体内药物分析终极复习资料
1.体内药物分析定义。P1 研究药物及其代谢物在生物体内数量与质量变化规律得方法学科,获得药物在体内吸收、分布、代谢排泄等各种动力参数,药物与大分子得相互作用,代谢产物、代谢途径等信息,对药物评价,为临床合理用药、研发新药等提供科学依据。 2.影响血药浓度得因素(理解)。P3-5 （1）机体因素:包括生理、病理、遗传因素 （2）药物因素:包括剂型因素、药物相互作用 （3）(3)其她因素:大气污染、食品、烟、酒、茶等 药物进入体内后,血液循环为药物体内转运得枢纽。大多数药物只有达到作用部位与受体部位,并达到一定得浓度后,才产生一定得药理作用。多数药物得血药浓度与药理效应呈平行关系,部分药物得血药浓度与药效无明显相关关系。 3.体内药物分析得生物样本及分析对象。P8 生物样本:凡就是体液所到之处,如血液、尿液、唾液、毛发、各种器官、组织、呼出气体等都就是取样对象,还包括细胞悬液,微粒体孵育液、器官灌流液等体外试验中得各种生物介质。 分析对象:母体药物、代谢产物、必要得内源性物质或与之相关得其她药物。 4.体内药物分析得特点 （1）干扰杂质多 （2）被测浓度低 （3）供试样品量少 （4）待测物得易变性 （5）要求较快提供结果 （6）要有一定得仪器设备 （7）工作量大 5.生物样品选择得基本原则。常用得生物样品及其应用特点。P19 选择原则: （1）必须能反映浓度与药效得关系 （2）易于获得 （3）便于处理 （4）根据不同目得要求选取 常用生物样品及应用特点: 血液 优点:较好体现药物浓度与治疗得关系 缺点:(1)损伤性取样,取样量有限制 (2)需要专业人员操作 尿液 优点:(1)非损伤性取样 (2)药物浓度高 (3)收集方便 缺点:(1)浓度变化大,与血药浓度相关性差 (2):不易采集,保存 (3):肾功能不全、婴儿不宜用此法 唾液 优点:(1)非损伤性取样 (2)含蛋白浓度低,易处理 (3)CS/CP较恒定时,可代替血样进行TDM及药物动力学研究 缺点:(1)适用药少 (2)取样量变化大 毛发 优点:(1)取样方便,可重复取样 (2)通过测某特定代谢物区别滥用药、临床药 (3)可获得长期用药信息 缺点:(1)预处理繁杂,干扰多 (2)分析对象含量低,需精密仪器 6.血液样品得采集与制备、P21 采集: 通常用一次性针头插入静脉血管内抽取,取下针头,转移到相应容器,不能用力推压以免血细胞破裂 制备: (1)血浆:多以肝素作抗凝剂,取适量于离心管,旋转使均匀分布于管壁,倾去多余液体, 干燥试管;然后加入血样,离心后取上层黄色液体即可,其量约为全血得50% (2)血清:等血样中血块凝结,在室温25°下凝结速度较慢,可在37°水浴加快血清析出,离心后取上清液即可,其量约为全血得40% (3)全血:在血样中加入含有抗凝剂得试管,轻轻混匀即可。 6. 生物样品得储存。P23-24 （1）冷冻储存 （2）加稳定剂(酶抑制剂、抗氧剂) （3）加防腐剂或调节pH 8.去除蛋白得方法及原理,各种常用得蛋白沉淀剂及其效果。P27-28 蛋白质沉淀法: （1）生成不溶性盐沉淀,低于蛋白质等电点得pH时,酸根与带正电荷得蛋白质形成不溶性盐沉淀;高于蛋白质等电点pH时,金属离子与蛋白质中带负电荷得羧基形成不溶性盐沉淀。 （2）盐析与脱水: 与水混溶得有机溶剂可以与蛋白质争夺水化膜,并使水得介电常数减少,从而影响蛋白质得解离程度及所带电荷数量,增加蛋白质颗粒间得引力使蛋白质沉淀。 组织得酶消化法: 蛋白水解酶可在温与条件下有效水解生物蛋白,将与蛋白质结合得药物释放出来 9. 常用得缀合物水解方法有哪些？P28 （1）酸水解 （2）酶水解 （3）溶剂解 10.什么样品需要进行有机破坏处理？P29 微量元素多数以结合得形式存在于有机物中,在分析与测定这些元素时,需将这些元素从有机物中游离出来,或者将有机物破坏后测定,根据被测得性质,选则合适得有机物破坏法,使样品中绝大部分有机物破坏。某些元素在破坏有机物得过程中无丝毫损失,又能在破坏有机物后测定就是何物干扰。 11.游离药物与结合药物分析得方法有哪些？其原理就是什么？P29-30 平衡透析法、超滤法、超离心法、凝胶过滤法 前两法原理:利用半透膜只允许小分子药物通过,而不允许大分子药物通过得原理使游离性与结合性药物分离 12.液液提取法得原理、影响因素及提取技术。P30-33 原理:药物与干扰成分在互不相容得两相溶剂中得分配系数不同,选择性地提取生物基质中得药物 影响因素:水相pH。提取溶剂种类、离子强度 提取技术:通常在戴塞得试管中进行,多半进行一次提取,用酸碱回提时也只就是一次,不考虑提取尽药物 13.液固提取法得原理,固相萃取得主要步骤,及固相萃取得影响因素。P33-35 原理:将样品液通过合适得固相小柱,利用药物与杂质对固相小柱亲与力得差别,用适当溶剂冲洗、洗脱,使药物得到净化 步骤:(1)固相柱选择(2)固相柱处理(3)样品液上样(4)分离净化(5)待测物洗脱 提取率、选择性得影响因素:(1)流速(2)样品装载量(3)固相柱使用要求(4)样品上柱前得处理 14.提取溶剂得蒸发方法。P36 抽真空挥发或直接通入气体使溶剂挥发 15.柱切换技术得原理。见 就是一种在线固相分离技术: 选用一个3～5cm长得短柱,用低溶剂强度得预处理流动相使生物样品净化,富集 切换阀后,分析流动相将组分带入分析柱分离测定 测定结束后仪器自动恢复开始状态,准备下次进样 16.微透析技术得定义。P45 (MD)就是一种膜分离技术,利用膜透析原理,对细胞液进行流动性连续采样,在不破坏生物体内环境得情况下,直接插到生物活体内采样进行原位测定。 17.基本概念P51-52 生物介质:指一种生物来源得物质,能够以可重复方式采集与处理。 标准物质:用于制备标准样品与QC样品得待测物得参比标准,结构上可以就是物质本身、其游离碱、酸、盐、酯。 标准样品:在空白介质中家人已知量待测物标准物质制成得样品,用于建立标准曲线,计算质控样品与未知样品中待测物浓度。 质控样品:在空白生物介质中加入已知量待测物标准物质制成得样品,监测生物分析方法得重复性与评价每一分析批中未知样品分析结果得完整性与正确性。 介质效应:样品中存在除待测物以外得其她干扰物质,对待测物响应值造成直接或间接影响 分析批:包括待测样品、适当数目得标准样品与QC样品得完整系列。 18.特异性得定义及考察方法。P52 定义:指样品中存在干扰成分得情况下分析方法能准确、专一测定分析物得能力。 考察方法:至少取六个不同个体空白样品,采用拟定得方法进行测定,所得结果接近于定量限浓度得模拟样品与用药后得实际生物样品比较,以证明内源性物质、相应得代谢物、降解产物及其她共服药物不干扰样品测定 19.标准曲线与线性范围,结合实验进行复习。P52-54 20.定量下限得定义、考察方法及要求。 定义:指符合准确度、精密度要求得生物样品中药物得最低定量浓度,其反映了方法得灵敏度。 考察方法:按标准曲线项下方法制备样品,至少制备5个标准样品,按照拟定方法进行测定,考察精密度与准确度。 要求:LLOQ得准确度应在真实浓度得80％～120％范围内;精密度得RSD应小于20％; LLOQ限度要求:至少能满足测定3－5个半衰期后生物样品中得药物浓度(或能检测出Cmax得1/10~1/20时得药物浓度),信噪比(S/N)一般大于5。 21 精密度准确度得定义、表示方法、考察方法与要求。 准确度:指用该方法测得得生物样品中待测药物浓度与其真实浓度得接近程度。 表示方法:相对回收率(RR)或相对误差(RE) 要求:RR 85％～115％(LLOQ附近80％～120％) RE ±15％(LLOQ附近±20％) 精密度:每次测定结果与多次测定得平均值得偏离程度。表示该分析方法得可重复性,可反映分析方法得可操作性。 表示方法:相对标准偏差(RSD) 要求: RSD一般应小于15％ LOQ附近RSD应小于20％。 22. 需要进行哪些稳定性试验？ （1）短期室温稳定性 （2）长期储存稳定性 （3）冻融稳定性 （4）储备液稳定性 （5）待测溶液稳定性 （6）样品处理过程稳定性 23. 提取回收率得定义、评价指标与限度要求。 指从生物样本基质中回收得到分析物质得响应值与标准物质产生得响应值得百分比,用于评价样品预处理方法。 取待测药物对准品加入空白基质中,制备高、中、低3个浓度QC样品,每个浓度5个样品按样品处理方法处理,测定。 另取等量相同浓度得标准溶液,不经提取处理,直接测定。 内标(1个浓度5个QC样品)也需进行提取回收率试验。 提取回收率限度要求:一般应≥50％且恒定;高、中浓度得RSD应≤15%;低浓度得RSD应≤20％。 内标得提取回收率应与被测物一致或相近,一般相差不超过±10% 24. 分析方法得质量控制方法及限度要求。 每个分析批生物样品测定时应建立新得标准曲线,并随行测定高、中、低3个浓度得QC样品,每个浓度至少双样品,QC样品数不得少于未知样品数得5%,且不得少于6个,并均匀分布在未知样品测试顺序中。 限度要求:偏差一般应小于15%,低浓度点小于20%,最多允许33%得质控样品结果超限,且不得均在同一浓度 25. 血浆蛋白结合率得定义,测定常用得5种方法,平衡透析法原理。(第一组) 定义:药物血浆蛋白结合率就是药物与血浆蛋白结合得量占药物总浓度得百分率,就是药物代谢动力学得重要参数 常用方法:(1)平衡透析法(2)超滤法)(3)超速离心法(4)光谱法(5)色谱法 平衡透析法原理:半透膜与蛋白质易产生体积迁移效应,对于带电得蛋白质可能产生Gibbs-Donna 效应与以非特异性得透析设备表面得药物吸附效应 26. 在盐酸哌甲酯稳定性考察实验中,采取得提高稳定性得方法有哪些？分别从什么方面起到提高稳定性得作用？(第三组) 28. 基质效应得定义,来源,评定方法及消除方法。(第四组) 基质效应:来源于生物样品中得内源组分与样品处理后引入得杂质,常对样品得测定有显著得干扰,并影响测定结果得稳定性,这些影响与干扰被称为基质效应。 来源:内源性杂质指生物样品中存在得有机与无机成分,经前处理后仍存在于提取液中。
体内药物分析总结 药物分析专业专用
首过效应：药物经肠道吸收首次进入肝脏时，有些药物可被肠液或肠道上的肠菌酶破坏，或在肝内受到微粒体混合功能氧化酶代谢，使进入体循环的药量减少。
肠肝循环：药物经胃肠吸收，经胆汁分泌进入小肠或药物经吸收后在肝转化为代谢物，经胆汁分泌排入小肠，在小肠处重吸收的过程。
特征为“双吸收峰”。
平衡透析法：将含药物的血浆与透析液放置于半透膜两侧，在一定温度下搅拌使其平衡。
半透膜能阻挡血浆蛋白和结合药物的血浆蛋白，而游离药物自由通过半透膜并达平衡。
优点：平衡状态下，结果真实可靠缺点：受稀释作用影响，费时超滤法：利用离心力迫使药物通过半透膜，同时血浆中水分也不断被滤除，使样品管内血浆样品不断浓缩，打破了药物与血浆蛋白结合的动态平衡。
优点：设备简单，时间短，收集到足够的超滤液可直接进样缺点：非平衡状态下测定。
液液萃取法：基于被测组分在不混溶的两种溶剂中的分配系数不同而得到分离。
固相萃取：SPE是一种吸附剂萃取，样品通过填充吸附剂的一次性萃取柱，分析物和杂质被保留在柱上，然后分别用选择性溶剂去除杂质，洗脱出分析物，从而达到分离的目的。
萃取方法选择：1较亲脂药物最好用烷基硅胶键合相省时，碱性药物用大孔树脂为佳。
2较亲水且具有酸碱性，可电离，采用离子交换树脂；3较亲水但不能解离，不易萃取，沉淀蛋白后直接进样柱切换技术：指由阀来改变流动相走向与流动相系统,从而使洗脱液在一特定时间内从预处理柱进入分析柱的技术。
衍生化技术：在色谱过程中用特殊的化学试剂，借助化学反应给样品化合物接上某个特殊基因，使其转变为相应衍生物之后进行检测的方法。
目的：1使极性药物变成非极性易挥发药物，使其具有能被分离的性质。
2增加药物的稳定性。
3提高对光学异构体的分离能力。
顶空气相色谱法：在封闭恒温系统中气相和凝聚相（液相或固相）存在着分配平衡，因此气相的组成能反应凝聚相的组成，用GC法来分析平衡体系中气体的方法。
分为静态顶空气相色谱法和动态顶空气相色谱法。
体内药物--复习提纲
1.体内药物分析定义。
P3➢体内药物分析也称体液药物分析、生物药物分析，是一门新兴的学科。
➢通过分析的手段了解药物在体内的质和量的变化，获得各种药代动力学的参数和药物代谢途径与转化方式的信息。
➢体内药物分析学是一门研究生物机体中药物及其代谢物和内源性物质的质与量的变化规律的分析方法学。
2.体内药物分析的对象。
P4-7➢研究对象—人体、动物体；细胞模型、组织匀浆、微粒体、离体器官等➢生物样本—血液、尿液、唾液、毛发、汗液、乳汁、泪液、类便、羊水、各种器官、组织，以及呼出的气体；细胞悬液、微粒体孵育液、器宫灌流液➢分析对象—母体药物、代谢产物、必要的内源性物质或与之相关的其他药物3.体内药物分析的特点。
P8-9➢生物样品基质复杂：生物样品中的内源性或外源性杂质，结合的、游离的原型药物、代谢物往往干扰分析测定，因此样品一般均需经过分离，净化后才能进行分析，以适应分析方法的专属性与耐用性要求。
➢被测物浓度低：ug/ml~ug/ml，个体之间、连续取样点之间的浓度变化幅度大➢样品量少：采集量受到限制，尤其在连续取样测定过程中，不能再度获得完全相同的样品➢待测物的易变性：一些药酶离体后仍作用于待测物，一些药物不稳定，离体后即发生降解➢分析方法要求高：临床用药监护，中毒解救等➢实验室仪器设备要求高：样品冷贮、萃取、离心分离、浓集等必要的设备，LC-MS,GC-MS,LC-NMR,HPLC,GC,HPCE，荧光偏振免疫分析仪等分析仪器➢工作量大，数据处理复杂：药代动力学研究中需要测定数百个样品，有时数据的处理和阐明比较困难。
4.血液样品的采集和制备。
P15-18➢血液样品的采集：（1）从动脉或心脏取血，用于动物实验；（2）静脉采血：直接将注射器针头插入静脉血管内抽取，抽取的血液移至试管或其他容器时，注意不要用力压出，最好取针头后轻轻推出。
以防血细胞破裂使血浆或血清带有血红蛋白。
（每次1~5ml，动物实验时，采血量不宜超过动物总血量的15%～20%）（3）从毛细管采血：成人手指或耳垂取血，小儿多从脚趾取血。
药物分析复习要点
药物分析复习要点绪论1、药物分析的研究对象：化学结构明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量的控制方法，也研究中药制剂和生物制品及其制剂有代表性的质量控制方法。
2、国家药品标准：国务院药品监督管理部门颁布的《中华人民共和国药典》和药品标准。
3、药典是国家监督管理药品质量的法定技术标准。
《中华人民共和国药典》为我国药典的全称，简称为《中国药典》，用英文缩写为Ch.P，目前使用的为2005年版。
美国药典简写为USP,英国药典简写为BP，日本药典简写为JP。
4、药品质量管理规范。
包括药品非临床研究质量管理规范（GLP），药品生产质量管理规范（GMP），药品经营质量管理规范（GSP）和药品临床试验质量管理规范（GCP）第一章药典概况1、《中国药典》（05年版）为建国后第八版药典。
本版药典共分为一部，二部和三部。
药典一部收载药材及饮片、植物油和提取物、成方制剂和单味制剂等；药典二部分为两部分，第一部分收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品，第二部分收载药用辅料；药典三部收载生物制品。
2、中国药典的内容。
中国药典的内容分为凡例、正文、附录和索引四部分。
凡例中重点的内容有：（1）标准品与对照品的区别。
（2）精确度：药典规定取样量的准确度和试验精密度。
试验中供试品与试药等“称重”或“量取“的量均以阿拉伯数码表示，其精确度可根据数值的有效数位确定。
如称取“0.1g”系指称取重量可为0.06～0.14g；称取“2.00g”系指称取重量可为1.995～2.005g；称取“2.0g”系指称取重量可为1.95～2.05g.。
试验中的“空白试验”，系指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法测得的结果；含量测定中的“并将滴定的结果用空白试验校正”，系指按供试品所耗滴定液的量与空白试验中所耗滴定液的量之差进行计算。
附录的组成：包括制剂通则、通用检测方法和指导原则。
3、药品检验工作的基本程序：药品检验工作的基本程序一般分为取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告。
体内药物分析
体内药物分析体内药物分析:药物分析的的重要分支，是研究生物体中药物及其代谢物和内源性物质的质与量变化规律的分析方法学。
体内药物分析的特点◆生物样品基质复杂◆被测物浓度低◆分析方法要求高◆实验室仪器设备要求高◆测定目标与数据处理复杂体内药物分析方法的要求◆高灵敏度检测方法的应用◆建立高选择性、高专属性的分离方法◆建立的分析方法满足于分析目的相适应的精密度和准确度要求成分复杂、干扰众多——要求方法选择性高采样量小，浓度很低——要求方法灵敏度高原料药：容量分析为主制剂：仪器分析为主体内药物：高灵敏度；高选择性的方法第二章生物样品指含待测物质的生物基质最常见的生物基质为血液，最常用的生物样品是血浆或血清血样采集的时间、方式：血样的应用：血样包括全血、血浆、血清全血不能作为作用部位药物浓度的可靠指标，通常指测定血浆或血清中的药物的浓度。
当血浆中含有的抗凝剂对药物浓度有干扰时，使用血清样品血样制备的差异：尿液：尿液中必须加入防腐剂，非损伤性采样方法唾液：组织：头发：微量元素的测定生物样品的贮存：◆血浆和血清：采血后及时分离（2h），短期4℃，长期-20℃◆冷冻是最常用的生物保存方法◆生物样品总的原则：临时解冻，解冻的样品一次测完，不能反复冷冻→解冻→冷冻分析样品制备的目的：◆使药物从缀合物或结合物中释放，测定总浓度◆使样品纯化与药物组分富集◆满足测定方法对分析样品的要求◆保护仪器性能及改善分析条件有机破坏法主要应用于头发样品中金属元素的测定去除蛋白质法去除蛋白质目的：溶剂解法：◆常用溶剂——甲醇、丙醇◆原理——◆操作——盐析法：中性盐（置换蛋白结合的水，使蛋白脱水而沉淀）强酸沉淀法：10％三氯醋酸、6％高氯酸超滤法：不需加热，不需添加化学试剂、操作条件温和，没有相态变化，破坏性小，能耗少，工艺流程短。
酶水解法：避免酸碱、高温降解，改善回收率，无乳化，减少净化操作纯化与浓集应用范围：液－液提取法（LLE）大多数药物都是脂溶性，内源性物质基本上都是水溶性，当用有机溶剂萃取时，药物被萃取出来而内源性物质被除去，因此采用有机溶剂萃取法能够达到纯化目的优点：选择性；药物能与多数内源性物质分离缺点：乳化、有毒、不环保、不自动，对极性大的化合物的萃取效率低固相萃取(SPE)◆原理：根据液相萃取的原理，利用液相中溶质与吸附剂间的选择性吸附与洗脱原理。
药物分析总结——执业药师考试复习资料
药物分析总结——执业药师考试复习资料鉴别一、与三氯化铁显色的1、阿司匹林（紫堇色）2、丙磺舒（米黄色）3、对乙酰氨基酚（蓝紫色）4、肾上腺素（翠绿色碱化后紫红色醌类）5、盐酸吗啡（铁氰化钾+三氯化铁显普鲁士蓝）6、罂粟酸（红色）7、雌二醇（加硫酸黄绿色荧光—加三氯化铁草绿色—稀释变红色）8、头孢羟氨苄，及其片剂、胶囊剂（黄棕色）9、盐酸四环素（加硫酸显紫色再加三氯化铁显红棕色）二、重氮化偶合反应显色1、盐酸普鲁卡因（橙色或猩红色沉淀）2、对乙酰氨基酚（受热水解后显红色）3、磺胺甲恶唑（橙黄色至猩红色沉淀）4、磺胺嘧啶（橙黄色至猩红色沉淀）5、苯并二氮杂卓类部分药物除书上的地西泮（橙红色沉淀）三、与铜盐反应显色1、苯巴比妥（铜吡啶：显紫色或生成紫色沉淀）2、司可巴比妥钠（铜吡啶：显紫色或生成紫色沉淀）3、硫喷妥钠（铜吡啶：绿色沉淀）4、利多卡因（硫酸铜：蓝紫色配合物；转溶于氯仿显黄色）5、磺胺甲恶唑（硫酸铜：草绿色沉淀）6、磺胺嘧啶（硫酸铜：黄绿色，放置后变紫色）7、磺胺异恶唑（硫酸铜：浅棕色，放置后暗绿色絮状沉淀）8、盐酸麻黄碱（硫酸铜：双缩脲反应蓝紫色，加乙醚，乙醚层紫红色，水层蓝色）四、与银盐反应显色1、苯巴比妥（硝酸银：白色沉淀）2、司可巴比妥钠（硝酸银：白色沉淀）3、硫喷妥钠（硝酸银：白色沉淀）4、异烟肼（氨制硝酸银：生成单质银，银镜反应）5、盐酸氯丙嗪（硝酸银：白色沉淀）6、磷酸可待因（硝酸银：黄色沉淀）7、维生素C（硝酸银：生成单质银，黑色沉淀）五、硝酸钠---硫酸反应显色1、苯巴比妥（橙黄色产物，随即转为橙红色。
）六、甲醛---硫酸反应1、苯巴比妥（玫瑰红色）2、盐酸吗啡（Marquis紫菫色）七、与碘反应1、司可巴比妥（碘的棕黄色消失）2、甲氧苄啶（棕褐色沉淀）八、与醋酸铅反应1、硫喷妥钠（白色加热后黑色）1、硫喷妥钠（鲜黄色火焰）2、司可巴比妥钠（鲜黄色火焰）3、青霉素钠（鲜黄色火焰）4、青霉素钾（紫色火焰）十、衍生物测熔点1、司可巴比妥钠2、硫喷妥钠3、氟康唑（直接测熔点）4、磷酸可待因十一、氧化显色1、肾上腺素（过氧化氢：血红色）2、盐酸氯丙嗪（硫酸、硝酸：红色渐变淡黄色）3、阿扑吗啡（碱性碘溶液：绿色溶于乙醚，乙醚层宝石红色，水层绿色）十二、氢氧化钠反应1、硝苯地平（橙红色）十三、硫酸反应1、地西泮（紫外灯下显黄绿色荧光）2、硫酸奎宁（蓝色荧光）十四、碘化铋钾或碘化汞钾（生物碱的沉淀试剂）1、地西泮（碘化铋钾：橙红色沉淀）2、维生素B1（碘化汞钾：黄色沉淀）十五、茜素氟蓝和硝酸亚铈（有机氟）1、氟康唑（蓝紫色水溶性配合物）2、左氧氟沙星（也可以）3、醋酸地塞米松（蓝紫色）十六、托烷生物碱反应Vitali1、硫酸阿托品（水解发烟硝酸黄色加醇制氢氧化钾深紫色醌型产物）十七、钼硫酸反应Frohde1、盐酸吗啡（紫色—蓝色—棕绿色）十八、亚硒酸反应1、磷酸可待因（绿色—蓝色）十九、氯化铵镁1、磷酸可待因（白色结晶）二十、钼酸铵、硝酸1、磷酸可待因（黄色沉淀）二十一、硝酸溶液1、维生素E（无水乙醇显橙红色）二十二、緑奎宁反应thalleiaqllin1、硫酸奎宁（溴和氨溶液，显翠绿色）二十三、斐林试剂（酒石酸铜）1、醋酸地塞米松（红色沉淀）2、葡萄糖（红色沉淀）3、右旋糖酐40（淡蓝色---棕色沉淀）4、维生素C，（红色沉淀）5、头孢羟氨苄颗粒（碱性酒石酸铜，墨绿色）二十四、亚硝基铁氰化钠1、黄体酮（碳酸钠或醋酸铵蓝紫色）1、黄体酮（黄色）典型，中国药典列举，单项选黄体酮2、丙酸睾酮3、醋酸地塞米松二十六、硫色素反应1、维生素B1（铁氰化钾加正丁醇显蓝色荧光，加酸消失加碱显色）二十七、二氯靛酚钠反应1、维生素C（使颜色消失）二十八、氢氧化钾甲醇溶液1、维生素K1（绿色—热水浴深紫色---放置红棕色）含量测定一、高效液相色谱HPLC1、芳酸类：阿司匹林片、阿司匹林肠溶片、布洛芬片、布洛芬缓释胶囊、丙磺舒原2、巴比妥类：苯巴比妥片3、胺类：盐酸普鲁卡因注射液、盐酸利多卡因（原、制）、盐酸肾上腺素注射液对乙酰氨基酚（泡腾片、注射剂、滴剂、凝胶剂）4、磺胺类：复方磺胺甲恶唑片、磺胺嘧啶片5、杂环类：异烟肼（原、制）、左氧氟沙星（原、制）、地西泮片、地西泮注射液、氟康唑片6、生物碱类：盐酸麻黄碱注射液、盐酸麻黄碱滴鼻液、磷酸可待因片7、甾体激素类：醋酸地塞米松原、醋酸地塞米松片、丙酸睾酮原、黄体酮原雌二醇原8、维生素类：维生素K1原、维生素K1注射液9、抗生素类：青霉素钠（钾）（原、制）、阿莫西林（原、制包括片、胶囊、颗粒、干混悬剂）、头孢羟氨苄（原，制片、胶囊、颗粒）、盐酸四环素（原、制）、阿奇霉素（原、制）二、酸碱滴定1、芳酸类：阿司匹林原、布洛芬原2、杂环类：磷酸可待因糖浆三、银量法1、巴比妥类：苯巴比妥原（电位法）、四、溴量法1、巴比妥类：司可巴比妥钠五、紫外分光光度法1、巴比妥类：注射用硫喷妥钠2、胺类：对乙酰氨基酚原、对乙酰氨基酚（普通片）3、杂环类：盐酸氯丙嗪片、盐酸氯丙嗪注射液、氟康唑胶囊4、生物碱类：硫酸阿托品片、硫酸阿托品注射液、盐酸吗啡片5、甾体激素类：醋酸地塞米松注射液（四氮唑比色法）6、维生素类：维生素B1片，维生素B1注射剂六、非水滴定（高氯酸）1、胺类：肾上腺素原2、杂环类：盐酸氯丙嗪原、地西泮原、氟康唑原3、生物碱类：盐酸麻黄碱原、硫酸阿托品原、盐酸吗啡原、磷酸可待因原磷酸可待因注射液、硫酸奎宁原4、维生素类：维生素B1原七、亚硝酸钠滴定法（永停法）2、磺胺类：磺胺甲恶唑原，磺胺甲恶唑片、磺胺嘧啶原八、铈量法（邻二氮菲）1、杂环类：硝苯地平原九、碘量法（淀粉指示剂）1、维生素类：维生素C原，维生素C片，维生素C注射液十、气相色谱1、维生素类：维生素E（原、制）十一、抗生素微生物检定法1、抗生素类：硫酸庆大霉素（原制）十二、旋光度1、糖类药物：葡萄糖注射液右旋糖酐40氯化钠注射液检查溶出度一、用紫外分光光度法：阿司匹林片80、苯巴比妥片75、对乙酰氨基酚片80、磺胺嘧啶片70、左氧氟沙星片80、地西泮片75、氟康唑片80，氟康唑胶囊80，盐酸吗啡片70、醋酸地塞米松片70，头孢羟氨苄片、胶囊80二、用高效液相色谱：布洛芬片70，复方磺胺甲恶唑片70，阿奇霉素片、分散片、胶囊75，检查释放度一、用紫外分光光度法：阿司匹林肠溶片10·70，硫酸庆大霉素缓释片二、用高效液相色谱：布洛芬缓释胶囊、雌二醇缓释贴片【例题】。
第05章 体内药物分析1
洗脱——用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。
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亲水型填料
用作SPE的亲水型填料有硅藻土、硅胶、棉 纤维等，其原理为分配作用。填料为支持物，水 基质中极性强的成分与填料结合牢固，流动相为 与水不相混溶的有机溶剂，较亲脂的药物易分布 于流动相，从而达到萃取的目的。
亲水型填料SPE有较高的萃取回收率（大于 80%），但洗脱剂用量较大（一般大于5ml）， 无浓集作用，萃取液较干净。
长期保存，可―20 ℃冷冻，不要反复冻融。 小技巧：按测定时需要的体积分装一支！
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（二）有时，还应考虑加入稳定剂：
酶抑制剂：一些酯类药物，如普鲁卡因、阿糖 胞苷，易受血浆酯酶作用而发生水解，则应在采样 后立即加入酶抑制剂如氟化钠等。
抗氧化剂：一些易氧化的药物，可加入维生素C 或其它抗氧化剂。如血浆中儿茶酚类药物常规保存 仅4周，若加入适量VC，则能保存10周。
（1）溶剂的选择与纯度要求 纯度AR以上 ①了解药物与溶剂的化学结构与性质，按相似相 溶原则选用②对药物的未电离分子可溶，而对电 离形式的分子不溶（光谱分析法）③沸点低、易 挥发、浓集④与水不相混溶⑤无毒，不易燃烧⑥ 不易形成乳化（氯仿易乳化，毒性大）⑦具有较 高的化学稳定性和惰性⑧不影响紫外测定 表5-1 毒性大的尽量不用
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缺点： 唾液是各腺体分泌的的混合液体，其 组成发生经时变动。 S/P只有少数药物是恒定值。 蛋白结合率较高的药物，药物在唾液 中的浓度低。 对有些患者（昏迷）不能采集唾液样 品。
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二、生物样品的贮存与处理
（一） 冷藏或冷冻 采样后除立即分析外，为防止药物发生变 化，应： 短期保存，可 4 ℃冷藏
传统萃取方式回收率低、样品用 量大、繁琐费时、溶剂用量大、溶剂 毒性大、易乳化、不能自动化操作
药学考试资料归纳-体内药物检测
药学考试资料归纳-体内药物检测药学虽然是基础学科, 但是很多学员都觉得药学知识点特别多, 不好复习。
今天就带着大家总结归纳一下药学知识点：体内药物检测, 以便大家更好地记忆。
一、体内样品的种类1.血样血样包括全血、血浆和血清, 它们是最为常用的体内样品。
血药浓度监测, 除特别说明是全血外, 通常都是指血浆或血清中药物浓度的测定。
当药物在体内达到稳定状态时, 血浆中药物的浓度能够反映药物在靶器官的状况。
因而, 血浆药物浓度可作为体内药物浓度的可靠指标。
(1)血样(全血)的采集动物实验时, 可直接从静脉、动脉或心脏取血。
全血采集后置含有抗凝剂(例如：肝素、EDTA、草酸盐、枸橼酸盐等)的试管中, 混合均匀, 即得。
血浆或血清由采集的全血制备。
(2)血浆的制备将采集的全血置含有抗凝剂的离心管中, 混匀后, 以约1000 g离心力离心5～10分钟, 分取上清液即为血浆, 血浆量约占全血量的50%～60%。
(3)血清的制备将采集的全血置不含抗凝剂的试管中, 在室温或37℃下放置0.5～1小时, 待血液凝固后, 再以约1000 g离心力离心5～10分钟, 分取上清液即为血清, 血清量约占全血量的20%～40%。
2.尿液尿液药物浓度测定的目的通常与血液或唾液样品的测定目的不同, 主要用于药物尿液累积排泄量、尿清除率或生物利用度的研究, 以及药物代谢物及其代谢途径、类型和速率等的研究。
在临床上, 亦可推断患者是否违反医嘱用药。
二、体内样品的测定法1.免疫分析法免疫分析法是基于抗体与抗原或半抗原之间的高选择性竞争反应而建立的一种生物化学分析法。
具有很高的选择性和很低的检出限, 可以应用于测定各种抗原、半抗原或抗体。
免疫分析法分为放射免疫法和荧光免疫法、发光免疫法、酶免疫法及电化学免疫法等非放射免疫法。
2.色谱分析法色谱分析法包括：气相色谱法(GC)、有效液相色谱法(HPLC)和色谱-质谱联用法(GC-MS、LC-MS)等, 这些方法适用于体内复杂样品中微量药物的专属准确定量。
药物分析期末复习资料
药分期末复习（仅供参考）题型及分值一，写出英文缩写的全称、中文10个*2共20分二，单词、词组的英汉互译5个*2共10分三，问答计算（in English）5个*4共20分四，单选20个*1共20分五，名词解释10个*2共20分六，计算2个*5共10分一，写出英文缩写的全称、中文10个*2共20分GLP (Good Laboratory Practice )药物非临床研究质量管理规范GMP (Good Manufacture Practice )药品生产质量管理规范GSP (Good Supply Practice)药品经营质量管理规范GCP (Good Clinical Practice)药物临床试验质量管理规范QA(Quality Assurance)质量保证QC（Quality Control) 质量控制UV（Ultraviolet Spectrophotometry）紫外光谱法IR(Infrared Spectrophotometry)红外光谱法TLC（Thin layer Spectrophotometry)薄层色谱法HPLC(High Performance Liquid Chromatography)高效液相色谱法GC(Gas Chromatography)气相色谱法PC（Paper Chromatography)纸色谱法FID(Flame Ionisation Detector)氢火焰离子化检测器FDA(Food and Drug Administration)食品药品监督管理局SD(Standard Deviation)标准偏差RSD(Relative Standard Deviation)相对标准偏差LOD(Limit of Detection)检测限LOQ(Limit of Quantitation)定量限Chp(Pharmacopoeia of The People’s Republic of China)中国药典USP (United States Pharmacopoeia)美国药典NF（National Formulary）美国国家处方集BP(British Pharmacopoeia)英国药典JP（Japanese Pharmacopoeia)日本药局方二，单词、词组的英汉互译5个*2共10分Linearity and Range线性和范围Repeatability and reproducibility 可重复性和可重现性Accuracy and Precision准确度和精密度Standard Operation Procedure（SOP）标准操作程序Non-aqueous titrations非水滴定V oid volume死体积Capacity factor容量因子Column efficiency（column performance）柱效Resolution分离度、分辨率System suitability 系统适应性试验Theoretical plates 理论塔板数Peak symmetry 峰对称性Peak retention times峰保留时间Mobile phase流动相Stationary phase 固定相Carrier gas载气Pharmaceutical analysis 药物分析Titration滴定Standard solution标准溶液Heavy metal重金属Loss on drying干燥失重Selectivity选择性Ruggedness（or robustness）耐用度Analytical blank空白分析Sensitivity灵敏度三，问答计算（in English）5个*4共20分1 Accuracy：The closeness of the assay result obtained by the assay method to the true value How？Recovery studies2Precision：The degree of agreement among individual assay results when the assay method is applied repeatedly to multiple sampling of a homogeneous sampleHow？relative standard deviation (RSD) or coefficient of variation (CV)3 LOD: The smallest amount of an analyte which can be detected by a particular method.4 Range：The range of the assay method is the interval between the upper and lower levels (inclusive) of analyte that have been determined.5Ruggedness（or robustness）：The degree of the reproducibility of the assay results obtained by the analysis of the same sample under a variety of normal test conditions6 Selectivity (or specificity)：The selectivity of a method is a measure of how capable it is of measuring the analyte in the presence of other compounds contained in the sample.7 Sensitivity：The sensitivity of method indicates how respondsive it is to a small change in the concentration of an analyte.8 indicator:An indicator is a weak acid or base that changes colour between its ionized and un-ionised forms.9 What are primary standards?Primary standards are stable chemical compounds that are available in high purity and which can be used to standardise the standard solutions used in titrations.10 What is Beer-lambet law?A=ECLA is the absorbance.E is the extinction coefficient of the analyte.C is the concentration of the analyte.L is the thickness of the solution11What are the Components of a UV-vis spectrophotometer?Lamps、slit、monochromator、slit、quartz cell、detector12 4.2What are the concentrations of the following solutions of drugs in g/100ml and mg/100ml 4.4 Calculate the percentage of stated content of promazine hydrochloride in promazine tablets from the following information4.5 Determine the concentration of the following injections（答案见英文讲义）13What are the Components of a HPLC system?solvent reservoir →pump →injection loop →column →UV/vis detector →integrator14What is the ‘Rf value’ of a compound in a TLC chromatogram?The distance travelled by the compound from the origin (where the compound is put onto the plate) divided by the distance travelled by the solvent from the origin is called the ‘Rf value’ of the compound.四，略(看原来的资料)五，略（看原来的资料）六，计算2个*5共10分示例一茶苯拉明中氯化物检查取本品0.30g 置200 ml量瓶中，加水50ml、氨试液3ml和10%硝酸铵溶液6ml，置水浴上加热5min，加硝酸银试液25ml，摇匀，再置水浴上加热15min，并时时振摇，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，放置15min，滤过，取续滤液25ml置纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置5min，与标准氯化钠溶液(10μg Cl-/ml)1.5 ml制成的对照液比较，求氯化物的限量。
习题第七章 体内药物分析法【执业药师 药物分析】
一、A1、可作为体内药物浓度可靠指标的是A、尿药浓度B、血清药物浓度C、血浆药物浓度D、唾液药物浓度E、肌肉药物浓度【正确答案】 C【答案解析】当药物在体内达到稳定状态时，血浆中药物的浓度能够反映药物在靶器官的状况，因而，血浆药物浓度可作为体内药物浓度的可靠指标。
【该题针对“体内样品种类”知识点进行考核】2、在体内药物分析中最为常用的样本是A、尿液B、血液C、唾液D、脏器E、组织【正确答案】 B【答案解析】体内样品包括各种体液和组织。
但是，在体内药物分析中最为常用的样本是血液，它能够较为准确地反映药物在体内的状况。
【该题针对“体内样品种类”知识点进行考核】3、一般成人每天分泌唾液约A、1～2LB、1.5～2LC、2～3LD、1～1.5LE、0.5～1.5L【正确答案】 D【答案解析】一般成人每天分泌约1～1.5L。
【该题针对“体内样品种类,体内药物分析法-单元测试”知识点进行考核】14、健康成人一日排尿量为：A、2～5LB、1～5.5LC、1～6LD、2～7LE、1～5L【正确答案】 E【答案解析】尿液包括随时尿、晨尿、白天尿、夜间尿及时间尿几种。
健康成人一日排尿量为1～5L，尿液的pH值在4.8～8.0之间。
【该题针对“体内样品种类,体内药物分析法-单元测试”知识点进行考核】5、尿液的PH值：A、4.8～9.5B、4.8～8.0C、4.8～9.0D、5.0～8.0E、5.5～8.0【正确答案】 B【答案解析】健康成人一日排尿量为1～5L，尿液的pH值在4.8～8.0之间。
【该题针对“体内样品种类,体内药物分析法-单元测试”知识点进行考核】6、体内药物分析中去除蛋白质的方法为A、加入强酸法B、缀合物水解法C、液-液萃取法D、固相萃取法E、化学衍生化法【正确答案】 A【答案解析】去除蛋白质常用的方法包括蛋白沉淀法和蛋白分解法。
其中蛋白沉淀法常用的方法包括：加入有机溶剂、强酸和无机盐。
【该题针对“体内样品处理”知识点进行考核】7、丙酮沉淀蛋白时，上清液pH值为2A、9～10B、8.5～9C、8～8.5D、7.5～8E、7～7.5【正确答案】 A【答案解析】使用乙腈或甲醇时，上清液的pH值为8.5～9.5；丙酮沉淀蛋白时，上清液pH值为9～10。
体内药物分析(12级及以前年级)2.1.3
H2N
COOCH2CH2N(C2H5)2 H2O H2N
COOH
异烟肼
在乙酰基转移酶的作用下 被代谢为乙酰异烟肼
CONHNH2 Ac etyl-CoA
N
CONHNHCOCH3 N
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非那西丁
在体内的Ⅰ相代谢和Ⅱ相代谢反应
CH3CH2O
NHCOCH3
phenac etine
Ⅰ相代谢反应（phase Ⅰ reactions） ——在药物结构中引入羟基、羧基极性基团，增加 水溶性，以利于药物经泌尿和消化系统排泄
Ⅱ相代谢反应（phase Ⅱ reactions） ——Ⅰ相代谢产物再与体内的一些内源性化合物结 合，生成极性更大的新的代谢物从尿液中排出体外
Ⅰ相反应（phase I reactions）
2）Ⅱ相反应——结合反应（Conjugation）
1．药物代谢的化学途径及部位
药物代谢主要在肝内进行，也发生在血浆、 胃肠道、肺、皮肤、肾脏或其他组织细胞
绝大多数药物代谢均是细胞内特异的酶催化 反应。（ 肝微粒体混合功能氧化酶）
2．药物代谢的反应类型及特性
药物代谢反应包括： Ⅰ相代谢和Ⅱ相代谢反应
甲苯磺丁脲
苯环上的-CH3首先被氧化成-CH2OH 再进一步被氧化成-COOH
CH3
SO2NHCONH(CH2)3CH3
[O]
HOCH2 HOOC
SO2NHCONH(CH2)3CH3
[O]
SO2NHCONH(CH2)3CH3
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苯妥英
O N
HO [O]
NH OH
羟基苯妥英
O N
NH OH
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丙咪嗪
（三）影响药物代谢的因素