耐热大肠菌群原始记录表
原始记录单控制编号：
第1页共2页
耐热大肠菌群检验数据原始记录
委托书编号：委托单位：
检测项目：耐热大肠菌群检测依据： GB/T 5750.12-2006 3.1 多管发酵法
样品名称：样品数量：
样品编号：样品状态：
收样日期：检测日期：
环境温度：环境湿度：
操作方法：
一、乳糖发酵实验
1、取10ml水样接种到10ml双料乳糖蛋白胨培养液中，取1ml水样接种到10ml单料乳糖蛋白胨培养
液中，另取1ml水样注入到9ml灭菌生理盐水中，混匀后吸取1ml (即0.1ml水样）注入到10ml单料
乳糖蛋白胨培养液中，每一稀释度接种5管。对已处理过的出厂自来水，需经常检验或每天检验一次
的，可直接种5份10ml水样双料培养基，每份接种10ml水样。
2、检验水源水时，如污染较严重，应加大稀释度，可接种1，0.1，0.01ml甚至0.1，0.01，0.001ml,每
个稀释度接种5管，每个水样共15管。接种1ml以下水样时必须作10倍递增稀释后，取lml接种，
每递增稀释一次，换用1支lml灭菌刻度吸管。
3、将接种管置36±l°C培养箱内，培养24h±2h,如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸，则可报告为总
大肠菌群阴性，如有产酸产气者，则按下列步骤进行。
4、如检测未经氯化消毒的水，且只想检测耐热大肠菌群时，或调查水源水的耐热大肠菌群污染时，可
用直接接种乳糖蛋白胨培养液在44.5±0.5°C水浴中培养，其余步骤同。
二、分离培养：
经培养24h后，将产酸产气的发酵管，分别取一滴接种于EC培养基，置于44.5°C水浴箱培养24h ±2h ,
如有产气者，按下列步骤进行。
三、证实试验：
将产气的发酵管，转种于伊红美兰琼脂平板上，置于44.5°C培养18-24h，凡平板上有典型菌落者，即
证实为耐热大肠菌群阳性。
培养基 培养温度 培养时间
二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液
36±1°C 24h±2h
乳糖蛋白胨培养液
36±1°C/44.5±0.5°C 24h±2h
EC培养基
44.5±0.5°C 24h±2h
原始记录单控制编号：
第2页共2页
EMB 44.5°C 18-24h
观察结果
序号
样品 编号 乳糖发酵 EC EMB 结果报告
(MPN/100mL)
10ml 1ml 0.1ml 10ml 1ml 0.1ml 10ml 1ml 0.1ml
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
操作人：复核人：
食品大肠菌群检验原始记录表
食品大肠菌群检验原始记录样品编号：检验开始时间：年月日样品名称：检验完成时间：年月日检测项目：大肠菌群检测依据：GB4789.3-2016(第二法)平板计数法，按菌落总数测定方法制备l00、10-1、10-2、10-3、10-4……稀释液。
选择2-3个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种2个无菌平板，每皿1ml，同时取1ml生理盐水加入两个无菌平皿内作空白对照，及时将15-20ml冷至46℃的VRBA倾注平皿，小心旋转平皿混合均匀，待琼脂凝固再加3-4mlVRBA覆盖，36±1℃培养18-24h,观察，可疑菌落分别移种BGLB肉汤管中，进行证实实验，36±1℃培养24-48h,观察，产气者记为大肠菌群阳性。
注：○+产气；+有可疑菌落；-不产气或无可疑菌落；电子天平编号：使用状况试验前：试验后：培养箱编号：使用状况试验前：试验后：检测人：校核人：审核人：食品菌落总数检验原始记录样品编号：检验开始时间：年月日样品名称：检验完成时间：年月日检测项目：菌落总数检测依据：GB4789.2-2016无菌操作称（量）取样品25g或ml加入225ml的无菌生理盐水中，均质2分钟，做成1℃10样品液。
取1℃10稀释液1ml加入到9ml生理盐水中，混匀，做成1℃100样品均液。
以上法制备10倍系列稀释样品均液。
选择2-3个适宜稀释度的样品均液，吸取1ml样品均液于无菌平皿内，每个稀释度做2个平皿。
同时，分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照，及时将15-20ml冷至46℃的平板计数培养基倾注平皿，转动平皿使其混合均计算及结果：菌落总数（CFU/g，ml）：电子天平编号：使用状况试验前：试验后：培养箱编号：使用状况试验前：试验后：检测人：校核人：审核人：。
大肠菌群原始记录
样品编号
LST肉汤初发酵试验培养温度℃，培养开始时间年月日点分，培养结束时间年月日点分。
用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，接种于煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）管中，培养观察。
样
品
编
号
BGLB肉汤复发酵试验
培养温度℃，培养开始时间年月日点分，培养结束时间年月日点分。
结果报告
MPN/mL
备注：+：阳性-：阴性
绥芬河出入境检验检疫局综合技术中心密山实验室
ZJ-03-107大肠菌群检验原始记录
样品名称：样品号：
检验日期：验讫日期：标准物质Biblioteka 号检验依据设备编号
大肠菌群计数
第一法大肠菌群MPN计数法：取检样25g(ml)+225ml，用均质器均质1min，制成1:10的样品匀液。按10倍递增稀释，选取6个适宜的稀释倍数，接种LST肉汤管，每个稀释度接种三管，培养观察。
微生物检测原始记录之欧阳科创编
XXXX检测有限公司
菌落总数与大肠菌群检验原始记录
共页第页
主检：年月日校核：年月日
XXXX检测有限公司
菌落总数和大肠菌群检测原始记录
共页第页
主检：年月日校核：年月日
XXXX检测有限公司
水质微生物检验原始记录
共页第页
主检：年月日校核：年月日
XXXX检测有限公司
乳酸菌与大肠菌群检测记录
共页第页
主检：年月日校核：年月日
XXXX检测有限公司
致病菌检验原始记录
共页第页
主检：年月日校核：年月日
XXXX检测有限公司
霉菌和酵母菌检验原始记录
共页第页
培养温度：28±1℃培养时间：年月日时年月日
时：
菌落计数：
培养温度：28±1℃培养时间：年月日时年月日
时
主检：年月日校核：年月日
XXXX检测有限公司
商业无菌检验原始记录
共页第页
主检：日期：校核：日期：。
大肠菌群检验原始记录(第二法)
原始记录
共页；第页项目名称大肠菌群样品编号
使用设备名称电热恒温培养箱手提式压力蒸汽消毒器
试验方法标准GB 4789.3-2010(第二
法)
环境条件温度℃，相对湿度 %
以无菌操作将检样25g置于225mL灭菌生理盐水中，混匀后，做成检验所用稀释液：分别将待检样品稀释液接种于2个VRBA平板混匀，待琼脂凝固后，再加3mL-4mLVRBA覆盖平板表层。
翻转平板，置于36℃±1℃温箱内，培养18h-24，计数典型和可疑菌落。
选取典型菌落或可疑菌落进行证实试验，观察产气情况。
稀释度
典型菌落总数cfu/ml n 1
n 2
n 3
n 4
n 5
证实试验从VRBA平板上挑取10个典型菌落或可疑菌落，分别移种于BGLB肉汤管，36℃±1℃温箱内，培养24h-48h.凡BGLB肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。
检测结果
备注n为同一批次产品应采集的样品件数；c为最大可允许超出m值的样品数；m为致病菌指标可接受水平的限量值;M为致病菌指标的最高安全限量值
检验人员校核人员检验日期校核日期。
大肠菌群测定原始记录
要求：初发酵试验：36℃±1℃；24h±2h或48h±2h。复发酵试验：36℃±1℃；48h±2h。
初发酵：＿月＿日＿时至＿月＿日＿时；复发酵：＿月＿日＿时至＿月＿日＿时。
稀释度
管号
接种量
（ml）
初次发酵
导管有
无气泡
阴
阳
性
复发酵
导管有
无气泡
阴
阳
性
大肠菌群最有可能数（MPN/100g）
LST肉汤
BGLB肉汤
大肠菌群测定原始记录
编号：
样品名称
规格型号
生产批次
抽样数量
检验标准
GB4789.3-2010
生产日期
检验日期
样品
处理
无菌操作取检样25g，加225ml无菌生理盐水，均质处理得1:10稀释液，再用灭菌生理盐水按梯度稀释，得1:100、1:1000稀释液，选择三个连续的适宜稀释度接种发酵管，双料发酵管接种稀释液10ml，单料发酵管接种稀释液1ml。
备注：
检验员：年月日校核员：年月日
1:10
1
24h( ) 48h( )
2
1
24h( ) 48h( )
3
1
24h( ) 48h( )
1:100
1
1
24h( ) 48h( )
2
1
24h( ) 48h( )
3
1
24h( ) 48h( )
1:1000
1
1
24h( ) 48h( )
2
1
24h( ) 48h( )
3
1
24h( ) 48h( )
大肠菌群检验原始记录第二法
共页；第页
项目名称
大肠菌群
样品编号
使用设备名称
电热恒温培养箱手提式压力蒸汽消毒器
试验方法标准
GB4789.3-2010（第二
法）
环境条件
温度C,相对湿度％
以无菌操作将检样25g置于225mL灭菌生理盐水中，混匀后，做成检验所用稀释液：分别将待检品稀释
液接种于2个VRBA平板混匀，待琼脂凝固后，再加3mL-4mLVRBAg盖平板表层。翻车t平板，置于36C±
1C温箱内，培养18h-24,计数典型和可疑菌落。选取典型菌落或可疑菌落进行证实试验，观察产气情况。
稀释度
典型菌落总数
cfu/ml
n1
n2
n3
n5
证实试验
从VRBAF板上挑取10个典型菌落或可疑菌落，分别移种于BGLB肉汤管，
36c±1C温箱内，培养24h-48h.凡BGLB肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。
检测结果
备注
n为同一批次产品应采集的样品件数；c为最大可允许超出m值的样品数；m为致病菌指标可接受水平的限量值；M为致病菌指标的最高安全限量值
检验人员
校核人员
检验日期
校核日期
大肠菌群检验原始记录
初发酵（月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤，）支）
产气管数（支）
复发酵(煌绿乳糖胆盐
肉汤，
37℃，,48h)
产气管数（支）
10-1
10-2
10-3
检验结果
（MPN/100g）
检验人：复核人：
大肠菌群检验检验原始记录
样品名称
明胶
样品编号
样品状态
生产日期
检验依据
GB4789.3-2010
检验日期
大肠菌群检验过程：
1、称取样品25g样品放入盛有225ml灭菌的生理盐水中，制成1：10的样品匀液，用1ml无菌吸管吸取1：10的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：100的样品均液，用1ml无菌吸管吸取1：100的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：1000的样品均液。
2、初发酵试验：大肠菌群每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤（大肠菌群测定：如果超过1ml，则用双料LST肉汤），36℃±1℃培养24h±2h，观察倒管内产气情况。如未产气，培养至48h±2h，如产气着进行复发酵试验。
三、复发酵试验：（大肠菌群的测定）用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿糖胆盐肉汤（BGLB）管中，36℃±1℃培养48h±2h，，观察产气情况。
大肠菌群检验原始记录-MPN法
检验单位
xxxx公司 检验室
检验员
张xx
检验日期
2022-xx-xx至2022-xx-xx
环境条件
温度xx℃，相对湿度（RH）xx%
检验依据
GB4789.2-2016 《食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠菌群计数》第一法
检验编号
20220606xxx
样品名称
xxxx
样品批次
2022xxxx
仪器设备及耗材：
天平：(xxxx)洁净工作台: (xxxx)培养箱:ຫໍສະໝຸດ (xxxx)培养基及试剂：
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）：xxxx配制日期2022/xx/xx
煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）：xxxx配制日期2022/xx/xx
磷酸盐缓冲液：xxxx配制日期2022/xx/xx
-
阴性
报告人
报告日期
复核人
复核日期
将以上 LST置于 36.0 ±1℃，培养24h±2h（2022/xx/xxxx时~2022/xx/xxxx时），观察导气管内是否有气泡产生。如产气，进行证实实验，如未产气继续培养至48h±2h（2022/xx/xxxx时~2022/xx/xxxx时），产气，进行复发酵实验，不产气报告结果为阴性。
4.证实试验（接种BGLB）
实验过程：
1.样品处理和稀释：
1.1如需要，使用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸将样品调整pH在6.5~7.5之间。
1.2 制备样品稀释液
无菌操作，称取/吸取 25g（mL）样品，加入到 225mL 无菌磷酸盐缓冲液中均质（混匀），制成 1:10 样品匀液。吸取1:10样品匀液1mL，沿试管壁注入盛有9mL无菌磷酸盐缓冲液的试管中， 涡旋混匀，制成1:100的样品匀液。根据对样品污染情况的估计，按上述操作将样品稀释至所需浓度。
大肠菌群-原始记录
检测项目：菌落总数大肠菌群
样品名称
样品编号
样品状态和特性
生产单位
型号规格
使用仪器设备及试验环境
生化培养箱;压力蒸汽消毒锅
菌落总数
GB4789.2-2010
操作过程：
培养基
100
10—1
10—2
10—3
10—4
空白
cfu/ml（g）
平板计数琼脂培养基
注解：为进行此项目测试；+:阳性—:阴性（不产气）
微生物检验原始记录
检测项目：菌落总数大肠菌群
样品名称样品编号样品状态和来自性生产单位型号规格
使用仪器设备及试验环境
生化培养箱;压力蒸汽消毒锅
菌落总数
GB4789.2-2010
操作过程：
1、配制200mL平板计数琼脂培养基于250mL三角烧瓶中，配制0.85%的生理盐水300mL,分别吸取9mL生理盐水置于2个试管中，将三角瓶、试管加塞棉塞，用报纸包好。
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤
煌绿乳糖胆盐肉汤
MPN/ml（g）
注解：为进行此项目测试；+:阳性—:阴性（不产气）
主检：检验日期：年月日验讫日期：年月日
6、选择样品匀液10-1、10-2、10-3，分别吸取1ml加入无菌平皿内，分别吸取1mL稀释液（无菌生理盐水）加入平皿内做空白。
7、将15-20mL冷却至46℃的平板计数琼脂培养就倾注平板内，并转动平皿，使其混合均匀，待琼脂凝固后将平皿翻转。
8、将平皿于36±1℃的生化培养箱内培养48h±2h,计数。
培养基
100
10—1
水质微生物检测原始记录
1ml
0.1ml
366nm紫外荧光
报告值（MPN/100ml）
酶底物法
100ml水样加入2.7g±0.5gMMU-MUG培养基粉末：摇匀使之溶解
定性反应
℃培养h
结果判读：无变化（）变黄（）有荧光（）
报告值（MPN/100ml）
10管法
分装10管℃培养h
结果判读
报告值（MPN/100ml）
51孔定量盘法
样品名称：
样品编号：
检测时间：年月日
检测项目：菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠、大肠埃希氏菌
检测技术依据：
培养箱型号及编号：
检测环境条件：无菌室温度：℃湿度：%RH
检测
稀释度（倍）
1
10-1
10-2
10-3
空白
培养条件
℃培养h
平板菌落数
报告值（CFU/ml）
总大肠菌群检测
发酵法
培养基名称
乳糖蛋白胨培养液
稀释度（加样量）
10ml
1ml
0.1ml
0.01ml
初发酵（℃、h）
分离平板
革兰氏染色
复发酵（℃、h）
报告值（5gMMU-MUG培养基粉末：摇匀使之溶解
定性反应：℃培养h
结果判读：无变化（）；颜色变黄（）
报告
10管法：分装10管℃培养h
结果判读：黄色反应的试管数：
报告值（MPN/100ml）
51孔定量盘法：加入51孔定量盘内排气封口℃培养h
结果判读：黄色反应的孔穴数：
报告值（MPN/100ml）
耐热
大肠
菌群
培养基名称
稀释度（加样量）
10ml
1ml