应用免疫蛋白质组学方法鉴定日本血吸虫虫卵诊断抗原
日本血吸虫虫卵单克隆抗体的初步研究
日本血吸虫虫卵单克隆抗体的初步研究严自助;吕再婴【期刊名称】《中国寄生虫病防治杂志》【年(卷),期】1990(3)1【摘要】将血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)免疫 BALB/C 小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP 2/0杂交融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测特异性抗体,获得一株稳定地分泌单克隆抗体的细胞株 SM21-8。
该 SM21-3的免疫球蛋白型为 IgM,其靶抗原为血吸虫卵,能识别分子量20～67kD 多个重复表位的虫卵糖蛋白。
用 SM21-3 ELISA 双抗体法检测 SEA,湖南重疫区粪检阳性的慢性血吸虫病人血清的阳性率为80.0%(44/55),正常人血清阳性率为5.0%(1/20)。
纯化的 SM21-3经荧光素标记后用直接荧光抗体法定位地检出肉芽肿组织中的虫卵抗原。
结果表明,用 SM21-3 ELISA 双抗体法可检出部分重感染病人血清中的微量抗原,该抗原也是肝肉芽肿形成的主要因素。
【总页数】3页(P42-44)【作者】严自助;吕再婴【作者单位】不详;不详【正文语种】中文【中图分类】R532.210.3【相关文献】1.TNF—α与日本血吸虫虫卵肉芽肿及肝纤维化关系的初步研究 [J], 贺永文;刘薇2.日本血吸虫模拟虫卵抗原的初步研究 [J], 钱旻;白艳军;章平;吴自荣;严自助3.日本血吸虫虫卵肉芽肿与肝纤维化免疫病理及调节研究初步报告 [J], 蔡卫民;陈智;陈峰;杨艳宏;翁红雷;刘荣华4.日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原诱导免疫对虫卵肉芽肿影响的初步研究 [J], 余祖江;杨明义;董惠芬;蒋明森;杨孟祥;李瑛5.用抗日本血吸虫虫卵单克隆抗体NP28-5B检测循环抗原的研究 [J], 仇镇宁;管晓虹;刘萍;吴宜琴;陶如华;罗建平;吴观陵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
重组抗原用于日本血吸虫病免疫诊断研究进展
重组抗原用于日本血吸虫病免疫诊断研究进展
潘丽红;沈际佳
【期刊名称】《热带病与寄生虫学》
【年(卷),期】2007(5)3
【摘要】目前，用于血吸虫病免疫诊断的最常用的抗原是成虫抗原和虫卵抗原，
由于这两种粗抗原的成分复杂，且与其他寄生虫感染血清存在着较严重的交叉反应，血吸虫病诊断的特异性不高，生产的试剂不宜标准化。
近年来，随着分子生物学的迅猛发展，很多生物学技术已经用于寄生虫学（病）研究。
运用分子克隆等技术可以获得大量纯化的重组寄生虫抗原。
重组抗原可以大批量生产，成本低廉，能解决大量诊断用抗原的来源。
【总页数】4页(P181-184)
【作者】潘丽红;沈际佳
【作者单位】246003,安庆市,安徽省安庆医药高等专科学校基础教研室;安徽医科
大学病原生物学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R5
【相关文献】
1.日本血吸虫病免疫诊断方法的研究进展 [J], 鞠川;冯正;胡薇
2.重组日本血吸虫26 ku谷胱甘肽-硫-转移酶的表达、纯化及其免疫特性分析用于急性血吸虫病免疫诊断 [J], 罗庆礼;沈继龙;汪学龙;刘淼;胡元生;钟政荣;王家传;袁
小松
3.重组抗原用于血吸虫病免疫诊断研究进展 [J], 吴锦雅;周晓红;陈晓光
4.SVLBP重组抗原用于日本血吸虫病免疫诊断的研究 [J], 王越;干小仙;曾肖芃;沈慧英;丁建祖;沈丽英;樊晋江
5.重组抗原用于弓形虫病免疫诊断研究进展 [J], 司进;朱荫昌
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日本血吸虫成虫和肝卵切片抗原免疫酶试验诊断血吸虫病的观察
日本血吸虫成虫和肝卵切片抗原免疫酶试验诊断血吸虫病的观
察
顾启章;许复苏;刘泓;赵文华;周维立
【期刊名称】《中国血吸虫病防治杂志》
【年(卷),期】1992(0)3
【摘要】自Kamiya创用曼氏血吸虫鼠肝石蜡切片免疫酶试验(LE-IIP)以来,国内陆续有报道。
我们对日本血吸虫成虫(AW),肝卵切片进行IIP比较,发现存有差异,现报告如下。
材料和方法一、切片抗原病兔肝组织常规石蜡切片,片厚4μm,每张载玻片贴6枚。
活成虫经生理盐水漂洗后,用5％福尔马林固定,6％琼脂包被后同上石蜡包埋切片。
载体改进用25μm厚的硬性PVC薄膜,裁成10×5cm大小,每张贴24枚。
【总页数】1页(P188-188)
【关键词】日本血吸虫成虫;抗原免疫;酶试验;常规石蜡切片;曼氏血吸虫;石蜡包埋切片;抗原检测;抗原片;兔肝;血清抗体
【作者】顾启章;许复苏;刘泓;赵文华;周维立
【作者单位】浙江医科大学杭州分校
【正文语种】中文
【中图分类】R532.21
【相关文献】
1.成虫童虫冰冻切片抗原间接荧光抗体试验和免疫酶染色试验诊断肺吸虫病 [J], 史志明;章子豪;张耀娟
2.日本血吸虫肝卵和成虫切片免疫酶染色试验效果观察 [J], 顾启章;许复苏
3.肝卵组织石蜡切片间接荧光抗体试验诊断日本血吸虫病... [J], 陈碧珍;林筱勇
4.肝卵组织石蜡切片间接荧光抗体试验诊断日本血吸虫病的进一步研究 [J], 陈碧珍;林筱勇
5.PVF抗原片环卵沉淀试验诊断日本血吸虫病敏感性和特异性的进一步观察 [J], 杨兆莘;蒋美荣;袁有赉;陈树仁;李家泉
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50例血吸虫病多原发结直肠癌治疗效果分析论文
50例血吸虫病多原发结直肠癌治疗效果分析【摘要】目的对血吸虫病多原发结直肠癌的临床治疗效果进行探讨与分析。
方法对本医院在1993年至2012年之间收治的50例血吸虫病多原发结直肠癌患者的临床资料进行回顾性总结与分析。
结果50例患者发现第一原发癌后第一时间接受手术切除肿瘤，术后根据患者情况行化疗和/或放疗。
所有患者在接受手术之后的3年内均发现第二原发癌，时间最短的在半年内便出现，第二原发癌术后部分接受化疗和/或放疗，至今共死亡20例，无1例因癌症复发或转移死亡。
结论血吸虫病可诱发多原性结直肠癌，但是及时的手术治疗与科学的放疗化疗可以较好地切除肿瘤，并且预后较好，可以达到根治效果。
【关键词】血吸虫病；多原发结直肠癌；治疗效果吸虫病走在我国的某些地区发病率较高，并且血吸虫常常引起结直肠癌等恶性疾病，给患者的生命安全造成严重威胁。
本医院在1993年至2012年之间共收治50例血吸虫病多原发结直肠癌患者，现将其治疗效果报告如下。
1对象与方法1.1对象资料所有患者均来自本医院在1993年至2012年之间收治的多原发结直肠癌患者，一共50例，其中有男性患者47例，女性患者3例。
入院之初患者的年龄范围在52岁至63岁之间，患者的职业有农民、石油工人以及钻井工人等。
所有患者均具有吸血虫病史，其中最长时间患病已有20年。
所有患者均具有慢性结肠炎病史。
其中患者的首发病症主要集中在升结肠癌、横结肠癌、降结肠癌、乙状结肠癌、直肠癌等，分别有12例、7例、9例、10例和12例所有患者在确诊之后均接受了根治手术，并且根据患者自身情况进行了术后化疗（直肠癌另加放疗），治疗后肠镜随访。
第2原发癌：12例首发升结肠癌中，第2原发癌5例为横结肠癌，6例为乙状结肠癌；7例首发横结肠癌中，第2原发癌4例为直肠癌，3例为乙状结肠；首发降结肠癌9例，所有患者的第2原发癌均为直肠癌；10例首发乙状结肠癌中，3例为降结肠癌，7例为直肠癌；12例首发直肠癌患者中，第2原发癌为升结肠癌者4例，乙状结肠癌5例，直肠癌3例。
血吸虫
Department of Infectious disease, No2 Affiliated hospital of China Medical University
一、概 述
日本血吸虫病是由日本血吸虫寄生在门静脉系统 所引起的疾病。 人主要是通过皮肤接触含尾蚴的疫水而感染。 主要病变是由虫卵引起肝与肠的肉芽肿。 急性期有发热、肝肿大和压痛、腹泻或排脓血便， 血中嗜酸性粒细胞显著增多。
一般在感染后5年左右发生。
根据其主要临床症状分为巨脾型、 腹水型和侏儒型。
临床表现
1．巨脾型：最为常见，均伴有脾功 能亢进。
2．腹水型：腹水是晚期血吸虫病肝功能失 代偿的表现。腹水形成与门 静脉阻塞，低白蛋白血症及 继发性醛固醇增多引起水、 钠潴留有关。腹胀、浮肿和 尿少。
临床表现
3．侏儒型：现已少见。
慢性期以肝脾肿大为主，
晚期以肝脏门静脉周围纤维化为主，可发展为门 静脉高压症(食道、胃底静脉曲张、巨脾与腹水)。
毛泽东《七律二首· 送瘟神》 一九五八年七月一日 读六月三十日《人民日报》，余江县消灭了血吸虫。 浮想联翩，夜不能寐。微风拂晓，旭日临窗，遥望南 天，欣然命笔。 绿水青山枉自多，华佗无奈小虫何！ 千村薜荔人遗矢，万户萧疏鬼唱歌。 坐地日行八万里，巡天遥看一天河。 牛郎欲问瘟神事，一样悲欢逐逝波。
三、流行病学
(二)传播途径 接触疫水。 流行必须具备以下三个条件： 1．粪便入水－病人粪便、河边厕所、 粪船、施肥、牛粪 2．钉螺孳生－唯一中间宿主 3．接触疫水－河水、饮用水、露水
三、流行病学
(三)易感人群
人普遍易感。 患者以农民、渔民为多。 男比女多。 5岁以下儿童感染率低。感染率随年龄增 加而升高，10—20岁组为最高。 夏秋季为感染高峰。
免疫学技术与方法
・免疫学技术与方法・日本血吸虫铁蛋白基因的克隆、表达及其免疫诊断的研究①王 敏 易新元② 曾宪芳② 袁仕善② 李先平 (中南大学湘雅二医院检验科,长沙410011) 中国图书分类号 R383.2 文献标识码 A 文章编号 10002484X(2004)1020696204[摘 要] 目的:构建、表达、纯化日本血吸虫铁蛋白基因的原核表达重组蛋白,并初步观察其免疫诊断价值。
方法:将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆于p G MC载体,转化重组体到大肠杆菌E.coli2566进行表达;采用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白;用S DS2PAGE和Western blot鉴定表达纯化产物;用D ot2E LIS A分别检测了血吸虫病人及正常人的血清。
结果:重组的日本血吸虫铁蛋白以G MC(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)2日本血吸虫铁蛋白融合蛋白的形式在细菌中得到高效表达,分子量为40kD,能被日本血吸虫感染兔血清识别。
用重组铁蛋白检测30例日本血吸虫病人血清和30例正常人血清,阳性率和假阳性率分别为9313%和313%。
结论:成功地表达纯化日本血吸虫重组铁蛋白,且该蛋白具有一定的免疫诊断价值。
[关键词] 日本血吸虫;铁蛋白;基因克隆;表达;免疫诊断Schistosoma japonicum ferritin:cloning,expression and its use in immunodiagnosisWANG Min,YI Xin2Yuan3,ZENG Xian2Fang3,YUAN Shi2Shan3,LI Xian2Ping.Department o f Clinical Laboratory, The Second Xiangya Hospital o f Central South Univer sity,Changsha410011,China;3Department o f Parasitology, Xiangya Medical College o f Central South Univer sity,Changsha410078,China[Abstract] Objective:T o construct,express and purify the prokary otic expressed recombinant protein which contains Schistosoma ja2 ponicum ferritin gene,and to explore its use in immunodiagnosis.Methods:The ferritin gene was subcloned into the expression vector p G MC. The expression vector p G MC with ferritin gene(p G MC2S jferritin)was then used to trans fer E.coli strain ER2566.Fractionate and purify p G MC2 S jferritin using electrophoretic chromatography.M olecular weight of p G MC2S jferritin was determined by S DS2PAGE and Western blot.The pro2 tein used an antigen for D ot2E LIS A to detect sera from schistos omiasis patients and normal controls.R esults:The recombinant protein p G MC2S j2 ferritin was expressed high efficiently in E.coli ER2566and its m olecular weight was40kD.The protein could be recognized by antibody in se2 ra of rabbit in fected with Schistosoma japonicum.The sera from30schistos omiasis patients and30normal controls were tested.The result showed the positive rate and the false2positive rate were9313%and313%,respectively.Conclusion:The authors have success fully expressed and purified the recombinant protein which contains Schistosoma japonicum ferritin gene.The recombinant protein can be used an antigen for the immunodiagnosis of schistos omiasis.[K ey w ords] Shistosoma japonicum;Ferritin;G ene cloning;Expression;Immunodiagnosis 铁是细胞生命过程中不可缺少的必需元素,但是元素铁可催化羟基团形成从而对细胞造成毒害;而且生理pH值的水溶液中含铁物质迅速氧化,通过水解或聚合作用可形成不溶性的三价铁的衍生物,它必须与铁蛋白结合才能发挥运输氧和转移电子的功能。
抗日本血吸虫循环抗原单链抗体的抗原定位和初步应用
抗日本血吸虫循环抗原单链抗体的抗原定位和初步应用陈代雄;孟锦绣;易冰;何蔼;李卓雅;张瑞琳;詹希美【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2003(019)004【摘要】目的将获得的抗日本血吸虫循环抗原的单链抗体进行抗原定位和用于诊断.方法用间接荧光抗体试验(IFA)对2株可溶性单链抗体所针对的抗原进行定位;将可溶性单链抗体进行生物素标记后,用于检测急、慢性血吸虫病人血清标本.结果两个特异性单链抗体分别于日本血吸虫成虫的肠管和生殖系统呈现明显的荧光反应.检测急性血吸虫病人血样20份,慢性血吸虫病人血样30份,正常人血样20份.结果用其中1株单链抗体检测急性病人的敏感度为60%,慢性病人的敏感度为36.7%,特异度为90%;以2株单链抗体混合检测急性病人的敏感度为75%,慢性病人的敏感度为56.7%,特异度为85%.结论经抗体库技术制备的单链抗体可用作日本血吸虫病的诊断,单抗组合较单株单抗可提高免疫学检测的敏感性.【总页数】3页(P63-65)【作者】陈代雄;孟锦绣;易冰;何蔼;李卓雅;张瑞琳;詹希美【作者单位】广州医学院寄生虫学教研室,广州,510182;中山大学中山医学院寄生虫学教研室;中山大学中山医学院寄生虫学教研室;中山大学中山医学院寄生虫学教研室;中山大学中山医学院寄生虫学教研室;中山大学中山医学院寄生虫学教研室;中山大学中山医学院寄生虫学教研室【正文语种】中文【中图分类】R53【相关文献】1.抗rSj14-3-3单克隆抗体检测循环抗原及疗效考核价值的初步研究 [J], 查任远;沈继龙;汪学龙2.液态芯片技术检测抗人类白细胞抗原抗体抗主要组织相容性Ⅰ类相关链A位点抗体在移植肾围手术期急性抗体介导性排斥反应中的应用 [J], 周文强;王新颖;匡国杰;武洪文;石炳毅;韩永;钱叶勇;蔡明;肖漓;王强;许晓光;黄海燕3.抗旋毛虫循环抗原单克隆抗体的制备及初步应用 [J], 贾世玉;刁有祥;付兴伦;刘瑞田4.抗细粒棘球蚴B抗原人源单链可变区抗体临床诊断价值的初步研究 [J], 陈新华;温浩;张金辉;林仁勇;张琰;张静萍;郑树森5.日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP48单特异性双链抗体的构建表达与初步鉴定 [J], 朱毅;朱进;冯振卿;徐璐;李芸茜;仇镇宁;管晓虹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
日本血吸虫铁蛋白基因的克隆、表达及其免疫诊断的研究
日本血吸虫铁蛋白基因的克隆、表达及其免疫诊断的研究王敏;易新元;曾宪芳;袁仕善;李先平【期刊名称】《中国免疫学杂志》【年(卷),期】2004(020)010【摘要】目的:构建、表达、纯化日本血吸虫铁蛋白基因的原核表达重组蛋白,并初步观察其免疫诊断价值.方法:将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆于pGMC载体,转化重组体到大肠杆菌E.coli 2566进行表达;采用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白;用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达纯化产物;用Dot-ELISA分别检测了血吸虫病人及正常人的血清.结果:重组的日本血吸虫铁蛋白以GMC(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)-日本血吸虫铁蛋白融合蛋白的形式在细菌中得到高效表达,分子量为40 kD,能被日本血吸虫感染兔血清识别.用重组铁蛋白检测30例日本血吸虫病人血清和30例正常人血清,阳性率和假阳性率分别为93.3%和3.3%.结论:成功地表达纯化日本血吸虫重组铁蛋白,且该蛋白具有一定的免疫诊断价值.【总页数】4页(P696-699)【作者】王敏;易新元;曾宪芳;袁仕善;李先平【作者单位】中南大学湘雅二医院检验科,长沙,410011;中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室,长沙,410078;中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室,长沙,410078;中南大学湘雅医学院寄生虫学教研室,长沙,410078;中南大学湘雅二医院检验科,长沙,410011【正文语种】中文【中图分类】R383.2【相关文献】1.猪囊虫免疫诊断侯选抗原基因克隆和表达研究进展 [J], 骆学农;才学鹏2.日本血吸虫铁蛋白基因的筛选,克隆与表达 [J], 易新元;Yang,W3.牦牛日本血吸虫Sjp38MAPK基因克隆、原核表达及免疫保护效果研究 [J], 杜敏4.细粒棘球蚴抗原EPC1基因的克隆、表达及其免疫诊断的研究 [J], 蔡辉霞;沈玉娟;韩秀敏;袁忠英;王虎;徐馀信;胡媛;卢潍媛;官亚宜;曹建平5.日本血吸虫中国大陆株基因重组抗原Sj22.6kDa基因克隆与表达的研究 [J], 张桂筠;张兆松;陈淑贞;沈一平;吴海玮;苏川;吴观陵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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Hale Waihona Puke 应 点， 与健 康 兔 血 清 出现 ３个 非特 异 的 阳 性 反 应 点 ；９个 特 异 性 抗 阳 性 反 应 点 中 ， 银 染 ２Ｄ ２ 从 － Ｅ胶 图上 找 到 ２ １个 匹 配 的 抗 原 蛋 白质 点 ； ＭＡＩ Ｉ （Ｆ Ｔ — ）／ ０Ｆ质 谱 鉴 定 和 Ｎ Ｂ Ｄ Ｔ Ｃ Ｉ数 据 库 检 索 ，３个 点 （ １ ９ ） 得 匹 配 蛋 白质 ， １ ６ ． 获 ４个 点 （ ９ ０ ） 得 匹 配 １． 获 Ｅ Ｔ， Ｓ ４个 点 （９ ０ ） 能 从 数 据 库 中 找 到 相 匹 配 的 信 息 。 重 组 表 达 筛 选 出 的 １ ． 未 Ｃ ＨＧＣ ６ ４ ０ ０ｏ和 Ｓ Ｐ ０两 个 抗 原 蛋 白 质 ， ｊ４ Ｗｅｔｒ ｌｔ 果 显 示 ｒＳ ＣＨＧ ０ ０ ０ ｒＳ Ｐ ０均 能 与感 染 兔 血 清 抗 体 发 生 特 异 性 反 应 ， 有 潜 在 的 应 用 价 值 。结 论 ２ ｓｅｎｂｏ 结 ｅｊ Ｃ ６４ 、 ｊ ４ ｅ 具 一 Ｄ ＭＡ Ｉ Ｆ 质谱 联 合 Ｗ ｅｔｒ ｌｔ的 免 疫 蛋 白质 组 学研 究 方 法 ， 于 筛 选 、 定 Ｓ Ａ 中 诊 断 抗 原 蛋 白质 ， 切 实 可 行 Ｅ、 Ｉ — Ｄ ＴＯ ｓｅｎｂｏ 用 鉴 Ｅ 是 的 ； 该 方 法 存 在 一定 的局 限 性 ， 待 进 一步 改进 。 但 有 关键词 ： 日本 血 吸 虫 ； 卵 可 溶 性 抗 原 ； 疫 蛋 白质 组 学 虫 免
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中 国 人 兽 共 患 病 学 报
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文 章 编 号 ：０ ２ ６ ４ ２ １ ） ０ ８ １ ５ １ ０ —２ ９ （ ０ １ １ —０ ６ —０
应用免疫蛋 白质组学方法鉴定 日本血吸虫 虫卵诊断抗原 ＊
王 越 杨再峰 马 安 施 晓 华 陈璋 辉 刘 晓龙 干 小仙 ， ， ， ， ， ，
摘 要 ： 的 虫 卵 可 溶 性 抗 原 （ｏｕ ｌ ｅｇａｔ ｅ ，Ｅ 是 目前 日本 血 吸 虫病 免 疫 诊 断 中最 常用 的 抗 原 。本 研 究 联 合 目 ｓｌｂｅ ｇ ｎｉ ｎ Ｓ Ａ） ｇ 应 用 双 向凝 胶 电泳 （－ ）Ｗ ｅｔｒ ｌ 和 ＭＡＩ Ｉ ＯＦ质 谱 等 技 术 ， 定 Ｓ Ａ 中诊 断抗 原 蛋 白质 。 方 法 Ｓ Ａ 经 ２Ｄ ２ＤＥ 、 ｓｅｎｂｏ ｔ — Ｄ Ｔ 鉴 Ｅ Ｅ Ｅ分 离 蛋 白质 后 进 行 银 染 ， 应 用 日本 血 吸 虫 感 染 兔 血 清 Ｗ ｅｔｒ ｌｔ 选 抗 原 蛋 白点 ， ＭＡ Ｉ ＯＦ Ｔ 或 ｓｅｎｂｏ 筛 用 Ｉ Ｄ Ｔ ／ ＯＦ 串联 质 谱 鉴 定 每 一
中 图分 类 号 ： ３ ３ ２ 文 献 标 识 码 ： Ｒ ８ Ａ
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