肝损伤动物模型研究进展
【关键词】 肝疾病； 毒物， 四氯化碳； 醋氨酚； 疾病模型，动物
肝损伤是各种肝脏疾病的病变结果，对肝损伤的防治目前仍是一个严峻的课题。通过建立实验性肝损伤动物模型，研究肝病的发生机制，筛选保肝药物，探索保肝作用原理，具有重要的现实意义。现将近年来国内外对实验性肝损伤动物模型分类、作用原理、造模方法及其优缺点等研究进展作综述和探讨。
1 化学性肝损伤动物模型
1.1 四氯化碳（carbon tetrachloride, ccl4） ccl4导致肝损伤的主要机制目前认为与其自身和自由基代谢产物有关。ccl4代谢产生的自由基进入机体后，在肝脏经细胞色素p450激活，生成三氯甲基自由基和三氯甲基过氧自由基，攻击肝脏细胞膜上的磷脂分子，使得细胞膜、内质网膜发生氯烷化和脂质过氧化，损伤细胞膜、细胞器；还能与膜脂质和蛋白质大分子进行共价结合，影响蛋白质代谢，并且破坏膜结构和功能的完整性，钙离子内流增加，影响细胞正常生理功能，最终导致肝细胞胞质中的可溶性酶渗出，细胞死亡[1]。
ccl4所致肝损伤可分为急性和慢性。急性肝损伤：赖力英等应用4 ml/kg ccl4剂量灌胃可诱发sd大鼠急性肝功能衰竭，死亡率达85 %[2]。慢性肝损伤：zhang等采用2 ml/kg ccl4腹膜内注射sd大鼠，每周2次，持续9周可伴有肝细胞坏死和明显炎症的肝硬化[3]。ccl4导致肝损伤是经典模型之一，能准确反应肝细胞功能、代谢及形态学变化，重复性好且 经济 。但ccl4同时还损伤动物的心、脾、肺、肾、脑等器官，另外，蒸汽和液体可由呼吸道、皮肤吸收，对人体也有一定毒性，操作时应注意。
1.2 α萘基异硫氰酸酯(αnaphthylisot hiocyanate, anit) anit是一种间接肝毒剂，其主要损害是通过膜脂质过氧化反应，致使肝细胞变性、坏死、胞内血清谷丙转氨酶(alt）大量溢入血流，同时还导致胆管上皮细胞肿胀坏死，引起毛细胆管增生及小叶间胆管周围产生炎症，从而造成胆管阻塞，形成明显的胆汁淤积，并伴随以点状坏死为主的肝实质细胞损害，产生梗阻性黄疸，出现高胆红素血症和胆汁分泌减少。 1.3 d氨基半乳糖(dgalactosamine, dgaln ) dgaln是一种肝细胞磷酸尿嘧啶核苷干扰剂，通过竞争生成二磷酸尿苷半乳糖使磷酸尿苷耗竭,导致肝细胞的rna和浆膜蛋白合成障碍，限制细胞器的再生及酶的生成和补充，使细胞器受损，引起肝细胞变性、坏死；另外dgaln还可以与肝实质细胞膜特异性结合，影响其完整性，引起肝细胞内ca2+增多，mg2+减少，抑制线粒体功能，激活磷脂酶，加速氧化自由基的产生，因此mg2+/ca2+的比例失调也是dgaln导致肝细胞不可逆损害的因素之一；加上使肝脏谷胱甘肽减少，并激活库普弗释放tnfα引起细胞凋亡[5]。
李梅等筛选dgaln造模的最佳剂量，比较dgaln造成的大、小鼠急性肝损伤模型的稳定性，发现dgaln 500 mg/kg诱导的大鼠急性肝损伤模型肝组织形态变化显著且死亡率低，更适用于保肝新药的筛选与评价[6]。dgaln形成的急性肝功能衰竭模型是研究病毒性肝炎的发病机制及有效 治疗 药物理想的实验动物模型，其优点是该模型的病变仅限于肝脏，不涉及其它器官，症状、生物化学、组织学表现接近人，给药方便，重复性好，终点明确，具有可逆性，不造成环境污染及人体伤害，不需特殊的实验操作保护措施，对肝衰竭、肝性脑病、人工肝支持系统的评价研究有重要价值，但价格昂贵导致应用受限。
1.4 二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,dmn) dmn是常见的致肝癌剂，它通过微粒体代谢，其中间产物与细胞核酸、蛋白质等结合可造成细胞内大分子损伤，诱发大鼠肝窦壁肝星状细胞的活化，导致过多增多和沉积，引起肝纤维化形成；同时促进窦内皮细胞形成肝窦毛细血管化，加重肝损伤，促进肝纤维化的 发展 [7]。
1.5 硫代乙酰胺( thioacetamide，taa) taa具有直接肝毒性作用，摄入后可经肝细胞内细胞色素p450混合功能氧化酶代谢为taa硫氧化物，干扰细胞核内rna转移，影响蛋白质合成和酶活力，增加肝细胞核内dna合成及有丝分裂，促进肝硬化发展，同时激活肝细胞磷脂酶a2，破坏肝细胞膜，形成肠源性内毒素血症，导致大面积肝细胞破坏，并可使alt、ast明显增高。taa小剂量诱发肝细胞凋亡，大剂量导致脂质氧化和小叶中央坏死、损伤程度与tnfγ和内毒素水平正相关，可被羟自由基清除剂缓解[11]。
2 药物性肝损伤模型
2.1 醋氨酚(acetaminophen,papa) papa亦名对乙酰氨基酚、扑热息痛，经体内p450代谢可生成活性中间代谢物n乙酰对苯醌亚胺(napqi)，napqi具强大的氧化作用，使生物膜系统发生脂质过氧化，干扰细胞内的能量代谢，导致肝细胞变性坏死，同时诱导肝组织细胞中高表达fas/fasl和穿孔素/颗粒酶，活化细胞死亡程序，导致肝细胞坏死[14]。papa引起肝障碍还与肝脏谷胱甘肽含量减少有关。
papa加热下溶于生理盐水，给小鼠300～500 mg/kg一次性腹腔注射，也可配成质量浓度为2.5%的混悬液经口灌胃，制成急性肝损伤模型[15]。papa常用于制作急性肝功能衰竭模型，其诱导的急性肝功能衰竭模型与人急性肝功能衰竭的临床特点、组织学表现相似，是较理想的急性肝功能衰竭模型。papa肝损伤动物模型也可用于因各种原因导致谷胱甘肽含量减少而引起肝细胞损伤的治疗药物筛选。赵世锋等对杂种家犬采用多次皮下注射醋氨酚的方法建立急性肝损伤模型有以下特点：具有较好的重复性、可复制性和稳定性；有明显的肝脏损伤特异性对其他重要脏器无损害；对实验人员危害较小[16]。
2.2 其他 四环素（tetracycline）导致肝损伤的机制仍未明确，禄保平等应用四环素10倍剂量（2 250 mg/kg），灌胃18 h成功制得急性肝损伤模型[17]。抗结核药物异烟肼具有肝毒性，禄保平等认为异烟肼的肝损伤机制与其代谢产物乙酰异烟肼和肼二者引起的自由基脂质过氧化反应有密切关系，应用2倍剂量（180 mg/kg）异烟肼灌胃后18 h，成功诱导急性肝损伤模型[18]，由于家兔对异烟肼敏感多选用家兔动物模型，异烟肼引起肝损伤动物模型多用于药物性肝炎的研究。
3 免疫性肝损伤动物模型
3.1 卡介苗（bacillus calmetteguerin vaccine,bcg）加脂多糖（lipopolysaccharide,lps） bcg的损伤机制可能是小鼠注射bcg后导致多核中性粒细胞或巨噬细胞(肝内库普弗细胞)聚集于肝脏并被致敏，继而用低剂量lps攻击，促进其释放大量对肝细胞有毒性作用的细胞因子，如白三烯、tnf、il1和no等，no作为自由基，可以与o2－反应生成超氧化亚硝酸阴离子(onoo－)以及其他自由基引起脂质过氧化造成肝细胞损害[19]。 sheabudgell等以bcg浆液每只0.2 ml（含＞5×106菌）注射小鼠尾静脉，致敏后10 d，再尾静脉注射lps每只7.5 μg，成功诱导小鼠肝损伤模型[20]。邱英锋等确定bcg菌数5.0×107+ lps 剂量30 μg/kg联合最佳，能够充分造成大鼠急性肝损伤[21]。bcg和lps肝损伤动物模型简便易行，且造成的大鼠急性肝损伤与病毒性肝炎发病机制有较大相似，可用于对病毒性爆发性肝炎的研究。
胆汁淤积性肝病动物模型构建的研究进展2024(全文)
胆汁淤积性肝病动物模型构建的研究进展2024(全文)
胆汁淤积性肝病(C1.D)是一类由免疫、遗传、环境等因素导致胆汁形成、分泌和排泄障碍的肝胆疾病总称,一项基于上海市慢性肝病的多中心流行病学研究表明,在4660例慢性肝病患者中,胆汁淤积的患病率为10.26%.C1.D起病隐匿，临床早期无明显症状，进展期可出现黄疸、尿色加深、皮肤瘙痒等一系列高胆红索血症相关表现，可进一步发展为肝纤维化、肝硬化，甚至出现肝衰竭等终末事件。C1.D根据发生部位可分为肝内胆汁淤积和肝外胆汁淤积，包括胆道闭锁(BA)、胆石性肝病、药物性0目汁淤积性肝病(D1.C)、妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)、IgG4性自身免疫性肝病、原发性胆汁性胆管炎(PBQ和原发性硬化性胆管炎(PSC).
C1.D发病机制复杂，诊断困难，治疗亟需解决.为了加深对C1.D本身的认识，同时帮助临床医师在探究C1.D机制和寻找新疗法的研究中更科学、合理地选择工具本文就C1.D的动物模型的制备、机制、优缺点作一综述.
1、BA动物模型
BA是一种发生于婴儿时期的肝脏内胆管异常狭窄、阻塞或者完全缺失的疾病，可导致胆汁淤积、胆道反复炎症、胆管纤维化。新生儿胆汁淤积症患病率为1/2500,约34%~43%为BAe本病病因尚未明确，如不及时诊治，可迅速进展至肝硬化、肝衰竭等终末期肝病而致死亡.因此，对该病病因及发病机制的深入研究对于预防疾病尤为关键,而BA模型的构建是为其提供重要条件。
(1)胆总管结扎BA模型:2008年，国内学者张守华等通过结5~6周龄BA1.B/c小鼠月且总管建立梗阻性黄疸模型，炎症细胞变化与BA实际情况相符,术后剖腹可见近端胆总管囊性扩张,胆寰增大,肝脏呈淤胆性改变，但该模型存在以下缺陷：①成年小鼠的胆道系统已经发育成熟，与发生于婴J1.M月的BA年龄不匹配；②临床症状方面未很好地复现出BA的腹水等门静脉高压的并发症；③病理组织学方面可见肝小叶结构模糊，胆汁淤积及大量增生的胆管，以及片状坏死的肝细胞，但未见到肝内外胆管消失、肝纤维化甚至假小叶形成.而后国内学者菌军涛等对该模型进行改良，通过结扎新生BA1.B/c小鼠(出生后5~7天)的胆总管建立BA模型，术后2天出现黄疸、小便深黄、陶土样大便、食欲不振、精神状态差等症状，这与临床上BA临床症状有较为相似，术后10天左右出现实验组小鼠死亡高峰期.该模型的优点在于造模方法相对简单，重复性好，周期短，但也存在一些缺点：死亡小鼠解剖后可见增宽的胆总管、大胆囊，黄染的肠道及肾脏，但未见严重的肝硬化、门静脉高压、肝衰竭等情况，这与临床上患儿终末期表现不相符，其次该动物模型制备在小鼠出生后5~7天进行,无法完全模拟围生期胆管闭锁情况。
异烟肼灌胃建立小鼠急性肝损伤模型的研究_禄保平
286 中国医药生物技术 2007年8月第2卷第4期 Chin Med Biotechnol, August 2007, Vol. 2, No. 4
·论著·
异烟肼灌胃建立小鼠急性肝损伤
模型的研究
禄保平，杨晓娜，许家艳
【摘要】
目的 探索应用异烟肼灌胃建立小鼠急性肝损伤模型，并初
步阐明其机制。
方法 昆明种小鼠 50 只，随机分为异烟肼正常剂量造模组
（常量组）、2 倍剂量造模组（2 倍量组）、5 倍剂量造模组
（5 倍量组）、8 倍剂量造模组（8 倍量组）和空白对照组，
每组各 10 只。各造模组分别以 90、180、450、720 mg/kg
剂量的异烟肼灌胃，18 h 后检测血清丙氨酸氨基转移酶
（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平并取肝组织进
行光镜观察，探索导致明显急性肝损伤的相对合适剂量。另
取昆明种小鼠 90 只，随机分为单纯造模组（40 只）、干预
造模组（40 只）和空白对照组（10 只），各造模组以相对
合适剂量异烟肼灌胃，其中干预造模组于造模前以甘利欣
75 mg/kg 体重连续灌胃 5 d，18、36、54、72 h 后分别检
测血清 ALT、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、
谷胱甘肽过氧物酶（GSH-Px）水平，并进行肝组织光镜和
电镜观察，探索导致明显急性肝损伤的相对合适时间及可能
机制。
结果 在探索相对合适剂量实验中，2 倍量组小鼠血清
ALT、AST 分别为（101.6 ± 6.3）和（108.1 ± 14.9）U/L，
明显高于空白对照组的（30.1 ± 3.6）、（35.3 ± 6.5）U/L 和
常量组的（52.8 ± 5.3）、（53.9 ± 8.9）U/L，差异均有统计学
意义（均P < 0.05），肝细胞出现广泛的脂肪变性和水肿，
肝窦几乎消失；5 倍量组小鼠死亡 7 只，8 倍量组小鼠则
全部死亡。在探索相对合适时间及发生机制实验中，应用
2 倍剂量异烟肼灌胃后 18 h，单纯造模组小鼠血清 ALT、
动物肝损伤模型建立的研究进展
动物肝损伤模型建立的研究进展
周仲强;魏恩巍
【摘 要】肝损伤涉及短期内突发的肝细胞损害,其病因较多,机理复杂.动物实验是研究该病发病机制及临床前药物筛选的重要方法之一.本文基于肝损伤的模型建立,对四氯化碳、D-半乳糖胺、乙醇,以及人源性肝嵌合体小鼠等模型建立进行综述,为研究动物实验肝损伤提供有针对性的选择方法.
【期刊名称】《吉林化工学院学报》
【年(卷),期】2018(035)011
【总页数】4页(P14-17)
【关键词】动物;肝损伤;模型
【作 者】周仲强;魏恩巍
【作者单位】吉化集团总医院 药剂科,吉林 吉林132000;吉林大学 药学院,吉林 长春130021
【正文语种】中 文
【中图分类】R575.3
肝脏是人体内主要的代谢器官，而肝损伤引起的多种肝脏疾病是严重影响人们的身体健康的常见疾病.造成肝损伤的原因有很多，包括化学性、代谢性、药物性、酒精性及环境因素等，长期的肝损伤往往会进一步发展成肝纤维化、肝硬化、肝癌及肝功能衰竭[1].肝损伤是各种肝脏疾病的病变结果，对肝损伤的防治目前仍是一个严峻的课题.构建恰当的肝损伤动物模型，是研究肝损伤的发病机制，探索新的治疗方法的基础[2].近年来对于肝损伤的治疗似乎是热点[3]，通过建立实验性肝损伤动物模型，研究肝病发生的机制与靶点，筛选出较优的保肝药物，探索保肝的作用原理，是具有重要的现实意义.因此本文阐述了近些年动物不同肝损伤模型的概况以及相应抗肝损伤机制，对日后关于肝损伤的研究提供理论基础，具有一定的应用价值.
1 CCl4诱导肝损伤
四氯化碳(CCl4)肝损伤动物模型是最经典的试验性模型.CCl4 进入体内后,在肝细胞的内质网中经细胞色素P450氧化酶的代谢,生成活泼的三氯甲基自由基和氯自由基.这些自由基可与细胞内和细胞膜的大分子共价结合,使酶的功能丧失,细胞膜脂质过氧化,胞浆Ca2+ 浓度升高,胞浆内转氨酶渗入血液[4],导致肝细胞损伤.
急性肝损伤试验实验报告
一、实验目的
1. 了解急性肝损伤的实验方法及原理。
2. 掌握急性肝损伤动物模型的建立方法。
3. 学习观察肝损伤指标的变化，评估肝损伤程度。
4. 探讨不同药物对急性肝损伤的保护作用。
二、实验原理
急性肝损伤是指由多种因素导致的肝脏急性损伤，如药物、毒素、酒精等。本实验采用CCl4诱导的小鼠急性肝损伤模型，通过观察肝功能指标的变化，评估肝损伤程度，并探讨不同药物对急性肝损伤的保护作用。
三、实验材料
1. 实验动物：ICR小鼠，体重18-22g，雌雄不限。
2. 试剂与仪器：CCl4、橄榄油、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）试剂盒、酶标仪、离心机等。
四、实验方法
1. 实验分组：将60只ICR小鼠随机分为6组，每组10只，分别为正常对照组、模型组、阳性对照组、药物高剂量组、药物中剂量组和药物低剂量组。
2. 建立急性肝损伤模型：除正常对照组外，其余各组小鼠按20mg/kg剂量腹腔注射CCl4橄榄油溶液，正常对照组注射等体积的橄榄油。
3. 给药：阳性对照组给予联苯双酯（200mg/kg），药物高、中、低剂量组分别给予不同剂量的药物，正常对照组和模型组给予等体积的生理盐水。
4. 样本采集：给药后24小时，各组小鼠眼球取血，分离血清，测定ALT、AST和TBIL。
5. 数据处理：采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，组间比较采用单因素方差分析。
五、实验结果 1. 各组小鼠ALT、AST和TBIL水平比较：与正常对照组相比，模型组ALT、AST和TBIL水平显著升高（P<0.01）；与模型组相比，阳性对照组和药物高、中、低剂量组ALT、AST和TBIL水平均显著降低（P<0.01）。
2. 药物对急性肝损伤的保护作用：与模型组相比，药物高、中、低剂量组ALT、AST和TBIL水平均显著降低，且呈剂量依赖性。
六、实验结论
1. 本实验成功建立了CCl4诱导的小鼠急性肝损伤模型。
肝豆状核变性动物模型的研究进展
!N"!肝豆状核变性动物模型的研究进展
杨玉龙１，魏涛华２，杨文明２，３，郝文杰１，杨 悦１，钱南南１，李 祥２，江海林２１安徽中医药大学研究生院，合肥２３００００；２安徽中医药大学第一附属医院脑病中心，合肥２３００００；３新安医学教育部重点实验室，合肥２３００００摘要：肝豆状核变性（ＷＤ）是一种罕见的常染色体隐性遗传病，其发病机制复杂，涉及多系统多脏器及体内复杂的铜稳态调节系统，其中肝脏是铜离子最常沉积的器官，肝损伤也是ＷＤ最早和最常见的表现，因此寻找一种理想的动物模型在ＷＤ研究中非常重要。本文通过对目前国际上常用的ＷＤ动物模型进行综述，系统地归纳了不同模型的背景，肝脏、神经等系统表现以及模型应用，并对不同动物模型的特点进行了比较，为各类ＷＤ动物模型的应用提供借鉴。关键词：肝豆状核变性；肝疾病；疾病模型，动物基金项目：国家自然科学基金（８１９７３８２５）；国家中医药脑病循证能力提升及平台建设项目（２０１９ＸＺＺＸ－ＮＢ００１）；安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室开放基金项目（２０２０ｘａｙｘ１２）；安徽高校协同创新项目（ＧＸＸＴ－２０２０－０２５）；安徽省自然科学基金青年资助项目（２１０８０８５ＱＨ３６７）
ＲｅｓｅａｒｃｈａｄｖａｎｃｅｓｉｎａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓｏｆＷｉｌｓｏｎ’ｓｄｉｓｅａｓｅＹＡＮＧＹｕｌｏｎｇ１，ＷＥＩＴａｏｈｕａ２，ＹＡＮＧＷｅｎｍｉｎｇ２，３，ＨＡＯＷｅｎｊｉｅ１，ＹＡＮＧＹｕｅ１，ＱＩＡＮＮａｎｎａｎ１，ＬＩＸｉａｎｇ２，ＪＩＡＮＧＨａｉｌｉｎ２．（１．ＧｒａｄｕａｔｅＳｃｈｏｏｌｏｆＡｎｈｕｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｅｆｅｉ２３００００，Ｃｈｉｎａ；２．ＥｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙＣｅｎｔｅｒ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＡｎｈｕｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｅｆｅｉ２３００００，Ｃｈｉｎａ；３．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＸｉｎ’ａｎＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｈｅｆｅｉ２３００００，Ｃｈｉｎａ）Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ：ＹＡＮＧＷｅｎｍｉｎｇ，ｙａｎｇｗｍ８８１０＠１２６．ｃｏｍ（ＯＲＣＩＤ：００００－０００１－８２６８－９２９１）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｗｉｌｓｏｎ’ｓｄｉｓｅａｓｅ（ＷＤ）ｉｓａｒａｒｅａｕｔｏｓｏｍａｌｒｅｃｅｓｓｉｖｅｄｉｓｏｒｄｅｒｗｉｔｈａｃｏｍｐｌｅｘｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｖｏｌｖｉｎｇｍｕｌｔｉｐｌｅｓｙｓｔｅｍｓ，ｍｕｌｔｉｐｌｅｖｉｓｃｅｒａｌｏｒｇａｎｓ，ａｎｄｔｈｅｃｏｍｐｌｅｘｃｏｐｐｅｒｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｗｉｔｈｉｎｔｈｅｂｏｄｙ．Ｔｈｅｌｉｖｅｒｉｓｔｈｅｍｏｓｔｃｏｍｍｏｎｏｒｇａｎｆｏｒｃｏｐｐｅｒｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ，ａｎｄｌｉｖｅｒｉｎｊｕｒｙｉｓｔｈｅｅａｒｌｉｅｓｔａｎｄｍｏｓｔｃｏｍｍｏｎｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｏｆＷＤ；ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｉｔｉｓｉｍｐｏｒｔａｎｔｔｏｆｉｎｄａｎｉｄｅａｌａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｆｏｒＷＤｒｅｓｅａｒｃｈ．ＢｙｓｕｍｍａｒｉｚｉｎｇｔｈｅａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓｏｆＷＤｃｏｍｍｏｎｌｙｕｓｅｄｉｎｔｈｅｗｏｒｌｄ，ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｓｙｓｔｅｍａｔｉｃａｌｌｙｓｕｍｍａｒｉｚｅｓｔｈｅｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ，ｌｉｖｅｒａｎｄｎｅｒｖｏｕｓｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｓ，ａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｏｄｅｌｓａｎｄｃｏｍｐａｒｅｓｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓ，ｓｏａｓｔｏｐｒｏｖｉｄｅａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｖａｒｉｏｕｓａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｓｏｆＷＤ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＨｅｐａｔｏｌｅｎｔｉｃｕｌａｒＤｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ；ＬｉｖｅｒＤｉｓｅａｓｅｓ；ＤｉｓｅａｓｅＭｏｄｅｌｓ，ＡｎｉｍａｌＲｅｓｅａｒｃｈｆｕｎｄｉｎｇ：ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（８１９７３８２５）；ＮａｔｉｏｎａｌＰｒｏｊｅｃｔｔｏＩｍｐｒｏｖｅｔｈｅＥｖｉｄｅｎｃｅ－ｂａｓｅｄＡｂｉｌｉｔｙａｎｄＰｌａｔｆｏｒｍｆｏｒＴＣＭＥｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ（２０１９ＸＺＺＸ－ＮＢ００１）；ＯｐｅｎＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＰｒｏｊｅｃｔｏｆＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＸｉｎ’ａｎＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，ＡｎｈｕｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ（２０２０ｘａｙｘ１２）；ＴｈｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｙｎｅｒｇｙＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＰｒｏｇｒａｍｏｆＡｎｈｕｉＰｒｏｖｉｎｃｅ（ＧＸＸＴ－２０２０－０２５）；ＡｎｈｕｉＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎＹｏｕｔｈＦｕｎｄｉｎｇＰｒｏｊｅｃｔ（２１０８０８５ＱＨ３６７）
急性酒精性肝损伤小鼠模型及早期诊断指标GSTA1的研究
急性酒精性肝损伤小鼠模型及早期诊断指标GSTA1的研究
刘芳萍;马欣;赵常伟;常轶聪;蔺月霞;李敏敏;刘颖姝;周琼;李植
【摘 要】为研究谷胱甘肽S转移酶A1(GSTA1)在肝损伤早期诊断中的价值,本试验通过检测血清谷丙转氨酶(GPT)及肝组织指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)变化,成功复制急性酒精性肝损伤小鼠模型;通过时间-效应和剂量-效应关系研究血清中GSTA1和ALT变化.结果显示,给予小鼠灌服乙醇溶液后,2h血清中GSTA1含量变化与对照组相比差异极显著(P＜0.01),而ALT活性变化在6h才显示出一定的差异性(P＜0.05);当乙醇剂量为10 mL/kg体重时,血清中GSTA1含量变化与对照组相比差异极显著(P＜0.01),而当乙醇剂量达到14 mL/kg体重时,ALT活性变化与对照组相比差异极显著(P＜0.01).表明在急性酒精性肝损伤模型中,GSTA1的含量变化在肝损伤早期就可检测出来,作为肝损伤标记物,GSTA1比ALT更敏感.
【期刊名称】《中国兽医杂志》
【年(卷),期】2015(051)007
【总页数】3页(P86-88)
【关键词】GSTA1;急性酒精性肝损伤;动物模型;早期诊断指标
【作 者】刘芳萍;马欣;赵常伟;常轶聪;蔺月霞;李敏敏;刘颖姝;周琼;李植
【作者单位】东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨150030
急性肝损伤模型的研究进展
煎 医蕴 ６ 第２９卷第６期Ｈｅｂｅｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，Ｊｕｎ ２Ｏ０７，ｖ０１ ２９，Ｎｏ．６
停滞因素有关，制动、理疗、注药效果良好，极少手术治疗ｎ 。
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急性肝损伤模型的研究进展
刘彦双朱淑霞王永利
肝损伤实验动物模型的复制是进行防治肝损伤药物研究
的前提。目前，肝损伤动物模型的复制主要有生物性、免疫性、
化学性等方法，生物学方法要求实验条件高且费用昂贵，限制
了应用。免疫方法是造成免疫肝损伤，主要用于通过免疫机制
而抗肝损伤的药物研究。化学方法则是通过化学性肝毒物质，
如四氯化碳、氨基半乳糖、硫代乙酰胺、黄曲霉素等致肝损伤。
在我国卫生部颁布的《中药药理实验指导原则》中明确指定应
用四氯化碳和氨基半乳糖肝损伤动物模型进行保肝降酶新药
的药理实验，应用四氯化碳和氨基半乳糖复制肝损伤动物模
型，条件要求低，技术易于掌握，可靠性强，重复性好，是其他任
何肝损伤模型无法比拟的，故目前研究抗肝损伤新药常采用四
常用急性肝损伤动物模型研究进展
常用急性肝损伤动物模型研究进展
肝脏是人类重要的代谢器官，承担着维持生命的重要功能，还有解毒、造血和凝血作用，其中一些有损肝脏的物质也必须依靠肝脏解毒，故肝损伤的发生率极高，肝病的防治工作刻不容缓。寻找一种较为适合的肝损伤模型是进行肝病防治研究的必要前提，目前常用的肝损伤模型有化学性、免疫性、酒精性还有其他类肝损伤模型。本文将近几年常用的各种急性肝损伤的动物模型进行综述，为选择合适的造模方法提供思路。
标签：急性肝损伤;动物模型;方法
化学性肝损伤
四氯化碳（CCl4）。四氯化碳是最常用的致化学性肝损伤的药物，其特异性高，能够有效造成肝脏发生脂质过氧化反应。 CCl4进入体内后，能够在肝药酶的催化作用下产生自由基，与细胞膜上的大分子物质共价结合，产生脂质过氧化反应，破坏细胞膜的结构和功能。周迎春[1]给小鼠灌胃1% CCl4（0.1 ml/10 g），24h后建立小鼠急性肝损伤模型，该模型重复性好，具有强烈的肝毒性，能使血清中ALT、AST含量迅速升高，是理想的造模药物。但CCI4挥发性强，可经多途径传播吸收，对实验人员有一定的危害。
对乙酰氨基酚（AP）。AP是目前临床常常用的解热镇痛药，但长期过量应用，会造成肝损伤疾病。AP在体内代谢产生的N-乙酰对苯醌亚胺（NAPQI）可与肝细胞内生物大分子共价结合，影响蛋白质的正常生理功能。吴洋东等[2]给昆明种系小鼠一次性腹腔注射AP 200mg/kg，40h后造成急性肝损伤模型，AP可造成肝损伤而不会损害其他组织器官，模型重复性好，是常用的肝损伤模型。
D-氨基半乳糖（D-GaIN）。D-氨基半乳糖（D-GaIN）可对肝细胞磷酸尿嘧啶产生干扰，可以损害质膜，形成肝细胞内复合物，消耗尿苷三磷酸，使肝细胞出现炎症和弥漫性坏死，其病理变化与病毒性肝炎相似。王超等给小鼠一次性腹腔注射10% D-GalN 生理盐水溶液，剂量为600 mg /kg ， 16h后造成急性肝损伤模型。也可以利用脂多糖联合D - 氨基半乳糖致急性肝损伤，肝细胞弥漫性坏死后，肝脏对内毒素（LPS）的解毒能力降低，使肝损伤加重。该模型的稳定性好，重复性高，且对实验人员无危害。但该模型具有不可逆性，且D-氨基半乳糖的价格较为昂贵，限制了其应用。
急性肝损伤模型的研究进展 2
急性肝损伤模型的研究进展
作者：刘彦双 朱淑霞 王永利 作者单位：050200 河北省石家庄市卫生学校（刘彦双）;河北武警总队医院（朱淑霞）;河北医科大学药理教研室（王永利）
【关键词】 急性肝损伤
肝损伤实验动物模型的复制是进行防治肝损伤药物研究的前提。目前，肝损伤动物模型的复制主要有生物性、免疫性、化学性等方法，生物学方法要求实验条件高且费用昂贵，限制了应用。免疫方法是造成免疫肝损伤，主要用于通过免疫机制而抗肝损伤的药物研究。化学方法则是通过化学性肝毒物质，如四氯化碳、氨基半乳糖、硫代乙酰胺、黄曲霉素等致肝损伤。在我国卫生部颁布的《中药药理实验指导原则》中明确指定应用四氯化碳和氨基半乳糖肝损伤动物模型进行保肝降酶新药的药理实验，应用四氯化碳和氨基半乳糖复制肝损伤动物模型，条件要求低，技术易于掌握，可靠性强，重复性好，是其他任何肝损伤模型无法比拟的，故目前研究抗肝损伤新药常采用四氯化碳和氨基半乳糖复制动物模型。
1 化学性肝损伤动物模型
1.1 四氯化碳性肝损伤 四氯化碳（CCl4 ）溶于精致植物油，配制0.1%浓度，按10ml.kg小鼠腹腔注射，12～24h后处死动物。测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红质（TB）、总蛋白（TP）、白蛋白（A）、，肝匀浆脂质过氧化物（LPD）或丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）或还原性谷胱甘肽（GSH）等反映肝功能及脂质过氧化的指标，并进行组织病理学检查。
关于CCl 4 肝毒的作用机制，存在多种假设，但都一致公认，自由基的形成及引发的链式过氧化反应是其主要机制。CCl 4在体内可经肝微粒体细胞色素P450 代谢激活，生成两个活性自由基（CCl 3 O 2 和Cl）及一系列氧活性物，可与肝细胞质膜或亚细胞结构的膜脂质发生过氧化反应，膜磷脂大量降解，从而破坏细胞膜结构完整性，引起膜通透性增加，最终导致肝细胞死亡［1］ 。另外，CCl 4 的代谢产物能迅速与细胞成分如胞内脂质、蛋白、核脂质、核蛋白和DNA等多种大分子发生不可逆的共价结合而导致细胞死亡，特别是当自由基作用于DNA时，损伤核糖和碱基，使核酸直接破坏引起DNA链的断裂或DNA链与蛋白间交联，影响其信息传递功能以及转录和复制特性。在CCl 4 代谢产物引起的脂质过氧化物和共价结合的双重作用下，导致膜脂质流动性降低、钙泵抑制、谷胱甘肽活性抑制、肝微粒和线粒体功能丧失、肝细胞内钙稳态失调及代谢紊乱，引起肝细胞损伤加剧［2］ 。
肝损伤动物模型的研究进展
肝损伤动物模型的研究进展
肝脏是人体最重要的器官之一，它具有排毒、合成蛋白质、解毒、能量储备和胆汁分泌等功能。由于不良的生活习惯以及环境污染等因素，肝脏疾病的发病率逐年增加。研究肝损伤的动物模型具有重要的理论和临床意义。本文将从动物模型的选择、建立方法和研究进展等方面进行综述。
一、动物模型的选择
在研究肝损伤的动物模型时，研究者首先需要选择合适的动物种类。常用的动物模型包括小鼠、大鼠、猪和猕猴等。小鼠和大鼠是最为常用的实验动物，它们具有生殖力强、易于获取、成本低等优点，更适合大规模的实验研究。而猪和猕猴则更接近人类的生理特征，更适合用于某些特定的研究。
二、动物模型的建立方法
1. 化学性肝损伤模型
化学性肝损伤模型是最为常见的一种模型，常用的损伤剂包括四氯化碳（CCl4）、酒精、丙酮、二乙酰肼等。CCl4是最为常用的肝损伤剂，它会在肝脏内产生自由基，进而导致肝细胞损伤和坏死。通过给予动物不同剂量和不同途径的CCl4，可以模拟出不同程度的肝损伤，从而用于疾病的研究。
2. 生物性肝损伤模型
生物性肝损伤模型是通过给予动物不同病原体或毒素，来诱导其产生肝炎、肝硬化等疾病，从而模拟出相应的肝损伤。常用的病原体包括甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒等，而常用的毒素包括霉菌毒素、大豆异黄酮等。
3. 物理性肝损伤模型
物理性肝损伤模型是通过给予动物不同的物理性因素，如电击、冷冻等，来诱导其产生肝损伤。这种模型一般用于肝损伤的急性期研究。
三、研究进展
近年来，随着生物技术的不断发展和进步，肝损伤动物模型的研究也取得了长足的进步。一方面，利用基因编辑技术和转基因动物技术，研究者可以构建出更为理想的肝损伤动物模型，从而更好地模拟出人类肝脏疾病的发生和发展过程。利用影像学技术和免疫组化技术，研究者可以对肝脏进行更为直观和准确的研究，从而更深入地了解肝损伤的机制和病理生理过程。 近年来，许多研究者还利用干细胞和干细胞衍生物，构建出更为完整和复杂的肝脏器官模型，从而更好地模拟出人类肝脏的生理和病理过程。这种模型不仅可以用于药物筛选和致病机制研究，还可以为肝脏移植和再生医学等领域提供重要的研究工具和理论基础。