人脐带血间充质干细胞诱导肝样细胞研究进展
肝干细胞移植治疗终末期肝病的研究进展
干细胞分裂图
作者单位：２３００３１合肥解放军１０５医院消化内科
万方数据
塞煎匿堂呈Ｑ塑堡箜三Ｑ鲞筮！！翅叁些逝丛型ｉ迦』壁坠婴型！丛：圣Ｑ：№：！！：盟壁！：２Ｑ鲤
【关键词］ 肝干细胞；移植；终末期肝病 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ／１０００－０３９９．２００９．１ １．０４３
１ 引言
常规的内科保肝治疗效果不佳，原位肝移植仍然是日前治 疗终末期肝炎致肝硬化最有效的措施。近５年来，我国肝移植 事业更呈专业化和规模化发展，每年肝移植例数已超过２ ０００ 例，据中国肝移植注册（Ｃｈｉｎａ ｌｉｖｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ｒｅｇｉｓｔｒｙ，ＣＬＴＲ）统 计显示，我国大陆肝移植例数９ １１８例中，总体１年、３年和５ 年生存率分别达８４％、８０％和７６％。在肝移植乃至活体肝移 植蓬勃发展的过程中，积累了富有中国特色的自身经验，并逐 渐融入网际移植界这一大家庭。但是，它存在的三大缺陷阻碍 着它的更广泛开展和应用¨Ｊ：①供肝缺乏是永恒的矛盾。我国 是肝病大国，慢性乙肝病毒性肝炎患者近３ ０００多万，其中 ２０％发展为肝硬化，仅此类终末期患者至少约６００万人，以 ２００４年为例１年中仅有约３ ０００例患者有“幸”接受肝移植治 疗。即潜在适合肝移植的患者中，仅有０．０４％接受肝移植治 疗，即使在美围，尽管活体肝移植率已达３０％，但每年还有数千 人在等待器官移植中死亡，而在等待器官移植的患者却以每年 １ １％的速度递增。②免疫排斥反应是难以根本解决的问题：供 体肝与受体存在免疫排斥反应，肝移植术后需长期应用免疫抑 制剂，使患者免疫力下降，易患各种疾病。③从医疗经济学角 度分析，器官移植费用昂贵，对国家、社会、个人都是一种沉重 的经济负担。
脐带血间充质干细胞的分离培养及诱导表达IDO对免疫介导再生障碍性贫血小鼠的治疗研究
脐带血间充质干细胞的分离培养及诱导表达IDO对免疫介导再生障碍性贫血小鼠的治疗研究魏晓巍;李玉云;张强【摘要】目的:从人脐带血中分离和培养脐带血间充质干细胞(umbilical cord blood mesenchymal stem cells,UCB MSCs),探讨其吲哚胺2,3-过氧化酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)活性对MSCs治疗再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)的影响.方法:采集足月分娩儿脐带血,淋巴细胞分离法分离培养UCB MSCs.倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物表达,成骨与成脂诱导鉴定UCB MSCs分化潜能.建立免疫介导AA小鼠模型,尾静脉输注经γ-干扰素(IFN-γ)诱导的UCB MSCs,观察对AA小鼠的治疗效果.结果:UCB MSCs培养1周可见少量贴壁梭形细胞,于3周左右细胞生长形态较均匀,成纤维样、平行排列或漩涡状;传代细胞1周即可见80%左右融合.流式检测细胞表面标志物,不表达造血标志物CD34,CD44、CD73阳性表达率分别为94.36%和92.48%.UCB MSCs经IFN-γ诱导表达IDO活性,对AA小鼠造血恢复具有治疗作用.结论:脐血分离培养的MSCs在IFN-γ诱导作用下,其IDO基因表达对于免疫介导AA小鼠模型具有治疗作用.%Objective: To isolate and culture of umbilical cord blood mesenchymal stem cells (UCB MSCs) from human umbilical cord blood and explore the effect of induction indoleamine2,3-dioxygenase( IDO) expresson on the treatment of immune mediated aplastic anemia(AA) in mice. Methods: UCB was collected from full-term deliveries. UCB MSCs were isolated and cultured using the lymphocyte isolation method. The cell morphologhy was observed under inverted microscope, and the surface markers of MSCs were analyzed by flow cytometry. Osteogenic andadipogenic induction was used to verify the differentiation potential of UCB MSCs. The murine model with immune mediated aplastic anemia were established. The caudal vein of mice was injected with UCB MSCs induced by IFN-γ, and the treatment effect was observed. Results: A little of adherent spindle cells presented at 1 week culture of UCB MSCs. About 3 weeks of culture, these uniformity fibroblast-like cells were found, and showed parallelly or whirlpool-shape arrangement. After passage ,MSCs reached 80% confluence at 1 week. Immunophenotype analysis showed that MSCs expressed CD44(94. 36% ) and CD73 (92. 48% ) ,but no CD34 of hematopoietic marker. UCB MSCs that induced by IFN-γ promoted IDO activity,and had therapeutic effect on haematogenesis function recovery of mice with aplastic anemia. Conclusions;Under IFN-γ induction,the isolated and cultured UCB MSCs from umbilical cord blood can improve the IDO activity,which has therapeutic effect on murine immune mediated aplastic anemia.【期刊名称】《蚌埠医学院学报》【年(卷),期】2012(037)010【总页数】5页(P1147-1150,1161)【关键词】再生障碍性贫血;间充质干细胞;脐带血;免疫介导;吲哚胺2;3-过氧化酶【作者】魏晓巍;李玉云;张强【作者单位】蚌埠医学院,临床检验诊断学实验中心,安徽,蚌埠233030;蚌埠医学院,临床检验诊断学教研室,安徽,蚌埠233030;江苏大学,江苏,镇江,212013【正文语种】中文【中图分类】R556.5间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是来源于中胚层的成体干细胞，具有自我更新和多向分化潜能［1］，脐带血(umbilical cord blood，UCB)是MSCs的重要来源。
人脐带血间充质干细胞的富集与表型鉴定
l
胞 集 落 集 落大 小 不
，
。
至 培养第
天 集落部 分连 片 在集落
，
，
份
，
周 围 可 见 贴 壁 生 长 散 在分 布 的 长 梭 形 成 纤 维 样 细胞 ( 图
、
1)
。
HBsA g
阴 性 采 集 后 2 h 内进 入 实 验 程 序
，
。
脐带血 按
to pa qu }
1
：
的比
2
．
2
富 集 的 脐 带血 间 充 质 细 胞 形 态观 察 培 养第
，ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
。
个
。
份
，
同 型 对 照 抗 体 为 荧 光 素标 记 的 小 鼠 I g G
2
实验 经 医 院 医 学 伦 理 委 员 会 批 准
克 隆抗 体
s o n
，
。
F 1T C
标记
CD 90
、
CDl 4
单
公
结果
1
Pe正 P
标记 C D 2 9
0 1． 7 7
、
C I)4 5
—
单 克 隆抗 体 ( B e c
563∞ 3 )
义 医 学 院附 属 医 院贵 州 省 细 胞 工 程 重 点 实 验 室
问充 质 干 细 胞 ( m
、
e s e n c
hym
a
l
s te m
c e
lls
，
M SC )具
有 自我 更
。
脐带 血 单 个 核 细 胞 细 胞 接 种 密 度 为
，
2 × 10
“
骨组织工程常用间充质干细胞的研究进展
十几年的研究，骨组织工程在种子细胞、支架材料以及细 胞一支架材料复合体等方面的研究取得了很大进展，为临床 骨缺损修复重建打下了良好的基础。其中种子细胞的研究与 应用主要集中在以下几种间充质干细胞：骨髓问充质干细 胞、脐血『日Ｊ充质干细胞、脂肪干细胞、肌源性下细胞等。 ＭＳＣ是一类具有多向分化潜能的干细胞。可来源于骨髓、 脂肪、胎盘、脐血、脐静脉内皮下层、外周血及肌肉等各种组 织中。在特定条件下可向骨、软骨、心肌、脂肪、血管内皮等间 叶组织细胞转化。来源小问的ＭＳＣｓ，虽在生物学特性方面均 表现干细胞特性，但相互之间仍有一定差异。目前对于ＭＳＣｓ 的生物学特性研究主要集中在以下几个方面： １．１分离培养 １．１．１骨髓问允质Ｔ．细胞（ＢＭＳＣｓ）：具有来源广泛、相对容易 获取、扩增表型稳定，无医学伦理学争议及过人的骨异常增 殖趋势等优点，被公认为是骨组织上程最为常用的种子细 胞。目前分离ＢＭＳＣｓ的常用方法有５种：即全骨髓法、密度梯 度离心法、贴肇筛选法、流式细胞仪法及免疫磁珠法。全骨髓 法即根据干细胞贴壁特性，定期换液弃去不贴壁细胞，从而 达到纯化细胞的目的：密度梯度离心法是根据ＢＭＳＣｓ与其他 细胞的密度不同而采用ｐｅｒｃｏｌｌ分离液将其分离出来；贴壁 筛选法则是根据ＢＭＳＣｓ具有在塑料组织培养瓶中贴肇生长 的特性对其进行分离：流式细胞仪分选法则是根据ＢＭＳＣ体 积小、相对缺少颗粒的特性对它进行分选：而免疫磁珠法则 根据细胞表面带有或缺失的抗原成分进行正选或负选。用抗 体包被磁珠，获得相对纯化的细胞。其中由于经过流式或磁 珠分选后的干细胞会Ｈ｛现增殖缓慢等一些问题，加之耗费较 大和技术的难度，两者应用并不广泛。目前最为常用分离 ＢＭＳＣｓ的方法主要是全骨髓法和密度梯度离心法，由于单独
２在骨组织工程中的应用 鉴于上述ｌ’ＨＪ充质十细胞的牛物学特性及各自优势，它们 在骨组织工程研究中的心用越来越广泛，并在基础实验与临 床应用研究两个环节都取得了可喜的成果。目前，伴随基因 工程的发展，它们在骨组织工程研究中的作用得到了更大的 体现和发挥。 ２．１基础研究：由于大块骨缺损修复面临的血管化难题日前 还没能得到很好解决，利用骨组织工程技术仍无法满足临床 上形式各异的骨缺损修复需要，因而大量的基础研究正在为 解决血管化难题，尽快实现由基础研究向临床过渡而努力。
脐血源性间充质干细胞向神经样细胞诱导分化的研究
代的脐血间充质干细胞 ， 用不同浓度的脑源性神经营养因子（ Ｄ Ｆ 和睫状 神经营养 因子 （ Ｎ Ｆ 单 独或联合诱 导脐源血问充 ＢＮ ） Ｃ Ｔ ）
质干细胞 向神经样细胞分化。倒置相差显微镜观察细胞形态变化 ， 于实验第 １３ ６ 、、 天分别进 行神经 元特异性烯 醇化酶 （ Ｓ ） Ｎ Ｅ
和胶 质纤维酸性蛋 白（ Ｆ Ｐ 免疫细胞化学染色并计数分化为神经元 样细胞及 神经胶质 细胞 的 比例 。结果 与对照组相 比， ＧＡ ） ＢＮ Ｄ Ｆ和 Ｃ Ｔ Ｎ Ｆ能显著提高人脐血源 ＭＳ ｓ Ｃ 分化为神经元的比例 。其 中 ２ ｇ ｍ ０ ／ Ｌ的 Ｂ Ｎ ｎ Ｄ Ｆ联合 ２ ／ ０ｎ ｍＬＣ Ｔ ｇ Ｎ Ｆ诱导人脐血 源 Ｍ Ｃ 分化为神经样细胞的 比例最高 。结论 Ｓｓ 人脐血 Ｍ Ｃ 经 Ｂ Ｎ Ｓ ｓ Ｄ Ｆ和 Ｃ Ｔ 体外诱 导 ， Ｎ Ｆ 能够分 化为神经样细 胞。
Ａ Ｓ Ｒ Ｃｔ Ｂ Ｔ Ａ ：Ｏｂｅｔ ｅ Ｔｏｉｖｓｉａｅｔｅｆａｉｉｔ ｆｔｅｉｄ ｃｉ ｆｍｅｅ ｃｙｌ ｔ ｊｃｉ ｖ ｅｔ ｔ ｈ ｅｓ ｌｙ ｏ ｕ ｔ ｎｏ ｓｎ ｈｍａ ｓ ｍ ｎ ｇ ｂｉ ｈ ｎ ｏ ｅ
ｃｌ ｅｉｅ ｒｍ ｕ ｎ ｕ ｉｃ ｌｂｏ ｄ ｉｔ ｅ ｒ ｎ ｌ ｅｃ ｌ ． Ｍ ｅｈ ｄ Ｔｈ ｕ ｎ ｕ ｉｃｌ ｅｌ ｄ ｒ ｄ ｆｏ ｈ ｍａ ｍｂｌ ａ ｌｏ ｎ ｏ ｎ ｕ ｏ －ｉ ｅｌ ｓ ｖ ｉ ｋ ｓ ｔｏ ｓ ｅ ｈ ｍａ ｍｂｌ ａ ｉ ｂｏ ｄ ｄ ｒｖ ｄ ｍｅｅ ｃ ｙ ａ ｔｍ ｅｌ ｗｅｅ ｉｄ ｃｄ ｗｉ ｉ ｅ ｅ ｔｃ ｎ ｅ ｔ ｆｂ ａｎ ｄ ｒｖ ｄ ｎ ｕ ｌｏ － ｅｉｅ ｓ ｎ ｈ ｍ ｌｓｅ ｃｌ ｒ ｎ ｕ ｅ ｔ ｄｆ ｒｎ ｏ ｔｎ ｓｏ ｒｉ — ｅｉｅ ｅ — ｓ ｈ ｆ
干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的研究进展_岑朝
模更大，但冻存和复温也可能导致干细 胞丢失、移植失败。 使用胎盘间充质干 细胞、人胎肝源性干细胞、胚胎干细胞 等治疗肝硬化， 仍然处于动物研究阶 段。 1．3 干细胞定向分化、扩增后移植 事 实上自骨髓、外周血或脐血来源的干细 胞采集液里混有大量的其他单核细胞， 直接输入患者体内仅有少量干细胞发 挥“种子”的作用。 因此，随着干细胞分 离、培养、鉴定及增殖技术的发展和成 熟， 通过体外对干细胞进行纯化培养、 扩增数代后可以得到较多数量的纯化 的干细胞 ／ 祖细胞， 也是提高干细胞移 植治疗的效果重要手段， 如使用 RosetteSep 负 选 分 离 方 法 收 集 自 体 BMSCs 未 被 抗 体 标 记 ，可 用 于 各 种 研 究 或治疗，此方法不需要对细胞行后续处 理，得到的细胞回收率及细胞活力都较 高 ， 收 集 BMSCs 简 便 、 快 速 ， 体 外 增 殖 速度快， 而且具有很强的分化能力，适 合作为以治疗为目的的细胞来源，与造 血 干 细 胞 相 比 ，BMSCs 具 有 更 高 的 分 化 潜能，同时具有取材方便，体外培养扩 增容易，无移植免疫排斥反应，创伤小， 价格低廉、无伦理争议等优点，因而具 有更为广阔的应用前景。脂肪间质干细 胞 在 干 细 胞 研 究 中 也 日 趋 活 跃 ， ［9－10］ 能 不同程度地改善肝脏功能及肝组织病 理学变化，因其取材容易、来源广泛以 及细胞增殖分化迅速，有望成为治疗肝 硬化极具潜力的种子细胞之一，但目前 仍处在动物实验阶段。 1．4 干 细 胞 种 类 对 移 植 效 果 的 影 响 在干细胞移植治疗肝硬化研究和实践 中，来源于自体骨髓、外周血和异体脐 血的干细胞临床应用最为广泛，虽然这 些干细胞都具有自我复制、多向分化特 性以及横向分化的可塑性，但它们在干 细胞池中所属的分化阶段、属系不完全 一样，同时采集液中细胞成份也不完全 一致，如外周血干细胞采集液中 T 淋巴 细 胞 是 骨 髓 采 集 液 的 7 ～ 10 倍 ，是 否 对 肝硬化治疗有影响，尚未明确。 经过体 外扩增的干细胞是否保持干细胞的 肝 硬 化 患者肝脏病理学改善，但 6 个月后恢复 到原来基线水平，提示对于终末期肝硬 化， 首次移植成功并非能一劳永逸，国 内外研究报道多为近期疗效，至于移植 有效后的治疗效应能持续多久，有待研 究 。 郭 晓 钟 等 对 ［14］ 45 例 肝 硬 化 失 代 偿 期 病 例 分 为 首 次 移 植 （23 例 ）与 二 次 移 植 组 （22 例 ） 两 组 ， 分 别 经 肝 动 脉 给 予 自体骨髓干细胞移植，后者在首次移植 后 4 ～ 12 个 月 再 进 行 第 2 次 移 植 ，结 果 Alb、ALT、PT 和 Fib 差 异 有 统 计 学 意 义 ，TBil 和 AST 差 异 无 统 计 学 意 义 ， 提 示多次移植可能增加疗效。因此肝硬化 终末期患者的干细胞移植治疗可能需 要多次反复实施，然而间隔的时间周期 尚未能确定。 6 细胞因子辅助治疗
骨髓间充质干细胞及其外泌体治疗终末期肝病的研究进展
!L"!骨髓间充质干细胞及其外泌体治疗终末期肝病的研究进展梁 悦１，２，胡永红１，２，刘 伟１，２，慕永平１，２，陈佳美１，２，刘 平１，２，３１上海中医药大学附属曙光医院，上海市中医药研究院肝病研究所，上海２０１２０３；２肝肾疾病病证教育部重点实验室，上海市中医临床重点实验室，上海２０１２０３；３上海中医药大学交叉科学研究院，上海市中医药化学生物学前沿基地，上海２０１２０３摘要：终末期肝病是各种急慢性肝病的晚期阶段，病死率高，严重危害人民健康。
目前有效的治疗方法是肝移植，但囿于供体短缺、费用高昂等因素极大地限制了其临床应用。
近年来临床与基础研究表明，骨髓间充质干细胞及其外泌体在治疗终末期肝病上具有良好的临床应用前景。
本文就骨髓间充质干细胞及其外泌体在终末期肝病治疗中的作用机制与临床应用研究概况作一综述，期冀为进一步研究提供参考。
关键词：终末期肝病；间充质干细胞；外泌体；治疗学基金项目：国家自然科学基金重点项目（８２１３０１２０）；国家自然科学基金面上项目（８１９７３６１３）；中国博士后基金面上项目（２０２１Ｍ７０２２１８）Ｒｅｓｅａｒｃｈａｄｖａｎｃｅｓｉｎｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｎｄｉｔｓｅｘｏｓｏｍｅｓｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｅｎｄ－ｓｔａｇｅｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅＬＩＡＮＧＹｕｅ１，２，ＨＵＹｏｎｇｈｏｎｇ１，２，ＬＩＵＷｅｉ１，２，ＭＵＹｏｎｇｐｉｎｇ１，２，ＣＨＥＮＪｉａｍｅｉ１，２，ＬＩＵＰｉｎｇ１，２，３．（１．ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＬｉｖｅｒＤｉｓｅａｓｅｓ，ＳｈａｎｇｈａｉＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＳｈｕｇｕａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ；２．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＬｉｖｅｒａｎｄＫｉｄｎｅｙＤｉｓｅａｓｅｓ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，ＳｈａｎｇｈａｉＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ；３．ＳｈａｎｇｈａｉＡｄｖａｎｃｅｄＢａｓｅｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＢｉｏｌｏｇｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＩｎｔｅｒ ｄｉｓｃｉｐｌｉｎａｒｙＩｎｔｅｇｒａｔｉｖｅＭｅｄｉｃｉｎｅＲｅｓｅａｒｃｈ，ＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１２０３，Ｃｈｉｎａ）Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒｓ：ＣＨＥＮＪｉａｍｅｉ，ｃｊｍ０１０２＠１２６．ｃｏｍ（ＯＲＣＩＤ：００００－０００１－９８０８－９６１０）；ＬＩＵＰｉｎｇ，ｌｉｕｌｉｖｅｒ＠ｖｉｐ．ｓｉｎａ．ｃｏｍ（ＯＲＣＩＤ：００００－０００２－６１５２－４５０８）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｅｎｄ－ｓｔａｇｅｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｉｓｔｈｅｌａｔｅｓｔａｇｅｏｆｖａｒｉｏｕｓａｃｕｔｅａｎｄｃｈｒｏｎｉｃｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓｗｉｔｈｈｉｇｈｍｏｒｔａｌｉｔｙａｎｄｓｅｒｉｏｕｓｌｙｔｈｒｅａｔｅｎｓｐｅｏｐｌｅ’ｓｈｅａｌｔｈ．Ｌｉｖｅｒｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｓｃｕｒｒｅｎｔｌｙａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｉｓｄｉｓｅａｓｅ，ｂｕｔｉｔｓｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｓｇｒｅａｔｌｙｌｉｍｉｔｅｄｂｙｔｈｅｆａｃｔｏｒｓｓｕｃｈａｓｓｈｏｒｔａｇｅｏｆｄｏｎｏｒｓａｎｄｈｉｇｈｃｏｓｔｓ．Ｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓ，ｃｌｉｎｉｃａｌａｎｄｂａｓｉｃｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｓｈｏｗｎｔｈａｔｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙ ｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌａｎｄｉｔｓｅｘｏｓｏｍｅｓｈａｖｅｇｏｏｄｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｐｒｏｓｐｅｃｔｓｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｅｎｄ－ｓｔａｇｅｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅ．Ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｒｅｖｉｅｗｓｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｃｔｉｏｎａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌａｎｄｉｔｓｅｘｏｓｏｍｅｓｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｅｎｄ－ｓｔａｇｅｌｉｖｅｒｄｉｓ ｅａｓｅ，ｓｏａｓｔｏｐｒｏｖｉｄｅａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｆｕｒｔｈｅｒｒｅｓｅａｒｃｈ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｅｎｄ－ＳｔａｇｅＬｉｖｅｒＤｉｓｅａｓｅ；ＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅｌｌｓ；Ｅｘｏｓｏｍｅｓ；ＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓＲｅｓｅａｒｃｈｆｕｎｄｉｎｇ：ＫｅｙＰｒｏｊｅｃｔｏｆＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（８２１３０１２０）；ＧｅｎｅｒａｌＰｒｏｊｅｃｔｏｆＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ（８１９７３６１３）；ＣｈｉｎａＰｏｓｔｄｏｃｔｏｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎ（２０２１Ｍ７０２２１８）ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－５２５６．２０２２．１１．０４１收稿日期：２０２２－０４－１５；录用日期：２０２２－０７－１４通信作者：陈佳美，ｃｊｍ０１０２＠１２６．ｃｏｍ；刘平，ｌｉｕｌｉｖｅｒ＠ｖｉｐ．ｓｉｎａ．ｃｏｍ 终末期肝病（ｅｎｄ－ｓｔａｇｅｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅ，ＥＳＬＤ）以肝功能不能满足人体的正常生理需求为特征，是各种急、慢性肝损伤所致的晚期阶段，主要包括病毒性肝炎、酒精性肝病、自身免疫性肝炎等疾病引起的失代偿期肝硬化及肝衰竭。
脐带血干细胞的基础与应用研究
生命科学Chinese Bulletin of Life Sciences第18卷 第4期2006年8月Vol. 18, No. 4Aug., 2006脐带血干细胞的基础与应用研究顾东生, 刘 斌, 韩忠朝*（中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室，天津 300020）摘 要：作为造血干/祖细胞(hematopoietic stem cells/hematopoietic progenitor cells, HSCs/HPCs)的另一来源，脐带血已经应用于临床治疗多种恶性和非恶性疾病。
脐带血中HSCs/HPCs 的质与量是决定其临床应用效果的最重要因素。
同时，脐带血中还存在多种非造血的干细胞和前体细胞，如间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)、内皮前体细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)和非限制性体干细胞(unrestricted somatic stem cells, USSCs)等，这些细胞可能会在未来的细胞治疗和再生医学中发挥重要作用。
本综述还讨论了脐带血的临床应用及HSCs/HPCs 的体外扩增、增加HSCs 归巢和再植能力等提高其临床应用能力的相关研究。
关键词：脐带血；造血干细胞；移植中图分类号：R322.2; R323.3; Q813 文献标识码：AThe research and application of cord blood stem cellsGU Dong-Sheng, LIU Bin, HAN Zhong-Chao*(State Key Laboratory of Experimental Hematology, Institute of Hematology, Chinese Academy ofMedical Sciences and Peking Union Medical College, Tianjin 300020, China)Abstract: Umbilical cord blood (UCB), as an alternative source of hematopoietic/progenitor stem cells (HSCs/HPCs), has been used clinically for a large number of malignant and non-malignant disorders. The quality and quantity of HSC and HPC may be the most important factors on which the capacity of UCB to perform clinical function depends. Other non-HSCs/HPCs, such as mesenchymal stem cells (MSCs), endothelial progenitor cells (EPCs) and unrestricted somatic stem cells (USSCs), also present in cord blood, which may play a future role in cell therapy and regenerative medicine. This review also covers the efforts to expand HSCs and HPCs ex vivo and recent studies on attempts to enhance the homing and engrafting capability of HSCs as means to enhance the clinical utility of UCB.Key words: umbilical cord blood; hematopoietic stem cells; transplantation收稿日期：2006-04-25基金项目：“863”计划(2003AA205060)；“973”项目子项(2001C B5101)作者简介：顾东生(1981—)，男，硕士研究生；刘 斌(1973—)，男，硕士，助理研究员；韩忠朝(1953—)，男，博士，教授，博士生导师，*通讯作者。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
（ ｓｎｈ ｍａ ｓｅ ｃｌ ， Ｃ ） 间 充 质 干 细 胞 是 来 源 于 中 胚 ｍｅｅｃ ｙ ｌ ｔｍ ｅ ｓＭＳ ｓ 。 ｌ 层 的 具 有 高 度 自我 更 新 能 力 和 多 向 分 化 潜 能 的 成 体 干 细 胞 （ｄ ｌ ｓｅ ｅ１ ， 泛 存 在 于 全 身 结 缔 组 织 和 器 官 间质 中 。早 ａ ｕｔ ｔｍ ｃｌ）广 在２ Ｏ年 前 ， ａ Ｏｇｗａ等 ［人 就 发 现 人 脐 带 血 中存 在 原 始 造 血 干 ｜ ］ 细 胞 。２ ０ ０ ０年 ， ｒ ｅＩ将 采 自脐 血 的 单 个 核 细 胞 于 体 外 培 养 Ｅ ｉ ｓ］ ｃ ｓ
时 ， 得 了 间充 质 细 胞 ， 充 质 细 胞 形 态 呈 成 纤 维 细 胞 样 ， 且 获 间 并
在 一 定 的 实 验 条 件 下 可 分 化 为 肝 细 胞 ［ ］成 骨 细 胞 、 骨 细 １、 软
胞 、 肪 细 胞 、 经 细胞 、 骼 肌 细 胞 ［等 ， 组 织 工 程 、 因工 脂 神 骨 ３ 在 ］ 基
ｏｔｏ ｒｈｉｓＭ］ ｏｈａ ｅＤ ｔｂ ｓ ｙｔＲ ｖ ２ ０ ：５ ｓｅａｔｒ ｉ［ ．Ｃ ｃ ｒｎ ａａ ａｅＳ ｓ ｅ ， ０６ ２ ． ｔ ［３ ＡＩ ｗａ Ａ，Ｍｏ ｉ ｔ ，Ｈｏ ｇａ ｄＹＴ，ｅ ａ．Ｃ ｍｐｒ ｏ ｆ ５ Ｉ ｙＪ ｏ ｒ ｒｙＭＪ ａ ｏ ｌｎ ｔ １ ｏ ａｉ ｎｏ ｓ
ｔｉｍｃｎ ｌｎ ａ ｅｏ ｉｅ ｒａ ｉｏｏ ｅ ｃｔ ｎｄ ｗｉｈ ｎ ｏ ｔ ａ ｉ ｉ ｈ ｔｅ ｔ ｎ ｏ ｔ ｉｄ ｍｅ ｈ ｃｎ ｎ ｔ ｅ ｒａ ｍｅ ｔ ｆ
【 关键 词】 脐 带 血 ； 间 充质 干 细胞中 ３９２
【 献标 识 码 】 Ａ 文
【 文章 编号 】 １ ７－５ １ ２ ０ ） ２０ ０ －３ ６ ２３ １ （０ ８ ０ －４ ７０
干 细 胞 （ ｔｍ Ｃ ｌ Ｓｅ ｅ１ 称 前 体 细 胞 （ ｒｃ ｒｏｃｌ） 祖 细 ）也 ｐｅｕｓｒｅ１或 胞 （ｒｇ ｎｔｒ ｅ ）是 机 体 内存 在 的 一 类 具 有 自我 增 殖 和 多 向 ｐｏ ｅｉ ｌ ， ｏ ｃ１
表 达 多 种 间 叶 祖 细 胞 的 相 关 抗 原 （ Ｈ２ Ｓ 、 Ｈ４ Ａ ＭＡ、 Ｓ 、 Ｈ３ Ｓ 、 Ｓ ＭＡＢ ４ ０Ｃ ３ Ｃ ２ １７ 、 Ｄ１ 、 Ｄ ９及 Ｃ ４ ｅ ， 现 其 免 疫 表 型 和 功 能 特 Ｄ ９）发
点 与 骨 髓 来 源 的 ＭＳ Ｓ 为 类 似 ， 余 培 养 的 均 为 破 骨 样 细 ｃ 极 其
程 以及临床应用上有着 巨大的应用价值。 因脐血有充足的脐血
间充 质 干 细 胞 来 源 ， 且 脐 血 的 免 疫 原 性 较 弱 ， 间 充 质 干 细 而 其
胞 更 为 原 始 ， 增 能 力 更 强 ， 脐 血 间充 质 干 细 胞 的 作 用 越 来 扩 故 越 突 出 ， 作 为 一种 新 的 替 代 细 胞 来 源 用 于 各 系 统 疾 病 的 细胞 可
陈祖 轩 综述 刘 汉锋 审校
（ 西 医科 大 学 第 一 附属 医 院西 院 肿 瘤 内科 ， 西 南 宁 ５ ０ ２ ） 广 广 ３ ０ １
【 要 】 间 充 质 干 细 胞 是 来 源 于 中胚 层 的具 有 高度 自我 更新 能 力 和 多 向 分 化 潜 能 的 成 体 干 细胞 ， 究发 现人 脐 摘 研 带 血 中含 有 间 充 质 干 细 胞 ， 一 定 的条 件 下 能 向 肝 细 胞 定 向 分 化 。 过 对 其 减 轻肝 损 害 ， 进 肝 细胞 再 生 的研 究 ， 肝 病 在 通 促 给 患者 的 治疗 带来 新 的 思 路 和 方 法 。
的研 究 进 展 做 一 综 述 。 １ 人 脐 带 血 间 充 质 干细 胞
口
＝ 脐 带 血 （ｕ ｎｕ ｉｃｌ ｏｄｂｏ ｄ ＨＵＢ ） 脐 带 内 及 Ｉ ｈ ｍａ ｍｂｌ ａ ｃ ｒ ｌｏ ， ｉ Ｃ是
胎 盘 近 胎 儿 一 侧 血 管 内 的 血 液 ， 含 造 血 干 细 胞 包
胞 ， 时发 现 早 产 儿 脐 血 中 间 充质 干 细 胞 的 含 量 要 较 足 月 儿 丰 同 富 。 后 Ｋｉ 等 ［也 证 实 了 人 脐 带 血 中 含 间 充 质祖 细胞 。 倩 之 ｍ ６ 许
移 植 及 基 因治 疗 。 文就 脐 血 间充 质 干 细 胞 诱 导 分 化 为 肝 细胞 本
分 化 潜 能 的 原 始 幼 稚 型 特 殊 细 胞 ，依 据 分 化潜 能 的 大 小 ， 细 干 胞 可 分 为 ３ ： 是 全 能 干 细 胞 ， 类 细 胞 具 有 分 化 为完 整 个 类 一 此 体 的 能 力 ； 是 多 能 干 细 胞 ， 类 细 胞 具 有 分 化 为 多 种 细 胞 的 二 这
维普资讯
西部 医 学 ２ ０ ０８年 ３月 第 ２ 卷 第 ２ Ｏ 期
Ｍｅ Ｗｅｔ ｈｎ ， ｒｈ２ ０ ， ｏ． ０Ｎｏ ２ ｄＪ ｓ Ｃ ｉａ Ｍａｃ ０ ８Ｖ １２ ， ．
４ ０７
人 脐 带 血 间 充 质 干 细 胞 诱 导 肝 样 细 胞 研 究 进 展
（ ｅ ｔ ｐ ｉ ｉ ｔｍ ｃ ｉ ，ＨＳ ｓ） 和 间 充 质 干 细 胞 ｈ ｍａｏ ｏｅ ｃ ｅ ｔ ｓ ｅｓ ｌ Ｃ
能 力 ， 不 具 备 发 育 为 完 整 个 体 的 能 力 ， 骨 髓 间 充 质 干 细 胞 但 如 和脐血 间充质干细胞 等 ； 是单能 干细胞 （ 称专 能干细胞 ） 三 也 ，