真皮免疫系统研究进展(一)
真皮免疫系统研究进展(一)
摘要:皮肤是一个具有免疫功能并与全身免疫系统密切相关的外周淋巴器官。皮肤内的免疫反应主要发生于真皮。真皮免疫系统的细胞包括树突状细胞、t淋巴细胞、内皮细胞、肥大细胞、成纤维细胞等。这些细胞相互作用，并通过其衍生的细胞因子相互调节以发挥免疫功能。本文仅就真皮免疫系统的细胞组成、各细胞功能及其相互作用作一综述。
1990年，bos等1]提出皮肤免疫系统（sIS）的概念，1993年，nickoloff等2]进一步提出真皮免疫系统（dIS），对sIS作了重要的补充。近年对真皮免疫细胞功能和特点的研究又取得了许多新的成果，本文对其研究进展综述如下。
一、真皮免疫系统的细胞
真皮内参与免疫应答的细胞主要集中于真皮浅层微血管丛周围，有树突状细胞（包括郎格罕细胞和单核巨噬细胞）、血管内皮细胞、t淋巴细胞、肥大细胞等。近年研究发现，参与真皮免疫反应的成分除上述细胞外，还有成纤维细胞，多种结缔组织成分及细胞因子，它们对于免疫细胞的活化、游走、增殖分化、免疫应答的诱导及炎症损伤和创伤修复均具有重要作用。
（一）树突状细胞：真皮树突状细胞为组织树突状细胞。目前关于树突状细胞的来源尚未统一，因真皮树突状细胞既表达凝血因子ⅩⅢa，也表达白细胞分化抗原（cD）34,故有人提出它可能来源于真皮cD34+间叶干细胞2]。但目前大部分证据支持树突状细胞起源于骨髓，经血液循环进入各组织器官。如巨噬细胞前体为血液中的幼单核细胞；人类外周血中cD34+CLA+树突状细胞CD71（low）/CD11a+/CD11b+/CD49d+/CD45RA+]体外经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和肿瘤坏死因子（tNF）-α诱导可分化为郎格罕细胞，cD34+CLA-树突状细胞CD71+/CD11a（low）/CD11b（low）/CD49d+/CD45RA（low）]则仅分化成树突状细胞3]。树突状细胞的游走及吞噬功能可能与其表面cD44分子有关。接触抗原后，郎格罕细胞和树突状细胞上调cD44的表达，抗cD44表位的抗体抑制郎格罕细胞的迁移，阻止活化的郎格罕细胞和树突状细胞与淋巴结内t淋巴细胞区结合，抑制迟发型超敏反应4]。树突状细胞受刺激后除分泌tNF-α、白介素1（iL-1）、干扰素（iFN）等多种细胞因子外，最近研究发现，其经脂多糖处理后，细胞内编码巨噬细胞炎性蛋白γ、巨噬细胞炎性蛋白α、c10、iL-1β的mRNA增多5]，这些因子为免疫应答的诱导及调节提供了有利的微环境。
（二）内皮细胞：虽然内皮细胞不直接参与免疫反应，但内皮细胞的活化是免疫反应答起动的重要前提。内皮细胞在iL-1、tNF-α等作用下活化，引起形态和功能的改变；①由上皮型转变为纺缍型并伴有波形蛋白丝（vimentinfilaments）的重组；②内皮细胞表面标志逐渐减少直至消失；③被覆胶原后形成管状结构的能力增加6]；④表达主要组织相容性复合体（mHC）Ⅱ类抗原及e-选择蛋白，增加细胞间粘附分子（iCAM）-1的表达，粘附白细胞能力增加，这是炎症细胞在皮肤中聚集的关键。内皮细胞经iL-1β、tNF-α、iFN-γ等刺激，可合成单核细胞趋化蛋白（mCP）-1、iL-8、一种“调控正常t细胞活性、表达和分泌”的趋化因子（rANTES）、iL-10等多种白细胞趋化因子7]。内皮细胞结构和功能异常亦会给机体带来危害。皮肤淋巴瘤晚期，内皮细胞通过细胞因子介导机制表达iCAM-3，该分子可能与淋巴瘤的全身性播散有关8]。
（三）淋巴细胞：淋巴细胞中只有t淋巴细胞能进入皮肤器官，目前已发现多种分子与t淋巴细胞归巢至皮肤有关。正常皮肤中40%T淋巴细胞表达皮肤淋巴细胞相关抗原（cLA），而机体其它部位只有极少数t淋巴细胞表达该分子9]，cLA与e-选择蛋白结合对t淋巴细胞外渗具有十分重要的作用10]。因此多数学者认为cLA可能为皮肤特定的归巢受体9-12]。最近研究发现，t淋巴细胞和内皮细胞结合及其在皮肤炎症区聚集与cD73分子有关。外周血淋巴细胞中，cD73+者占13%，cLA+者占9%，同时表达cD73和cLA者仅占1%，而浸润皮肤的淋巴细胞大部分同时表达这两种分子。若用cD73单克隆抗体4G4处理外周血淋巴细胞，其结合炎症区内皮细胞的能力70%被抑制12]。此外，极迟活化抗原-4/血管细胞间粘附分子-1（vCAM-1）及淋巴细胞功能相关抗原-1（lFA-1）/ICAM-1的相互作用亦参与t淋巴细胞的归巢活动10]。t淋巴细胞识别抗原多肽及自身mHC分子，并在协同刺激分子作用下活化、增殖、产生免疫应答。一方面杀伤靶细胞及肿瘤细胞，清除抗原，发挥保护作用；另一方面也可引起组织损伤。如皮肤慢性溃疡边缘有大量cD45RO+T淋巴细胞浸润聚集，其释放的细胞因子和生长因子使创伤趋于慢性化，不易愈合13]。
（四）肥大细胞：真皮内肥大细胞属结缔组织肥大细胞，内含中性蛋白酶、类胰蛋白酶及食糜酶。肥大细胞起源于骨髓内cD34+多能干细胞，进入循环系统后表面标志为cD34+、fcεrⅠ—、kit+，形态上与其它单核细胞无法区别。肥大细胞表面cD11a/CD18、cD11b/CD18、cD11c/CD18等β2整合素家族粘附分子可能在其迁移过程中起主要作用14]。迁移至组织内的肥大细胞在干细胞因子及其它局部细胞因子作用下发育成熟，干细胞因子缺乏时，肥大细胞将发生凋亡15]。肥大细胞表面存在多种膜受体，其中fcεrⅠ通过igE桥联变应原是Ⅰ型变态反应的主要机理。真皮内的肥大细胞受到免疫或非免疫性刺激后较肺及粘膜内的肥大细胞更容易活化，导致脱颗粒反应。产生并释放多种生物活性物质：“一类预合成并贮存在颗粒内，包括组胺、肝素、中性粒细胞及嗜酸粒细胞趋化因子、各种蛋白酶类；另一类为新合成的物质，如前列腺素和白三烯。这些物质释放后导致局部水肿（风团）或血管舒张及白细胞浸润。肥大细胞亦是产生tNF-α的主要细胞，该因子即可贮存在颗粒内，又可在受刺激后合成。tNF-α能诱导合成iL-1、iL-6、iL-1β、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子等。另外，肥大细胞自身还可合成iL-1、iL-3、iL-4、iL-5、iL-6、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子，其释放的介质以及由这些介质诱导产生的细胞因子构成一复杂的调节网络，以维持、恢复局部的平衡状态2]。
（五）成纤维细胞：实验发现，真皮成纤维细胞可合成人及鼠各类t淋巴细胞亚群最适活化所必需的多种基质蛋白。成纤维细胞可通过粘附分子cD44、lFA-3、iCAM-1与t淋巴细胞结合，其产生的因子可延长正常及病理状态下皮肤内t淋巴细胞的存活时间。成纤维细胞还可产生许多细胞因子如iL-1α、iL-6、iL-8、iFN-β、单核细胞趋化/活化蛋白、b因子、c3粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、转化生长因子-α、转化生长因子-β等，这些因子对皮肤内的免疫反应及炎症反应具有重要的调节作用2]。最近研究表明，损伤的皮肤组织内外周血来源的一种纤维细胞表达mHC-Ⅱ类抗原，可能在局部作为抗原呈递细胞具有激活t淋巴细胞的功能16]。关于成纤维细胞在免疫反应中的作用尚有待于进一步研究。
二、真皮免疫系统细胞间相互作用
正常皮肤中，上述各类细胞集中分布于以表浅真皮微血管丛为中心的区域，围绕血管形成“套袖”样结构，据此，sontheimer提出了真皮微血管单位（dMU）的概念17]，它包括真皮微血管内皮细胞（dMVEC）、真皮血管周围t淋巴细胞、真皮血管周围树突状细胞（dPDC）、真皮血管周围肥大细胞（dPMC）。dMU形成的原因可能为：
1．骨髓来源的细胞（dPTC来源于胸腺）进入皮肤组织，血管周围区域是其必经之路。
2．通过如下几种方式锚定于血管周围：①与血管外膜结缔组织中粘附分子结合；②局部趋化因子的趋化作用；③细胞间通过树状突起相互连接。这些以血管为中心分布的细胞群在功能上可能作为一免疫学单位，完成皮肤内的保护性和（或）病理性免疫反应2]。
（一）dPDC-DPTC：dPDC作为抗原呈递细胞，与记忆型cD4+DPTC作用引发局部t淋巴细胞介导的迟发型超敏反应如接触性皮炎等。dPDC产生的细胞因子如tNF-α、iL-1在dPTC的激活过程中起作用。dPTC产生的iFN-γ可诱导巨噬细胞表达凝血因子ⅩⅢa。活化t淋巴细胞产生的iL-2可增强树突状细胞的游走性并促进其在肺部及皮肤中聚集18]。
（二）dPDC-DMVEC：炎症反应中dPDC产生的tNF-α和iL-1可使dMVEC增加mHC-Ⅱ类抗原及iCAM-1的表达并可产生新的粘附分子e-选择蛋白、vCAM-1，辅助lFA+及cLA+T淋巴细胞的渗出。 （三）dPDC-DPMC：肥大细胞前体与单核细胞形态非常相似，活化dPMC可产生粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子促进巨噬细胞分化，tNF-α则有诱导dPDC产生iL-1的能力；dPDC产生的iL-1等细胞因子可增强组织胺诱导的内皮细胞释放前列环素的使用。
（四）dPTC-DPMC：dPMC产生的tNF-α作用于dMVEC辅助t淋巴细胞的粘附渗出。体外实验显示，dPTC产生的组胺释放因子可使肥大细胞、嗜碱粒细胞脱颗粒，释放的介质又吸引、活化其他免疫细胞，形成炎症循环。组胺局部浓度增大时，通过诱导单核细胞产生组胺释放抑制因子或通过与h2受体结合，活化局部抑制性t淋巴细胞亚群。
（五）dPTC-DMVEC：dPTC-通过与内皮细胞粘附分子e-选择蛋白等结合渗出血管。内皮细胞产生的趋化因子iL-8与其b型受体结合可控制cLA+T淋巴细胞的迁移10]。活化t淋巴细胞分泌的细胞因子如iFN-γ可增加dMVECⅠa类抗原及粘附分子如iCAM-1的表达。t淋巴细胞产物对维持dMVEC在淋巴细胞归巢中的“预激活”状态是十分重要的。
（六）dPMC-DMVEC：dPMC释放的组胺与dMVEC上h1及h2受体结合使血管通透性增加，体外，组胺与h1受体结合可促进内皮细胞增殖。dPMC产生的肝素附着在内皮细胞表面可为其他内皮细胞生长因子提供结合位点。dPMC产生的tNF-α可使dMVEC表达多种粘附分子以起动内皮细胞-淋巴细胞间的相互作用及随后的免疫反应。
（七）免疫细胞与结缔组织细胞的相互作用：淋巴细胞与内皮细胞上粘附分子结合可介导淋巴细胞归巢，与成纤维细胞上粘附分子结合则对淋巴细胞起定位作用，使免疫反应局限化。免疫细胞产生的iL-1和tNF-α可通过不同途径刺激或抑制成纤维细胞的增殖及胶原合成；转化生长因子-β、tNF-α、iL-4等则对成纤维细胞具有趋化作用。
研究证实，在免疫细胞上还存在有儿茶酚胺、aCTH、β-内啡肽、p物质、血管活性肠肽、多巴胺等的受体；内源性或注射入真皮内的p物质引起局部皮肤潮红、风团与p物质诱导的肥大细胞脱颗粒有关；无髓神经纤维可通过轴索-肥大细胞-内皮细胞轴触发或促进细胞免疫反应。可见皮肤内的免疫反应亦受神经-内分泌系统的调节2]。相信随着免疫学、分子生物学的发展及研究的深入，必将会促进皮肤免疫系统概念的进一步更新。同时，将对皮肤免疫性疾病有更深入的了解。
本文所用缩写：CD：白细胞分化抗原，CLA：皮肤淋巴细胞相关抗原，TNF：肿瘤坏死因子，IL：白介素，IFN：干扰素，ICAM：细胞间粘附分子，VCAM：血管细胞间粘附分子，LFA：淋巴细胞功能相关抗原，FcεRⅠ：IgEⅠ型受体，DMVEC：真皮微血管内皮细胞，DPTC：真皮血管周围T淋巴细胞，DPDC：真皮血管周围树突状细胞，DPMC：真皮细胞周围肥大细胞
羊脱细胞真皮基质在体内转归的动物实验研究
・５２ ２０１３年第８卷第３期Ｃｈｉｎ Ｊ ｕ Ｒｅｐａｉｒ ａｎｄ Ｗｏｕｎｄ ａｌｉ （Ｅｌｅａｒｕ￣ｃ ） Ｊ１ ： ： ：
羊脱细胞真皮基质在体内转归的动物实验研究
张军侯智慧 贾军乐 周彪 王凌峰
【摘要】 目的 了解羊脱细胞真皮基质（ＡＤＭ）在受体体内的转归情况。方法 健康雄性绵羊
活杀扒皮、拔毛，反削为断层皮片，经胰蛋白酶溶液消化、ＴｒｉｔｏｎＸ一１００溶液振荡清洗制成符合组织学要
求的ＡＤＭ，一部分置于０．０４％的戊二醛溶液中制成交联型ＡＤＭ，另一部分不做交联。将４Ｏ只大白
鼠随机分为交联组与未交联组，各组２０只。交联组每只大白鼠背脊位置设计切口、沿游离出的组织
间隙包埋入交联型ＡＤＭ，未交联组用同样的方法包埋入未交联型ＡＤＭ。术后对比观察交联与未交联
组术区的外观变化、埋植物及周围组织形态结构的变化。结果埋植羊交联和未交联型ＡＤＭ后，大
鼠埋植区均无明显的炎症反应，未出现明显的排斥反应，交联型和未交联型羊ＡＤＭ被周围组织包裹，
包裹组织血运正常，无异常分泌物，镜下交联型和未交联型羊ＡＤＭ周围均被炎性细胞浸润，以单核细
胞和中性粒细胞为主，羊ＡＤＭ被周围组织吸收逐渐缩小直至消失。结论羊ＡＤＭ在体内转归过程
中无明显的排斥反应，显示了较低的免疫原性。 【关键词】 羊脱细胞真皮基质；排斥反应；转归
异体真皮和猪皮脱细胞基质在临床上已有广泛的应用， 脱细胞真皮基质（ａｃｅｌｌｕｌａｒ ｄｅｒｍａｌ ｍａｔｒｉｘ，ＡＤＭ）由于去除真
皮组织内的细胞有效成分，使免疫原性大大降低，减小了机
体的免疫排斥反应，移植后对创面的修复起到积极的作用，
疗效显著。近几年羊皮生物敷料的实验研究和临床应用取
得了一定的成绩，提示羊皮生物敷料也具备一定的临床应用
价值 Ｊ。羊ＡＤＭ的动物实验研究也取得了较显著的治疗效
果 ，本实验笔者将制备的羊ＡＤＭ埋植于大白鼠体表，对
羊ＡＤＭ在大白鼠体内的转归过程做一初步了解，为临床实
真皮间充质干细胞生物学特性研究进展
江西医学检验２００７年２月第２５卷第１期 真皮间充质干细胞生物学特性研究进展 罗琳付建华综述汪泱★审校 中图分类号Ｒ４４６．１Ｗ３，Ｒ４４６．８ 文献标识码Ｃ 文章编号１００８－－００２３（２００７）０１－００４５－０３ １前言 干细胞是具有高度增殖和自我更新能力．并可 分化为多种不同靶细胞的细胞。在个体发育的过程 中，干细胞经历了从全能干细胞ｆ胚胎干细胞１到多 能干细胞再到定向干细胞．最终分化为不同的成熟 组织细胞的演变过程。近来，各个阶段干细胞的研 究均取得了重要的进展。间充质干细胞来源于发育 早期的中胚层和外胚层，具有广泛的分化潜能。可 向多种中胚层和外胚层来源的组织细胞分化：更令 人惊讶的是近来发现这类细胞广泛存在于成熟个 体的多种组织中。目前已经在骨髓、肌肉、大脑、骨 膜等多种组织中均证实有间充质干细胞的存在．本 世纪初。人们发现真皮组织中同样存在有间充质干 细胞，真皮间充质干细胞（国外常称作Ｓｋｉｎ—ｄｅｒｉｖｅｄ Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ即皮肤来源的祖细胞）自２０００年发现到 现在不过数年［１１，其相关研究已取得巨大进展，尤其 是其分离培养技术方面．本综述将就近几年其分离 培养方法、生物学特性及应用前景作一概述。 ・ ２真皮间充质干细胞的分离培养方法进展 人们发现真皮组织含有血管、Ｍｅｒｋｅｌ细胞、神 经和神经感受器受体、皮脂腺、毛囊和汗腺等结构， 包括来源于三个胚层的多种不同的组织细胞。皮肤 组织是机体内自我更新和再生修复速度最快的组 织之一．且以往有研究发现鸟类的多种结缔组织包 括真皮中存在多能间充质干细胞．据此人们推测真 皮组织中也可能存在有多能干细胞。基于此设想． ２０００年，Ｔｏｍａ等则自小鼠皮肤中以细胞悬浮培养 方式（细胞形成球形集落，培养基由ＤＭＥＭ／Ｆ１２添 加上Ｂ一２７、ＥＧＦ和ｂＦＧＦ等组成）分离培养出皮肤 来源的祖细胞且传代超过一年仍具有多向分化的 能力，他们同时证实人类头皮中也存在有类似细 胞闭。国内．２００１年．史春梦等自大鼠皮肤中成功分 离培养出此多能干细胞（纽胞贴壁生长，培养基由 ＩＭＤＭ补充１０％小牛血清、ＥＧＦ、ＫＧＦ和ｂＦＧＦ组 成）翻。２００３年．Ｋａｗａｓｅ等在Ｔｏｍａ等建互的培养万 作者单位：３３０００６南昌大学医学院第一附属医院整形外科 ｝通讯作者：汪泱，女，医学博士，研究员，主要从事干细胞及 组织工程方面的研究 －综述・ 法基础上进行改良．添加不同生长因子．实验证实 ＴＧＦ—Ｂ能有效促进球形细胞集落的形成而不影响 其分化潜能Ｉ４１。２００５年，美国学者Ｂａｒｔｓｃｈ等分离培 养方法更进一步。以无生长因子的培养基（ＤＭＥＭ 补充胚胎干细胞标准级胎牛血清、ＭＥＭ非必需氨基 酸、２一巯基乙醇、１％抗生素和左旋谷氨酸）自人体包 皮中分离培养出真皮间充质干细胞【习。２００６年， Ｍｅｄｉｎａ等在前述的二维培养体系进行重大创新．用 一种温敏性凝胶构建的三维培育系统（温敏性凝胶 添加ＤＭＥＭ和１０％ＰＢＳ）。自胚鼠和新生Ｃ５７Ｂ／６小 鼠皮肤中分离培养出一种真皮来源的上皮细胞的 祖细胞嘲 ３真皮间充质干细胞的生物学特性 用流式细胞术和免疫组化的方法检测体外培 养的啮齿类动物和人类的真皮间充质干细胞的免 疫表型。检测结果表明真皮间充质干细胞的细胞表 面蛋白表达情况虽然不完全相同１２－１３１。但特征性表型 趋于一致。其可表达的表面蛋白主要有如下几种： ３．１粘附分子 啮齿类动物和人类的真皮间充 质干细胞均一致表达整合素１３１（ＣＤ２９）。前者也表 达整合素ａ６（ＣＤ４９ｔ），血管细胞粘附分子（ＶＣＡＭ一１； ＣＤ１０６），细胞内粘附分子３（ＩＣＡＭ一１；ＣＤ５４），不表 达内皮选择素（Ｅ—ｓｅｌｅｃｔｉｎ；ＣＤ６２）：人类真皮多能干 细胞也表达间充质干细胞特异表型之一的ｅｎｄｏｇｌｉｎ／ ＳＨ２（ＣＤ１０５）．不表达血小板内皮细胞粘附分子 （ＣＤ３１）、ＣＤ８和整合素ａｃ（ＣＤ１ １ｃ）。 ３．２受体分子啮齿类动物和人类的真皮间充 质干细胞均表达透明质酸受体（ＣＤ４４），前者也表达 转铁蛋白受体（ＣＤ７１），后者有报道不表达脂多糖受 体（ＣＤ１４）和干细胞因子受体（ＣＤ１ １７即ｃ—ｋｉｔ）。 ３．３表面酶人、鼠真皮间充质干细胞均表达氨 基肽酶（ＣＤ１３）。 ． ３．４细胞外基质蛋白和糖蛋白：啮齿类动物和人 类的真皮间充质干细胞一致表达胸腺嘧啶一１ （ＣＤ９０）．前者也表达Ｉ型和Ⅲ型胶原，不表达Ⅱ型 胶原：有实验表明前者不表达角蛋白１９（ｃｙｔｏｋｅｒ－ ａｔｉｎ１９）．后者不表达血型糖蛋白一Ａ。
皮肤HPA轴的研究进展
Ｄ∽２００９，Ｖ第ｏＩ篓２３篡Ｎ麓１２ＩＯ聿Ｈ闯ｌｌｉ篇ＨＩ暇］Ｒｉ住ｌｌＶ磊Ｉ］Ｉ髻ＩＢＲ汆Ｈ苦ＨＬＩ８４Ｉ∽，．，ｏ．ＩＪＩ－一—Ｔ－
・综述・
皮肤ＨＰＡ轴的研究进展
郭红卫１’２，都飞１
［摘要］
［关键词】皮肤是一神经内分泌器官，皮肤及其附属器与神经内分泌系统有着多方位联系。ＨＰＡ轴中的神经肽
激素主要包括ＣＲＨ，ＡＣＴＨ，ａ－ＭＳＨ，１３一内啡肽，这些激素与它们相应的受体分布于皮肤表皮和真皮的特定部位，以自分泌或旁分泌方式相互作用，对精神应激和环境应激因素如ＵＶ、外伤、理化物质刺激作出反应。皮肤的ＨＰＡ轴具有多种功能，可诱导表皮分化、色素沉着、血管反应、免疫反应以终止应激刺激
引起的皮肤反应，保持皮肤结构功能的完整性以及与全身系统的动态平衡。临床上，局部给予ＨＰＡ轴中关键分子能够刺激或抑制ＨＰＡ轴分子的内源性合成和释放。从而调控ＨＰＡ轴对皮肤及其附属器功能的调节。
皮肤；ＨＰＡ轴；应激
［中图分类号】Ｒ３３８．３［文献标识码】Ａ［文章编号】１００１—７０８９（２００９）１２—０８４１一０３
ＲｅｓｅａｒｃｈＰｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎｏｆＩｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔＨＰＡＳｙｓｔｅｍｉｎＳｋｉｎ
ＧＵＯＨｏｎｇ．ｗｅｉ‘ｒ．ＨＡＯＦｅｉＪ
（１ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｙｏｆＴｈｅＴｈｉｒｄＭｄｈａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４００８００，Ｃｈｉｎａ；２ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＤｅｒｍａｔｏｌ—ｏｇｙｏｆＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌｃｏｌｌａｇｅ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ５２４００１，Ｃｈｉｎａ）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｓｋｉｎｈａｓａｌｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅｃｉｒｃｕｉｔｒｙｂｙｗｈｉｃｈｉｔｓａｐｐｅｎｄａｇｅｓｃｏｍｐｏｓｅａｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｎｅｔｗｉｔｈｎｅｕｒａｌａｎｄｅｎｄｏｃｒｉｎｅｓｙｓｔｅｍ．Ｔｈｅｅｌｅｍｅｎｔｓｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｅｈｙｐｏｔｈａｌａｍｕｓ－ｐｉｔｕｉｔａｒｙ－ａｄｒｅｎａｌ（ＨＰＡ）ａｘｉｓｉｎｃｌｕｄｅＣＲＨ，ｔｔｒｏｃｏｒｔｉｎ，ａｎｄＰＯＭＣｗｉｔｈｉｔｓｐｒｏｄｕｃｔｓＡＣＴＨ，仅・ＭＳＨ，ａｎｄＢ－ｅｎｄｏｒｐｈｉｎ．Ｔｈｅｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｏｆａｌｌｔｈｅｓｅｅｌｅｍｅｎｔｓａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇｒｅｃｅｐｔｏｒｓｗｅｒｅｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｂｙｐａｒａ・ｏｒａｕｔｏｃｒｉｎｅｍｅｃｈａ－ｎｉｓｍｓ．ＴｈｅｓｅｅｌｅｍｅｎｔｓｒｅｓｐｏｎｄｔｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｓｔｒｅｓｓｏｒｓｓｕｃｈａｓＵＶｌｉｇｈｔａｎｄｈａｖｅＵｒｏｌｅｆｏｒｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｐｓｙ—ｃｈｏｌｏ西ｃａｌｓｔｒｅｓｓｉｎａｆｉｅｌｄ—ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄｍａｒｉｎｅｒｉｎｔｈｅｓｋｉｎ．ＴｈｅｓｋｉｎＨＰＡａｘｉｓｈａｓｄｉｖｅｒｓｅｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｃｌｕｄｉｎｇｔｈｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｖａｓｃｕｌａｒｃｈａｎｇｅｓ，ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｉｍｍｕｎｅａｃｔｉｖｉｔｙ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎａｎｄｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｅｐｉｄｅｒｍａｌｔＯｎｅｕｔｒａｌｉｚｅｔｈｅｅｌｉｃｉｔｅｄｌｏｃａｌｓｔｒｅｓｓｒｅａｃｔｉｏｎｓｉｎｏｒｄｅｒｔｏｍａｉｎｔａｉｎｔｈｅｓｋｉｎｓｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｎｔｅｇｒｉｔｙａｎｄ
猪真皮基质上培养人表皮细胞重组皮肤的实验研究
塞用医学杂志２００７年第２３卷第５期 猪真皮基质上培养人表皮细胞重组皮肤的实验研究 易先锋宋春红林映莲 摘要 目的：在猪真皮基质培养人表皮细胞重组复合皮。方法：取成人健康的包皮（包皮切除术自愿的提供 者）１ ｃｍ 全层皮片中用，Ｉ＇｝１．Ｔｒ法分离表皮细胞并进行计数，以无血清完全培养基培养法作为原代细胞培养，空白 对照组不放任何培养支持物。脱细胞猪真皮基质作为支架的气液界面培养法培养表皮细胞为实验组。形态学、常 规组织学、ＨＥ染色观察。免疫组织染色（ＳＡＢＣ法）检测复合皮肤中Ｐａｎｃｙ．ｔｏｋｅｒａｔｉｎ和层粘连蛋白（１ａｍｉｎｉｎ）。结果： ＨＥ染色显示有２层上皮细胞形成和无基底膜形成，稍有角质化，免疫组化染色显示Ｐａｎｃｙ．ｔｏｋｅｒａｔｉｎ（＋＋＋），提示在 猪真皮基质上生长的为人表皮细胞；Ｌａｍｉｎｉｎ（±），提示培养的人表皮细胞产生的新的基底膜不明显。结论：在猪真 皮基质上能进行人表皮细胞的培养，这种人表皮细胞能存活．但生长不太活跃。基底膜形成不明显。实验证明能在 体外构建具有表皮与真皮复合皮肤，但这种复合皮能否作为一种临床有效皮肤还需进一步证实。 关键词细胞培养技术表皮猪真皮基质 临床上应用培养的细胞上皮因缺乏真皮组织，使 愈合的创面瘢痕增生严重，不耐磨，抗感染差，基于表 皮细胞的缺陷，现在趋向寻找表皮和真皮混合移植方 法。我们用猪真皮基质进行表皮细胞培养，为探索一 种有潜力的永久性皮肤代用品提供理论与实践的依 据。 １材料与方法 １．１ 实验细胞的组织来源为健康成人包皮环切术 提供包皮全层皮肤（自愿提供者），共有２Ｏ人提供包 皮的全层皮肤。 １．２脱细胞猪真皮基质（ａｃｅｌｌｕｌａｒ ｐｉｇ ｄｅｒｍｉｓ）的制备 取市场６０～１２０ ｋｇ左右的白猪猪皮，用电动取皮刀取 出猪真皮清洗消毒，用戊二醛抗原处理，再用０．２５％ 胰蛋白酶液对猪真皮进行脱细胞处理。 １．３培养基无血清完全培养基ＣＳＦＭ，参照戴氏方 法配制［１－２］。以ＢＭ为基础补充过氧化氢酶（ｃａｔａｌｓｅ， ｓｉｇｍａ）２０ ｍｇ／Ｌ，牛血清白蛋白（ＢＳＡ，瑞士）１０ ｇ／Ｌ，人 转铁蛋白（ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ．ｓｉｇｍａ）１ ｍｇ／Ｌ，胰岛素（ｉｎｓｕｌｉｎ， 国产）８ ｍｇ／Ｌ，胆固醇（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ，国产）２０ ｍｇ／Ｌ，氢 化可的松（ＨＣ，国产）０．５ ｍｇ／Ｌ，补充表皮生长因子 （ｒｈ．ＥＧＦ）１０ ｐ￣ｇ／Ｌ，牛垂体提取物５０ ｍｇ／Ｌ，乙醇胺 （ｅｔｈａ，ｓｉｇｍａ）１×１０ ｍｏｌ／Ｌ。 １．４细胞培养和复合皮构建 １．４．１取材包皮环切术后健康人包皮皮肤，经常规 漂洗去除皮下组织和部分真皮后将其剪成２ ｍｍ× １０ ｍｍ的皮片，加０．２５％胰蛋白酶液，使二者的体积 比为１：５，置４￣Ｃ消化１６～１８ ｈ，用尖镊分离出表皮并 放入培养液中，以吸管轻轻打使表皮细胞分散，尼龙筛 网过滤．ＴＪ．６型离心机１ ０００ ｒ／ｍｉｎ离心沉淀５ ｍｉｎ， 弃上清液，管底有分解不完全的细胞团块取表皮细胞 层 基金项目：汕头市科技局立项课题（２ｏｏ４年度） 作者单位：５１５０４１汕头大学医学院第二附属医院 １．４．２活细胞计数用台晒蓝拒染法。 １．４．３原代细胞培养空白对照组（不放任何培养支 持物）培养瓶中按６×１０５／ｃｍ 密度接种人表皮细胞形 成细胞悬液，３７℃５％ＣＯ 培养箱培养２～３ ｄ，换液１ 次，第１次换液加入ｒｈ．ＥＧＦ １０ ｐ￣ｇ／Ｌ。 １．４．４气液面培养实验组以猪真皮基质为培养支 持物培养人表皮细胞在第７天左右将猪真皮基质转 移到不锈钢网状支架上。使猪真皮和表皮细胞恰好处 于ＣＳＦＭ的气液交界上。表皮细胞上层可以接到空气 和ＣＯ 而进一步分化，下面能吸起ＣＳＦＭ的营养成分 不断生长，继续培养７ ｄ左右。 １．５人表皮细胞形态学观察每天用倒置显微镜观 察实验组及对照组表皮细胞生长增殖的过程和特点， 并取不同时期的倒置相差显微镜成像系统上进行摄 影。 １．６组织切片ＨＥ染色将培养１４ ｄ的人表皮细胞 及猪真皮基质用４％甲醛固定，石蜡包埋后，５ ｍ薄 层切片，常规ＨＥ染色，显微镜下观察。 １．７免疫组化鉴定人表皮细胞和猪真皮基质采用 免疫组织染色（ＳＡＢＣ法）。实验方法：载玻片多聚一Ｌ一 赖氨酸防脱黏附：将培养１４ ｄ左右的表皮细胞加猪 真皮基质固定、包埋、切片、脱蜡水化，５％过氧化氢溶 液灭活内原性酶、胰蛋白酶修复抗原；正常山羊血清 封闭液；结合Ｐａｎｃｙ．ｔｏｋｅｒａｔｉｎ，层粘连蛋白（１ａｍｉｎｉｎ）的 一抗；结合相应的生物素化山羊抗人ＩｇＧ的二抗， Ｓｔｒｅｐａｖｉｄｉｎ／ＨＲＰ复合物结合，ＤＡＢ显色，苏木素轻度 复染，蒸馏水冲洗还蓝，梯度酒精脱水干燥，二甲苯透 明，中性树胶封固。显微镜下观察。 ２结果 ２．１ 人表皮细胞的相差显微镜观察人表皮细胞接 种到培养瓶后，倒置显微镜下观察呈悬浮球形，约８ ｈ 后细胞沉降，１２ ｈ后细胞出现黏附现象，２４ ｈ后部分 细胞粘壁并形成集落，第４天集落与集落之间树状细 胞将其连成网状，
异体脱细胞真皮基质的研究与应用
异体脱细胞真皮基质的研究与应用
发布时间：[1970-01-01]
中华整形外科杂志 2002 年9月第18卷第5期
异体脱细胞真皮基质的研究与应用
霍孟华，戚可名，黄金井
脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix，ADM)是异体皮经特殊处理，去除其细胞成分后得到的一种真皮替代品。由Livesey[1]开发研制，Lifecell 公司生产，商品名为AlloDerm，已获美国FDA批准应用于临床，近几年在烧伤和整形外科领域中得到了广泛的应用和发展。
一、脱细胞真皮基质的制备方法
ADM 的制备包含去表皮、脱真皮细胞及冷冻干燥处理3个基本步骤，有两种方法。一是尸体皮经高渗盐水和12烷基硫酸钠(SDS)处理，形成NaCl-SDS ADM[1，2]；二是经DispaseⅡ处理后，再经Triton X-100处理，形成Dispase-Triton ADM[3]。两种处理方法不同，得到的ADM略有差异，其中细胞成分均被清除，基质的基本结构完整，弹力素、硫酸角质素、层粘素、Ⅲ、Ⅳ型胶原虽有丢失，但仍保留足够的数量；相比较而言，Dispase-Triton ADM中各种抗原成分较少，而 NaCl-SDS ADM中Ⅳ型胶原、纤维结合素、结合素、弹力素、HLA-DR的含量较多[4]。
二、生物学特性
针对异体皮产生的免疫反应主要作用于表皮细胞、真皮中的成纤维细胞、内皮细胞等细胞成分，真皮的非细胞成分细胞外基质蛋白和胶原(即ADM)则相对无免疫活性，可永久地存在于宿主机体内。ADM作为一种异体真皮，细胞成分及Ⅰ、Ⅱ型细胞相容性抗原已被完全清除，免疫活性很低，不会诱发针对异体组织移植所产生的特异性细胞免疫反应(即排异反应)，亦不会诱发非特异性异物反应[5]。ADM中保留了基底膜复合物，形成基底膜与真皮两个面，真皮面有利于ADM的快速血管化，基底膜面可为上皮细胞的移行和定植提供一个天然平面，有利于ADM的上皮化[2，6]。
真皮组织作为添充材料的研究进展
中华损伤与修复杂志（电子版）２００８年第３卷第２期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｉｎｉｕｒｙ Ｒｅｐａｉｒ Ｗｏｕｎｄ Ｈｅａｌｉｎｇ（Ｅｌｅｃｔｒｏｎ Ｖｅｒ），Ａｐｒｉｌ ２００８，Ｖ０Ｊ ３，Ｎｏ．２
２０９． 参考 文献 ３石荣光．创伤骨折住院患者心理健康状态调查与心理干预［Ｊ］． １汪向东，王希林，马弘．心理卫生评定量表手册［Ｍ］．中国心理 护士进修杂志，２００６，２１（１）：２１－２３． 卫生杂志，１９９９，１３（增刊）：１９６．１９７． （收稿日期：２００８．．０１．．０８）
２姜乾金，主编．医学心理学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２００２． （本文编辑：谷俊朝）
王晓凤，刘小龙．护理干预对烧伤患者心理应激反应的影响［Ｊ／ＣＤ］．中华损伤与修复杂志：电子版，２００８，３（２）：２２７－２２８
真皮组织作为添充材料的研究进展
侯贺宪杨加保王强
皮肤是人体最大的器官，它构成人体与环境间自我更新
和修复的界面，是人体与外界环境间相互沟通的主要部位。
大面积深度烧伤患者缺乏足够的皮片供修复，使用异体／异 种皮片修复最终因免疫排斥反应需再度植皮。组织工程
（Ｔｉｓｓｕｅ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ）的核心是在运用生物正常及病理两种
状态下的组织、结构和功能关系的基础上，研究开发用于人
体各种组织或器官损伤后修复其功能和形态结构的生物替
代物的一门新兴学科，由活细胞和真皮支架材料制成的人造
生物皮肤，是当今世界上治疗大面积深度烧伤和慢性顽固性
皮肤溃疡的理想产品。
早在２０世纪７０年代中期，哈佛医学院的Ｒｈｅｉｎｗａｌｄ
等 首次提出自体表皮细胞膜片（ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ａｕｔｏ—
ｇｒａｆｔ，ＣＥＡ）培养技术，解决了表皮细胞体外传代扩增的难题。
他们从患者身体上取小块皮肤，经２～３周培养，即形成 ＣＥＡ，然后移植到部分或全层皮肤缺损创面上。但临床实践
中发现ＣＥＡ缺乏真皮组织，创面愈合后增生严重，抗感染力 差，不耐磨，易破溃，组织学也证实ＣＥＡ覆盖全厚创面后，最
真皮成纤维细胞多向分化潜能的研究进展
组织工程与重建外科杂志２０１１年ｌ２月 第７卷第６期
ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１６７３－０３６４．２０１ １．０６．０１５
真皮成纤维细胞多向分化潜能的研究进展
马晓飞 朱明 综述 张艳 柴岗 审校 ・３４７・
．综述．
【提要】真皮成纤维细胞起源于胚胎中胚层间质细胞，是构成体内疏松结缔组织的主要细胞成分。以往认为．真皮成纤 维细胞在机体发育过程中是分化完全的终末细胞，不具备多向分化潜能，只能作为真皮组织的种子细胞 近年来研究发
现，真皮成纤维细胞能够表达间充质干细胞相关标志物，具有多向分化潜能，在特定条件下能够向骨、脂肪、软骨、肌腱、 神经以及胰岛等多胚层组织器官分化，可能成为组织器官构建的种子细胞来源。现将真皮成纤维细胞的多向分化潜能
研究现状进行综述。
【关键词】 真皮成纤维细胞多向分化潜能干细胞
【中图分类号】Ｑ８１３．１＋１ 【文献标识码】Ｂ【文章编号】 １６７３—０３６４（２０１１）０６—０３４７—０３
Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｎ Ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ Ｄｅｒｍａｌ Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ＭＡ Ｘｉａｏｆｅｉ，ＺＨＵ Ｍｉｎｇ，ＺＨＡ ＮＧ Ｙａｈ，ＣＨＡ Ｉ Ｇａｎｇ．
Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｌａｓｔｉｃ ａｎｄ Ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅ Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｎｉｎｔｈ Ｐｅｏｐｌｅ ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ＪｉａｏＴｏｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ
Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０００１１，ＣｈｉｎｃＬ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＺＨＡＮＧ Ｙａｈ ｆＥ—ｍａｉｌ：ｚｙｃｇ８１＠ｙａｈｏｏ．ｔｏｍ．ｃｎ）． 【Ｓｕｍｍａｒｙ】ＤＦｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｍｅｓｏｄｅｒｍａｌ ｅｍｂｒｙｏ ａｒｅ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｃｅｉｌｓ ｏｆ ｌｏｏｓｅ ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅ ｔｉｓｓｕｅ．ＤＦｓ
皮肤免疫知识点总结
皮肤免疫知识点总结
一、 皮肤的免疫系统
1. 皮肤是人体最大的器官，它不仅是机体的第一道屏障，还是免疫系统的一个重要部分。皮肤免疫系统包括表皮和真皮中的多种免疫细胞，如Langerhans细胞、皮下组织中的树突细胞等，它们在皮肤组织中起着重要的免疫防御作用。
2. 表皮的免疫细胞主要是Langerhans细胞，它们具有天然免疫和适应性免疫双重功能。Langerhans细胞能够识别和捕获皮肤中的抗原，并将抗原呈递给其他免疫细胞，激活免疫应答，发挥抗菌、抗病毒、抗真菌的作用。
3. 真皮中的免疫细胞主要包括树突细胞、巨噬细胞、T细胞、B细胞等。它们在皮肤组织中形成一个完整的免疫网络，通过细胞因子、趋化因子等介质，参与皮肤免疫应答，维护皮肤的健康状态。
二、 皮肤疾病的免疫学机制
1. 特应性皮炎是一种常见的皮肤疾病，其免疫学机制主要涉及Th2细胞、IgE介导的过敏反应。在特应性皮炎患者的皮肤组织中，Th2细胞活化增多，释放IL-4、IL-5、IL-13等细胞因子，刺激B细胞产生大量IgE抗体，导致过敏反应和皮肤炎症。
2. 自身免疫性疾病如银屑病、结节性红斑等，其免疫学机制主要涉及T细胞介导的免疫异常。在这些疾病中，T细胞被异常激活，产生大量趋化因子和细胞因子，导致皮肤组织的炎症反应和异常增生。
3. 感染性皮肤病的免疫学机制涉及宿主免疫系统与病原体的相互作用。皮肤是人体最容易受到外界病原体侵袭的器官，免疫系统通过天然免疫和适应性免疫应答，参与对病原体的识别和清除，维护皮肤的健康。
三、 皮肤免疫学与免疫治疗
1. 生物制剂是一类有效的皮肤免疫治疗药物，如抗TNF-α药物、IL-17抑制剂等，它们通过针对免疫细胞介质、细胞因子等靶点，调节免疫反应，减轻皮肤炎症和病变。
2. 免疫调节疗法是一种新兴的皮肤免疫治疗方法，如光动力疗法、免疫调节药物等，它们通过调节免疫细胞的功能、影响免疫介质的释放等机制，改善皮肤免疫状态，治疗和预防皮肤疾病。
人工真皮(皮耐克)的临床研究进展
人工真皮（皮耐克）的临床研究进展
人工真皮作（皮耐克）为一种组织工程材料有操作简便，可批量生产，免疫排斥反应小的特点，本文复习了人工真皮的历史和特性，总结了人工真皮的优缺点，并对人工真皮的临床应用进行展开讨论，通过本文的阐述得出，人工真皮移植后可血管化形成类真皮组织，治疗皮肤软组织缺损有疤痕少，创伤小的优点，对烧伤，骨外露及一些特殊的创面有很好的疗效，是一种可靠得皮肤软组织修复方法。
标签：人工真皮；皮肤软组织缺损；皮肤移植
随着现代工业和交通运输的发展，各种创伤越来越高发，损伤的程度越来越严重。这种严重创伤往往有皮肤软组织的缺损，骨与肌腱等深部组织的外露，给创面的修复带来极大的困难。传统的修复方法皮瓣和植皮，有损伤大，手术风险高，疤痕收缩明显等不足。近年组织工程化皮肤得到广泛的应用，其具备有可减少对供体组织的需求，可减少创面的收缩，可实现急性大面积创面快速覆盖，免疫排斥反应小等优点[1]。真皮替代物皮耐克是其中的代表之一，现将其临床研究进展综述如下。
1人工真皮的历史及特性
人工真皮是由Yannas和Burke于1980年開发，是一种膜状人工皮，是一种用于修复皮肤组织的合成组织[2-3] ，开始时用于治疗烧伤创面。S.Suzuki[4]等对产品进行研究改良，研制出了我们今天应用的人工真皮（皮耐克），皮耐克产品较前产品更易于运输、储存、使用。皮耐克的硅胶膜厚度为150 um，增强了机械强度，透湿性能为1.5 ug/h，接近正常皮肤的透湿性能。使用时首先对创面进行消毒，然后根据创面的大小选用合适的人工真皮材料，将材料的海绵层紧贴创面，要将材料与创面的边缘缝合，这样可避免材料与创面的相对滑动。然后在材料上面覆盖一层纱布，轻轻压迫固定，因为太大的压力会破坏海绵材料的构造，所以压力不能过大。定期换药观察，在观察到硅胶薄膜下长出略带红色的良性肉芽组织后，可剥去硅胶膜，二期手术植上表皮。创面较小时可不进行二次植入表皮，只须等待创面自然表皮化。当创面贴附皮耐克第一周，虽然有炎性细胞侵入，但已有纤维母细胞及毛细血管生成，同时材料的深层有新生胶原填充的现象，第2 w时，从深层到浅层，大部分的海绵结构均被真皮样组织所代替。而在第3 w时，在所有的层面上均有新生组织分布，而且新生的組织分布状态完全不同于疤痕组织，而是具有真皮样的结构。有研究表明，真皮的成分愈多，皮肤愈合越快，创面改善越明显，可以减少供皮区的切取厚度，加快供皮区的愈合。创面植入真皮替代物后，成纤维细胞和毛细血管会逐渐长入其中，2～3 w后只需在其上方移植表皮就可修复创面[5]。皮耐克具有以上特点，临床应用逐渐广泛，并取得很好的临床效果。目前利用人工真皮修复创面的最长随访时间是22年。Suzuki[6]用皮耐克治疗一个5岁男孩背部下方和臀部的巨痣，他们把巨痣切除后的创面用皮耐克覆盖，3 w后在其上方移植刃厚皮片，5年后，臀部人工真皮修复的皮肤下放置扩张器，用扩展的皮肤重建肛门周围残余的巨痣。22年来，一直保持着
芥子气促进真皮成纤维细胞分泌IL-10的时效和量效研究
芥子气促进真皮成纤维细胞分泌IL-10的时效和量效研究
田泾;陆坚;杨积顺;胡晋红
【摘 要】目的:探讨芥子气诱导真皮成纤维细胞分泌IL-10的规律.方法:采用ELISA方法,检测不同浓度梯度的芥子气调节IL-10分泌的量效和时效关系.结果:成纤维细胞自身可分泌一定量的IL-10,芥子气作用成纤维细胞后,显著上调IL-10的分泌(P<0.05).并呈时间依赖性和剂量依赖性.结论:芥子气治疗银屑病的作用机制可能与促进细胞分泌抗炎因子IL-10有关.
【期刊名称】《药学实践杂志》
【年(卷),期】2009(027)003
【总页数】3页(P177-178,188)
【关键词】芥子气;真皮成纤维细胞;IL-10;银屑病
【作 者】田泾;陆坚;杨积顺;胡晋红
【作者单位】第二军医大学研究生管理大队,上海200433;第二军医大学研究生管理大队,上海200433;第二军医大学长海医院药学部,上海200433;第二军医大学长海医院药学部,上海200433
【正文语种】中 文
【中图分类】R986
银屑病是一种T细胞引发并维持的自身免疫性疾病[1]，病人机体免疫系统紊乱，健康细胞受到攻击，导致临床上各种形态的皮肤红斑鳞屑性炎症病变。银屑病全层皮肤均存在异常，真皮成纤维细胞在银屑病发展中扮演重要的调节作用。芥子气(sulfur mustard，SM)的化学名为“二氯二乙硫醚”，对皮肤有较强的渗透性。芥子气霜(1:10 000)，作为一种疗效确切的治疗银屑病的常用经典药物，在我校长海医院曾有多年的应用历史，临床经验证明：对银屑病症状及机体炎性状态的改善发挥了重要的作用。但其治疗机制尚不清楚。实验证实：当芥子气浓度<500
μmol/L时，对人体表皮细胞是没有毒性的[2]。本文将研究芥子气对真皮成纤维细胞分泌IL-10的影响，进而为研究芥子气治疗银屑病的机制做贡献。
单道数字可调微量移液器(日本NICHIRYO公司)，流式细胞计数仪(FACSCAN) 胶原酶(CLS-1,Worthington Biochemical Corp.)；分散酶(AMRESCO)；胰蛋白酶(tissue culture grade，AMRESCO)；小牛血清(GIBCO)； DMEM(high glucose,