人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书
ELISA法检测甲胎蛋白异质体用于肝癌诊断的探讨
ELISA法检测甲胎蛋白异质体用于肝癌诊断的探讨
黄彩云;韩素桂;张景华;王晓蕊;李世龙;周秀艳
【摘 要】Objective To explore of clinical value of AFP-L3 in the diagnosis of
patients with HCC. Methods The serum AFP-L3 levels in 137 patients with
elevated AFP level were detected by ELISA. The patients were divided into
HCC group and benign liver disease group. Results The serum levels of
AFP-L3 in patients with HCC (109.04 ?2.51ng/mL) were significantly higher
than those patients with benign liver diseases
(25.96 ?9.43ng/mL,P<0.001).The area under the ROC curve of AFP-L3 level
in patients with HCC was 0.819. Taking AFP-L3 level =37.9ng/mL as
diagnostic criteria, the sensitivity of AFP-L3 level in HCC diagnosis was 83.
7% , and the specificity was 88.9% , with a total conformity rate of 85.4%
compared to the confirmed clinical diagnosis. Conclusion The serum AFP-
原发性肝癌早期诊断中AFP、AFP-L3、Fer、TSGF检验的准确性
中国现代医生2021年1月第59卷第2期
CHINAMODERNDOCTORVol.59No.2January2021窑肿瘤医学窑
原发性肝癌是临床较常见的恶性肿瘤袁流行病学显示[1-2]袁此病可发生于任何年龄段袁其中最常见的是40耀49岁群体袁具体划分为肝细胞肝癌尧胆管细胞肝癌袁如未及时诊断治疗袁极易危及生命袁因此探寻经济尧有效及可行的诊断方法袁逐渐成为医学界研究热点遥孙艳华等[3]认为袁诊断原发性肝癌时袁主要依赖于测定甲胎蛋白渊Alpha-fetoprotein袁AFP冤袁经流行病学显示袁10%的肝癌未有AFP产生尧30%的肝癌存在AFP含量较少袁诱导该指标呈阴性尧低浓度袁因此单纯AFP指标检测未能预测疾病是否发生袁临床应用受限遥基于上述背景袁本研究选择2018年1月至2020年4月我院收治的78例原发性肝癌患者为研究对象袁分析原发性肝癌早期诊断中AFP、AFP-L3、Fer、TSGF检验的准确性黄维南方医科大学顺德医院广东省佛山市顺德区第一人民医院肿瘤科袁广东佛山528300[摘要]目的探讨原发性肝癌患者早期诊断中应用甲胎蛋白渊AFP冤尧血清甲胎蛋白异质体渊AFP-L3冤尧铁蛋白渊Fer冤肿瘤特异性生长因子渊TSGF冤检验的准确性遥方法选择2018年1月至2020年4月我院收治的78例原发性肝癌患者作为观察组袁另择取同期78例健康体检者作为对照组袁早期诊断中均接受AFP尧AFP-L3尧Fer尧TSGF检验袁两组检验结果进行比较遥结果淤观察组AFP尧AFP-L3尧Fer尧TSGF指标均高于对照组袁差异有统计学意义渊P约0.05冤曰于对照组AFP渊3.85%冤尧AFP-L3渊3.85%冤尧Fer渊5.12%冤尧TSGF渊3.85%冤尧联合检测阳性率渊1.28%冤均低于观察组的76.92%尧79.49%尧78.21%尧79.49%尧97.44%渊P<0.05冤曰盂联合检测准确度渊98.70%冤尧特异度渊90.80%冤尧灵感度渊77.50%冤尧阳性预测值渊86.40%冤尧阴性预测值渊88.20%冤均高于AFP渊86.40%尧90.80%尧77.50%尧86.40%尧88.20%冤尧AFP-L3渊89.50%尧91.50%尧79.40%尧87.80%尧90.10%冤尧Fer渊87.20%尧91.50%尧78.30%尧82.50%尧89.60%冤及TSGF渊88.30%尧93.20%尧78.20%尧85.20%尧89.70%冤指标比较袁差异有统计学意义渊P约0.05冤遥结论AFP尧AFP-L3尧Fer尧TSGF联合检验能提高原发性肝癌患者疾病确诊率尧改善预后袁值得推广遥[关键词]原发性肝癌曰AFP曰AFP-L3曰Fer曰TSGF曰检验曰准确性[中图分类号]R735.1[文献标识码]B[文章编号]1673-9701渊2021冤02-0093-03AccuracyanalysisofAFP,AFP-L3,FerandTSGFtestsinearlydiagnosisofprimarylivercancerHUANGWeiDepartmentofOncology,ShundeHospitalofSouthernMedicalUniversity袁theFirstPeople忆sHospitalinShundeDistrictofFoshanCityinGuangdongProvince,Foshan528300,China[Abstract]ObjectiveToexploretheaccuracyofalpha-fetoprotein(AFP),serumalpha-fetoproteinvariants(AFP-L3),fer鄄ritin(Fer)andtumorspecificgrowthfactor(TSGF)testsintheearlydiagnosisofprimarylivercancer.MethodsAtotalof78patientswithprimarylivercanceradmittedtoourhospitalfromJanuary,2018toApril,2021wereselectedastheobservationgroup,andanother78healthysubjectsreceivedphysicalexaminationduringthesameperiodwereselectedasthecontrolgroup.Intheearlydiagnosis,AFP,AFP-L3,FerandTSGFweretested,andthetestresultsofthetwogroupswerecompared.Results淤TheindicatorsofAFP,AFP-L3,FerandTSGFintheobservationgroupwereallhigherthanthoseinthecontrolgroup(P<0.05,withstatisticallysignificantdifferences).于TheAFP(3.85%),AFP-L3(3.85%),Fer(5.12%),TSGF(3.85%)andpositiverateofcombineddetection(1.28%)inthecontrolgroupwerealllowerthanthoseintheobservationgroup(76.92%,79.49%,78.21%,79.49%and97.44%,P<0.05).盂Thecombineddetectionaccuracy(98.70%),specificity(90.80%),sensitivity(77.50%),positivepredictivevalue(86.40%),negativepredictivevalue(88.20%)wereallhigherthanAFP(86.40%,90.80%,77.50%,86.40%,88.20%),AFP-L3(89.50%,91.50%,79.40%,87.80%,90.10%),Fer(87.20%,91.50%,78.30%,82.50%,89.60%)andTSGF(88.30%,93.20%,78.20%,85.20%,89.70%),thedifferencewasstatisticallysignicant(P<0.05).ConclusionCombinedtestsofAFP,AFP-L3,FerandTSGFcanim鄄provethediagnosisrateandprognosisofprimarylivercancerpatients,whichisworthyofpromotion.[Keywords]Primarylivercancer;AFP;AFP-L3;Fer;TSGF;Test;Accuracy[基金项目]广东省佛山市自筹经费类科技计划项目渊医学类科技攻关冤渊2018AB000963冤93中国现代医生2021年1月第59卷第2期窑肿瘤医学窑
亲和吸附离心管法检测甲胎蛋白异质体用于诊断肝癌的研究
亲和吸附离心管法检测甲胎蛋白异质体用于诊断肝癌的研究
邢怀广;李捷;韩善乐
【摘 要】目的 采用亲和吸附离心管法检测甲胎蛋白异质体(AFP-L3),分析甲胎蛋白异质体AFP-L3在诊断肝癌的临床应用价值.方法 选择121例甲胎蛋白AFP阳性患者血清(≥10ng/ml).使用亲和吸附离心管方法检测血清甲胎蛋白异质体AFP-L3,并且对研究对象进行跟踪,分析甲胎蛋白异质体用于临床在鉴别肝癌的作用.结果 以甲胎蛋白异质体AFP-L3≥10%作为诊断指标,肝癌患者血清中甲胎蛋白异质体AFP-L3异常升高者明显高于其他肝病患者(P<0.01); 对58例临床确诊为肝癌的患者甲胎蛋白异质体AFP-L3的诊断灵敏度是79.31%;在63例临床诊断为其他肝脏疾病的患者甲胎蛋白异质体AFP-L3的诊断特异性达到92.06%,甲胎蛋白异质体AFP-L3的符合率85.95%.结论应用亲和吸附离心管法检测甲胎蛋白异质体AFP-L3在肝癌与良性肝脏病变鉴别诊断中具有重要临床价值.
【期刊名称】《中国实用医药》
【年(卷),期】2011(006)013
【总页数】3页(P11-13)
【关键词】甲胎蛋白异质体;肝癌;离心法
【作 者】邢怀广;李捷;韩善乐
【作者单位】252004,聊城市人民医院放免室;252004,聊城市人民医院内科;莘县人民医院内科
【正文语种】中 文 肝癌是世界上最常见的10种恶性肿瘤之一，全世界每年约有25万人肝癌［1］;肝癌发病之初较为隐匿，临床难以检出，临床诊断是一般多为晚期，治疗效果差，因此早期发现肝癌并且及时治疗可以提高患者的5年存活率。近年随着影像学的发展，一部分体积小的肝癌患者得以及时发现，患者5年存活率有了一定的提高。但是影像学技术检测用于诊断肝癌仍然受到很多的限制，使很多患者未能及时得到准确诊断，失去了最佳的治疗时机。甲胎蛋白(AFP)定量检测是目前早期发现肝癌的主要血清学标志物，但是其他一些疾病也可能引起甲胎蛋白的升高，特别是属于肝癌高危监测人群的慢性肝炎、肝硬化患者［1，2］。因此寻找肝癌早期诊断高灵敏度、高特异性的鉴别指标具有重要的临床意义。
AFP-L3,GP73,DCP,GPC3联合检测在原发性肝癌诊断中的临床意义
AFP-L3，GP73，DCP，GPC3联合检测在原发性肝癌诊断中的临床意义
摘要】 目的 探讨血清中AFP-L3，GP73，DCP，GPC3四种肿瘤标志物在原发性肝癌中的诊断价值及联合检测的意义。方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法和化学发光法检测了63例原发性肝癌(PLC)，48例良性肝病和40例正常体检者血清中AFP-L3，GP73，DCP，GPC3的含量并进行相关的分析。结果 PHC患者中的AFP-L3，GP73，DCP，GPC3均显著高于良性肝病和正常体检者。四者联合检测时的敏感性和诊断准确性均比单项检测高。结论 应用AFP-L3，GP73，DCP，GPC3联合检测可大大提高原发性肝癌的检出率。
【关键词】 原发性肝癌 AFP-L3 GP73 GPC3 肿瘤标志物
原发性肝癌(Primary liver cancer, PLC)指肝细胞或肝内胆管细胞发生癌变，是临床上常见的消化系统恶性肿瘤之一。在全球肿瘤患者致死率中高居第3，其中我国肝癌死亡人数占全球肝癌死亡人数的45%～50%[1]。起病隐匿，早期多无明显的症状体征，但疾病进展迅速。而早发现，及时治疗可显著地改善患者的预后。血清甲胎蛋白(AFP)检测诊断原发性肝癌的临床价值已得到普遍肯定，但其阳性率不是很高，30%～40%的PLC患者呈阴性或低浓度[2]，给临床造成漏诊或误诊的机会增多。为了提高PLC的检出率，AFP-L3，GP73，DCP，GPC3联合检测，有望提高PLC诊断的阳性率，评价它们在PLC诊断中的临床意义。
1、资料与方法
1.1 临床资料 收集大连市第二人民医院2011年4月—2013年3月住院患者血清标本116例。其中PLC组63例，男40例，女23例，平均年龄(46.81±5.30)岁。良性肝病组48例，男35例，女13例，平均年龄(50.01±8.35)岁。正常对照组40例，男25例，女15例，平均年龄(43.38±6.03)岁。所有病例均根据临床病史，经实验室检查，B超，CT，MRI等确诊。
甲胎蛋白异质体_AFP_L3_检测技术的研究进展
分子诊断与治疗杂志2009年9月第1卷第3期JMolDiagnTher,September2009,Vol.1No.3
1前言甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是一种单链糖蛋白。1970年Purves对肝癌患者血清作凝胶电泳时最先观察到AFP有不同的迁移率，因此提出甲胎蛋白异质体（alpha-fetoproteinvariants）这一概念［1］。随着生物化学及其相关分析技术的发展，研究人员发现不同来源的AFP，其糖链的组成和构型存在差异。不同的植物凝集素能够特异性地识别一定的糖基，并与之结合。根据与外源性凝集素亲和性的不同，可对AFP的来源作出判断。Taketa等［2］发现原发性肝癌（hepatocellularcarcinoma，HCC）患者血清中AFP与小扁豆素（lensculinarisagglutinin，LCA）结合后，电泳分成三带，依次命名为AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3，即LCA非结合型（AFP-L1、AFP-L2）和LCA结合型（AFP-L3）。对比分析显示HCC患者AFP-L3比率比其它良性肝病患者明显升高。现通常把与小扁豆素结合的AFP-L3称为AFP异质体，它是新一代的肿瘤标志物［3］。2甲胎蛋白异质体（AFP-L3）检测的临床意义AFP属于胚胎性蛋白，是应用最广泛的肿瘤标志物。大量研究证实，AFP分子的糖链异质性与其组织器官来源有关，不同生理病理状况可产生不同糖链结构，并且具有肿瘤特异性。血清总AFP所含AFP-L1来自良性肝病，占其主要部分；AFP-L2来自孕妇；而AFP-L3则为肝癌细胞特有，AFP-L3>15%即可诊断为原发性肝癌。AFP-L3诊断肝癌的敏感性为96.9%，特异性为92.0%，准确性为95.5%［4］。AFP-L3值与总AFP值无相关性，是独立于总AFP值的肝癌诊断因子［5］，是目前公认的肝癌鉴别诊断和早期诊断的指标，具有非常重要的临床意义［6］。3甲胎蛋白异质体的检测技术测定AFP-L3常用的方法，是根据AFP异质体对植物凝集素（如小扁豆凝集素LCA、刀豆素ConA或豌豆凝集素PSA）结合能力的不同进行分离，然后应用免疫学方法进行定量测定。经典免疫技术（免疫荧光技术、放射免疫技术及免疫酶技术）的不断发展，使甲胎蛋白异质体（AFP-L3）检测技术的研究进展张雯钱金雄肖彦革陈缵光[摘要]甲胎蛋白异质体(AFP-L3)与原发性肝癌密切相关，是重要的肝癌诊断因子，在临床中对于肝癌定性诊断、肝癌预后和治疗肝癌药物的疗效评价都具有非常重要的意义。本文对甲胎蛋白异质体检测技术的研究进展进行简要的综述。[关键词]甲胎蛋白异质体；肿瘤标志物；临床检测Researchprogressindetectionofalpha-fetoproteinvariants(AFP-L3)ZHANGWen,QIANJinxiong,XIAOYange,CHENZuanguang(SchoolofPharmaceuticalSciences,SunYat-senUniversity,Guangdong,Guangzhou510006,China)[ABSTRACT]Alpha-fetoproteinvariants(AFP-L3)iscloselyrelatedtohepatocellularcarcinoma(HCC).Itisoneofthemostcommondiagnosticfactorinclinic,whichissignificantnotonlyindiagnosticandprognosisofhepatocarcinomabutalsoinevaluatingtheeffectivenessofmedicationtherapyinhepatocarcinoma.Thisreviewsummarizesrecentadvancesindetectionofalpha-fetoproteinvariants(AFP-L3).[KEYWORDS]Alpha-fetoproteinvariants;Tumormarker;Clinicaltesting
ELISA法甲胎蛋白(AFP)的检测
ELISA法甲胎蛋白（AFP)的检测
摘要】目的：探讨ELISA法甲胎蛋白（AFP)的检测方法及意义。方法：对原发性肝癌患者30例，对ELISA法甲胎蛋白（AFP)方法及临床意义进行分析。结果：ELISA测得的AFP含量取不同浓度的混合血清，AFP浓度为10.7lng/mL、18.08ng/mL、46.83ng/mL，分别加入不同浓度定值血清，用ELISA法分别检测其回收率。用ELSIA测得的回收率分别在93.90％～98.16％，平均回收率分别为96.42％，ICA的检测精度高，稳定性强。结论：AFP是原发性肝癌最灵敏、最特异的肿瘤标志，血清AFP测定结果大于500μg/L以上，或含量有不断增高者，更应高度警惕。
【关键词】ELISA法；甲胎蛋白（AFP)；检测
【中图分类号】R735.7 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2017）18-0058-02
甲胎蛋白(AFP)是一种在电场中泳动于α-球蛋白区的单一多聚体肽链的糖蛋白，与血清白蛋白、维生素D结合蛋白同属一大家族。AFP是胚胎发育早期的重要血清成分，由卵黄囊和肝细胞合成。出生后一年内降至正常水平[1]。AFP有很强的免疫抑制功能。当肝细胞发生病变时，AFP基因表达重新开放，于血清中可检测到AFP浓度显著升高。
1.资料与方法
1.1 实验对象
选取2015年1月-2016年6月收治的门诊或住院原发性肝癌患者30例，年龄20～79岁，平均年龄54.5±3.5岁。所有患者增根据临床表现，经B超、CT及各项实验室指标检查确诊。
1.2 实验试剂
微孔反应板用抗AFP单抗体包被。2～8℃干燥保存，有效期内保持稳定。酶结合物溶于缓冲液中，含蛋白稳定剂。2～8℃保存，有效期内保持稳定。显色液A：0.05M乙酸缓冲液，含0.02%过氧化氢，存于滴瓶中。2～8℃保存，有效期内保持稳定。显色液B：含色素基质和稳定剂，存于滴瓶中。2～8℃避光保存，有效期内保持稳定。标准品：AFP浓度分别为5ng/ml，10ng/ml。30ng/ml，60ng/ml，120ng/ml，240ng/ml。含蛋白稳定剂和防腐剂，存放于玻璃瓶中，2～8℃保存。质控血清含AFP浓度分别为，L-I，L-Ⅱ，含防腐剂及蛋白稳定剂。2～8℃保存，有效期内保持稳定。终止液：含lN H2SO4。洗液(10倍浓缩)：50ml，磷酸盐缓冲液，用前稀释[2]。2～8℃保存，有效期内保持稳定。
AFP-L3核酸适配体的筛选及特异性结合蛋白的初步研究
AFP-L3核酸适配体的筛选及特异性结合蛋白的初步研究
摘要：肝癌是最常见且发病率较高的恶性肿瘤之一，发现往往已属中晚期。肝癌患 者的 5 年生存率小于 20%，实现早期诊断是降低肝癌死亡率最有效的途径；传统的甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）检测和超声成像分析敏感性、特异性不足，难以实现早期诊断。甲胎蛋白异质体-3（alpha-fetoprotein
variant-3）仅来源于癌变干细胞，可作为肝癌早期筛查肿瘤标记物。核酸适配体是能够通过分子内折叠形成特定的三维结构从而与靶分子高特异性、高亲和力结合的单链 DNA 或 RNA。核酸适配体与靶分子结合的灵敏度高、特异性强，在生物医学、新药研发、靶向治疗和疾病检测等方面具有巨大潜能和优越性。
关键词：甲胎蛋白异质体；核酸适配体；肝癌
引言
2020年全球肝癌新发病例905677例，死亡病例830180例，分别占癌症发病和死亡总数的 4.7%和8.3%[1]。其标化发病率和死亡率分别为9.5/10万和8.7/10万，0～74岁累积发病和死亡风险分别为1.11%和1.01%[1]。肝癌死亡率位居全国癌症第二，因肝本身并无痛觉神经，早期症状不明显，发现往往已经是晚期，此为肝癌死亡率居高不下的重要原因，早筛查是早诊断、早治疗的关键。目前，我国各体检机构中所应用的甲胎蛋白（AFP）检测特异性低，在早期筛查具有局限性，因AFP在其他疾病中也可升高，使得检测AFP的敏感度仅为65%左右，单以AFP单个血清肿瘤标志物为标准进行筛查，已不足以作为原发性肝癌早期筛查的依据。
目前肝癌血清的肿瘤标志物有甲胎蛋白（AFP）、高尔基体糖蛋白73（golgi
protein 73，GP73）、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、肿瘤特异性生长因子（tumor specific growth factor，TSGF）、肿瘤相关抗原（TAA）及对应的自身抗体（抗-TAAs）、岩藻化甲胎蛋白（AFP-L3，又称甲胎蛋白异质体）等，AFP-L3仅来源于发生癌变的干细胞，对肝癌检测的特异性高达95%以上，因此通过新型手段去筛选以AFP-L3为靶标的核酸适配体是研究的热点所在。
血清甲胎蛋白甲胎蛋白异质体-L3异常凝血酶原及糖类抗原199联合检测对肝细胞癌的诊断价值分析
血清甲胎蛋白甲胎蛋白异质体-L3异常凝血酶原及糖类抗原199联合检测对肝细胞癌的诊断价值分析
张晓琼;戴林林
【期刊名称】《基层医学论坛》
【年(卷),期】2024(28)7
【摘 要】目的 探讨血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、甲胎蛋白异质体-L3(Alpha-fetoprotein lens culinaris agglutinin3,AFP-L3)、异常凝血酶原(protein induced by vitamin k absence or antagonist-ii,PIVKA-Ⅱ)、糖类抗原1 99(carbohydrate antigen,CA1 99)联合检测在肝细胞癌诊断中的临床价值。方法 选取2019年9月—2022年9月吉安县中医院收治的60例肝细胞癌作为观察组,同期60例良性肝脏疾病患者作为对照组。比较2组及不同TNM分期肝癌患者AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ及CA1 99水平;绘制ROC曲线,分析AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ、CA1 99及联合检测诊断肝细胞癌的临床价值。结果 观察组AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ、CA1 99水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ期—Ⅳ期患者AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ、CA1 99水平高于Ⅰ期—Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);绘制ROC曲线,分析显示,AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ、CA1 99及联合检测诊断肝细胞癌的曲线下面积分别为0.787、0.770、0.806、0.763、0.968,联合检测价值更高。结论 血清AFP、AFP-L3、PIVKA-Ⅱ、CA1 99在肝细胞癌中存在较高表达,能够辅助疾病的早期诊断。联合检测可进一步提高诊断灵敏度、特异度,有助于临床后续治疗工作的开展。
【总页数】4页(P129-131) 【作 者】张晓琼;戴林林
【作者单位】吉安县中医院;南昌市卫生健康促进中心
甲胎蛋白异质体和甲胎蛋白信使核糖核酸用于诊断肝细胞癌
龙源期刊网
甲胎蛋白异质体和甲胎蛋白信使核糖核酸用于诊断肝细胞癌
作者：邱大鹏 韩风 贺涛
来源：《中国医学创新》2014年第03期
【摘要】 目的：探讨联合检测2种血清肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP）异质体（AFP-L3）和甲胎蛋白信使核糖核酸（AFPmRNA）诊断肝细胞癌价值及评估肝癌预后的意义。方法：对2005年4-7月收治的82例肝细胞癌（HCC）、11例慢性乙型肝炎肝硬化合并门脉高压和19例肝脏良性肿瘤患者应用酶联吸附法及荧光定量PCR联合检测AFP-L3和AFPmRNA水平，对比其阳性率；并对术后1个月的肝癌患者检测AFP-L3和AFPmRNA水平，统计作出生存曲线。结果：术前不同肿瘤指标的检测结果：AFP-L3联合AFPmRNA检测阳性率为64.3%，明显高于AFP、AFP-mRNA单独检测的阳性率（50.9%、40.2%），差异均有统计学意义（P
【关键词】 原发性肝癌； 甲胎蛋白异质体； 甲胎蛋白信使核糖核酸； 诊断； 预后
肝细胞癌（HCC）是临床常见恶性肿瘤，疾病进展快，病情危重，侵袭性较强，预后较差，患者生活质量受到明显下降。近年来我国发病率明显升高，肝细胞癌由多种方式因素引起，乙型肝炎病毒感染、肝硬变等均是导致疾病发生的重要原因。甲胎蛋白（AFP）作为诊断HCC的重要指标，在临床广泛使用，然而对肝癌的特异性及敏感性均较低，因此探讨更为有效的诊断方法，研究更为敏感、特异的肿瘤标志物对于提高诊断率，提高患者生存率有着重要作用[1]。临床研究显示，多种肿瘤标志物联合检测效果明显优于单独检测，特异性及敏感性更高，笔者对2005年4-7月收治的82例HCC患者进行AFPmRNA联合甲胎蛋白（AFP）异质体（AFP-L3）检测，对其与HCC的诊断及预后关系进行探讨，具体报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2005年4-7月本院部分住院患者血清资料库中的112份血清标本，其中男76例，女36例，年龄30～73岁；平均（45.62±6.2）岁；肝脏良性病变19例（其中2例炎性假瘤，3例血管平滑肌脂肪瘤，2例灶性结节性增生，12例血管瘤），肝硬化合并门脉高压（LC）11例，HCC82例。患者均经术后病理学诊断确诊，为了排除其他因素对肝癌预后分析的影响，将HCC患者的入选标准定为：单发肿瘤
人甲胎蛋白异质体3AFPL3酶联免疫分析试剂盒使用方法
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1 人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)酶联免疫分析试剂盒使用方法
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
50ng/L– 1600ng/L
使用目的：
本试剂盒用于测定人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)水平。用纯化的人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)，再与HRP标记的甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)浓度。
试剂盒组成
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（3200 ng/L） ×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 ×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
3．组织处理：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。