红枣多糖提取及分离工艺研究
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红枣多糖提取及分离工艺研究
作者：李铭芳，李淑芳，汪小强,温凯华
来源：《天津农业科学》2013年第01期
摘 要：以红枣为原料，采用热水浸提法，通过正交试验对影响红枣多糖提取率的工艺参数进行了探讨。结果表明，红枣多糖的最佳提取工艺条件为温度80 ℃，加水倍数8倍，时间1 h，连续对原料提取2次。另外乙醇沉淀多糖试验显示，浓缩液与乙醇体积用量之比以1∶3为宜，为红枣多糖的开发利用提供了一些参考。
关键词：红枣；多糖；提取分离；正交试验
中图分类号：R284.2 文献标识码：A
DOI编码：10.3969/j.issn.1006－6500.2013.01.010
Extraction and Separation Process of Polysaccharide from Red Date
LI Ming-fang1， LI Shu-fang2， WANG Xiao-qiang1， WEN Kai-hua1
（1.College of Science， Jiangxi Agricultural University， Nanchang， Jiangxi
330045，China； 2.The First Middle School of Dongxiang County，Jiangxi
Province，Dongxiang， Jiangxi 331800，China）
Ａｂｓｔｒａｃｔ： Using water extraction to extract polysaccharide from
red date through orthogohal test ，conditions of extraction rate were studied in
the paper.The results indicated that the optimum technological conditions for
extracting polysaccharides of red date were as follows：adding 8 times water
as much as red date in 80 ℃ for 1 hour by 2 times extractions to raw
materia.Moreover， the volume of concentrated liquid and the amount of alcohol
in 1∶3 ratio was appropriate when despoiting red date polysaccharides.This
conclusion provided some reference for the exploitation and use of red date
polysaccharide.
Key words： red date； polysaccharide； extraction and separation；orthogonal
test
红枣又名大枣，系鼠李科枣属植物枣树的果实，红枣味美甘甜，营养丰富，既可食用亦可入药，具有滋阴补肾、强身健体、软化血管、开胃健脾等多种功效，享有“百果之王”的美称。红枣中除含有大量的糖分外，还含有生物碱、皂甙、黄酮、氨基酸、维生素等多种物质成分。 龙源期刊网
红枣多糖是红枣中重要的生物活性物质，可作为免疫促进剂，能控制细胞的分裂和分化，调节细胞的生长和衰老，经检测，红枣多糖具有明显的抗补体活性和促进淋巴细胞增殖作用，对提高机体免疫力具有重要的影响，可广泛用于医药、保健品及功能性食品，作为绿色生物医药产品具有广阔的市场开发前景。
红枣在我国南北均有分布，其栽培面积及产量均占世界的90%以上，因此，在我国开发利用红枣产品具有广泛的现实意义。目前，随着各种新的提取分离技术的发展，红枣多糖的提取分离也有多样的选择，如微波提取、酶法提取、超声提取，本研究采用传统的热水提取法，通过正交试验，对红枣多糖的提取工艺条件进行了一些探讨，以期为红枣的综合开发利用提供一些参考。
1 材料和方法
1.1 材 料
红枣：购买于江西农业大学超市。
试剂：葡萄糖、苯酚、浓硫酸、无水乙醇等，所有试剂均为分析纯。
主要仪器与设备：电子天平；722型分光光度计（上海光谱仪器有限公司）；电热恒温水浴锅（上海森信实验有限公司）；离心机（Anke TDL-5-A 飞鸽牌）；真空干燥箱。
1.2 方 法
1.2.1 标准溶液的配制 精确称取葡萄糖标准品0.025 0 g ，定容于250 mL容量瓶中，得到浓度为100 mg·L-1的标准溶液。
1.2.2 标准曲线的绘制 采用苯酚—硫酸法，以葡萄糖为标准样品，分别移取葡萄糖标准溶液0.20，0.40，0.60，0.80，1.00，1.20，1.40，1.60 mL于带刻度的试管中，定容至2.00 mL，另取2.00 mL蒸馏水作空白对照， 每支试管加6%的苯酚溶液2.00
mL， 摇匀，用移液管向每支试管中缓慢加入浓H2SO410.00 mL，摇匀，在40 ℃水浴中加热25 min。在490 nm下比色平行测定3次，以多糖的质量浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，见图1。
1.2.3 多糖的提取工艺流程 红枣→ 冼净去核→烘干→粉碎→称量→水浸提→离心→上清液→乙醇沉淀→离心→真空干燥→红枣多糖。
1.2.4 多糖含量的测定及提取率的计算 多糖含量测定：将提取液定容于250 mL容量瓶中，准确移取2.00 mL于另一个50 mL的容量瓶中 ， 再从其中精确移取2.00 mL于试管中，加6%的苯酚溶液2.00 mL，浓H2SO410.0 mL，摇匀，并放入龙源期刊网
40 ℃水中加热25 min，在490 nm下平行测定吸光度，将测定的吸光度代入标准曲线，求得被测液多糖的浓度，进而求得提取率。
多糖提取率=m2/m1 ×100%，m2为提取液中多糖含量，m1为红枣样品质量。
1.2.5 正交试验设计 确定以浸提温度、时间、料水比为影响因素，每个因素选3个水平，每组以10.0 g原料计，作L9（33）正交试验。
1.2.6 提取次数的确定 在三因素条件下，采用正交试验确定的最佳工艺条件对原料连续提取3次，算得各次的提取率，确定最佳提取次数工艺。
1.2.7 醇析条件的选择 将多糖提取液浓缩后， 分别加入1，2，3，4倍于浓缩液体积的无水乙醇，沉淀24 h后离心，沉淀复溶后测定其吸光度，计算出多糖含量。
2 结果与分析
2.1 正交试验条件选择及结果
通过分析可知，影响红枣多糖提取率因素的主次顺序为：温度A>加水倍数C>时间B，最优的提取工艺条件参数为：温度80 ℃，时间1 h，加水倍数8倍。在此工艺条件下红枣多糖提取率可达6.99%（表1，表2）。
2.2 提取次数的选择
在上述试验确定的最佳提取工艺条件下，对红枣样品连续提取3次，结果见表3。
由表3可以看出，随着提取次数的增加，多糖提取率显著下降，考虑到节省能源及后续醇析工艺的经济性，选择提取2次为宜。
2.3 醇析条件的选择
向多糖浓缩液中分别加入1，2，3，4倍于浓缩液体积的无水乙醇，静置24 h后离心，将沉淀用丙酮洗涤3次，干燥，复溶于水，测定其多糖含量。结果见表4。
由表4可知，浓缩液与乙醇体积比越大，多糖析出也越多，当浓缩液体积与无水乙醇用量之比由1∶3到1∶4时，多糖的析出量增加不明显，考虑到经济成本因素，选择浓缩液与无水乙醇体积之比1∶3较为合适。
2.4 样品分析
利用上述试验所确立的最优工艺条件对红枣样品进行5次平行试验，结果见表5。 龙源期刊网
由表5可以看出，采用上述试验所确立的最佳工艺条件对红枣多糖提取及分离能够获得较好的效果。
2.5 加标回收试验
为了考察试验方法的可行性，进一步验证上述试验，设计了本次加标回收试验，结果见表6。结果显示，回收率在94.71%～103.81%之间，表明试验方法可行。
加标回收率= （加标试样测定值－试样测定值）/加标量×100%
3 结论与讨论
本试验对在提取过程中影响红枣多糖提取率的3个因素进行了正交试验，结果分析表明，影响红枣多糖提取率因素的主次顺序为：温度>加倍数>时间，最优提取工艺条件为：温度80 ℃，加水倍数8倍，时间1 h。
为避免工序繁琐，减少能耗，降低成本，对红枣多糖选择连续提取2次为宜，醇析工序中，浓缩液体积与无水乙醇体积用量之比以1∶3较为合适，经济。
水提醇析是提取红枣多糖常用方法，样品分析试验表明，此方法对红枣多糖的提取分离能够获得较好的效果。
红枣多糖具有多种保健功效及生物活性，充分显示了其在食品医疗领域广泛开发利用的潜力，随着对红枣多糖研究的不断深入，加之我国红枣资源充足，红枣多糖的开发利用将具有广阔的市场前景。在此，本研究对红枣多糖的探讨也为其提取提供了一些参考。
参考文献：
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正交试验法优选红枣多糖滴丸制备工艺
正交试验法优选红枣多糖滴丸制备工艺
黄绍天; 王步江; 李黎
【期刊名称】《《食品研究与开发》》
【年(卷),期】2019(040)019
【总页数】5页(P165-168,214)
【关键词】红枣多糖; 滴丸; 制备; 工艺; 正交试验
【作 者】黄绍天; 王步江; 李黎
【作者单位】天津农学院食品科学与生物工程学院 天津300384; 天津市农副产品深加工技术工程中心 天津300384; 天津天狮学院生物与食品工程学院 天津301700
【正文语种】中 文
枣在中国具有悠久的历史，枣果以其丰富的营养价值、独特的功能特性，作为一种药食两用的同源食品而广受关注[1-3]。随着新型分离检测手段的出现和生命科学的发展，红枣多糖的生理活性和生物学功能逐渐受到人们的关注[4]。研究发现，红枣的多种功能主要源于其中的活性成分多糖，红枣多糖具有较强的抗氧化、抗肿瘤、清除自由基、抗补体、降血糖、降血脂等生物活性[5-10]，可广泛应用于医药、保健品及功能食品等领域[11]。临床研究表明，红枣多糖这种生物活性物质具有较好的抗补体活性和促进淋巴细胞的增殖作用，可有效减轻衰老模型老鼠免疫器官的萎缩及脑老化。目前枣在国内大面积种植，但对于枣产业只有鲜果及干红枣作为农产品销售，科技含量低，产品无推广特点。基于这种状况，本研究试图将红枣多糖制备成滴丸产品，该产品具有速效、服用剂量标准、降低不良反应发生及储存、运输、携带、服用方便等特点。试验对红枣多糖滴丸制备工艺进行优化研究，为红枣深加工及产品开发提供相应的技术支持。
1 材料和方法
1.1 材料与试剂
红枣：天津市武清区农产品交易市场；红枣多糖浸膏（热水浸提优质红枣后经过一定的浓缩后用活性炭硅胶柱纯化除杂，然后采用醇沉制备而得）；无水乙醇（分析纯）：天津中和盛泰化工有限公司；聚乙二醇（分析纯）：山东瑞生药用辅料有限公司；二甲基硅油（分析纯）：北京贝思科技有限公司；苯酚（分析纯）：兴源科技化工有限公司；浓硫酸（分析纯）：南京联特化工有限公司。
多糖的分离纯化及分析
.
.. 多糖的分离纯化及分析
一、多糖的提取方法
（一）溶剂提取法
1、水提法
水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法.多糖是极性大分子化合物，提取时应选择水、醇等极性强的溶剂.用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提渗滤，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇，使其最终体积分数达到70%左右，利用多糖不溶于乙醇的性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置5h，多糖的质量分数和得率均较高.
2、酸碱提法
有些多糖适合用稀酸提取，并且能得到更高的提取率。有些多糖在碱液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。与酸提类似，碱提中碱的浓度也应得到有效控制，因为有些多糖在碱性较强时会水解。
3、超临界流体萃取法
超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术.
（二）生物酶提取法
酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。
（三）超声提取法
超声波是一种高频率的机械波，其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏，有利用植物有效成分的释放，而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流，有效地减小、消除与水相之间的阻滞层，加大了传质效率，有助于溶质的扩散。超声波提取与传统的提取方法相比，有提取效率高、时间短、耗能低等优点。
（四）微波提取
微波是频率介于300MHz和300GHz之间的非电离电磁波，微波提取的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部，由于溶剂及细胞液吸收微波能
细胞内部温度升高，压力增大，当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来，传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。
二、多糖的分离纯化
红枣的功效成分
固 专题报道 Ｚｈｕａｎｔｉ Ｂａｏｄａｏ
强、早果速丰、营养丰富、经济效益和社会效益显
著等特点而被广泛栽培。据统计，我国枣树栽培总 面积为１５０万ｈｍｚ（２ｏｏ６年统计数据），红枣总产量
达２５０多万ｔ，占世界总产量的９８％以上。红枣美味 可口、营养丰富，是一种天然的药食同源食品。
１．红枣的一般营养成分
红枣作为中国的特色果品，色泽鲜艳、酸甜适 口，历来受到人们的青睐。据研究分析，红枣中含
有５０多种化学物质，红枣（干枣）含水量２５％
～３０％、糖５０．３％～８６．９％（以还原糖为主）、蛋白质 ２．９２％～４．０％、脂肪０．２％～０．９６％、粗纤维１．６％～３．１％、
磷０．０９％～１．２７％、钾０．６１％～１．０５％、钙０．０３％￣０．０６％、 胡萝卜素０．４ ｍ １００ ｇ、核黄素０．１５ ｍ￣ｌＯ０ ｇ、尼克
酸１．２ ｍ １００ ｇ、无机酸１．４ ｍ １００ ｇ、硫胺素 ０．６ ｍ￣ｌＯ０ ｇ、维生素Ｂ ０．１７ ｍ １００ ｇ、维生素Ｂ２
０．３５ ｍ １００ ｇ。鲜果中维生素Ｃ含量尤其高，可达 ５００ ｍ￣ｌＯ０ ｇ－８００ ｍ￣ｌＯ０ ｇ。此外，枣果中还含有
人体必需的１８种氨基酸，其中有８种人体不能合
成的必需氨基酸，以及幼儿体内不能合成的组氨酸 和精氨酸。
２．主要功效成分的研究进展 随着近几年人们对红枣功能成分和药理的深入 研究，发现红枣还含有一些其他水果没有或含量很
少，但具有很高生理活性的特殊生物活性成分，即 栏目ｉ持人：刘润平
的功效成分
化学研究所原超范三红林勤保
功效成分。这些功效成分主要包括大枣多糖、环腺 苷酸、有机酸和三萜类、黄酮类和大枣低聚糖等。
（１）红枣多糖 自２０世纪７０年代以来，科学 家发现，多糖类在生物体中不仅是作为能量资源和
构成材料，更重要的是它存在于一切细胞膜结构 中，参与生命现象中细胞的各种活动，具有多种多 样的生物学功能，由此红枣多糖的研究拉开帷幕。
植物多糖的提取方法和工艺
植物多糖的提取方法和工艺
福建水产,2006年8月第3期
JOURNALoF'IJJIANFISHERIES
NO.3
Aug.25.2006
植物多糖的提取方法和工艺
许燕燕
(厦门大学化学工程与生物工程系,福建厦门361005)
摘要:多糖的生物活性倍受关注,其提取方法及工艺已成为目前研究焦点之一.在植物多糖提取的研
究中采用了许多不同的方法,包括溶剂提取法,酸提法,碱提法,酶解法,超滤法,超声波强化法,微波
法.本文对这些方法在不同多糖提取上的运用进行综述,以期为该领域的生产和研究工作者提供参考.
关键词:植物多糖;提取
多糖是存在于自然界的醛糖和(或)酮糖
通过糖苷键连接在一起的聚合物,它是生物体内
除蛋白质和核酸以外的又一类重要的信息分子.
它具有多种生物活性,与生物机能的维持密切相
关,与蛋白质,脂类形成的糖蛋白,脂多糖在细
胞的识别,分泌以及在蛋白质的加工,转移方面
起着不容忽视的作用.近年来,植物,海洋生物
及菌类等来源的多糖已作为有生物活性的天然产
物中的一个重要类型出现,各种多糖所具有的抗
肿瘤,免疫,抗凝血,降血糖和抗病毒活性已相
继被发现.而在菌多糖得到广泛研究的背景下,
越来越多研究人员将目光投向植物多糖.据文
献…报道,已有近100种植物的多糖被分离提取
出来.
尽管许多研究已充分证明了大量植物多糖
具有各种活性,但有些多糖的提取方法和工艺
尚未成熟,基于效率,成本多方面的考虑,各
种方法的开发,比较,分析,仍是研究工作的
焦点之一.
种类繁多的植物多糖,存在于植物中的部位
不尽相同.而且,一般植物细胞壁比较牢固,在
提取前需进行专门的破细胞操作,包括机械破碎
(研磨法,组织捣碎法,超声波法,压榨法,冻
融法),溶胀和自胀,化学处理和生物酶降解.
因此,植物多糖提取的研究中采用了许多不同的
方法,包括溶剂提取法,酸提法,碱提法,酶解
法,超滤法,超声波强化法,微波法.本文对这
红枣中皂甙的提取与分离研究
安徽农业科学，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＡｎｈｕｉ Ａｇ６．Ｓｃｉ．２００８。３６（２２）：９４５８—９４５９，９４６５ 责任编辑张彩丽责任校对张士敏
红枣中皂甙的提取与分离研究
王延峰 ，贺晓龙 ，王艳宁 ，张向前２
（１．延安大学生命科学学院，陕西延安７１６０００；２．陕西省区域生物资源保育与利用工程技术研究中心，陕西延安７１６０００）
摘要『目的］对红枣皂甙的提取工艺进行进一步的优化研究，为红枣的深度开发提供依据。［方法］应用单因素分析和正交试验设计
对红枣皂甙正丁醇提取法的提取工艺进行研究。［结果］结果表明，料液比对红枣皂甙得率的影响比较大，其次为乙醇浓度，再次是浸 提时间，最后是浸提温度；最佳工艺条件为：料液比１：１５，浸提温度６ｏ℃，乙醇浓度７０％，浸提时间２ ｈ。［结论］试验提取工艺条件下，红
枣总皂甙提取含量可达红枣干粉的０．９９％。
关键词皂甙；红枣；提取工艺
中图分类号￥６６５、１ 文献标识码Ａ 文章编号０５１７—６６１１（２ｏｏ８）２２—０９４５８—０２
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆｔｈｅ Ｓａｐｏｎｉｎ ｆｒｏｍ Ｊｕｊｕｂｅ ⅥＡＮＧ Ｙａｎ－ｆｅｎｇ ｅｔ ａｌ （Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｙａｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎａｎ，Ｓｈａｓａｘｉ．７１６ＯＯＯ） Ａｂｓｔｒａｃｔ ［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｔｈｅ ａｉｍ ｏｆｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｗａｓ ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｔｅｄｍｉｑｕｅ ｏｆ ｓａｐｏｎｉｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．［Ｍｅｔｈｏｄ］Ｓｉｎｇｌｅ ｆａｃｔｏｒ ｔｅｓｔ ａｎｄ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ Ｗａｓ
ｕｓｅｄ ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆｔｏｔａｌ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｆｒｏｍｊｕｊｕｂｅ、［Ｒｅｓｕｌｔ］ ｌ￣Ｓｌｌｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｏｒｄｅｒＷＳ．Ｓ ｔｈｅ ｓｏｌｉｄ－ｌｉｑｕｉｄ ｍｔｉｏ ｏｆ ｅｘ—
大枣多糖储藏稳定性研究
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大枣多糖储藏稳定性研究
作者：孟祥哲等
来源：《农业与技术》2015年第01期
摘要：本文对大枣多糖固体在室温4℃和-18℃下储藏稳定性进行了研究，通过选取不同天数测定大枣多糖抗氧化活性（羟基自由基、DPPH自由基、ABTS自由基清除率以及还原力）的变化，考察了大枣多糖的储藏稳定性。结果表明：在室温条件下储藏，大枣多糖的抗氧化活性有所下降，而在4℃和-18℃储藏条件下，大枣多糖的抗氧化活性变化不大。因此，低温储藏有利于大枣多糖活性的保持。
关键词：大枣多糖；储藏；稳定性；抗氧化活性
中图分类号：R28271文献标识码：A
1前言
大枣（Zizyphus Jujuba Mill.）又名红枣，为鼠李科的成熟果实，富含蛋白质、糖类、脂肪、环磷酸腺苷、B族维生素、维生素C、以及钙、磷、铁等营养成分[1-4]。大枣具有补中益气、养血安神的功效，是保健佳品。
我国的土壤和气候很适合枣树的生长，枣产区分布极为广阔，主要分布在新疆、河北、山东、河南、山西、陕西等省。大枣及深加工产品具有巨大的发展空间和经济效益。
大枣多糖是大枣中的重要的保健成分，研究表明，它具有保护肝损伤[5]、提高免疫力[6]、抗氧化活性[7，8]等生理功能。将大枣多糖从大枣中提取出来做成含片、胶囊、饮品等保健食品和药品具有广阔的市场，这就涉及到大枣多糖活性保持的问题。本文以大枣多糖的抗氧化活性为衡量指标，研究了大枣多糖固体分别在室温、4℃和-18℃的储藏稳定性。
2材料与方法
21材料与设备
新疆若羌枣购于农贸市场。DPPH和ABTS购于美国Sigma公司。
S-3C酸度计：上海精密科学仪器有限公司；RE-52A旋转蒸发器：上海亚荣生化仪器厂；TD5A-WS/TD5B-WS台式离心机：湘麓离心机仪器有限公司；752型可见分光光度计：上海菁华科技仪器有限公司。
复合酶辅助微波技术提取红枣多糖的工艺研究
复合酶辅助微波技术提取红枣多糖的工艺研究
红枣多糖是植物发育过程中重要的配糖物质，具有抗氧化、抗菌、抑制酸化和抗炎症等生理活性，因此红枣多糖受到当今社会的广泛关注，并成为食品医药和其他行业中抗氧化剂、生物活性添加剂的重要成分。提取红枣多糖的方法可以大致分为常规液体萃取法和超声波萃取法等，但是由于抗氧化物质受到热损伤，这些方法的保护效果较弱，微波技术的提取红枣多糖的工艺受到越来越多的关注。
微波技术是一种源于电磁能的一种高能激发技术，具有快、高效、环保、能耗低等优点。鉴于其特殊工作性能，将合成酶纳入微波技术结构，也就是称为复合酶辅助微波技术，可以有效提取红枣多糖。具体可以采用以下策略：首先，将红枣切碎，添加足量的抗氧化剂；其次，将切碎的红枣与抗氧化剂搅拌均匀，取合适量的混合液并添加相应的合成酶；再次，采用微波加热，进行抗氧化剂提取，使红枣多糖分解，重复多次；最后，通过冷却技术将红枣多糖提取出来。
复合酶辅助微波技术提取红枣多糖的工艺具有抗氧化性好、复合酶对真菌的耐受性高、高收率、提取物稳定性好、一次性提取低成本等特点。因此，复合酶辅助微波技术在红枣多糖提取方面具有广阔的应用前景，可以有效提升红枣多糖的生产效率和质量。
红枣多糖提取实验报告(3篇)
第1篇
一、实验目的
本研究旨在探讨红枣多糖的提取工艺，优化提取条件，并通过分离纯化得到高纯度的红枣多糖，同时对其抗氧化活性进行评价。
二、实验材料与仪器
1. 实验材料
- 红枣：选用优质红枣，经清洗、去核后备用。
- 主要试剂：水、乙醇、硫酸铵、氯化钠、硫酸铜、铁氰化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠等。
2. 实验仪器
- 磁力搅拌器
- 超声波提取器
- 离心机
- 紫外可见分光光度计
- 蒸发皿
- 烧杯
- 试管等。
三、实验方法
1. 红枣多糖提取
- 将红枣粉末与水按一定比例混合，采用超声波辅助提取法，提取时间、温度、功率等条件进行优化。
- 提取后，将提取液离心分离，收集上清液。
2. 红枣多糖分离纯化
- 采用硫酸铵盐析法，对提取液进行初步纯化。 - 将纯化后的多糖溶液通过大孔树脂AB-8进行脱色、脱蛋白处理。
- 最后，采用凝胶色谱法对多糖进行进一步纯化。
3. 红枣多糖抗氧化活性评价
- 采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法和FRAP法对红枣多糖的抗氧化活性进行评价。
四、实验结果与分析
1. 红枣多糖提取
- 通过单因素试验和正交试验，确定最佳提取条件为：提取时间30min，提取温度50℃，料液比1:20，超声功率200W。
- 最佳条件下，红枣多糖提取率为3.68%。
2. 红枣多糖分离纯化
- 硫酸铵盐析法处理后，多糖纯度达到75%。
- 大孔树脂AB-8脱色、脱蛋白处理后，多糖纯度进一步提高至90%。
- 凝胶色谱法纯化后，多糖纯度达到95%。
3. 红枣多糖抗氧化活性评价
- DPPH自由基清除法：红枣多糖对DPPH自由基的清除率为76.5%。
- ABTS自由基清除法：红枣多糖对ABTS自由基的清除率为80.2%。
- FRAP法：红枣多糖的抗氧化活性指数为29.8μmol/g。
多糖的提取分离工艺研究
多糖的提取分离工艺研究
多糖是由单糖连接而成的多聚物，人们对多糖的研究已经有很长时间的历史，对多糖的初始研究可追溯到1936年Shear对多糖抗肿瘤活性的发现，至20世纪50年代，陆续发现一些真菌多糖和高等植物多糖具有明显的抑瘤活性。最近又发现许多中药多糖还具有降血糖作用。70年代以来，科学家们发现多糖及糖复合物在生物体内不仅是作为能量资源和构成材料，重要的是它存在于一切细胞膜结构中，参与生命现象中细胞的各种活动。多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物、和微生物细胞壁中，是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子。科学研究已经确认糖类物质具有许多生物活性，包括抗肿瘤、免疫、降血糖和抗病毒等，而且对机体几乎无毒副作用。中药多糖因具有增强机体免疫功能及抗肿瘤降血糖等药理作用，而且几乎没有毒性与副作用，因此引起国内外药理学家、生物学家和化学家们的关注。
1.多糖的提取工艺
1.1 水提法
用水作溶剂来提取多糖是最常用的方法之一，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。水提取的多糖多数是中性多糖。一般植物多糖提取多数采用热水浸提法，该法所得多糖提取液可直接或离心除去不溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，用高浓度乙醇沉淀提纯多糖；但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离；还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离；其中，以乙醇沉淀最为普遍。
用100g去核枣粉，加入250mL适当体积分数的乙醇，45℃水浴回流脱脂两次，离心分离后枣渣加水共3500mL，90℃水浴搅拌浸提8h，离心分离，合并所得多糖提取液；提取液45℃减压浓缩，浓缩液用无水乙醇沉淀，离心分离，得粗多糖沉淀；粗多糖加水溶解后，氯仿、正丁醇脱蛋白，用NaOH溶液调pH值至弱碱性，加0.4倍多糖液体积的H2O2，40℃水浴保温4h脱色；脱色液对蒸馏水透析24h，无水乙醇沉淀，离心分离，45℃真空干燥，得到大枣多糖。根据预实验，选择对水冷浸提取工艺有影响的主要因素：加水量、提取时间、提取次数及是否搅拌，按L9（34）进行正交试验。按常规，将中药的水冷浸条件设为中间水平，分别再取高低两水平。最后得出枸杞多糖的最佳提取工艺为：取枸杞药材，第一次加水l0倍，以后每次加水8倍量，共冷浸3次；每次冷浸1h；每小时搅拌10min.溶剂提取为常用的传统方法之一，有自身的优点。如不需特殊设备，成本低等，但此法往往提取效率低且费时，因此，近年来，伴随着现代工业工程技术的迅猛发展，一些现代高新技术不断被应用到植物多糖的提取中。
大枣多糖的提取实验报告
大枣多糖的提取实验报告
一、实验目的
本实验旨在研究大枣多糖的提取方法，通过优化实验条件，提高大枣多糖的提取率，并对提取得到的多糖进行初步的性质分析。
二、实验原理
大枣多糖是大枣中的一种重要生物活性成分。多糖一般溶于水，可通过水提醇沉的方法进行提取。在一定温度和时间条件下，用水将大枣中的多糖成分溶解出来，然后加入乙醇使多糖沉淀，经过离心、干燥等操作，得到大枣多糖。
三、实验材料与设备
（一）实验材料
新鲜大枣（购自当地市场）、无水乙醇（分析纯）、蒸馏水等。
（二）实验设备
电子天平（精度 0001g）、恒温水浴锅、离心机、旋转蒸发仪、真空干燥箱、分光光度计等。
四、实验方法
（一）大枣的预处理 将新鲜大枣洗净，去核，切成小块，在 60℃的烘箱中烘干至恒重，粉碎，过 40 目筛，备用。
（二）多糖的提取
称取一定量的大枣粉末，按料液比 1:20（g/mL）加入蒸馏水，在
80℃的恒温水浴锅中提取 2 小时，提取过程中不断搅拌。提取结束后，冷却至室温，离心（4000r/min，15min），收集上清液。
（三）多糖的沉淀
将上清液减压浓缩至原体积的 1/4，然后缓慢加入 4 倍体积的无水乙醇，边加边搅拌，使多糖充分沉淀。将混合液在 4℃冰箱中静置过夜。
（四）多糖的分离与干燥
次日，离心（4000r/min，15min），收集沉淀，用无水乙醇洗涤 2-3
次，以去除残留的杂质。将沉淀置于真空干燥箱中，在 60℃下干燥至恒重，得到大枣多糖粗品。
（五）多糖含量的测定
采用苯酚硫酸法测定大枣多糖的含量。以葡萄糖为标准品，绘制标准曲线。取适量的大枣多糖样品溶液，加入苯酚和浓硫酸，在沸水浴中加热反应，冷却后在 490nm 处测定吸光度，根据标准曲线计算多糖含量。
五、实验结果与分析
（一）料液比对多糖提取率的影响 分别设置料液比为 1:10、1:15、1:20、1:25、1:30（g/mL），在 80℃下提取 2 小时。结果表明，随着料液比的增加，多糖提取率逐渐提高，当料液比达到 1:20 时，提取率达到最大值，之后提取率增加不明显。因此，选择料液比 1:20 为最佳提取条件。