梅毒检测方法分类、结果临床意义、临床检查优缺点、试验筛查策略及检测结果解释
梅毒血清学检测策略
1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验：•原理：梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放的类脂物质，刺激机体产生抗类脂抗体（反应素）。
在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应，形成凝集反应。
•方法：VDRL (venereal disease research laboratory test) USR (unheated serum reagin test )RPR (rapid plasma reagin circle card test) TRUST (tolulized red unheated serum test)特点：非特异性反应，一、梅毒血清试验2、梅毒螺旋体抗原血清试验基于TP特异性抗原，检测TP抗体TPPA TPPA物，荧光镜下，TP呈苹果绿色荧光。
阴性弱阳性阳性图18-1 TP抗体酶联免疫法试验双抗原夹心一步法原理图18-2 TP抗体酶联免疫法试验双抗原夹心二步法原理•电化学发光(ECLIA)免疫检测原理亲和素5）TP-RT胶体金法：•临床：用于梅毒筛查•注意：高敏感性，特异较？IgG 特异性总抗体特异性IgG 抗体特异性IgM 抗体5-7周 反应素抗体变化规律Comparison of three syphilis serodiagnosis algorithms and clinical 665 RPR-/TPPA+ patients were excluded from positive serodiagnosis due to a missed diagnosis rate of 24.2% (665/2,749).Man-Li Tong, et al. Analysis of three algorithms for syphilis serodiagnosis and implications for clinical management. ClinicalInfectious Diseases 2014;58:1115-1124.The traditional algorithm•One lab ：•98%EIA +/PRP+→•TP-PA+•CDC. Discordant results from reverse sequence syphilis screening--five laboratories ，United States ，2006-2010. MMWR. Morbidity and mortality weekly report ，2011，60(5): 133.特点：仅检测活动性梅毒。
trust检测标准
trust检测标准
Trust检测，也称为梅毒甲苯胺红不加热血清试验，是一种用于检测梅毒螺旋体抗体的试验方法。
其原理是利用梅毒螺旋体抗原与抗体相结合的原理，检测血清中的反应素。
Trust检测标准主要包括以下几个方面：
正常值范围：Trust检测的正常值范围为阴性或1:2（或1:4）以下。
如果Trust滴度为阴性，说明没有感染梅毒或已经完全治愈。
如果Trust滴度为1:2或1:4，说明体内存在梅毒抗体，但滴度较低，可能处于感染早期或者治愈后复发阶段。
阳性结果判断：如果Trust滴度超过正常值范围，即为阳性结果，说明感染了梅毒螺旋体。
此时需要进一步进行确证试验，如TPPA（梅毒螺旋体颗粒凝集试验）等，以确定是否真正感染了梅毒。
检测方法：Trust检测通常采用静脉采血的方式，将血液分离出血清后进行检测。
也可以采用试纸检测，但准确率相对较低。
临床意义：Trust检测主要用于梅毒的诊断和疗效观察。
如果Trust滴度升高，说明病情在进展或者治疗无效。
如果Trust滴度下降或转阴，说明病情得到控制或者治疗有效。
需要注意的是，Trust检测标准并不是唯一的诊断依据，还需要结合临床其他指标和患者的病史进行综合判断。
同时，
由于Trust检测的灵敏度和特异性存在一定的局限性，可能会出现假阳性和假阴性结果，需要进一步确证和排除其他干扰因素。
2024版梅毒PPT培训课件
诊断标准及流程
01
02
03
04
三期梅毒
皮肤粘膜损害、近关节结节、 主动脉炎及神经梅毒等为主要
表现。
询问病史
包括性接触史、输血史、母婴 传播等。
体格检查
全面检查皮肤、粘膜、淋巴结 等。
实验室检查
包括暗视野显微镜检查、梅毒 血清学试验等。
实验室检查方法
暗视野显微镜检查
直接观察病损部位病原体，适用 于一期、二期梅毒的皮损检查。
梅毒PPT培训课件
目录
• 梅毒概述 • 诊断与鉴别诊断 • 治疗与预防策略 • 并发症识别与处理 • 患者教育与心理支持 • 总结与展望
01
梅毒概述
定义与发病机制
定义
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性 传染病，主要通过性接触传播。
发病机制
梅毒螺旋体侵入人体后，在皮肤和黏膜 下繁殖，引起局部病变。随后，病原体 进入血液，播散至全身各器官和组织， 引起广泛的病变。
提高梅毒防治意识和能力
加强宣传教育 通过多种渠道和形式加强梅毒防治知识 的宣传教育，提高公众对梅毒的认识和
重视程度。 加强监测和报告制度 完善梅毒的监测和报告制度，及时发 现和控制梅毒的传播和流行。
提高医务人员的专业素养 加强对医务人员的培训和教育，提高 其梅毒诊断和治疗的专业素养和能力。
加强合作与交流 加强国内外相关机构之间的合作与交 流，共同推进梅毒防治工作的深入开 展。
梅毒血清学试验
包括非特异性抗体检测和特异性 抗体检测。
非特异性抗体检测
如快速血浆反应素环状卡片试验 （RPR），用于梅毒的筛查和疗 效观察。
特异性抗体检测
如梅毒螺旋体颗粒凝集试验 （TPPA），用于梅毒的确诊。
梅毒螺旋体血清学试验常用方法
梅毒螺旋体血清学试验常用方法梅毒螺旋体血清学试验常用方法梅毒是一种由梅毒螺旋体感染引起的性传播疾病，其在世界范围内广泛存在。
为了准确诊断梅毒，血清学检测是一种常用的方法。
本文将介绍梅毒螺旋体血清学试验的常用方法，旨在帮助读者更全面、深入地了解这一主题。
1. 微量血试验微量血试验是常用的梅毒螺旋体血清学试验之一。
它的优势在于只需要很少的血液样本，却能提供准确可靠的结果。
该试验通过检测患者血液中的抗梅毒螺旋体抗体来诊断梅毒。
这些抗体在感染后数周内开始产生，并持续存在于血液中。
微量血试验通常采用凝集试验、免疫层析试验或酶联免疫吸附试验等方法进行。
2. 血清螺旋体沉降率试验血清螺旋体沉降率试验是另一种常用的梅毒螺旋体血清学试验。
该试验可以评估患者血清中的梅毒螺旋体抗体的水平。
试验原理是将患者血清与一定量的抗原（梅毒螺旋体）混合，并在一定时间内观察螺旋体与血清中的抗体结合沉降形成的沉降率。
沉降率越高，说明血清中的抗体水平越高，暗示患者可能存在梅毒感染。
3. 链球菌溶血试验链球菌溶血试验是一种常见的反应型血清学试验，也可用于梅毒的检测。
该试验基于患者血清中的抗链球菌溶血素抗体与试剂中的链球菌溶血素结合的反应。
通过测定溶血素结合率，可以评估患者血清中的抗体水平。
一旦患者感染了梅毒螺旋体，抗链球菌溶血素抗体的水平会升高，从而反映出可能存在梅毒感染。
总结回顾：梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的常用方法。
微量血试验、血清螺旋体沉降率试验和链球菌溶血试验是其中常见的三种方法。
微量血试验通过检测患者血液中的抗梅毒螺旋体抗体来诊断梅毒；血清螺旋体沉降率试验通过观察螺旋体与血清中的抗体结合沉降形成的沉降率评估抗体水平；链球菌溶血试验则是通过测定抗链球菌溶血素抗体的结合率进行评估。
这些试验的目的都是为了准确诊断梅毒感染，帮助患者尽早接受治疗以防止疾病的进展和传播。
个人观点和理解：虽然梅毒螺旋体血清学试验在梅毒的诊断中发挥着重要的作用，但我们也需要意识到这些试验对梅毒感染的早期诊断有一定的局限性。
梅毒筛查(TRUST)实验操作规程
梅毒筛查（TRUST）实验操作规程
一、原理：
采用VDRL抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液中制成。
供在白色卡片上进行试验，以检测血清或血浆中反应素用。
可作为梅毒病人的诊断和疗效之参考。
二、操作步骤：
1、定性试验：
①分别吸取50ul梅毒阳性对照和阴性对照均匀铺加在纸卡的两个圆圈中。
②取待检血清或血浆50ul（不需灭活）置于纸卡的另一圆圈中。
③用专用滴管及针头垂直分别滴加TRUST试剂1滴于上述血清中。
④按每分钟100转摇动8分钟，肉眼观察结果。
㈡定量试验：
将待检血清用生理盐水作倍比稀释，然后按上述定性方法进行试验，以呈现明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。
三、结果判断：
①阳性反应（+++～++++）：可见中等或较大的红色凝聚物。
②弱阳性反应（+～++）：可见较小的红色凝聚物。
③阴性反应（-）：可见均匀的抗原颗粒而无凝聚物。
四、注意事项：
①本试验在23～29℃条件下进行。
②TRUST试剂使用前应充分摇匀。
③本试验系非特异性反应，需结合临床进行综合分析，必要时需作梅毒螺旋体抗体特异性试验。
五、正常值：阴性
六、临床意义：
作为诊断梅毒的初筛试验。
TRUST为非梅毒螺旋体抗原试验，此试验敏感性很高，而特异性较差，一些非梅毒病人血清中可暂时或长期测出反应素，称为生物学阳性（BFP）。
故对结果的解释需结合临床具体分析。
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梅毒螺旋体检测标准操作规程
目 的：规范的梅毒螺旋体检验操作，确保检测结果准确。
适用范围：性病实验室工作人员责任 人：实验操作者1、标本的采集与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1操作应规范化。
1.1.2所有标本都应当被视为具有传染性，医务人员应戴手套谨慎操作。
1.2梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法，各期梅毒的检测方法及部位见下表。
1.2.1血液1.2.1.1血清标本根据需要，用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml，室温静置1-2小时（或37℃静置30分钟），待血液凝固、血块收缩后，3000r/min离心10-15分钟，分离新鲜血清，备用。
也可采用保存于2-8℃或-20℃的血清。
溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。
1.2.1.2血浆标本根据需要，用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml，轻轻颠倒混匀8-10次，3000r/min离心10-15分钟，分离血浆，备用。
血库血浆以及EDTA 抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验（一般仅用于RPR实验，），但易出现假阳性反应（需用血清复试），如用其他抗凝剂应首先评价后再用。
1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂，1岁以下儿童采用足跟部）。
一次性采血针刺破皮肤，用无菌棉签擦掉第一滴血。
收集滴出的血液，立即用于检测。
1.2.2皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测，或取渗出液直接涂片，用于镀银染色试验。
1.2.2.2用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，刮取渗出液，加入有DNA保存液（1ml/管）的标本管中，备用。
1.2.3淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结，注入0.3ml无菌生理盐水并反复抽吸2-3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片后立即进行暗视野镜检或备用。
梅毒诊断标准解读及梅毒热点问题探讨最新
• 或疑似病例+非梅毒螺旋体血清学试验阳性
+梅毒螺旋体血清学试验阳性。
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27
❖1.3点评：
（1）强调流行病学史的重要性；
（2）疑似病例不能仅凭临床表现，应至少有RPR或 TRUST结果阳性；
（3）确诊病例强调暗视野病原体的检查意义（即确 诊意义），也强调特异性和非特异性检测同时阳 性的意义；
梅毒诊断标准（2016版）解读 及梅毒热点问题探讨
&
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1
❖第一部分：梅毒诊断标准 （2016版）解读
❖第二部分：梅毒热点问题探讨
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2
1 各期梅毒表现
第一部分 2 检测方法及意义目录3 梅毒诊断依据4 点评
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3
（一）梅毒 定义
❖梅毒是苍白螺旋体（梅毒螺旋体）感 染人体所引起的一种系统性、慢性经典 的性传播疾病，可引起人体多系统多脏 器的损害，产生多种多样的临床表现， 导致组织破坏、功能失常，甚至危及生 命。
类似于获得性二期梅毒。
临床表现：
(1)发育不良； (2)皮损常为水疱-大疱、红斑、丘疹、扁平湿疣； (3)梅毒性鼻炎及喉炎； (4)骨髓炎、骨软骨炎及骨膜炎； (5)可有全身淋巴结肿大、肝脾肿大、贫血等。
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12
➢ 2. 晚期胎传梅毒：一般在2岁以后发病，
类似于获得性三期梅毒。
临床表现：
（1）炎症性损害（间质性角膜炎、神经性耳聋、鼻 或腭树胶肿、克勒顿关节等）
（5）确诊隐性梅毒强调非梅毒螺旋体试验和梅毒螺 旋体试验双阳性。
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37
❖ 5.1胎传梅毒（疑似病例）：
梅毒血清学检测的操作规范
TPPA操作步骤
试剂准备：恢复室温 加稀释液：每份样本做4孔，加标本稀释液 加至微量反应板孔内，第1孔100μL，第2～4 孔各25μL 样本稀释：取血清25μL加至第1孔，混匀后 取25μL至第2孔，混匀后取25μL至第3孔，混 匀后取25μL至第4孔，混匀后弃去25μL 加对照液：第3孔加未致敏颗粒25μL，第4孔 加致敏 颗粒25μL 混合：将反应板置振荡器振荡30秒 反应：孵育2h观察结果
TPPA结果判读
观察第3孔，不出现凝集为有效试验
TPPA结果判断
观察凝集反应强度：分级如下
4+~3+：颗粒光滑覆盖整个孔底，有时边缘有折叠
2+：颗粒光滑集聚覆盖孔底，周围有一颗粒环
1+： 颗粒光滑集聚覆盖孔底，周围有一明显颗粒环
±：颗粒模糊覆盖，边缘有明显的小环
一：颗粒紧密沉积孔底中央或形成一小点
50.0
-
50.0
抗原悬液(ul) 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7
非梅毒螺旋体抗原检测意义
早期梅毒硬下疳出现1~2周后，血清学可 呈阳性 梅毒患者经治疗后血清滴度可下降并转 阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发 或再感染的指征 为什么要做定量检测？
滴度常与病情活动相关，滴度改变4倍具有 临床意义
梅毒血清试验假阳性因素：
技术性
标本的污染 溶血 操作失误 患者有其他疾病，使梅毒血清试验出现阳性 生理机能发生变化：少数孕妇也可发生生物 学假阳性
各期梅毒试验诊断方法
二，梅毒血清学筛查策略：
梅毒筛查策略 I RPR/TRUST阳性 TPPA/FTA阳性
梅毒
特点：传统方法，漏检高（15%），现症。
梅毒筛查策略 II：
TP-ELISA阳性 TPPA阳性确证（阳性） TRUST阳性 梅毒
一期梅毒
1-3月
二期梅毒
1-3月
潜伏梅毒
28%三期梅毒 梅毒树胶肿
2-50年
心血管梅毒
72% 终生潜30伏% 梅毒
脊髓痨, 麻痹性痴呆
[2]Gjestland, T. 1955. The Oslo study of untreated syphilis; an epidemiologic investigation of the natural course of the syphilitic infection based upon a re-study of the Boeck-Bruusgaard material. Acta Derm. Venereol. 35:3–368;
转阴率
1.14％ 17.65％ 39.91%
40％ 23.08％
累计阴转率
1.14％ 18.59％ 44.57% 66.74％ 74.42％
[1]顾伟鸣等，先天梅毒的血清学随访，中华传染病杂志 2007，25（2）：117-119
误诊率？？？？ 检测能力差！！
2011年梅毒诊断试剂临床评估结果
中国性病控制中心，广西皮肤病防治研究所、北京市CDC、云南省 CDC、甘肃省CDC、浙江省皮肤病防治研究所等
[18]Baughn, R. E., and R. F. Schell. 2001. Immune responses to Treponema pallidum and Borrelia burgdorefi, p. 27.1–27.7. In R. R. Rich (ed.), Principles and
梅毒实验室诊断(刘利洪)
暗视野检查法
临床意义 1、检测阳性，在临床上可确证梅毒； 2、如未能发现梅毒螺旋体，不能排除诊断； 3、无论暗视野显微镜检查的结果如何，都应进一步 进行血清学检测。
镀银染色检查
检测原理 梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染成棕黑色， 可以从普通高倍显微镜下观察到梅毒螺旋体。
镀银染色检查
仪器器材 1、普通显微镜 2、加拿大树胶 3、罗吉固定液 4、鞣酸媒染剂 5、Fontana银溶液 6、无水乙醇 7、无菌纱布等取材用品
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
定性试验 （1）试剂准备：复室温30分钟 （2）加标本：样本量50ul； （3）加抗原：抗原量（60±1滴/ml，约17ul/滴） （4）反应：反应时间8min （5）读取结果
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
定量试验
抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴 抗原1滴
如何就目前高发的性病，尤其是对梅毒进行有效监测 和控制？ 如何对高危人群及潜在易感人群进行筛查，主动发现 无症状的性病感染者？ 如何确定感染的病原体种类？
——需要完善的实验室检测工作，包括检测能力建设 和质量控制
性病防治工作的重点 两个系统 疫情监测系统 实验室检测系统-实验室检测能力和质量控制 一个服务 规范化医疗服务
注意：应把每一份样本当作强阳性样本来处置和对待！！
பைடு நூலகம்
快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)
仪器：水平旋转仪（要求？） 试剂盒： （1）含有活性碳的抗原悬液； （2）一个标定的9号针头（0.9mm）； （3）压印有18mm直径圆圈的封塑环状卡 片； （4）内部对照； 为了保证试验结果的可靠性，以及 每批试剂间的可比性，应制备外部对照 血清 （5）50ul量程移液器和吸头 （6）0.9%无菌生理盐水
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梅毒检测方法分类、结果临床意义、临床检查优缺点、试验筛查策略及检测结果解释
在医学上梅毒常用的检测方法主要分为两类，一类是病原学检测；另一类是血清学检测。
病原学检测法：以直接观察病原体为目的的检测，目前在临床上应用的较少，能够开展的医院也不多。
病原学检测
1、暗视野显微镜检查
2、镀银染色检查
血清学检测
血清学检测则又包括两大类：
1、以非梅毒螺旋体抗原的血清试验：
（1）VDRL(性病研究实验室试验)
（2）USR（不加热血清反应素试验）
（3）RPR(加速血浆反应素环状卡片试验)
（4）TRUST(甲苯胺红不加热血清试验)
目前RPR和TRUST是我国主要采取的两种非梅毒螺旋体抗原血清检测方法。
2、以梅毒螺旋体抗原的血清试验：
（1）FTA-ABS（密螺旋体荧光抗体吸收）
（2）TPPA/ TPHA(梅毒密螺旋体凝集试验)
（3）TP-ELISA(酶联免疫吸附试验)
（4）CIA（发光法）
（5）GICA（胶体金免疫层析法）
（6）WB（蛋白印迹试验）
（7）PCR聚合酶链反应
（8）梅毒螺旋体IgM抗体检测
通过检查血液中的抗体来判断是否感染的检测，是在临床上广泛被采用的检验梅毒的手段，血清学检查主要有以下几点优点：
1、实验过程更为方便，更利于用于普遍的筛查，部分实验可以实现自动化。
2、实验结果更为稳定，更为直观，可作为梅毒的确诊实验。
3、实验结果临床意义更丰富，不仅可以作为梅毒的确诊标准，也可以用于观察疗效，复发等。
缺点：由于使用的不是梅毒的特异性抗原，非特异性抗原（心磷脂）可以和很多疾病产生交叉的阳性反应，导致结果出现假阳性结果，大部分的假阳性滴度小于1:4。
梅毒血清学试验较容易出现生物学假阳性反应，可分为急性及慢性两类。
急性生物学假阳性反应见于很多非梅毒的感染性疾病，如：风疹、麻疹、水痘、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎、牛痘疹、活动性肺结核、丝虫病、回归热及钩端螺旋体病等。
随着疾病的消退，在6个月内一般都转为阴性。
慢性生物学假阳性反应见于系统性红斑狼疮、麻风、干燥综合征、系统性硬化症、慢性肝脏疾病、类风湿性关节炎、老年等。
可持续数月或数年，甚至终身。
临床上检测梅毒较常用检测方法有：化学发光法\ELISA、TRUST\RPR、TPPA，优缺点如下：
化学发光法\ELISA：其敏感度及特异性较高，在操作中可以同一时间进行多份抗体检验，方法较简单，常用来进行大批量的筛查。
缺点：结果阳性不能区分既往感染和现症感染。
TRUST\RPR：该方法操作简便、迅速，适用于大量标本检测。
用于临床初筛试验、梅毒的病程和疗效观察。
缺点：TRUST在硬下疳出现后4周才能检出，对一期梅毒检出率较低，适合诊断二期梅毒。
还易出现生物学假阳性反应；肉眼观察结果，判断主观。
TPPA：敏感性和特异性均较高，能够作为非梅毒螺旋体抗原血清学试验初筛阳性标本的确证试验。
缺点：手工操作，步骤繁琐，对操作人员要求较高。
结果依赖肉眼判断且不宜保存，不适用于大批量筛查实验。
梅毒血清学试验筛查策略
临床上可根据实验室条件选择任何一类血清学检测方法作为（初筛）试验，但初筛阳性结果需经另一类梅毒血清学检测方法复检确证，才能够为临床诊断或疫情报告等提供依据，有条件时亦可同时做这两类试验。
梅毒血清学检测结果解释。