结核病免疫学辅助诊断检查
诊断结核的标准
诊断结核的标准
诊断结核的标准主要包括以下几个方面：
1. 症状：结核病患者通常会出现一些典型的症状，如咳嗽、咳痰、低热、盗汗、体重下降等。
这些症状可以帮助医生初步判断是否存在结核感染。
2. 影像学检查：通过X线、CT等影像学检查，可以观察到肺部是否存在结核病灶，这对于结核病的诊断具有重要意义。
3. 病原学检查：通过痰涂片、痰培养等方法，可以检测出结核分枝杆菌，这是诊断结核病的金标准。
如果能在患者的痰液中培养出结核分枝杆菌，那么就可以确诊为结核病。
4. 免疫学检查：通过检测血液中的结核抗体、结核感染T细胞等，也可以辅助诊断结核病。
需要注意的是，由于结核病的临床表现和影像学检查可能与其他肺部疾病相似，因此在进行诊断时，医生需要综合考虑患者的病史、症状、体征以及检查结果，以做出准确的诊断。
同时，对于疑似结核病患者，应及时进行病原学检查以明确诊断，以便尽早开始治疗。
结核病实验室检查临床意义
可重复性
中等，但可变
存在的可能性较小 存在的可能性较小 相关性较PPD皮试大 无充足的证据
较高，但证据较少
费用 副反应 患者来院次数 需要的仪器设备 检测过程 得出结果时间 受医生主观因素影响
PPD皮试
低
罕见 两次
无 简单 三天 影响较大
γ-干扰素释放试验
昂贵
罕见 一次
需要 相对复杂 一天 影响较小
失败：
治疗的最后12个月，5次痰培养中有两次或两次以 上阳性；或者在最后的3次，培养中有任何一次是 阳性。
分离培养的优点
敏感性较直接涂片法高，理论上10-100条菌/ 毫升可检出阳性；
特异性较直接涂片法高，可以从菌落生长速 度、色素产生初步判断非结核分枝杆菌；
分离出具有活力的纯培养物，为进一步药敏 试验提供基础。
结核病 实验室检查
细菌学检查 免疫学检查
涂片染色镜检 分枝杆菌分离培养 分支杆菌药敏试验 分枝杆菌菌种鉴定 噬菌体生物扩增法 体液免疫学检查
细胞免疫学检查
分子生物学检查
生物化学检查
体液免疫学检查
• 结核抗体测定 • 结核抗原测定 • 循环免疫复合物测定
结核病体液免疫学诊断具有快速、简 易的优势，但灵敏度、特异度较低，可作 为辅助诊断方法。
实验室耐药与临床耐药之间的有一定差距。
分枝杆菌菌种鉴定
• 鉴别结核和非结核分枝杆菌 非结核分支杆菌传染性小；耐药性高。
噬菌体生物扩增法检测结核
噬菌体生物扩增法检测结核菌
噬菌体生物扩增法检测结核菌临床价值
优点：检测结果只需48小时，使快速诊断成为 可能； 安全可靠，传染性小； 检测活菌，且为半定量试验，可作为治疗效果 好坏的判断指标。 缺点：操作影响因素多，检测涂片阳性痰标本 的敏感性29%~99%，特异性52%~100%。结 果差异很大。有待标准化研究。
结核检验项目
结核检验项目结核病是一种由结核分枝杆菌引起的感染性疾病，其传播途径主要是通过空气中的飞沫传播。
为了及早发现和治疗结核病，医学界开展了多种结核检验项目。
本文将介绍几种常见的结核检验项目，以及其作用和操作步骤。
一、结核菌素皮肤试验结核菌素皮肤试验是诊断结核病最常用的方法之一。
这项检验通过注射结核菌素溶液到皮下，观察注射部位的反应情况来判断是否感染结核分枝杆菌。
注射后48-72小时，如果注射点周围形成红斑和硬结，直径大于5毫米，则说明感染了结核分枝杆菌。
二、结核病原学检验结核病原学检验是通过检测痰液、组织活检等样本中的结核分枝杆菌，来确定结核病的诊断和治疗方案。
常用的方法有涂片法、培养法和PCR法。
涂片法是将样本涂抹在玻璃片上，经染色后观察结核分枝杆菌的形态。
培养法是将样本放入培养基中培养，待菌落形成后进行进一步鉴定。
PCR法是通过扩增结核分枝杆菌DNA的特定片段来检测其存在。
三、结核抗体检测结核抗体检测是通过检测人体内特定的抗体来判断是否感染了结核分枝杆菌。
这种方法可以辅助结核病的诊断和监测治疗效果。
目前常用的结核抗体检测方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光免疫分析法（FIA）。
这些方法通过检测血液中的抗体水平来判断感染情况。
四、结核药物敏感性检测结核药物敏感性检测是为了确定结核病患者对抗结核药物的敏感性，从而选择合适的药物治疗方案。
常用的方法有比例法和荧光法。
比例法是将结核分枝杆菌培养物与不同浓度的药物一起培养，观察菌落生长情况来判断药敏性。
荧光法是通过检测结核分枝杆菌培养物中的荧光信号来判断抗药性。
结核检验项目的开展，能够帮助医生及时发现和治疗结核病，减少疾病的传播。
通过结核菌素皮肤试验、结核病原学检验、结核抗体检测和结核药物敏感性检测等项目的综合应用，可以提高结核病的诊断准确性和治疗效果，为控制结核病的蔓延起到重要作用。
希望通过这些结核检验项目的研究和应用，能够更好地保护人们的健康，并减少结核病的发病率。
结核病辅助诊断项目及意义
结核病辅助诊断项目及意义2008-12-1 13:9在结核病病原学诊断中，下列检查有助于其诊断。
1、免疫学诊断：⑴细胞免疫学诊断——结素试验结核菌素试验简称结素试验，是常用的诊断与辅助诊断方法，其原理为IV型超敏反应。
常用5TU标准结素（PPD-S）于前臂掌侧中央处皮内注射，72小时后观察结果。
①注射部位有针眼大小的红点或稍有红肿，硬结直径小于5mm为阴性反应：未感染过结核菌，近期（4～8周）感染机体尚未产生反应，机体免疫反应受到抑制。
②注射部位硬结直径在5～9mm为+阳性，10～20为++阳性反应：机体接种过卡介苗或感染过结核菌已康复。
③注射部位硬结直径大于20mm（3岁以下婴幼儿大于或等于15mm）或可见水泡、丘疹、局部坏死者为强阳性反应：体内可能有活动性结核病灶存在，可能为抗酸杆菌感染，婴幼儿阳性或强阳性，且未接种过卡介苗，表示体内有活动性结核病灶。
⑵体液免疫学诊断（血清学诊断）体液免疫学－血清学检测结核抗体的反应机制为结核菌侵入机体后刺激机体产生一系列体液免疫和细胞免疫反应，并且细胞免疫随者病情的加重而减弱，体液免疫随着病变的加重（或血行播散）而增加，这种细胞免疫与体液免疫分离的现象在结核病方面表现非常明显。
①酶标法结核抗体试验（ELISA-TB-Ab）ELISA原理是将抗体或抗原吸附于固相载体上，加入检样和酶结合物反应后，再利用酶催化其底物呈色的反应来检测抗原或抗体的方法。
本法测出的阳性对活动性结核有辅助诊断价值，但应结合临床观察，因有少数感染结核菌已治愈者也呈阳性反应。
②金标法结核抗体试验（TB-DOT）该方法是应用现代生物技术提纯结核杆菌特异性外膜抗原，引进斑点金免疫渗滤试验（DIGFA）原理，在定性检测的基础上，引进定量标准色谱卡技术，用于测定活动性结核患者IgG、IgA、IgM抗体的快速血清免疫学诊断，以及化疗后抗体滴定度动态跟踪观察，具有灵敏度高、特异性强等特点，能在数分钟内完成检测。
儿童中枢神经系统结核的诊断标准及流程(团体标准)
儿童中枢神经系统结核的诊断标准及流程(团体标准)在儿童健康领域，结核病一直是一个备受关注的问题。
尤其是儿童中枢神经系统结核，由于其症状表现复杂多样，诊断十分困难，因此需要有一套明确的诊断标准和流程来进行规范。
本文将从深度和广度两个方面来探讨儿童中枢神经系统结核的诊断标准及流程，希望能够为相关医护人员和家长提供一些有益的参考。
一、诊断标准儿童中枢神经系统结核的诊断标准是非常关键的，它可以帮助医生准确判断病情，从而制定合理的治疗方案。
根据国内外专家的研究和临床实践，目前常用的诊断标准主要包括以下几个方面：1. 临床表现：儿童中枢神经系统结核的临床表现主要有头痛、呕吐、癫痫发作、意识障碍等症状，需要医生高度重视。
2. 影像学检查：除了临床表现外，影像学检查也是诊断的重要依据。
脑部CT和MRI检查可以清晰显示蛛网膜下腔、脑实质病变等特征性改变。
3. 实验室检查：脑脊液检查是确诊儿童中枢神经系统结核的金标准，包括细胞计数、蛋白和葡萄糖含量、结核病菌检测等指标。
通过以上诊断标准的综合分析，医生可以做出初步判断，但为了更加准确地诊断儿童中枢神经系统结核，还需要进行进一步的团体标准化诊断流程。
二、团体标准化诊断流程团体标准化诊断流程是指由多个医学专家经过充分讨论和共识达成的诊断流程，旨在提高诊断准确性和一致性。
针对儿童中枢神经系统结核，团体标准化诊断流程主要包括以下几个环节：1. 专家讨论会议：邀请多位脑科医生、影像专家、实验室医师等专家参与，共同讨论儿童中枢神经系统结核的诊断流程，形成初步共识。
2. 制定诊断标准：在专家讨论的基础上，制定儿童中枢神经系统结核的诊断标准，明确临床表现、影像学检查和实验室检查等内容。
3. 诊断流程培训：对参与诊断的医生进行系统的培训，让他们能够准确理解并遵循团体标准化诊断流程。
4. 诊断结果评价：对诊断结果进行定期评价，及时总结经验，不断优化和完善儿童中枢神经系统结核的团体标准化诊断流程。
结核病实验室诊断技术
GenoType MTBDR and 诊断结核感染及对利福 MTBDRplus；INNO- 平和异烟肼药物敏感性 LiPA Rif.TB
Frane; LW Scientific; Zeiss
诊断结核患者
Cepheid GeneXpert
诊断结核感染及对利福 平的耐药性
WHO推荐的结核新诊断技术
方法 DNA微阵列芯片法
有前景的几种新技术
❖ 分子诊断技术:GeneXpert（Cepheid公司） ❖ 分子线性探针技术:INNO-LIPA（Innogenetics公司） ❖ 反向点杂交技术:GenoType MTBDR （Hain Lifescience）
分枝杆菌菌种鉴定试剂盒（亚能生物） ❖ 基因芯片技术：微阵列芯片法（博奥生物） ❖ 细胞免疫学技术：T-SPOT.TB（Oxford Immunotec公司）
目前诊断方法回顾
细菌学检测方法 ： 涂片、常规培养、快培 其他辅助检查方法：皮试、结核抗体
目前诊断方法的局限性
涂片的缺点： 敏感性低； 特异性差； 无法区别死菌与活菌
培养的缺点： 耗时久，一般需4~8周； 阳性率低，约30%~50%；特异性差， 无法区别MTB与NTM
皮试的缺点： 敏感性低特异性差 抗体检测缺点：敏感性低特异性差
新型诊断技术产品比较
企业 美国 Cepheid
比利时 Innogenetics 德国 Hain Lifescience 中国 亚能生物
中国 博奥生物
英国 Oxford Immunotec
方法
产品特点
GeneXpert
同时检测MTBC和判断利福平耐药； 快速；简便；安全
线性探针杂交法 （INNO-LIPA）
➢ 新的实验诊断技术可弥补传统方法的不足，提高诊 断的灵敏度和特异性，但各有缺点或不足，难以完 全满足临床检测需求，因此，新型结核杆菌诊断技 术及产品的研发势在必行。
辅助检查在临床中的应用
辅助检查在临床中的应用近年来，随着医学技术的不断进步，临床辅助检查已成为临床诊断和治疗中不可或缺的重要环节。
辅助检查通过对患者体内各种生理参数和临床指标的检测和分析，可以帮助医生更准确地判断疾病的病情、制定更合理的治疗方案，并且对疾病的预防和早期诊断起着十分关键的作用。
本文将就临床中辅助检查的应用进行深入探讨。
一、临床意义1. 诊断疾病：辅助检查可以帮助医生明确诊断疾病的类型、程度和范围。
X线、CT、MRI等影像学检查可以直观显示病变的位置、大小和形态；血常规、尿常规等生化检查可以帮助了解患者的生化指标和血液成分。
这些检查结果都对医生诊断疾病起着至关重要的作用。
2. 指导治疗：辅助检查结果可以为医生制定治疗方案提供依据。
心电图可以帮助医生了解心脏功能的异常，从而指导心脏病的治疗方案；血糖、血压、血脂等指标可以为糖尿病、高血压等慢性病的治疗提供依据。
3. 判断疗效：在治疗过程中，辅助检查可以帮助医生判断治疗的疗效。
肿瘤患者的肿瘤标志物检测可以帮助医生了解肿瘤疾病的发展情况，从而调整治疗方案。
4. 预防和筛查：辅助检查可以帮助医生进行疾病的早期筛查和预防工作，例如乳腺X 线摄影、宫颈细胞学检查等都可以帮助早期发现癌症病变。
5. 评估病情：辅助检查可以帮助医生评估患者的病情，了解疾病的发展和进展情况，从而更全面地了解患者的病情。
二、常见辅助检查1. 影像学检查：包括X线、CT、MRI、超声等，可以直观显示人体内部结构的情况，对各种病变，如骨折、肿瘤、脏器疾病等进行诊断。
2. 生化检查：如血常规、尿常规、生化学检查、免疫学检查等，可以了解患者的血液成分、生化指标、免疫功能等，对各种疾病的辅助诊断具有重要意义。
3. 病理学检查：包括细胞学检查、组织病理学检查等，通过对病变的细胞和组织进行检测，可以明确病变的性质和类型。
4. 生理学检查：如心电图、肺功能检查、神经电生理检查等，可以检测人体生理功能的异常状况，对心脏病、呼吸系统疾病、神经系统疾病等有重要的辅助诊断价值。
γ-干扰素释放试验联合血清HMGB1及Fe测定对活动性结核病患者的诊断效能分析
γ-干扰素释放试验联合血清HMGB1及Fe 测定对活动性结核病患者的诊断效能分析作者：李玉美陈胤文余晓琳洪建明林炳耀曾今诚林东子来源：《中国医学创新》2020年第17期【摘要】目的：探究γ-干擾素释放试验联合血清高迁移率族蛋白B1（high mobility group box 1，HMGB1）及Fe测定对活动性结核病患者的诊断效能。
方法：选取2018年1-12月于本院就诊的活动性肺结核患者作为活动组（n=154），潜伏性结核分枝杆菌感染者作为潜伏组（n=158）。
比较两组γ-干扰素、HMGB1及Fe水平。
比较血清γ-干扰素释放试验、HMGB1及Fe单独及联合检测对活动性结核的诊断效能。
结果：活动组γ-干扰素水平明显高于潜伏组（P<0.05）。
活动组HMGB1水平高于潜伏组，Fe水平低于潜伏组（P<0.05）。
γ-干扰素释放试验的最佳截断值为2.72 IU/mL;血清HMGB1检测的最佳截断值为4.48 μg/L;血清Fe检测的最佳截断值为10.3 μmol/L。
联合诊断的曲线下面积明显高于各项单独检测，且联合诊断的准确度明显高于各项单独检测（P<0.05）。
结论：血清γ-干扰素释放试验联合HMGB1及Fe测定可提高活动性结核的诊断准确度，同时保持较好的敏感度，对活动性结核诊断有重要的临床价值。
【关键词】活动性结核病γ-干扰素释放试验高迁移率族蛋白B1 Fe[Abstract] Objective： To explore the diag nostic value of γ-interferon release test combined with serum high mobility group box 1 （HMGB1） and Fe determination in patients with active tuberculosis. Method： Active pulmonary tuberculosis patients admitted to our hospital from January to December 2018 were selected as the active group （n=154）， and those infected with latent mycobacterium tuberculosis were selected as the latent group （n=158）. The levels of γ-interferon，HMGB1 and Fe between the two groups were compared. The diagnostic value of serum γ-interferon release test， HMGB1 and Fe single and combined detection for active tuberculosis were compared. Result：The level of γ-interferon in the active group was significantly higher than that in the latent group （P<0.05）. The level of HMGB1 in the active group was higher than that in the latent group，the level of Fe was lower than that in the latent group （P<0.05）. The best cut off value of γ-interferon release test was 2.72 IU/ mL. The best cut off value of serum HMGB1 detection was 4.48 μg/L， and the best cutoff value of serum Fe detection was 10.3 μmol/L. The area under the curve of combined diagnosis was significantly higher than that of individual detection， and the accuracy of combined diagnosis was significantly higher than that of individual detection （P<0.05）. Conclusion：Serum γ-interferon release test combined with HMGB1 and Fe determination can improve the diagnostic accuracy of active tuberculosis and maintain good sensitivity at the same time， which has important clinical value for active tuberculosis diagnosis.[Key words] Active tuberculosis γ-interferon release test HMGB1 FeFirst-author’s address：The Sixth People’s Hospital of Dongguan City， Dongguan 523008，Chinadoi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.17.029结核是严重危害人类健康的慢性传染病，尤其是在发展中国家结核疾病的负担位居世界前列[1]。
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结核病免疫学辅助诊断检查利用免疫学原理检查机体对分枝杆菌、特别是结核分枝杆菌感染造成的免疫反应，从而帮助临床医师进行鉴别诊断；但由于结核分枝杆菌的生物特性及此类病原菌引起的人体免疫反应较为特殊和复杂，截止到目前为止，结核病的免疫学检查在临床诊断中的作用尚存有较大争议。
因此，目前结核病免疫学的检测结果，在结核病的临床诊治中，只能够作为辅助参考，不能作为结核病诊断和评价治疗效果的指标。
临床医师在参考免疫学检查结果的同时，必须同时参照结核分枝杆菌的传统微生物学检查(包括抗酸染色镜检、特别是分枝杆菌培养检查) 的结果并参考其它临床检查手段所得到的结果进行综合判断。
（一）结核病免疫学检查试剂盒概述根据我国临床生物诊断试剂的规定，用于结核病免疫学检查的试剂盒，必须具有国家药品监督管理局颁发的生产文号。
目前，我国已颁发生产文号的结核病免疫学检测试剂盒，按照相应的实验步骤，可分为两大类：一类试剂盒检测的标本一般为血清，是利用ELISA实验原理进行检测，此类试剂盒中都应具有相应的阴性、阳性和空白对照试剂；另一类试剂盒采用快速金标法进行检测实验，检测的标本有血清和全血，此类试剂盒均应具备显示反应正常的质控线或斑点。
由于结核病免疫学检查的试剂盒种类及相应实验步骤区别较大，故请开展此项检查工作的实验室严格按照选用试剂盒厂家提供的说明书进行实验、判断和报告结果。
（二）结核病免疫学检查试剂盒实验的质量控制1、完成结核病免疫学检查实验的操作人员必须经过专门培训。
2、必须选用具备国家药品监督管理局颁发生产文号的检测试剂盒；同时生产厂商提供操作的技术培训和指导。
3、使用的试剂盒必须在有效期内；检测实验记录中必须包括试剂盒的生产批号。
4、进行检测的相应标本必须符合试剂盒说明书中列举的种类和质量标准。
5、采用ELISA技术完成检测的试剂盒，每次实验必须设立阴性、阳性和空白对照；严格按照试剂盒说明书提供的操作步骤完成检测实验，如果相应对照样本检测结果出现问题，必须进行重新实验并分析记录引起问题的可能原因。
6、采用快速金标方法完成检测实验的试剂盒，每批试剂盒投入正常使用前，相应实验室应使用检测结果已知为阳性、阴性的标本或使用生产厂家提供的对照预先进行检测，检测结果相符后方可投入正常使用。
7、对于结果检测值处于无效区和灰区的样本必须进行全过程的重复检测并根据重复检测值报告结果。
本文归纳了结核病细菌学检验所包括的4项基本技术（涂片染色镜检、分枝杆菌分离培养、分枝杆菌药物敏感性试验、分枝杆菌菌种鉴定）以及结核杆菌临床基因扩增（PCR）检验技术、分枝杆菌快速培养及药物敏感性试验技术、免疫学有关检测技术的国家规范。
结核病实验室检查，特别是细菌学检查是结核病确诊和治疗的主要依据。
虽然这些常规检查方法在技术上比较成熟，但笔者认为尚存在以下几个问题：1、结核病诊断方法，目前只是在结核病防治系统内初步得到规范和质量控制，但结核病最初的诊断约85%是在综合性医院里，而恰恰是在综合性医院里结核病的细菌学诊断尚不够规范且水平参差不齐，所以加强和提高综合性医院的结核病细菌学诊断水平是我们今后工作的重点之一。
2、结核病的诊断技术目前还处在较低的水平，国际推荐的涂片和培养方法也还分别存在着特异性差、敏感性低和结果报出时间太长的不足，因此不断加强结核病诊断新技术的研究和开发仍然是十分必须的。
结核菌的快速培养系统是一项得到国际认可的结核菌检测技术，大大提高了培养结果的报出时间，但由于仪器设备昂贵，检测成本太高而较难推广普及。
敏感、特异、快速、经济、个体化是今后结核病实验室诊断的发展方向。
鉴于结核病实验室检查、特别是细菌学检查在结核病控制工作中的重要性，为保障相应检查项目结果的可靠性，要求相应的检查项目必须由经过培训并考核合格的专职人员完成，且开展相应检查的实验室应具备安全操作设施并制定实验室内部质量控制措施，同时接受专业结核病参比实验室的质量控制督导和培训。
结核病的免疫学诊断十几年来国内外学者一直从MT培养滤液中提纯蛋白质抗原，由于该方法制备蛋白抗原较烦琐、费时。
因此，近年来，笔者研究室应用基因工程技术克隆、表达MT基因，简便地获得了大量MT单一的蛋白抗原(如CFPl0、ESA T6、MPT63、MPT64、Ag85A、Ag85B、KatG、16ku、3Sku、65ku等蛋白)，研究其诊断应用价值。
(1)血清学诊断20世纪70年代应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测患者血清中结核特异性抗体，成为结核病常用的辅助诊断手段之一，尤其是近十几年来金标免疫斑点法检测抗原抗体反应已成为无需特殊仪器的快速诊断技术。
由于结核患者免疫功能不同而导致对MT抗原识别的差异，此外结核患者对抗原的识别存在阶段特异性，目前任何一个单一的抗原或商品化的组合抗原检测试剂盒都无法检测出所有结核患者血清中的抗结核抗体，结核病患者的抗体反应是针对许多MT抗原的。
因此，筛选多个纯化的结核病的特异性抗原组成联合抗原是目前血清学诊断的研究方向。
特异性、敏感性、阳性预测值、阴性预测值。
TB-DOT\TB-CHECK\TB-PPD。
MPT64结核杆菌分泌到体外的蛋白质。
(2)皮肤试验结核菌素、纯蛋白衍生物(PPD)皮肤试验是最常用且最简便的一种结核分枝杆菌感染诊断方法，但由于PPD中含有许多分枝杆菌共同的抗原，PPD皮试阳性并不能鉴别是因为MT复合群感染还是接触环境中NTM或卡介苗接种后造成的致敏。
因此，PPD皮试诊断的特异度差，用该方法进行结核病流行病学调查获得的结核分枝杆菌感染率并不能真正反映人群中结核分枝杆菌感染的实际状况。
目前国内外学者通过动物模型或临床试验研究纯化抗原、合成多肽和重组蛋白，筛选致病性结核分枝杆菌表达而BCG不特异抗原，以期建立新的结核皮肤诊断试剂。
假阳性，假阴性，无反应。
PPD阴性，经1--3周再试验，如PPD阳性，结核。
PPD阴性，不考虑结核。
(3)双抗体夹心ELISA检测细胞因子水平目前的研究已表明活动性肺结核、结核性胸膜炎或脑膜炎患者血液中或局部组织的T淋巴细胞、单核细胞或巨噬细胞在MT抗原的激活下，释放可溶性白细胞介素(1L-2)受体、膜IL-2受体、γ干扰素(1FN-γ)、。
肿瘤坏死因子、IL-18和IL-8的水平不同，与正常人或非结核性疾病差异有显著性。
因此，采用双抗体夹心ELISA检测其在血清、胸腔积液、脑积液中的水平，对结核病具有辅助诊断和鉴别诊断价值；对抗结核疗效和病情转归的评价具有一定的临床意义。
(4)T淋巴细胞增殖试验MT特异的蛋白抗原(如ESAT6、CFPl0蛋白等)可刺激结核分枝杆菌感染的人和牛外周血单个核细胞(PBMC)产生增殖反应和大量的IFN-γ，而卡介苗接种的健康人对该抗原反应水平低，其特异性显著高于MT超声抗原和培养滤液。
结核病在疾病发展的不同阶段，T淋巴细胞识别的结核抗原也不尽相同，因此，目前正通过双抗体夹心ELISA检测PBMC 受特异抗原刺激后产生IFN-了的水平，或通过酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测分泌IFN-丁的外周血T淋巴细胞，建立新的灵敏度高、特异度强的诊断结核分枝杆菌感染的特异性方法。
但这些方法均为体外的T细胞试验，技术较复杂，需要高度纯化的MT特异的蛋白或多肽抗原及用于细胞培养和细胞因子检测的仪器、设备，可能难以在临床上常规应用。
(5)T细胞亚群分析结核病患者存在明显的细胞免疫功能紊乱，其外周血CD+3、CD+4T淋巴细胞下降，CD+8T淋巴细胞增高，CD+4／CD+8值降低，同时伴有T细胞活化功能障碍，尤其是活动性结核病更为显著；但结核性胸腔积液中淋巴细胞比例、CD+4T淋巴细胞显著升高。
分析T细胞亚群的变化对于病情监控、疗效判定和预后判断都具有重要意义，并有助于结核性和癌性胸腔积液的鉴别。
(6)红细胞免疫功能测定红细胞免疫系统新概念是1981年由美国学者Siegel提出的，经过20多年国内外学者的研究发现，红细胞CRl有黏附C3b、C4b的能力。
测定结核病患者红细胞免疫黏附能力和红细胞免疫黏附促进因子，结果两者均明显低于正常人，结核病患者红细胞免疫促进因子下降可能是其红细胞免疫黏附功能降低的重要原因之一。
因此，红细胞免疫功能测定可作为结核患者免疫功能状态的一个新指标，为结核患者的免疫治疗、判断愈后提供依据。
结核治疗效果不佳，初始耐药，非结核分枝杆菌。
牛性也可能是非结核分枝杆菌。
过近6年的研究，采用分子生物学技术，找到了可以明显提高菌阴肺结核检出率的最佳方案——五种方法联合同步检测法。
目前全世界结核菌感染人数占世界总人口数的1/3，全球结核病人约2000万，中国肺结核病人约600万。
在肺结核病人中，大约有50 %～70%的病人痰中检查不出结核菌，即所谓菌阴肺结核(经3次痰涂片和一次培养均为阴性者)。
由于菌阴肺结核的诊断缺乏“金标准”，诊断困难，极易发生漏诊、误诊、漏治、误治、过治，不仅给病人增加了负担，还给社会带来负担和危害。
因此，如何准确对菌阴者进行诊断和治疗，是亟待解决的一个难题。
河南省结核病防治所原所长、主任医师王国斌和主任医师叶德普等，为寻找出一组较灵敏、快捷、简便、特异的诊断菌阴肺结核的方案，进行了长期的探索。
他们在传统诊断肺结核的临床方法(症状、病史、血象、胸片、结核菌素试验、痰涂片或培养)的基础上，采用聚合酶链反应、酶联免疫吸附试验、结核特异性循环免疫复合物、结核抗体包括结核分枝杆菌壁糖脂免疫球蛋白、卡介苗免疫球蛋白等五种方法进行同步检测，对菌阳肺结核、菌阴肺结核、非结核性肺部疾病、健康人群分别作了对比观察研究。
结果证明，上述五种方法联合检测可将菌阴结核的检出率提高到85.7%；而用一种或两种方法的检出率只有21.4%～44%。
有关专家认为，这种方法简便、易行、快速，在我国县以上医院可以常规开展，能明显提高对菌阴肺结核的诊治，减少误诊、误治，有效控制结核病。
此成果已被评为河南省医药卫生科技成果一等奖。
由于诊断不明，结核病人被误治、漏治特别是当作癌症过治的情况在临床并不鲜见。
准确及时诊断与病人治疗关系重大。
本期我们介绍两则有关结核病临床诊断研究进展的消息，希望对医生、患者有所帮助。