植物内生真菌
植物内生真菌
一、内生真菌的概念
内生真菌是在宿主植物的茎和叶内生存并完成生活周期的真菌。这类真菌中，有许多种类很少形成孢子，或者在宿生植物上形成的孢子（或者孢子果）不容易识别。真菌感染植物组织，菌丝存在于细胞内和细胞间。与病原菌不同，这些真菌对宿主植物几乎没有害处，它们和植物之间或者是相互依存的共生关系，或者是不太密切的共生关系。
草本植物内生真菌侵染种子内部，播种后，真菌随着幼苗的生长和植株的发育成熟而生长，这些真菌没有吸器，出现在茎、叶、花序组织，而不出现在根内，这一点与菌根真菌不同。受侵染的植株在营养生长阶段不表现出被内生真菌侵染的特点，但是，当植物开花的时候，就可以观察到浸染的真菌。
与内生真菌容易混淆的一个概念是内生菌根，菌根是高等植物的根与真菌形成的共生联合体，内生苗根是菌根当中的一种类型，内生菌根的共同特征是根的表面不产生菌套，仅有稀疏的外生菌丝，菌丝在根部皮层组织的细胞间延伸，但不产生哈蒂氏网，菌丝体可侵入细胞内部，并形成不同形状的吸器，而宿主植物的根一般无形态及颜色的变化。故内生菌根用肉眼很难识别。
二、内生真菌的一般特征
内生真菌存在于根以外的植物组织细胞，可以用显微镜观察，也可以通过纯培养把它们分离出来进行研究。分离内生真菌时要对植物组织进行表面消毒，然后切成小片放在培养基上培养3～5天，内生真菌就生长在培养基上，可根据孢子和菌丝的特征，对它们进行分类鉴定。
可以按常规方法把内生真菌从多种植物上分离出来，已经发现的内生真菌包括许多子囊菌和半知菌、一些担子菌及少量的卵菌。主要的内生真菌包括药用Chloroscypha和
Lophodermium（散斑壳属）中的一些种类以及Cryptoxline、Cryptosporriopsis（拟隐孢菌属）、Phomopsis（拟茎点霉属）和 Phyllosticta（叶点霉属）中的一些种类。其中许多可以从植物组织中偶然分离到。这类真菌的共生生活方式与其占主导地位的腐生生活方式来讲，似乎是次要的。比如说，担子菌中有许多种类生长在木头上或粪堆上，但有时也可在植物细胞内发现。
苔鲜植物、蕨类植物、裸子植物和被子植物中都发现有内生真菌。Petrini（1986）在对热带、温带和阿尔卑斯山地区的200多种植物调查之后发现，几乎所有生活的植物体内均有内生真菌的存在。在内生真菌中，宿主的专一性变化很大，一些真菌能够从生长在不同的生态和地理条件下的属于不同科属的多种宿主植物内分离出来，但是其它一些内生真菌仅限于某一特殊种属的几种宿主植物，仅有少数几种内生真菌专一地出现在某一种特定的植物中。
内生真菌在一些植物及农作物中广泛传播具有重要意义，农业科学家对牧草的内生真菌有特别的兴趣，因为这些真菌会产生真菌毒素，从而对动物产生毒性。此外这些真菌也有潜在的应用价值，例如利用抗、感品种的植株或器官对病原真菌毒素的敏感性反应上的差异，人们可以应用毒素进行快速、准确地鉴定大批的品种资源，一则可以直接发现抗病材料，在生产上推广应用；二则可以选出一些农艺性状虽然不太理想，但具有抗病性的材料，作为今后常规育种的亲本材料。
三、草本植物的内生真菌
l．草本植物内生真菌的形成 许多草本植物的内生真菌都是属于麦角菌科（Clavicipitaceae）的真菌，其中传播最广的可能是香柱菌（Epichloe typhina），它寄生在禾本科牧草上，在70多种草坪植物中均存在，它的无性世代是半知菌类的顶孢霉属（Acremonium）。香柱菌属真菌子座淡色，平铺状，包围在禾本科植物茎和叶上，像一个套子；子囊壳理生在子座内，子囊细长，单膜；顶端加厚，具有折光性的顶帽；子囊孢子丝状，无色，有隔膜。
麦角菌属（ Claviceps）内生真菌，寄生在禾本科植物的子房内，后期在子房内形成圆形到香蕉形的黑色或白色的菌核，菌核越冬后，产生子座；子座直立，有柄，可孕头部近球形，子囊壳埋在整个可孕头部的表层内；子囊孢子无色，丝状，无隔膜。麦角菌（C．purpurea）寄生的患病植物在种子上形成紫色、弯曲的菌核，即表角；麦角内含有生物碱，人、畜误食后会引起中毒，但它又具有医疗价值，在临床上麦角碱可用于促进临产的子宫收缩。
瘤座菌属（Balansia）内生真菌通常在寄主的嫩梢顶端或穗部先形成假菌核，然后在菌核上产生垫状无柄的子座。
人们已经从200多种草坪植物中分离出内生真菌，这些草坪植物从温带到热带均有分布。调查表明，同一种宿主植物感染内生真菌的频度从 25％到100%不等。
2．草本植物内生真菌的生活史 根据内生真菌繁殖的方式和对植物的影响，可以把内生真菌分为两个主要类群：一群能够产生肥大的子座，子座孕育子囊孢或子实体；另一群不能够产生肥大的子座，这两个类群真菌对宿主植物的影响也各不相同。
（1）不产生孢子的内生真菌 这一群内生真菌以增节变态的顶孢霉属为代表，它们完全在植物细胞内生活，完成生活史，不产生外生孢子。真菌穿过组织生长到达正在生长的胚珠，在种子发育过程中，整合到种子当中去，随着植物种子的传播而传播。被内生真菌侵染的植物开花和种子形成过程与正常的没有被侵染的植物一样，但是由于内生真菌的寿命并没有种子那样长，所以在种子贮藏期延长之后，种子内就没有真菌存在了。
（2）产生孢子的内生真菌 这类真菌的子座或者在花序上，或者在叶上。香柱菌和其它一些真菌的子座产生于花序内，引起花序大范围的变化和机械损伤，导致植物部分或全部不育。而其它一些真菌，如Balansia epichloe，在叶片上形成子座，这些真菌能改变植物体内的激素平衡，阻碍植物开花。通常，分生孢子或产生在子座上的子囊孢子到达尚未被侵染的小花上，然后，孢子就在柱头上萌发，萌发管侵入胚珠；少数情况下，内生真菌经过生长而到达生长发育的胚珠。
（3）草本植物内生真菌的真菌毒素 从已被内生真菌侵染的草本植物中可以分离到各种真菌毒素，这些毒素包括各种麦角生物碱，人如果误食了麦角菌产生的菌核，就会引起麦角中毒。真菌毒素除了可以从内生真菌侵染的草本植物中分离外，还可以从纯培养的真菌中获得。人的麦角中毒症状通常类似于绵羊、山羊等牲畜的中毒症状，这些牲畜在放牧过程中吃了长得比较高的酥油草或者是黑麦等其它牧草后，就会产生一种被称为酥油草中毒症的症状，其特征是体重轻微增加、步态不稳、组织坏死、肢体残缺，并发生自发性流产。另一种被称为黑麦晕倒症的症状，其特征是伴有肌肉痉挛，严重者甚至站立不稳。这些食草动物啃食被内生真菌感染的牧草之后，若再碰到这类牧草，则会避开这类牧草。人们从患病的新西兰绵羊中，较多地了解了这一症状。
被内生真菌侵染的小草对昆虫也有毒，这样的小草会导致昆虫生长发育不良，繁殖能力减弱，甚至死亡。但实验研究已经证明，吃过被侵染植物组织的昆虫，如果再次给予选择的机会，一些昆虫将会轻而易举地避免去吃已经被内生真菌侵染的小草，最终，在感染的草地上，昆虫仍能够较好地生存下去。
被内生真菌所侵染的植物具有以下三方面的潜在优势：①营养生长增加；②抗旱力增强；③内生真菌产生毒素。植物生存得怎样，最终取决于真菌对植物的有益作用达到什么程度，例如营养生长的增加可以弥补植物开花受到阻碍，即可以弥补植物的有性降低。
牧草内生真菌与牧草之间的相互作用激发了农业生态学家的兴趣，他们预测内生真菌与牧草之间的这种生物学作用也将产生商业利润。因为真菌在种子内随种子转运，这使贸易简单化；其次，科学工作者可以选育出使草坪植物营养生长加快的菌株，草坪更加浓密；第三，内生真菌使草坪的抗旱性和抗病虫害能力增强等特点，都将产生直接的经济效益。
上述内生真菌通过产生毒素来抵抗昆虫对草坪的啃食作用，这实际上是内生真菌与昆虫之间的一种竞争关系，这种竞争关系在生物防治上有一定的应用价值。Johnson等（1985）发现，牛尾草的病原菌顶孢霉（Acremonium coenophialum）妨碍了禾谷缢管蚜和麦二叉蚜的取食，在被该侵染的植珠上这两种蚜虫皆不能存活。Bergdah1等（1985）也发现．在香脂冷杉上，奇异拟夏孢锈菌（Uredinopsis mirabilis）的存在间接地造成了冷杉瘦蚊（Paradiplosis tumifpex）及另一种瘿蚊死亡，从而可把该锈菌视为蚊的自然控制因子．
【精品】植物内生真菌共生体对昆虫种群的影响
植物-内生真菌共生体对昆虫种群的影响
1 / 29 植物-内生真菌共生体对昆虫种群的影响
王学霞，杨民和，王国红
(福建师范大学生命科学学院发育与神经生物学重点实验室，福州350108)
摘要：植物内生真菌与植食性昆虫共用寄主植物作为食物、能量来源及栖息场所，三者之间的互作关系复杂多变，在生物种群控
制、生物进化和植物生产中发挥重要作用。从植物-内生真菌共生体、内生真菌对植食性昆虫与多级营养层的影响，及内生真菌
抗虫代谓}产物等方面概括了内生真菌一植物一昆虫相互关系的研究进展，建议将植物内生真菌纳入植物生态学、昆虫生态学和作
物病虫害控制的范畴内。
关键词：植物；内生真菌；植食性昆虫；天敌昆虫；共生关系
文章编号：1000—0933(2009)10．5618．09中图分类号：Q143，Q938，Q968文献标识码：A
在所有的生物关系中，食物关系起着决定性的作用j。自然条件下，植物、内生植物-内生真菌共生体对昆虫种群的影响
2 / 29 真菌、昆虫通过食物链发
生关系，彼此相互依存、相互制约，因而多级营养层间的交互作用是生物协同进化(CO—evolution)的驱动力。近
年来有关植物一内生真菌互作关系的研究已经广泛地开展，国内外很多学者也对植物内生真菌研究现状进行
了详细的综述’31。从Bacon等1977年首次报道内生真菌(Epichloetyphina)、寄主植物的毒素和植食动物
三者间的关系，到1988年，Prestidge和Gallagher建立黑麦草(Loliumperenne)中内生真菌(Acremoniumlolii)的
存在与阿根廷茎象甲(Listronotusbonariensis)幼虫的生长、存活和取食行为间的关系，有关内生真菌一植物。
昆虫三者之间互作关系的研究，取得了可喜的成绩。以下将主要从植物-内生真菌共生体、内生真菌一植物共
生体对植食性昆虫的影响、内生真菌对多级营养层关系的影响和内生真菌代谢产物抗虫活性等几个方面进行
内生菌根真菌提高植物抗病性的机理
内生菌根真菌提高植物抗病性的机理
内生菌根真菌的抗病机制主要包括改善植物营养、加固植物根系细胞壁、改变
菌根围内微生物区系的组成、与病原菌竞争侵染位点和诱导植物产生次生代谢产物
。
一、改善植物营养
内生菌根真菌虽然不象外生菌根真菌一样形成菌索，但是它可以增加植物根系
分枝数、形成更高级的侧根和增加根幅，根外菌丝扩展在土壤里形成的网状结构具
有强大的吸收能力，促进植物对营养物质及矿物质的的吸收。
Tarafdar
等报道内生菌根真菌侵染宿主能增强土壤中磷酸酶活性。宋勇春等
研究发现接种内生菌根真菌后土壤酸性和碱性磷酸酶活性均有增强。并且，根际土
壤酸性磷酸酶原位化学定位结果表明，菌丝周围有明显的酸性磷酸酶的反应产物，
这说明内生菌根真菌菌丝能直接向外分泌磷酸酶，增加植物对可溶性磷和难溶性磷
的吸收。
二、加固植物细胞壁
一些研究发现内生菌根真菌具有诱导植物细胞壁发生细胞学和形态学变化的功
能。
Aist
和
Bracker
在烟草、番茄和洋葱上观察到，在内生菌根真菌附着胞与植
物的接触点上，出现了与正常皮层细胞壁加厚相类似的情况，而且，这些细胞壁加
厚物在结构和染色特性上与正常细胞壁一样，与病原物入侵引起植物细胞壁加厚不
一样。
Dunas
研究发现内生菌根真菌菌丝入侵宿主植物时，如果只在表皮细胞的细胞
内和皮层细胞间时，只会引起胞壁物质的积累，但是，侵入内皮层的菌丝可引起宿
主细胞质和细胞器的增殖，促使宿主的代谢活性提高。对其分子生物学机制研究发
现，细胞壁富含羟基脯氨酸的糖蛋白（
HRGP
）与诱导抗病性和过敏反应有关，它自
身可增强胞壁强度、阻隔和固定病原菌，并可以作为木质素的沉积位点，在病原菌
入侵时诱导的各种酶类都不能降解
HRGP
。现已经对和内生菌根真菌诱导抗病性有
关的两个分子，β-1，
3
葡聚糖和
HRGP
作了免疫定位，结果发现，编码
HRGP
的
mRNA
在欧芹菌根中显著增多，而玉米根系中糖蛋白集中在丛枝周围，在菌根真菌
侵入点周围多有分布。
三、改变菌根围内微生物区系
内生真菌及其意义
内生真菌及其意义
内生真菌及其意义*
摘要内生真菌是一大类未被充分研究过的真菌它们生活在健康的植物体内不引起任何病害
症状内生真菌具有丰富的多样性总数可超过一百万种许多内生真菌与植物寄主形成互惠
共生体并有寄主专化性器官专化性和组织专化性内生真菌具有重要的生态学意义和经济
意义内生真菌可以产生许多次生代谢产物在农业医学生物技术领域中有广泛的应用前
景
关键词内生真茵共生多样性专化性代谢物
1 前言
真菌是吸收异养型的真核生物种类繁多植物内生真菌是一大类尚未被充分认识的真菌
许多真菌学家对此了解也不多从已有研究结果来看内生真菌具有重要的生态学意义和经济意义其物种多样性也是非常丰富的
内生菌Endophyte 的概念最早由De Bary 1886 是指生活在植物组织内的微生物
用以区分那些生活在植物表面的表生菌Epiphyte 按此定义植物的寄生菌菌根菌也归属于
内生真菌的概念范畴Carroll 1986 将内生菌的范畴仅限于植物体内那些不引起症状的有机体不包括寄生与兼性寄生的病原真菌和互惠共生的菌根菌Petrini 1991 则认为在生活史
的某一阶段能够在植物体内生活而下对寄主植物明显有害就是内生茵这个定义包括一些在生
活史中的某些阶段营表面生的内生菌和潜伏性病原菌Latent
pathogen 寄生菌Parasite
虽然也生活在寄主植物组织内但引起明显的病害症状因此不是内生真菌内生菌根菌生活
在植物根部与植物互惠共生可以算是内生菌但通常意义上的内生菌不包括菌根菌
内生菌中有内生细菌和内生真菌Fisher 等1992 本文主要讨论的是植物内生真菌
与其它普通真菌腐生菌寄生菌相比内生真菌的研究历史不长Lewis
1924 首先报
道了禾本科植物叶片存在内生真菌但此后的研究工作一直很少直到最近20 年内生真菌
的研究才开始比较活跃禾本科植物中内生真菌与寄主形成互惠共生关系内生真菌可增强寄主的抗病虫性及其它抗逆能力可望用于生物防治的广阔前景内生真菌种类繁多它们在其
植物内生真菌多样性及其共生作用
现代农业科技２０１２年第１８期 林业科学
植物内生真菌多样性及其共生作用
孙辉 （仲恺农业工程学院农学院，广东广州５１０２２０）
摘要植物内生真菌是生活在健康的植物体内不引起寄主植物任何病害的一类微生物。内生真菌具有丰富的多样性，在与寄主植物 协同进化的过程中．通过不同方式为寄主提供有利保护。人们在对内生真菌的研究利用中，可根据研究的需要寻找特殊的内生真菌来源， 为生产和研究提供最具研究价值和使用价值的资源。 关键词 内生真菌；多样性；共生 中图分类号 Ｑ９４９．３２ 文献标识码Ａ 文章编号１００７－５７３９（２０１２）１８－０１４３－０３
Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｆｕｎｇａｌ Ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ ａｎｄ Ｓｙｍｂｉｏｓｉｓ ｗｉｔｈ Ｐｌａｎｔ ＳＵＮＨｌｌｉ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙ，Ｚｈｏｎｇｋａｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ ５１０２２０） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｍｉｃｒｏｂｅｓ ｌｉｖｉｎｇ ｗｉｔｈ ｉｎｔｅｒｉｏｒ ｔｉｓｓｕｅｓ ｏｆ ｈｅａｌｔｈｙ ｐｌａｎｔｓ ｗｉｔｈｏｕｔ ｃａｕｓｉｎｇ ｄｉｓｅａｓｅ ｓｙｍｐｔｏｍｓ ａｒｅ ｃａｌｌｅｄ ｆｕｎｓａｌ ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ．ＦｕｎｇａＪ ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ ｐｏｓｓｅｓｓ ｈｉｇｈ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ．Ｔｈｅｙ ｌｉｋｅ ｔｏ ｐｌａｙ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｏｒ ｍｕｔｕａｌｉｓｔｉｅ ｒｏｌｅｓ ｔｏ ｔｈｅ ｈｏｓｔ ｐｌａｎｔｓ ｔｈｅｙ ｉｎｈａｂｉｔ．Ｓｏ ｍｕｃｈ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｈａｄ ｂｅｅｎ ｃａｒｒｉｅｄ ｔｏ ｆｏｃｕｓ ｏｎ ｆｕｎｇａｌ ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ．Ｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓ Ｃａｎ ｆｉｎｄ ｔｈｅ ｍｏｒｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｗａｙｓ ａｎｄ ｒｅｓｏｕｒｃｅ ｔｏ ｇｏ ｏｎ ｔｈｅ ｎｅｘｔ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｔｈｅ ｃｌｕｅｓ ｐｒｏｖｉｄｅｄ ｂｙ ｆｏｒｍｅｒ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ ｆｕｎｇａｌ ｅｎｄｏｐｈｙｔｅｓ；ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ｓｙｍｂｉｏｓｉｓ
药用植物乌头内生真菌研究
药用植物乌头内生真菌研究
摘要从药用植物乌头的侧根、茎、叶、花中分离获得内生真菌164株，将其中的151株根据显微形态观察进行分类鉴定，它们归属于6个目、9个科、23个属，其中毛霉属、黑孢属、头孢霉属、芽枝霉属和交链孢属为该植物内生真菌的优势属，表明药用植物乌头不同部位内生真菌在种群、数量及分布上具有多样性特征，在侧根上分布得最多。
关键词乌头；内生真菌；分离；分类鉴定 ；多样性
中图分类号r282.5文献标识码a文章编号 1007-5739（2009）07-0007-02
乌头（aconitum carmichaeli debx．）为毛莨科（ranunculaceae）乌头属（aconitum l.）多年生草本植物。该植物全株有毒，母根为川乌，母根上所附生的侧根为附子。主产四川、陕西，云南、贵州、河北、湖南、湖北、江西、甘肃等省也有栽培。乌头含有多种生物碱，具有抗炎、免疫抑制、麻醉止痛、抗肿瘤、强心、降血压、扩血管等作用[1]。在农业上有杀虫作用[2] 。
目前，国内外对植物内生真菌的研究报道较多，许多来自植物的天然化合物与植物的内生真菌有密切的关系，甚至也是内生真菌的次生代谢产物[3]。对乌头的研究报道较多的是它的药效、药用成分的分离提取、毒性、种植、田间管理和病虫害的防治等[4-6]。笔者对乌头植物内生真菌作了系统的研究，从内生真菌的分离、分类鉴定到活性物质的筛选和分离提取，以期为研究乌头植物内生真菌提供依据。
1材料与方法
1.1试验材料
1.1.1供试植物。乌头样品采自昆明市云南大学微生物所栽培的乌头植物。
1.1.2培养基。①分离培养基：pda培养基（马铃薯葡萄糖培养基），使用前1ml培养基中加80iu的青霉素，以抑制细菌生长。②分类鉴定培养基：pda培养基和促孢培养基（kh2po4，mgso4·7h2o，kno3，kcl，葡萄糖，蔗糖）。
1.2试验方法
1.2.1内生真菌的分离培养。首先用自来水冲洗乌头植物表面的泥沙，去除母根，接着进行表面消毒、分离和培养。方法参照文献[7]。
内生菌在植物中的作用及其生态意义
内生菌在植物中的作用及其生态意义
植物是地球上最重要的生物之一，它们为我们提供了食物、氧气、纤维和医药等资源。然而，植物在生长过程中会受到很多生物和非生物因素的影响，其中内生菌是一种重要的微生物。内生菌是指生活在植物组织内部，并且与其形成共生关系的微生物。它们可以促进植物生长发育，提高植物的适应性和抗病能力，对维持生态平衡和保护生态环境具有重要意义。
一、内生菌的种类及其作用
内生菌包括真菌和细菌两大类，其中真菌包括菌根真菌和内生菌真菌，细菌包括根瘤菌和非根瘤菌。
1. 菌根真菌
菌根真菌是一类生态重要的内生菌，它们与植物根系特别是木本植物形成的共生关系被称为菌根。菌根真菌可分为外生菌根和内生菌根两种类型，其中内生菌根是与大多数硬质根系的木本植物共生的主要类型。
菌根真菌在木本植物的生长过程中发挥重要作用，可以增加植物吸收养分的面积和能力，进而提高植物的生长速度和生产力，延长其生长周期。同时，菌根真菌还可以分泌植物生长素，并提高植物对环境的适应能力和抗病能力，帮助植物抵御各种有害因素。
2. 内生菌真菌
内生菌真菌是生活在植物体内部的真菌，其主要生长在植物种子或幼苗的表面，通过植物根系进入到植物组织中，形成内生共生状态。
内生菌真菌能够分泌植物生长素、维生素和植物抗氧化物质等因子，促进植物发育和营养吸收。同时还可以抑制植物病原菌的生长，从而保护植物不受病害的侵袭。 3. 根瘤菌
根瘤菌是内生细菌的一种，其主要生活在豆科植物的根部，能够将大气中的氮转化为植物能够利用的有机氮。根瘤菌通过产生根瘤来与豆科植物形成共生关系，根瘤内有许多根瘤细胞，这些细胞周围的菌根可与豆科植物形成共生囊。
根瘤菌能够将空气中的氮转化为有机氨和氨基酸，大大提高了豆科植物的吸氮能力和氮素利用率。同时，根瘤菌还能促进植物生长，增加种子产量，并提高植物对环境的适应能力和抗病能力。
4. 非根瘤菌
非根瘤菌是生活在植物体内部的一类细菌，其主要形态为球形或杆状，可以与许多植物形成共生关系，促进植物生长和发育。
植物内生菌抗菌杀虫活性总结
植物内生菌抗菌杀虫活性总结
1 / 431 / 43 摘要:本文综述了植物内生菌次级代谢产物的抗菌、杀虫等活性，以便寻找到植物源新的具有农药活性的先导化合物。
关键词：内生菌；次级代谢产物；抗菌活性；杀虫活性
植物内生真菌(Plant endophytic fungi)是指生活在健康植物组织内部但不引起植物体病害的真菌。这类真菌资源十分丰富，它们可能产生在微生物一宿主关系中发挥作用的生理活性物质，其次生代谢产物在生物制药、农业生产、工业发酵等领域越来越受到人们的关注。目前，微生物源生物化学农药的研究和开发在我国十分活跃，但微生物资源及其应用潜力尚没有得到充分的发挥，而植物内生真菌即是这样一类有待开发的新兴微生物资源，本文对植物内生菌次级代谢产物的生物活性进行总结，为进一步研究内生菌的生物活性提供依据。
1 抗菌活性的内生真菌代谢产物
1.1 生物碱类
IFB-Lactam-1 (1)是来自白菜内生真菌Trichoderma sp.的1个大环内酰胺生物碱，其可以很好地抑制柿子炭疽病[1]。6-isoprenylindole-3-carboxylic acid (2)是从黄花蒿（Artemisiaannua）内生真菌Colletotrichum sp.分离的吲哚生物碱。生物活性测试，在浓度200 µg/mL时，其对Gaeumannomyces graminis var. tritici、Rhizoctonia cerealis、Helminthosporiumsativum有抑制作用[2]。
内生真菌E99401的发酵液中产生的cerulenin (3)，在5 μg/disk时对C.glabrata、
Candida albicans、C. krusei、C. parapsilosis、Microsporum canis、Cryptococcus neoformans、Mucor miehe、 Nematospora coryli、Rhizomucor pusillus、 Paecilomyces variotii的抑菌圈分别为17、16、14、28、40、30、40、42、36、38 mm，而对应的阳性对照制霉菌素在20 μg/disk时，抑菌圈在10-20 mm[3]。从Garcinia dulcis的内生真菌PSU-D15中，分离到phomoenamide
内生真菌定殖植物方法
内生真菌定殖植物方法
There are various methods for establishing a symbiotic relationship
between endophytic fungi and plants, and these methods are crucial
for the study of endophytic fungi and their potential applications in
agriculture and biotechnology. 有多种方法可以建立内生真菌与植物之间的共生关系，这些方法对于研究内生真菌及其在农业和生物技术中的潜在应用至关重要。
One common method for establishing endophytic colonization in
plants is through seed inoculation. 将种子接种内生真菌是建立植物内生定殖的一种常见方法。Seed inoculation involves coating the seeds with
fungal spores or mycelium, which allows for the establishment of
endophytic fungi within the plant as it grows. 种子接种包括用真菌孢子或菌丝包裹种子，这样在植物生长的过程中内生真菌就能在其中定居。
Another method for establishing endophytic colonization is through
tissue culture. 通过组织培养建立内生真菌定居的另一种方法。In tissue
culture, plant tissue is manipulated in a controlled environment to
分离植物内生真菌操作流程
分离植物内生真菌操作流程
1.材料准备：植物样本、剪刀、镊子、70%乙醇、3%次氯酸钠（本实验用4?）、酒精灯、计时器、平板、锥形瓶，无菌水，离心管（带盖，灭菌）、打开无菌操作台灭菌30min。
（1）植物样本的采集：选取生长状态良好，不要有病斑或者枯枝烂叶，每种植
物实行三株标本，必须具有叶子、叶柄和枝条及其他部位，将样本名字写下在小纸条上放到上装标本的袋子里，檀香的标本与写著名字的纸条一同偷拍，样本上存有脏东西时，恳请用纸轻轻盖住，若不确切植物名字，恳请将整棵植物偷拍领用作鉴别，并搞好有关记录。
（2）制作pda固体培养基，在无菌操作台中倒平板，每瓶250ml的培养基大
概倒15个板，等待其凝结后用作注射。
2.清洗：认真用清水将标本洗净，洗去标本表面的灰尘，去除枯叶，备用。3.取样：
（1）在叶片的左上、右上、左下，右下和正中五个部位展开采样，穗序
5mm*5mm的叶片，如果是叶柄或枝干，则剪取5~10mm，若是比较粗的枝干或圆圆的果实之类的，总之比较大的，则将它切开，再剪取样本，样本不要剪的太大或太小。
（2）每种植物的叶子，叶柄，枝干等其他部位，每种部位注射两块板，小
板每个要接种五个样本即左上、右上、左下，右下和正中，小板每个接种四个样本即左上、右上、左下，右下，计算好所要剪的样本数，尽量多剪几个，以免后面的表面灭菌中冲洗时被冲掉。
（3）若植物标本存有余下，且是没烧完的，再次上装不好，放在冰箱里，水泵，
洗过的扔掉。
（4）每种植物标本所剪的样本放到一个50ml的离心管中，放到试管架上，
并且每个离心管上要标好所对应的植物标本。
4.表面杀菌：在无菌操作台中展开
（1）先向各离心管内倒入适量（10~20ml）70%乙醇，拧紧盖子，用计时器
已经开始计时1min,每10秒钟摇晃离心管几次，并使其充份杀菌。
内生真菌次级代谢产物
- 1 - 内生真菌次级代谢产物
内生真菌是一类存在于生物体内的真菌，常常与植物根系形成共生关系。近年来，越来越多的研究表明，内生真菌能够分泌多种次级代谢产物，具有广泛的生物活性和医药应用价值。
目前已经发现的内生真菌次级代谢产物包括多糖、多酚、生物碱、萜类化合物等。其中，多糖和多酚具有很好的抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抗菌等生物活性，已经成为研究热点。生物碱和萜类化合物则具有显著的抗菌、抗癌、抗病毒等活性，已经成为抗生素、抗癌药等药物的重要来源。
内生真菌次级代谢产物在医药、农业、食品等领域都有广泛的应用前景。但是目前内生真菌次级代谢产物的开发和研究仍存在着一些难点，例如内生真菌生长条件较为苛刻，产量较低，提取纯化难度大等。因此，未来需要加强内生真菌次级代谢产物的研究，提高产量和纯度，为其应用于各个领域提供更好的支撑。