嗜碱性粒细胞激发试验的临床应用
2022儿童呼吸道过敏性疾病医疗装置临床实践专家共识最全版
2022儿童呼吸道过敏性疾病医疗装置临床实践专家共识(最全版)过敏性疾病又称变应性疾病,包括过敏性哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、食物过敏和药物过敏等［1-2 ］,其中呼吸道过敏性疾病最为常见且患病率呈上升趋势［3-4 I O其规范化诊治对改善儿童生活质量、降低疾病负担至关重要［5-7 ］,而诊断、治疗和评估均离不开医疗装置的合理应用。
中国妇幼保健协会儿童变态反应专业委员会呼吸学组和《中国实用儿科杂志》编辑委员会于2021-2022年组织全国专家制定《儿童呼吸道过敏性疾病医疗装置临床实践专家共识(2022年)》，旨在规范儿童呼吸道过敏性疾病医疗装置和方法的应用，提高疾病的管理水平。
1过敏原检测装置和方法1.1 体内检测1.1.1 皮肤点刺试验(skin prick test, SPT) SPT基于I型变态反应原理，用标准化过敏原试液点刺皮肤局部产生风团、伪足等反应的情况判断患儿是否对该过敏原过敏。
SPT适用于各年龄儿童，可根据患儿的病史、居住环境及与症状有关的疑似过敏原决定应检测的种类［5 J O与阴性对照比较，风团平均直径＞3 mm判定为SPT阳性。
反应强度则采用皮肤指数(skin index , SI),分别测量过敏原和组胺风团的最长直径及最长垂直直径，同时要避开伪足,计算出风团平均直径,两者平均直径的比值即为SI z分为4 个等级:+ 为0.3≤SI<0.5 ; ++为0.5≤SI<1.0 ; + ++为1.0≤SI<2.0 ; + + ++为SI≥2.0 [8]o1.1.2 皮内试验(intradermal test, IDT) IDT是将过敏原试液与对照试液各0.02 ml分别注入皮内，使局部产生圆形2〜3mm皮丘，并观察皮肤反应［8 ］o该法特异度和灵敏度高，但对操作的要求高，儿科不常用。
1.1.3 过敏原激发试验(allergen provocation test, APT ) APT 包括过敏原气管激发和鼻黏膜激发，其中前者儿科不适用，后者则是将某种过敏原直接作用于鼻黏膜，观察是否诱发相关症状。
超敏反应性疾病及检验
III型超敏反应是指由可溶性免疫复合物沉积于 局部或全身多处毛细血管基底膜，通过激活补体,并 在血小板、嗜碱性粒细胞、中性粒细胞等的参与下， 引起的以充血水肿、局部坏死和中性粒细胞浸润为 主要特征的炎症反应和组织损伤。
一、Ⅲ型超敏反应发生机制 参与反应主物质
可溶性抗原
抗体：IgG、IgM
补体：C3a、C5a、C3b 参与细胞：中性粒细胞、碱性粒细胞、肥大细 胞、血小板
0.01～0.03ml/针 迟发型 48～72h内观察
速发型 15～30min内观察
(2)点刺试验
将试验抗原与对照液分别 滴于试验部位的皮肤上 用针尖透过液滴轻挑一下 以刺破皮肤而不出血为度
1min后拭（吸）去试验抗原液
比皮内试验敏感性稍低，但假阳性较少； 皮试液浓度要比皮内试验高10～100倍。
和性，影响检测敏感性;
②待检血清中如有抗淋巴细胞的抗体，能和Raji细
胞反应; ③SLE血清中的抗DNA也能和Raji细胞反应，使测定 结果偏高。
4.抗球蛋白技术—
单克隆RF(mRF)凝胶扩散试验 基本原理 IgG或IgM类自身抗体具有与IC中IgG的Fc
段结合而不与游离IgG结合的特性，mRF与CIC亲和力 较强。
2. ELISA法
1.基本原理 ELISA法测定的CIC，是能够结合C1q的 IgG类抗体与其特异性抗原形成的CIC。 2.技术要点 将聚苯乙烯包被上C1q，加入受检血清，
CIC中IgG的Fc段与C1q结合，再加抗人IgG· HRP， 形成C1q-CIC-抗人IgG· HRP复合物，加底物显色。
方法评价
防治Ⅰ型超敏反应性疾病
预防药物或疫苗等过敏
检测Ⅳ型超敏反应
人嗜碱性粒细胞_对它在免疫反应中作用的新认识
低 （ a ;b ） ， 且缺乏令人满意的纯化方法， 故在很大 程度上束缚了对嗜碱性粒细胞的研究， 影响了人们 对此类细胞的研究兴趣。最近研究发现伴随着嗜碱
［ ］ 性粒细胞表面 CT<9G、 细胞 CC1: 和 CTI: 的表达 ; ， 释放大量的细胞因子— FG=< 和 FG=;:， 由此激发了人
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国外医学免疫学分册 899< 年第 8V 卷第 : 期
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15.超敏反应
Ⅰ型超敏反应 Ⅱ型超敏反应
过敏反应（速发型） 细胞溶解型或细胞毒型
Ⅲ型超敏反应 Ⅳ型超敏反应
免疫复合物型或血管炎型 迟发型超敏反应
一、Ⅰ型超敏反应
Type I Hypersensitivity：
(一) Ⅰ型超敏反应的特征 又称速发型超敏反应或过敏反应。 1、发生快，消退也快。 2、主要由特异性IgE介导。 3、通常引起机体生理功能紊乱。 4、具有明显的个体差异和遗传背景。
单选题
I型超敏反应目前最好的诊断方法()
A 皮肤试验 B 特异性IgE测定 C 血清总IgE测定 D 吸入物变应原过筛试验 E 皮内试验+特异性IgE测定
提交
单选题
支气管激发试验中常用的非特异性吸入物()
A 组胺或花粉 B 甲基胆碱或花粉 C 花粉或屋尘 D 组胺或甲基胆碱 E 动物皮屑或花粉
提交
口腔激发试验
将超敏原直接与口腔黏膜接触，当口腔 黏膜出现肿胀和充血时，判断为阳性。
结膜激发试验 将超敏原滴于一眼，阳性反应为结膜充 血、水肿、分泌增加、搔痒，眼睑红肿。
鼻黏膜激发试验
将抗原吸入/滴入鼻腔，出现鼻黏膜水 肿、苍白、鼻痒、流涕、喷嚏为阳性。
2、血清总IgE的检测
测定方法
ELISA 双抗体夹心法，操作简便， 敏感性很高，是测定血清IgE最常 用的方法
Ⅱ型超敏反应免疫学检测
1.Rh抗体的检测：盐水凝集法和酶介质法。 2.抗球蛋白检测（Coombs试验）
(1)直接Coombs试验 (2)间接Coombs试验
抗球蛋白试验：又称Coombs试验，是指用 抗球蛋白抗体来检测血液中球蛋白（如红 细胞表面IgG或C3片段）的一种实验方法。
IgG IgM
变应性鼻炎
检查
诊断
常年性变应性鼻炎根据其常年发病的特点， 以及临床检查所见，诊断并不困难，但须 与其他类型的非变应原性的常年性鼻炎相 鉴别( 鉴别(表2—8—2)，因为治疗方法完全不同。 2)，因为治疗方法完全不同。 季节性变应性鼻炎的发病具有典型的地区 性和季节性。就某一地区的某一病人而言， 其每年发病的时间相对固定。鼻分泌物涂 片检查鼻粘膜及其分泌物中的细胞，如嗜 酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞等，有助于诊 断。
鉴别诊断
并发症
主要有变应性鼻窦炎( 主要有变应性鼻窦炎(包括变应性真菌性鼻 窦炎) 窦炎)、支气管哮喘和分泌性中耳炎等。变 应性鼻炎与支气管哮喘二者常同时存在， 前者先于后者发生是哮喘的一个危险因素， 故提出“一个呼吸道，一种疾病” 故提出“一个呼吸道，一种疾病”的概念。
治疗
变应性鼻炎的治疗分非特异性治疗和特异 性治疗，前者主要指药物治疗，后者则主 要指免疫治疗。应根据病人的症状类型和 其病理生理学过程选择不同的药物，有时 需要联合用药。
治疗
A\非特异性治疗：1、糖皮质激素；2、抗 非特异性治疗：1、糖皮质激素；2 组胺药物；3、肥大细胞膜稳定剂；4 组胺药物；3、肥大细胞膜稳定剂；4、减充 血药；5、抗胆碱药；6 血药；5、抗胆碱药；6、其他降低鼻黏膜敏 感性及手术。 B\特异性治疗：1、避免与变应原接触。2、 特异性治疗：1、避免与变应原接触。2 免疫治疗。
发病机制
实际上是I 实际上是I型变态反应 变应原刺激机体产生的特异性IgE抗体结合在鼻粘膜浅层 变应原刺激机体产生的特异性IgE抗体结合在鼻粘膜浅层 和表面的肥大细胞、嗜碱性粒细胞的细胞膜上，此时鼻粘 膜便处于致敏状态。 当变应原再次吸人鼻腔时．变应原即与肥大细胞、嗜碱性 粒细胞表面的IgE发生“桥连” 即一个变应原与两个IgE分 粒细胞表面的IgE发生“桥连”(即一个变应原与两个IgE分 子的Fab端相结合) 子的Fab端相结合)，继而激发细胞膜一系列生化反应，导 致以组胺为主的多种介质的释放：这些介质通过其在鼻粘 膜血管、腺体、神经末梢上的受体，引起鼻粘膜明显的组 织反应。表现为阻力血管收缩(鼻粘膜苍白) 织反应。表现为阻力血管收缩(鼻粘膜苍白)，或容量血管 扩张(鼻粘膜呈浅蓝色、鼻塞)、毛细血管通透性增高( 扩张(鼻粘膜呈浅蓝色、鼻塞)、毛细血管通透性增高(粘膜 水肿) 水肿)，多形核细胞、单核细胞浸润，尤以嗜酸性粒细胞 浸润明显。副交感神经活性增高，腺体增生、分泌旺盛 (鼻涕增多)，感觉神经敏感性增强(喷嚏连续性发作)。这些 鼻涕增多)，感觉神经敏感性增强(喷嚏连续性发作) 病理变化常使鼻粘膜处于超敏感状态，使某些非特异性刺 激冷、热等，易于诱发变应性鼻炎的临床症状。
嗜碱性粒细胞活化试验在过敏性疾病应用中的研究进展
嗜碱性粒细胞活化试验在过敏性疾病应用中的研究进展①张敏崔振泽李悦②徐超（大连市儿童医院，大连116000）中图分类号R392.8文献标志码A文章编号1000-484X（2021）22-2803-07［摘要］21世纪以来，过敏性疾病的发病率逐年增高，严重威胁着人类的生命健康。
然而临床中针对这一类疾病目前没有安全高效的检测方法。
本文通过梳理过敏性疾病及嗜碱性粒细胞活化试验的相关文献资料，认为该试验是一种安全高效的辅助诊断过敏性疾病的方法，其理论依据是嗜碱性粒细胞的表面标志物会随着过敏反应的发生而变化。
基于这一理论依据，传统的嗜碱性粒细胞活化试验是利用流式细胞术对细胞进行检测，进而体外辅助诊断过敏性疾病。
近年来基于微流体技术的新型嗜碱性粒细胞活化试验逐步兴起。
流式细胞术是一种对细胞进行快速定量分析和筛选的方法。
微流体技术是一种高精度处理小体积流体的技术，具有成本低、操作简便且所需样本及试剂量少的优点。
本文就嗜碱性粒细胞的相关概念、分别基于流式细胞术及微流体技术的嗜碱性粒细胞活化试验及其在临床过敏性疾病中的应用价值做一综述，以期为嗜碱性粒细胞活化试验在过敏性疾病诊断领域的应用提供理论支持。
［关键词］嗜碱性粒细胞；流式细胞术；微流体技术；嗜碱性粒细胞活化试验；过敏性疾病Research progress of basophil activation test and its application in allergic diseasesZHANG Min，CUI Zhen-Ze，LI Yue，XU Chao.Dalian Children's Hospital，Dalian116000，China ［Abstract］Since the21st Century，the incidence rate of allergic diseases has increased year by year，which seriously threatens human life and health.However，there is no safe and efficient detection method for this kind of disease.Many literatures about allergic diseases and basophil activation test have reported that basophil activation test is a safe and efficient method for the diagnosis of allergic diseases.And the theoretical basis of this test is that the surface markers of basophils will change with the occurrence of allergic reactions.Based on this theoretical basis，the traditional basophil activation test is to detect cells by flow cytometry，and then assist in the diagnosis of allergic diseases in vitro.In recent years，a new type of basophil activation test based on microfluidic technology has been developed.Flow cytometry is a rapid method for quantitative analysis and screening of cells.Microfluidic technology is a high pre‐cision technology for processing small volume fluid，which has the advantages of low cost，simple operation and small amount of sam‐ples and reagents.In this paper，the related concepts of basophils，basophil activation test which based on flow cytometry and microflu‐idic technology，and its application value in the diagnosis of allergic diseases are reviewed in order to provide theoretical support for the application of basophil activation test in the field of allergic diseases diagnosis.［Key words］Basophil；Flow cytometry；Microfluidic technology；Basophil activation test；Allergic diseases虽然世界医疗水平、工业发展程度以及感染性疾病的防治水平不断提高，但是过敏性疾病的发病率却在全球呈现增高的趋势，严重影响公共健康，已成为21世纪需着重研究和防治的疾病之一［1］。
过敏性鼻炎专题知识讲座
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4.特异性免疫治疗（舌下含服免疫疗法）
当前仅限于对尘螨引发过敏性鼻炎。患者经过舌下尘螨免疫治疗 前后体内免疫学指标也有改变, 因为舌下粘膜组织较薄, 这些位 于粘膜表面Langerhans（朗格罕）细胞会在接触抗原时候, 捕足 到变应原存在信号, 变应原疫苗能快速吸收, 从而开启脱敏反应。 包含血清IgG4水平上升, Th2/Th1细胞比值改进等。因为是经过 舌下给药, 通常不会产生过敏性休克等严重不良反应。
过敏性鼻炎专题知识讲座
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上述病理改变在缓解期可恢复正常, 如屡次重 复发作, 可引发粘膜上皮增殖性改变, 造成粘膜 肥厚及息肉样变。如合并感染, 则黏膜充血、 嗜中性粒细胞增多、坏死, 表现为黏脓涕或脓 涕。
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临床表现
经典症状主要是阵发性喷嚏、清水样鼻涕、其
次为鼻塞和鼻痒，部分患者有嗅觉减退，但多 为暂时性。
1.喷嚏:天天数次阵发性发作，每次多于3个， 甚至连续10个或数10个。多在晨起或夜晚或 接触过敏原后立刻发作。
2.清涕: 为大量清水样鼻涕，有时可不自觉地 从鼻孔流出。
3.鼻塞: 间歇性或连续性，单侧、双侧或两侧
交替，表现不一。 过敏性鼻炎专题知识讲座
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4.鼻痒: 大多数患者感鼻内发痒。花粉症患者可伴有眼 睛、外耳道、软腭等处发痒。
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诊疗
1.详细采集病史 个人或家族过敏性疾病史、呼吸道及皮肤变应性疾病史、发作期经典症状
及时间等, 对于变应性鼻炎诊疗都是必不可少。
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2.特异性检验 （1）体内试验法:
①变应原皮肤试验: 主要观察皮试后速发相过敏反应， 是当前变态反应学界中主要诊疗方法，它已广泛用于 检测IgE介导过敏反应。变应原皮肤试验能够在短时间 内同时一次提供各种变应原试验结果，是作鼻粘膜激 发试验前筛选可疑过敏原主要方法，也是诊疗过敏性 鼻炎主要指标之一。
流式细胞术分析嗜碱性粒细胞活化试验在过敏性疾病诊断中的应用
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山东 医药 ２ ０ １ ４年 第 ５ ４卷第 ３期
嗜碱性粒细胞激发试验 的临床应用
朱晓 敏 ， 张 慧云 ， 何韶衡
（ １南京 医科 大 学第一 附属 医院 ， 南京 ２ １ ０ ０ ２ ９； ２苏州 市相城人 民 医院 ； ３海 南 医学院 ）
摘要 ： 目的 观察 嗜碱性粒 细胞激发试验 （ Ｂ Ａ Ｔ ） 的临床应用情况 ， 为过敏疾 病的诊断提供参考 。方 法 选择
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中图分类 号： Ｒ ４ ４ ６
文献标 志码 ： Ａ
文章编号 ： １ ０ ０ ２ － ２ ６ ６ Ｘ （ ２ ０ １ ４ ） ０ ３ － ０ ０ ０ ８ ０３ －
Ｃｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ Ｉ ａ ｐ ｐ ｌ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｂ ａ ｓ ｏ ｐ ｈ ｉ ｌ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｅ ｓ ｔ
亦有可能对 ｓ Ｉ ｇ Ｅ检测结果 阴性 即非 Ｉ ｇ Ｅ介导的过敏诊断有帮助。 关键词 ： 嗜碱性 粒细胞激发试验 ； 特异性免疫球蛋 白 Ｅ； 过敏原
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ２ － ２ ６ ６ Ｘ ． ２ ０ １ ４ ． ０ ３ ． ０ ０ ３
１ ０种吸人性 过敏原对 ３ ０例过敏性 疾病 患者行过 敏原体外 特异性 Ｂ Ａ Ｔ， 福 克全 自动过敏原定 量分析 系统检测 患者 血清特异性 Ｉ ｇ Ｅ （ ｓ ｌ ｇ Ｅ ） 水平 。对 Ｂ Ａ Ｔ与 ｓ ｌ ｇ Ｅ检测结 果进 行一 致性 检验 。结果 被检 １ ０种过敏原 中， 马上皮 、 链格 孢属 、 枝孢属霉菌 、 艾蒿 、 白桦树及梯牧 草 Ｂ Ａ Ｔ的阳性 检出率 明显高于血清 ｓ ｌ ｇ Ｅ检测 ， Ｐ均 ＜ ０ ． ０ ５ 。两种 检测 方法 对过敏原检测 的整体 阳性率分别为 ２ ３ ％、 １ ２ ． ２ ％， Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ； 两 种方法检测 结果 阳性吻合 率最高 的过 敏原是 屋尘螨 和粉尘螨 ， 分别 为 １ ７ ％和 １ ３ ％， 其余 过敏原阳性吻合率 均低 于 ７ ％ 。两种检测方法对 １ ０种过敏原 的检测 结果一致 性较差 ， Ｋ ａ ｐ ｐ ａ 均＜ ０ ． ４ 。结论 Ｂ Ａ Ｔ对 过敏原 的检测 范围比 ｓ ｌ ｇ Ｅ检测更 宽泛 ， 其 不仅能 帮助诊断 ｓ ｌ ｇ Ｅ阳性过 敏 ，
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