主管检验师临床医学检验免疫学和免疫检验 第七章 放射免疫分析
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第七章 放射免疫分析
第一节 放射免疫技术
放射免疫分析是利用放射性核素可探测的灵敏性、精确性和抗原抗体反应特异性相结合的一种免疫技
术。
早期的放射免疫技术是基于竞争性结合反应原理的放射免疫分析(RIA) ,稍后又发展了非竞争性结
合的免疫放射分析(IRMA)。
一、基本类型及原理
1、放射免疫分析(RIA)
是以放射性核素标记的抗原与反应系统中未标记抗原竞争结合特异性抗体为基本原理来测定待检样品
中抗原量的一种分析法。
2、免疫放射分析(IRMA)
是用放射性核素标记的过量抗体与待测抗原直接结合,采用固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗
体的非竞争放射免疫分析法。
二、常用的放射性核素
放射免疫技术常用的放射性核素有125Ⅰ、131Ⅰ、3H、14C等。使用最广泛的是125Ⅰ。
三、标志物制备及鉴定
采用放射性碘(如125Ⅰ)制备标志物的基本原理是以放射性碘原子通过取代反应置换被标志物分子中
酪氨酸或酪胺残基以及组胺残基上的氢原子。
1、直接标记法
最常用于肽类、蛋白质和酶的碘化标记,其原理是采用化学或酶促氧化反应直接将125Ⅰ结合于被标志
物分子中酪氨酸残基或组胺残基上。
(一)标记及类型
其特点是标记方法操作简便,容易将较多的125Ⅰ结合到被标记蛋白分子上,易得到比放射性较高的标
志物。常用的方法为:①氯胺T(ch-T)法;②乳过氧化物酶标记法。
2、间接标记法
也称连接标记法(Bolton-Hunter法) ,是最常用的间接碘标记方法。该法主要用于甾体类化合物、
环核苷酸、前列腺素等缺乏碘标记基团的小分子化合物的标记。
(二)标志物的纯化
纯化标志物的方法有利用分子筛机制的凝胶过滤法、利用游离125Ⅰ与标志物分子极性差异进行吸附解
离的离子交换层析法、按分子所带电荷和直径不同在电场作用下分子迁移速率不同进行分离纯化的聚丙烯
酰胺凝胶电泳法(PAGE)以及高效液相色谱法。
(三)标志物的鉴定
1、放射化学纯度
是指单位标志物中结合于被标志物上的放射性占总放射性的百分率,一般要求大于95%。
2、免疫活性
指制备的标志物与抗体结合的能力。
3、比放射性
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指单位化学量标志物中所含的放射性强度,也可理解为每分子被标志物平均所结合放射性原子数目,
常用Ci/g、mCi/mg或Ci/mmol等单位表示。
比放射性计算方法有计算法和自身置换法。
四、抗血清鉴定
抗血清的质量直接影响分析方法的特异性和灵敏度。用于鉴定抗血清质量的参数主要有以下几项:
1、亲和性
是指抗体分子上一个抗原结合部位与相应的抗原决定簇之间的结合强度,常用亲和常数Ka表示。
2、特异性
是指一种抗体识别相应抗原决定簇的能力。
3、效价
是反映抗血清中有效抗体含量的相对参数,即抗血清稀释至能与抗原发生有效反应的最大稀释度。
五、方法学评价
为增强结果的可比性, 需对RIA方法学进行评价。除常规的灵敏度、精密度、准确性、特异性和稳定
性等指标外,还应注意以下指标:
1、可靠性
是评价被测物与标准品的免疫活性是否相同的指标。借助标准曲线与样品稀释曲线的平行性分析来判
断方法的可靠性。平行性好者可靠。
2、剂量-反应曲线
标记免疫实验是通过已知浓度的标准品和相应的反应参数绘制成剂量-反应曲线,待测物定量是通过计
算其反应参数在剂量-反应曲线上对应的标准品浓度值而确定。
3、高剂量钩状效应
高剂量钩状效应(H00K效应)是指当标本中被测物浓度超过线性范围上限时,所得结果反而降低或呈
阴性的现象。
第二节 放射免疫分析
放射免疫分析(RlA) 是以放射性核素作示踪剂的标记免疫分析方法,它具有高度灵敏性、特异性和
精确性等特点,特别适用于激素、多肽等含量微少物质的超微量分析。
一、基本原理
经典RIA是采用标记抗原和非标记抗原竞争性结合有限量特异性抗体的反应。
二、实验方法及测定
RIA具体测定方法包括以下三个主要步骤:
(一)抗原抗体反应
根据RIA原理,将未标记抗原(标准品和待测样品)、标记抗原和特异性抗体加入反应试管中,在一
定条件(温度、时间及介质pH)下进行竞争抑制反应。
(二)分离结合与游离标志物
RIA反应平衡后,标记抗原与试剂抗体形成免疫复合物(B)。由于其含量极少,不能自行沉淀,因此
需加入适当的沉淀剂才能将其彻底沉淀, 然后经离心使其与游离的标记抗原(F)分离。某些小分子抗原
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也可采用吸附法分离B与F。
目前RIA常用的分离方法有以下几种:
1、第二抗体沉淀法
其原理是用RIA反应中的试剂抗体(一抗)如豚鼠的IgG免疫另一种动物(如羊),制得羊抗豚鼠IgG
血清(二抗)。RIA反应结束时,加入二抗,使其形成抗原、一抗-二抗的双抗体复合物;但因一抗含量甚
微,此复合物也少,不易离心分离,一般还需加入一定量的与一抗同种动物的血清或IgG,使其与二抗形成
较大量的可见沉淀物,与双抗体复合物共沉淀;离心后,即可有效地分离B和F。也可将二抗与某些颗粒固
相物连接,制成固相二抗,分离B、F效果也好。
2、聚乙二醇(PEG)沉淀法
PEG能非特异地沉淀抗原抗体复合物等大分子蛋白质,而不沉淀小分子抗原,因此PEG被广泛用于RIA
实验作沉淀剂。其优点是沉淀完全、经济方便,但非特异性沉淀较多,且当温度高于30℃时,沉淀物易复
溶。
3、PR试剂法
先将二抗与PEG按一定比例混合成悬液后进行试验。是将第二抗体沉淀法和PEG沉淀法沉淀原理相结
合的方法。此法保留了两者的优点,节省了二者的用量,且分离迅速,简便。
4、活性炭吸附法
活性炭可吸附小分子游离抗原或半抗原,而大分子蛋白(如抗体和免疫复合物)则留在溶液中。抗原
抗体反应后,加入活性炭颗粒,使游离的标记抗原(F)吸附到颗粒上,再离心使颗粒沉淀,上清液中含有
的标记抗原抗体复合物(B)供测定。该法主要用于测定小分子抗原或药物的RIA。
(三)放射性测量及数据处理
分离B、F后,即可对标记抗原抗体复合物(B)进行放射性测量,也可根据RIA实验方法及目的,测
定游离标记抗原(F) 。绘制标准曲线(剂量-反应曲线),样品管以其测量或计算的反应参数, 通过标
准曲线即可查出相应的待检抗原浓度,目前已普遍采用计算机进行数据处理、自动绘制标准曲线和打印样
品抗原浓度。
第三节 免疫放射分析
免疫放射分析(IRMA)是在RIA的基础上发展起来的放射性核素标记免疫分析。
与经典RIA不同,IRMA是以过量125I标记抗体与待测抗原进行非竞争性免疫结合反应,用固相免疫吸
附剂对B或F进行分离,其灵敏度和可测范围均优于RIA,操作程序较RIA简单。
一、基本原理
1、单位点IRMA
是先利用过量标记抗体与待测抗原进行反应,形成抗原-抗体复合物,反应平衡后,再用固相抗原结合
反应液中剩余的未结合标记抗体并将其分离,测定上清液的放射量。
2、双位点IRMA
是先用固相抗体与抗原反应结合,然后再用过量的标记抗体与已结合于固相的抗原的另一抗原决定簇
结合,形成固相抗体-抗原-标记抗体复合物,洗弃反应液中剩余的标记抗体,测定固相上的放射性。
二、IRMA与RIA的比较
1、标志物
RIA是以放射性核素标记抗原,抗原有不同种类,标记时需根据其理化和生物学特性,选用不同的放射
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性核素和方法。
IRMA则是标记抗体,为大分子蛋白,性质较稳定,不同抗体标记方法基本相同,标记抗体的比活度高,
提高了测定的灵敏度。
2、反应速率
反应速率与反应物浓度成正比,IRMA反应中,标记抗体为过量,且抗原抗体结合为非竞争性,故反应
速率比RIA快。
3、反应原理
RIA为竞争抑制性结合,反应参数与待检抗原量成反比。
IRMA为非竞争性结合,反应参数与待检抗原浓度呈正相关。
4、特异性
IRMA采用针对不同抗原决定簇的双抗体结合抗原,反应受交叉反应物的干扰,较仅用单一抗体的RIA
者小,测定特异性较高。
5、灵敏度和检测范围
IRMA反应中,抗原与抗体属非竞争性,微量抗原能与抗体充分结合;RIA中标记抗原和待检抗原竞争,
与有限量抗体的结合不充分,故IRMA测定的灵敏度明显高于RIA。
由于抗体量大,能结合较多的抗原量,IRMA用于抗原含量较高标本测定时,结果也较RIA好,IRMA标
准曲线工作范围较RIA宽1~2个数量级。
6、其他
RIA所用抗体为多克隆性,因此对其亲和力及特异性要求较高,但用量很少;IRMA为试剂过量的非竞
争性结合反应对抗体亲和力的要求不及RIA,但用量大。
RIA可以测定大分子和小分子抗原,但IRMA则只能测定至少有两个抗原决定簇的抗原。
第四节 放射免疫分析技术的应用
常用于各种激素、微量蛋白质、肿瘤标志物和药物等微量物质的测定。
由于大多数检验项目均有RIA或IRMA试剂盒提供,目前仍是基层单位对超微量物质测定的主要手段。
但由于放射污染和危害,常用放射性核素半衰期短,试剂盒有效期不长,无法自动化分析等诸多不足,特
别是近年来其他非放射性标记免疫测定技术及其自动化分析的飞速发展和普及,RIA将会逐渐被这些优秀的
标记免疫分析方法所取代。
临床医学检验主管技师分类模拟题临床免疫与免疫学-(7)
临床医学检验主管技师分类模拟题临床免疫与免疫学-(7)以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。
请从中选择备选答案中所有正确答案。
1. 可作为人工结合抗原试验的载体分子包括A.牛血清白蛋白B.鸡卵白蛋EC.二硝基苯D.DNA-蛋白质E.天然糖蛋白答案:ABDE2. Tc细胞的特性包括A.可特异性杀伤病毒感染细胞B.靶细胞将MHC-Ⅰ类分子一抗原肽复合物呈递给Tc细胞C.可特异性杀伤肿瘤细胞,为执行免疫监视功能主要效应细胞D.杀伤靶细胞的机制为ADCCE.表面不表达CD3分子答案:ABC3. 下列关于免疫比浊测定,叙述正确的是A.胶乳颗粒在免疫比浊测定有较广泛的应用B.免疫比浊法分透射比浊法和散射比浊法C.不宜单点定标D.免疫比浊法必须在过多聚合、形成絮状沉淀之间进行浊度测定E.不会出现抗原过量的情况答案:ABCD4. 补体旁路激活途径区别于其他途径的特点是A.可以识别“自己”和“非己”B.与抗原和抗体的特异性一样C.具有放大机制D.形成MACE.有B、D、P因子参与答案:ACE5. 可诱导免疫应答的物质是A.免疫原B.半抗原C.半抗原+载体D.异种物质E.胚胎期机体免疫细胞未曾接触过的物质答案:ACDE6. 可激活补体旁路途径的有A.抗A血型抗体与A型红细胞结合的复合物B.病毒感染细胞C.细菌脂多糖D.IgAE.酵母多糖答案:CE7. 属于Ⅲ型超敏反应性疾病的是A.农民肺B.甲亢C.复合物性肾炎D.类风湿关节炎E.传染性变态反应答案:CD8. 黏膜上皮细胞的抗感染作用包括A.机械阻挡作用B.分泌抑菌物质C.分泌特异性抗体sIgAD.吞噬作用E.屏障作用答案:ABCE9. CD4+T细胞的生物学作用不包括A.促进免疫细胞的增殖和分化B.协调免疫细胞之间的相互作用C.参与对靶细胞的特异性直接杀伤D.受MHC-Ⅱ类分子限制E.任何状态下均可通过产生CK而发挥作用答案:CE10. 细胞因子表达过高可见于A.浆细胞瘤B.AIDSC.类风湿关节炎D.超敏反应E.细菌性脓毒血症休克答案:ACDE11. 下列说法正确的是A.敏感性、特异性和决定值有关B.决定值偏低,敏感性增加,特异性降低C.决定值偏高,敏感性降低,特异性增加D.决定值偏低,敏感性降低,特异性增加E.决定值偏高,敏感性增加,特异性降低答案:ABC12. 描述肿瘤标志物诊断价值的主要指标是A.敏感性B.特异性C.决定值D.准确率E.以上都是答案:ABD13. 临床常用的胚胎抗原类肿瘤标志物有A.AFPB.CEAC.PSAD.CA125E.CA153答案:AB14. 免疫应答的调控因素有A.抗原、抗体的调节B.Ts细胞的调节C.TH细胞的调节D.MHC的群体调节E.神经内分泌免疫网络的调节答案:ABCDE15. 器官移植中免疫抑制的方法有A.使用环孢素AB.使用转移因子C.血液净化D.使用FK506E.使用环磷酰胺答案:ACDE16. 临床上可用于乳腺癌诊治的糖蛋白抗原类肿瘤标志物有A.CA199B.CA153C.CA549D.BCME.MCA答案:BCDE17. 关于Ⅳ型超敏反应错误的是A.以IgG抗体介导为主B.反应速度慢C.需补体参与D.炎症区以单个核细胞浸润为主E.效应Tc细胞参与答案:AC18. 有关新生儿溶血症描述不正确的是A.抗体是天然IgMB.使胎儿Rh+RBC发生溶解破坏的抗体是免疫双价IgG抗体C.天然IgG抗体造成Rh+RBC溶解D.IgM抗体造成Rh+RBC溶解E.IgE引起答案:ADE19. 可用于定量检测的免疫学检测方法有A.双向琼脂扩散B.放射免疫检测法C.单向琼脂扩散D.ELISAE.间接凝集抑制实验答案:BCD20. 关于B细胞在外周免疫器官中错误的是A.进行发育成熟B.是抗原依赖的C.是产生免疫应答场所D.分化成浆细胞,分泌抗体E.是抗原非依赖性答案:BCD21. IL-1在炎症反应中的作用有A.促进血管内皮细胞表达黏附分子B.诱导发热C.激活B细胞D.刺激机体细胞产生急性蛋白E.刺激骨髓造血干细胞的生成答案:ABCDE22. 一男性接受器官移植的最适器官供者可能是A.父母双亲B.同卵双生兄弟C.同胞姐妹D.无关个体E.类似配型个体答案:BE23. ELISA可应用于临床中的哪些方面A.病原体及其抗体的检测B.Ig、补体、肿瘤标志物等蛋白质的检测C.非肽类激素的检测D.药物的检测E.毒品的检测答案:ABCDE24. 关于CK的描述错误的是A.以自分泌或旁分泌方式在局部发挥效应B.作用于靶细胞具MHC限制性C.一种CK可由不同细胞产生D.一种细胞可产生多种CKE.具有抗原特异性答案:BE25. 属于吞噬细胞非依氧杀伤系统的物质有A.溶菌酶B.NOC.MPO杀菌系统D.乳铁蛋白E.弹性蛋白酶答案:ADE26. 目前用于治疗各种血细胞低下症的CK是A.M-CSFB.GM-CSFC.G-CSFD.IL-1E.EPO答案:ABCE27. 有些肿瘤标志物在肿瘤的早期诊断中不够敏感,但在肿瘤的预后判断中有较高应用价值,如A.雌激素受体和孕激素受体B.甲胎蛋白C.癌基因erbB-2编码蛋白D.前列腺特异抗原E.免疫球蛋白轻链答案:AC28. Ts细胞的特性是A.具有免疫调节功能的细胞B.作用方式为非特异性C.受MHC分子的限制D.抑制自身反应性T细胞克隆E.抑制机体对非己抗原的免疫应答答案:ACDE29. 在抗体形成过程中,下列哪些叙述是正确的A.浆细胞是抗体产生细胞B.B细胞分化为浆细胞C.B细胞对TD抗原的应答需巨噬细胞和TH2细胞参与D.再次应答时B细胞为抗原呈递细胞E.所有B细胞都必须有双信号刺激答案:ABCD30. NK细胞的生物学活性包括A.细胞因子,如IFN-γ、TNF-β干扰病毒复制B.直接特异性杀伤肿瘤细胞C.分泌穿孔素D.ADCC杀伤E.吞噬杀伤答案:ACD31. IFN-γ具备的生物学作用是A.促进APC细胞表达MHC-Ⅱ类分子B.增强CTL作用C.增强NK细胞的杀伤活性D.增强巨噬细胞吞噬杀伤功能E.作用具有种属特异性答案:ABCDE32. 免疫复合物活化补体可以导致A.免疫复合物的清除B.过敏毒素释放C.中性粒细胞的杀伤D.调理作用E.趋化因子释放答案:ABCDE33. 属于凝集反应的有A.ABO血型鉴定B.Ea玫瑰花结形成试验C.单向琼脂扩散D.细菌菌种鉴定E.肥达反应答案:ADE34. 临床上可用于胰腺癌诊治的肿瘤标志物有A.CA199B.CEAC.TAG72D.CA153E.CA125答案:ABC35. 接触性皮炎的特点有A.治疗方法是注射抗原B.用抗原进行皮试进行诊断C.可经血清被动转移D.一些半抗原与宿主蛋白结合为完全抗原而引发E.补体参与答案:BD36. 急性炎症反应产生的应激物质有A.溶解酶B.HSPC.MBLD.乳铁蛋白E.C-反应蛋白答案:BCE37. 可与IgG Fe段结合的有( )A.中性粒细胞、单核细胞B.NK细胞、巨噬细胞C.SPA、酶D.荧光素、同位素E.嗜碱性粒细胞、肥大细胞答案:ABCD38. 理想的肿瘤标志物应符合的条件是A.敏感性高B.特异性高C.肿瘤标志物的浓度和肿瘤大小无关D.肿瘤标志物浓度和转移及恶性程度有关E.以上都是[解答] 肿瘤标志物的产量或血清浓度应与肿瘤组织大小呈正相关。
放射免疫检定法
放射免疫检定法一、引言放射免疫检定法(radioimmunoassay,简称RIA)是一种利用放射性同位素标记物质和抗原抗体相互作用进行定量分析的方法。
它具有高度的灵敏度、特异性和准确性,在生物医学研究和诊断中得到广泛应用。
本文将详细介绍放射免疫检定法的原理、操作步骤及其在临床上的应用。
二、原理放射免疫检定法基于抗原与抗体相互结合的特异性,通过测量标记物质(通常是放射性同位素标记的抗原或抗体)与未标记物质(待测物质)竞争结合的程度,来定量测定待测物质的浓度。
该方法主要包括以下步骤:1.样品准备:待测物质需要提取和纯化,以获得精确的浓度。
2.标记物质制备:将待测物质标记上放射性同位素。
3.抗体制备:获得特异的抗体,可通过动物免疫、体外培养等方法获得。
4.标样制备:准备一系列已知浓度的标准样品。
5.标准曲线绘制:将标准样品与已知浓度相对应的竞争剂量进行测定,得到标准曲线。
6.待测样品测定:将待测样品与抗体、标记物质一起孵育,再与固相支持物接触,随后进行放射计数,得到计数值。
7.计算浓度:根据标准曲线上待测样品的计数值,计算待测物质的浓度。
三、操作步骤放射免疫检定法的操作步骤如下:1.准备所需试剂和设备:包括抗体、放射性同位素、标准样品、试剂盒、储存条件等。
2.标记放射性同位素:将待测物质标记上放射性同位素,使其具有放射性活性。
3.样品准备:通过提取和纯化方法,获得待测物质的准确浓度。
4.孵育:将待测样品与抗体和标记物质搅拌混合,使其充分反应。
5.分离:通过固相支持物将未结合的标记物质与结合物质分离开来。
6.放射计数:将分离后的结合物质放入放射计数器中,进行计数。
7.数据处理:根据标准曲线上待测样品的计数值,计算待测物质的浓度。
四、应用放射免疫检定法在临床医学中有着广泛的应用,主要应用于以下方面:1.肿瘤标志物检测:放射免疫检定法能够对血清或尿液中的肿瘤标志物进行测定,用于肿瘤的早期诊断、疗效评价和复发监测。
放射免疫测定法
放射免疫测定法放射免疫测定法(radiation immune assay, RIA)的技术类型很多,如再结合免疫技术,可用它作标本的定性、定量及定位分析等。
另外,由于它是以最敏感的同位素作标记,所以本法的高敏感性是最重要的特点,测定结果可达ng~pg水平,这是现用一切检测微量抗原和抗体法所不可比拟的。
(一) 放射免疫超微量分析法用其检测血清抗体时,用同位素如3H、14C、32P、131I或125I标记的病毒抗原与被检血清在37℃条件下一起孵育2小时,使二者相遇结合后,再加入抗γ球蛋白时,便与上述的抗原抗体复合物联结在一起,离心后,形成大的复合物沉淀下来,此时可用闪烁探测仪分别测量上清液和沉淀物的脉冲数,并计算出沉淀物放射性占总放射性的百分率,以此为指标,判定被检血清中有无相应抗体及其含量。
另外,也可用本法测抗原,依据的原理与上述测抗体的方法大致相同。
区别是将已知抗血清和可能含有相应病毒抗原的被检标本一起孵育,如被检标本中含有相应的病毒抗原,则二者充分结合,再引入标记的已知病毒抗原时,由于已知抗体已与标本中的抗原结合,则不能再与引入的标记病毒结合,只能呈游离状态存在于上清液中,加入抗γ球蛋白时,则与已知抗体和被检病毒抗原的复合物相结合,离心后,这种大分子的结合物即被沉淀下来,应用闪烁探测仪分别测定上清液和沉淀物的放射性时,结果沉淀物的放射性明显低于上清液的放射性,如果被检标本中不含相应的病毒抗原时,则沉淀物的放射性明显高于上清液的放射性。
(二) 放射火箭电泳测定法这种方法实际上是放射自显影与单向定量免疫电泳(即火箭电泳)相结合的一种测定技术。
它的分辨力很高,有的能精确地测出细胞内分子水平的放射性物质的分布。
检测时,可先将被检抗原用3H、131I标记,滴加于含一定量的抗血清琼脂凝胶板孔中,电泳时,抗原在移动过程中,与琼脂板中的抗体在比例适当处,即形成抗原-抗体复合物,未结合的抗原继续向阳极移动,直至全部抗原与抗体结合完为止,这样就形成一个形似火箭的锥形沉淀峰。
第七章 临床常用免疫学检查
第一节 血清免疫球蛋白检测
一、 免疫球蛋白G检测 二、 免疫球蛋白A检测 三、 免疫球蛋白M检测 四、 免疫球蛋白D检测 五、 免疫球蛋白E检测 六、 血清M蛋白检测
一、 免疫球蛋白G检测
免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)为人 体含量最多和最主要的Ig,占免疫球蛋白的 70~80%。它对病毒、细菌和寄生虫等都有抗体 活性,也是唯一能够通过胎盘的Ig。单向免疫 扩散法(RID)是将抗IgG血清均匀地混合于琼 脂糖凝胶板内,打孔,加样。待检标本中的抗 原(相应IgG)则产生扩散,与抗IgG形成沉淀 环,沉淀环的面积与相应抗原(IgG)含量相 关。
子病:系由一条重链和一条轻链组成的单 克隆Ig片段;⑥7SIgG病:为恶性M蛋白病 等。
第二节 血清补体检测
补体(complement,C)是一组具有酶原 活性的糖蛋白,它由传统途径的9种成分 C1(C1q、C1r、C1s)~C9,旁路途径的 3种成分及其衍生物、B、D、P、H、I等 因子组成。补体、体液因子或免疫细胞 共同参与灭活病原体的免疫反应,也参 与破坏自身组织或自身细胞而造成的免 疫损伤。
四、补体C3检测
补体C3(complement C3,C3)是一种由肝 脏合成的β2-球蛋白,由α和β两条多肽链 组成。 C3在补体系统各成分中含量最多, 是传统途径和旁路途径被激活的关键物 质。
【参考值】 单向免疫扩散法为1.14±0.27g/L。
【临床意义】 ①增高:见于急性炎症、传
染病早期、肿瘤、排异反应等;②减低: 见于70%以上的急性肾小球肾炎、85%以 上的链球菌感染后肾炎、78%的狼疮性肾 炎患者。还见于活动性SLE和类风湿关节 炎等。因此检测C3对这些疾病诊断有价值。
临床医学检验临床免疫技术:放射免疫技术
临床医学检验临床免疫技术:放射免疫技术1、单选用1251标记抗原,不正确的是OA.直接标记法仅用于含酪氨酸的化合物B.间接标记法可标记缺乏酪氨酸的肽类及某些蛋白C.T氯胺标记法是最常用的直接标记法(江南博哥)D.间接法标记蛋白质的放射性高于直接法E.间接标记法对蛋白质的损伤较小正确答案:D参考解析:用放射性同位素I标记抗原有直接法和间接法两种方法。
直接法最常用的是T氯胺标记法,标记率高低与抗原分子中酪氨酸含量及酪氨酸暴露程度有关。
间接法是先将T氯胺与一种物质结合,然后再标记抗原。
间接法优点是避免放射性物质对抗原的损伤,但是间接法标记蛋白质的放射性显著低于直接法2、单选不属于放射免疫分析特征的是OA.核素标记在抗原分子上B.主要用于小分子的测定C.非竞争性免疫分析D.非均相免疫分析E.体系中抗体限量正确答案:C参考解析:放射免疫分析抗体限量、定量标记抗原和待测抗原竞争限量抗体,属于竞争性免疫分析。
3、单选表示单位质量标记物的放射强度的指标是()A.放射化学纯度B.免疫活性C.比放射性D.交叉反应率E.亲和常数正确答案:C4、单选关于RlA原理,下列哪种说法正确(注:B为结合态的标记抗原,F为游离态的标记抗原)OA.Ag增多时,B/F比值增大B.Ag增多时,B/(B+F.比值减小CAg增多时,B增大DAg增多时,B+F减小EAg增多时,F值减小正确答案:B参考解析:待测Ag与标记Ag竞争结合抗体,待测Ag增多时,处于结合态的标记抗原(B)减少,而处于游离态的标记抗原(F)增加,故B∕(B+F)比值减小。
5、单选免疫放射测定(IRMA)和RIA的区别中,错误的是()A.RIA使用标记抗原,IRMA使用标记抗体B.RIA检测抗原,IRMA检测抗体C.RIA中抗体结合标记抗原的量与被测抗原浓度成反比,而IRMA中成正比D.RIA中需对B、F分别作放射强度测定,IkMA只测上清液的放射强度E.IRMA为非竞争结合,RIA为竞争抑制正确答案:B6、单选常见放射免疫分析用的碘同位素为OA.1231B.1241C.1251D.1261E.1271正确答案:C参考解析:放射免疫分析常用的放射性核素为1251、1301、3H、14C等。
