克瘤丸对结肠癌细胞HT-29黏附和侵袭能力的影响

等 ７味 中药 组 成 ｌ １ Ｉ 们经 过 多 年 的 临 床 实践 及 实 验研 究 ， 。我 证 实 了克 瘤 丸 具 有 一 定 的稳 定 瘤 体 。 制 肿 瘤 生 长 ， 高 免 疫 抑 提
以 及抗 血管 生 成 的 作 用ｌ Ｉ ｌ 。本研 究着 重 于 克 瘤 丸 对结 肠 癌 细 ＿ ５ 胞 Ｈ 一 ９的增 殖 、 袭 、 移 等 生 物 学行 为 的影 响 。 Ｔ２ 侵 转
计算 细胞 黏 附 抑 制 率 ： 制 率 ＝ １ 加 药 值 ／ 白值 ） １０ 抑 （一 空 ｘ ０ ％。
后得 ５种终浓度的溶液 ：ｍ ／ Ｌ ２ ／ Ｌ、ｍ ／ 、．ｒ ｍＥ ４ ｇｍ 、ｍｇ ｍ ｌｇ ｍＬ ０ ｅ ５＃ 、
０２ ｍｇ Ｌ ６０培 养液 购 自 Ｇｂ ｏ 司 ； 牛 血 清 购 自杭 州 ．５ ／ 。１４ ｍ ｉ 公 ｃ 小
四 季 青 公 司 ： ｒｒ Ｄ Ｓ 和 胰 蛋 白 酶 购 自 Ｂｏ ｈ ｒ Ｍｒ 、 Ｍ ０ ｉ ａｐ公 司 ： ｓ ８ ｍ 微 孔 聚 碳 酸 酯 膜 的 Ｔａ ｓｅ １ ｘ ｒｎ ｗ ｌ 胞 培 养 小 室 购 自美 国 ｌ细 Ｍｉ ｉ ｒ 司 ； ｔ ｇ ｌＦ ｌｐ ｅ公 ｌｏ Ｍａ ｉｅ 、 Ｎ胶 购 自美 国 Ｂ ｒ Ｄ公 司 ： 结 肠 癌 细 人
ＭＴ Ｔ法 、 细胞 黏 附人 工 重组 基 底 膜 培 养 小 室 （ｒｎｗ ｌ小 室 ） ， 察 克 瘤 丸 对人 结 肠 癌 细胞 Ｈ 一 ９增 殖 、 附和 侵 袭 能 Ｔａｓ ｅ ｌ 法 观 Ｔ２ 黏 力的 影 响 。结 果 ： 对 照 组 比较 ， 瘤 丸有 抑 制 人 结肠 癌 细胞 Ｈ 一 ９增 殖 的作 用 ， 着药 物 浓 度 的增 大 ， 对 细胞 的 抑 制 与 克 Ｔ２ 随 其
１０ ｉ， 出培 养 液 ， 灭 菌 Ｐ Ｓ小 心 清 洗 每 孑 ２ｍｎ吸 用 Ｂ Ｌ２次 ， 去 未 洗
黏 附 细胞 ，每 孔加 入 Ｉ ０ Ｌ １ ４ Ｏ ￣ ６ ０培 养 液＋ ０ Ｌ Ｍ Ｉ溶 液 ， ２ １ Ｔ＇ ｘ 继续 培 养 ４ ， 去 全 部上 清 ， ｈ弃 每孔 加 入 １ ０ Ｌ Ｄ Ｏ， ５ ￣ ＭＳ 振荡 器 振 荡 １ ｍ ｎ 使 结 晶 完 全 溶 解 ， 酶 联 仪 波 长 ４ ０ ｍ 处 测 出 ０ ｉ， 在 ９ｎ 各 孔 吸 光 度 值 （ Ｄ ， ０ 值 代 表 黏 附 细 胞 数 ， 下 列 公 式 Ｏ ）以 Ｄ 按
ｉ． ｊ
夥
克瘤丸对结肠癌细胞 Ｈ 一 ９黏 附和侵袭 能力的影响 Ｔ２
黄舒 然 王瑞平 ： 邹 玺
（． １南京 中医药大 学第一 临床 医学 院， 苏南京 ２ ０ ４ ；２江 苏省 中医院 ， 苏南京 ２ ０ ２ ） 江 １０６ ． 江 １ ０ ９
摘 要 目的 ： 察 克 瘤 丸 体 外 对 人 结 肠 癌 细胞 Ｈ 一 ９增 殖 、 附 、 袭 的 影 响 ． 价 其 抑 瘤 的 效 果 ． 法 ： 用 观 Ｔ ２ 黏 侵 评 ．方 采
克 瘤 丸 为 江 苏 省 中医 院肿 瘤 内 科 在 总 结 多 年 临 床 经 验 和 反 复 临床 实 践 的 基 础 上 研 制 出 的 抗 肿 瘤 制 剂 （ 药 制 字 苏
Ｚ ４０ ５ １ ． ０ ０ ０ ３ ） 由斑 蝥 、 莪术 、 虎 、 壁 山豆 根 、 蛭 、 鳖 虫 、 芪 水 土 黄
０５ ／ 、．５ ／ Ｌ 的 １ ４ ． ｍＬ ０２ ｍｇ ） ｍｇ ｍ ６ ０培 养 液 ，每 种 浓 度设 ３个 附 孔 。 照 组 加 入 无 药 物 的 １４ 对 ６ ０培养 液 。常规 培 养 ３ 、 ０ ９ 、 ０ ６ 、０
克 瘤 丸 各 组成 药 材 购 自江 苏 省 中 医院 药 房 ，采用 组 合 提
率也 明显 增 大 ， 当药 物 浓度 达 到 ｌ ］ Ｌ时 ， Ｈ 一 ９细胞 的抑 制作 用 最 强 。 克瘤 丸作 用 于人 结 肠 癌 细胞 Ｈ 一 ９后 ， ｍｇ ｍ 对 Ｔ２ Ｔ２ 细
胞 的 黏 附 能 力 明显 降低 ， 袭 的 细 胞 数较 对 照 组 明 显 减 少 结 论 ： 瘤丸 对 人 结肠 癌 细 胞 Ｈ 一 ９的 增 殖 具 有 抑 制 作 用 ， 侵 克 Ｔ２
１ 实验 材 料 Fra bibliotek７ ｍＬ的 Ｆ 包 被 ９ 板 ， 孔 ３ ， 净 台 风 干 ，℃备 ０＃ Ｎ ６孔 每 ０Ｌ超 ４
用 。 悬 细胞 至 浓 度 约 为 １ ｌ ６ ／ Ｌ 接 种 于 ９ 孔 板 ，ｘ 重 ×ｏ个 ｍ 。 ６ Ｉｌ
个／Ｌ 待 细 胞 贴 壁 后 ，加 入 含 不 同 浓 度 克 瘤 丸 （ｍ＃ 、 －， ｆ １ ｍＬ
１ ｒ ｎ 使 结 晶 物充 分 溶 解 。 酶联 免 疫 检 测 仪 ４ ０ ｍ 处 测 量 ０ ｉ， ａ 在 ９ｎ
各 孔 的吸 光 值 。 算 抑 制 率＝ １ 实 验 组值 ／ 照 组 值 ）１０ 计 （－ 对 × ０ ％。
重复 ３次 。
２３ ＭＴ 法 检 测 克 瘤 丸 对 ＨＴ ２ 细 胞 黏 附 能 力 的 影 响 用 － Ｔ 一９
能抑 制 人 结 肠 癌 细胞 ＨＴ ２ 一 ９的黏 附能 力 和侵 袭 能 力
关 键 词 克 瘤 丸 结 肠 癌 细 胞 ＨＴ ２ 细 胞 增 殖 细 胞 黏 附 细 胞 侵 袭 一９
中图 分 类 号 Ｒ２ ９５ ８ ．
文 献标 识 码 Ａ
文章 编 号 １ ７ — ９ Ｘ（ ０ ２）０ ０ ７ — ３ ６ ２ ３ ７ ２ １ １— ０ ９ ０
取 法 ， ２０ 粗 粉 Ｃ ： 临 界 萃 取 后 ， 渣 醇 提 （０ 乙醇 ） 取 ０ｇ Ｏ超 药 ７％
后 合 并 提取 液 ， 波 真 空 十 燥 将 上 药 用 生 理 盐 水 于 实 验 前 微 ，
稀 释后 得 终 浓 度 为 ｌ／ ｇｍＬ的药液 ．实 验 前 用 完 全 培 养液 稀 释