植物多糖中糖醛酸和中性糖分析检测方法的研究进展
收稿 日期 :2 1- 3 0 0 10 — 8
糖醛酸时 ,中性单糖也会产生一定的紫外吸收 , 会 影响到糖醛酸的定量检测的准确性。
2 1 年第 2期 01
6月出版
陈 辉 等: 植物 多糖 中糖醛酸和 中性糖分析检测方法的研 究进展
摘
要
综述植物 多糖组分 中糖醛酸和中性糖定性及定量的各种分析检测方法,并进行分类比较。
关键词 糖醛酸 ;中性糖 ; 检测方法;研究进展
Ab t a t T i sr c h s a e r v e v ro s f n ay ia meh d f r r n c a i a d e t s g r n l t p p r e iws a iu o a l t l c t o s o u o i c d n n u r l a u a i p a n p l s e h rd s, a d t e c a s c t n o a io wa c n u td. oy a e a i e n h ls i ai c mp rs n i f o s o d ce K e wo d u o i c d n u r l u a ; a ay ia t o y rs r n c a i ; e ta s g r n l t l meh d;r s a c r g e s c e e h p o r s r
为中性多糖和酸性多糖 。其中后者引人了糖醛酸等
基团而有酸性和一些相应的药 效,通常有葡萄糖醛 酸或 半 乳糖 醛酸 。定量 测 定 时 ,其 中 的糖醛 酸 与 中
剂 ,摇匀 ,并沸水中再加热若干分钟后 ,冷却至室
温 ,在指定处测定吸光度 ,以吸光度对浓度作图即 可得 出标 准曲线 。以上两种方法的主要区别在于显
陈
辉 和娴娴
( 河北科技大学 , 石家庄
李浩然
001 ) 5 0 8
L a — a I o rn h
CHEN h i HE x a — in u in x a
( ee u i ri i c n cn l yS iah a g0 0 1 , h a H b i n esy fc n e dt h o g ,h i u 5 0 8 C i ) v to s e a e o jz n n
分 光 光度测 量 是关 于物 质 分子 对 不 同波 长和 特
1 紫外分光光度法
单糖和木质素等干扰 ,使糖醛酸测定 的准确度大大
定波长处的辐射吸收程度 的测量。按照显色剂的不
生化专业 , 学士 , 教授 。
的提高 。王远红等运用硫酸 一咔唑法测定梅花参多 陈辉 ,男 ,95年 出生 ,9 2年 毕业于河北 大学微 生物与 糖 中糖醛酸的含量 ,结果精密度 比较 良好 ,并且硫 18 18 酸 一间羟联苯法特异性更强。用 以上两种方法分析
大 ;而在间羟基联苯法中各浓度 的中性糖溶液与间 羟基联苯并无交叉颜色反应 ,故受杂质 中性糖 的影
性糖两种组分会相互干扰而影响到实验准确性 。由 色试剂的种类和用量 ,分别加入 的间羟基联苯 的氢 于植物多糖 中组分 眭质 的不同 ,使组分 的分析条件 氧化钠溶液和咔唑的乙醇溶液 ,具体 的显色剂用量 不同,增加了其分析测定的难度 。 和衍生处 理时间则是依 照实验过程而定 。马云翔等 采用 3 5 二 甲方酚为显色剂 、参 比波长为 40F ,一 0 m l 和测定波长为 4 0 m的测定方法 ,测定 了不 同豆 5 n 类 中非淀粉多糖中糖醛酸的含量 ,并且消除了中性
,
5 1
醛酸 的显色。如果色谱 中葡萄糖醛酸有时出现两个 度也增大 ,说明中性糖与咔唑也发生反应 ,因而这 斑点 ,那么其中一个是 由其 内酯存在引起 的。张惟
硫 酸 一咔唑 法 随着 杂质 性 糖浓 度 的增 大 其 吸收 种 方 法 检 测 的糖 醛 酸 含 量 测 定 结 果 偏 离 理 论 值 较 杰 运用纸 色谱法对 糖醛 酸进行过初 步 的定 性分析 。 32 薄 层 色谱 法 .
中 图分类 号 :S 3 . T 2 62
文献 标识 码 : A
文 章 编 号 :63 6 0 (0 10— 00 0 17— 0 42 1 )2 05 — 4 同 ,检 测糖 醛 酸 的方 法可 以分 为间 羟基 联 苯法 和 硫
随着 生 物技 术 的发 展 ,多糖 组 分检 测 方法 的研
究 日益受到重视 。多糖是 由 1 以上 的单糖 ,并 酸 一咔唑法两种 。两种具体方法的检测 步骤类似 , O个 通过糖苷键聚合而成的一种生物大分子 ,其相对分 均是 加入 四硼酸钠硫 酸溶液后 ,置于冰水浴 中预 蒸馏水)和不 同浓度 的 子质量为数万甚至数百万 。多糖一般分为均多糖和 冷 。然后分别取空白溶液 ( 杂多糖 ,在天然多糖类中以杂 多糖为主。在多糖组 标准品各 l L m 加入到试管里 ,之后轻轻的震荡 ,直 分结构中除单糖外 ,还含有糖醛酸 、去氧糖 、氨基 至充分混匀 ,期间不断用冰水浴冷却 ,并将试管置 糖 、糖醇等基 团。按照化学性 质,植物多糖可以分 沸水 中加热数分钟 ,冷却至室温。最终加入显色试
食 品 工 程
F O0D NGI E NG E NE RI
Hale Waihona Puke 2 1 年第 2 01 期
6月出版
植物 多糖 中糖醛酸和 中性糖分析检 测方法的研 究进展
Re e rhp o r s na ay ia e h df r r nca i n s a c r g e so n lt l t o o o i cda d c m u n u r l u a ln Oy a c a ie a d e ta g r npa t Is c h r s n s i p d
中药多糖质量控制研究进展
中药多糖质量控制研究进展本文就近年来常见中药多糖质量控制方法,在总糖含量测定方法、分子量大小和分布测定方法、单糖组成和摩尔比测定方法、杂质检测方法等方面进行综述,希望能够为中药多糖的研究和开发提供一定的参考。
标签:多糖;质量控制;总糖含量;分子量;单糖多糖由10个或10个以上单糖通过缩合而形成的链状结构的物质。
在自然界中,植物、动物、微生物和海洋生物中都有多糖的存在。
近年来,已发现不少多糖类物质具有很好的生物活性,如抗肿瘤、免疫促进活性、抗病毒、降血糖、抗凝血等[1]。
多糖的多样化生物活性使多糖类药物的开发与研究成为了当前新药研究的热点。
多糖质量控制的问题是多糖类新药研发中的瓶颈问题[2]。
多糖是一类分子量相对较大的物质,其结构与蛋白质类似,也可分为一级结构、二级结构、三级结构、四级结构,而多糖的生物与其初级结构和高级结构都有密切的关系。
多糖的一级结构就包含分子量大小及分布、单糖组成及摩尔比、糖苷键链接方式、重复结构单元和分支度等多方面的问题。
这些问题使多糖的定性和定量检测成为一个很大的难题。
现就多糖质量控制的问题,在总糖含量测定方法、分子量大小和分布测定方法、单糖组成和摩尔比测定方法、杂质检测方法等方面进行综述。
1 多糖中总糖含量测定方法多糖的总糖含量决定了其纯度,是多糖药物质量控制最基本的问题。
多糖总糖含量测定一般利用单糖的缩合反应进行显色后用比色法测定;也有直接采用高效液相色谱法(HPLC)测定多糖含量[3],但由于缺少标准对照和有效检测手段等因素,该方法并未得到广泛认同。
1.1 苯酚/硫酸法多糖在浓硫酸作用下,迅速水解脱水生成糠醛或糠醛类似物,然后与苯酚缩合生成1种红色化合物,在一定范围内生成物颜色深浅和多糖中总糖含量成线性关系,由此来测定多糖中总糖含量。
该法所采用试剂的价格便宜,蛋白质等物质不干扰测定,灵敏度高,故被广泛采用[4-7]。
该法需要注意的问题有:己糖在显示后最大吸收波长一般在490 nm处,戊糖和糖醛酸显示后最大吸收波长一般在480 nm处;苯酚在空气中易氧化生成醌类物质,导致吸收波长发生偏离或吸收值不稳定,所以苯酚在使用前一般宜进行重蒸馏,且需要现配现用;不同多糖在使用该法时,苯酚、硫酸用量、反应温度和时间等都需要进行优化。
植物多糖的结构与活性研究进展_何余堂
植物多糖的结构与活性研究进展何余堂,潘孝明(渤海大学生物与食品科学学院,辽宁省食品质量安全与功能食品研究重点实验室,辽宁 锦州 121000)摘 要:植物多糖是一类具有重要生理功能并在食品中有广泛应用的生物大分子。
本文综述植物多糖的组成、结构和生理活性,对于植物多糖的开发具有现实意义。
关键词:植物多糖;种类;结构;生物活性;研发Biological Activity and Structure of Plant PolysaccharidesHE Yu-tang ,PAN Xiao-ming(College of Biology and Food Science, Bohai University, Liaoning Provincial Key Laboratory of Food Quality Safety and FunctionalFood, Jinzhou 121000, China)Abstract :Plant polysaccharides are a variety of biomacromolecules with important physiological functions and broad applications in foods. Composition, structure and physiological activity of plant polysaccharides are reviewed in this article,which will offer practical guidance for their exploitation.Key words :plant polysaccharides ;variety ;structure ;biological activity ;exploitation中图分类号:TS201.4 文献标识码:A 文章编号:1002-6630(2010)17-0493-04收稿日期:2010-06-29基金项目:辽宁省教育厅高校重点实验室计划项目(2008S003)作者简介:何余堂(1967—),男,教授,博士,研究方向为食品生物技术与功能性食品。
多糖研究进展
OD值
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Sephadex G-200色谱流出曲线
69
管号
1
5
9
RI 1U 0
uRI
U
-5
-5
-10 0 1 2 3 4 5 6 7 Minutes 8 9 10 11 12 13 14 15
-10
HPLC图谱(>2×106 )
1988年牛津大学德威克教授在当年的《生化 年评》中撰写了 “糖生物学” 综述,这标志了糖 生物学这一新的分支学科的诞生。 糖生物学(glycobiology)是研究聚糖及其衍生 物的结构,化学,生物合成及生物功能的科学。 也有人沿袭“基因组学”和“蛋白质组学” 的概念把这们学科叫做“糖原组学”或“糖组学” (Glycomics)。 生命科学研究中的新热点。
近年来,大量研究表明多糖除了有增强免疫 功能、抗肿瘤作用、抗氧化、抗衰老、消化系统 保护作用的生物学效应外,还有抗菌、抗病毒、 降血糖、降血脂、抗辐射、抗凝血、抗肿瘤等作 用。 随着多糖的制备、结构、合成、药理学及临 床学研究的不断深入,多糖药物将具有更广阔的 前景。
多糖的提取
多糖的生物活性倍受关注,但不少多糖的提 取方法和工艺尚未成熟,各种方法的开发、比较、 分析是研究工作的焦点之一。 目前多糖提取方法主要有溶剂提取法、酸提 法、碱提法、酶解法、超滤法、超声法、微波法、 超临界流体萃取法等。
酸提取法
有些多糖,含葡萄糖醛酸等酸性基团的多 糖,适合用稀酸提取。可用乙酸或盐酸使溶液 成酸性再加乙醇,使多糖沉淀析出。 由于H+的存在抑制了酸性杂质的溶出,稀 酸提取法产品纯度相对较高,但在酸性条件下 可能引起糖苷键断裂,因此,只在一些特定的 多糖提取中占有优势。
糖醛酸测定方法
糖醛酸测定方法一•间羟基联苯比色法1•原理:多聚己糖醛酸与含四硼酸钠的硫酸溶液在高温作用下水解,水解产物进一步与间羟基联苯反应,生成粉红色衍生物,产生紫外吸收,且在一定浓度范围内,该衍生物吸收值与糖醛酸含量呈线性关系,可通过比色法对糖醛酸含量进行计算。
2. 试剂配制:间羟基联苯溶液:称取0.15g间羟基联苯溶于5 mg/mL氢氧化钠溶液中,定容至100mL,其质量浓度为1.5mg/mL.四硼酸钠/硫酸溶液:0.478g四硼酸钠溶于100mL浓硫酸中,备用葡萄糖溶液:称取葡萄糖25.00mg,加水溶解并定容至25mL混匀,成1mg/mL的标准溶液。
(排除中性糖对测定结果的影响)半乳糖醛酸标准溶液:称取干燥至恒重的半乳糖醛酸25.00 mg,加水溶解并定容至25mL,混匀,成1mg/mL的标准溶液。
3. 波长扫描:取半乳糖醛酸标准溶液0.50mL,置10 mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀(质量浓度为0.05 mg/mL)。
量取溶液1.00 mL置于20 mL具塞试管,置冰水浴中,加入四硼酸钠/硫酸溶液6 mL,待全部加完后,用旋涡混合器混匀,于沸水浴中加热5 min,冰水浴中冷却后用微量加样枪加入1.5 mg/mL间羟基联苯溶液100此,混匀后振摇5 min,超声除去气泡。
以1 mL蒸馏水同上操作制得空白液调零,用UV-2450型紫外可见分光光度计在200 nm~ 800 nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长。
4. 标准曲线的制备:取1mg/mL半乳糖醛酸标准溶液0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL和0.6 mL置于10 mL容量瓶中,加水定容,再分别取上述各配制溶液1.0mL至于20mL具塞试管,置冰水浴中,加入四硼酸钠/硫酸溶液6 mL,待全部加完后,用旋涡混合器混匀,于沸水浴中加热5 min,冰水浴中冷却后用微量加样枪加入1.5 mg/mL间羟基联苯溶液100 L混匀后振摇5 min,超声除去气泡。
多糖含量测定的方法综述
多糖含量测定的方法综述作者:何佩娟张宇洁来源:《现代食品·下》2019年第01期摘要:多糖是生命科学中不可缺少的生物大分子,具有复杂、多方面的生物活性和功能,但由于其分子量大、结构复杂,而且缺少易于检测的发光基团,成为困扰人们对多糖进行进一步研究的一个大问题。
现结合近年文献,对多糖的含量测定进行综述。
关键词:多糖;含量测定;综述Abstract:Polysaccharides are indispensable biological macromolecules in life science, which have complex and multifaceted biological activities and functions. It has been a problem with the research of polysaccharides because of its intricate structur. In conjunction with recent literature, a review of polysaccharides has been determined.Key words:Polysaccharides; Content determination; Review中图分类号:Q53多糖(polysacharides,PS)是由糖苷键结合的糖链,至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物,可用通式(C6H10O5)n表示。
多糖在自然界分布极广,亦很重要:有的是构成动植物细胞壁的组成成分,如肽聚糖和纤维素;有的是作为动植物储藏的养分,如糖原和淀粉;有的具有特殊的生物活性,如人体中的肝素有抗凝血作用,肺炎球菌细胞壁中的多糖有抗原作用。
多糖的结构单位是单糖,多糖相对分子质量从几万到几千万。
多糖在自然界高等植物、藻类、微生物(细菌和真菌)与动物体内均普遍存在。
多糖含量测定的方法综述
多糖含量测定的方法综述
多糖是指由多个单糖单元通过糖苷键连接而成的生物大分子聚合物。
多糖广泛存在于
生物体内,包括植物和动物的细胞壁、粘液、胶原蛋白等组织中,对于维持细胞结构和功
能起着重要作用。
准确测定多糖含量对于研究生物过程和评估食物营养价值具有重要意义。
本文将综述常用的多糖含量测定方法。
1. 光度法
光度法是最常用于测定多糖含量的方法之一。
该方法基于多糖与酚类试剂(如苯酚硫
酸试剂)反应生成有色产物,通过测定产物的吸光度来间接测定多糖的含量。
这种方法简单、快速,适用于大多数多糖的测定,但不适用于含有酚类物质的样品。
2. 琼脂糖凝胶电泳
琼脂糖凝胶电泳是一种常用的多糖分析技术。
该方法将待测样品通过电泳在琼脂糖凝
胶上分离,根据多糖的电泳迁移率来判断其分子大小和含量。
这种方法可以同时测定多个
多糖组分,适用于多糖的组分分析和纯度检测。
3. 高效液相色谱法
高效液相色谱法是一种高分辨率、高灵敏度的多糖分析技术。
该方法通过在色谱柱上
分离多糖组分,再通过检测器测定其浓度。
该方法灵敏度高,分离效果好,适用于多组分
多糖的测定。
多糖含量的测定方法多种多样,可以根据研究目的和样品性质选择适合的方法进行测定。
无论是光度法、电泳法还是色谱法,都对多糖的含量测定提供了有力的工具,为多糖
的研究和应用提供了重要的支持。
植物多糖提取技术研究进展
植物多糖提取技术研究摘要:糖作为构成生命体最基本的物质之一,在生命过程中起着极为重要的作用,糖类物质不仅是能量储存和结构物质的存在形式,也作为生物信息的载体存在。
本文阐述了植物多糖的生物活性和制备技术以及提取方法,包括溶剂提取法、酸提法、碱提法、酶解法、超滤法、超声波强化法、微波法。
本文重点对这些方法在不同多糖提取上的运用进行综述。
关键词:植物多糖生物活性提取Abstract: The polysaccharide one kind of the most basic materials.It plays an important role in the process of life. The polysaccharide is not only the form of the depositeded energe and the framework substans .Its extraction methods and techniques have become one of the focuses of the p resent researches. In the study of polysaccharides extraction for plants, a large amount of methods have been used, such as solvent extraction, acid extraction, alkali extraction, enzyme extraction, ultrafiltration extraction, ultrasonic extraction, and microwave assisted extraction. This paper summerizes the extraction methods and techniques of the polysacchridesmentioned above,in the hope of p roviding the research work in this field with some referrences.Keywords: plant polysacchride; bio-activity; extraction多糖是由10个以上单糖通过苷键连接而成的聚糖,在自然界分布极广,在植物、动物和微生物体内均有存在,是自然界含量最丰富的生物聚合物。
多糖的提取分离纯化及分析鉴定方法研究
多糖的提取分离纯化及分析鉴定方法研究多糖是由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的高分子化合物。
多糖具有广泛的应用价值,包括食品、医药、化妆品和生物材料等领域。
因此,对多糖的提取、分离纯化以及分析鉴定方法的研究具有重要意义。
一、多糖的提取方法1.物理法物理法主要包括热水提取法、酸碱提取法和微波提取法等。
热水提取法是最常用的提取方法之一,通过加热使细胞壁破烂,有利于多糖的溶出。
酸碱提取法则是利用酸碱反应将多糖从细胞壁中释放出来。
微波提取法则是利用微波辐射对样品进行加热,加速多糖的溶解和释放。
2.化学法化学法主要包括酶解法、酶解分离法和酸碱水解法等。
酶解法是利用特定的酶对样品进行处理,将多糖分解为单糖,然后进行分离和纯化。
酸碱水解法则是通过酸碱反应将多糖水解为低聚糖和单糖。
3.生物法生物法是利用微生物或植物产生的酶对多糖进行酶解和分离。
生物法具有选择性强、工艺简单等优点,在多糖提取中得到了广泛的应用。
二、多糖的分离纯化方法多糖的分离纯化方法主要包括离子交换色谱法、凝胶渗透色谱法和亲和色谱法等。
1.离子交换色谱法离子交换色谱法是利用离子交换树脂对多糖进行分离的方法。
通过控制溶液pH值和离子强度等条件,使不同电荷的多糖在树脂上发生吸附反应,实现多糖的分离纯化。
2.凝胶渗透色谱法凝胶渗透色谱法是根据多糖分子量的大小来进行分离的方法。
多糖分子量越大,越容易在凝胶渗透色谱柱的孔隙中滞留,分离得到纯度较高的多糖。
3.亲和色谱法亲和色谱法是利用多糖与一些特定配体之间的相互作用进行分离的方法。
例如,可以利用亲和色谱柱上的特定配体与多糖的特定结构之间的结合作用,实现多糖的分离和纯化。
三、多糖的分析鉴定方法多糖的分析鉴定方法主要包括红外光谱法、紫外光谱法、核磁共振波谱法、高效液相色谱法和气相色谱法等。
1.红外光谱法红外光谱法能够通过检测样品吸收、散射或透射特定波长的红外光来分析多糖的结构和功能。
2.紫外光谱法紫外光谱法是利用多糖分子在紫外可见光区域的吸收特性进行分析。
多糖定量检测的研究进展
Pr g e s f o r s o Res a c n e r h o Qu n ia i e a tt t v De ec i n f O ys c h rd s t to o p I a c a i e
Ma a gl Hu F n i M ig u n ha Co mp n L d, G a g h 5 6 ay t u n z ou 1 65 0
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C ia h ) n
T e c n b di d d i t t o h y a e vi e n o w
A b ta t I t s a e , ma y s r c : n hi p p r n me h d f r t o s o qu n i a i e d t c i n o p l s c h r d s r d s r b d a t t tv e e t o f o y a c a i e a e e c i e
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c t g r e : o e a e o y s t e d r c d t r n t o o p l s c h rd s t e e v s s c a HPL , HCE, S a e o i s n c t g r i h i e t e e mi a i n f 0 y a c a i e h ms l e , u h s C EC, GCP, e c a o h r t .; n t e i t e n i e t me h d w ih h mo s c h r d i p l s c h r d s. T e p o i e t e r tc l f u a i n o f r h r d ve o me s h i d r c to s t t e no a c a i e n o y a c a i e h y r v d a h o e i a o nd to f r u t e e l p nt
植物多糖的结构及药理活性进展
安晓娟,冯琳,宋红平,李师翁* ( 兰州交通大学化学与生物工程学院,兰州 730070)
摘要:目的 对植物多糖的结构分析方法及部分药理活性的近年研究进展进行综述。方法 对近年来国内外相关研究文
献进行分析和归纳。结果与结论 植物多糖结构分析的主要方法包括气相色谱法( GC) 、液相色谱法( HPLC) 、红外光谱法
食品、保健品和药品。先进分析方法的应用必将使植物多糖的研究更加深入,许多新的植物多糖及其药理功能也将被发现
和应用。
关键词:植物多糖; 结构分析; 色谱法; 光谱法; 质谱法; 药理活性; 绞股蓝多糖; 黄芪多糖; 龙眼多糖; 灵芝多糖
中图分类号:Q935
文献标志码:A
文章编号:1001 - 2494( 2012) 16 - 1271 - 05
活性多糖具有一定的相对分子质量范围。研究表明,多 糖相对分子质量太大,不利于其跨越细胞膜进入生物体内发 挥生物学活性,而相对分子质量过低也没有活性。多糖相对 分子质量的测定方法有超速离心沉降速度法、光散射法、端 基分析法、气相渗透法、膜渗透法及凝胶渗透色谱法,目前常 用的是高效凝胶渗透色谱法 ( HPGPC) [8],商品柱是 Lonpak 系,Macrosphere 系和 TSK 系柱,前两者用水作洗脱剂,后者 采用缓冲溶液如磷酸盐缓冲液作洗脱剂。高效凝胶渗透色 谱法的特点是设备简单、操作方便,不需要有机溶剂,对高分 子物质有显著的分离效果,常用于大分子多糖的分析。单糖 组成的测定方法主要有纸层析、薄层层析法( TLC) 、气相色
基金项目: 国家自然科学基金资助项目( 30960063) ; 教育部“春晖”计划资助项目( Z2006-1-6213) 作者简介: 安晓娟,女,硕士研究生 研究方向: 中草药有效成分的提取、分离及纯化 * 通讯作者: 李师翁,博士,男,教授,博士生导师
