结直肠癌基因检测培训PPT

结直肠癌基因检测项目

结直肠癌是一种常见的恶性肿瘤，也是致死率很高的一种癌症，常常被称为“富贵病”，在欧美国家已成为常规筛查项目。随着基因检测技术的发展，结直肠癌基因检测日渐普及，成为预防和早期诊断的一种有效手段。

结直肠癌是一种多因素引起的疾病，其中遗传因素是非常重要的。结直肠癌基因检测是通过分析人体中与结直肠癌相关的基因变异，来评估个体结直肠癌患病风险的一项检测。

目前，结直肠癌基因检测主要包含两个方面：一是检测结直肠癌易感基因，包括APC、MLH1、MSH2、MSH6、PMS2、STK11等。这些基因的突变会导致某些重要蛋白质的功能失常，从而增加结直肠癌发生的风险。二是检测结直肠癌遗传易感性的基因多态性，如GSTP1、XRCC3、CYP2C9、UGT1A1等。

结直肠癌基因检测的优点在于早期诊断和预防结直肠癌方面的作用。随着年龄的增长，患结直肠癌的风险也逐渐增加，这是由于肠黏膜的正常细胞开始发生变异，变异的细胞不受控制增殖而形成肿瘤。检测结直肠癌易感基因和遗传易感性的基因多态性，能够更早的发现患者的风险，同时提供个性化的预防和治疗方案，从而避免肠道癌前病变的进一步转化成癌症。

但是，结直肠癌基因检测也存在不足之处，如检测结果可能存在误判、假阴性或假阳性等情况，另外费用也较高，这限制了其在一些地区的普及。

总之，结直肠癌基因检测是一种非常重要的检测手段，可以帮助家庭医生、肿瘤科医生更早地发现结直肠癌患者，更好地治疗癌症，最终提高患者的生命质量。但是，我们也应该注意到该项检测的局限性，以及需要在专业医生的指导下进行检测，以免出现不必要的麻烦和误判。

血浆Septin9基因甲基化检测在结直肠癌诊治中的应用

血浆 Septin9基因甲基化检测在结直肠癌诊治中的应用

摘要：目的:引进血浆Septin9基因甲基化检测技术，提高本院结直肠镜的受检率，为本地区结直肠癌( colorectal cancer，CＲC)的早筛、早诊、早治、疗效判断和复发监测提供有力的实验室依据，有效提升本地区结直肠癌的综合防治水平。方法：分析2018年1月开展至今的1972例Septin9基因甲基化检测结果，对阳性结果随访并进行结直肠镜检查。结果：健康体检职工血浆Septin9基因甲基化阳性率为2.96%（12/405），消化科患者、中西医肿瘤科患者、感染科患者血浆Septin9基因甲基化阳性率分别为14.29%（17/119）14.84%（38/256）和15.68%（8/51），差别有显著性（P<0.05）。结论：血浆Septin9基因甲基化检测技术以其采样方便、患者依从性好，灵敏度和特异性均较高的技术优势提高我院结直肠镜受检率，我院自2018年1月引进入疆并在临床推广应用，填补疆内空白，为结直肠癌的早筛、早治、疗效判断、复发监测等提供辅助诊断依据。

关键词：结直肠癌； Septin9；基因；甲基化检测

结直肠癌是结直肠黏膜上皮恶性肿瘤，结直肠癌（CRC）的发病率位居我国乃至全球各类恶性肿瘤第三位，其发病率和死亡率有逐年上升趋势，有效的早期筛查、诊断、复发监测及尽早干预治疗是CRC防治的关键。早期诊断 CＲC 能显著改善预后，但 60% ～ 70% 的 CＲC患者诊断时已进展至晚期。粪便血试验(facal immunochemical tests，FIT) 、癌胚抗原 ( carcinoembryonic

antigen，CEA )和肠镜是目前临床上最为常用的筛查手段，但FIT易受干扰因素影响，假阳性率高；CEA 特异性低，更适合疗效监测；肠镜检查侵入性强，患者接受率不高［1］。所以，寻找更好的检测标志物就显得尤为重要。最近研究发现CRC的发生、发展与基因的甲基化密切相关。Septin9基因与CRC发生密切相关，在癌组织中呈高度甲基化，是CRC发生发展过程中重要的分子标志物，研究发现，Septin9 基因甲基化存在于90%以上的 CＲC 癌组织中，且其Septin9基因甲基化程度远高于良性肿瘤和正常肠道组织，使得 Septin9 基因甲基化检测有望成为新的CＲC诊断指标［2］。结直肠癌的发生、发展是一个多因素影响、多基因参与并需经历多阶段演变的复杂过程，肠癌发展进程由增生、小腺瘤、大腺瘤、重度非典型增生、早期腺癌、晚期腺癌等阶段，大约需要5-10年的疾病发展期，临床症状出现时间晚，国民早期筛查意识差，无症状不检查，往往错过最佳治疗期。医界共识：早发现、早诊断、早治疗是防治癌症最有效的方式。目前结直肠癌体外筛查的方法有CEA、粪潜血和肠镜检查。CEA、粪潜血灵敏度较低，肠镜筛查虽然是临床筛查肠癌的金标准，但流程复杂、创伤大、风险高、左右结肠有差异、恐惧意识、人为误差，加之肠镜诊断的准确性和治疗的安全性很大程度上取决于肠道准备的质量等，使肠镜的受检率低于3%，不适合早期筛查。根据我院检测结果，总结如下：

Septin9基因检测助力肠癌早发现早诊断

结直肠癌又称大肠癌，是一种常见的恶性肿瘤，顾名思义包括结肠癌和直肠癌。结直肠癌是全球癌症相关死亡的第三大原因，中国结直肠癌发生率、死亡率均处于世界较高水平，而我国结直肠癌发病率和死亡率在全部恶性肿瘤中分别位居第2和第5位，我国已成为世界上结直肠癌每年新发病例数和死亡病例数最多的国家。如何有效的降低结直肠癌的发病率，是摆在我们面前的重大公共卫生问题。据报道，不同部位发病率从高到低依次为直肠、乙状结肠、盲肠、升结肠、降结肠及横结肠，近年有向近端（右半结肠）发展的趋势。

一、结直肠癌发病相关因素

目前的研究认为其发病相关与下列因素相关：

年龄：年龄是大肠癌的最重要危险因素，年龄越高诊断出结直肠癌的比例越高。

遗传：肠癌本身具有一定的遗传性，据估计超过四分之一的病例是由遗传因素引起的，如遗传性非息肉性大肠癌（也成林奇综合征），家族性腺瘤性鼻息肉病是最常见，但目前还有很多待阐明的遗传机制，遗传性结直肠癌发病率约占结直肠癌总体发病率的6％左右；有结直肠癌家族史的患者发病率较高，糖尿病也是结直肠癌的危险因素。

生活方式：久坐不动的生活方式，不健康的饮食（常食用红肉或加工肉类的人群），吸烟和肥胖、饮酒的人群发病率较高，合理搭配饮食（富含膳食纤维、谷物等）、合理饮用乳制品及体育锻炼都可以减低结直肠癌的发病率。

结直肠癌起源于结肠或直肠黏膜上皮组织的恶性肿瘤，60%以上的大肠癌发生于直肠和乙状结肠。致死率高，严重威胁人民的健康。结直肠癌早期症状不明显，隐匿性强，通常由结肠内壁的正常细胞开始形成息肉几乎所有结直肠癌都始于小的腺瘤性息肉，然后逐渐演变为癌症。癌症发展的过程通常很缓慢，大多遵循“腺瘤到癌”，从癌前病变到癌一般需要5到10年的时间，这给了我们在早期发现和治疗的宝贵机会。然而，早期肠癌通常没有明显的症状，隐匿性强，往往被忽视，多数患者在确诊时已属于中晚期。因此，早诊早治对提高结直肠癌的生存率和治疗效果显得尤为重要。

252例结直肠癌组织中KRAS、NRAS、 BRAF、PIK3CA的基因突变分析

刘影;郑细闰;朱亚珍;何青莲;郑广娟

【摘要】目的分析结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因的常见突变类型及其与临床病理指标的关系.方法对252例CRC石蜡包埋组织进行DNA提取,采用Sanger测序法对KRAS、NRAS、BRAF和PIK3CA基因进行检测,分析各个基因的突变率与临床病理特征的关系,并统计各个基因的突变类型.结果 252例CRC中,KRAS、BRAF、NRAS和PIK3CA突变发生率在性别、年龄、肿瘤部位、病理分期和有无淋巴结转移上差异均无统计学意义(P＞0.05);检测阳性突变共140例(55.5％),其中KRAS 113例(44.8％),NRAS 1例(0.4％),BRAF 19例(7.5％),PIK3CA 28例(11.1％),包括PIK3 CA与KRAS、NRAS、BRAF基因发生双突变21例(8.3％);KRAS的主要突变类型包括G12A、G12C、G12D、G12R、G12S、G12V、G13D、T20M、A59T、Q61H、Q61L、Q61P;NRAS仅有1例突变为G12D;BRAF的主要突变类型为V600E、D594G、K601E;PIK3CA的主要突变类型包括E542K、E545K、Q546K、Q546P、Q546R、M1043I、H1047R.PIK3CA与KRAS、NRAS、BRAF之间会发生交叉突变,但KRAS、NRAS、BRAF三者之间基本不存在交叉突变.结论 CRC中KRAS阳性突变率居高,PIK3CA次之,BRAF、NRAS突变率最低,且PIK3CA常与KRAS、NRAS、BRAF发生交叉突变.对CRC患者行KRAS、NRAS、BRAF、PIK3CA等多基因检测,可正确指导并选择抗EGFR单抗药,从而实现真正意义上的个体化靶向治疗.

遗传性结直肠癌基因检测及其在临床上的应用规范化问题

姜烈君;陆晓旭;黄华艺

【摘要】遗传性结直肠癌是一类多因素遗传特征家族性疾病,包括Lynch综合征、家族结直肠腺瘤性息肉和MYH相关性息肉,约占所有结直肠癌的5％.Lynch综合征(又称遗传性非息肉性结直肠癌)是因无效的错误配对修复(mismatch

repair,MMR)而导致微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)的一系列相关癌症,常由MMR基因(MLH1、MSH2、MSH6和PMS2)突变引起.家族性结直肠腺瘤性息肉(familial adenomatous polyposis,FAP)是APC基因突变引起的广泛性结肠息肉病.而MUTYH基因突变可引起MYH相关性息肉(MYH-associated

polyposis,MAP).为了规范对遗传性结直肠癌的分子诊断技术流程,美国医学遗传学和基因组学会制定检测大纲以供各相关实验室参考.本文对该大纲进行归纳并结合我国的大纲进行讨论.

【期刊名称】《分子诊断与治疗杂志》

【年(卷),期】2016(008)002

【总页数】7页(P135-141)

【关键词】遗传性结直肠癌;家族性腺瘤样息肉;Lynch综合征;MYH相关性息肉;基因检测

【作者】姜烈君;陆晓旭;黄华艺

【作者单位】广西壮族自治区人民医院检验科,广西,南宁530021;广西壮族自治区人民医院检验科,广西,南宁530021;广西壮族自治区人民医院检验科,广西,南宁530021;美国罗斯威尔帕克癌症研究所肿瘤外科,纽约,布法罗14263 【正文语种】中文

结直肠癌（colorectal cancer，CRC）可分为散发性、家族性或遗传性几种特征。约20%～30% CRC为多因素遗传特征家族性疾病，因遗传获得的高度外显率单基因突变约占所有CRC的5%。Lynch综合征、家族结直肠腺瘤性息肉（familial

抽血就能检测结直肠癌septin9基因甲基化检测早提示

大肠癌呈现出年轻化、高发病率的特点，要想提升患者的长期生存率，就要尽早发现。以往需要做肠镜及大便暗血实验，取病理活检进行诊断，然而很多人都害怕做肠镜检查，使得一些患者由于肿瘤较大导致肠梗阻才去就诊，已经发展到局部晚期。当前医学已步入到靶向治疗、基因检测、免疫治疗时期，而septin9基因甲基化检测，可以在大肠癌早期检测中应用，受到了人们的认可。

1、肠癌的高危人群

肠癌是一种高发病率的恶性肿瘤，很多患者发现就是晚期。随着人们的饮食习惯改变等因素影响，疾病的患病率日益提升，且年轻人患疾病的数量不断增加。有几类人群容易患上肠癌，主要包括：第一，有家族遗传病史。如果家庭中有直系亲属换过该疾病，那么相较于其他人，其患病概率要高出八倍。有1/4的患者有家属患病史。第二，有结肠息肉。部分大肠癌是从癌前病变发展的，即息肉。绒毛样腺瘤样息肉更易发展成癌症，几率为25%。管状腺瘤样息肉变成癌症的概率是1%-5%。第三，慢性溃疡性结肠炎患者。第四，中老年人。患者很多都超过50岁，随着年龄增加，相关的致病因素对于大肠黏膜的刺激时间增加，因此，患者年龄较高，也有一些患者年龄较小。最后，吸烟喝酒人群。有研究显示，吸烟的人相较于没有吸烟的人，患大肠癌的风险更高。如果有大肠息肉及大肠癌的家族病史，每天喝酒超过30g，会提升患大肠癌的概率。

2、什么是septin9基因甲基化检测？

septin9基因是直肠癌及结肠癌病人特有的血液标志物，septin9基因甲基化是早期筛查直肠癌的方式之一，特异性较高，通常在95%左右。通过这一检测，能够了解检测人员的血液样本中是不是有septin9基因的DNA，若是检查发现，代表着患者可能会患结肠癌或直肠癌，需要继续做肠镜以及病理检查，综合检查结果之后做出诊断。septin9基因甲基化在I期结直肠癌检测中的应用，灵敏度约为60%；在II-III期检测中应用，灵敏度超过80%；在IV期检测中应用，灵敏度超过90%。在检测前，患者不用进行特殊的准备，可以正常喝水和吃东西，直接抽血送去检测就可以。全血标本应该在2-8摄氏度中保存，不可以超过24小时，禁止冷冻。

结直肠癌KRAS，NRAS，BRAF基因突变分析及临床意义

赵丽辉;吴杏儿;孟凤娇

【期刊名称】《重庆医学》

【年(卷),期】2017(46)A03

【摘要】目的检测结直肠癌（CRC）组织中KRAS／NRAS、BRAF基因突变情况，探讨与CRC临床病理特征的关系。方法通过探针扩增阻滞突变系统（ARMS）荧光定量PCR法对36例CRC患者同时进行KRAS／NRAS及BRAF基因检测，研究其突变率及与临床特征的相关性。结果36例CRC患者中KRAS／NRAS基因突变19例（52．78％），其中KARS基因突变18例（50．00％），以外显子2（G12C、G12R、G12V、G12A、G13C）突变率最高，占25．00％，其次为外显子2（G12S、G12D）16．67％，外显子2（G13D）2．78％和外显子4（K117N、A146T、A146V、A146P）5．59％，未检测到外显子3突变，其中1例为外显子2上G12S、G12D和G12C、G12R、G12V、G12A、G13C均突变；NRAS基因突变1例（2．78％），为外显子2（G12D、G12S）的点突变，1例直肠中分化腺癌患者在不同时期检测出不同位点的突变。不同性别、年龄、病理分级、转移及部位的KRAS基因突变比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。中分化腺癌的NRAS基因突变率比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。检测BRAF基因突变1例，突变率为2．78％，临床病理分析低分化癌突变率相对较高，差异有统计学意义（P〈0．05）。KRAS／NRAS基因突变患者未检测到BRAF基因突变。结论CRC组织RAS基因突变以KRAS外显子2上的12、13密码子突变率最高；KRAS／NRAS基因与BRAF基因具有排他性；不同时期、部位基因突变位点也会不同；KRAS／NRAS及BRAF基因检测是结、直肠癌患者分子靶向治疗及预后的重要依据和必要检测手段。

应用优化的全自动免疫组化染色方案检测错配修复蛋白MLH1,PMS2在结直肠癌组织中的表达

【摘要】目的探究应用优化的全自动免疫组化染色方案检测结直肠癌组织中错配修复蛋白MLH1，PMS2的表达。方法收集2021年8月至2022年8月我院结直肠癌手术标本40例，并采用机器操作进行免疫组化染色，皆通过显微镜观察错配修复蛋白MLH1，PMS2表达的差异，并对比实验结果。结果全自动免疫组化染色可以实现着色均匀、定位准确、无边缘效应和背景清晰等多项优点，在各项指标上表现优异。结论经过优化的全自动免疫组化染色仪可以实现高度标准化的操作流程，从而提高染色的规范性和减少人为误差。在临床结直肠癌组织中，使用该设备能够更加准确地检测错配修复蛋白MLH1、PMS2的异常表达，从而为诊断提供更加可靠的依据。

【关键词】全自动免疫组化；染色；错配修复蛋白；结直肠癌

结直肠癌是临床中一种常见的恶性肿瘤，发病率及死亡率极高，40岁以上中老年人好发，通常是由于环境、生活习惯或基因的因素导致，患者会出现便秘、腹泻、便血或大便细软等症状。实验室检查可通过免疫组化及基因检测，推荐检测错配修复蛋白MLH1和PMS2的表达情况，从而指导患者用药。有学者表示[1]，基因错配修复是一种针对DNA中存在错配碱基的修复方式，它可以恢复正常的核苷酸序列。此外，错配修复还能够区分DNA的母链和子链，只会切除存在错误的核苷酸的子链，不会影响到母链上的正常核苷酸。免疫组化染色检测基因错配修复缺陷的一种有效方法，这种检测结果不仅稳定且可靠性强。因此，本文通过应用优化的全自动免疫组化染色方案检测40例结直肠癌组织中错配修复蛋白MLH1，PMS2，观察其检测结果的稳定性，现报道如下：

1 资料与方法 1.1一般资料

收集2021年8月至2022年8月我院病理科40例结直肠癌手术标本，其中男性28例、女性12例；年龄36-82岁，平均（58.25±4.21）岁。纳入标准：（1）经病理检查确诊为原发性结直肠癌[2]；（2）未进行放疗。排除标准：（1）继发性结直肠癌；（2）良性肿瘤；（3）非手术治疗者。

粪便SDC2基因检测联合粪便隐血试验对结直肠癌诊断的临床研究

摘要：目的本研究通过分析对照组、肠腺瘤组、大肠癌组患者行粪便SDC2基因甲基化检测及粪便隐血试验的结果，探讨二者联合检测对大肠癌诊断的临床价值。方法收集2021年1月-2022年1月期间于北华大学附属医院就诊，经电子结肠镜及组织学病理检查后明确诊断，符合入组标准的150名患者为研究对象。通过分析检测结果探讨二者联合检测对结直肠癌诊断的临床价值。结果对照组、腺瘤组及CRC组均行粪便SDC2基因甲基化检测、粪便隐血试验及二者联合检测，结果三种检测方法三组间比较阳性率均呈上升趋势。三组间比较差异均有统计学意义（<0.05）。三组间两两比较差异均有统计学意义（<0.05）。结论粪便SDC2基因甲基化检测对大肠腺瘤的检出率明显高于粪便隐血试验；对结直肠癌诊断的灵敏度明显优于粪便隐血试验。粪便SDC2基因甲基化检测联合粪便隐血试验对大肠腺瘤的检出率及对结直肠癌诊断的灵敏度均高于二者单独检测。二者联合检测对结直肠癌的诊断具有临床价值。

关键词：粪便SDC2基因；粪便隐血试验；结直肠癌；诊断

近年来，我国结直肠癌的发病率和死亡率也逐年增加，结直肠癌在我国已经成为发病率处于第2位，病死率处于第5位的恶性肿瘤[1]，是一种严重危害我国人民生命的恶性肿瘤。粪便隐血试验与粪便SDC2基因甲基化检测均属于无创检查，操作简单，依从性较高[2]。因此，探讨粪便SDC2基因甲基化及粪便隐血试验对结直肠癌的早期诊断是有意义的。本研究通过分析健康体检组、肠腺瘤组以及结直肠癌组粪便SDC2基因及粪便隐血试验的测定结果，探究二者联合检测对结直肠癌诊断的临床意义。以下是研究成果。

1 资料与方法

1.1 一般资料收集2021年1月-2022年1月期间于北华大学附属医院就诊，经电子结肠镜及组织学病理检查后明确诊断，符合入组标准的150名患者为研究对象。分为对照组（健康体检者）50例，大肠腺瘤组50例，结直肠癌组50例。

2020CSCO结直肠癌指南

结直肠癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤，对人们的健康造成了威胁。为了提供更好的诊断、治疗和管理方案，2020年中国抗癌协会（CSCO）制定了最新的结直肠癌指南。本文将简要介绍该指南的要点并探讨其对结直肠癌患者的临床应用。

一、背景与目的

CSCO结直肠癌指南的目标是提供全面、准确的指导，涵盖结直肠癌的预防、早期诊断、治疗及后续管理等各个方面。通过该指南，医生可以基于最新的研究成果和临床实践，为患者制定个性化的治疗方案，改善患者的生存率和生活质量。

二、预防与筛查

结直肠癌的早期筛查对于降低疾病发生率和死亡率具有重要意义。指南推荐人群如下：

1. 平均风险人群：建议在50岁开始进行结肠镜检查。

2. 高风险人群：家族性腺瘤性息肉病、遗传性非息肉病性结直肠癌等高风险人群可以在40岁或者10岁早于家族成员肿瘤年龄的时候进行筛查。

三、早期诊断与分期

早期诊断对于结直肠癌患者的治疗与预后有决定性的影响。指南强调以下诊断手段的重要性： 1. 完全结肠镜检查：高质量的结肠镜检查可以检测到直径小于5mm的超微小结直肠癌。

2. 结直肠息肉切除术：适用于无中重度异形增生或高度可疑结直肠癌的息肉。

四、分子病理学与分子靶向治疗

通过对结直肠癌组织进行分子病理学检测，可以获得更精确的患者信息，并辅助选取最佳治疗策略。目前，靶向治疗是结直肠癌治疗的重要组成部分，指南提出以下建议：

1. RAS基因检测：使用抗EGFR单克隆抗体治疗前，应考虑进行RAS基因检测。

2. BRAF基因检测：对于KRAS和NRAS基因为野生型的患者，推荐进行BRAF基因检测。

3. 靶向治疗：对于KRAS突变、野生型的结直肠癌患者，可考虑采用靶向治疗。

五、手术治疗与辅助治疗

手术切除是结直肠癌治疗的首选方法，而辅助治疗则在手术后起到重要的作用。指南给出了以下建议：

1. 结直肠癌的手术治疗应基于患者的病理分期，选择合适的手术方式和范围。 2. 肠道异物的管理：术前胃肠准备和术后早期肠内营养支持等，有助于缩短住院时间和减少并发症的发生。