成年山羊延髓的解剖图谱
延髓
延髓延髓居于脑的最下部，与脊髓相连；其主要功能为控制呼吸、心跳、消化等。
延髓在脊髓的直接上延部分，是脑干的后段。
延髓调节控制机体的心搏、血压、呼吸、消化等重要功能，延髓的局部损害常危及生命，故被看作机体的生命中枢。
延髓是中枢神经系统许多感觉和运动纤维传导的必经之路。
其中一些上行冲动能影响大脑皮层的功能，对维持觉醒和产生睡眠有重要作用。
向下的冲动参与了肌紧张和躯体运动的调节。
另外，延髓内一些神经核团接受内脏感觉传入，参与内脏运动及腺分泌的调节。
延髓之内具有与生命活动有关的中枢结构。
1.心血管中枢。
利用定位仪电刺激延髓不同部位，发现第Ⅳ脑室头端外侧背部的网状结构的广大区域都可使外周血管收缩、血压上升，这区域叫做加压区;刺激延髓尾端内侧腹部网状结构时，出现心搏减慢、血管舒张、血压下降，此结构叫做减压区。
这两个区域之间在功能上有协调关系，并保持着适度的紧张性活动等。
2.加压中枢。
延髓网状结构中属加压区的神经核有巨细胞网状核、外侧网状核。
它们通过网状脊髓束下行纤维至脊髓胸1～腰3灰质侧角，发出交感缩血管纤维。
静息情况下其节前纤维每秒钟发放1～2次冲动，使小动脉血管平滑肌保持一定紧张度，维持了外周阻力。
加压区的兴奋常引起全身性加压反应。
3.心加速中枢。
加压区中控制心脏活动的神经集团，也分布在延髓网状结构内。
通过网状脊髓束与上胸段T1～5，6，脊髓灰质侧角发生联系，再支配心脏的窦房结、心房肌、房室结和心室肌，使心搏加速加强。
4.减压中枢。
延髓的孤束核、旁正中网状核和中缝核均属此区。
它们接受窦神经等的传入冲动，再发出第2级纤维作用于脑干网状结构中具有缩血管作用的神经核团，如巨细胞核，使后者处于抑制状态，减少其传出冲动，从而降低小动脉平滑肌紧张性，出现减压效应。
5.心抑制中枢。
延髓迷走神经的疑核及其周围的网状结构。
由此发出的迷走神经分布在心房的窦房结、心房肌、房室结等，有使心搏变慢，心缩力减弱的作用。
平时该中枢紧张性较高，经常发放下行冲动，使心搏不致过快，称为迷走紧张。
延髓
2）脊髓丘脑束spinothalamic tract： 来自对侧脊髓后角的脊髓丘脑束在 脑干的外侧区上行，终止于腹后外 侧核。
传导躯干四肢的痛、温、触觉。
脊髓丘脑束 spinothalamic tract
3）三叉丘系trigeminal lemniscus：
三叉神经脑桥核和脊束核发出纤 维交叉后组成三叉丘系。与内侧 丘系经核而
面神经丘facial colliculus
成。
舌下神经三角
hypoglossal
triangle
迷走神经三角 vagal triangle
界沟 sulcus limitans 前庭区 vestibula area 听结节 acoustic tubercle 正中沟medi sulcus
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（2）脑干的纵向区分
脑干的结构可以纵向的组合成四个平行的部分：
顶盖上区
中脑部称为顶盖 上丘
室 腔 顶部：的
下丘 脑桥的顶部为上、下髓帆
后 方
延髓上部的顶为第四脑 室脉络丛和脉络组织
延髓下部的顶为后 索及薄、楔束核
室腔部：中脑水管、第四脑室、 延髓下部的中央管
被盖：室腔前方的广大区域
基底部：中脑的大脑脚底、脑桥部 的基底和延髓的锥体
滑车神经 trochlear n.
展神经abducens n.
面神经facial n. 舌咽神经 glossopharyngeal n.
迷走神经vagus n.
副神经accessory n.
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（二）非脑神经核：属于中继核团
1）薄束核与楔束核nucleus gracilis and cuneatus ：
橄榄 oliva
舌咽神经
山羊解剖实习报告材料
山羊解剖实验报告（一）.实验日期 2016年12月15号 (8:00～16:00)（二）.家畜品种：山羊性别：公年龄：未知活重：48斤放血后重：45斤体长：109cm（三）.解剖程序和观察内容1.活体观察✧毛色：体头都为白色前后关节：健全蹄着地情况：正常✧观察巩膜为白色，瞳孔为椭圆形，眼结膜粉红色、正常✧口腔粘膜和舌粘膜均呈粉红色，正常✧健康状况：一般叫声：尖锐洪亮鼻镜：湿润眼神：呆滞呼吸时胸部起伏情况：较大心跳：140次/分钟2.活体触摸✧用手触摸肩前淋巴结、髂下淋巴结✧用手触摸肋骨、肋间隙、髋结节、坐骨结节、髋关节、肩关节✧触摸关节和蹄部✧用针筒抽血✧触摸喉头、气管，按压颈静脉沟后部，颈静脉怒胀彭起3.处死✧磨刀，绑定，称重。
✧右手按压住颈静脉沟的颈基部，让颈静脉鼓起，主刀手迅速于颈静脉沟的后1/3部切开皮肤约6厘米长。
钝性分离皮下组织，把颈静脉挤向上方，继续分离结缔组织，在气管的侧面即可摸到搏动的颈动脉。
把颈动脉拉出，分离迷走交感干，用止血钳夹住颈动脉的头端，用一只手拉住颈动脉的胸段，用手术刀切开颈动脉。
进行放血。
✧抽筋后，用手触摸睫毛，判断是否死亡。
✧放血后称重。
45斤4.剥皮✧在四肢系部环切，再沿内侧正中线纵切至腹正中线。
从下颌至肛门沿腹正中线做纵切切开皮肤。
✧在正中线处向外顺序剥开皮肤，剥皮时其他人员将皮拉紧，沿皮下组织层切割。
先剥四肢后剥躯干。
5. 观察肌肉冈上肌、冈下肌、肱三头肌 髂肋肌菱形肌 斜方肌、背阔肌腹内斜肌、腹横肌、腹直肌腹恻锯肌6.头部解剖观察纵剖面观察：用钢锯把头部纵切面锯开，观察。
✧颅腔：颅腔内有脑组织填满，分清大脑、小脑和脑干的部分以及第三脑室、第四脑室。
把脑挖出，观察新鲜脑的三层脑膜和沟回，找到脑垂体✧鼻旁窦：在硬腭内有腭窦，鼻腔侧壁有上颌窦，颅腔周围有额窦。
✧舌：由舌肌构成，表面被覆黏膜，可分为舌尖、舌体和舌根三部分。
豆状乳头较少，有圆扁平在舌圆枕上，轮廓状乳头较大，中间圆形，四周有沟环绕，构成舌圆枕后部两侧。
动物解剖学神经系详解
交感神经的低级中枢位于脊髓颈8至腰3节段的
灰质外侧柱；副交感神经的低级中枢位于脑和脊髓 的荐1至荐4节段。
（2）周围神经节部位不同 交感神经节位于脊柱的两旁（椎旁节）和脊柱 的腹侧（椎下节）。副交感神经节位于所支配器官 的附近（器官旁节）和器官壁内（器官内节）。 （3）节前和节后神经元的比例不同
一个交感节前神经元的轴突可与许多节后神经
色泽:深棕色(单蹄类、反刍类、杂食类),淡黄色（食肉类）,
棕黄色（灵长类）
牛的右肾上腺呈心形，位于右肾前端内 侧，左肾上腺呈肾形，于左肾前方；
猪肾上腺长而窄，表面有沟，位于肾内
侧缘的前方；
马的肾上腺呈扁椭圆形，位于肾内侧缘
稍前上方，一般右肾上腺较大； 羊的左、右肾上腺均为扁椭圆形。 人的肾上腺呈矮帽状。
第十章 牛内分泌系
腺体分类：
外分泌腺：分泌物一般由导管排出，故也称为有管腺。
内分泌腺：分泌物无输出导管，其分泌的物质称为激素， 激素通过毛细血管或毛细淋巴管直接进入血液或淋巴，随
血液循环传递到全身，作用于靶器官或靶细胞，故又称无
管腺。 内分泌腺在结构上的共同特点是：
① 腺细胞排列成索状、块状或泡状
名称 颈神经 胸神经 腰神经 荐神经 尾神经 合计 牛 8 13 6 5 5-6 37-38 马 8 18 6 5 5-6 42-43 猪 8 14-15 7 4 5 38-39 狗 8 13 7 3 5-6 36-37 兔 8 12 7-8 4 6 37-38
脊神经有四种纤维构成
脊神经是混合神经，既含感觉神经纤维，又
部为尾状核，后部为海马；内侧壁为透明
中隔，以室间孔通第三脑室。
第三脑室：是环绕丘脑间粘合部的环
状空隙，前方借左右室间孔与侧脑室相通，
畜禽解剖生理——神经系统
条件反射意义和实践价值：
意义：
扩大了家畜的反应能力，也提高了反应的预见性，从而使家畜更 好的适应复杂变化的外界刺激
实践价值： 提高家畜的生产性能和工作效率。
三、中枢神经的功能
脊髓
大脑
脑 小脑
脑干
高级中枢 低级中枢
（一）脊髓的功能
豆状核 尾状核 杏仁体 屏状核
侧脑室
位置：大脑半球内部的腔隙 分部：
中央部：位于顶叶内 前角：伸入额叶的部分 后角：伸入枕叶的部分 下角：伸入颞叶的部分
连通：经室间孔与第三脑室相通
（三）脑脊髓膜
脑和脊髓外周包有三层膜：
软膜 蛛网膜
蛛网膜下腔（脑脊液）
硬膜
硬膜下腔（少量淋巴液）
骨膜
硬膜外腔
临床上进行局部麻醉时，将麻醉剂由腰荐间隙注入硬膜外腔。
内脏运动神经与植物性神经的比较
区别点 支配效应器
躯体运动神经 骨骼肌
是否受意识支配 受意志支配，随意N 中枢→效应器 无神经元,直达效应器
纤维种类
较粗，有髓纤维
内脏运动神经
心肌、平滑肌和腺体
不受意志支配，不随意N
需要交换两个神经元 较细，节前纤维有薄髓
节后纤维无髓
植物性神经
植物性N根据形态和机能的不同，分为交感N和副交感N。
影响 因素
神经纤维粗细
神经纤维传导冲动时具有的特征： 生理完整性 双向性 绝缘性 相对不疲劳性 不衰减性
反射种类：
非条件反射：
通过遗传而获得的先天性反射活动。 同种家畜有相同呃非条件反射，所以非条件反射又叫做种族反射。 终生保持，但是很难适应复杂的环境变化。
脑干外形、延髓内部结构(研究生)(王晓萃)
延髓的内部结构
1、出现锥体交叉； 2、薄束核、楔束核的出现与内侧丘系交叉； 3、下橄榄核的出现与小脑下脚的形成； 4、中央管向后开放形成第四脑脑室底； 5、第Ⅸ-Ⅻ对脑神经根及其核的出现与排列； 6、网状结构的发展。
一、锥体交叉
薄束核 楔束核
皮质脊髓束在延髓下端有 75%的f在中央管的腹侧交叉， 三叉N脊束核
下泌涎核
延髓 上端
加入舌咽N，至耳
加入迷走N，在器官旁、 内节换元后，支配平滑 肌、心肌及腺体的分泌
一般内脏、特殊内脏感觉核－孤束核
核团 分类
特殊 内脏 感觉核
一般 内脏 感觉核
核团 名称
孤束核 上端 (味觉 核)
孤束核 下端
核 团 传入Nf 位 来源、性质 置
内侧纵束 脊髓小脑前束 脊髓丘脑束 网状结构 内侧丘系
（二）下橄榄核传入纤维
在下橄榄核外面包有有髓纤维，较厚，称橄榄套；内含来自皮质、 红核、中脑被盖和中脑水管周围的中央灰质等处下降的纤维。
1、皮质橄榄束：额、顶、颞、枕叶→下橄榄主核的腹侧。 2、被盖中央束：是一个复合束，发自红核、中脑被盖和中脑水
面N核
疑核
副N核
核团 位置
传出Nf支配
脑桥 中部
构成三叉N运动根， 支配咀嚼肌、二腹肌前腹、 下颌舌骨肌等
脑桥 构成面N运动根， 下部 支配面部表情肌
延髓内
加入舌咽N、迷走N，支配 咽喉部、食管上段骨骼肌
延髓部→脑根→迷走N→支配咽喉肌 脊髓部→脊髓根→支配胸锁乳突肌、 斜方肌
特殊内脏运动核
核团 名称
第四脑室顶：自上（吻侧）而下（尾侧）为：前髓帆和小脑
上脚、后髓帆和第四脑室脉组织；顶的尖端称顶隐窝。
家畜解剖
一、家畜身体主要部分1、头：颅部：枕部、额部、顶部、颞部、耳部、腮腺部面部：眼部、眶下部、鼻部、咬肌部、唇部、下颌间隙部2、躯干：颈部：背侧部、侧部、腹侧部背胸部：背部、胸侧部、胸腹侧部腰腹部：腰部、腹部荐臀部：荐部、臀部尾部：尾根、尾体、尾尖二、骨的概念和作用：骨主要由骨组织构成的器官，有一定的形态和功能，坚韧而富有弹性，丰富的血管、神经、淋巴，具有新陈代谢、生长发育的能力，可被破坏、改造、再生和愈合，具有造血和防卫功能。
构成畜体柔软组织的支架、决定畜体的外形、保护体内器官,并构成运动的杠杆，此外还是畜体的钙、磷库，也具有造血和防卫的机能。
三、骨的构造：骨由骨膜、骨质、骨髓及血管和神经构成。
骨膜：分骨内膜和骨外膜，骨外膜：除关节面以外的骨的表面，含血管、神经、淋巴管，起营养再生和感觉功能，A：纤维层：外层，富有血管和神经，起营养和保护的作用。
B：成骨层：内层，富于有成骨细胞和破骨细胞，参于骨的生长、再生和修补功能。
骨内膜：衬在骨髓腔内面，薄层结缔组织，有造血功能。
四、骨质骨密质：位于骨质的表面，由成层排列的骨板构成，致密而坚韧，起主要的支持作用。
骨松质：位于骨质的深面，由骨针和骨小梁交织成海绵状，小梁的排列与骨所受的压力和张力的方向一致，即有支持作用，又减轻了骨的重量。
五、骨髓填充于骨髓腔和骨松质的腔隙内，富含血管。
红骨髓、黄骨髓。
骨松质内终生含有红骨髓。
六、骨的类型：1、长骨：呈柱形，多见于四肢，起支持和运动杠杆的作用。
2、短骨：长、宽、高相近，分布在既活动灵活又要结合牢固的部位。
如腕骨。
3、扁骨：呈板状，表面是骨密质，中间是骨松质，主要起保护作用，供肌肉附着。
4、不规则骨：形状不规则，机能也比较复杂，如头骨。
七、各种家畜头骨的特点马：无牛：枕骨、顶骨后移；角长在额骨上；无上切齿；有面结节。
猪：眶缘不完整；茎突长；有吻骨狗：眶窝与颞骨界限不明显八、躯干骨由脊柱、肋骨、胸骨三部分构成。
脊柱有颈椎、胸椎、腰椎、荐椎和尾椎组成，脊柱前端与头骨相连，胸椎与肋骨、胸骨一起围成胸廓。
脊髓解剖与功能图
一、脊髓的位置和外形
脊髓的外形
颈膨大 （C4-T1）
腰骶膨大 （L2-S3）
脊髓圆锥 马尾 终丝
Up Down Back
一、脊髓的位置和外形
• 颈膨大、腰膨大：脊髓全长粗细不等，有 两个膨大处，分别称为颈膨大和腰膨大。 颈膨大自颈髓第四节到胸髓第一节。颈膨 大的出现是由于该节段脊髓内的神经细胞 和纤维较多所致，膨大的成因则与肢体的 发达有关。由于人类的上肢动作灵巧，解 剖结构精细，所以支配上肢的臂丛神经就 比较发达，颈膨大正相当于臂丛神经发出 的节段。腰膨大L2-S3。
皮质脊髓前束：
●●●●● ●●●
止于双侧脊髓灰质
前角内侧核 支配躯干肌
四躯 肢干 肌肌
Up Down
●●● ●●●●●
躯 干 肌 Back
二、脊髓的内部结构
白质（下行传导束） 皮质脊髓束
功能：完成大脑皮质对脊髓运动功能的控制 控制骨骼肌的随意运动。
损伤表现：一侧损伤，表现为同侧（患侧） 损伤平面以下的肢体骨骼肌痉挛性瘫痪，肌 张力增高，腱反射亢进及锥体束征。躯干肌 不瘫痪。
• 前外侧沟：左右各一，相当于脊髓前根传 出部分
• 后外侧沟：左右各一，相当于脊髓后根丝 传入部位
Up Down Back
一、脊髓的位置和外形
与脑膜相对应，脊髓亦有三层膜。 1、硬脊膜：在骶髓阶段水平，形成盲端。 2、蛛网膜： 3、软脊膜：富含血管和神经，紧包于脊髓 的表面。 硬膜外腔：硬脊膜与骨膜之间，有静脉丛及 脂肪。硬膜下腔：无特殊结构。蛛网膜下腔： 充满脑脊液。
与同序数椎骨同高 比同序数椎骨高1个椎骨 比同序数椎骨高2个椎骨 比同序数椎骨高3个椎骨 平对第10～12胸椎体 平对第1腰椎体
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成年山羊延髓的解剖图谱
C. DEAN,1,2 L. K. GEIGER,1 B. M. SPRTEL,1 P. J. OHTAKE,1 AND H. V. FORSTER1 1密尔沃基威斯康星州生理学医学院53226;
2威斯康星医学院麻醉科和密尔沃基威斯康星州扎布洛茨基退伍军人事务医疗中心53295
本试验开发了山羊脑干的一个解剖图谱用于延髓神经元群体的研究，测定了神经元群体位置变异的影响因素。
31个成年山羊的髓质(重17-88公斤)经固定、回收、冻结、连续切片与0.5,中性红染色，并用光学显微镜观察。
将位于中央管进入第四脑室处的脑闩作为零参考点，从此处将后角和中外侧坐标的髓神经元组进行了测定，而从髓质表面开始计算背腹侧坐标。
量化了组织随山羊体重的变化，进行线性回归分析提供了体重在在所有三维的调整因素。
类似分析收缩百分比在固定和处理中为髓神经元群体的精确坐标提供调整因素。
确定神经元群体的准确位置时，应该考虑体重和组织学过程。
目前的研究为体重和标准组织学处理提供调整因素用以定位成年山羊大部分重要的延髓神经元群体。
组织学图谱;向斜核;疑核;孤束核
山羊是许多研究中动物模型的选择，包括一些关于呼吸控制的研究[3，7，8，12，15]。
虽然大量的研究集中在在延髓神经网络，但是这一区域主要神经元群体的位置在以前出版的山羊脑干图谱中没有明确的界定[18，19]。
要成功完成中枢神经网络控制在山羊的研究，需要这一物种脑干主要神经群体详细的位置的组织学图谱。
为此，我们已编制了一份山羊髓质的解剖图集并研究神经元群体的立体坐标的影响因素。
该图谱不包含髓质核团的详细功能，因其已被相关的出版物[1，5，6，16]详细讨论过。
编制本图谱的意图旨在给电生理学家组织学上的援助，通过提供从一个标准的零基准点到延髓神经元组的三维距离，及补偿性调整山羊重量和组织
处理的变化来帮助电生理学家定位延髓神经元组。
需要适当的生理标准和挑战进一步改进电极的放置。
略缩语
AP 最后区
CC 中央管
CN 楔形核
CON 耳蜗核
ECN 楔外核
FN 面神经核
FNl FN侧枝
FNM FN中间枝
FTL 侧盖
G 薄束核
GVII 膝面神经
HP 舌下核
INT intercalatus
IO 下橄榄核
LRN 外侧网状核
NA 疑核
NAef NA外侧
NTS 孤束核
P 锥体束
PGCL 核巨细胞旁的网状外侧
R 中缝核
RB 索状体
RG 网状核
RTN Retrotrapezoid核
SDM NTS的背内侧亚核
Si NTS的中间体亚核
SM NTS的内侧亚核
SO 上橄榄核
5SP 三叉神经脊束核
5ST 三叉神经脊束
SVL NTS的腹外侧亚核?
TB 梯形体
TS 孤束
V 前庭神经核
IV 第四脑室
实验材料和方法
本研究的方案获得威斯康星州医学院动物保护和使用委员会的批准。
从31只来自阿尔卑斯山、努比亚、和拉芒什海峡品种的成年山羊进行脑干的研究，动物的体重在17-88kg之间变化。
其中26只山羊用于有关呼吸调节的生理研究。
山羊先用氯胺酮(肌注氯胺酮;15mg/kg)麻醉，然后插管;1.2,氟烷维持麻醉。
对26只山羊中的9只进行了腹侧髓脑神经标志的体内测量。
每只羊左侧卧，头旋转到仰卧姿势。
暴露腹侧表面的髓质，将气管缩回侧面，通过中线切口查看枕骨大孔。
钻开颅底枕骨，除去硬脑膜。
暴露外展神经(NVI)和舌下神经(nXII)的神经根，以便在第VI和第XII神经之间，其出髓质处进行横向和喙尾测量。
这些数据随后与固定、组织化学处理、安装
(后处理)后的测量值比较，以确定脑干收缩的程度。
通过线性回归分析得到收缩与体重之间的关系。
在全麻的状态下，将导管插入颈动脉灌注大脑。
对山羊进行安乐死(静注戊巴比妥钠;90mg/kg)。
通过颈动脉插管灌注PBS(0.1M)，直到离体的颈静脉中渗出物变干净。
随后，灌注4-5L含4,多聚甲醛的0.1M PBS固定液30分钟以上。
取脑干放在在含10,蔗糖的PBS中于4?贮存，直到大脑沉底(1-2天)，之后冷冻保护剂蔗糖的浓度其时增加至20,，然后加到30,。
在冷冻超薄切片机(Reichert-Jung Cryocut 1800)上切成冷冻的髓质横截面(40µm)用于组织学分析。
连续切片放在用铬明矾处理过的片子上，然后用0.5,中性红染色。
在光学显微镜下找出主要的脑干神经核。
测量了迷走神经背核(X)、舌下神经(XII)、疑核(NA)的喙极及面神经核(FN)尾极相对于脑闩(中央管进入第4脑室的位置)、中线和背侧或腹侧表面的位置。
将从核极到脑闩的距离与体重的关系进行线性回归分析。
脑干切片在带数码相机的显微镜(Leaf Microlumina;像素分辨率:3,380 3
2,254;颜色:24位)下用Adobe Photoshop成像在威力麦金塔计算机上，用连有镜像示意的Epson Stylus Color
800打印机(分辨率:1440 3 720)打印出来。
从距脑闩尾2mm(-2)开始至距脑闩喙12mm
(+12)，每间隔1mm拍显微照片。
虽然大多数核团用中性红染色是可见的，但是细胞的向斜核(RTN)难以区分。
因此，为描
绘五只山羊的RTN，在NA区域注射共轭麦胚凝集素(WGA)辣根过氧化物酶(HRP)后
对细胞进行逆行追踪。
该五只羊麻醉同上，然后将山羊固定在胸骨位置，让
的延髓背侧入路。
一枕开颅手术
被执行，并且被打开硬脑膜而无菌
保持不变。
玻璃微，连接到汉密尔顿
注射器，插入双边的目标坐标
不适用在水平的闩。
超过30秒，50 NL 1,的WGA-HRP (Sigma)的注射，并除去的微量
30分钟注射后。
山羊被允许恢复，
他们收到庆大霉素(5毫克/公斤即时通讯)和止痛药(丁丙诺啡0.15.0.3毫克IM)疼痛。
在
24.48小时后注射，山羊麻醉，如
以上，对大脑的固定和拆卸。
山羊灌流
用0.1M的PBS中，然后通过4.5升1,多聚甲醛，
2.5,戊二醛固定剂(pH 7.2)中，最后的10,
在PBS中的蔗糖溶液。
除去脑，并且是
存储在10,蔗糖溶液中过夜4亱C.冷冻
通过髓质的横截面(40兪米)被切断，
在0.1M磷酸盐缓冲液中，收集和处理的WGAHRP
可视化通过使用四甲基联苯胺(TMB)的
结合的变形Mesulam(11)的方法
守望者等人的反应，产品稳定。
(14)，所述
详细由Pyner和库特(13)。
切片经
转移到0.05M磷酸盐缓冲液孵育之前，在
黑暗中，在预反应溶液(PS)制成的92.5浸泡
毫升蒸馏水中含有100毫克的硝普钠，
5.0毫升0.2M的醋酸钠缓冲液(pH值3.3)，5毫克TMB (Sigma公司)，和2.5毫升无水乙醇。
后20分钟预浸，
切片培养中的酶反应溶液(一个
一批新的PS加3.0毫升0.3,H2O2)，再进行20分钟。
漂洗切片在0.2M乙酸钠缓冲液(1:20)
稳定之前使反应产物与二氨基联苯胺
(Sigma公司)。
稳定，部分被放置在一个
含有50毫升0.05,的二氨基联苯胺的溶液在0.1M
PO4在4亱C，1毫升1,，氯化钴和15兪升30,过氧化氢5分钟。
切片在PBS中漂洗，安装在明胶包衣
幻灯片，空气干燥，并复染前用中性红
盖片。
通过光学显微镜进行了分析，
确定注射部位和逆行标记细胞染色
粒状的反应产物。
数码相机的显微照片
通过RTN成像和图解
申述的脑干部在水平为RTN
被编译。