α-葡萄糖苷酶抑制活性的测定方法

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微波预处理-超声波辅助提取紫山药多糖及抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

微波预处理-超声波辅助提取紫山药多糖及抑制α-葡萄糖苷酶活性研究WANG Yan-ping;CHEN Yue-ying;JIA Yan-jie;CAO Ya;XU Shi;LOU Fang-hui 【摘要】以紫山药粉为原料,对微波预处理-超声波提取紫山药多糖的工艺进行优化,并以α-葡萄糖苷酶抑制模型研究其对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用.通过单因素及正交试验确定最佳提取工艺为料液比1:40(g/mL)、微波功率300 W、微波时间30 s、超声功率270 W、超声时间30 min.在最佳工艺条件下,紫山药多糖平均得率为11.12％.醇沉后的紫山药多糖粉末中多糖的质量分数为45.80％.α-葡萄糖苷酶活性抑制试验中,紫山药多糖表现出明显的抑制作用,对α-葡萄糖苷酶抑制能力较阿卡波糖弱.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2019(040)014【总页数】6页(P7-12)【关键词】紫山药;多糖;微波预处理;超声波辅助提取;α-葡萄糖苷酶抑制【作者】WANG Yan-ping;CHEN Yue-ying;JIA Yan-jie;CAO Ya;XU Shi;LOU Fang-hui【作者单位】;;;;;【正文语种】中文紫山药多糖是紫山药细胞壁的结构成分，具有抗氧化[1]、免疫调节[2]、抗衰老[3-4]、降糖[5]、耐缺氧[6]等多种生物活性。

目前研究紫山药多糖的提取方法主要集中在热水浸提法[7]、超声波提取法[8]、微波提取法[9]和生物酶法提取[10]等，其中热水浸提法耗时长、温度高、得率低、纯度低，超声波法提取时间短、得率高，但长时间作用会破坏多糖活性[11]，微波法虽提取时间大为减少，但提取温度难以控制，亦会破坏多糖活性。

微波预处理-超声波辅助提取法首先采用微波对经水浸润的物料粉进行0.5 min～3 min 微波预处理，利用微波的热效应使生物细胞壁和细胞膜迅速破裂，然后进行20 min～60 min 超声波提取，利用超声波空化作用、机械作用和热效应进一步破坏生物细胞壁结构，加快多糖释放速度[12]。

中药多酚提取物对_葡萄糖苷酶抑制作用的研究

青钱柳(Cyclocarya paliurus)为胡桃科青钱柳属植物，是我国特有的单属种植物。

养心草为景天科植物费菜（Sedum aizoon L.）的全草，为福建省药物志所收载。

临床研究发现它们具有降血糖、降血脂、降血压等多种保健功能[1]，其主要生物活性成分为多酚类及皂苷等。

但对于这两种中药多酚提取物的总多酚含量测定和α-葡萄糖苷酶抑制活性未见研究报道。

α-葡萄糖苷酶抑制剂可抑制小肠内α-葡萄糖苷酶的活性，延缓或抑制葡萄糖在肠道的吸收，从而有效降低餐后高血糖。

由于其独特的优势，α-葡萄糖苷酶抑制剂已被第3次亚太地区糖尿病治疗药物指南推荐为降餐后血糖的一线药物[2]。

德国拜耳公司研制的阿卡波糖和日本武田制药公司研制的伏格列波糖已经被广泛用于糖尿病及其并发症的防治。

本研究旨在利用已建立的α-葡萄糖苷酶体外抑制模型[3]，对闽产青钱柳和养心草的提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性进行研究，并测定其总多酚的含量，为今后闽产青钱柳和养心草的开发利用提供理论参考。

1材料与方法1.1仪器钱柳、养心草分别采于福建泉州永春县牛姆林自然保护区和龙岩连城兰花公司，经本院中药鉴定教研室鉴定；没食子酸（中国药品生物制品检定所，批号：0831-9501）；4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)（singa公司）；α-D-吡喃葡萄糖苷酶(α-D-Glucosidase，Sigma公司)；阿卡波糖片（拜耳医药保健有限公司，批号：119873）；Folin-Ciocalteu试剂（北京鼎国生物技术有限公司）；其余试剂均为国产分析纯。

UV-2100分光光度计（北京瑞利分析仪器公司）；ELX808酶标仪（美国宝特公司）。

1.2中药多酚提取物的制备称取青钱柳和养心草粗粉各200g，置2L圆底烧瓶中，加8倍量60%乙醇回流提取2次，每次0.5h，减压回收乙醇，制成浓度为0.5g/ml药液。

将药液分别以乙酸乙酯萃取及过聚酰胺柱纯化处理，干燥得到多酚提取物。

降糖中药的筛选

降糖中药的筛选蓝萍; 高英; 王亮; 黄文文; 柳明【期刊名称】《《吉林农业C版》》【年(卷),期】2010(000)005【总页数】2页(P138,143)【关键词】α-葡萄糖苷酶; 抑制剂; 高通量药物筛选; 中药【作者】蓝萍; 高英; 王亮; 黄文文; 柳明【作者单位】西南大学药学院药用资源研究所重庆 400716【正文语种】中文【中图分类】R977.1+5一、材料（一）药材实验药材购自北碚万和大药房, 经中药师王安珍鉴定）：知母、黄精、桔梗、熟地黄、生地黄、木香、麦芽、银耳、牛膝、肉桂、三七、女贞子、麦冬、泽泻、大黄、山药、赤芍、葫芦芭、淫羊藿、苍术、白芍（热）、黄芪、白术、丹参、人参、枇杷叶、五加皮、桑白皮、牛蒡子、菟丝子、石斛、夏枯草、葛根、枸杞、乌梅、地骨皮、黑芝麻、茯苓、牛膝、灵芝、仙茅、藕节、玉竹、薏苡仁、昆布、刺五加、刺五加，共计48种。

（二）主要试剂α-葡萄糖苷酶（实验室自制），还原型谷胱甘肽（Sigma公司），4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG) （Sigma公司）。

（三）主要实验仪器RE-52AA旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂;Hitachi U-1800型紫外分光光度计，日本Hitachi仪器公司;CS1013电热鼓风干燥箱，中国重庆实验设备厂，上海福玛实验设备有限公司。

二、实验方法（一）体外α-葡萄糖苷酶抑制活力的测定在Matsui法基础上进行改进：取pH6.8磷酸盐缓冲液2010uL，适待测样品溶液250uL, 3mmol/L的谷胱甘肽80uL和实验室提取的α-葡萄糖苷酶各80uL于4mL的离心管中，在37℃恒温水浴中反应10min后，将反应液倒入比色皿中，加入80uL硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷（pNPG），于400nm处测定在酶的作用下释放出对硝基苯酚pNP的量，不加待测品溶液作为空白对照，每两分钟读一次吸光度值并记录。

每个样品同时做3个平行，取平均值，然后做吸光度随时间变化的关系曲线，可以发现吸光度与时间成正比例关系。

杨桃不同部位提取物抑制α-葡萄糖苷酶的作用

杨桃不同部位提取物抑制α-葡萄糖苷酶的作用廖彭莹李承曼黄志祥杨小妹唐丽娟（广西中医药大学，广西南宁530001）【摘要】目的：比较杨桃根、叶和果实三个部位不同极性溶剂提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。

方法：建立高效液相色谱法测定体外抑制α-葡萄糖苷酶作用，对杨桃不同部位提取物的抑制作用进行评价筛选。

结果：同等质量浓度下，杨桃根各提取物均对α-葡萄糖苷酶有抑制作用，杨桃叶乙醇冷浸提取物的抑制活性较强，而杨桃果实各提取物对α-葡萄糖苷酶抑制作用较差。

结论：杨桃根各提取物对α-葡萄糖苷酶均有较强抑制作用，其作为α-葡萄糖苷酶抑制剂具有潜在开发价值。

【关键词】杨桃；α-葡萄糖苷酶；抑制作用【中图分类号】R284.2【文献标识码】A【文章编号】1008-1151(2018)10-0036-02 α-Glucosidase Inhibitory Activities of the Extracts from DifferentParts of Averrhoa CarambolaAbstracts: Objectives: To study α-glucosidase inhibitory activities of the extracts from the roots, leaves and fruits part of Averrhoa carambola using different polar solvent.Methods:By establishing high-performance liquid chromatography method to evaluate α-glucosidase inhibitory activities in vitro, the activities of the extracts from different parts of Averrhoa carambola were screened. Results: All of the extracts from the root part of Averrhoa carambola showed inhibitory activities against α-glucosidase. The ethanol extracts obtained under room temperature showed stronger inhibitory activities of α-glucosidase. The extracts from fruit part showed very weak inhibitory activities against α-glucosidase. Conclusions:All of the extracts from the root part of Averrhoa carambola showed inhibitory activities against α-glucosidase, which showed a potent value to develop as α-glucosidase inhibitors.Key words: Averrhoa Carambola; α-glucosidase; inhibitory activitiesα-葡萄糖苷酶抑制剂是临床上治疗II 型糖尿病的主要药物之一，可减缓葡萄糖的生成和吸收，降低血糖水平[1]。

儿茶素EGCG对Caco—2细胞α—葡萄糖苷酶活性的抑制作用研究

儿茶素EGCG对Caco—2细胞α—葡萄糖苷酶活性的抑制作用研究作者：刘淑媛艾仄宜陈玉琼倪德江来源：《湖北农业科学》2017年第13期摘要：试验对Caco-2细胞膜上蔗糖酶和麦芽糖酶这两种α-葡萄糖苷酶活性进行不同培养时间检测，并以儿茶素单体EGCG作为抑制剂，探究其对Caco-2来源的蔗糖酶和麦芽糖酶的抑制效果。

结果表明，Caco-2细胞培养18 d后膜表面具有较高活性的蔗糖酶和麦芽糖酶，可用于进行α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选。

儿茶素EGCG具有蔗糖酶和麦芽糖酶抑制活性，抑制IC50分别为31.08 μg/mL和36.44 μg/mL。

关键词：茶；EGCG；蔗糖酶；麦芽糖酶；Caco-2细胞中图分类号：S571.1 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）13-2479-03DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2017.13.020Alpha-glucosidase Inhibitory Activity of EGCG in Caco-2 CellsLIU Shu-yuan， AI Ze-yi， CHEN Yu-qiong， NI De-jiang（Key Laboratory of Horticultural Plant Biology， Ministry of Education/College of Horticulture and Forestry Sciences，Huazhong Agricultural University， Wuhan 430070， China）Abstract： This research used the Caco-2 cell monolayer model in vitro to simulate the α-glucosidase activity at different culture days. EGCG was used as an inhibitor to investigate the inhibition activities on sucrase and maltase in Caco-2 cells. The results illustrated that Caco-2 could be used to estimate α-glucosidase inhibitory activity after 18 days with high sucrase and maltase activities. EGCG showed inhibitory effect on sucrase and maltase in Caco-2 cells， with the IC50 values of 31.08 μg/mL and 36.44 μg/m L， respectively.Key words： tea； EGCG； sucrase； maltase； Caco-2茶作为世界上三大饮品之一，其抗癌、抗氧化、降血糖、降血脂等健康功效已得到广泛证实[1-4]。

α-葡萄糖苷酶抑制剂体外筛选方法的研究

Ｄａｉｎ１１０３ＬｉｏｉｇＣｈｎ；．ｔｔｙＬｂｒｔｒｆｗ—ｔｃｒＣｈｎｓｅｉｉｅＰａｍａｅｔｃｌｏｅｓｌａ６４，ａｎｎｉａ３ＳａｅＫｅａｏａｏｏｙＮｅｅｈｆｉｅｅＭｄｃｎｈｒｃｕｉａｃｓ．ｏＰｒ
食品研究与开发
生物工程
ＦｏｄＲｅｅｒｈＡｎｖｌｏｎｏｓａｃｄＤｅｅｏｍｅｔ
２１０２年８月
第３卷第８ｌ３期７１
一
葡萄糖苷酶抑制剂体外筛选方法的研究
朱文佳１寇自农２曦付绍平朱靖博ｌ，萧伟，，张，，Ｉ，ｌ４
Ａｂｔａｔｓｒｃ：Ａｏｅｃｅｎｎｔｏｒｅ－ｇｕｏｉａｅｉｈｂｔｒａｅｎｅｔｂｉｈｄｂｎｖｌｓｒｅｉｇｍｅｈｄｆ￣ｌｃｓｄｓｎｉｉｏｓｈｓｂｅｓａｌｓｅｙＨＰＬｎｖｔｏＴｈｏＣｉｉ．ｅｒｅｚｍａｉｃｉｉｉｓｏ－ｌｃｓｄｓｒｅｅｍｉｅｙｍｏｉｒｎｈｅｅｓｆＰＮＰｆｏｔｅｓｂｔａｅｎｙｔａｔｖｔｅｆｃｇｕｏｉａｅｗｅｅｄｔｒｎｄｂｎｔｉｇｔｅｒｌａｅｏｏｒｍｈｕｓｒｔＰＮＰＧ．Ｉｏｄｒｏｍｐｏｅｔｅｅｅｔｏｓｎｉｖｔ，ｔｅｏｄｔｎｏｎｙｅ— ａａｙｅｒａｔｎ．ｎｒｅｔｉｒｖｈｄｔｃｉｎｅｓｔｉｙｈｃｎｉｉｓｆｅｚｍｉｏｃｔｌｚｄｅｃｉｗｅｅｏｒｏｔｚｄｐｉｅ．ＡｃｒｏｅｗａｓｄｔａｉａｅｔｅｅｔｂｉｈｄｍｅｈｄＴｅｒｓｌｓｓｏｄｔａｈＣ５ｖｌｅｆ — ｍｉａｂｓｓｕｅｏｖｌｄｔｈｓａｌｓｅｔｏ．ｈｅｕｔｈｗｅｈｔｔｅＩ０ａｕｓｏｇｕｏｉａｅｉｈｂｔｒｃｉｉｅｆＡｃｒｏｅｗａ．７ｍｇｍＬ．Ｗｈｃｓｃｏｅｏｔｅｅｐｒｍｅｔｌｄｔｌｃｓｄｓｎｉｉｏｓａｔｔｓｏａｂｓｓ２０／ｖｉｉｈｗａｌｓｄｔｈｘｅｉｎａａｅｒｐｒｅｎｌｔｒｔｒｓＳｈｓｍｅｈｄｃｕｄｂｓｄａｎａｔｒａｉｅｏａｉｏａｔｏｆｒｍｂｙ，ｎｔｅｏｔｄｉｉａｕｅ．ｏｔｉｔｏｏｌｅｕｅｓａｌｅｎｔｆｔｄｔｎｌｅｖｒｉｍｅｈｄｏＴｅｌａｄｉｃｕｄｂｓｄｉｅｈｇ —ｔｒｕｈｐｔｓｒｅｉｇｏ一ｌｃｓｄｓｎｉｉｒ．ｏｌｅｕｅｔｉｈｈｏｇｕｃｅｎｎｆｇｕｏｉａｅｉｈｂｔｓｎｈｏＫｅｒ：０一ｌｃｓｄｓｎｉｉｏｓＨＰＬｓｒｅｉｇｍｏｅ；ｉｂｔｓｍｅｌｔｓｅｚｍｅｋｎｔｃｙｗｏｄｓ【ｇｕｏｉａｅｉｈｂｔｒ；Ｃ；ｃｅｎｎｄｌｄａｅｅｌｉ；ｎｙｉｅｉｓｕ

知母中α-葡萄糖苷酶抑制剂的提取及性质研究

２实验部分
２１相关试剂的配制．
（）Ｈ６８浓度为０１ｍｏ・的磷酸缓冲溶液：０１ｍｏ・～ＫＨＯ１ｐ．、．ｌＬ将．ｌＬＰ溶液６．７５ｍＬ与０１．ｍｏ・Ｌ～Ｋ２Ｏ４ｌＨＰ溶液８．２５ｍＬ混合．
Ｎ４Ｑ．
陕西科技大学学报
Ｊ）（ＵＲＮＡＩＯＦＳＨＡＡＮＸＩＵＮＩＶＥＲＳＴＹＣＩＩＯＦＳＥＮＣＥ＆ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ
Ａｕｇ．０１２０
・
Ｖ０．８１２
４・１
文章编号：００５１（０００ — ０１０１０ —８１２１）４０４ — ４
知母中．葡萄糖苷酶抑制剂的提取及质研究）【一
杨秀芳，陈梅，闫倩茹
（．育部轻化工助剂化学与技术重点实验室，陕西科技大学化学与化工学院，陕西西安１教７０２）１０１
摘要：究了从知母中提取分离口葡萄糖苷酶抑制剂．水提物用石油醚、研一将乙酸乙酯、丁醇正
传统中医学治疗糖尿病已有２００多年的历史，０近年来国家确认了一批具有降血糖活性的中药，筛选ａ为一
葡萄糖苷酶抑制剂类药物提供了良好的背景．
知母为百合科植物知母ＡｎｍａｒｅａａｐｏｅｏｄｓＢｅ的干燥根茎，代药理研究结果表明知母ｅｒｈｎｓｈｄｌｉｅｇ．现具有清热泻火、生津润燥等功效［．研究报道知母水提物亦具有一定的ａ葡萄糖苷酶抑制剂作用［．４有］一５在］前人筛选工作的基础上，者进一步研究了知母总水提物的ａ葡萄糖苷酶抑制作用，作一旨在从中提取分离出ａ葡萄糖苷酶抑制剂并对其性质进行初步的研究．一

桑不同药用部位总生物碱对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

·基础研究·△［基金项目］　国家重点研发计划项目（２０１７ＹＦＣ１７０２４００）［通信作者］　陈志元，高级工程师，研究方向：中药现代化；Ｔｅｌ：（０７１４）３１８８７７９，Ｅｍａｉｌ：５７８０１３７＠ｑｑｃｏｍ桑不同药用部位总生物碱对α 葡萄糖苷酶活性的抑制作用△李名洁，孙代华，王泽霞，胡辉，成焕波，陈志元劲牌持正堂药业有限公司／湖北省中药配方颗粒工程技术研究中心，湖北　黄石　４３５１００［摘要］　目的：比较桑不同药用部位（桑叶、桑枝、桑白皮）总生物碱对α 葡萄糖苷酶活性的抑制作用。

方法：采用采用蒸发光散射检测器（ＥＬＳＤ）高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）测定桑不同药用部位总生物碱中１脱氧野尻霉素（ＤＮＪ）含量；以半数抑制浓度（ＩＣ５０）为评价指标，以阿卡波糖为阳性对照，以对硝基苯基 α Ｄ吡喃葡萄糖苷为底物，采用体外抑制模型评价桑不同部位总生物碱对α 葡萄糖苷酶活性的抑制作用。

结果：桑不同药用部位总生物碱中ＤＮＪ质量分数为桑白皮生物碱（３０１％）＞桑枝生物碱（２５８％）＞桑叶生物碱（２１４％）。

桑不同药用部位总生物碱对α 葡萄糖苷酶抑制作用强度为桑枝生物碱＞桑叶生物碱＞桑白皮生物碱＞阿卡波糖。

结论：在桑枝、桑叶、桑白皮总生物碱中，以桑枝总生物碱对α 葡萄糖苷酶活性抑制作用最强，为桑资源开发辅助降血糖的药品和保健食品提供依据。

［关键词］　桑；药用部位；生物碱；１脱氧野尻霉素；α 葡萄糖苷酶［中图分类号］　Ｒ２８５［文献标识码］　Ａ［文章编号］　１６７３４８９０（２０２１）０２０２９００４ｄｏｉ：１０１３３１３／ｊｉｓｓｎ１６７３４８９０２０２００３１１００１ＳｔｕｄｙｏｎＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙＥｆｆｅｃｔｏｆＡｌｋａｌｏｉｄｓｏｆＤｉｆｆｅｒｅｎｔＭｅｄｉｃｉｎａｌＰａｒｔｓｆｒｏｍＭｏｒｕｓａｌｂａｏｎＡｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆαＧｌｙｃｏｓｉｄａｓｅＬＩＭｉｎｇｊｉｅ，ＳＵＮＤａｉｈｕａ，ＷＡＮＧＺｅｘｉａ，ＨＵＨｕｉ，ＣＨＥＮＧＨｕａｎｂｏ，ＣＨＥＮＺｈｉｙｕａｎＪｉｎｇＢｒａｎｄＣｈｉｚｈｅｎｇｔａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏ，Ｌｔｄ，ＨｕｂｅｉＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＦｏｒｍｕｌａＧｒａｎｕｌｅＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ＆ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，Ｈｕａｎｇｓｈｉ４３５１００，Ｃｈｉｎａ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｃｏｍｐａｒｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｌｋａｌｏｉｄｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｄｉｃｉｎａｌｐａｒｔｓｆｒｏｍＭｏｒｕｓａｌｂａ（ｌｅａｆ，ｒｏｏｔａｎｄｔｗｉｇ）ｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆα ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅＭｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆ１ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎ（ＤＮＪ）ｉｎｔｈｅｔｏｔａｌａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｄｉｃｉｎａｌｐａｒｔｓｆｒｏｍＭａｌｂａｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｅｖａｐｏｒａｔｉｖｅｌｉｇｈｔｓｃａｔｔｅｒｉｎｇｄｅｔｅｃｔｏｒ（ＥＬＳＤ）ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）；Ｕｓｉｎｇｈａｌｆｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｖａｌｕｅ（ＩＣ５０）ａｓｅｖａｌｕａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ，ａｃａｒｂｏｓｅａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ，ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｌｋａｌｏｉｄｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐａｒｔｓｆｒｏｍＭａｌｂａｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆα ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅｗｅｒｅｅｖａｌｕａｔｅｄｗｉｔｈｉｎｖｉｔｒｏｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｍｏｄｅｌＲｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅｍａｓｓｆｒａｃｔｉｏｎｏｆＤＮＪｉｎｔｏｔａｌａｌｋａｌｏｉｄｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｄｉｃｉｎａｌｐａｒｔｓｆｒｏｍＭａｌｂａｉｓＭｏｒｉＣｏｒｔｅｘａｌｋａｌｏｉｄ（３０１％）＞ＭｏｒｉＦｏｌｉｕｍａｌｋａｌｏｉｄ（２５８％）＞ＭｏｒｉＲａｍｕｌｕｓａｌｋａｌｏｉｄ（２１４％）Ｉｎｔｈｅα ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｔｅｓｔ，ｔｈｅｏｒｄｅｒｏｆｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｗａｓＭｏｒｉＲａｍｕｌｕｓａｌｋａｌｏｉｄ＞ＭｏｒｉＦｏｌｉｕｍａｌｋａｌｏｉｄ＞ＭｏｒｉＣｏｒｔｅｘａｌｋａｌｏｉｄ＞ａｃａｒｂｏｓｅＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＡｍｏｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐａｒｔｓｏｆＭａｌｂａｓｕｃｈａｓＭｏｒｉＦｏｌｉｕｍ，ＭｏｒｉＣｏｒｔｅｘａｎｄＭｏｒｉＲａｍｕｌｕｓ，ＭｏｒｉＲａｍｕｌｕｓａｌｋａｌｏｉｄｓｈｏｗｓｔｈｅｓｔｒｏｎｇｅｓｔｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｎｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆα ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ，ｗｈｉｃｈｈａｓｔｈｅｖａｌｕｅｏｆｂｅｉｎｇｄｅｖｅｌｏｐｅｄｆｏｒｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｄｉａｂｅｔｅｓｏｒｈｅａｌｔｈｆｏｏｄ［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　ＭｏｒｕｓａｌｂａＬ；ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｄｉｃｉｎａｌｐａｒｔ；ａｌｋａｌｏｉｄｓ；１ｄｅｏｘｙｎｏｊｉｒｉｍｙｃｉｎ；α ｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅ糖尿病已成为严重危害人类健康的公共卫生问题，而我国是糖尿病患病率增长较快的国家之一。

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溶液配制
底物(pNPG)溶液：pH 值6.8 的0.1 mol/L 磷酸缓冲液配制成浓度为5 mmol/L (1.505mg/ml)
反应终止液：0.2 mol/L Na2CO3称取2.16g Na2CO3于烧杯中，加入适量蒸馏水溶解，并定容到100mL，4℃下保存，备用。

阳性对照药品阿卡波糖溶液:精密称取阿波卡糖样品，以磷酸缓冲液为溶剂溶解，配成10 mg/ml的浓度。

配制DNJ标准溶液（抑制剂）：精确称取0.0010g DNJ 标准品，用容量瓶准确定容到10mL，配制成1000μg/mL DNJ标准母液。

将母液分别稀释成、1、5、10、20、40、60μg/mL六个不同梯度的标准品溶液，备用。

α-葡萄糖苷酶的酶溶液：用磷酸缓冲液配制成0.26 U/ml α-葡萄糖苷酶的酶溶液。

OR 0.2 U/ml?
配制α-葡萄糖苷酶的酶溶液：将冻干酶粉（酶活力为14u/mg）用0.01mol/L磷酸缓冲液（pH为6.8）溶解，配制成2u/mL的母液。

再将酶液分别稀释，配制成0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1.0u/mL的酶溶液，备用。

样品组
（药物种类*浓度组数*3）
样品空白组
（药物种类*浓度组数）
对照组
空白组
50 μl 磷酸缓冲液 +20 μl 药液 +20 μl PNPG
阳性对照组 60 μl 磷酸缓冲液 +20 μl 药液 +20 μl PNPG
50 μl 磷酸缓冲液 +20 μl 药液 +20 μl PNPG 70 μl 磷酸缓冲液 +20 μl PNPG
80 μl 磷酸缓冲液 +20 μl PNPG
振荡使充分混匀 37 ℃水浴10 min
+100 μl 酶溶液振荡使充分混匀 37 ℃水浴20 min
+ 150 μl 0.2 mol/L Na 2CO 3
在酶标仪405nm 处测定吸光度
+100 μl 酶溶液 +100 μl 酶溶液。