的含量。在试验中，将提取物稀释到一定浓度后，用紫外分光光度计检测其在不同波长下的吸光度值。根据芦丁的特征峰，在290 nm处进行检测。将检测到的吸光度值与标准物质进行比较，以确定样品中芦丁的含量。
槐米萃取芦丁实验报告(3篇)
第1篇
一、实验目的
1. 学习槐米中芦丁的提取方法。
2. 掌握萃取实验的基本原理和操作步骤。
3. 了解芦丁的化学性质及其在槐米中的分布。
二、实验原理
芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合物，具有调节毛细血管壁渗透性的作用，临床上用作毛细血管止血药，常作为高血压病的辅助用药。槐米是槐系豆科槐属植物的花蕾，含芦丁量高达12%~16%。本实验通过萃取槐米中的芦丁，了解其提取方法及其在槐米中的分布。
三、实验材料与仪器
1. 实验材料：槐米、无水乙醇、盐酸、石灰水、硫酸、Mg粉、AlCl3、FeCl3、浓硫酸、浓盐酸等。
2. 实验仪器：研钵、烧杯、漏斗、抽滤瓶、容量瓶、分光光度计、紫外-可见分光光度计等。
四、实验步骤
1. 槐米预处理：称取3g槐米于研钵中研成粉状，置于50mL烧杯中。
2. 碱提：加入30mL饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸一刻钟后，抽滤。
3. 滤渣处理：滤渣再用20mL饱和石灰水溶液煮沸10min，合并滤液。
4. 中和：用15%盐酸中和滤液至pH值约为2～3。
5. 静置：静置6h，使芦丁沉淀析出。
6. 抽滤：过滤，滤渣干燥，即得粗芦丁。
7. 精制：将粗芦丁用无水乙醇溶解，过滤，滤液浓缩，得精制芦丁。
五、实验结果与分析 1. 槐米中芦丁的提取率：根据实验数据，槐米中芦丁的提取率为10.2%。
2. 芦丁的鉴定：通过Mg粉-HCl反应、AlCl3反应、FeCl3反应等显色反应，证实了提取物的确为芦丁。
3. 芦丁的纯度：精制芦丁的纯度可达99%以上。
六、实验讨论
1. 槐米中芦丁的提取方法：本实验采用碱提酸沉法，该方法简单易行，提取率较高。
2. 芦丁的纯度：通过精制，芦丁的纯度可达99%以上，符合药用要求。
3. 芦丁的应用前景：芦丁具有广泛的药用价值，可作为药用原料，也可用于食品、化妆品等领域。
七、实验结论
1. 本实验成功从槐米中提取了芦丁，提取率较高。
槐花中芦丁的提取工艺研究
时珍国医国药２００８年第１ ９卷第４期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００８ ＶＯＬ．１９ ＮＯ．４
槐花中芦丁的提取工艺研究
雷泞菲，桑世华，彭书明，宋雷霆
（成都理工大学材料与化学化工学院，四川成都６１００５９）
摘要：目的探讨槐花中黄酮类化合物芦丁的提取工艺和槐花的炮制储存对槐花中芦丁的影响。方法考察单因素水平
基础上进行正交设计提取槐花中芦丁；比较分析不同地点槐花、市售储藏槐花与槐花炭中芦丁的含量。结果槐花中芦
丁提取最佳工艺条件是：Ａ Ｂ Ｃ３，即２倍量６０％乙醇回流３次，２ ｈ／次。比较不同生长地点槐花与槐花炭中芦丁含量表
明，光照好的东风渠边槐花中芦丁含量最高（１３．２４％），新鲜槐花中芦丁含量普遍比市售储藏槐花高，烘干品比阴干品中
高，炮制后的槐花炭中含量最低（２．３４％）。结论槐花采摘后应立即高温１１０℃杀青有利于芦丁的保护，储藏期间尽量通
风干燥。栽培种植宜选择阳光好的空旷地。该实验结果为进一步开发和利用槐花提供了理论依据。
关键词：槐花； 芦丁； 醇回流法； 正交实验； 储藏栽培
中图分类号：Ｉ：｛２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００８－０８０５（２００８）０４－０８６０－０２
Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｒｕｔｉｎ ｆｒｏｍ Ｓｏｐｈｏｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ．Ｌ
ＬＥＩ Ｎｉｎｇ—ｆｅｉ，ＳＡＮＧ Ｓｈｉ—ｈｕａ，ＰＥＮＧ Ｓｈｕ－ｍｉｎｇ，ＳＯＮＧ Ｌｅｉ—ｔｉｎｇ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｃｈｅｎｇｄｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ
６１００５９，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｒｕｔｉｎ ａｎｄ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｓｔｏｒａｇｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａ ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｏ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｒｕｔｉｎ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｌｏｃａｔｉｏｎｓ，ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ ｓｔｏｒａｇｅ ａｎｄ ｐａｇｏ— ｄａｔｒｅｅ ｆｌｏｗｅｒ ｃａｒｂｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ Ａ２ Ｃ２ Ｂ３，ｔｈａｔ ｉｓ，ｔｗｉｃｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ６０％ａｌｃｏｈｏｌ ａｎｄ ｒｅｆｌｕｘｉｎｇ ｔｈｒｅｅ ｔｉｍｅｓ，ｔｗｏ ｈｏｕｒｓ ｏｎｃｅ．Ｃｏｍｐａｒｉｎｇ ｗｉｔｈ ｄｉｆｉｅｒｅｎｔ ｓｉｔｅｓ，ｓｔｏｒａｇｅｄ ａｎｄ ｐａｇｏｄａｔｒｅｅ ｆｌｏｗｅｒ ｃｈａｒｃｏａｌ，ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ １３１一 ｔｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｄｏｎｇｆｅｎｇ Ｒｉｖｅｒ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ（１ ３．２４％）．Ｒｕｔｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｆｒｅｓｈ ｆｌｏｗｅｒ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ ｐｒｏｄ— ｕｅｔｓ，ｄｒｙｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ ｏｖｅｎ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｉｎ ｔｈｅ ｓｈａｄｅ．Ｐａｇｏｄａｔｒｅｅ ｆｌｏｗｅｒ ｃｈａｒｃｏａｌ ｗａｓ ｔｈｅ ｌｏｗｅｓｔ（２．３４％）．Ｓｏ ｔｈｅ ｓｔｏｒａｇｅ ｏｆ Ｓｏｐｈｏｒａ ｊａｐｏｎｉｃａ Ｌ．ｓｈｏｕｌｄ ｆｉｘ ａ ｈｉｇｈ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｏｆ ｌ Ｉ Ｏ￣Ｃ ｉｍｍｅｄｉａｔｅｌｙ ａｆｔｅｒ ｐｉｃｋｉｎｇ ａｎｄ ｖｅｎｔｉｌａｔｉｏｎ ｄｒｙ ｓｔｏｒａｇｅ，ｐｌａｎｔｉｎｇ ｏｐｅｎ ｌａｎｄ ｏｆ
槐米中芦丁的提取,分离与鉴定实验报告
槐米中芦丁的提取,分离与鉴定实验报告
一、实验目的
1、通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。
2、通过芦丁结构的鉴定，了解苷类结构研究的一般程序和方法。
二、实验原理
芦丁:浅黄色针状结晶，mp174℃-178℃。溶解度:
1:8000;热水1:200;冷乙醇1:300;热乙醇1:30;冷甲醇1:100:热甲醇1:10.
槲皮素:黄色结晶，mp313℃-314℃，能溶解于冷乙醇，易溶于沸乙醇，可溶于甲醇、乙酸乙酯等;难溶于水，实验室以稀硫酸水解，乙醇重结晶制得。
本实验主要是利用芦丁分子中含有较多的酚羟基，显弱酸性，可溶于碱中，加酸酸化后又可析出结晶的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芦丁对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。
三、药品材料
槐米、石灰乳、盐酸、广泛PH试纸
四、实验操作
芦丁的的提取和精制
芦丁的提取:取槐米20g置500ml烧杯中，加入沸水400ml及1g硼砂，搅拌下加入石灰乳调至PH8-9,保持微沸30分钟，并随时补充蒸发掉的水分，趁热用双层纱布滤过，收集滤液，药渣再用200ml水按同样的操作再提取20分钟，合并两次滤液。浓缩至1/2体积，滤液在60℃-70℃再用盐酸调至PH4-5，静置一周，析出芦丁。
五、实验说明及注意事项
1、本实验采用碱溶液酸沉法从槐米中提取芦丁，收率稳定，且操作简便。在提取前应注意将槐米捣碎，使芦丁易于被热水溶出。槐花中含有大量粘液质，加入石灰乳使生成钙盐沉淀除去。PH应严格控制8-9，不得超过10,。因为在强碱条件下煮沸，时间稍长可促使芦丁水解破坏，使提取率明显下降。酸沉淀时PH4-5，不宜过低，否则会使芸香苷成烊盐溶于水，降低了收率。
2、提取过程中加入硼砂作用:保护芦丁分子中的邻二酚羟基不被氧化，亦保护邻二酚羟基不与钙离子络合，使芦丁不受损失。
槐米中芦丁的提取及工艺优化论文
槐米中芦丁的提取及工艺优化论文
一、引言
1.槐米的来源
槐树又称国槐、槐花树等。是我国特产树种之一。株高15?25米,胸径2米以上。枝叶密生,羽状复叶。圆锥花序顶生,花蝶形,夏季开黄白色花,略具芳香。
荚果肉质,含珠状不开裂,黄绿色。槐花为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥花蕾及花。全国各地区产,以黄土高原和华北平原为多。夏季花未开放时采收
其花蕾,称为“槐米”;花开放时采收,称为“槐花”(见图-1)。采收后除去花序
的枝、梗及杂质,及时干燥,生用、炒用或炒炭用。其性凉、味苦,功能凉血、止血,主治肠风、痔血、便血等症。槐米所含芦丁(云香苷),能增加毛细血管的韧性,
适用于毛细血管脆弱的患者。果实称槐实或槐角,俗称“槐连豆”,性能和主治与槐花相似。
我地区槐树种植广泛,特别在城市建设中,多用来作绿化树种,槐树多,槐米
产量自然高,全县每年收购量达万公斤以上。我地区收购的槐米,花蕾饱满,晒干后绿中呈黄,质地十分优良。上世纪八十年代,曾出口到外地[1]。
1.1化学成分 1.1.1槐花与槐米所含成分基本相同,主含三萜皂:
赤豆皂甙Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ,大豆皂甙I、Ⅲ,槐花皂甙Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ[2]。
1.1.2黄酮类化合物: 芦丁(Rutin?),槲皮素Quercetin,芸香甙(Rytub),异鼠李素,异鼠李素
-3-芸香糖甙,山奈酚-3-芸香糖甙。又含白桦脂醇,槐花二醇。 1.1.3脂肪酸类:
花油中含月桂酸Dodecanoic acid,十二碳烯酸,肉豆蔻酸,十四碳烯酸十四碳二烯酸,棕榈酸,十六碳烯酸,硬脂酸,十八碳二烯酸,十作碳三烯酸,花生酸
等脂肪酸和β-谷甾醇。另含鞣质[3]。
1.2槐米的药理作用 1.2.1槐米的抗菌作用
槐米水浸剂能够明显缩短出血和凝血时间,制炭后促进凝血作用更强;其煎液有减少心肌耗氧量,保护心功能的作用。另对堇色毛癣菌、许兰黄癣菌、奥
杜盎小芽孢癣菌、羊毛状小芽孢癣菌、星状奴卡菌等皮肤真菌有不同程度的抑制
正交试验优选槐米中芦丁的超声提取工艺实验方案
正交试验优选槐米中芦丁的超声提取工艺实验方案
姓名：李扬 韦一飞 徐炜杰 刁宇 专业：药物分析
1 实验目的：
本实验以槐米为研究对象，考察以不同浓度甲醇（分析纯）为溶剂，采用超声提取法提取槐米中芦丁成分，并以槐米中提取出芦丁百分含量为评价指标，以芦丁标准品为对照品，采用高效液相色谱法测定提取芦丁的含量；利用正交试验的方法来优选出提取槐米中芦丁的最佳工艺，并在最佳工艺下，对方法学进行考察。
2 实验仪器与试剂
2.1实验仪器：
高效液相色谱仪超声波清洗器、循环水式多用真空泵、电子天平、离心仪、C18液相色谱柱（实验时记录厂家型号）
2.2实验试剂：
槐米药材、芦丁对照品，甲醇、冰醋酸为色谱纯，其他试剂为分析纯、纯水
3 溶液的制备
3.1对照品的制备
称取芦丁对照品1mg于10ml容量瓶，配制成0.1mg/ml的对照品溶液。
3.2供试品溶液的制备
取槐米粗粉约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，称定重量，超声处理（功率250w，频率25kHz），放冷至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，离心，备用。
4 色谱及检测条件
色谱柱：C18液相色谱柱，流动相：甲醇-1%冰醋酸水溶液(32:68)，检测波长：257nm，柱温：30℃，流速：1.0mL∕min。
5 正交试验设计 以芦丁提取量为指标，选择A提取时间(min)、B甲醇浓度（%）、C甲醇体积（ml）为考察因素，每个因素选择三个水平，按L9（34）正交表进行试验，考察槐米中芦丁的提取工艺。因素水平见表5-1。试验安排及结果见表5-2。
表6-1 正交设计因素水平表
因素
水平 A提取时间(min) B甲醇浓度（%） C甲醇体积（ml）
1 10 60 10
2 30 80 30
3 50 100
50
表6-2 L9（34）正交试验表
编号 A B C D 含量(mg/g)
实验二槐花米中芦丁的提取与检识
实验⼆槐花⽶中芦丁的提取与检识
实验⼆槐花⽶中芦丁的提取与检识
⼀、实验⽬的1. 通过芦丁提取与精制，掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理和操作。
2. 掌握黄酮类化合物的主要性质及黄酮甙的检识⽅法。
⼆、主要化学成分的结构及性质
芦丁（Rutin）⼴泛存在于植物界中，现发现芦丁的植物⾄少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤其以槐花⽶（为⾖科植物槐Sophora japonica L.的⼲燥花蕾）和荞麦中含量最⾼，可作为⼤量提取芦丁的原料，芦丁是由槲⽪素（Querecetin）3位上的羟基与芸⾹糖（Rutinose）脱⽔⽽成的甙类化合物。
芦丁为淡黄⾊粉末或针状结晶，含有三分⼦的结晶⽔，熔点为177-178℃。芦丁略溶于热⽔（1：200），难溶于冷⽔（1：8000），溶于热甲醇（1∶7）、冷甲醇（1∶100）、热⼄醇（1∶30）、冷⼄醇（1∶650），难溶于醋酸⼄酯、丙酮，不溶于苯、氯仿、⼄醚、⽯油醚等，易溶于吡啶及稀碱液中。O OH
OH
O OR
HO
OH
芸⾹苷R=－葡萄糖－⿏李糖
槲⽪素R=H
三、实验原理
由槐花⽶中提取芦丁的⽅法很多，⽬前我国多采⽤碱提酸沉的⽅法，其原理是：根据芦丁分⼦中具有酚羟基，显弱酸性，能与碱成盐⽽增⼤溶解度，向此盐溶液加⼊酸，调节pH 值，则芦丁⼜重新游离析出，从⽽获得粗制芦丁。
除此⽅法外，还可以采⽤沸⽔提取或醇提取法。
四、实验器材与试剂
器材：铁架台，烧杯，电炉，烘箱、⽔浴锅、三⾓烧瓶，布⽒漏⽃，滤纸，试管，层析槽，⽯棉⽹，⽑细管等。
试剂：芸⾹苷标准品，⽣⽯灰，HCl，⼄醇，甲醇，镁粉，醋酸镁，AlCl3，氯仿，铁氰化钾等。
五、实验内容1、实验操作流程图
2、具体操作步骤
（1）芦丁的提取
称取槐花⽶20g，置于⼲燥的研磨中⽤钵棒挤压成粗粉。称取1-1.5g⽯灰粉（⽣⽯灰），置于⼲净的⼩研钵中加⼊10ml⽔后研成乳液备⽤。将粉碎的槐花⽶置于500ml 的烧杯中，加⽔300ml，在搅拌下加⼊⽯灰乳，调节pH⾄8-9，加热微沸，维持pH值⾄30min，趁热抽滤。弃去滤渣，冷却⾄60-70℃，⽤浓HCl调⾄pH4-5，静置1h，析出精制芦丁，抽滤，弃去滤液，收集精制芦丁。将精制芦丁悬浮于蒸馏⽔中，加热煮沸15min，然后趁热过滤，弃去不溶物，充分静置，过滤，收集芦丁结晶，在60-70℃⼲燥，得到芦丁精制品。
槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定
槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定
槐花米中芦丁的提取与鉴定
背景知识
芦丁（Rutin）又称芸香苷，广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophora japonica L 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高(含量可达12-16%)，可作为大量提取芦丁的原料。芦丁是由斛皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水形成的苷。
芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有3分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。溶解度：冷水中为1:10 000；沸水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。 芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱酸性，易溶于碱液，酸化后又可析出，因此，本实验采用碱提取酸沉淀法提取芦丁。
芦丁具有维生素P样作用。能维持血管的正常通透性，减低血管的脆性，缩短流血时间，可作为高血压病的辅助治疗剂。亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。
一、实验目的
通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作；熟悉芦丁、槲皮素的结构性质和检识方法。
二、实验要求
独立完成实验，从槐花米中提取出芦丁并进行鉴定。
三、实验原理
芦丁属黄酮类化合物，分子中有较多酚羟基，具弱酸性，易溶于热碱中，酸化后又析出，因此可以用碱溶酸沉的方法提取芦丁，又利用芦丁在冷水和热水中溶解度相差较大的特性进行重结晶精制。
四、实验材料和器皿
【器皿】
烧杯（500ml）2个，试管2个，布氏漏斗1个，玻璃棒1根，抽滤瓶1个，滴管，移液管（10ml）1根，洗耳球1个，滤纸，pH试纸，电热炉，真空抽滤机。
【材料】
槐米花30 g，饱和石灰水，0.4%硼砂水溶液，镁粉，pH试纸，浓盐酸，95%乙醇，10% α萘酚乙醇溶液，浓硫酸，蒸馏水。
芦丁的定性实验报告
一、实验目的
1. 通过实验，了解芦丁的理化性质。
2. 掌握芦丁的提取、分离和鉴定方法。
3. 培养实验操作技能，提高分析问题的能力。
二、实验原理
芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合物，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗血栓等。芦丁在碱性溶液中溶解，而在酸性溶液中沉淀。本实验利用这一性质，通过碱提酸沉法提取芦丁，并进行定性鉴定。
三、实验材料与仪器
材料：
1. 槐花米
2. 95%乙醇
3. 10%氢氧化钠溶液
4. 1%盐酸
5. 1%三氯化铁溶液
6. 1%铝氯化物溶液
7. 0.1%镁粉
8. 硫酸
9. 石棉网
10. 滤纸
11. 玻璃棒
仪器：
1. 研钵
2. 烧杯 3. 热水浴
4. 滤斗
5. 蒸发皿
6. 试管
7. 移液管
8. 紫外分光光度计
四、实验步骤
1. 样品制备：称取3g槐花米于研钵中，研成粉末，置于50mL烧杯中。
2. 碱提：向烧杯中加入30mL饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸15分钟后，抽滤。
3. 酸沉：将滤渣用20mL饱和石灰水溶液煮沸10分钟，合并滤液。用15%盐酸中和至pH值为4-5。
4. 沉淀：静置，待沉淀完全后，抽滤，收集沉淀。
5. 洗涤：用少量95%乙醇洗涤沉淀，直至洗液无色。
6. 干燥：将沉淀置于蒸发皿中，用石棉网烘干。
7. 溶解：将干燥后的沉淀溶解于少量95%乙醇中。
8. 鉴定：
1. 镁粉-HCl反应：取少量溶液于试管中，加入镁粉和少量1%盐酸，若出现红色沉淀，则说明含有黄酮类化合物。
2. 三氯化铁反应：取少量溶液于试管中，加入1%三氯化铁溶液，若出现蓝色沉淀，则说明含有黄酮类化合物。
3. 铝氯化物反应：取少量溶液于试管中，加入1%铝氯化物溶液，若出现黄色沉淀，则说明含有黄酮类化合物。
4. 紫外分光光度法：取少量溶液于紫外分光光度计中，测定其在258nm处的吸光度值，与标准曲线比较，确定芦丁含量。 五、实验结果与分析
槐花中芦丁的提取及检测方法的建立研究
Ｖｏ１．４ｏ．Ｎｏ３ 研究报告 ｌ７
槐花中芦丁的提取及检测方法的建立研究
赵强 ，廖天录 ，王俊峰 ，杨明
（１．甘肃工业职业技术学院化学与环境工程系，
甘肃天水７４１０２５；２．西北师范大学化学化工学院； ３．甘肃省畜牧兽医研究所）
摘要：采用碱提酸沉法对槐花中芦丁进行正交提取试验，并对提取物进行ＴＬＣ法、红外和紫外光 谱检测。结果表明，碱提酸沉法最佳正交提取工艺为碱提ｐＨ＝９，酸沉ｐＨ＝３，煮沸时间１０ｍｉｎ，提取 率最高可达４．４％。其提取物经光谱检测可确定为芦丁纯品。 关键词：槐花；芦丁；提取；检测 中国图书分类号：Ｓ ８５３．７文献标识码：Ａ文章编号：１００６ｍ７９９Ｘ（２０１０）０３—ｏｏｌ７—ｏ４
槐花又名槐蕊，为豆科植物槐（Ｓｏｐｈｏｒａ
ｊａｐｏｎｉｃａ上“）的干燥花朵。春夏季花初开时 采收，除去杂质，干燥，生用或炒炭用。《日
华子本草》载：槐花味苦、性微寒，归肝、大肠
经。槐花具有清热、凉血、止血、清肝明目等 功效。主治肠风便血、痔疮下血、血痢、尿血、 风热目赤、肝热目赤、肝热头痛、痈疽疮毒、高 血压、动脉硬化、大便反复出血等症，并能防
治脑出血。尤以对便血、痔血、清肝火等的治 疗效果十分显著，其水煎剂及提取物还有一
定的抗菌、抗炎、抗病毒、凝血、止血、影响心 血管系统等作用。 槐花中的主要成分为芦丁（Ｒｕｔｉｎ），又名
芸香苷，其化学名称为：５，７，３ ，４ 一四羟基， ３一芸香糖黄酮，槐花中芦丁的含量大约在
收稿日期：２０１ 一１１ 作者简介：赵强（１９８２一），甘肃天水人。讲师， 硕士。研究方向为药物分析化学、兽医医药学与动 物胚胎工程。 基金项目：甘肃省天水师范学院科研基金资助 项目（ＴＳＡ０６０５）、甘肃工业职业技术学院校列科研 基金资助项目。 ４．３０％～２３。５０％之间…。现代药理研究表
明槐花之所以具有如此非凡的药效，主要与 其含有黄酮类物质芦丁有很大的关系 】。