人参皂苷检测常用对照品研究
ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２００３ ＶＯＬ．１４ ＮＯ．１ 时珍国医国药２００３年第１４卷第１期 衰ｌ ｌＯ批样品含■测定结果 ｍｇ・ｇ
３小结 ３．１ 本文采用薄层层析法对参芪养生膏中主要活性成分进行 定性鉴别，操作较简单，分离效果好，稳定性及重现性好，可作质 量控制方法。 ３．２ 含量测定研究时，我们曾选用多种不同溶剂溶解样品，经 过比较，只有０．５ ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液溶解效果最好，且用水饱 和正丁醇萃取时不会发生乳化现象。 ３．３ 在含量测定研究展开剂选择时，我们也曾试用过多种展开 系统 而最终选用本文所采用的展开系统，在该展开系统下，黄芪 甲苷可以达到与其它斑点完全分离，且斑点较圆整的效果。 ３．４ 上述实验结果表明较所建立的方法可准确、快速地进行定 性、定量检测，可用于该制剂的质量控制。 参考文献： ［１］彭勃，黄 珂、胡润淮，等．丙肝康颗粒剂质量标准的研究ＥＪ］．中 草药，２００１，３２（１）：ｌ９－２１． 人参皂苷检测常用对照品研究 李 波 （劲牌有限公司技术中心，湖北大冶４３５１００） 摘要：目的：系统研究分光光度法检测人参皂苷常用对照品最大吸收波长的选择以及显色反应的稳定性，解决困扰很多 研究工作者有关对照品选择方面的疑问。方法：分别对人参二醇、人参三醇、齐墩果酸３种对照品溶液进行紫外一可见光 范围的光谱扫描，确定含量测定所需的最大吸收波长；并对３种对照溶液进行最大吸收波长处的吸光度一时间扫描，考 察显色反应的稳定性。结果：３种对照溶液在可见光范围内吸收光谱峰、谷分明，确定最大吸收波长分别为５５Ｏ，５５１，５４７ ｎｍ；另发现显色反应的稳定性均不够理想，吸光度数值１ ｈ内的减少率也分别达到４．７５ ，５．５９ ，４．７Ｏ％。结论：进行人 参皂苷检测时．最大吸收波长依据所选择对照品的具体情况确定，实验操作要求在显色反应后３０ ｍｉｎ内完成。 关键词：人参皂苷； 分析检测； 分光光度法； 对照品 中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００８—０８０５（２００３）０１—００１１－０１ 人参为五加科（Ａｒａｌｉａｃｅａｅ）植物人参Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ Ｃ．Ａ． Ｍｅｙ．的根。具有抗疲劳、免疫调节等作用。现代药理研究证实人 参的主要有效成分为人参皂苷类化合物，人参皂苷可分为三大 类，Ａ型（即人参二醇型）、Ｂ型（即人参三醇型）、Ｃ型（即齐墩果 酸型），有关人参皂苷的含量检测方法已有许多相关报道，但是这 些资料含量测定所用对照品种类不尽相同，在对照品的选用理由 及最大吸收波长的选择上各执一词，缺乏统一。因此，本文针对常 用的几种对照品就人参皂苷含量检测的对照品选用问题展开较 系统的研究（主要涉及分光光度法），希望能给广大研究工作者提 供帮助。 ｌ仪器和试剂 ＴＵ一１９０１紫外一可见分光光度计；可控温水浴锅（琴台医 疗器械厂）；人参二醇对照品、人参三醇对照品、齐墩果酸对照品、 人参皂苷Ｒｅ对照品（均购自中国生物制品检定所）；所用化学试 剂均为分析纯。 ２方法与结果 ２．１对照溶液的制备精密称取人参皂苷对照品５ ｍｇ，置２ ｍｌ 容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，精密吸取０，１０，２０，３０，４０， ５Ｏ ｌ，置磨口带塞试管中，吹干溶剂；加５％香草醛一冰醋酸溶液 ０．２ ｍｌ，高氯酸０．８ ｍｌ，于６Ｏ℃水浴中加热１５ ｍｉｎ，冰水冷却 １５ ｍｉｎ，加冰醋酸５ ｍｌ，摇匀，放至室温，进行光谱扫描。扫描波长 范围：７２０ ２００ ｎｍ；吸光度范围：Ｏ～２；扫描速度：快速；光谱带 收稿日期：２００２—０５—１４；修订日期：２００２一ｌＯ—Ｏ９ 作者简介：李 波（１９７８一），男（汉族）．湖北恩施人，现任劲牌有限公司技 术中心助理工程师．学士学位，主要从事中药活性成分及质量标准研究工 作． 宽：２ ｎｍ；采样间隔：１．００ ｎｍ。 ２．２ 光谱扫描结果（扫描图谱略）从光谱扫描图谱可以看出，３ 种对照溶液在紫外光区域均受较大干扰，而在可见光范围峰、谷 较分明，因此，我们在进行含量测定时，选取可见光范围的最大吸 收波长。如表１。 表ｌ各对照溶液最大吸收波长 对照溶液 最大吸收波长２／ｎｍ 人参二醇 人参三醇 齐墩果酸 ５５Ｏ ５５ｌ ５４７ ２．３稳定性实验研究各取一份对照溶液进行时间扫描。扫描波 长：各对照溶液可见光范围最大吸收波长；采样间隔 ６０ ｓ；采样 数：３００。 ２．４ 时间扫描结果见表２（扫描图谱略）。从表２结果可以看 出，３种对照溶液（人参二醇、人参三醇、齐墩果酸）的吸光度在 ５ ｈ内均有明显降低，减少率分别为１２．８８ ，１２．Ｏ８ ，１Ｏ．５１ ； 在１ ｈ内的减少率也分别达到４．７５ ，５．５９ ，４．７０ 。因此，我 们在进行同类型样品检测时，操作速度要快，最好能在显色操作 完成后３０ ｍｉｎ内完成含量测定工作。 表２各时段吸光度值 ・１ｌ・
维普资讯 http://www.cqvip.com 时珍国医国药２００３年第ｌ４卷第１期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２—００３ ＶＯＬ．１４ ＮＯ．１ ３讨论 ３．１ 在进行人参皂苷含量测定工作时，也有文献报道选取其它 的对照品，如人参皂苷Ｒｅ、Ｒｏ、Ｒｇ。等，本文后来又对人参皂苷 Ｒｅ的应用情况进行了研究，确定其可见光范围最大吸收波长为 ５８８．８０ ｎｍ，稳定性研究结果同上。关于其它对照品的应用情况， 值得以后深入研究。 ３．２ 本文在研究过程中进行光谱扫描时发现，各对照品溶液在 紫外光范围内均为锯齿状谱线，而在可见光范围内图谱较满意， 这可能由于显色反应后，各成分间紫外吸收互相干扰，而可见光 范围内有吸收的成分较单一所致。另时间扫描发现各对照溶液显 色反应后稳定性不是很理想，这可能与显色后生成的新化合物结 构不断发生异变有关。 ３．３ 人参皂苷的检测是目前研究得比较广泛，也比较透彻的一 类中药成分，而且，其检测方法可谓多种多样，应用较多的除了本 文提到的分光光度法，还有高效液相色谱法。对于某些纯度要求 很高的分离制备以及较高精密度的分析检测，一般应用后者。不 过，相对来说比较简单、经济、实用，如今应用最广泛的还是紫外 可见分光光度法，特别是对于一些中药成分提取工艺研究项 目，此法具有简单、快速，分析结果可靠且具有很强可比性的特 点。因此，本文对此方法展开这一步研究，希望能使该法更好地为 我们的研究工作服务。 ３．４ 本文仅对人参皂苷检测的部分对照品选用问题进行了研 究，但是，中药化学成分的分析检测是一项复杂的工作，其重点还 在于成分的前处理分离。因此，进行中药化学成分的分析检测方 法研究开发时应注意尽可能地去除杂质，避免干扰，减少误差。 参考文献： ［１］ 郑 虎．中药现代研究与应用．第１卷［Ｍ］．北京：学苑出版社． １９９８：４７—５２． ［２］ 陈发奎．常用中草药有效成分含量测定［Ｍ］．北京：人民卫生出版 社．１９９７：３—１ ４． 愈疱灵的质量标准研究 陈磊盎 （江苏省南京市中西医结合医院 ２１００１４） 摘要：目的：制订愈疱灵的质量标准。方法：对其中黄酮类、皂苷类成分进行了定性鉴别；采用比色法测定了制剂中总黄 酮含量。结果：加样回收率１０１．３ （ＲＳＤ＝２．１５ ， 一５），标准曲线ｒ＝０．９９９ ０。结论：方法稳定可靠，可作为该制剂的质 量控制方法之一。 关键词：愈疱灵； 质量标准； 总黄酮； 比色法 中图分类号：Ｒ２８４．１；Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ｂ 愈疱灵是我院研制的科研制剂，由垂盆草、蒲公英等多种鲜 草药压榨取汁而成。剂型为外用合剂，可消肿止痛，具有抗病毒 作用，用于治疗带状疱疹。该制剂中含有黄酮、皂苷等成分，现选 取黄酮类作为质量控制的主要成分。 １仪器与试药 ７５１－ＧＷ型分光光度计（上海分析仪器厂）；芦丁对照品（购 自中国药品生物制品检定所）；所用试剂均为分析纯。 ２检查 按照２０００年版《中国药典》附录ＩＪ合剂项下检查，均符合规 定。 ３鉴别 ３．１黄酮类成分的鉴别取愈疱灵溶液ｌ ｍｌ，置试管中，加入镁 粉适量，再滴加２滴盐酸，显红色并有气泡产生。 ３．２皂苷类成分的鉴别取愈疱灵溶液２ ｍｌ，沸水浴上蒸干，残 留物用５滴冰醋酸溶解，再加醋酐一浓硫酸（１９：１）试剂数滴，显 紫红色。 ４总黄酮的含量测定【Ｊ ４．１标准曲线的制备精密称取在１０５ Ｃ干燥至恒重的芦丁对 照品９．６ ｍｇ，置５Ｏ ｍｌ容量瓶中，加７Ｏ 乙醇３Ｏ ｍｌ，置水浴上微 热使溶解，放冷，加７Ｏ 乙醇至刻度。摇匀，即得芦丁对照液（浓 度０．１９２ ０ ｍｇ／ｍ１）。精密量取对照品溶液１．０，２．０，３．０，４．０， ５．０，６．０ ｍｌ，分别置２５ ｍｌ量瓶中，加水至６ ｍｌ，加５ 亚硝酸钠 溶液１ ｍｌ，混匀，放置６ ｍｉｎ，加ｌＯ 硝酸铝溶液１ ｍｌ，摇匀，放置 收稿日期：２００２—０５—２７；修订日期：２００２—０７—０８ 作者简介ｔ陈磊Ａ（１ ９７０一），女（汉族）．江苏南京人，现任江苏省南京市中 西医结合医院主管药师，学士学位，主要从事医院制剂的工艺和质量标准 研完工作． ・１２・ 文章编号：１００８—０８０５（２００３）０１—００１２－０１ ６ ｒａｉｎ，加氢氧化钠试液ｌＯ ｍｌ，再加水至刻度，摇匀，放置１５ ｍｉｎ； 以相应的溶液为空白，于５００ Ｄｍ处测定吸收度，以吸收度为纵 坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程Ａ一０．００３ ０＋ ０．２８９ ２Ｃ，ｒ一０．９９９ ０，表明对照品在０．１９２ ０～１．１５２ ０ ｍｇ／ｍｌ 范围内呈良好的线性关系。 ４．２样品中总黄酮含量测定精密量取本品２ ｍｌ，置２５ ｍｌ瓶 中，照标准曲线项下，自“加水至６ ｍｌ”起，依法测定吸收度，结果 见表ｌ。 衰１样品中总黄酮测定结果 ４．３ 回收率实验于测得已知含量的样品中，加入一定量芦丁 对照液，按“样品测定”项下操作，测得吸收度，计算回收率为 １０１．３ ，ＲＳＤ＝２．１ ５ （ ＝５）。 ５讨论 由以上实验结果可以看出，采用比色法对制剂中总黄酮的 含量进行测定，结果稳定，重现性好，可以作为该制剂的质控指 标。综合各批次的实验结果，拟将其标准定在每毫升药液中总黄 酮含量不低于０．２Ｏ ｍｇ。 参考文献： Ｅ１３ 中华人民共和国卫生部药典委员会．中国药典．Ｉ部［ｓ］．北京。化学 工业出版社．２０００：５３３—５３３．
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三七的鉴别
2 定性鉴别
取本品2 g,研细,加甲醇20 mL,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇2 mL使溶解,作为供试品溶液。另取缺三七的阴性对照品2 g,同法制成阴性对照品溶液。再取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷 R1对照品,分别加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验,吸取供试品溶液、对照品溶液及阴性对照液各2 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1对照品相应的位置上,显红色的斑点,而阴性对照液无相应斑点。
3 含量测定
3.1 色谱条件
Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液(18∶82)；流速：1.0 mL/min；检测波长：203 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL。理论塔板数按三七皂苷R1计算应不低于3 000。
3.2 对照品溶液的制备
分别精密称取人参皂苷Rg1和三七皂苷R1对照品适量,加甲醇制成每1 mL含人参皂苷Rg1 0.396 mg和三七皂苷R1 0.092 mg的混合溶液,摇匀,即得。
3.3 供试品溶液的制备
取本品适量,研细,取约1.2 g,精密称定,加水适量使溶解并转移至分液漏斗中,用水饱和的正丁醇萃取3次,每次20 mL,合并正丁醇萃取液,加氨试液洗涤2次,每次20 mL,弃去氨试液,正丁醇层蒸干,残渣加甲醇溶解并移入10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用0.45 μm滤膜滤过,作为供试品溶液。
3.4 空白试验
按处方及制备工艺制备不含三七药材的阴性样品,再按供试品溶液的制备方法制备并测定。按照上述色谱条件,吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10 μL,分别注入色谱仪,进行测定。结果供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,分别有相同保留时间的色谱峰,而阴性对照在此保留时间无干扰(见图1)。因此,可在此系统条件下对人参皂苷Rg1和三七皂苷R1进行定量分析。
HPLC法测定肿痛消喷雾剂中人参皂苷Rg1、三七皂苷R1含量
・４８・ 中国民族民间医药 Ｃｈｉｎｅｓｅ ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｅｔｈｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｙ 药物研究 Ｔｈｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｓｔｕｄｙ ＨＰＬＣ法测定肿痛消喷雾剂中人参 皂苷Ｒｇｌ、三七皂苷Ｒ１含量 曲静’ 刘丽’ 王艳春 １．辽宁中医药大学，辽宁沈阳１１００３２；２．辽宁中医药大学附属医院，辽宁沈阳１１００３２ 【摘要】 目的：建立肿痛消喷雾剂中人参皂苷Ｒｇｌ、三七皂苷Ｒｌ的含量测定方法。方法：色谱柱：Ｃ１８（２００×４．６ ｉｎｒｎ，５ｔｚｍ）； 流动相：乙腈一水一磷酸（２Ｏ：８０：０．０５）；流速：１．Ｏｍｌ／ｍｉｎ；检测波长：２０３ｎｍ。结果：人参皂苷Ｒｇｌ在１．８４４—９．２２０ｔｘｇ范围内线性关 系良好；三七皂苷ＲＩ在０．８９２—４．４６ｌ，ｚｇ范围内线性关系良好。结论：本方法简便、准确，重复性好，可作为肿痛消喷雾剂的质量控制 方法。 【关键词】 肿痛消喷雾剂；人参皂苷Ｒ暑ｌ；三七皂苷Ｒ１；高效液相色谱法 【中图分类号】Ｒ２８４．１ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１００７—８５１７（２０１１）０１—００４８一Ｏ２ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｇｌ ａｎｄ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｌ Ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｉｎ Ｚｈｏｎｇｔｏｎｇｘｉａｏ Ｓｐｒａｙ ｂｙ ＨＰＬＣ Ｑｕｊｉｎｇ ，Ｌｉｕｌｉ ，Ｗａｎｇ Ｙａｎｃｈｕｎ （１，２ Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ；３ Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｈｏｓｐｉｔａ１） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｇｌ ａｎｄ ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒ１ ｉｎ Ｚｈｏｎｇｔｏｎｇｘｉａｏ Ｓｐｒａｙ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ Ｃ１８（２００×４．６ｍｍ，５１ｘｍ）．Ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ—ｗａｔｅｒ—ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ（２０：８０ ：０．０５）ａｎｄ ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ １．０ ｍｌＪｍｉｎ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ａｔ ２０３ ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｇｌ ｈａｓ ａ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒ ｂｅ— ｔｗｅｅｎ １．８４４—９．２２ ｇ ａｎｄ Ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒ１ ｈａｓ ａ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒ ｂｅｔｗｅｅｎ ０．８９２—４．４６１．ｔｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｍｉｐｌｅ ａｎｄ ａｅｃｕｒａｔｅ ｗｉｔｈ ｇｏｏｄ ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｇｌ ａｎｄ Ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ ＲＩ ｉｎ Ｚｈｏｎｇｔｏｎｇｘｉａｏ Ｓｐｒａｙ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｚｈｏｎｇｔｏｎｇｘｉａｏ Ｓｐｒａｙ；ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｇｌ；ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒ１；ＨＰＬＣ 肿痛消喷雾剂是由三七、川Ｉ芎、当归等中药组成，具 有活血消肿，去瘀生新的功效，临床用于治疗跌打损伤， 筋骨肿痛等症。为 有效控制制剂质量，本实验建立了高 效液相色谱法测定肿痛消喷雾剂中人参皂苷Ｒｇｌ、三七皂 苷Ｒ１含量的方法，方法简便，准确，重复性好。 １仪器与试药 １．１仪器 日本岛津ＬＣ一１０ＡＴｖｐ高效液相色谱仪；ＳＰＤ 一１０Ａｖｐ紫外检测器；赛多利斯电子天平ＣＰ２２５Ｄ。 １．２试药人参皂苷Ｒｇｌ（批号０７０３—２００１１９）及三七皂 苷Ｒ１（批号７４５—８９０２）由中国药品生物制品检定所提供。 甲醇为色谱纯。水为重蒸水，其它试剂均为分析纯。供试 品肿痛消喷雾剂为实验室自制（批号０８０９１１）。 ２方法与结果 ２．１ 色谱条件与适用性试验 色谱柱：ｃ （２００ ｘ ４．６ ｍｉｌｌ，５ ｍ）；柱温：３０℃；流动相：乙腈一水一磷酸（２０： ８０：０．０５）；流速：１．０ｍｌ／ｍｉｎ；检测波长：２０３ｎｍ。 ２．２溶液的制备 ２．２．１ 对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Ｒｇｌ、三七 皂苷Ｒ１对照品适嚣，加甲醇制成每１ｍｌ含人参皂苷Ｒｇｌ ０．４ｍｇ，含三七皂苷Ｒ１ ０．２ｍｇ的混合溶液，摇匀，即得。 ２．２．２供试品溶液的制备取药液滤过，即得。 ２．２．３ 阴性液的制备取本方中除三七外的药材，按制剂制 备方法进行制备，滤过，即得。 ２．３ 色谱图绘制及阴性液干扰试验精密吸取供试品溶液 ４ ｌ、对照品溶液１０ ｌ、阴性液注入液相色谱仪中，按前述 色谱条件测定，结果见图 在与对照品色谱峰相应的位置 上供试品溶液具有相同保留时问的色谱峰，阴性液在此峰 位无吸收，对本品的人参皂苷Ｒｇｌ、三七皂苷Ｒｌ含量测定 无干扰。 ２．４线性范围考察分别精密吸取人参皂苷Ｒｇｌ、三 七皂苷Ｒ１对照品的混合溶液４．０、８．０、１２．０、１６．０、 ２０．０ １，按上述色谱条件测定峰面积，以对照品溶液浓度 为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，经线性回归， 得人参皂苷Ｒｇｌ回归方程为：Ｙ＝３９８１２．８＋１７１８１０．６３Ｘ，ｒ ＝０．９９９７；三七皂苷Ｒ１回归方程为：Ｙ＝一１０７４９．１＋ １４４３３８．４５Ｘ，ｒ＝０．９９９７。人参皂苷Ｒｇｌ在１．８４—９．２２０￣ｇ 范围内线性关系良好；三七皂苷Ｒ１在０．８９２—４．４６０￣ｇ范 围内线性关系良好。 ２．５ ６精密度试验取同一供试品溶液，按含量测定项下 方法操作，连续进样５次，结果测得人参皂苷Ｒｇｌ的ＲＳＤ 为１．０５％。，三七皂苷Ｒ１的ＲＳＤ为１．１８％。 ２．６稳定性试验取同一供试品，分别在０、２、４、６、８ 小时，进样测定峰面积，色谱峰面积积分值在８ｈ内基本无 变化，结果表明供试品溶液在８ｈ内稳定。 ２．７重复性试验取同一批号样品５份，分别按含量测定 项下方法测定，结果测得含量的人参皂苷Ｒｇｌ的ＲＳＤ为 ０．９０％，三七皂苷Ｒ１的ＲＳＤ为１．２４％ ２．８回收率试验 精密吸取已知含量样品（人参皂苷 Ｒｇｌ１．７２ｍｇ／ｍｌ，三七皂苷Ｒ１０．４２ｍｇ／ｍ１）５份，分别精密 加入人参皂苷Ｒｇｌ、三七皂苷Ｒ１的混合对照品溶液适量， 按含量测定项下方法进行测定，人参皂苷Ｒｇｌ回收率为 １００．１％，ＲＳＤ＝１．５３％，三七皂苷Ｒｌ回收率为９８．６％， 作者简介：曲静
基于人参皂苷含量的西洋参等级规格标准研究
基于人参皂苷含量的西洋参等级规格标准研究
周海燕;赵润怀;付建国
【摘 要】目的:分析不同产地、不同等级规格西洋参中人参皂苷的含量,评价西洋参的化学信息,为其行业标准的制定提供实验依据.方法:采用UPLC测定主要活性成分人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rg2含量,用SPSS16.0软件进行统计分析.结果:建立了不同产地西洋参样品人参皂苷分布特征图谱;西洋参中Rg1、Re、Rb1的含量之和符合《中国药典》标准;方差分析表明产地、长度对同一个规格的西洋参中人参皂苷的含量影响具有统计学意义(P＜0.01).结论:由于西洋参中人参皂苷含量受产地、长度、重量等多因素影响,在等级规格评价中,符合《中国药典》标准基础上不宜采用人参皂苷含量为指标进行等级规格划分.
【期刊名称】《中国现代中药》
【年(卷),期】2014(016)006
【总页数】5页(P454-458)
【关键词】西洋参;等级规格;人参皂苷
【作 者】周海燕;赵润怀;付建国
【作者单位】中国药材公司,北京 102600;中国药材公司,北京 102600;黑龙江东度参业科技发展有限公司,黑龙江 海林157100
【正文语种】中 文
西洋参Panax quinquefolium L.为五加科植物，味甘、微苦，性凉；入心、肺、肾经；具有补气养阴、清热生津的功能[1]，原产于美国东部和加拿大，我国已有大面积栽培[2]，现国产栽培西洋参主产于吉林、黑龙江、北京、山东等地。根据目前西洋参市场状况、消费者的习惯及国产栽培西洋参精加工后的形态特征，依据长度、单支重量可将西洋参商品划分成不同规格，例如8 g长支、8 g中支、15 g短支。人参皂苷(ginsenosides)是西洋参的主要活性成分和重要质量控制指标[3]，其含量是人参的3～4倍，具有抗肿瘤、抗癌、降血压、降血脂、抗疲劳等多方面的药理活性[4]。本文应用UPLC测定主要活性成分人参皂苷含量，详细分析了不同产地、同一等级规格西洋参以及同一产地、不同等级规格西洋参中人参皂苷的含量，为全面系统评价不同产地、不同等级规格西洋参的质量提供了科学依据。
林下山参片人参总皂苷及19种单体人参皂苷(元)的含量测定
林下山参片人参总皂苷及19种单体人参皂苷(元)的含量测定
陈金鸾;孟繁玉;王振洲;张浩;朱海林;赵炳林;刘金平;李平亚
【摘 要】目的 测定林下山参片中人参总皂苷及19种单体人参皂苷(元)的含量. 方法 采用以水为溶剂的加热回流法提取林下山参片中的总皂苷,经大孔吸附树脂纯化,采用香草醛-浓硫酸比色法测定人参总皂苷含量,检测波长540nm. 采用二极管阵列检测器高效液相法(HPLC-PDA)测定林下山参片中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rh1、Rg2、Rb1、Rc、Ro、F1、Rb2、Rb3、Rd、20 (S)-Rg3、20 (R)-Rg3、PPT、F2、Rh2、齐墩果酸和PPD共19种单体皂苷(元)的含量,用Unitary C18色谱柱( 4.6mm×250 mm,5μm) ,以乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱,流速为1.3mL·min-1,柱温为30℃,检测波长203nm.结果:比色法测定人参总皂苷,在42.8~171.2μg(r=0.999)范围内线性关系良好.测得样品中人参总皂苷含量为2.78%. 林下山参片中人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rh1+Rg2、Rb1、Rc、Ro、Rb2、Rb3、Rd、20(S)-Rg3、20 (R)-Rg3、F2、PPD的含量分别为0.32%、0.12%、0.09%、0.06%、0.62%、0.15%、0.15%、0.13%、0.02%、0.20%、0.10%、0.11%、0.01%、0.40%、2.48%;未检出人参皂苷F1、PPT、Rh2、齐墩果酸.结论:首次对林下山参片中的人参总皂苷及19种单体人参皂苷进行含量测定, 为林下山参片新产品的开发提供了科学依据.%OBJECTIVE:To determine the contents
of total ginsenosides and 19 monomer ginsenosides or aglycones in
人参皂苷的提取与分离 论文
人参皂苷的提取与分离
学 生 姓 名
专 业
班 级
学 院
摘 要
首先认识人参和人参皂苷，了解人参皂苷的详细作用和功效，接着研究了人参茎叶总皂苷含量提取方法，用详细的工艺提取人参皂苷，并且用对显色反应和薄层层析对提取物进行鉴定，为以后的人参茎叶的开发利用奠定基础。
关键词：皂苷；人参茎叶；鉴定。
Abstract
.
The first ginseng and ginseng saponin, understanding the role and
efficacy of ginseng saponin in detail, then study the effect of ginseng stem
leaf total saponin extraction method, with the detailed process of
extraction of ginseng saponin, and used for color reaction and thin-layer
chromatography to extract were identified, for the future of ginseng stem
and leaf development lays a foundation.
key words: saponin; ginseng stems and leaves; appraisal;
目 录
摘 要 ............................................................................................................................... 1
高效液相色谱法测定人参超微粉中人参皂苷的含量
高效液相色谱法测定人参超微粉中人参皂苷的含量
皂苷类是人参的主要成分和药效成分，采用高效液相色谱法可准确测定人参中各皂苷类成分，本文主要介绍采用液相色谱测定在超微粉碎技术下得到不同粒度的粉末中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的含量。
标签：高效液相色谱法，人参，人参皂昔
本品为五加科植物人参Pana：c ginseng C.A.Mey.的干燥根和根茎。它具有大补元气，补脾益肺，生津养血，安神益智等之功效。临床用于体虚欲脱，肺虚气喘，肢冷脉微，脾虚食少，口渴少津，内热消渴，气血不足等[1]。皂苷类成分是人参的主要活性物质和药效成分，因此提高它的提取率就可增强其生物利用率，以下将介绍同一批次的人参，在样品经过振动磨型超微粉碎机粉碎后得到不同粒度的粉体的皂苷含量进行测量[2]。
1 实验仪器与材料
1.1 实验仪器
AEL-200电子天平（沈阳龙腾电子称量仪器有限公司），AB204-N精密分析天平（METTLER TOLEDO），Agilent 1260型HPLC（Agilent Technologies），TKCD-1006超声波清洗仪（南昌科昌达超声波设备厂），Heal Force final Filter超纯水機（上海浦东分析仪器设备厂），HH-4数显恒温水浴锅（常州国华电器有限公司），SQW-25系列超微粉碎机（山东济南三清易辰）。
1.2 实验材料
人参皂苷标准品Rb1，Re，Rg1：中国药品生物制品检定所；乙腈（HPLC）。
1.3 样品制备
同一批次人参（吉林省长白山）：人参粗粉（过40目筛）；人参样品经过超微振动磨型得到粒径分别为76.006～86.348 μm、29.963～30.025 μm、25.088～25.488 μm、22.163 μm。
1.4 对照品溶液的制备
取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rg1对照品适量，精密称定，加甲醇定容；分别精密量取上述对照品溶液各1 mL，置于同一10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。每1 mL各含0.2 mg的混合溶液。
HPLC法测定西洋参口服液中人参皂苷Re的含量
-24-
科学技术创新2019.14
HPLC
法测定西洋参口服液中人参皂甘Re
的含量
张巍
(哈药集团三精制药有限公司，黑龙江 哈尔滨150000)
摘要：目的：建立西洋参口服液中人参皂甘Re
的含量测定方法。方法：高效液相色谱法，采用C
i8(250 x 4.6mm,5?m)
色谱
柱；以乙睛-0.1%
磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱；流速1.0mL/min;
检测波长203nm
。结果：在11.7247|
jlg/mL~ 117.2470pg/mL
浓度范围内人参皂昔Re
的峰面积和浓度具有良好的线性关系,R=1.00000;
平均回收率为99.95%,RSD=0.40%(n=9)
。结论:本方
法准确、可靠、重复性好，适用于西洋参口服液中人参皂昔Re
的含量控制。
关键词：西洋参口服液;人参皂昔Re;
高效液相色谱法
中图分类号:R284
文献标识码：A
文章编号:2096-4390(2019)14-0024-02
1
仪器与试剂
仪器:Waters 2695
高效液相色谱仪。
色谱纯乙睛。
对照品:人参皂昔Re(
批号=110754-201324,
含量92.7%
，中
国药品生物制品检定所)。
自制西洋参口服液。
2
测定法和结果
2
」色谱条件(液相)
C18
色谱柱(250 X 4.6mm,5 pm)
为色谱柱。
流动相:乙月青为流动相A.0.1%
磷酸溶液为流动相B
。时间(分钟) 流动相A
(乙睛)% 流动相B (0.1%
磷酸溶液)%表1
(T2519—2081—80
25~6020—4080—60
60~9040-*5560—45
9CT10055—6045—40
203nm
为检测波长。
1.0 mL/min
为流速。
10 “L
为进样量。
2.2
对照品溶液的制备 (转下页)
图5 II
级电磁环境背景噪声
3.3
效能下降程度感知
电磁环境是客观存在的，同时其影响是通过特定装备反映
出来的，电磁环境的复杂度评估最终是通过机载敏感设备的效
能下降程度进行感知并最终检验的叫以无线电装备在复杂电
人参皂甙
人参皂甙
中文名称：人参皂甙
英文名称：ginsenoside;GS
结构式：
基本性质：
分子式：C42H72O13
分子量：785.02
密度：1300kg/m3
熔点：315-318。C
来源植物：人参
产地：主产于东北三省，而70%产于吉林省，出自吉林的人参70%出自白山市。
在人参不同部位的含量：
侧根总皂苷（60.5%）》
花蕾总皂苷（15%）》
参叶总皂苷（7.6-12.6）、
人参须根总皂苷（8.5-11.5）》
参皮总皂苷（8.0-8.8）》
人参主根总皂苷（2-7）
人参幼根总皂苷（3%）
种子总皂苷（0.7%）
人参皂甙的提取：（从人参根部）
方案1:
人参根粗粉
用滤纸筒包好，置索氏提取器中
加甲醇加热回流提取，至三氯化锑氯仿饱和溶液反应呈阴性
提取液
减压回收甲醇
浸膏
用10倍量蒸馏水溶解
水溶液
用乙醚在分液漏斗中
振摇脱脂4次
乙醚液（脂类） 水层
用水饱和的正丁醇萃取6次，
合并
正丁醇液
减压回收正丁醇，蒸干
残留物（总皂苷粗品）
方案2:
人参根粗粉
用滤纸筒包好，置索氏提取器中，
加10倍量乙醚回流脱脂至无色，
乙醚液（脂类） 残渣
加甲醇加热回流提取至三氯化锑氯仿饱和溶液反应呈阴性
甲醇提取液
减压回收甲醇
浸膏
用10倍量蒸馏水溶解
水溶液
用水饱和的正丁醇萃取6次，合并
正丁醇液
减压回收正丁醇，蒸干
残留物（总皂苷粗品）
人参皂甙的分离和提纯：
方法（1）沉淀法
1份总皂苷粗品
甲醇溶解，倾入约10倍量丙酮，
不断搅拌，析出
黄白色沉淀 母液
过滤 回收溶剂，用少量甲醇溶解，再倾入约10倍量丙酮
总皂苷
黄白色沉淀
过滤
总皂苷
合并，减压60℃下真空干燥，称重计算收率
HPLC测定活力源片中人参皂苷Rg1～Re含量
２０１３年１１月 第１５卷第１１期 中国现代中药Ｍｏｄｅｍ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｎｏｖ．２０１３ Ｖｏ１．１５ Ｎｏ．１１
ＨＰＬＣ测定活力源片中人参皂苷Ｒｇ１ Ｒｅ含量
崔旭光 ，杜立娟，徐茂伟，陈艳红
（吉林华康药业股份有限公司，吉林 敦化 １３３７００）
［摘要］ 目的：建立高效液相色谱法测定活力源片中人参皂苷Ｒｇ。、Ｒｅ的含量。方法：采用Ａｇｉｌｅｎｔ ＴＣ Ｃ 。 （２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ ｍ），流动相：乙腈一水（２０：８０）；流速：０．８ ｍＬ・ｍｉｎ～，检测波长：２０３ ｎｍ。结果：人参皂 苷Ｒｇ 在０．１２０—２．０４０ Ｉ．Ｌｇ呈良好线性关系，ｒ：０．９９９ ６，平均回收率为９７．１％，ＲＳＤ：０．７％（ｎ＝６）；人参皂苷Ｒｅ 在０．２９７—５．０４９ ｔ．ｚｇ呈良好线性关系，ｒ＝０．９９９ ８，平均回收率为９７．４％，ＲＳＤ＝０．３％（／／，＝６）。结论：本方法分离 效果好、准确、重复性好，可用于该制剂的质量控制。 ［关键词］ 高效液相色谱法；人参皂苷Ｒｇ．；人参皂苷Ｒｅ；活力源片
活力源片收载于《卫生部药品标准》 Ｊ，是由
人参茎叶皂苷、黄芪、麦冬等５味中药组成的复方 制剂，具有益气养阴、强心益肾的功效。方中人参
茎叶皂苷为君药，原方法采用高效液相色谱测定其
中人参皂苷Ｒｅ（Ｃ Ｈ Ｏ ）含量，要求每片不得少 于５．０ ｍｇ。为了提高对产品质量的控制，作者采用
高效液相色谱法同时测定人参皂苷Ｒｅ和Ｒｇ 含量。
１仪器与试药
ＬＣ一２０１０ Ａ ＨＴ高效液相色谱仪、ＬＣ ｓｏｌｕｔｉｏｎ色
谱工作站；Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｂｉｔ２１１Ｄ电子天平；ＣＱＸ２５－０６ 型超声波清洗器（２５０ｗ，５０ ｋＨｚ）。
人参皂苷Ｒｇ 对照品（批号：１１０７０３－２００３２２）、
人参皂苷Ｒｅ对照品（批号：１１０７５４－２００４２１），含量 测定用，购于中国食品药品检定研究院。活力源片
HPLC法测定我院制剂益康胶囊中人参皂苷含量
内蒙古中医药药物定性与定量研究
*宝应县中医院（225800）2012年5月23日收稿摘要：目的：通过高效液相色谱法（HPLC）检测我院制剂益康胶囊中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re以及人参皂苷Rb1的含量。方法：使用ODSC18色谱柱，在流动相流速均为1.0ml/min，检测波长均为203nm，以乙腈:0.05%磷酸作为流动相检测益康胶囊中Rg1和Re的含量，以乙腈:水作为流动相检测益康胶囊中Rb1的含量。结果：人参皂苷Rg1、Re以及Rb1分别在进样量为6.82～34.31μg、1.29～6.29μg以及6.19～30.77μg范围内呈良好线行关系。结论：HPLC法检测益康胶囊中人参皂苷Rg1、Re以及Rb1具有操作简单快速、准确性高以及重复性好等优点，很适用于益康胶囊中各种人参皂苷的含量检测，可作为临床益康胶囊质量检测的标准。关键词：HPLC；人参皂苷Rg1；人参皂苷Re；人参皂苷Rb1中图分类号：R284.1文献标识码：B文章编号：1006-0979（2012）14-0032-02ＨＰＬＣ法测定我院制剂益康胶囊中人参皂苷的含量戴作波*益康胶囊是由人参、紫河车、仙茅、山药、何首乌、灵芝以及生地等13味名贵中药所组成的复方制剂。具有补肾益精，强壮身体之功效，主要用于治疗由气血阴阳不足所导致四肢倦怠、食欲不振、阳痿、早泄、盗汗以及自汗等症状。其中人参是本药的主要有效成分，而人参所含人参皂苷Rg1、人参皂苷Re以及人参皂苷Rb1，对于其发挥功效具有重要作用[1，2]。为了解此三种成分在益康胶囊含量，我院采用HPLC法检测该药中3种成分的含量，以为临床治疗提供参考，现报道如下。1仪器与试药1.1仪器：采用Agilent1200高效液相色谱仪,配有自动进样器、在线脱气机、四元泵、二极管陈列检测器以及ChemStations色谱工作站。1.2试药：人参皂苷Rg1对照品,人参皂苷Re对照品以及人参皂苷Rb1对照品均购自中国药品生物制品检定所。益康胶囊由我院制剂室提供。乙腈为色谱纯,其他试剂均为分析纯。2检测方法2.1色谱条件：使用4.6mm×300mm的ODSC18色谱柱,流动相流速均为1.0ml/min，检测波长均为203nm，柱温为30℃的条件下，以乙腈:0.05%磷酸（19∶82）作为流动相检测益康胶囊中人参皂苷Rg1和Re的含量，以乙腈∶水（34∶67）作为流动相检测益康胶囊中人参皂苷Rb1的含量。进样量：30μl。理论塔板数在4000左右。2.2对照品溶液的配制：分别精密称取人参皂苷Rg1、Re以及Rb1对照品适量，分别加入适量甲醇制成每1ml含1mg的溶液作为储备液；并用甲醇稀释成对照品人参皂苷Rg1浓度为0.16g/L,人参皂苷Re浓度为0.02g/L，人参皂苷Rb1浓度为0.5g/L。2.3供试品溶液的配制：精密称量益康胶囊内容物0.3g，加入40ml氯仿,搅拌20min后取残渣，向其中加50ml甲醇,搅拌20min后浓缩至5ml,加入已处理好的中性氧化铝柱中,用40%甲醇洗脱，蒸干洗脱液所得残渣加水溶解，用20ml水饱和的正丁醇萃取3次，合并正丁醇溶液,用水洗涤3次后蒸干，加10ml甲醇溶液溶解残渣作为供试品溶液。用同样的方法配制阴性对照溶液。3结果3.1线性关系：使用精密移液枪分别吸取上述3种对照品溶液（5、10、15、20、25、30）μl，HPLC测定我院制剂益康胶囊中人参皂苷的含量。注入色谱仪进行测量，按照2.1所述条件平行测量3次,然后以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标作图，进行线性回归分析。回归方程分别为Rg1：Y=415.24X+187.14r=0.998；Re：Y=224.83X+6.89r=0.997；Rb1：Y=253.84X+8.03r=0.998。其结果表明,人参皂苷Rg1、Re以及Rb1分别在进样量为6.82～34.31μg、1.29～6.29μg以及6.19～30.77μg范围内呈良好线行关系。3.2稳定性实验：精密称取供试品溶液10μl，分别于（2、4、8、12）h测定，得RSD分别为0.68%，0.66%，0.84%以及0.78%，表明在12h内该供试品溶液稳定性良好。3.3精密度实验：精密称取供试品溶液10μl，重复进样10次，得Rg1、Re、Rb1的RSD分别为1.69%、1.45%、1.48%。表明高效液相色谱仪器精密度良好。3.4重复性实验：精密称取同一批益康胶囊内容物，分成5份，按照2.3方法制备供试品溶液，检测Rg1、Re、Rb1的平均含量分别为14.28mg/粒、0.77mg/粒、13.21mg/粒，其RSD分别为0.79%、1.51%、0.44%。3.5加样回收率实验：精密称取5份同一批样品，分别加入人参皂苷Rg1、Re、Rb1的对照品，依法检测其回收率，结果见表1。表1回收率检测分析